本发明涉及肉鸡饲料技术领域，更具体的说是涉及一种促进鸡肉中epa和dha沉积的方法。
背景技术：
epa(eicosapentaenoicacid)即二十碳五烯酸，属于ω-3系列多不饱和脂肪酸，是人体不可缺少的重要营养素，可降低胆固醇和甘油三酯的含量，促进体内饱和脂肪酸代谢，预防脑血栓、脑溢血、高血压等心血管疾病。
dha(docosahexaenoicacid)即二十二碳六烯酸，是神经系统细胞生长及维持的一种主要成分，是大脑和视网膜的重要构成成分。
为了补充epa、dha，人们通常选择服用经过提纯的epa、dha保健品，然而，作为epa和dha主要来源的深海鱼油和海洋藻类，由于鱼类过度捕捞，海洋环境污染，其产量和质量严重下降，已经不能满足日益增长的市场需求，因此，仍需开发更加天然的epa、dha摄取方式。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明公开了一种促进鸡肉中epa和dha沉积的方法，改善鸡肉营养价值，进而通过食用鸡肉即可摄取epa、dha，且食物来源的epa和dha生物利用率更高。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
大豆异黄酮在促进鸡肉中epa和dha沉积中的应用。
大豆异黄酮在制备促进鸡肉中epa和dha沉积的饲粮或饲粮添加剂中的应用。
一种促进鸡肉中epa和dha沉积的方法，使用含α-亚麻酸的饲粮饲喂肉鸡，并且在饲粮中添加大豆异黄酮。
大豆异黄酮具有多种生理功能，同时α-亚麻酸(ala)作为n-3前体具有合成epa和dha能力(主要是通过不饱和酶和延长酶来实现的)，大豆异黄酮的加入可能通过改变了一系列酶活作用，促进了ala转化合成epa和dha的效率并使其有效沉积在鸡肉中。
优选地，使用含亚麻籽油的饲粮饲喂肉鸡，并且在饲粮中添加大豆异黄酮；亚麻籽油中富含α-亚麻酸。
一种促进鸡肉中epa和dha沉积的饲粮，饲粮中亚麻籽油含量为2％-4％；亚麻籽油中α-亚麻酸含量为50-60％；饲粮中大豆异黄酮添加量为20-60mg/kg。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开了一种促进鸡肉中epa和dha沉积的方法，通过大豆异黄酮的添加促进epa和dha的合成，使得epa和dha有效沉积在鸡肉中，提高了鸡肉营养价值，进而使得人们通过食用鸡肉便可摄取epa和dha。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
选用900只29日龄(体重bw597±0.00g)快大型岭南黄羽肉鸡(公)作为试验鸡，按饲粮成分不同分为5个处理组(表1)，每处理6个重复，每个重复30只鸡。试验鸡地面平养，每重复(30只)饲养于一栏，自由采食颗粒料和饮水。按照常规饲养操作规程和免疫程序进行饲养和免疫；试验期29-66日龄。
表1
试验采用玉米-豆粕型基础饲粮，其营养水平主要参考《鸡饲养标准》(ny/t33-2004)设置，根据中国饲料成分及营养价值表(2018)计算饲粮组成及营养水平，饲粮组成及营养水平(风干基础)如表2所示，饲粮脂肪酸组成如表3所示。各组饲粮使用制粒机制成颗粒料。
表2
其中，1预混料为每千克饲粮分别添加：
维生素b1：2.4mg(29-49日龄)、2.1mg(50-66日龄)；
维生素b2：4mg(29-49日龄)、3mg(50-66日龄)；
烟酸：17mg(29-49日龄)、15mg(50-66日龄)；
胆碱：600mg(29-49日龄)、500mg(50-66日龄)；
维生素a：6000iu；维生素d3：500iu；维生素e：20iu；维生素k3：0.50mg；泛酸：10mg；维生素b6：3.5mg；生物素：0.15mg；叶酸：0.55：mg；维生素b12：0.01mg；
fe：80mg；cu：7mg；mn：60mg；zn：75mg；i：0.35mg；se：0.23mg(分别以一水硫酸亚铁feso4·h2o、五水硫酸铜cuso4·5h2o、一水硫酸锰mnso4·h2o、一水硫酸锌znso4·h2o、碘酸钙ca(io3)2·h2o和亚硒酸钠na2seo3的形式添加)。
2营养水平为计算值，参考饲料数据库(2018)。
表中，la组饲粮含4％猪油；la+lo组饲粮含2％猪油+2％亚麻籽油；lo组饲粮含4％亚麻籽油；si表示30mg/kg大豆异黄酮。
la+lo+si组和lo+si组除添加si外，其余成分分别与la+lo组和lo组饲粮组成相同，si添加到预混料中。
合成大豆异黄酮(syntheticisoflavone，si，主要成分为6-甲基-2-乙基-7-丙酰氧基大豆异黄酮，纯度大于98％)由广东新南都饲料科技有限公司提供。
亚麻籽油(linseedoil，lo)具体成份百分比(测定值)：α-亚麻酸(c18:3n-3)58.3％，油酸(c18:1n-9)17.1％，亚油酸(c18:2n-6)14.0％，硬脂酸(c18:0)4.0％，棕榈酸(c16:0)5.1％，等。
猪油(lard，la)具体成份百分比(测定值)：油酸(c18:1n-9)40.2％，棕榈酸(c16:0)23％，亚油酸(c18:2n-6)15.2％，硬脂酸(c18:0)14.1％，棕榈油酸(c16:1n-7)2.7％，肉豆蔻酸(c14:0)1.3％，α-亚麻酸(c18:3n-3)1.5％，等。
表3
注：含量较低的脂肪酸未列出。
于66日龄时，断料12小时后重新称重以计算平均日增重(adg)，以各处理每重复为单位记录平均日采食量(adfi)，计算料重比(f/g)。随后从各处理每重复中选取2只接近平均体重的试验鸡，采用肝素抗凝管进行静翅脉采血；在4℃下1200g离心10分钟分离血浆样品，并将血浆分管后保存在-80℃直到分析。肉鸡屠宰后采集左侧胸肌样品，移到-20℃冰箱保存，用于胸肌脂肪酸含量与组成测定。
血浆生化分析：采用市售试剂盒(南京建城生物工程研究所)分光光度法测定了总超氧化物歧化酶(t-sod)活性、总抗氧化能力(t-aoc)、还原型谷胱甘肽(gsh)、氧化型谷胱甘肽(gssg)和丙二醛(mda)含量。随后计算gsh/gssg比值。采用自动生化分析仪(荷兰selectra-proxl临床化学系统)和配套试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司)测定血浆中总甘油三酯(tg)、总胆固醇(tch)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)的浓度。
脂肪酸含量与组成采用气相色谱法(gc)进行测定：准确称取2.0g胸肌肉样冻干粉于水解管中，加入4ml氯乙酰-甲醇溶液(1:10)和1mlc11:0(1mg/ml)内标的十一碳酸甲酯溶液，盖紧瓶盖置于80℃水浴反应2个小时。取出冷却后加入7％碳酸钾5ml，振摇均匀，以1200r/min的速度离心5min后过0.2um滤膜装入进样小瓶，上机检测。
采用sas(version9.1，sasinstitute，cary，nc)统计软件中one-wayanova进行五个处理组的数据分析，数据以平均值±平均标准误(sem)表示，亚麻籽油替代水平与大豆异黄酮的交互作用采用glm进行分析，以p<0.05作为差异显著性判断标准。
1.生长性能
如表4所示，与la饲粮相比，用亚麻籽油替代一半或全部猪油显著降低了黄羽肉鸡的平均日采食量(adfi)，完全替代降低了f/g；29-66日龄鸡的终bw和adg没有受到显著影响。lo组饲粮相较于la组饲粮的饲料效率提高了4.56％(p<0.05)。
表4
其中，
a,b同行无字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著p<0.05)。
1bw，体重；adg，平均日增重；adfi，平均日采食量；f/g，料重比。
2指5个处理组one-wayanova分析的p值。
3lo表示亚麻籽油剂量，亚麻籽油替代一半或全部猪油。
2.血浆抗氧化和脂质代谢指标
如表5所示，用亚麻籽油替代一半或全部猪油对肉鸡血浆抗氧化指标无显著影响(p>0.05)。当si添加到亚麻籽油饲粮时，lo+si饲粮组肉鸡血浆t-sod活性显著高于lo和la+lo组。五种饲粮对血浆t-aoc、mda、gsh和gssg含量无显著影响，但含si的饲粮组(la+lo+si和lo+si)的gsh/gssg比值均高于la+lo和lo组(p<0.05)。与la组相比，亚麻籽油饲粮中tg和tch含量明显降低，尤其是在si存在的情况下，tg和tch水平会进一步降低。亚麻籽油替代猪油水平与si对血浆tch含量的影响存在显著交互作用，但各饲粮对鸡血浆hdl-c或ldl-c含量无显著影响。
表5
其中，
a,b,c同行无字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著p<0.05)。
1t-aoc，总抗氧化能力；t-sod，总超氧化物歧化酶；gsh，还原型谷胱甘肽；gssg，氧化型谷胱甘肽；mda，丙二醛；tg，总甘油三酯；tch，总胆固醇；hdl-c，高密度脂蛋白胆固醇；ldl-c，低密度脂蛋白胆固醇。
2指5个处理组one-wayanova分析的p值。
3lo表示亚麻籽油剂量，亚麻籽油替代一半或全部猪油。
3.胸肌脂肪酸组成
如表6所示，与la组相比，食用含亚麻籽油的鸡的ala(c18:3n-3)、epa(c20:5n-3)含量较高(p<0.05)，肉豆蔻酸(c14:0)、棕榈酸(c16:0)、油酸(c18:1n-9)、花生四烯酸(c20:4n-6)和二十四碳酸(c24:0)含量较低。饲粮含亚麻籽油饲喂的鸡的饱和脂肪酸(sfa)和n-6/n-3比值均低于单纯用猪油饲喂的鸡(p<0.05)。与la组相比，亚麻籽油组的n-3脂肪酸含量、pufa含量和pufa/sfa比例更高(p<0.05)，但对n-6脂肪酸的含量没有显著影响。当添加30mg/kgsi到含亚麻籽油(la+lo和lo)的饲粮中时，epa含量进一步增加(p<0.05)，dha含量显著增加。表明饲粮中的α-亚麻酸能有效地沉积在黄羽肉鸡肌肉中，且能有效地转化为epa沉积在鸡肉中；添加大豆异黄酮到亚麻籽油饲粮中可进一步促进α-亚麻酸转化成epa、再转化成dha沉积于鸡肉中。
表6
a,b,c同行无字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
1epa：二十碳五烯酸，dha：二十二碳六烯酸，sfa：饱和脂肪酸，mufa：单不饱和脂肪酸，pufa：多不饱和脂肪酸，n-3：包括α-亚麻酸、epa、dha，n-6：包括亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸。
2指5个处理组one-wayanova分析的p值。
3lo表示亚麻籽油剂量，亚麻籽油替代一半或全部猪油。
综上所述，用亚麻籽油替代一半猪油或全部猪油可以提高饲料效率，使岭南黄鸡的肉富含n-3多不饱和脂肪酸(ala、epa和dha)，并降低血脂相关指标(血浆tg、tch)。在亚麻籽油饲粮中添加si进一步提高了epa和dha在胸肌中的含量，并且降低了血浆tg和tch水平，改善了鸡的抗氧化状态。在tch含量方面，亚麻籽油水平与si之间存在显著的交互作用，其中lo+si饲粮最优。
总之，在具备ala的基础上，大豆异黄酮具有促进从ala转化为epa和dha的作用，从而增加了肌肉中epa和dha含量。因此，大豆异黄酮与亚麻籽油配合使用可生产出富含n-3不饱和脂肪酸(ala、epa、dha)的鸡肉产品，为满足消费者对健康食品的需求作出贡献。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对上述实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。