本发明涉及水产养殖饲料及其制备方法。
背景技术：
目前，我国对水生动物细菌性疾病的防治主要采用口服抗生素与全池泼洒消毒剂相结合的方法，但使用抗生素会使养殖对象产生抗药性，并在体内形成药物积累，影响水产品质量；使用消毒剂会抑杀水中浮游生物，抑制水生植物的光合作用，造成水体缺氧，破坏水体生态平衡，影响养殖对象生长。
如果水产养殖饲料能提高河蟹对腐败希瓦氏菌的免疫力，可为预防水产养殖对象的腐败希瓦氏菌感染提供一种新的途径。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种水产养殖饲料及其制备方法，该水产养殖饲料具有抗菌功效，能提高水产养殖对象对腐败希瓦氏菌的免疫力。
为实现上述目的，本发明提供一种水产养殖饲料的制备方法，以添加腐败希瓦氏菌的餐厨有机固体废弃物饲养蝇蛆，诱导蝇蛆对腐败希瓦氏菌产生特异抗菌功能，再将蝇蛆制成水产养殖饲料。
优选的，所述水产养殖饲料的制备方法，包括如下步骤：
1）将蝇蛆幼虫均匀铺晒在餐厨有机固体废弃物表面，进行蝇蛆育养4～5天；
餐厨有机固体废弃物的投料量为65～85kg/m2；餐厨有机固体废弃物中加入了含有腐败希瓦氏菌的菌液，每公斤餐厨有机固体废弃物中加入100ml菌液，且拌匀；菌液中腐败希瓦氏菌的含量为9×109cfu/ml；
蝇蛆育养密度：每公斤餐厨有机固体废弃物投放蝇蛆幼虫1～10克；
蝇蛆育养环境：温度控制在25～26℃，空气湿度65%，避免阳光照射，保持通风换气；
2）将成熟的蝇蛆收集至清洁的容器中放置4～6小时，使蝇蛆体内的食料充分排泄出来，得到鲜蛆；
3）将鲜蛆清洗后置入烘箱进行烘干：烘箱内温度为40～45℃，烘干时间为10～12小时，且每30分钟翻炒一次；
4）将烘干后的干蛆粉碎成干蛆粉；
5）将粉碎后的干蛆粉与辅料混匀，制得水产养殖饲料。
本发明还提供上述制备方法所制得的水产养殖饲料。
优选的，所述的水产养殖饲料其用于饲养河蟹。
本发明的优点和有益效果在于：提供一种水产养殖饲料及其制备方法，该水产养殖饲料应用了腐败希瓦氏菌，具有抗菌功效，能提高水产养殖对象对腐败希瓦氏菌的免疫力。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
本发明提供一种水产养殖饲料，以腐败希瓦氏菌诱导的功能蝇蛆制成，包括如下步骤：
1）将蝇蛆幼虫均匀铺晒在餐厨有机固体废弃物表面，进行蝇蛆育养4～5天；
餐厨有机固体废弃物的投料量为65～85kg/m2；餐厨有机固体废弃物中加入了含有腐败希瓦氏菌的菌液，每公斤餐厨有机固体废弃物中加入100ml菌液，且拌匀；菌液中腐败希瓦氏菌的含量为9×109cfu/ml；
蝇蛆育养密度：每公斤餐厨有机固体废弃物投放蝇蛆幼虫1～10克；
蝇蛆育养环境：温度控制在25～26℃，空气湿度65%，避免阳光照射，保持通风换气；
2）将成熟的蝇蛆收集至清洁的容器中放置4～6小时，使蝇蛆体内的食料充分排泄出来，得到鲜蛆；
3）将鲜蛆清洗后置入烘箱进行烘干：烘箱内温度为40～45℃，烘干时间为10～12小时，且每30分钟翻炒一次；
4）将烘干后的干蛆粉碎成干蛆粉；
5）将粉碎后的干蛆粉与辅料混匀，制得水产养殖饲料。
本发明制备的水产养殖饲料具有抗菌功效，可用于饲养河蟹，能提高河蟹对腐败希瓦氏菌的免疫力。
对比试验如下：
菌液的制备：通过无菌操作，将腐败希瓦氏菌纯培养物，接种于营养肉汤，28℃，100r/min摇床培养24h，离心，然后借助比浊仪用生理盐水调制成腐败希瓦氏菌含菌量为9×109cfu/ml菌液（母液），并根据试验需要，用生理盐水稀释成不同浓度的菌液，4℃保存备用。
蝇蛆培养：在塑料盘中加入餐厨有机固体废弃物2000g，再加入菌液（菌液中腐败希瓦氏菌的含量为9×109cfu/ml）200ml，拌匀，然后在盘中各投放刚孵出的家蝇幼虫（蝇蛆幼苗，1.2mg/只）20g，空调维持室温25～26℃，空气湿度65%，培育4天，获得成熟的蝇蛆，即经分离菌诱导的功能蝇蛆。
攻毒试验a：
先进行腐败希瓦氏菌对河蟹（平均体重62g/只）合适感染剂量的初筛，确定感染剂量的大致范围，然后开始正式攻毒试验a。在1-4号水箱（长×宽×高=60cm×40cm×30cm，水深10cm）中，各投放10只河蟹，顺箱号依次感染菌液浓度分别为2×108、1×108、0.5×108、0.25×108cfu/ml，每只河蟹肌肉注射0.1ml，即得1-4号箱河蟹的细菌感染剂量分别为：0.40×105、0.81×105、1.61×105、3.23×105cfu/g，试验期间保持昼夜充氧，空调维持室温在27～28℃，48h后观察记录试验结果。采用改良寇氏法计算菌株对河蟹的48h半致死剂量（ld50）。
腐败希瓦氏菌对河蟹的攻毒试验a结果见表1。表1可见，在人工感染腐败希瓦氏菌48h后，3.23×105cfu/g剂量组的河蟹死亡率为100%，0.40×105cfu/g剂量组的河蟹死亡率为20%。采用改良寇氏法，计算得出腐败希瓦氏菌对河蟹人工感染48h的ld50为0.71×105cfu/g。
表1腐败希瓦氏菌对河蟹的攻毒试验a
攻毒试验b：
在1-4号4个水箱（长×宽×高=60cm×40cm×30cm，水深10cm）中，各投放健康河蟹10只，每天投喂配合饲料加功能蝇蛆（两者比例9：1），日投喂量均为河蟹体重的3%，分早晚两次（8：00和17：00）平均投喂，如此饲养试验一周，然后进行分离菌对实验河蟹的攻毒试验b（依照攻毒试验a的方法进行）。整个试验期间保持昼夜充氧，空调维持室温在27～28℃，每天吸出水底排泄物。
腐败希瓦氏菌对投喂功能蝇蛆河蟹的攻毒试验b结果见表2。通过改良寇氏法，计算得出腐败希瓦氏菌对投喂功能蝇蛆河蟹人工感染48h的ld50为2.29×105cfu/g，为该菌对未投喂功能蝇蛆河蟹攻毒试验a的（0.71×105cfu/g）3.2倍。
表2腐败希瓦氏菌对投喂功能蝇蛆河蟹的攻毒试验
结论：攻毒试验a和攻毒试验b的结果显示，腐败希瓦氏菌对投喂了该菌诱导的功能蝇蛆河蟹的48hld50为2.29×105cfu/g，为未投喂功能蝇蛆河蟹的3.2倍，这表明在配合饲料中添加投喂功能蝇蛆能显著提高河蟹对腐败希瓦氏菌的免疫力。