本发明属于天然植物酵素领域，更具体地，涉及一种富硒草珊瑚酵素饮料及其制备方法和应用。
背景技术：
：酵素是指以动物、植物和菌类等为原料，经微生物发酵制得的含有特定生物活性成分的产品。酵素成分包含来自植物原料和微生物所提供的各种营养素和天然植物中的植物类功能性化学成分，以及发酵生成的一些生理活性物质，包括维生素、氨基酸、多糖、肽类、多酚类、黄酮类、矿物元素和有机酸，gaba、sod、过氧化氢酶等抗氧化成分，各种益生菌，醇类、酯类、酶类以及外添加的低聚糖，酶、牛磺酸等功能性成分之故。草珊瑚，学名：(sarcandraglabra(thunb.)nakai)，为金粟兰科多年生常绿亚灌木，俗称满山香、观音茶、九节花、接骨木等。其形态秀丽、四季馨香，具有极高的药用、食用及观赏价值。草珊瑚全株供药用，能清热解毒、祛风活血、消肿止痛、抗菌消炎。主治流行性感冒、流行性乙型脑炎、肺炎、阑尾炎、盆腔炎、跌打损伤、风湿关节痛、闭经、创口感染、菌痢等。还用以治疗胰腺癌、胃癌、直肠癌、肝癌、食管癌等恶性肿瘤，有缓解、缩小肿块、延长寿命、改善自觉症状等功效，无副作用。草珊瑚含挥发油、酯类、酚类、鞣质、黄酮、氰甙、香豆素、内酯等；全株含左旋类没药素甲，异秦皮定，延胡索酸，琥珀酸，黄酮甙及香豆精衍生物事。草珊瑚分布广泛，资源丰富，是一种极具开发潜力的新食品原料。使用草珊瑚果制作的酵素不仅可以预防流感，还能够预防流行性乙型脑炎、肺炎、阑尾炎等，但现有技术没有草珊瑚酵素的研究。技术实现要素：鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于通过筛选发酵菌种，并对生产工艺及技术参数进行优化，提供一种天然草珊瑚酵素饮料的生产方法。本发明的第一方面提供一种富硒草珊瑚酵素饮料的制作方法，该方法包括以下步骤：(1)制备草珊瑚汁：取新鲜成熟富硒草珊瑚果，洗净、破碎，加入果胶酶酶解后进行榨汁，得到天然草珊瑚果汁；果胶酶的添加量为草珊瑚质量的0.02％-0.05％；酶解步骤的时间为3-6h；(2)调配：向天然草珊瑚果汁中添加1-3％的白砂糖和0.05-0.1％的柠檬酸进行调配；(3)混菌发酵：先进行乳酸菌发酵，植物乳杆菌接种量2-8％，发酵温度20-50℃，发酵时间15-40h；后进行酵母菌发酵，酵母菌接种量0.03-0.3％，发酵温度10-50℃，发酵时间3-15h；当ph达到2.5-5.0时终止发酵，在4-8℃下低温贮罐保藏；(4)过滤：采用微滤过滤机进行过滤，巴氏灭菌，制得成品饮料。根据本发明，优选地，步骤(1)中所述的果胶酶的添加量为草珊瑚质量的0.025％-0.035％，例如为0.03％。根据本发明，优选地，步骤(1)中所述酶解步骤的时间为4-5h，例如为4h。根据本发明，优选地，步骤(2)中，向天然草珊瑚果汁添加1.5-2.5％的白砂糖和0.07-0.09％的柠檬酸进行调配，例如，添加2％的白砂糖和0.08％的柠檬酸进行调配。根据本发明，优选地，步骤(3)的乳酸菌发酵步骤中，植物乳杆菌接种量4-6％，发酵温度30-40℃，发酵时间25-35h。例如，植物乳杆菌接种量5％，发酵温度33℃，发酵时间30h。根据本发明，优选地，步骤(3)的酵母菌发酵步骤中，酵母菌接种量0.1-0.2％，发酵温度25-35℃，发酵时间8-12h。例如，酵母菌接种量0.12％，发酵温度30℃，发酵时间10h。根据本发明，优选地，步骤(3)中，当ph达到3.8-4.2时终止发酵，在4-6℃下低温贮罐保藏。例如，当ph达到4.0时终止发酵，在5℃下低温贮罐保藏。根据本发明，优选地，步骤(3)中，所述的乳酸菌有效活菌总数为4.0×109-16.0×109cfu·ml-1；所述的乳酸菌有效活菌总数为5.7×109-10.0×109cfu·ml-1。本发明的第二方面提供由上述方法制得的富硒草珊瑚酵素饮料。本发明的第三方面提供上述富硒草珊瑚酵素饮料在制备用于预防流感功能的食品中的应用。本发明有益效果：本发明提供一种具有预防流感的天然草珊瑚酵素饮料；与现有技术相比，本发明采用双菌发酵方式，能够促进草珊瑚中碳水化合物、蛋白质、脂类、黄酮类等物质的溶出，这些有益成分可以促进肠道有益菌的增殖，抑制有害菌的繁殖及腐败物质形成，起到调节肠道菌群平衡、增强免疫作用。本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。实施例1本实施例提供的一种具有预防流感功能的富硒草珊瑚酵素饮料及制作方法，该方法包括以下步骤：(1)制备草珊瑚汁：取新鲜成熟富硒草珊瑚果，洗净、破碎，加入果胶酶酶解后进行榨汁，得到天然草珊瑚果汁；果胶酶的添加量为草珊瑚质量的0.02％；酶解步骤的时间为3h。(2)调配：向天然草珊瑚果汁中添加1％的白砂糖和0.05％的柠檬酸进行调配。(3)混菌发酵：先进行乳酸菌发酵，植物乳杆菌接种量2％，发酵温度25℃，发酵时间20h；后进行酵母菌发酵，酵母菌接种量0.05％，发酵温度20℃，发酵时间3h；当ph达到2.5时终止发酵，在4℃下低温贮罐保藏；步骤(3)所述的乳酸菌有效活菌总数为7.0×109cfu·ml-1；所述的乳酸菌有效活菌总数为5.7×109。(4)过滤：采用微滤过滤机进行过滤，巴氏灭菌，制成成品饮料。实施例2本实施例提供的一种具有预防流感功能的富硒草珊瑚酵素饮料及制作方法，该方法包括以下步骤：(1)制备草珊瑚汁：取新鲜成熟富硒草珊瑚果，洗净、破碎，加入果胶酶酶解后进行榨汁，得到天然草珊瑚果汁；果胶酶的添加量为草珊瑚质量的0.03％；酶解步骤的时间为4h。(2)调配：向天然草珊瑚果汁中添加2％的白砂糖和0.08％的柠檬酸进行调配。(3)混菌发酵：先进行乳酸菌发酵，植物乳杆菌接种量5％，发酵温度33℃，发酵时间30h；后进行酵母菌发酵，酵母菌接种量0.12％，发酵温度30℃，发酵时间10h；当ph达到4.0时终止发酵，在5℃下低温贮罐保藏；步骤(3)所述的乳酸菌有效活菌总数为10.0×109cfu·ml-1；所述的乳酸菌有效活菌总数为7.0×109cfu·ml-1。(4)过滤：采用微滤过滤机进行过滤，巴氏灭菌，制成成品饮料。实施例3本实施例提供的一种具有预防流感功能的富硒草珊瑚酵素饮料及制作方法，该方法包括以下步骤：(1)制备草珊瑚汁：取新鲜成熟富硒草珊瑚果，洗净、破碎，加入果胶酶酶解后进行榨汁，得到天然草珊瑚果汁；果胶酶的添加量为草珊瑚质量的0.05％；酶解步骤的时间为6h。(2)调配：天然草珊瑚果汁添加3％的白砂糖和0.1％的柠檬酸进行调配。(3)混菌发酵：先进行乳酸菌发酵，植物乳杆菌接种量8％，发酵温度38℃，发酵时间35h；后进行酵母菌发酵，酵母菌接种量0.2％，发酵温度35℃，发酵时间12h；当ph达到3.7时终止发酵，在5℃下低温贮罐保藏；所述的乳酸菌有效活菌总数为16.0×109cfu·ml-1；所述的乳酸菌有效活菌总数为10.0×109cfu·ml-1。(4)过滤：采用微滤过滤机进行过滤，巴氏灭菌，制成成品饮料。测试例本测试例用于说明本发明富硒草珊瑚酵素饮料对抗流感病毒的作用，对比例1：与实施例1的区别在于：原料中的草珊瑚为不含富硒元素的草珊瑚。对比例2：与实施例2的区别在于：配料中不含植物乳杆菌。对比例3：与实施例3的区别在于：配料中不含酵母菌。预防流感作用实验：将spf级雄性小鼠，7-8周龄，120只小鼠随机分为空白对照组、病毒对照组、实施例1～3组和对比例1～3组。每组10只，每组小鼠按20ml/(kg·d)体积灌胃1次，连续6天。空白对照组和病毒对照组灌服生理盐水(0.02ml/g·d)，实施例组和对比例组分别按实施例1～3和对比例1～3制备的酵素饮料进行灌服，剂量为0.02ml/g，1天1次，给予小鼠灌服处理后第7天，以50μl的流感病毒滴鼻感染小鼠，制备流感病毒小鼠感染模型(空白对照组小鼠滴鼻等体积的生理盐水)。第7天，处死小鼠，取肺称重，按照以下公式计算肺指数和肺指数抑制率：肺指数＝[肺质量(g)/体质量(g)]×100％；肺指数抑制率＝[(病毒对照组肺指数均值-各组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值]×100％。肉眼观察肺脏病变，肺组织用％的多聚甲醛固定液固定，乙醇系列脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，he染色，普通光学显微镜下观察肺组织形态学变化。实时荧光定量-pcr测定的ct＜35，曲线呈s型，可认为待检样本流感病毒rna阳性。用spss16.0软件，p＜0.05为差异有统计学意义。结果为表1所示。表1本发明对抗流感病毒的影响组别阳性(n)阳性率(％)肺指数肺指数抑制率(％)空白对照组000.4±0.043.7病毒对照组786.41.5±0.5-实施例1组224.00.8±0.219.5实施例2组111.60.8±0.322.7实施例3组113.10.8±0.321.8对比例1组563.91.1±0.410.1对比例2组562.81.1±0.59.2对比例3组449.30.8±0.114.4从表1数据结果可以看出，本发明的实施例1～3制得的酵素饮料，对流感病毒的防治作用，效果明显优于对比例1、对比例2、对比例3，可见本发明选用原料对流感病毒的防治作用有较大影响，其他生产工艺的改变也会影响疗效，所以本发明选用富硒草珊瑚等为原料，相互作用，同时优化工艺，制得的酵素饮料对流感病毒有较好的防治作用。以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。当前第1页12