一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂及其制备方法与流程

[0001]
本发明属于微生态制剂技术领域，具体涉及一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂及其制备方法。


背景技术：

[0002]
随着我国养猪规模的扩大，集约化程度的提高，以及最新育种技术的采用，猪的抗逆性变得越来越差，对环境条件的要求也越来越高。在饲养阶段，猪抗逆性下降会导致在各种应激环境下生长猪生长速度减缓或停滞，饲料报酬降低；抵抗力和免疫力下降，对一些传染病和寄生虫病易感性增强，导致各种疫病的流行。因此养殖行业普遍存在使用抗生素的行为。大剂量的使用抗生素可以起到防治传染病的效果，而且禽畜类抗生素比专项药物价格低廉，还可以降低饲养成本，因此一些不良商家为了节约养殖成本或是相关知识储备不全对于大量使用抗生素并无防范意识的养殖户会出现滥用抗生素的行为。但是滥用抗生素不仅会干扰饲养禽畜的肠道菌群平衡，还会出现排泄不掉的抗生素遗留在禽畜机体内对食用者造成危害的情况。所以，研发无抗饲料是现行养殖业急需解决的技术问题。尤其是2020年7月起，国家将禁用饲用抗生素。那么在养殖过程中，仅依靠接种疫苗去防治各种传染性疾病，种类既不全面，预防力度也不够，因此，各种传染性疾病的发病率、腹泻率和死亡率都将大大增高。
[0003]
微生态制剂是一类无毒、无害、无耐药性、无污染、绿色安全的生物制剂，可以在数量或种类上补充肠道内减少或缺乏的正常微生物，调整并维持肠道内正常的微生态平衡，减少胃肠道大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌对肠粘膜、肠绒毛膜的损伤，抑制有害菌繁殖，减少毒素的分泌，增强机体免疫功能，还可以促进营养物质的消化吸收，改善饲料转化率和畜禽生产性能。但微生态制剂主要功效是增强动物的抗病能力，在促进仔猪的生长方面并不是很明显。
[0004]
目前国内外关于利用微生态制剂作为饲料添加剂的报道很多，中国专利申请cn110353099a公开了一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法：步骤通过筛选丁酸梭菌产丁酸性能较好的菌株，实现固态共培养丁酸梭菌嗜酸乳杆菌及代谢产物等在动物肠道中的协同调控及替代抗生素的作用，通过丁酸梭菌嗜酸乳杆菌固态共培养发酵，达到加工副产品原料高值化利用的目的。该发明的兽用微生物饲料添加剂可加快牲畜的生长，减少疾病的发生，替代抗生素的使用，但是对于基体抗病能力的提高效果并不突出，尤其是对于牲畜生长过程中出现的腹泻、免疫力低等情况，治疗和预防效果不明显。
[0005]
中国专利申请cn106819487a公开了本发明公开一种含丁酸梭菌的仔猪低蛋白配合饲料及其应用，包括玉米60～65、豆粕15～22、乳清粉3～6、鱼粉3～9、小麦麸1～6、葡萄糖1～3、豆油1～3、酸化剂0.1～0.5、磷酸氢钙0.5～1.2、石粉0.5～1.1、食盐0.1～0.5、l-赖氨酸盐酸盐0.1～0.7、dl-蛋氨酸0.1～0.7、苏氨酸0.05～0.3、色氨酸0.1～0.8、仔猪预混料1～4、丁酸梭菌0.001～0.005(冻干粉中活菌含量为1
×
10
9
cfu/g)。该发明在仔猪低蛋白饲料中添加适当比例的丁酸梭菌添加剂在降低仔猪腹泻率、改善肠道健康的具有一定的
作用，但是该发明为单一型丁酸梭菌饲料添加剂，在改善和提高仔猪生长性能方面的效果较差。
[0006]
故而要开发替代传统抗生素的产品，不可以依靠某种单一的生物制剂，往往需要多种产品的科学配伍交替使用才能得到最佳的效果。


技术实现要素：

[0007]
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂及其制备方法。本发明提供的含丁酸梭菌的复合微生态制剂通过对丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌按照特定的比例进行复合使用，并且与消化促进剂协同作用，不仅可以显著地提高仔猪的抗病能力，增强免疫力和肠道吸收能力，还可以有效的提高饲料的利用率，降低了料肉比，提高猪仔生长率。
[0008]
本发明的技术方案是：
[0009]
一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉40～65份，复合载体25～30份，抗菌肽3～6份，消化促进剂5～16份，抗氧化剂2～12份。
[0010]
进一步地，所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0011]
进一步地，所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、低聚果糖、壳聚糖、海藻糖中的两种或以上。
[0012]
进一步地，所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:(6～12)组成。
[0013]
进一步地，所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:8组成。
[0014]
进一步地，所述复合微生物菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0015]
s1、将活化好的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别接种于种子培养基中，接种量各为1～10％，培养温度32～37℃，摇床转速120～160r/min，培养10h，分别得丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液；
[0016]
进一步地，所述种子培养基为牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，氯化钠0.5％，硫酸铵0.3％，加水至100％，ph 5；
[0017]
s2、将步骤s1所得的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液混合接种于复合培养基中，接种量为4～10％，培养温度为32～37℃，混合发酵10～16h，得到复合生物菌发酵液；
[0018]
s3、将步骤s2所得的复合生物菌发酵液经离心分离，从上清液中分离得到复合微生物菌沉淀，并在干燥箱中40℃烘干成干粉，即得复合微生物菌粉；
[0019]
进一步地，所述步骤s1中丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌的重量比为9:2:5；
[0020]
进一步地，所述步骤s2中的复合培养基为：蛋白胨12g、酵母粉8g、玉米粉12g、葡萄糖15g、碳酸钙2g、磷酸二氢钾0.6g、硫酸铵0.3g、维生素b 0.2g、牛磺酸0.1g，纯化水1000ml，调节ph值为7，经112℃高温灭菌20分钟，冷却至室温即得；
[0021]
进一步地，所述步骤s3中所得复合微生物菌粉中，丁酸梭菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g，嗜酸乳杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g；地衣芽孢杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/
g。
[0022]
进一步地，所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比5～15:1～4组成。
[0023]
进一步地，所述的丹参提取物的制备方法如下：
[0024]
向丹参中加入其重量7～12倍的体积份数为60～80％乙醇水溶液浸泡3～5小时，然后在50～70℃下提取1～3次，每次提取时间为1～3小时，过滤，将滤液合并，将合并液减压浓缩、真空干燥，即得丹参提取物。
[0025]
更进一步地，所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比10:3组成。
[0026]
另外，本发明还提供了一种所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0027]
将复合微生物菌粉，复合载体，抗菌肽，消化促进剂，抗氧化剂经混合机混合均匀，20～40℃下干燥后分装得到含丁酸梭菌的复合微生态制剂。
[0028]
进一步地，所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为3～8％。
[0029]
本发明提供的复合微生态制剂采用了多菌种联合发酵和菌种配伍技术制备而成，通过对丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌按照特定的比例进行复合使用，伴随饲料进入动物体内时，能够产生大量的胞外酶(如淀粉酶、蛋白酶和半纤维素水解酶等)，这些酶类可以促进饲料的消化和吸收，提高饲料的利用率，还能够能够进一步抑制肠道病原微生物的生长，提高肠道中有益微生物的数量，能够调节胃肠道内的微环境和ph，保护胃肠道健康，降低仔猪腹泻率，提高动物机体的抗病能力和免疫力。同时，与本发明中添加的视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按一定比例组成的促进吸收剂协同作用，有效的提高了胃肠道对营养成分、维生素和矿物质的吸收，从而能够有效促进动物的生长，提高猪仔的日增重和生长率。
[0030]
另外，本发明提供的复合微生态制剂中，还添加了由共轭亚油酸和丹参提取物一定比例组成的抗氧化剂，能够有效提高复合微生态制剂的抗氧化性，延长复合微生态制剂的使用寿命，使得本发明所提供的饲料添加剂具有良好的保存活性和热稳定性，同时能够有效提高仔猪的血清免疫球蛋白，进而提高其抗病免疫力。
[0031]
与现有技术相比，本发明提供的含丁酸梭菌的复合微生态制剂具有以下优势：
[0032]
(1)本发明提供的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，通过对丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌按照特定的比例进行复合使用，并且与消化促进剂协同作用，不仅可以显著地提高仔猪的抗病能力，增强免疫力和肠道吸收能力，还可以有效的提高生长饲料的利用率，降低了料肉比，提高猪仔率，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。
[0033]
(2)本发明提供的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，在组分中添加的抗氧化剂能够有效提高复合微生态制剂的抗氧化性，延长复合微生态制剂的使用寿命，使得本发明所提供的饲料添加剂具有良好的保存活性和热稳定性，试验证明，本发明制备的复合微生态制剂常温下放置6个月后，芽孢率仍能达到90％以上。
具体实施方式
[0034]
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本
发明的基本思想，均在本发明的保护范围之内。
[0035]
视黄醇结合蛋白购自南京欧凯生物科技有限公司；β-桉叶醇购自上海源叶生物科技有限公司；丁酸梭菌购自上海晅科生物科技有限公司；嗜酸乳杆菌购自和湖北鑫鸣泰化学有限公司；地衣芽孢杆菌购自上海西格生物科技有限公司；共轭亚油酸、抗菌肽，货号：kl-p054，购自上海康郎生物科技有限公司。
[0036]
本发明所用的其他试剂均为常用试剂，均可在常规试剂生产销售公司购买。
[0037]
实施例1一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0038]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉40份，复合载体25份，抗菌肽3份，消化促进剂5份，抗氧化剂2份。
[0039]
所述复合载体为玉米粉、低聚果糖和壳聚糖按重量比1:1:1组成。
[0040]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:12组成。
[0041]
所述复合微生物菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0042]
s1、将活化好的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别接种于种子培养基中，接种量各为1％，培养温度32℃，摇床转速120r/min，培养10h，分别得丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液；
[0043]
所述种子培养基为牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，氯化钠0.5％，硫酸铵0.3％，加水至100％，ph 5；
[0044]
s2、将步骤s1所得的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液混合接种于复合培养基中，接种量为4％，培养温度为32℃，混合发酵10h，得到复合生物菌发酵液；
[0045]
s3、将步骤s2所得的复合生物菌发酵液经离心分离，从上清液中分离得到复合微生物菌沉淀，并在干燥箱中40℃烘干成干粉，即得复合微生物菌粉；
[0046]
所述步骤s1中丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌的重量比为9:2:5；
[0047]
所述步骤s2中的复合培养基为：蛋白胨12g、酵母粉8g、玉米粉12g、葡萄糖15g、碳酸钙2g、磷酸二氢钾0.6g、硫酸铵0.3g、维生素b 0.2g、牛磺酸0.1g，纯化水1000ml，调节ph值为7，经112℃高温灭菌20分钟，冷却至室温即得。
[0048]
所述步骤s3中所得复合微生物菌粉中，丁酸梭菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g，嗜酸乳杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g；地衣芽孢杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g。
[0049]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比5:4组成。
[0050]
所述的丹参提取物的制备方法如下：
[0051]
向丹参中加入其重量7倍的体积份数为60％乙醇水溶液浸泡3小时，然后在50℃下提取1次，提取时间为1小时，将滤液减压浓缩、真空干燥，即得丹参提取物。
[0052]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0053]
将复合微生物菌粉，复合载体，抗菌肽，消化促进剂，抗氧化剂经混合机混合均匀，20℃下干燥后分装得到含丁酸梭菌的复合微生态制剂。
[0054]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数3％。
[0055]
实施例2一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0056]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0057]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0058]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:8组成。
[0059]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，所述复合微生物菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0060]
s1、将活化好的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别接种于种子培养基中，接种量各为6％，培养温度35℃，摇床转速140r/min，培养10h，分别得丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液；
[0061]
所述种子培养基为牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，氯化钠0.5％，硫酸铵0.3％，加水至100％，ph 5；
[0062]
s2、将步骤s1所得的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液混合接种于复合培养基中，接种量为8％，培养温度为35℃，混合发酵14h，得到复合生物菌发酵液；
[0063]
s3、将步骤s2所得的复合生物菌发酵液经离心分离，从上清液中分离得到复合微生物菌沉淀，并在干燥箱中40℃烘干成干粉，即得复合微生物菌粉；
[0064]
所述步骤s1中丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌的重量比为9:2:5；
[0065]
所述步骤s2中的复合培养基为：蛋白胨12g、酵母粉8g、玉米粉12g、葡萄糖15g、碳酸钙2g、磷酸二氢钾0.6g、硫酸铵0.3g、维生素b 0.2g、牛磺酸0.1g，纯化水1000ml，调节ph值为7，经112℃高温灭菌20分钟，冷却至室温即得。
[0066]
所述步骤s3中所得复合微生物菌粉中，丁酸梭菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g，嗜酸乳杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g；地衣芽孢杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g。
[0067]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比10:3组成。
[0068]
所述的丹参提取物的制备方法如下：
[0069]
向丹参中加入其重量10倍的体积份数为75％乙醇水溶液浸泡4小时，然后在60℃下提取2次，每次提取时间为2小时，过滤，将滤液合并，将合并液减压浓缩、真空干燥，即得丹参提取物。
[0070]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0071]
将复合微生物菌粉，复合载体，抗菌肽，消化促进剂，抗氧化剂经混合机混合均匀，30℃下干燥后分装得到含丁酸梭菌的复合微生态制剂。
[0072]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0073]
实施例3一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0074]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉65份，复合载体30份，抗菌肽6份，消化促进剂16份，抗氧化剂12份。
[0075]
所述复合载体为玉米粉和海藻糖按重量比1：1组成。
[0076]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:6组成。
[0077]
所述复合微生物菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0078]
s1、将活化好的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别接种于种子培养基中，接种量各为10％，培养温度37℃，摇床转速160r/min，培养10h，分别得丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液；
[0079]
所述种子培养基为牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，氯化钠0.5％，硫酸铵0.3％，加水至100％，ph 5；
[0080]
s2、将步骤s1所得的丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌种子液混合接种于复
合培养基中，接种量为10％，培养温度为37℃，混合发酵16h，得到复合生物菌发酵液；
[0081]
s3、将步骤s2所得的复合生物菌发酵液经离心分离，从上清液中分离得到复合微生物菌沉淀，并在干燥箱中40℃烘干成干粉，即得复合微生物菌粉；
[0082]
所述步骤s1中丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌的重量比为9:2:5；
[0083]
所述步骤s2中的复合培养基为：蛋白胨12g、酵母粉8g、玉米粉12g、葡萄糖15g、碳酸钙2g、磷酸二氢钾0.6g、硫酸铵0.3g、维生素b 0.2g、牛磺酸0.1g，纯化水1000ml，调节ph值为7，经112℃高温灭菌20分钟，冷却至室温即得。
[0084]
所述步骤s3中所得复合微生物菌粉中，丁酸梭菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g，嗜酸乳杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g；地衣芽孢杆菌的活菌数≥1.0
×
10
9
cfu/g。
[0085]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比15:1组成。
[0086]
所述的丹参提取物的制备方法如下：
[0087]
向丹参中加入其重量12倍的体积份数为80％乙醇水溶液浸泡5小时，然后在70℃下提取3次，每次提取时间为3小时，过滤，将滤液合并，将合并液减压浓缩、真空干燥，即得丹参提取物。
[0088]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0089]
将复合微生物菌粉，复合载体，抗菌肽，消化促进剂，抗氧化剂经混合机混合均匀，40℃下干燥后分装得到含丁酸梭菌的复合微生态制剂。
[0090]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数8％。
[0091]
对比例1一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0092]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0093]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0094]
所述消化促进剂为β-桉叶醇。
[0095]
所述复合微生物菌粉的制备方法与实施例2类似。
[0096]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比10:3组成。
[0097]
所述的丹参提取物的制备方法与实施例2类似。
[0098]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法与实施例2类似。
[0099]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0100]
与实施例2的区别在于，所述消化促进剂中未添加视黄醇结合蛋白。
[0101]
对比例2一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0102]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0103]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0104]
所述消化促进剂为视黄醇结合蛋白。
[0105]
所述复合微生物菌粉的制备方法与实施例2类似。
[0106]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比10:3组成。
[0107]
所述的丹参提取物的制备方法与实施例2类似。
[0108]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法与实施例2类似。
[0109]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0110]
与实施例2的区别在于，所述的消化促进剂中未添加β-桉叶醇。
[0111]
对比例3一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0112]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0113]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0114]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比1:1组成。
[0115]
所述复合微生物菌粉的制备方法与实施例2类似。
[0116]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比10:3组成。
[0117]
所述的丹参提取物的制备方法与实施例2类似。
[0118]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法与实施例2类似。
[0119]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0120]
与实施例2的区别在于，所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比1:1组成。
[0121]
对比例4一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0122]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0123]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0124]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:8组成。
[0125]
所述复合微生物菌粉的制备方法与实施例2类似。
[0126]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸。
[0127]
所述的丹参提取物的制备方法与实施例2类似。
[0128]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法与实施例2类似。
[0129]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0130]
与实施例2的区别在于，所述的抗氧化剂中未添加丹参提取物。
[0131]
对比例5一种含丁酸梭菌的复合微生态制剂
[0132]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂，由如下组分及其重量份数组成：复合微生物菌粉55份，复合载体28份，抗菌肽5份，消化促进剂10份，抗氧化剂8份；
[0133]
所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、壳聚糖和海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
[0134]
所述消化促进剂由视黄醇结合蛋白和β-桉叶醇按重量比3:8组成。
[0135]
所述复合微生物菌粉的制备方法与实施例2类似。
[0136]
所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比1:1组成。
[0137]
所述的丹参提取物的制备方法与实施例2类似。
[0138]
所述的含丁酸梭菌的复合微生态制剂的制备方法与实施例2类似。
[0139]
所述复合微生态制剂在饲料中的添加量为重量分数5％。
[0140]
与实施例2的区别在于，所述抗氧化剂为共轭亚油酸和丹参提取物按重量比1:1组成。
[0141]
试验例一、本发明的复合微生态制剂对仔猪生长状况的影响
[0142]
1、试验材料：本发明实施例1～3，对比例1～5制备的复合微生态制剂。
[0143]
2、试验方法：在相同的养殖条件下，使用本发明实施例1～3，对比例1～5制备的微
生态制剂作为饲料添加剂试验组，市场上的饲料作为对照组。将180头保育保育ii阶段仔猪(30日龄)分为9组，分别为实施例1～3组，对比例1～5组和对照组，每组20头；对照组喂食普通市售饲料，实施例1～3组，对比例1～5组在饲料中添加本发明实施例1～3，对比例1～5制备的微生态制剂，添加比重为饲料量的5％，饲养30天。
[0144]
(1)观察统计仔猪平均日增重、料肉比、腹泻率等情况；
[0145]
(2)免疫指标检测：血样的采集与处理：各组饲养30天后，随机采6头，采血具体时间为采血当日7:00～10:00am，每头每次从前腔静脉采血5ml，放置至析出血清后，3000rpm，离心5min，吸取上清液，分装成小包装，-20℃保存，采用终点法测定免疫球蛋白igg、iga、igm。
[0146]
3、试验结果
[0147]
试验结果如表1、2所示。
[0148]
表1本发明的复合微生态制剂对仔猪生长状况的影响
[0149][0150][0151]
表2血清免疫球蛋白含量(n＝6)
[0152][0153]
由表1可知，食用添加了本发明实施例1～3制备的复合微生态制剂的饲料与对照组(普通市售饲料)相比，有效预防了仔猪的产生腹泻的情况，腹泻率较低，且日增重有了明显的提高，其中实施例2组的效果最好，日增重显著增加为680.47g，料肉比及腹泻率大大降低，为本发明的最佳实施例。结果表明，添加本发明微生态制剂的猪用饲料时，对保育ii阶段仔猪(30日龄)的养殖效果好，有效提高仔猪的免疫力，成本低，可以显著提高仔猪的抗腹
泻和饲料转化率，有效提升仔猪饲养经济效益。而对比例1～3组中，当改变了消化促进剂的组分和比例时，仔猪的日增重量和料肉比有了明显的下降。
[0154]
由表2可知，食用添加了本发明实施例1～3制备的复合微生态制剂的饲料的仔猪中血清免疫球蛋白igg、igm、iga的浓度与对照组(普通市售饲料)相比，有了较大的提高，其中实施例2组的效果最好，为本发明的最佳实施例。而从对比例4～5的实验数据可以看出，当改变了抗氧化剂的组分和含量时仔猪中血清免疫球蛋白igg、igm、iga的浓度与实施例组相比有了较大的下降，说明本发明提供的抗氧化剂能够有效改善机体细胞免疫功能。
[0155]
试验例二、本发明的复合微生态制剂的芽孢率检测
[0156]
1、试验材料：本发明实施例1～3，对比例4～5制备复合微生态制剂。
[0157]
2、试验方法：将本发明实施例1～3，对比例4～5制备的复合微生态制剂于室温下保存6个月后，采用简单染色法检测其芽孢率并记录实验数据。
[0158]
3、试验结果
[0159]
试验结果如表3所示。
[0160]
表3本发明的复合微生态制剂的芽孢率检测结果
[0161]
组别实施例1实施例2实施例3对比例4对比例5芽孢率(％)94.8294.9693.7975.8580.12
[0162]
由表1可知，本发明实施例1～3制备的复合微生态制剂于室温下保存6个月后，芽孢率均仍能达到93％以上，其中实施例2的效果最好，芽孢率为94.96％，为本发明的最佳实施例。而对比例4～5中改变了制备的复合微生态制剂的抗氧化剂的组分时，制得的复合微生态制剂于室温下保存6个月后，其芽孢率大大降低，仅有70～80％左右，说明本发明添加的抗氧化剂能保持复合微生态制剂长期保存下的保存活性，延长微生物菌剂的使用寿命，保持复合微生态制剂的药效和稳定性。
[0163]
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。