本发明属于水果保鲜
技术领域：
：，具体而言，涉及一种葡萄保鲜技术，尤其涉及一种用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法。
背景技术：
：：据统计，世界葡萄(vitisviniferal.)的栽培面积达到了1000万hm2，其产量在世界水果总产量中名列前茅，近几年来我国葡萄产业被广泛种植，其中用于鲜食的占60％以上。我国葡萄在采后贮藏的过程中，20％以上会出现腐烂、落粒、失水、褐变等问题，这对于鲜食葡萄产业的发展带来了巨大的挑战，鲜食葡萄贮藏性差是我国葡萄产业亟待解决的主要问题。葡萄果实采后生理生化机理研究和高效贮藏保鲜技术的开发对葡萄产业的发展具有十分重要的作用。‘夏黑’葡萄(vitishybridcv‘summerblack’)是欧美杂交来源的三倍体品种。它是一个早熟、丰产、易着色的品种。其穗形整齐紧凑、果皮呈蓝黑色、无涩味、外观美、含糖量高，但是在贮藏过程中容易受伤导致污染，从而较快的腐烂，极大的降低了葡萄的商品价值，因此腐烂、干梗、落粒是‘夏黑’葡萄贮运过程中经常出现的问题(张红,李洪山,申玉香.夏黑葡萄采后壳聚糖等多种保鲜剂处理对其保鲜效果的影响[j].食品科技,2017,42(09):26-29.)。目前，国内外对葡萄的保鲜贮藏运用较多的是so2防腐技术、低温贮藏技术以及1-mcp保鲜技术。so2可以有效地控制鲜食葡萄腐烂，然而由于二氧化硫导致葡萄发生伤害的剂量和对葡萄有效杀菌的剂量相近，但其最大的问题是会损坏葡萄的商品性，会造成果实漂白、异味等问题(frankamlikota.gablerjosephl.smilanickmonirf.mansourhakankaraca.influenceoffumigationwithhighconcentrationsofozonegasonpostharvestgraymoldandfungicideresiduesontablegrapes[j].postharvestbiologyandtechnology,2010,55(2):85-90)。低温贮藏技术可以明显的抑制果蔬的新陈代谢、延长贮藏期，甚至可以提高果蔬的口感和营养物质。张翔宇等研究了低温对巨峰葡萄果实品质的影响，发现巨峰葡萄在0℃下贮藏比在20℃下贮藏的品质更佳，保鲜效果更好(张翔宇.不同温度条件下1-甲基环丙烯对葡萄果实质地的影响和作用机理初探[d].天津科技大学,2017.)。而1-mcp是近几年发现的一种乙烯受体抑制剂，它能通过竞争乙烯作用受体而影响乙烯的生理活动，从而抑制植物的成熟和衰老(董萍,辛广,张博,冯帆,李铁纯.1-mcp处理对南果梨20℃贮藏期间香气成分的影响[j].食品科学,2010,31(22):477-479.)，目前尚无文献报道将1-mcp用于‘夏黑’葡萄的保鲜贮藏。总之，‘夏黑’是一个早熟，硬肉、天然无核的品种，这导致其可溶性糖、花色苷、丙二醛等的含量与以往研究的‘巨峰’、‘红地球’、‘阳光玫瑰’这些品种的特性存在较大区别，从而使现有贮藏方法用于‘夏黑’葡萄时的效果并不理想，要么保鲜周期不长，要么可溶性固形物、可滴定酸、可溶性糖和花色苷的含量显著降低，影响商品的外观品质和内在风味。技术实现要素：鉴于‘夏黑’葡萄在贮运过程中易出现腐烂、干梗、落粒的问题，本发明的目的在于提供一种1-mcp+na2s2o5+pp透气包装的复合处理与低温高湿度贮藏条件相结合的贮藏保鲜方法。为了实现上述技术目的，本发明人通过大量试验对‘夏黑’葡萄进行不同保鲜包装与保鲜剂条件下的处理，通过物理、化学方法的不同结合，从‘夏黑’葡萄果穗采后失重率、落果率、腐烂率，可溶性固形物、可溶性糖、可滴定酸、花色苷、mda、叶绿素含量，果梗褐化来分析果实具体的贮藏情况，探索出了最适宜‘夏黑’葡萄的一种保鲜技术，从而提高其商品性，最终获得了如下技术方案：一种用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，该方法包括以下步骤：(1)1-mcp保鲜剂制备：取1-mcp包入吸水性材料中，置于容器内，向容器中加入蒸馏水使吸水性材料吸水，备用；(2)na2s2o5保鲜剂制备：取焦亚硫酸钠，用吸潮透气性材料包裹，备用；(3)将采收的新鲜‘夏黑’葡萄运至冷库，然后将葡萄放入pp透气包装袋中，向包装袋内放入步骤(1)制备的1-mcp保鲜剂和步骤(2)制备的na2s2o5保鲜剂，立即包扎封口、贮藏，贮藏温度为0～1℃，湿度为90％～95％；所述1-mcp保鲜剂中1-mcp和所述na2s2o5保鲜剂中na2s2o5的质量比为1：(25000～40000)。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，步骤(1)中所述的吸水性材料为脱脂棉。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，步骤(1)中所述1-mcp、吸水性材料和蒸馏水的质量用量比为1：(200～500)：(1000～2000)。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，步骤(2)中所述的吸潮透气性材料为滤纸。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，步骤(3)中所述pp透气包装袋为有孔透气袋，孔径8～12mm。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，步骤(3)中所述pp透气包装袋的规格为(220～250)mm×(260～300)mm。进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，以每千克‘夏黑’葡萄计算，所述1-mcp保鲜剂中1-mcp的用量为0.08～0.12mg，所述na2s2o5保鲜剂中na2s2o5的用量为2.8～3.4g。再进一步优选地，如上所述用于‘夏黑’葡萄果实贮藏的复合保鲜处理方法，以每千克‘夏黑’葡萄计算，所述1-mcp保鲜剂中1-mcp的用量为0.08～0.12mg，所述na2s2o5保鲜剂中na2s2o5的用量为2.9～3.1g。本研究得到的复合配方与现有技术相比，本发明涉及的复合保鲜处理方法具有如下优点和进步性：(1)降低了‘夏黑’葡萄的失水率、腐烂率以及落果率，贮藏后果实外观品质下降较慢，商品性维持较好。(2)本发明能减缓‘夏黑’葡萄在贮藏期间可溶性固形物、可滴定酸的降低，维持可溶性糖、花色苷的含量，从而较好地保持了葡萄原有的内在风味。(3)应用本发明进行‘夏黑’葡萄贮藏保鲜，贮藏112天之后仍具有商品性，给零售商足够的销售时间。附图说明图1为不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄果穗腐烂率的影响；图2为不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄果穗落果率、失重率的影响；图3为不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄穗轴褐变(a)、叶绿素a(b)、叶绿素b(c)和叶绿素含量(d)的影响；图4为不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄可溶性固形物(a)、可滴定酸(b)、可溶性糖(c)、花色苷(d)含量的影响；图5为不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄mda含量的影响。具体实施方式以下实施例进一步描述本发明方法的实施过程和有益效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变也包含在本发明范围之内。本实施例以武汉‘夏黑’葡萄为材料，用不同的保鲜剂(焦亚硫酸钠)、1-甲基环丙烯(1-mcp))和pp透气包装的8个组合处理。将处理后的‘夏黑’葡萄均置于纸箱，置于低温0-1℃，相对湿度90-95％的环境中贮藏。以失重率、脱果率、腐烂率、可溶性固形物含量、可滴定酸、可溶性糖、mad、花色苷、果柄中叶绿素的含量为测定指标，研究‘夏黑’葡萄在不同复合保鲜处理下的采后生理及品质影响。结果表明：pp透气包装袋可以有效的降低果穗的失重率、落果率，对于其它指标没有较大的影响。1-mcp和na2s2o5的复合处理能够降低‘夏黑’葡萄的失水率、腐烂率以及落果率，延缓可溶性固形物、可滴定酸的下降。1-mcp能够有效的抑制‘夏黑’葡萄果梗的褐化，从而维持果梗叶绿素的含量，而na2s2o5可以有效的减少果实的腐烂，保存果实的完好性。1材料和方法1.1材料研究材料葡萄‘夏黑’采自武汉市东西湖区葡萄种植标准园，果穗完整、果粒新鲜。1-甲基环丙烯生物保鲜剂：白色粉末状，有效成分含量为3％，购于武汉市阿凡达生物化学有限公司。焦亚硫酸钠试剂：购于武汉市阿凡达生物化学有限公司。保鲜袋是pp材质(聚丙烯)的有孔透气袋，孔径10mm，规格235mm×285mm，购于武汉市金瑞成化玻仪器有限公司。1.2处理方法将葡萄当天运到冷库，然后用不同的保鲜剂和保鲜膜对其进行处理，处理1：na2s2o5+透气保鲜袋，处理2：na2s2o5，处理3：1-mcp+透气保鲜袋，处理4：1-mcp，处理5：透气保鲜袋，处理6：空白对照，处理7：na2s2o5+1-mcp+透气保鲜袋，处理8：na2s2o5+1-mcp，处理完后放入纸箱进行封口贮藏。1-mcp处理：按每千克夏黑葡萄称取3mg1-mcp粉剂(含1-mcp约0.09mg)，包入脱脂棉中置于小烧杯内，向烧杯中加入4ml蒸馏水，将烧杯置于塑料袋中，立即包扎封口。na2s2o5处理：按每千克红提葡萄称取3gna2s2o5粉剂，用滤纸包裹，置于装有葡萄的塑料袋中，塑料袋包扎封口。1.3测定指标及方法浆果脱落、失重和腐烂率，分别用三穗鲜食葡萄测定果实的脱落、失水和腐烂率，记录脱落果实数量和腐烂果实的数量和重量。可溶性固形物含量测定，采用手持折光仪法，丙二醛含量的测定，采用硫代巴比妥酸法；可滴定酸含量的测定，采用氧化钠溶液滴定法；可溶性总糖的测定，采用蒽酮法；花色苷含量的测定，采用ph示差法；叶绿素a/b的测定，采用分光光度法；以上指标测定全部参考曹建康等的方法(曹建康，姜微波，赵玉梅.果蔬采后生理生化实验指导[m].北京:中国轻工业出版社，2007.)。1.4数据处理所有试验数据均用graphpadprism和excel2010软件进行分析和作图，结果以平均值±标准误表示。2结果2.1不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄果实腐烂的影响表1不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄果实腐烂率(％)比较研究结果表明(表1)，‘夏黑’葡萄果实的腐烂率随着时间的增加而升高，在56天之前果实没有出现腐烂，84天时有少数处理的果实开始腐烂，比如处理3在84天时之后开始逐渐开始。处理5和处理6在后期果实腐烂情况最严重，处理8果实的外观品质较好果穗的腐烂率为0，所以用两种保鲜剂复合处理‘夏黑’葡萄对果实保鲜的效果最好(图1a)。处理1最终的腐烂率为3±0.82％，处理3的为7.33±0.42％，可以看出na2s2o5的防腐烂效果比1-mcp好(图1b)。2.2不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄果穗落果率的影响表2不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄果实落果率(％)比较果穗落果率的趋势随着贮藏时间增加而逐渐上升，在贮藏84天后落果速率开始快速上升，贮藏112天后处理5的落果率为8.67±0.46％，处理6为18.33±0.41％，此结果表明保鲜袋的处理可以有效的降低果穗的落果率。处理7贮藏112天落果率为5.33±0.47％，与处理5相比发现两种保鲜剂的复合处理能够在一定程度上降低果穗的落果率(表2、图2a)。2.3不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄果穗失重率的影响表3不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄果实失重率(％)比较水分对于细胞来说是十分重要的，它既能够维持细胞的膨压，同时也参与细胞内各种生理反应，葡萄采后严重失水，会导致其果皮细胞气孔关闭，从而影响果实正常代谢。‘夏黑’葡萄在贮藏28天内的失重率较低不超过1.82±0.23％，但在28天到42天这段时间失重速率快速上升，42天之后缓慢增加。‘夏黑’葡萄贮藏112天后处理6的失水率最高为14.07±0.39％，处理5为5.23±0.74％，其结果表明用保鲜袋处理的‘夏黑’葡萄比没有用保鲜袋处理的失水率更低。‘夏黑’葡萄处理7的失水率最低为2.06±0.05％，与处理5相比发现用两种保鲜剂和保鲜袋共同处理对‘夏黑’葡萄的贮藏具有较好的保水性能(表3、图2b)。2.4不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄穗轴褐变及叶绿素含量的影响表4不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄果梗叶绿素含量(mg/g)比较1-mcp是—种新型乙烯受体抑制剂，乙烯参与了葡萄穗轴褐变的过程，褐变的减少伴随着乙烯生物合成途径中acs1水平的降低。从图中可以看出处理5处理6葡萄的果穗褐化较为明显，处理3与处理7处理8的果梗保持得更新鲜，结果表明1-mcp可以一定程度的延缓果穗的褐变，在贮藏112d后，用1-mcp处理过的葡萄其褐变程度低于其它处理组(图3a)。叶绿素a和b的含量与叶绿素总含量的变化趋势一致，都是先升后降，总体来说叶绿素的含量最终是下降的，这与葡萄轴的形态褐变是一致的。处理8和处理7叶绿素的含量最终保持最高，分别为0.84mg/g、0.83mg/g，而处理5和处理6的最低分别为0.75mg/g、0.77mg/g，处理8与处理7、处理5与处理6的差值不大说明保鲜袋对穗轴褐变的影响不大(表4、图3d)。2.5不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄可溶性固形物含量的影响表5不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄可溶性固形物含量(°brix)比较可溶性固形物是指所有溶解于水中的化合物的总称，是衡量果实品质的重要指标，在贮藏期可溶性固形物的含量逐渐下降，是由于呼吸消耗。图中可溶性固形物的含量呈现缓慢下降的趋势，处理8的可溶性固形物含量降低的最少，处理8从17.29±0.92°brix降到15.18±0.27°brix，处理6从17.29±0.92°brix降到13.11±0.19°brix，说明两种保鲜剂的复合使用能够减少可溶性固形物含量的降低。处理5从17.29±0.92°brix降到12.62±0.26°brix，与处理6相比其可溶性固形物下降的更快，说明保鲜袋的使用反而会加快可溶性固形物的下降(表5、图4a)。2.6不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄可滴定酸、可溶性糖、花色苷含量的影响表6不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄可滴定酸含量(％)比较表7不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄可溶性糖含量(mg/g)比较表8不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄花色苷含量(mg/kg)比较酸味是葡萄的一种主要风味，‘夏黑’葡萄可滴定酸含量呈现先升高后下降的趋势，在贮藏后42天可滴定酸含量最高的为0.43％，各处理之间的酸含量的变化幅度相对较小，基本维持在0.35-0.43％之间(表6、图4b)。‘夏黑’葡萄的可溶性糖的含量在一直升高，处理8的‘夏黑’葡萄其可溶性糖的含量最终保持最高为109.75±0.27mg/gfw说明两种保鲜剂的处理可以提高可溶性糖的含量(表7、图4c)。果色是葡萄品质的一项重要指标，它直接影响葡萄的商品价值，花色苷主要由糖转化而来，存于细胞液中。‘夏黑’在贮藏期间花色苷的含量逐渐上升，其趋势与可溶性糖含量变化趋势一致，处理8花色苷的含量最终保持最高为1.5±0.1mg/g，说明两种保鲜剂的保鲜处理可以提高花色苷的含量(表8、图4d)。2.7不同保鲜处理对‘夏黑’葡萄mda含量的影响表9不同保鲜处理的‘夏黑’葡萄mda含量(nmol/g)比较mda是果实脂质过氧化物最重要的产物之一，它的含量可反映果实遭受自由基伤害的程度和膜脂过氧化程度。‘夏黑’葡萄mda的含量呈现先升高后降低的趋势，在贮藏56天之后mda含量开始下降，其不同处理之间的变化总体趋势一致。处理4和处理3最终mda的含量高于其他处理，处理3为48.12±1.03nmol/g，处理4为49.72±0.27nmol/g，说明单独使用1-mcp时，葡萄细胞损伤与膜脂过氧化的程度较高(表9、图5)。三、结论本实验中发现1-mcp和na2s2o5的复合处理能够降低‘夏黑’葡萄的失水率、腐烂率以及落果率，同时也能减缓可溶性固形物、可滴定酸的降低，维持可溶性糖、花色苷的含量。na2s2o5能够有效防止果实腐烂，保证葡萄果穗的外观品质。1-mcp能够有效的抑制‘夏黑’葡萄果梗的褐化，保持较高的叶绿素水平。本发明的研究发现‘夏黑’葡萄在采后贮藏28天内，其葡萄果实外观品质，内在风味最佳。在生产中推荐使用透气包装+1-mcp+na2s2o5的复合处理来贮藏‘夏黑’葡萄，温度为(0-1)℃、相对湿度在90％-95％条件，‘夏黑’葡萄可贮藏112天，贮藏后果实品质下降较慢，商品性维持较好。当前第1页12当前第1页12