可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品的制作方法

1.本发明属于发酵型功能饮料加工领域，尤其是一种可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品。


背景技术：

2.随着现代生活节奏的加快及生活环境的影响，患有慢性疲劳综合征等亚健康疾病人群不断扩大，预防和对症机体健康的调整已经成为解决亚健康问题的共识。中医认为肾主藏经，关系人的生长、发育、生殖等多种生理活动，肾气的盛衰决定人的健康状态。为此，强肾是改善人们亚健康状态的一种有效手段。海参是一种有益于身体健康的食品，在中药中占有重要地位。《本草纲目拾遗》中记载：“海参性温补，足敌人参，故名海参”，“补肾经、益精髓、消痿涎，摄小便，壮阳，生百脉”。研究表明，海参肠比海参体壁含有更多的活性物质，如刺参皂苷、锌、硒、钒等成分。但是，迄今为止并没有充分利用海参肠中的有效成分，辅以其他药食同源的植物进行配伍，制备显著提高强肾健体效果的海参肠提取物益生菌饮品的相关报道。


技术实现要素：

3.本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品。
4.本发明的技术解决方案是：一种可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品，其特征在于按照如下方法制备：a. 将新鲜的海参肠匀浆，加入海参肠质量10~15倍的磷酸盐缓冲液，4℃下静置过夜，得海参肠自溶酶解液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/l， ph6.3；b. 在海参肠自溶酶解液中接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在在30~37℃密封静置发酵24~72h，所述酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，所述酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第一次海参肠发酵原汁，将第一次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉a；c. 在海参肽冻干粉a中加入纯水，制成质量浓度为40%的底物，接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在30~37℃密封静置发酵24~72h，所述酿酒酵母、干酪乳杆菌、底物的质量比为0.5：0.5：100，酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第二次海参肠发酵原汁，将第二次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉b；d. 将海参海参肠提取物冻干粉b、蓝莓干粉、覆盆子干粉及桑葚干粉加水制成混合培养液，各组分的质量百分比为海参肠提取物冻干粉b 0.1~5%、蓝莓干粉0.1~10%、覆盆子干粉0.1~10%、桑葚干粉0.1~10%，再加入混合培养液质量2~6%的益生菌粉在30~37℃密封静置发酵24~72h，所述益生菌粉是由保加利亚乳酸菌、青春双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌等质量组成，所述保加利亚乳酸菌≥1
×
106cfu/g、青春双歧杆菌≥1
×
106cfu/g、干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g、嗜酸乳杆菌≥1
×
106cfu/g；
e. 将发酵液转移到后储罐中进行发酵后熟，发酵至ph为3.10~4.00，总酸达到5~7g/l，得海参肠提取物益生菌饮品。
5.本发明是以海参肠为原料，首先制备成海参肠自溶酶解液，再通过二次发酵方法制备成富含海参肽、皂苷、锌、硒、钒的海参肠提取物，与蓝莓干粉、覆盆子干粉、桑葚干粉及益生菌发酵制备成饮品，各组分相互作用，可显著增强强肾健体效果，从而有效改善人们的亚健康状态。
具体实施方式
6.实施例1本发明的一种可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品，按照如下方法制备：a. 将新鲜的海参肠匀浆，加入海参肠质量12倍的磷酸盐缓冲液，4℃下静置过夜，得海参肠自溶酶解液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph6.3；b. 在海参肠自溶酶解液中接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在35℃密封静置发酵50h，所述酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，所述酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第一次海参肠发酵原汁，将第一次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉a；c. 在海参肽冻干粉a中加入纯水，制成质量浓度为40%的底物，接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在35℃密封静置发酵50h，酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第二次海参肠发酵原汁，将第二次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉b；d. 将海参海参肠提取物冻干粉b、蓝莓干粉、覆盆子干粉及桑葚干粉加水制成混合培养液，各组分的质量百分比为海参肠提取物冻干粉b 3%、蓝莓干粉5%、覆盆子干粉5%、桑葚干粉5%，再加入混合培养液质量4%的益生菌粉在32℃密封静置发酵50h，所述益生菌粉是由保加利亚乳酸菌、青春双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌等质量组成，所述保加利亚乳酸菌≥1
×
106cfu/g、青春双歧杆菌≥1
×
106cfu/g、干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g、嗜酸乳杆菌≥1
×
106cfu/g；e. 将发酵液转移到后储罐中进行发酵后熟，发酵至ph为3.6，总酸达到6g/l，得海参肠提取物益生菌饮品。
7.所用原料均为外购商品，其中酿酒酵母购于安琪公司，益生菌粉来源如表1所示。
8.表1实施例2：本发明的可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品，按照如下方法制备：a. 将新鲜的海参肠匀浆，加入海参肠质量10倍的磷酸盐缓冲液，4℃下静置过夜，
得海参肠自溶酶解液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph6.3；b. 在海参肠自溶酶解液中接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在30℃密封静置发酵72h，所述酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，所述酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第一次海参肠发酵原汁，将第一次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉a；c. 在海参肽冻干粉a中加入纯水，制成质量浓度为40%的底物，接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在30℃密封静置发酵72h，所述酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第二次海参肠发酵原汁，将第二次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉b；d. 将海参海参肠提取物冻干粉b、蓝莓干粉、覆盆子干粉及桑葚干粉加水制成混合培养液，各组分的质量百分比为海参肠提取物冻干粉b 0.1%、蓝莓干粉0.1%、覆盆子干粉0.1%、桑葚干粉0.1%，再加入混合培养液质量2%的益生菌粉在30℃密封静置发酵72h，所述益生菌粉是由保加利亚乳酸菌、青春双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌等质量组成，所述保加利亚乳酸菌≥1
×
106cfu/g、青春双歧杆菌≥1
×
106cfu/g、干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g、嗜酸乳杆菌≥1
×
106cfu/g；e. 将发酵液转移到后储罐中进行发酵后熟，发酵至ph为3.10，总酸达到7g/l，得海参肠提取物益生菌饮品。
9.原料来源同实施例1。
10.实施例3：本发明的可强肾健体的海参肠提取物益生菌饮品，按照如下方法制备：a. 将新鲜的海参肠匀浆，加入海参肠质量15倍的磷酸盐缓冲液，4℃下静置过夜，得海参肠自溶酶解液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/l， ph6.3；b. 在海参肠自溶酶解液中接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在37℃密封静置发酵24h，酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，所述酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第一次海参肠发酵原汁，将第一次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉a；c. 在海参肽冻干粉a中加入纯水，制成质量浓度为40%的底物，接种酿酒酵母、干酪乳杆菌在37℃密封静置发酵24h，酿酒酵母、干酪乳杆菌、海参肠自溶酶解液的质量比为0.5：0.5：100，酿酒酵母≥1
×
106cfu/g，干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g，固液分离得第二次海参肠发酵原汁，将第二次海参肠发酵原汁冷冻干燥得海参肠提取物冻干粉b；d. 将海参海参肠提取物冻干粉b、蓝莓干粉、覆盆子干粉及桑葚干粉加水制成混合培养液，各组分的质量百分比为海参肠提取物冻干粉b 5%、蓝莓干粉10%、覆盆子干粉10%、桑葚干粉10%，再加入混合培养液质量6%的益生菌粉在37℃密封静置发酵24h，所述益生菌粉是由保加利亚乳酸菌、青春双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌等质量组成，所述保加利亚乳酸菌≥1
×
106cfu/g、青春双歧杆菌≥1
×
106cfu/g、干酪乳杆菌≥1
×
106cfu/g、嗜酸乳杆菌≥1
×
106cfu/g；e. 将发酵液转移到后储罐中进行发酵后熟，发酵至ph为4.00，总酸达到5g/l，得海参肠提取物益生菌饮品。
11.实验例1：
将本发明实施例1所得海参肠提取物益生菌饮品冻干粉与对照组进行肽、皂苷、锌、硒、钒含量测定。对照组是以粉碎后的新鲜海参肠桨冻干粉代替本发明实施例1所得海参肠提取物冻干粉b，按照本发明实施例1的步骤d、e制备出的饮品的冻干粉。按照gb/t22492
‑
2008规定的方法进行肽含量测定；按照《保健食品检验与评价技术规范》2003年版测定总皂苷含量；参照gb5009.268
‑
2016测定钒、锌、硒含量；结果如表2。
12.表2结果表明：本发明实施例1的海参肠提取物益生菌饮品冻干粉中的肽、皂苷、锌、硒、钒含量分别是对照组中的肽、皂苷、锌、硒、钒含量的1.64、1.56、1.84、1.83以及2倍，即本发明可将海参肠中的有效成分充分提取出来。
13.实验例2：取18~22g雄性icr小鼠50只，随机分成5组：空白组、阴性对照组、阳性对照组、对照组、本发明实施例1组。除空白组皮下注射生理盐水（25mg/kg
•
d）外，每组小鼠皮下注射等量（25mg/kg
•
d）的氢化可的松，连续7d构建肾阳虚小鼠模型。建模之后连续灌胃24d：空白组和阴性对照组灌胃生理盐水（25ml/kg
•
d），阳性对照组注射丙酸睾酮（5mg/kg
•
d），对照组（0.5g/kg
•
d）灌胃样品同实验例1，本发明组（0.5g/kg
•
d）灌胃本发明实施例1所得饮品的冻干粉；最后一次灌胃结束后24h，将小鼠放入水温为6
±
2℃的水箱中，记录小鼠游泳时间，以小鼠不能游动为截止时间。待小鼠游泳结束后，以颈椎脱臼处死小鼠，检测睾丸组织中睾酮水平、精囊腺中精液乳酸脱氢酶（ldh）水平及精子活动率。结果如表3所示：表3
表3中与空白组相比，极显著**（p<0.01），显著*(p<0.05)；与对照组相比，极显著##（p<0.01），显著#(p<0.05)。
14.结果表明，从阳虚小鼠低温游泳时间、睾酮水平、精囊腺中精液乳酸脱氢酶（ldh）水平及精子活动率等指标看出，本发明组明显高于对照组、阴性对照组及阳性对照组，说明本发明组可显著增强强肾健体效果。