一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法与流程

1.本发明涉及生物发酵技术领域，具体涉及一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法。


背景技术：

2.灵芝，又称为瑞草、神芝、仙草、瑶草、还阳草、林中灵、菌灵芝、万年蕈、灵草、赤芝、丹芝、琼珍等，是一种多孔菌科真菌。在明代大医学家李时珍编著的《本草纲目》中有灵芝的记载。灵芝中富含多糖、核苷类、呋喃类、甾醇类、生物碱、三萜类、油脂类、多种氨基酸及蛋白质类、酶类、有机锗及多种微量元素等；灵芝多糖具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤作用；三萜类化合物能净化血液，保护肝功能；灵芝多种制剂分别具有镇静、抗惊厥、强心、抗心律失常、降压、镇咳平喘作用；此外，灵芝还有抗凝血、抑制血小板聚集及抗过敏作用。目前获取灵芝三萜的途径有两种，一是从子实体和孢子粉中获得，二是从灵芝发酵液或菌丝体中获得。
3.自20世纪80年代以来，随着我国养殖业连续20多年以年平均9％以上的高速度增长，畜牧主产区的饲料资源短缺问题也将越来越严重。近年以来我国的饲料生产成本居高不下，原料涨价使饲料生产企业处于亏损的边缘，养殖业经济效益难以保障，严重制约我国畜牧业的发展；针对我国饲料资源严重短缺、原料价格居高不下的现状，集成我国常规能量、蛋白质资源替代技术和非常规饲料资源开发利用的关键技术成果，开发新型饲料资源，增加饲料原料供给，缓解我国饲料短缺已成当前迫切的任务。
4.由于灵芝所含活性物质具有高效、无毒、增强免疫力、抗病毒抗菌等特点，很符合绿色饲料及绿色养殖的要求，是一种全新而有效的绿色饲料添加剂，目前，已有少量关于灵芝制备饲料添加剂的报道，而关于使用液态深层发酵方式生产灵芝功能性饲料添加剂的报道则未见报道。
5.因此，需要开发一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，从而提高动物饲料产品的品质。


技术实现要素：

6.针对现有技术中存在的不足，本发明提供一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，灵芝功能性饲料添加剂中含有丰富的灵芝多糖和灵芝酸等活性物质，具有增强免疫性、抗菌性、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射等广泛的生理活性。本发明采用的技术方案是：
7.一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：包括以下步骤：
8.s1.生产灵芝菌丝体液态深层发酵液；
9.s2.将灵芝菌丝体液态深层发酵液进行匀浆处理，获得粒径分布均匀的匀浆发酵液；
10.s3.将匀浆发酵液进行喷雾干燥，得到灵芝功能性饲料添加剂。
11.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s1灵芝菌丝
体液态深层发酵液的生产步骤为：
12.s11.活化灵芝菌株：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基在115℃～125℃条件下灭菌20～40min后倒平板，得到马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板，冷却备用；在超净工作台上挑取灵芝菌块并放置在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板中央，然后将马铃薯葡萄糖琼脂培养基放入20℃～30℃恒温培养箱中培养，至灵芝菌丝体长满平板得到活化的灵芝菌株；
13.s12.制备灵芝菌丝体种子培养液：葡萄糖10
‑
30g/l，酵母粉2
‑
7g/l，mgso4·
7h2o 0.5
‑
2.0g/l，kh2po
4 0.5
‑
2.0g/l，将上述原料混合得到液体培养基，将液体培养基分装于三角瓶中；在超净工作台上，挑取4
‑
6块活化的灵芝菌株接入三角瓶，并将三角瓶置于旋转式摇床上培养5
‑
14天，得到种子培养液；
14.s13.制备菌丝体液态深层发酵液：将发酵培养基加入发酵罐中，然后将种子培养液转接至发酵罐中搅拌并通空气，培养3
‑
10天，得到灵芝菌丝体液态深层发酵液。
15.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s12中液体培养基的ph＝4.5，灵芝菌株大小为2
‑
6mm2。
16.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s12旋转式摇床的温度为20
‑
30℃，转速为50
‑
200rpm。
17.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s13发酵培养基包括黄豆粉10
‑
30g/l，葡萄糖10
‑
40g/l，可溶性淀粉5
‑
30g/l，玉米粉5
‑
30g/l，mgso4·
7h2o 0.5
‑
3.0g/l，kh2po
4 0.5
‑
3.0g/l；所述发酵培养基的ph＝5。
18.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s13接种量为3％
‑
10％(v/v)，发酵温度为20
‑
32℃，搅拌转速为0
‑
200rpm，通气比0.5
‑
2.0vvm。
19.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s2控制均质温度为40
‑
60℃，均质压力为10
‑
20mpa。
20.优选的是，所述的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，其中：所述步骤s3喷雾干燥温度为50
‑
60℃。
21.本发明的优点：本发明的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，通过液态深层发酵、匀浆处理和喷雾干燥得到灵芝功能性饲料添加剂，含有丰富的灵芝多糖和灵芝酸等活性物质，具有增强免疫性、抗菌性、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射等广泛的生理活性，该产品作为饲料添加剂使用能明显提高动物饲料的品质，在提高养殖动物的肉质质量的同时，最重要的是，对人体健康带来很多益处，可以增强身体免疫力。
具体实施方式
22.下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
23.实施例1
24.一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：
25.s1.生产灵芝菌丝体液态深层发酵液；
26.s2.将灵芝菌丝体液态深层发酵液进行匀浆处理，获得粒径分布均匀的匀浆发酵液，控制均质温度为50℃，均质压力为10mpa；
27.s3.将匀浆发酵液进行喷雾干燥，喷雾干燥的温度为55℃，得到灵芝功能性饲料添加剂。
28.所述步骤s1灵芝菌丝体液态深层发酵液的生产步骤具体为：
29.s11.活化灵芝菌株：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基在115℃条件下灭菌30min后倒平板，得到马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板，冷却备用；在超净工作台上挑取4mm2大小的灵芝菌块并放置在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板中央，然后将马铃薯葡萄糖琼脂培养基放入26℃恒温培养箱中培养，至灵芝菌丝体长满平板得到活化的灵芝菌株；所述灵芝菌块为赤芝，由无锡泛宁生物科技有限公司提供和保藏，保藏编号：ccgmc5.616，已在[菌物学报2020年第39卷第1期164
‑
173]公开；
[0030]
s12.制备灵芝菌丝体种子培养液：葡萄糖20g/l，酵母粉4g/l，mgso4·
7h2o 1.0g/l，kh2po
4 1.5g/l，ph＝4.5，将上述原料混合得到液体培养基，将液体培养基分装于三角瓶中；在超净工作台上，挑取4
‑
6块大小为4mm2活化的灵芝菌株接入三角瓶，装液量为摇瓶容积的70％，并将三角瓶置于旋转式摇床上培养8天，温度25℃，转速120rpm，得到种子培养液。
[0031]
s13.制备菌丝体液态深层发酵液：发酵培养基包括黄豆粉10g/l，葡萄糖10g/l，可溶性淀粉10g/l，玉米粉10g/l，mgso4·
7h2o 1.5g/l，kh2po
4 2.0g/l，ph＝5，将发酵培养基加入发酵罐中，装液量为发酵罐容积的70％，然后将种子培养液转接至发酵罐中搅拌并通空气，接种量8％(v/v)，温度27℃，转速50rpm，通气比1.25vvm，培养时间6天，得到灵芝菌丝体液态深层发酵液。
[0032]
实施例2喂养动物实验
[0033]
采用实施例1获得的灵芝功能性饲料添加剂进行仔猪饲养实验，共设定3个实验组和1个对照组，对照组喂不添加任何添加剂的普通饲料，饲养60天后效果如表1
[0034]
表1
[0035][0036][0037]
实施例3
[0038]
一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：
[0039]
s1.生产灵芝菌丝体液态深层发酵液；
[0040]
s2.将灵芝菌丝体液态深层发酵液进行匀浆处理，获得粒径分布均匀的匀浆发酵液，控制均质温度为40℃，均质压力为10mpa；
[0041]
s3.将匀浆发酵液进行喷雾干燥，喷雾干燥的温度为50℃，得到灵芝功能性饲料添加剂。
[0042]
所述步骤s1灵芝菌丝体液态深层发酵液的生产步骤具体为：
[0043]
s11.活化被保藏的灵芝菌株：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基在121℃条件下灭菌20min后倒平板，得到马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板，冷却备用；在超净工作台上挑取2mm2大小的灵芝菌块并放置在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板中央，然后将马铃薯葡萄糖琼脂培养基放入20℃恒温培养箱中培养，至灵芝菌丝体长满平板得到活化的灵芝菌株；所述灵芝菌块为赤芝，由无锡泛宁生物科技有限公司提供和保藏，保藏编号：ccgmc5.616，已在[菌物学报2020年第39卷第1期164
‑
173]公开；
[0044]
s12.制备灵芝菌丝体种子培养液：葡萄糖10g/l，酵母粉2g/l，mgso4·
7h2o 0.5g/l，kh2po
4 0.5g/l，ph＝4.5，将上述原料混合得到液体培养基，将液体培养基分装于三角瓶中；在超净工作台上，挑取4
‑
6块大小为4mm2活化的灵芝菌株接入三角瓶，装液量为摇瓶容积的70％，并将三角瓶置于旋转式摇床上培养5天，温度20℃，转速50rpm，得到种子培养液；
[0045]
s13.制备菌丝体液态深层发酵液：发酵培养基包括黄豆粉10g/l，葡萄糖10g/l，可溶性淀粉5g/l，玉米粉5g/l，mgso4·
7h2o 0.5g/l，kh2po
4 0.5g/l，ph＝5，将发酵培养基加入发酵罐中，装液量为发酵罐容积的70％，然后将种子培养液转接至发酵罐中搅拌并通空气，接种量3％(v/v)，温度20℃，转速0rpm，通气比0.5vvm，培养时间3天，得到灵芝菌丝体液态深层发酵液。
[0046]
实施例4喂养动物实验
[0047]
采用实施例3获得的灵芝功能性饲料添加剂进行仔猪饲养实验，共设定3个实验组和1个对照组，对照组喂不添加任何添加剂的普通饲料，饲养60天后效果如表2。
[0048]
表2
[0049][0050][0051]
实施例5
[0052]
一种灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：
[0053]
s1.生产灵芝菌丝体液态深层发酵液；
[0054]
s2.将灵芝菌丝体液态深层发酵液进行匀浆处理，获得粒径分布均匀的匀浆发酵
液，控制均质温度为60℃，均质压力为60mpa；
[0055]
s3.将匀浆发酵液进行喷雾干燥，喷雾干燥的温度为60℃，得到灵芝功能性饲料添加剂。
[0056]
所述步骤s1灵芝菌丝体液态深层发酵液的生产步骤具体为：
[0057]
s11.活化被保藏的灵芝菌株：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基在125℃条件下灭菌40min后倒平板，得到马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板，冷却备用；在超净工作台上挑取6mm2大小的灵芝菌块并放置在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板中央，然后将马铃薯葡萄糖琼脂培养基放入30℃恒温培养箱中培养，至灵芝菌丝体长满平板得到活化的灵芝菌株；所述灵芝菌块为赤芝，由无锡泛宁生物科技有限公司提供和保藏，保藏编号：ccgmc5.616，已在[菌物学报2020年第39卷第1期164
‑
173]公开；
[0058]
s12.制备灵芝菌丝体种子培养液：葡萄糖30g/l，酵母粉7g/l，mgso4·
7h2o 2g/l，kh2po
4 2g/l，ph＝4.5，将上述原料混合得到液体培养基，将液体培养基分装于三角瓶中；在超净工作台上，挑取4
‑
6块大小为4mm2活化的灵芝菌株接入三角瓶，装液量为摇瓶容积的70％，并将三角瓶置于旋转式摇床上培养14天，温度30℃，转速200rpm，得到种子培养液；
[0059]
s13.制备菌丝体液态深层发酵液：发酵培养基包括黄豆粉30g/l，葡萄糖40g/l，可溶性淀粉30g/l，玉米粉30g/l，mgso4·
7h2o 3.0g/l，kh2po
4 3.0g/l，ph＝5，将发酵培养基加入发酵罐中，装液量为发酵罐容积的70％，然后将种子培养液转接至发酵罐中搅拌并通空气，接种量10％(v/v)，温度32℃，转速200rpm，通气比2.0vvm，培养时间10天，得到灵芝菌丝体液态深层发酵液。
[0060]
实施例6喂养动物实验
[0061]
采用实施例5获得的灵芝功能性饲料添加剂进行仔猪饲养实验，共设定3个实验组和1个对照组，饲养60天后效果如表3
[0062]
表3
[0063][0064]
本发明的灵芝功能性饲料添加剂的生产方法，通过液态深层发酵、匀浆处理和喷雾干燥得到灵芝功能性饲料添加剂，含有丰富的灵芝多糖和灵芝酸等活性物质，具有增强免疫性、抗菌性、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射等广泛的生理活性，该产品作为饲料添加剂使用能
明显提高动物饲料的品质，在提高养殖动物的肉质质量的同时，最重要的是，对人体健康带来很多益处，可以增强身体免疫力。
[0065]
最后所应说明的是，以上具体实施方式仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照实例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。