草果鲜果的保鲜贮藏方法

本发明属于果实采后保鲜贮藏技术领域，涉及一种草果鲜果的保鲜贮藏方法。

背景技术：

草果(amomumtsaokocrevostetlemaire)为姜科豆蔻属多年生常绿丛生草本植物，作为一种重要的药食同源中药材，在国内外食品香料行业中应用广泛。草果主要在我国的云南、广西、贵州、四川等地种植，其中云南产草果是国内草果的主要来源。草果鲜果的成熟期比较集中，于10～12月间果实成熟。云南省的草果加工主要采用传统的烘干和晒干，加工方式主要以家庭作坊为主，大量的草果成熟或采摘后如果得不到及时的干燥处理或采摘后贮藏于不当环境或在贮藏过程中受到病原菌腐皮镰孢fusariumsolani.的侵染，草果鲜果将很快发生衰老、品质劣变以及腐烂变质，造成严重的经济损失。目前针对草果鲜果的保鲜贮藏方法缺乏，研究其保鲜贮藏方法将有效减少损失。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种草果鲜果的保鲜贮藏方法，保鲜效果明确、显著。

经研究，本发明提供如下技术方案：

草果鲜果的保鲜贮藏方法，包含以下步骤：

1)将草果鲜果进行果实品质分级；

2)将分级后的同等品质草果鲜果去除果柄；

3)将去除果柄后的草果鲜果用杀菌剂浸泡后晾干；所述杀菌剂含有下述有效成分中的任一种或多种：咪鲜胺、抑霉唑、苯醚甲环唑、吡唑菌酯、戊唑醇和嘧菌酯；

4)将晾干后的草果鲜果预冷至4℃，充分散去水汽后置保鲜盒中，加贴1-甲基环丙烯(1-mcp)保鲜纸，封盖，4℃贮藏。

进一步，步骤3)中所述杀菌剂含有有效成分咪鲜胺。

进一步，步骤3)中所述杀菌剂为咪鲜·抑霉唑杀菌剂。

进一步，所述步骤3)是将去除果柄后的草果鲜果用咪鲜·抑霉唑杀菌剂浸泡果实2-3min后晾干；所述咪鲜·抑霉唑杀菌剂是用水稀释至咪鲜胺质量分数为0.4‰、抑霉唑质量分数为0.067‰使用。

本发明的有益效果在于：本发明通过对果实处理方式、保鲜剂、贮藏包装和贮藏温度进行筛选研究，提供了一种有效的草果鲜果保鲜贮藏方法，保鲜效果明确、显著，在生产实践中具有重要的意义。

附图说明

图1为化学杀菌剂单品对病原菌的抑制效果。柱和竖线分别代表生物学重复的均值和标准偏差，不同字母表示差异显著(p<0.05)。

图2为化学杀菌剂单品对病原菌菌落直径的影响。

图3为商业杀菌剂对于病原菌的抑制效果。柱和竖线分别代表生物学重复的均值和标准偏差，不同字母表示差异显著(p<0.05)。

图4为商业杀菌剂对于病原菌菌落直径的影响。

图5为不同发病阶段果实症状。

图6为草果采后贮藏包装、温度、保鲜剂筛选，其中上图为未去果柄组，对照a为2℃保鲜袋对照、b为2℃保鲜袋+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp、c为2℃保鲜袋+壳聚糖+1-mcp、对照d为4℃保鲜盒对照、e为4℃保鲜盒+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp、f为4℃保鲜盒+壳聚糖+1-mcp、对照g为4℃保鲜袋对照、h为4℃保鲜袋+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp、i为4℃保鲜袋+壳聚糖+1-mcp；下图为去果柄组，对照a为4℃保鲜盒对照、b为4℃保鲜盒+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp、c为4℃保鲜盒+壳聚糖+1-mcp、对照d为2℃保鲜盒对照、e为2℃保鲜盒+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp、f为2℃保鲜盒+壳聚糖+1-mcp。柱和竖线分别代表生物学重复的均值和标准偏差，同一时间点不同字母表示差异显著(p<0.05)。

图7为不同保鲜贮藏方式对不同品质草果果实腐烂率的影响。柱和竖线分别代表生物学重复的均值和标准偏差，同一时间点不同字母表示差异显著(p<0.05)。图7中所述“咪鲜胺”均为咪鲜·抑霉唑杀菌剂的简称。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的描述。

一、实验方法

1.化学杀菌剂单品对病原菌的抑制效果

将表1所示的化学杀菌剂单品各自加入融化灭菌的pda培养基中，配制成终浓度为5ppm的含药培养基，每个平板20ml，以等量无菌水为对照。待培养基凝固后，在上述平板中接入直径5mm、在正常pda培养基上培养7天的腐皮镰孢菌饼，用封口膜密封后，于28℃培养箱中培养5d，用十字交叉法测量每个平板的菌落直径。

表1化学杀菌剂单品

2.商业杀菌剂对病原菌的抑制效果

将表2所示的商业杀菌剂各自加入融化灭菌的pda培养基中，配制成终浓度如表2所示(体外抑菌使用浓度为该商业杀菌剂的最高推荐使用浓度)的含药培养基，每个平板20ml，以等量无菌水为对照。待培养基凝固后，在上述平板中接入直径5mm、在正常pda培养基上培养7天的腐皮镰孢菌饼，用封口膜密封后，于28℃培养箱中培养5d，用十字交叉法测量每个平板的菌落直径。

表2商业杀菌剂

3.草果果实表面、果柄活菌数计数

随机选取30个健康草果果实及30个发病草果果实，分别用20ml无菌水富集草果表面微生物。10倍梯度稀释后，取10^-4、10^-5、10^-6、10^-7的稀释液各100μl，分别涂布于lb以及pda固体培养基上，每个梯度重复涂布5次。将lb平板于37℃静置培养24h，选择菌落数30-300之间的平板进行计数并拍照记录。将pda平板于25℃静置培养2-3d，每天观察平板并拍照记录。

随机选取30个健康草果果实及30个发病草果果实，剪下果柄部位，分别置50ml无菌水中于28℃、200rmp条件下震荡1h。10倍梯度稀释后，取10^-4、10^-5、10^-6、10^-7的稀释液各100μl，分别涂布于lb以及pda固体培养基上，每个梯度重复涂布5次。将lb平板于37℃静置培养24h，选择菌落数30-300之间的稀释梯度进行计数。将pda平板于25℃静置培养2-3d，每天观察平板并拍照记录。

4.草果采后贮藏包装、温度、杀菌剂筛选

选用两种不同包装方式(保鲜袋、保鲜盒)、两种不同贮藏温度(4℃、2℃)、一种化学杀菌剂(咪鲜·抑霉唑杀菌剂：咪鲜胺质量分数为24％，抑霉唑质量分数为4％，600倍稀释使用)和一种生物杀菌剂(壳聚糖水溶液，壳聚糖质量分数为1％)进行筛选实验。草果鲜果剔除坏果后，分为去果柄组(注意不对果实及果蒂造成机械伤)和未去果柄组，进行2-3min的化学杀菌剂或生物杀菌剂浸泡处理，晾干后用保鲜袋或保鲜盒包装，分别贮藏于4℃和2℃的环境中，以研究不同处理方式和贮藏环境对草果腐烂率的影响。

5.保鲜贮藏方法及鲜果品质对草果贮藏效果的影响

草果鲜果剔除坏果后，去除果柄(注意不对果实及果蒂造成机械伤)，根据果实的外观、色泽等将其分为高等品质和中等品质：高等品质果实为完全成熟、着色均匀且无明显机械伤的果实，中等品质果实为完全成熟、存在微小机械伤但未见发生病害现象的果实。两种品质的果实再分为对照组和处理组。对照组：仅用清水清洗果实表面；处理组：清水清洗果实表面后，用咪鲜·抑霉唑杀菌剂(咪鲜胺质量分数为24％，抑霉唑质量分数为4％，600倍稀释使用)浸泡果实2-3min；所有果实均于室温自然风干后放置于4℃预冷3d，充分散去水汽后置保鲜盒中，处理组于封盖前加贴1-甲基环丙烯保鲜纸，封盖，于4℃冷库中贮藏。对照组和处理组均设置3个重复，每个重复为500个果实。定期测定果实腐烂率，果实腐烂率的计算公式为：腐烂率(％)＝果实腐烂个数/果实总数×100。

二、实验结果

1.化学杀菌剂单品对病原菌的抑制效果

为能有效地防治草果病原菌腐皮镰孢引起的腐烂，选取10种化学杀菌剂单品，测定其对于病原菌腐皮镰孢菌丝生长的抑制效果。结果如图1和图2所示，有6种化学杀菌剂单品(10号咪鲜胺、4号抑霉唑、2号苯醚甲环唑、7号吡唑醚菌酯、3号戊唑醇、1号嘧菌酯)能显著抑制病原菌菌丝的生长，其中对病原菌菌丝生长抑制效果最好的是咪鲜胺，然后依次是抑霉唑、苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯、戊唑醇、嘧菌酯；另外4种化学杀菌剂(5号papb、6号异菌脲、8号peeg、9号pc8)不能抑制草果病原菌腐皮镰孢菌丝的生长。

2.商业杀菌剂对病原菌的抑制效果

如图3和图4所示，所选取的13种商业杀菌剂均能抑制病原菌腐皮镰孢菌丝的生长，但抑制效果有较大差异，其中咪鲜·抑霉唑(b)、咪鲜·抑霉唑(c)、甲硫·福美双(e)、咪鲜·多菌灵(h)、咪鲜胺(a)、多菌灵(l)对腐皮镰孢菌丝生长的抑制效果最佳，在接种5d后能够完全抑制菌丝生长；壳聚糖(m)、烯酰·锰锌(k)、烯酰·嘧菌酯(d)、百菌清(j)的抑制效果次之，可将菌丝直径降低40-55mm左右；噁酮·霜脲氰(g)、多菌灵·thiram(i)、多菌灵+代森锰锌(f)的抑制效果相对较弱。可见含有咪鲜胺成分的商业杀菌剂均能有效抑制草果采后病原菌腐皮镰孢的生长。

3.草果果实表面和果柄带菌情况

草果鲜果采摘后得不到及时处理，由于病原菌的侵害将发生严重的腐烂现象。本发明对草果鲜果的发病现象及过程进行了研究，并根据发病程度将草果发病阶段进行分级，不同等级的果实腐烂症状见图5。其中0级为健康果实，不表现发病症状；1级果实果柄腐烂、果蒂处果皮褐变，褐变面积小于整果1/4；2级果实果柄腐烂、果蒂处果皮褐变，褐变面积大于整果1/4小于1/2；3级果实褐变面积大于整果1/2；4级果实整个果实表皮褐变；5级果实整果均长出白霉。大多数草果鲜果的起始腐烂部位为果柄及果蒂部位，然后逐渐延伸至全果，故进行草果果实表面和果柄的菌落总数计数，结果如表3所示。随着培养天数增加，各组菌落总数均呈现增加趋势。发病果实表面和果柄的菌落总数均大于健康果实的果实表面和果柄；果柄的菌落总数大于果实表面的菌落总数。因此，优选在贮藏前去除果柄，可有效延缓果实发病腐烂现象。

表3草果果实表面和果柄的菌落总数

hf：健康果实；hs：健康果柄；df：发病果实；ds：发病果柄

4.草果采后贮藏包装、温度、杀菌剂对贮藏期腐烂率的影响

草果采后贮藏包装、温度、杀菌剂对贮藏期腐烂率的影响如图6所示，在未去果柄组中，4℃保鲜盒+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp处理(上图e)的腐烂率最低，在贮藏第90天时的腐烂率为63.33％；在去果柄组中，4℃保鲜盒+咪鲜·抑霉唑杀菌剂+1-mcp处理(下图b)的腐烂率也最低，在贮藏第90天时的腐烂率为44.93％；去果柄组的保鲜效果总体优于未去果柄组。基于以上研究结果总结如下：(1)4℃低温贮藏对草果鲜果病害有明显的控制效果。(2)保鲜盒对于草果鲜果的保鲜效果优于保鲜袋。(3)咪鲜·抑霉唑杀菌剂结合1-mcp保鲜纸可以较好地控制草果病害的发生。(4)去果柄处理有利于控制草果鲜果贮藏期的腐烂损耗，优选在贮藏前去除果柄，这也与前述研究中发现果柄带有更多病原菌的结果对应。

5.草果采后保鲜贮藏方法及果实品质对贮藏期腐烂率的影响

基于前述草果采后贮藏包装、温度、杀菌剂筛选实验结果，实施综合保鲜处理方式及不同鲜果品质对草果贮藏效果的影响研究，结果如图7所示。在4℃低温环境中贮藏草果鲜果，7d内基本不会发生腐烂现象，表明4℃低温可以显著抑制果实的腐烂，贮藏效果明显优于目前实际生产中将果实贮藏于常温环境下造成大量损失。随着贮藏时间的延长，各组果实腐烂率均呈现上升趋势，对照组在50d左右基本全部腐烂。与对照组相比，处理组均能显著降低果实的腐烂率；在贮藏前期，高等品质果实各组腐烂率均显著低于中等品质果实，而随着贮藏时间的增加，高等品质对照组腐烂率迅速增长。由此说明，贮藏用果的品质对后期贮藏效果有较大的影响，直接影响着果实的贮藏期，因此优选在实际生产中对果实进行品质分级后分别进行保鲜贮藏，以避免病原菌的大量交叉感染。保鲜效果最佳处理方式为同等品质果实去果柄后，用咪鲜·抑霉唑杀菌剂浸泡处理，再用保鲜盒结合1-mcp保鲜纸于4℃贮藏，在生产实践中使用此综合保鲜处理方式可以显著提高草果鲜果的贮藏期。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。