提高新生禽类生长性能的卵内营养补剂及用途

1.本发明属于农业畜牧生产技术领域，具体涉及提高新生禽类生长性能的卵内营养补剂及用途。


背景技术：

2.雏鸡早期生长发育速度关系到中后期成年鸡的肉质生长、产蛋、抗病等诸多家禽生产性状能力。而雏鸡早期生长发育速度主要受胚胎期营养吸收影响，胚胎期营养主要来源于卵黄囊内容物；同时还与新生雏鸡肠道菌群的建立有关联，这会直接影响新生雏鸡的采食能力。部分鸡胚在孵化后期会出现卵黄囊吸收障碍问题，导致营养不良甚至出现个体死亡的现象。
3.目前常规雏鸡促生长营养剂一般设计为新生雏鸡使用，而新生雏鸡消化器官和激素调节器官的形态结构已基本定型，服用后对于早期雏鸡生长发育促进作用往往不明显。同时，新生雏鸡已接触外界菌群环境，服用常规促生长营养剂不能在短期内改变雏鸡肠道菌群。部分常规雏鸡促生长营养剂含有兴奋剂药物，尽管能够促进雏鸡生长，但同时会造成雏鸡不可逆的器官损伤，同时人体食用含有药物残留的禽类制品，会诱发各种生理疾病。虽然部分常规雏鸡促生长营养剂主要成分调整为低副作用或无副作用的天然药物，但中药作用缓慢，雏鸡服用后短期效果不明显。


技术实现要素：

4.本发明所要解决的技术问题是提供一种针对禽类胚胎使用，毒副作用小，无药物残留，促进新生禽类生长发育的卵内营养补剂及用途。
5.本发明为解决上述技术问题采用的技术方案是提供了提高新生禽类生长性能的卵内营养补剂，包括如下成分：黄芪多糖和营养成分。
6.其中，所述黄芪多糖为天然的或非天然的。
7.优选地，所述黄芪多糖为人工合成或微生物发酵制备的。
8.更优选地，所述黄芪多糖是从黄芪中提取出的由多种糖类组成的复合物。
9.进一步更优选地，所述复合物包括糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。
10.其中，所述黄芪多糖为黄芪多糖干粉，纯度大于90％。
11.其中，所述卵内营养补剂成分包括营养成分、黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯。
12.其中，所述黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯占卵内营养补剂的质量浓度为1～20％。
13.优选地，所述药学上可接受的盐和/或酯为黄芪甲苷和黄芪甲苷氯化钠中至少一种。
14.其中，所述营养成分包括：甘氨酸、精氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、
亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、氯化胆碱、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、硫胺素盐酸盐、肌醇中至少一种。
15.优选地，所述营养成分包括：含有甘氨酸、精氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、氯化胆碱、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、硫胺素盐酸盐、肌醇的复合营养物。
16.其中，所述卵内营养补剂还包括：注射剂载体。
17.优选地，所述注射剂载体选择药学上可接受的用于胚胎或细胞注射的稀释液。
18.更优选地，所述稀释液为无菌葡萄糖溶液或无菌生理盐水注射稀释液。
19.其中，所述卵内营养补剂，包括质量浓度为1～20％的黄芪多糖和以质量浓度计的以下营养成分：甘氨酸：0.002～0.003％，精氨酸：0.007～0.009％，胱氨酸：0.005～0.007％，谷氨酰胺：0.05～0.06％，组氨酸：0.003～0.005％，异亮氨酸：0.01～0.02％，亮氨酸：0.01～0.02％，赖氨酸：0.015～0.025％，蛋氨酸：0.002～0.003％，苯丙氨酸：0.005～0.007％，丝氨酸：0.003～0.005％，苏氨酸：0.008～0.01％，色氨酸：0.001～0.002％，酪氨酸：0.01～0.02％，缬氨酸：0.009～0.015％，氯化胆碱：0.0003～0.0005％，泛酸钙：0.0003～0.0005％，叶酸：0.0003～0.0005％，烟酰胺：0.0003～0.0005％，盐酸吡哆醇：0.0003～0.0005％，核黄素：0.00003～0.00005％，硫胺素盐酸盐：0.0003～0.0005％，肌醇：0.0007～0.0008％。
20.优选地，所述卵内营养补剂，包括：黄芪多糖：10～200g，甘氨酸：0.02～0.03g，精氨酸：0.07～0.09g，胱氨酸：0.05～0.07g，谷氨酰胺：0.5～0.6g，组氨酸：0.03～0.05g，异亮氨酸：0.1～0.2g，亮氨酸：0.1～0.2g，赖氨酸：0.15～0.25g，蛋氨酸：0.02～0.03g，苯丙氨酸：0.05～0.07g，丝氨酸：0.03～0.05g，苏氨酸：0.08～0.1g，色氨酸：0.01～0.02g，酪氨酸：0.1～0.2g，缬氨酸：0.09～0.15g，氯化胆碱：0.003～0.005g，泛酸钙：0.003～0.005g，叶酸：0.003～0.005g，烟酰胺：0.003～0.005g，盐酸吡哆醇：0.003～0.005g，核黄素：0.0003～0.0005g，硫胺素盐酸盐：0.003～0.005g，肌醇：0.007～0.008g，5％葡萄糖溶液定容至1000g。
21.本发明还提供所述卵内营养补剂的制备方法，包括如下步骤：将黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯在避光的环境中与营养成分加热溶解于注射剂载体中，再经除菌后避光保存。
22.优选地，本发明还提供所述卵内营养补剂的制备方法，包括如下步骤：将黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯在避光的环境中以1～20％的浓度与复合营养物65℃加热混合溶解于无菌5％葡萄糖溶液，再经除菌后避光保存。
23.本发明还提供所述卵内营养补剂的保存方法，包括以下步骤：卵内营养补剂于
‑
20℃冷冻保存，保存时间不超过3个月或于4℃冷冻保存，保存时间不超过1周。
24.优选地，所述卵内营养补剂于玻璃容器中保存。
25.本发明还提供所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途。
26.所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途中，卵内营养补剂的使用方法，包括如下步骤：取孵育至16～20日龄种蛋或胚胎，确定胚胎小头端卵黄囊位置后对蛋壳表面消毒，在卵黄囊位置处钻孔，然后在卵内营养补剂为36.5～38.5℃时，从小头端开孔处注射卵内营养补剂进入胚胎卵黄囊，注射完毕后用电熔胶封口。
27.优选地，在卵内营养补剂为37.5℃时，从小头端开孔处注射卵内营养补剂进入胚胎卵黄囊。
28.进一步地，所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途中，钻孔直径为1mm。
29.进一步地，所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途中，注射深度1～1.5cm，注射剂量0.1～1ml。
30.进一步地，所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途中，整个注射使用过程不超过5min。
31.其中，所述禽类为雏鸡，所述胚胎为鸡胚。
32.有益效果：不同于常规禽类促生长营养剂，本发明药物为卵内营养补剂，针对禽类胚胎使用；不同于常规禽类促生长营养剂，本发明主要促生长成分为中药提取物黄芪多糖，毒副作用小，无残留；本发明除含有中药提取物外，还含有胚胎发育所需的必须氨基酸等营养物质；本发明卵内营养补剂为卵内注射剂，不含苯甲醇等防腐剂，或其他有毒有害成分；本发明在注射时，严格控制注射温度、注射时间、注射环境及注射剂量，在保证不破坏胚胎的前提下，卵内营养补剂注射进胚胎后能有效提高新生禽类出生重，且不干扰孵化率和胚胎器官正常发育；同时能改善新生禽类肠道菌群，促进新生禽类采食量，有效提高新生禽类早期生长发育速度。
附图说明
33.图1为实施例2的注射示意图，其中1为卵黄囊；2为鸡胚；3为注射孔；4为注射器；
34.图2为实施例4的各个处理组1日龄雏鸡初生重；
35.图3为实施例4的各个处理组1至17日龄雏鸡增重情况。
具体实施方式
36.本发明所要解决的技术问题是提供一种针对禽类胚胎使用，毒副作用小，无药物残留，促进新生禽类生长发育的卵内营养补剂及用途。
37.本发明为解决上述技术问题采用的技术方案是提供了新生禽类生长性能的卵内营养补剂，包括如下成分：黄芪多糖和营养成分。
38.其中，所述黄芪多糖为天然的或非天然的。
39.优选地，所述黄芪多糖为人工合成或微生物发酵制备的。
40.更优选地，所述黄芪多糖是从黄芪中提取出的由多种糖类组成的复合物。
41.进一步更优选地，所述复合物包括糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。
42.其中，所述黄芪多糖为黄芪多糖干粉，纯度大于90％。
43.其中，所述卵内营养补剂成分包括营养成分、黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯。
44.其中，所述黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯占卵内营养补剂的质量浓度为1～20％。
45.优选地，所述药学上可接受的盐和/或酯为黄芪甲苷和黄芪甲苷氯化钠中至少一
种。
46.其中，所述营养成分包括：甘氨酸、精氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、氯化胆碱、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、硫胺素盐酸盐、肌醇中至少一种。
47.优选地，所述营养成分包括：含有甘氨酸、精氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、氯化胆碱、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、硫胺素盐酸盐、肌醇的复合营养物。
48.其中，所述卵内营养补剂还包括：注射剂载体。
49.优选地，所述注射剂载体选择药学上可接受的用于胚胎或细胞注射的稀释液。
50.更优选地，所述稀释液为无菌葡萄糖溶液或无菌生理盐水注射稀释液。
51.其中，所述卵内营养补剂，包括质量浓度为1～20％的黄芪多糖和以质量浓度计的以下营养成分：甘氨酸：0.002～0.003％，精氨酸：0.007～0.009％，胱氨酸：0.005～0.007％，谷氨酰胺：0.05～0.06％，组氨酸：0.003～0.005％，异亮氨酸：0.01～0.02％，亮氨酸：0.01～0.02％，赖氨酸：0.015～0.025％，蛋氨酸：0.002～0.003％，苯丙氨酸：0.005～0.007％，丝氨酸：0.003～0.005％，苏氨酸：0.008～0.01％，色氨酸：0.001～0.002％，酪氨酸：0.01～0.02％，缬氨酸：0.009～0.015％，氯化胆碱：0.0003～0.0005％，泛酸钙：0.0003～0.0005％，叶酸：0.0003～0.0005％，烟酰胺：0.0003～0.0005％，盐酸吡哆醇：0.0003～0.0005％，核黄素：0.00003～0.00005％，硫胺素盐酸盐：0.0003～0.0005％，肌醇：0.0007～0.0008％。
52.动物和人对氨基酸和维生素的需求有一定的规律，营养复合物中必须添加对应的必需氨基酸，而其他的非必须氨基酸和维生素可以对应适当添加。赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氦酸、缬氨酸、苏氨酸为鸡发育的必须氨基酸，需要添加。它们之间的比例不宜差异过大(超过100倍差异)，不然会出现营养不平衡和中毒现象。
53.优选地，所述卵内营养补剂，包括：黄芪多糖：10～200g，甘氨酸：0.02～0.03g，精氨酸：0.07～0.09g，胱氨酸：0.05～0.07g，谷氨酰胺：0.5～0.6g，组氨酸：0.03～0.05g，异亮氨酸：0.1～0.2g，亮氨酸：0.1～0.2g，赖氨酸：0.15～0.25g，蛋氨酸：0.02～0.03g，苯丙氨酸：0.05～0.07g，丝氨酸：0.03～0.05g，苏氨酸：0.08～0.1g，色氨酸：0.01～0.02g，酪氨酸：0.1～0.2g，缬氨酸：0.09～0.15g，氯化胆碱：0.003～0.005g，泛酸钙：0.003～0.005g，叶酸：0.003～0.005g，烟酰胺：0.003～0.005g，盐酸吡哆醇：0.003～0.005g，核黄素：0.0003～0.0005g，硫胺素盐酸盐：0.003～0.005g，肌醇：0.007～0.008g，5％葡萄糖溶液定容至1000g。
54.本发明还提供所述卵内营养补剂的制备方法，包括如下步骤：将黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯在避光的环境中与营养成分加热溶解于注射剂载体中，再经除菌后避光保存。
55.优选地，本发明还提供所述卵内营养补剂的制备方法，包括如下步骤：将黄芪多糖和/或其药学上可接受的盐和/或酯在避光的环境中以1～20％的浓度与复合营养物65℃加热混合溶解于无菌5％葡萄糖溶液，再经除菌后避光保存。
56.本发明还提供所述卵内营养补剂的保存方法，包括以下步骤：卵内营养补剂于
‑
20℃冷冻保存，保存时间不超过3个月或于4℃冷冻保存，保存时间不超过1周。
57.优选地，所述卵内营养补剂于玻璃容器中保存。
58.本发明还提供所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途。
59.所述卵内营养补剂在提高新生禽类或胚胎生长性能上的用途中，卵内营养补剂的使用方法，包括如下步骤：
60.取孵育至16～20日龄种蛋或胚，照蛋确定胚胎小头端卵黄囊位置；75％酒精蛋壳表面消毒后，取1mm直径微型电钻在卵黄囊位置处钻孔；从冰箱取出本发明卵内营养补剂，注射前36.5～38.5℃温度水浴预热，取直径0.7ml的1ml注射器吸取卵内营养补剂，从小头端开孔出插入胚胎卵黄囊，注射深度1～1.5mm，注射剂量0.1～1ml；注射完毕后用电熔胶进行封口；每个种蛋注射操作时间不超过5min；为避免鸡蛋间的交叉感染，每枚鸡蛋均使用独立的注射器。
61.优选地，在卵内营养补剂为37.5℃时，从小头端开孔处注射卵内营养补剂进入胚胎卵黄囊。这是由于胚胎温度为37.5℃，胚胎对温度极其敏感，上下波动1度死亡率都会升高10％，所以卵内注射操作难度很大。由于注射剂是冷冻保存，因此在注射前需将注射剂放入水浴锅中预热，达到36.5～38.5℃，更优选的达到37.5℃才开始注射，没达到就继续预热。
62.家禽产业以肉鸡和蛋鸡为主，其中肉鸡生产规模比例更高，而其他禽类，如鸭、鹅，商业化产量较低，以鸡胚做实验针对性更强，应用前景更好。因此本发明禽类为雏鸡，胚胎为鸡胚。
63.实施例1(本发明卵内营养补剂的配制)：
64.浓度为1％黄芪多糖卵内营养补剂制备：在避光的环境中，将黄芪多糖：10g，甘氨酸：0.025g，精氨酸：0.08g，胱氨酸：0.06g，谷氨酰胺：0.55g，组氨酸：0.04g，异亮氨酸：0.15g，亮氨酸：0.15g，赖氨酸：0.2g，蛋氨酸：0.025g，苯丙氨酸：0.06g，丝氨酸：0.04g，苏氨酸：0.09g，色氨酸：0.015g，酪氨酸：0.15g，缬氨酸：0.1g，氯化胆碱：0.004g，泛酸钙：0.004g，叶酸：0.004g，烟酰胺：0.004g，盐酸吡哆醇：0.004g，核黄素：0.0004g，硫胺素盐酸盐：0.004g，肌醇：0.0075g，65℃加热混合，再5％无菌葡萄糖溶液定容至1000g。最后经除菌后避光保存。
65.所用黄芪多糖干粉购自solarbio公司的黄芪多糖干粉，纯度≥90％。
66.上述所用氨基酸和维生素干粉均购自merk公司sigma
‑
aldrich系列相应的单一氨基酸和单一维生素干粉，纯度均≥90％。
67.实施例2(本发明卵内营养补剂使用方法)：
68.取孵化至16日龄spf种蛋或鸡胚，照蛋确定鸡胚小头端卵黄囊位置；75％酒精蛋壳表面消毒后，取1mm直径微型电钻在卵黄囊位置处钻孔；从冰箱取出本发明注射剂，注射前37.5℃预热5min；取直径0.7ml的1ml注射器吸取注射剂，从小头端开孔出插入鸡胚卵黄囊，注射深度15mm，注射剂量0.5ml；注射完毕后用电熔胶进行封口；每个种蛋注射操作时间不超过5min；为避免鸡蛋间的交叉感染，每枚鸡蛋均使用独立的注射器。如图1所示为注射示意图。
69.实施例3(本发明卵内营养补剂对孵化性状的影响试验)：
70.随机选取600个孵化至16日龄的spf种蛋或鸡胚。
71.其中200个卵黄囊注射0.5ml本发明卵内营养补剂。
72.200个作为空注对照，卵黄囊注射0.5ml生理盐水。
73.剩余200个种蛋作无注射对照，不进行任何操作。
74.记录各个处理组孵化24h、48h、72h的胚胎存活数，存活率＝各个时间胚胎存活数/200*100％。记录各个处理组孵化至20日龄时啄壳雏鸡数目，啄壳率＝啄壳鸡胚数/200*100％。记录各个处理组孵化至22日龄时出壳雏鸡数目、出壳健康雏鸡数目，孵化率＝出壳雏鸡数/200*100％，健雏率＝出壳健康雏鸡数目/出壳雏鸡数目*100％。
75.表1实施例3不同处理组间孵化性状的比较
[0076][0077]
实施例4(本发明注射剂对雏鸡生长性状的影响试验)：
[0078]
随机选取450个孵化至16日龄的spf种蛋或鸡胚。
[0079]
其中150个卵黄囊注射0.5ml本发明注射剂。
[0080]
150个作为空注对照卵黄囊注射0.5ml生理盐水.
[0081]
剩余150个种蛋作无注射对照不进行任何操作。
[0082]
种蛋孵化后，各组随机选取1日龄100只雏鸡，继续饲养至17日龄。在1日龄、5日龄、9日龄、13日龄、17日龄时，记录各种雏鸡体重。统计分析方法为one
‑
way anova方差分析，组间两两比较采用tukey's hsd多重比较检验，显著水平p<0.05，极显著水平p<0.01。
[0083]
图2是各组雏鸡初生体重的对比图。很明显黄芪多糖注射后的雏鸡初生重更高，说明黄芪多糖营养剂有促进生长的作用。一般来说初生重越大的个体，在幼年和成年时期发育速度越快。
[0084]
图3是各组雏鸡在出生后17天内的增重情况对比图。同图2相似，黄芪多糖注射后的雏鸡的增重速度更快，进一步说明黄芪多糖营养剂有促进生长的作用。