一种猫豆保存方法及其在左旋多巴生产中的应用

1.本发明属于农产品保存方法技术领域，具体涉及一种猫豆保存方法及其在左旋多巴生产中的应用。


背景技术：

2.猫豆（mucuna pruriens (linn.) dc. var. utilis (wall. ex wight) bak. ex burck）的成熟种子，别名：黎豆、龙爪黎豆、虎爪豆、狗爪豆，英文名：velvetbean。其原产地为南亚，在我国西南、华南海拔800～1400m石山地也有分布，广西是最主要的产区。猫豆，豆科黎豆属一年生草质藤本植物，是一种耐旱、耐瘦、适应性很强的农作物，根部有很多根瘤菌，可以提高土地肥力，根系比较发达，叶蔓攀高，覆盖面广，有利于保持水土。猫豆全身都是宝，豆壳、豆叶和豆籽都含有丰富的粗脂肪和粗蛋白，是上乘的猪饲料，豆籽是生产左旋多巴药的原料。
3.研究表明，猫豆（成熟种子）主要含左旋多巴、藜豆素等非蛋白氨基酸及β-咔啉等吲哚类、喹啉类生物碱，以及油酸、亚油酸、亚麻酸、棕榈酸等脂肪酸类化合物。猫豆中左旋多巴 (l-dopa，全称3，4-二轻苯丙氨酸)含量高达5%
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9 .94％，是生产左旋多巴药的重要原料之一。左旋多巴 (3，4-dihydrox ylphenylalanine，l-dopa)属于苯丙氨酸类化合物，为抗震颤麻痹药，是目前治疗原发性震颤麻痹症及非药原性震颤麻痹综合症(帕金森氏病)最为常用、有效的药物。传统上，猫豆收割后要晒干保存，但按照传统晒干保存的方法保存的猫豆保存效果差，容易流失所含的左旋多巴成分，在保存一年后，因左旋多巴含量太低而失去提取左旋多巴的价值，而目前鲜有猫豆保存方法方面的研究报道。因此，研究出一种猫豆的保存方法，减少猫豆在保存过程中左旋多巴成分的流失，有效保证猫豆的质量，对左旋多巴的生产具有重要的意义。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供的一种猫豆保存方法及其在左旋多巴生产中的应用。该猫豆保存方法简单、方便，采用该保存方法可减少猫豆中左旋多巴的降解和氧化，减少猫豆在保存过程中左旋多巴成分的流失，有效保证猫豆的质量，延长猫豆的保存时间。采用该保存方法保存的猫豆，猫豆皮经预先浸润，营造出提取溶剂的进出通道，在左旋多巴的生产中，可大大提高左旋多巴的提取效率。
5.为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：一种猫豆保存方法，具体为：采收猫豆成熟果实，打下种子，得到猫豆，放入容器中，然后加入特制溶液，将猫豆浸没，浸泡保存即可；所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸1～10%，乙二胺四乙酸（edta）0.5～5%，焦亚硫酸钠0.1～1%，余量为水。
6.上述的猫豆保存方法中，无论是新收割未晒干的猫豆还是采收后晒干的干猫豆，都可用所述的猫豆保存方法进行保存。
7.所述的猫豆保存方法在左旋多巴生产中的应用：用所述保存方法保存的猫豆，无需进行破碎处理，将整颗猫豆投料，对完整颗粒的猫豆，用提取溶剂直接进行提取左旋多巴；用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的提取溶剂。
8.优选的，所述的猫豆保存方法中，所用的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水。
9.在本发明猫豆保存特制溶液的配方中：甲酸可起到抗氧化、调节溶液ph为酸性的作用，乙二胺四乙酸（edta）具有助溶猫豆皮中的碳酸钙的作用，焦亚硫酸钠可起到抗氧化的作用。
10.本发明的有益效果为：1、传统上，猫豆收割后要晒干保存，而采用本发明的猫豆保存方法，无需晒干猫豆，可直接放入溶液中浸泡，湿法保存即可。本发明的猫豆保存方法，无论是新收割未晒干的猫豆还是采收后晒干的干猫豆，都适用。
11.2、采用本发明的猫豆保存方法中的特制溶液对猫豆进行保存，可减少猫豆中左旋多巴的降解和氧化，大大减少猫豆在保存过程中左旋多巴成分的流失，有效保证猫豆的质量，延长猫豆的保存时间。传统方法晒干保存的猫豆，保存一年后因左旋多巴含量太低而失去提取左旋多巴价值，而采用本发明方法对猫豆进行保存，猫豆可保存3年，仍具有提取左旋多巴的价值。3、本发明中用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的溶液。采用所述的猫豆保存方法保存的猫豆用于左旋多巴的生产中具有以下优点：（1）本发明中用于保存猫豆的特制溶液，可直接用作提取左旋多巴的提取溶剂，第一次左旋多巴提取已在保存过程中自动完成；（2）保存过程中，溶液对猫豆的皮壳和豆肉泡软，泡出化学物质交换通道，可大大提高左旋多巴的提取效率。
附图说明
12.图1 干猫豆用本发明特制溶液浸泡2小时后取皮显微观察（
×
200）；图2 新采摘未晒干猫豆用本发明特制溶液浸泡2小时后取皮显微观察（
×
200）；图3干猫豆用本发明特制溶液浸泡60天后取皮显微观察（
×
200）；图4 新采摘未晒干猫豆用本发明特制溶液浸泡60天后取皮显微观察（
×
200）。
具体实施方式
13.实施例1一种猫豆保存方法，具体为：采收猫豆成熟果实，打下种子，得到猫豆，无需晒干，直接放入容器中，然后加入特制溶液，所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸1%，乙二胺四乙酸（edta）3%，焦亚硫酸钠1%，余量为水；将猫豆浸没，浸泡保存即可。
14.实施例2一种猫豆保存方法，具体为：采收猫豆成熟果实，打下种子，晒干后放入容器中，然后加入特制溶液，所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸4%，乙二胺四乙酸（edta）0.5%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水；将猫豆浸没，浸泡保存即可。
15.实施例3一种猫豆保存方法，具体为：将新收割的猫豆成熟果实，打下种子，得到猫豆，无需晒干，放入容器中，然后加入特制溶液，所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸10%，乙二胺四乙酸（edta）5%，焦亚硫酸钠0.1%，余量为水；将猫豆浸没，浸泡保存即可。用所述保存方法保存的猫豆用于左旋多巴的生产中，无需进行破碎处理，将整颗猫豆投料，对完整颗粒的猫豆，用提取溶剂直接进行提取左旋多巴；用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的提取溶剂。
16.实施例4一种猫豆保存方法，具体为：采收猫豆成熟果实，打下种子，晒干后得到干猫豆，放入容器中，然后加入特制溶液，将猫豆浸没，浸泡保存即可；所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸7%，乙二胺四乙酸（edta）4%，焦亚硫酸钠0.3%，余量为水。用所述保存方法保存的猫豆用于左旋多巴的生产中，无需进行破碎处理，将整颗猫豆投料，对完整颗粒的猫豆，用提取溶剂直接进行提取左旋多巴；用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的提取溶剂。
17.实施例5一种猫豆保存方法，具体为：将新收割的猫豆成熟果实，打下种子，得到猫豆，无需晒干，直接放入容器中，然后加入特制溶液，将猫豆浸没，浸泡保存即可；所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水。用所述保存方法保存的猫豆用于左旋多巴的生产中，无需进行破碎处理，将整颗猫豆投料，对完整颗粒的猫豆，用提取溶剂直接进行提取左旋多巴；用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的提取溶剂。实施例6一种猫豆保存方法，具体为：采收猫豆成熟果实，打下种子，不用晒干猫豆，直接放入容器中，然后加入特制溶液，将猫豆浸没，浸泡保存即可；所述的特制溶液由以下重量百分含量的各原料组分配制而成：甲酸10%，乙二胺四乙酸（edta）5%，焦亚硫酸钠1%，余量为水。用所述保存方法保存的猫豆用于左旋多巴的生产中，无需进行破碎处理，将整颗猫豆投料，对完整颗粒的猫豆，用提取溶剂直接进行提取左旋多巴；用于保存猫豆的特制溶液，同时也是提取左旋多巴的提取溶剂。
18.实施例7 效果实验一、本发明猫豆保存方法在左旋多巴生产中的作用1、新采摘未晒干猫豆和已晒干猫豆，分别用本发明特制溶液（甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水）浸泡2小时（也就是一般中药提取时间），取皮，切片，苏木素-伊红染色，在200倍显微镜下观察，猫豆皮完整，未见裂隙，皮内组织未见有破坏，见附图1和附图2。
19.2、新采摘未晒干猫豆和已晒干猫豆，分别用本发明特制溶液（甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水）浸泡60天后，取皮，切片，苏木素-伊红染色，在200倍显微镜下观察，猫豆皮的表皮有裂隙，皮内组织疏松，提取溶剂可以通过，见附图3和附图4。
20.可见，采用本发明用于保存猫豆的特制溶液对猫豆进行保存，保存过程中，溶液将
猫豆的皮壳和豆肉泡软，泡出化学物质交换通道，有利于提高左旋多巴的提取效率。
21.二、传统保存方法与本发明保存方法，左旋多巴含量比较猫豆中的左旋多巴含量低于2.5%时，提取左旋多巴的效率和经济效益会显著下降，企业甚至会出现亏损。如果是因为长时间存放造成猫豆中左旋多巴下降，造成猫豆中的左旋多巴含量低于2.5%的，提取得到的左旋多巴中杂质会显著增多，产品需多精制1-2次才能合格。基于以上原因，当猫豆中的左旋多巴含量低于2.5%时，企业一般会弃而不用，停止生产。
22.猫豆样品a、样品b，各2千克，取自同一批刚晒干的猫豆原料，同时放在阴凉、自然通风、自然采光的原料仓库，放在同一个桌面上。处理方法：样品a模拟仓库存放方法，无包装，直接堆放于托盘中，托盘置于桌面上，每隔2个月取样测定左旋多巴含量。样品b放在棕色瓶子中，少量多次加入本发明特制溶液，每次加入时使刚好没过猫豆面（特制溶液的总量为3235ml，成分为：甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水），浸泡，使之正好慢慢吸干。静置浸泡，过程中不搅动。前一年每隔2个月取样，后二年每隔4个月取样，测定左旋多巴含量。
23.左旋多巴含量测定方法：（1）样品a：取10颗样品a猫豆，置药盅中捣碎，取约3克细末，精密称重，置研砵中，用浓度为 1 mol/l 盐酸水溶液研磨提取3次，每次20分钟，第一次加50ml，第二次加30ml，第三次加20ml。合并提取液，定容至100ml。量取5 ml置容量瓶中，用甲醇定容至100ml，定容过程中不断摇匀。精密过滤，hplc法测定左旋多巴含量。
24.（2）样品b：取10颗样品b猫豆，置药盅中捣成药泥，取约10克药泥，精密称重，置研砵中，用浓度为 1 mol/l 盐酸水溶液研磨提取3次，每次20分钟，第一次加40ml，第二次加30ml，第三次加20ml。合并提取液，定容至100ml。量取5 ml置容量瓶中，用甲醇定容至100ml，定容过程中不断摇匀。精密过滤，hplc法测定左旋多巴含量，然后再折算成干猫豆中的含量。
25.检测结果见下表1。
26.从表1中可见，采用传统晒干后仓库存放的方法对猫豆进行保存，在存放14个月后，猫豆中的左旋多巴的含量已降到2.5%以下，因左旋多巴含量太低已失去了提取左旋多巴的价值。而采用本发明方法对猫豆进行保存，在保存了3年后该猫豆仍具有提取左旋多巴的价值。
27.三、本发明保存猫豆的特制溶液也同时是提取左旋多巴的提取液取1000g猫豆放在棕色瓶中（瓶子底部有旋塞，可以放出瓶子中的溶液），加入8000ml本发明特制溶液（甲酸6%，乙二胺四乙酸（edta）2%，焦亚硫酸钠0.5%，余量为水），浸泡。每隔4个月取样，测定浸泡液中左旋多巴含量(mg/ml)。每次取样前，将棕色瓶中的溶液
全部放出，流入另一个大瓶中，混匀，取样，然后再将浸泡液倒回装有猫豆的瓶子中，继续浸泡，如此往复。
28.浸泡液中左旋多巴含量随时间的变化结果见表2。从表2可见，本发明中用于保存猫豆的特制溶液也同时是提取左旋多巴的提取液，采用所述的特制溶液保存的猫豆，用于提取左旋多巴，保存猫豆所用的特制溶液可直接用作提取左旋多巴的提取溶剂。而第一次左旋多巴提取已在保存过程中自动完成，因而有利于提高左旋多巴的提取效率。
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