一种具有抗氧化活性的黑色素铁及制备方法

1.本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种具有抗氧化活性的黑色素铁及制备方法。


背景技术：

2.铁是人体必需的一种微量元素，参与了必要的生化过程，如氧气运输、电子转移反应、基因调控以及细胞生长和分化。研究表明，缺铁不仅会导致贫血，还会增加氧化应激水平，影响机体免疫和炎症防御，进而增加机体患心血管疾病、传染病、癌症、糖尿病等疾病的风险。缺铁性贫血(ida)是营养缺乏发病率最高的疾病之一，缺铁严重时会导致细胞内酶功能受损产生消化道和神经系统问题，严重影响人类健康。口服铁补充剂在治疗和预防人体缺铁方面是必需的。硫酸亚铁已被广泛用作治疗缺铁性贫血的补铁剂，虽然在一定程度上有助于缓解缺铁和贫血的症状，但也会引起如上腹部疼痛，腹泻和便秘等不良反应，另一方面，铁的摄入量高于所需的量时可能对生物有毒和有害。
3.目前较新型补铁剂大多采用氨基酸或肽螯合铁制备，这些补铁剂仍然存在一些弊端，如有些性质较不稳定，生产或储存都很困难，易产生异味；对胃、肠等消化道刺激性大、可能导致胃肠道不良反应显著增加，因此研究新型补铁剂来完善我国补铁剂市场的种类迫在眉睫，这对改善不适人群的铁营养状况具有十分重要的意义。同时，现有补铁铁复合物功能相对单一，主要用于补铁作用，而同时具有配合的其他功效相对较少，用途单一。
4.黑芝麻黑色素(bsm)具有抗氧化、抗肿瘤和降血糖等多种生物活性，且其能为金属离子提供多个潜在结合位点，与铁离子反应后形成黑色素铁(bm
‑
fe)，相较于硫酸亚铁可减少游离铁离子对胃肠道刺激等不良反应和更高的生物利用度。同时待黑色素铁中的铁释放后，黑芝麻黑色素可继续发挥其他药效。因此，黑色素铁是既可以作为铁补充剂治疗缺铁性贫血，也可以抗氧化，提高机体免疫力的理想药物。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于通过黑芝麻黑色素与无机铁盐作用制备出一种具有抗氧化活性的黑色素铁，利于人体吸收且具有较少的不良反应，在治疗缺铁性贫血的同时发挥抗氧化作用，达到双重保健功能。
6.为达成上述目的，本发明的解决方案为：一种具有抗氧化活性的黑色素铁的制备方法，采用三氯化铁法制备黑色素铁，具体步骤如下：
7.将黑芝麻黑色素配置成一定浓度的bsm溶液，按比例加入fecl3·
6h2o溶液混合，调节ph，响应面法优化螯合条件，于黑暗、常压环境下在恒温、恒速水浴搅拌条件下反应，螯合反应完成后，离心5min，取沉淀物水洗两次后，真空冷冻干燥得到黑色素铁。
8.优选地，所述制备方法采用响应面法优化黑色素铁的螯合条件，以铁螯合率为考察指标，以bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液的体积比、反应时间、反应温度、ph、转速为考察因素，先后设计单因素实验和响应面实验，分析最佳的制备条件。
9.优选地，所述制备方法按bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液的体积比为4:4、5:4、6:4、7:4、8:4混合。
10.优选地，所述反应时间为1
‑
6h，所述反应温度为4
‑
60℃，所述ph为2
‑
8，所述转速为0
‑
400rpm。
11.优选地，所述bsm溶液的浓度为0.4mg/ml。
12.优选地，所述fecl3·
6h2o溶液的浓度为0.6mg/ml。
13.优选地，所述混合液在离心机转速为8000rpm的条件下离心5min。
14.本发明针对现有技术的补铁螯合物功能单一，利用黑色素的特性通过与铁盐溶液反应，制备了黑色素铁，可减少游离铁离子对胃肠道刺激等不良反应和更高的生物利用度，提高了补铁剂的抗氧化性和铁含量。
15.因此，本发明还提供一种具有抗氧化活性的黑色素铁由上述制备方法所制得。
16.本发明的黑色素铁具有良好的抗氧化性能，且铁含量高，能够显著提高血红蛋白浓度及血清铁蛋白、血清铁水平，具有一定的抗贫血活性。
17.因此，本发明还提供了所述黑色素铁在制备补铁剂产品中的应用。
18.采用上述方案后，本发明的增益效果在于：
19.1、本发明简单，反应条件温和，容易实施；且黑色素来源广泛，成本低，具有生物相容性、抗氧化性和金属螯合性等优良的理化性能，是理想的配体。
20.2、本发明采用天然黑色素介导的绿色合成方法，与铁离子反应后制得的黑色素铁功能性显著提高，其抗氧化性好，可有效提供机体免疫力，且铁含量高，有利于人体吸收，能促进人体铁的补充，达到双重保健功能。
21.3、本发明方法制备的黑色素铁，既较好的延续了黑色素的优良特性，又有较好的补铁效果，生物利用度高，副作用小，有望成为一种新型的营养性补铁剂，有着广泛的开发前景。
附图说明
22.图1是本发明铁含量标准曲线图；
23.图2是本发明体积比对铁螯合率的影响结果图；
24.图3是本发明反应时间对铁螯合率的影响结果图；
25.图4是本发明反应温度对铁螯合率的影响结果图；
26.图5是本发明ph对铁螯合率的影响结果图；
27.图6是本发明搅拌速度对铁螯合率的影响结果图；
28.图7是本发明bsm和bm
‑
fe的ftir图；
29.图8是本发明bsm和bm
‑
fe的sem图；
30.图9是本发明bsm和bm
‑
fe的粒径图；
31.图10是本发明bsm、bm
‑
fe和vc对abts自由基清除率条形图；
32.图11是本发明bsm、bm
‑
fe和vc对dpph自由基清除率条形图；
33.图12是本发明bm
‑
fe在胃肠液中的铁溶出图；
具体实施方式
34.为更好地理解本发明，下面结合附图、实施例和实验例对本发明的技术方案和技术效果做进一步说明。应当注意的是，下述实施例仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
35.本发明提供一种具有抗氧化活性的黑色素铁的制备方法，采用三氯化铁法制备黑色素铁，具体步骤如下：
36.将黑芝麻黑色素配置成浓度为0.4mg/ml的bsm溶液，与浓度为0.6mg/ml的fecl3·
6h2o溶液按一定比例混合，调节ph，响应面法优化螯合条件，于黑暗、常压环境下在恒温、恒速水浴搅拌条件下反应一段时间，螯合反应完成后，在离心机转速为8000rpm的条件下离心5min，取沉淀物水洗两次后，真空冷冻干燥得到黑色素铁。在本实施例中，设计响应面实验，考察bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液的体积比、反应时间、反应温度、ph、转速对螯合反应的影响，优化出黑色素铁的最佳工艺条件为：bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液体积比为4：4、ph为3，于黑暗、常压环境下在反应温度为50℃、转速为300rpm水浴搅拌条件下反应4h时，铁螯合率达到最大值。
37.螯合率的测定：采用邻二氮菲法
38.标准曲线的绘制：用硫酸高铁胺[fenh4(so4)2·
12h2o]精密配制20ug/ml的铁离子标准溶液，稀释10倍后得铁标准供试液，精密量取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0ml的铁标准供试液分别置50ml容量瓶中，加入10％的盐酸羟胺1.0ml、醋酸
‑
醋酸钠缓冲液5.0ml及0.1％的邻菲罗啉3.0ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以不加铁标准液为空白对照，用分光光度汁在510nm波长处测吸收度，绘制标准曲线，图1是本发明铁含量标准曲线图，其回归方程式如下：
[0039]
y＝0.0073x+0.0024r2＝0.9998
[0040]
铁含量的测定：精密量取样品供试液5.0ml至50ml容量瓶中，步骤标准曲线的绘制，代入回归方程计算其含量。
[0041]
铁含量/(mg/kg)＝c/[m*(v1/v0)]
[0042]
式中：c
‑
标准曲线上查得螯合物溶液相应的铁含量，μg；m
‑
螯合物质量，g；v1‑
测定时所取螯合物溶液的体积，ml；v0‑
螯合物处理后定容体积，ml。
[0043]
铁螯合率的测定
[0044]
螯合率/％＝[(c0‑
ce)/c0]*100％
[0045]
式中：c0—溶液中fe
3+
离子初始浓度，mg/l；ce—反应后溶液中离子的平衡浓度，mg/l
[0046]
实施例1
[0047]
采用单因素实验考察体积比、反应时间、反应温度、ph值和转速大小这5个因素对铁螯合率的影响，具体设计见表1。
[0048]
表1单因素实验设计表
[0049][0050]
a研究bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液体积比对铁螯合率的影响
[0051]
在反应时间5h、反应温度30℃、ph值为5、转速200rpm的条件下，将bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液按体积比为4:4、5:4、6:4、7:4、8:4混合，制备五组黑色素铁，以铁螯合率为考察指标，考察不同体积比对bm
‑
fe铁螯合率的影响，图2是本发明体积比对铁螯合率的影响结果图。
[0052]
由图2可知，随着bsm溶液比例增大，铁螯合率总体呈先增大后减小的趋势。bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液体积比为4:4
‑
6:4时，铁螯合率随bsm增加而增大，但增加不显著；比例为7:4
‑
8:4时，铁螯合率随bsm增加显著下降，这是由于体积比太小，bsm不足，不能形成稳定的结构，螯合物不稳定；而体积比太大时，bsm含量过高，bsm对fe
3+
的螯合已经达到饱和，使得bsm利用率下降，铁螯合率降低，并且会造成bsm的浪费。而体积比为6:4时，铁螯合率达到最大值，且与其他条件相比有显著差异，故选择最佳体积比为6:4
[0053]
b研究反应时间对铁螯合率的影响
[0054]
将bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液按体积比6:4混合，在ph值为5、反应温度30℃、转速200rpm的条件下，控制反应时间为1、2、3、4、5、6h，制备六组黑色素铁，以铁螯合率为考察指标，考察不同反应时间对bm
‑
fe铁螯合率的影响。
[0055]
由图3可得，总体上，1
‑
6h铁螯合率一直增加，在1
‑
2h时显著增加，随后增加不显著，变化范围并不大。这是因为螯合反应是一个较快速的反应，时间若过短，螯合反应不彻底，螯合率较低，而时间过长，bsm对fe
3+
的螯合已经达到饱和，所以选择反应时间为5h最好。
[0056]
c研究反应温度对铁螯合率的影响
[0057]
将bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液按体积比6:4混合，在ph值为5、转速200rpm、反应时间5h的条件下，控制反应温度为4、30、40、50、60℃，制备五组黑色素铁，以铁螯合率为考察指标，考察不同反应温度对bm
‑
fe铁螯合率的影响。
[0058]
从图4可知，随温度升高铁螯合率先增大后减小。4
‑
30℃时，铁螯合率随温度升高显著增大；超过40℃后，随着温度继续升高，铁螯合率显著下降。这是由于温度过低，反应不能完全进行；温度过高，虽然加快了反应速率，但很大程度地提高了能量消耗，不利于复合物的生成，升高温度可能会导致bsm的氧化、复合物分解或发生其他的反应，从而使铁螯合率下降。因此，螯合反应最佳温度为30℃。
[0059]
d研究ph对铁螯合率的影响
[0060]
将bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液按体积比6:4混合，在反应温度30℃、转速200rpm、反应时间5h的条件下，调节ph值为2、3、4、5、6、7、8，制备七组黑色素铁，以铁螯合率为考察指
标，考察不同ph对bm
‑
fe铁螯合率的影响。
[0061]
图5表明，ph为2时，铁螯合率只有5％，可能是由于溶液中大量水合氢离子会与金属离子竞争反应活性位点，还可能是因为溶液呈强酸性，bsm分子中的酚羟基、羧基、胺基等因质子化而带正电荷，与fe
3+
之间产生较强的静电斥力，使fe
3+
很难靠近bsm，导致fe
3+
螯合率几乎为零；随着ph的增大，螯合率提高，是因为溶液的酸性减弱，吸附剂中与水合氢离子络合的活性部位逐渐暴露出来有利于fe
3+
的螯合；ph大于4后又整体呈下降趋势，可能是因为超过了铁离子微沉淀上限，金属离子会形成氧化物沉淀；ph大于8后，溶液中oh
‑
与bsm竞争fe
3+
，使溶液中游离的fe
3+
浓度变小，导致螯合率降低，因此，不再继续探究。因此酸度对bsm螯合fe
3+
有较大影响，其最佳ph为3。
[0062]
e研究转速对铁螯合率的影响
[0063]
将bsm溶液与fecl3·
6h2o溶液按体积比6:4混合，在ph值为5、反应温度30℃、反应时间5h的条件下，控制转速为0、100、200、300、400rpm，制备五组黑色素铁，以铁螯合率为考察指标，考察不同转速对bm
‑
fe铁螯合率的影响。
[0064]
由图6可知，是否搅拌对铁螯合率有较显著的影响，磁力搅拌后，铁螯合率明显增加,但在测试范围内，转速为300rpm时，螯合率最大。故选择最佳转速为300rpm。
[0065]
实施例2
[0066]
在单因素实验的基础上，运用响应面法优化制备工艺。以bm
‑
fe的螯合率(％)为响应值，利用design expert 10统计软件，进行box
‑
behnken设计及响应面分析实验。选择体积比x1、反应时间x2(h)、反应温度x3(℃)、ph x4四个因素，分别设计三个水平进行实验，具体见表2。
[0067]
表2响应面实验设计表
[0068][0069]
根据响应面实验结果，利用design expert 10软件对黑芝麻黑色素
‑
纳米铁螯合率y与相对应的体积比x1、反应时间x2(h)、反应温度x3(℃)和ph x4之间的关系进行多元二次回归拟合，得到了一个多项回归方程的模型，即：
[0070]
y＝77.56
‑
7.42x1‑
1.43x2+2.42x3‑
3.86x4‑
1.57x1x2‑
2.89x1x3‑
3.64x1x4‑
0.28x2x3+1.81x2x4‑
1.54x3x4+1.42x
12
+2.93x
22
+1.48x
32
‑
1.53x
42
[0071]
各因素的方差分析结果由表5可以看出，以bm
‑
fe的螯合率为响应值时，该方程模型p值＜0.05，表明该二次回归方程模型显著，具有统计学意义；同时失拟项p值＞0.05，表明该方程的失拟项不显著说明方程对实验的拟合情况好，无失拟因素存在，实验误差小，该模型建立成功。根据p值可知，影响bm
‑
fe螯合率的因素主次顺序为：体积比(x1)＞ph(x4)＞反应温度(x3)＞反应时间(x2)；交互项x1x2、x1x3、x1x4、x2x3、x2x4、x3x4的p值均大于0.05，表明交互项影响不显著，表明四个因素无交互作用。通过软件分析，得出bm
‑
fe的最佳理论制备工艺参数为：体积比为3.988：4，反应时间为4h，反应温度为50℃，ph为3；考虑到实际操作的方便和可行性，将提取工艺条件调整为：体积比为4：4，反应时间为4h，反应温度为50℃，ph
为3。
[0072]
表5回归方程方差分析结果
[0073][0074][0075]
实验例1
[0076]
本实验例对实施例1
‑
2所得最佳条件下制备的bm
‑
fe及bsm进行红外光谱实验，实验前将bsm和bm
‑
fe分别用溴化钾(kbr)在玛瑙钵体中研磨，然后分别制备圆片，通过傅立叶红外光谱仪(ft
‑
ir)测定获得红外光谱图，并进行比较。
[0077]
结果如图7所示，bsm的吸收峰主要位于3365cm
‑1、2930cm
‑1、1625cm
‑1、1425cm
‑1几组吸收峰上；3365cm
‑1处的吸收峰很宽，而且较强，说明bsm含有羟基(
‑
oh)和氨基(
‑
nh2)，同时该区域也属于羰基(
‑
c＝o
‑
)的伸缩振动，2930cm
‑1处小而尖的吸收峰是烷烃结构中c
‑
h的伸缩振动引起的，1625cm
‑1、1425cm
‑1处很强的吸收峰是由芳环振动引起的，为芳环c＝c的振动伸缩吸收峰；1625cm
‑1处的强吸收峰说明分子中存在羰基，与3400cm
‑1处的强吸收峰共同指示了
‑
cooh结构的存在，810
‑
525cm
‑1范围内为芳环取代区，吸收峰较弱表明芳环被取代，芳氢含量较少，形成了共轭体系。与bsm相比，bm
‑
fe中3400
‑
3000cm
‑1、1500cm
‑1左右以及指纹区的红外吸收峰证实了bsm的存在，部分吸收峰减弱，表明羧基、羟基、氨基参与了金属离子的螯合。在3365cm
‑1波长处吸收峰出现减弱，说明
‑
oh或氨基强度下降，氨基的n原子可能
发生了配位反应甚至消失，降低了
‑
n
‑
h基团的伸缩振动频率，这表明铁离子与bsm的化学结合，几个特征峰的变化能够反映出bsm和六水三氯化铁反应后对bsm的整体结构没有太大的影响，但从一些特征吸收峰的峰值变化可以看出fe
3+
主要与bsm中的氨基、羧基和酚羟基发生了络合作用。
[0078]
实验例2
[0079]
本实验例对实施例1
‑
2所得最佳条件下制备的bm
‑
fe及bsm的表面进行观察，实验前将bsm和bm
‑
fe利用双面导电胶置于样品台上，喷金处理，随后于扫描电镜下观察形貌。图8是bsm和bm
‑
fe的sem图，其中，a、c为bsm，b、d为bm
‑
fe。
[0080]
从图8可以看出二者微观形态存在显著差异，bsm呈立方体块状结构，结构较明显，表面无附着物，且形貌较规则。bm
‑
fe较聚集，呈片状，形状大多不规则，表面较粗糙，上述结果可能是由于bsm与铁反应后可能改变了本身的一些基团，内部结构出现变动，从而导致bm
‑
fe表面形貌发生了改变。
[0081]
实验例3
[0082]
本实验例对实施例1
‑
2所得最佳条件下制备的bm
‑
fe及bsm进行动态光散射粒度分析，将制备得到的bsm及bm
‑
fe稀释同样倍数，利用动态光散射仪测定粒径。图9是本发明bsm和bm
‑
fe的粒径图，其中，a为bsm，b为bm
‑
fe。
[0083]
如图9所示，二者平均粒径数据分别为844.9nm、294.3nm。bm
‑
fe的颗粒尺寸明显小于bsm，可能是因为铁离子与bsm上的羧基和羟基结合后发生结构折叠，形成铁离子的纳米载体，导致bm
‑
fe的粒径减小。
[0084]
实验例4
[0085]
本实验例对实施例1
‑
2所得最佳条件下制备的bm
‑
fe进行抗氧化性能测试。
[0086]
(1)abts自由基清除试验
[0087]
将7mm的abts与2.45mm的过硫酸钾溶液混合于暗处反应12
‑
16h制备abts离子液，使用前用乙醇调整abts离子液在734nm处的吸光度值为0.7
±
0.02。反应中各试剂按照加样顺序表进行实验，详见表3，其中bsm及bm
‑
fe液分别依次对半稀释为5个浓度(1.25、2.5、5、10、20μg/ml)，于室温避光旋涡振荡反应6min，在734nm处测定吸光度值。以同浓度的vc做阳性对照，abts自由基的清除能力按如下公式计算：
[0088][0089]
式中：a1为样品与abts自由基反应后的吸光度值；a2为对照组无水乙醇与abts自由基反应后的吸光度值；a0为abts自由基溶液起始吸光度值。
[0090]
表3加样顺序表
[0091]
[0092]
由图10可知，bsm、bm
‑
fe、vc对abts的抑制率均显示出了一定的浓度依赖性。bsm、bm
‑
fe的清除效率显著高于vc组。在极低浓度就表现出极好效果，其抗氧化效果极好,bsm分子具有氧化性(邻醌)和还原性(邻对苯二酚)基团，可以通过与自由基相互作用，在电子转移过程中失去电子或俘获电子以清除活性氧或活性氮自由基。另外这些不同抗氧化性能的官能团之间可能相互还原产生协同作用，使bsm的抗氧化性更强。且bm
‑
fe与bsm的清除作用相当,说明bsm与三氯化铁反应后较好的保留了其本身的抗氧化活性。
[0093]
(2)dpph自由基清除试验
[0094]
精确称取25.6mg dpph自由基，用无水乙醇定容于100ml容量瓶中摇匀并避光保存待用。反应中各试剂按照加样顺序表进行实验，其中bsm及bm
‑
fe溶液分别依次对半稀释为5个浓度(12.5、25、50、100、200μg/ml)，以同浓度的vc溶液作为阳性对照,于室温下遮光反应30min，在517nm波长处测定吸光度值a。dpph自由基的清除率按如下公式计算：
[0095][0096]
表4加样顺序表
[0097][0098][0099]
由图11可知，bsm、bm
‑
fe对dpph的抑制率均显示出了一定的浓度依赖性。但bsm、bm
‑
fe的清除效率显著低于vc组。浓度为200μg/ml时，其清除率可达40％左右，其抗氧化效果较好。bsm及其衍生物可能直接捕获或与dpph相结合从而清除dpph自由基.bsm的几种衍生物清除率较低于bsm，这可能是因为氨基酸和bsm作用时，对二苯酚/苯醌结构转换而失去电子，降低了其清除自由基的活性。且bm
‑
fe清除效率与bsm相当。
[0100]
一般来说，由于缺铁，体内在调节多种细胞过程中发挥重要作用的含铁酶的活性会降低，这些酶活性的降低严重影响机体的正常代谢，导致氧化水平的升高，增加氧化应激，从而导致心血管疾病、传染病、癌症、糖尿病和神经退行性等疾病的发生。综合分析bsm及bm
‑
fe对abts、dpph自由基的清除作用，可以发现bm
‑
fe较好的延续了bsm本身的强抗氧化作用，bm
‑
fe作为一种潜在的新型补铁剂，可能对于贫血导致的相关疾病具有积极的治疗作用。
[0101]
实验例5
[0102]
本实验例对实施例1
‑
2所得最佳条件下制备的bm
‑
fe进行体外铁溶出实验。
[0103]
(1)模拟胃液
[0104]
准确称取20mg bm
‑
fe，使其溶于100ml盐酸溶液(0.1mol/l)中，37℃、100rpm条件下磁力搅拌反应2h，每隔0.5h取一次样，一次取3ml，同时加入相同体积的盐酸溶液。反应完毕后，样液经0.45μm微孔滤膜过滤，过滤后分别取各个滤液2ml于50ml容量瓶中，之后操作步骤如铁含量测定，完成后510nm处测量吸光度值。
[0105]
由图12可知，bm
‑
fe在胃液环境下30min后，释放率约为45％，这可能是由于胃液的强酸条件增加了bm
‑
fe释放的游离铁离子的含量。2h时，bm
‑
fe的铁释放率超80％。
[0106]
(2)模拟肠液
[0107]
准确称取20mg bm
‑
fe，使其溶于100ml ph 6.8的缓冲液中，37℃、100rpm条件下磁力搅拌反应4h，每隔0.5h取一次样，一次取3ml，同时加入相同剂量的缓冲液。反应完毕后，样液经0.45μm微孔滤膜过滤，过滤后分别取各个滤液2ml于50ml容量瓶中，之后操作步骤如铁含量测定，完成后510nm处测量吸光度值。
[0108]
由图12可知，bm
‑
fe在肠液环境中，也有较高的释放率，2h时，bm
‑
fe的释放率达70％，由于铁离子主要是在十二指肠及空肠上段被吸收，说明bm
‑
fe中的铁有较好的生物利用度。本案中所有实验重复3次，结果以平均值x
±
sd表示。采用origin 2018进行图形绘制，spss 24.0进行显著性分析，图中不同小写字母表示有显著性差异(p<0.05)。
[0109]
从上述实验例1
‑
5可以看出，铁元素成功与bsm反应；bm
‑
fe在模拟的胃肠环境中铁元素溶出度较高，说明其在胃肠道环境中有良好的生物利用度且其较好的保留了黑色素的抗氧化等优良特性。
[0110]
其中，红外结果显示表明bsm的羧基、羟基、氨基基团参与了铁离子的螯合；抗氧化实验说明了bm
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fe较好的延续了bsm抗氧化的优良特性；体外铁溶出实验结果显示了bm
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fe有利于机体吸收的特点。
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目前已有的补铁螯合物已被证实具有良好的补血作用，但在抗氧化等方面并未得到关注，本研究证明黑色素铁具有较好的抗氧化性，并且人体吸收性良好，利于人体利用。因此，bm
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fe配合物有望开发为一种具有良好活性的新型多功能铁补充剂，在生物学、医学、甚至是在基本营养之外对健康有潜在积极影响的新型功能性食品的应用都有很大的前景。
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以上所述仅为本发明的较佳实施例，并非对本案设计的限制，凡依本案的设计关键所做的等同变化，均落入本案的保护范围。