一种含SOD和5-HTP的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方的制作方法

一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方
技术领域
1.本发明属于保健品技术领域，具体为一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方。


背景技术：

2.睡眠是人体最基本的生理过程，人的一生中大概有三分之一的时间是在睡眠中度过。而充足和优质的睡眠与身心健康、安全、生活质量等息息相关。随着生活节奏的加快以及生活工作的压力的逐渐增大，失眠等睡眠疾病已成为影响人类健康的世界性公共卫生问题。流行病学资料显示，我国自然人群中约有10％-15％左右的人患有原发性失眠，其中以入睡困难、睡眠不足、易醒、多梦等为主要表现。根据《2018中国睡眠质量调查报告》显示，有超过16％的被调查者夜间睡眠不足的情况，25.83％的被调查者存在入睡困难。并且，许多研究均表明睡眠相关疾病与多种其它疾病如抑郁症、内分泌疾病、阿尔兹海默症等疾病有关；同时睡眠不足的问题还会导致机体经常感到疲劳、精神欠佳、体力“透支”、免疫能力低下、易患感冒、自然衰老加速等症状。研究发现，在正常情况下，人体内的自由基是出于不断产生的动态平衡中，但自由基过多或者清除过慢会对生物体产生一系列的损害，加速人体衰老和诱发各种症状，如疲劳等。而睡眠不足等睡眠问题同样会造成人体感到疲劳，同时会诱导改变人体的自由基平衡严重影响人体健康。针对上述情况，也公开了一些保健食品，但是现有的保健食品也存在一下问题：
3.1.名目繁多，功能多样，有的具有抗氧化等美容作用，有的具有抗疲劳作用，有的具有改善睡眠作用，但同时兼具抗氧化、抗疲劳和改善睡眠等多种功能于一体的保健品几乎没有；
4.2.sod等各种抗氧化成分容易在高温、偏酸偏碱环境中易失活；
5.3.现有制备工艺过于简单，仅仅只是各种成分的直接混合，未有工艺上的相互配伍，无法使相关成分在制备工艺上在体内发挥更好的作用；
6.因此，急需开发出一款高效稳定的，具有抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方。


技术实现要素：

7.[技术问题]
[0008]
现有保健食品无法兼具抗氧化、抗疲劳和改善睡眠等多种生理功能，并且当前改善睡眠的保健食品又无法有效抗疲劳或有效清除自由基。
[0009]
[技术方案]
[0010]
针对上述问题，本发明提供一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳和改善睡眠的保健配方，本发明的保健配方同时具有抗氧化、抗疲劳和改善睡眠等多种功能，能够有效清除自由基，缓解疲劳，提高睡眠质量。
[0011]
为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：
[0012]
一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳和改善睡眠的保健配方，以重量份数计，包括
超氧化物歧化酶(sod，下同)10-20份，5-羟基色氨酸(5-htp，下同)10-25份，苹果酸镁5-10份，维生素0.01-0.1份，辅料10-20份。
[0013]
在本发明的一种实施方式中，所述的超氧化物歧化酶(sod)单位酶活力为10000
–
50000iu/g。
[0014]
在本发明的一种实施方式中，所述sod为深圳中科欣扬生物科技有限公司制备得到的稳定sod，参见cn108018266a。
[0015]
在本发明的一种实施方式中，所述的维生素包括维生素a、维生素d、维生素e、维生素c、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、烟酸、叶酸、泛酸、胆碱和烟酰胺中的一种、几种或全部。
[0016]
在本发明的一种实施方式中，所述保健配方，以重量份数计，优选包括：sod20份，5-htp25份，苹果酸镁10份，维生素0.07份(维生素a 0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)，辅料10-20份。
[0017]
在本发明的一种实施方式中，所述的辅料包括填充剂、矫味剂、助流剂、防腐剂、粘合剂、崩解剂的一种、几种或全部。
[0018]
在本发明的一种实施方式中，所述的填充剂为淀粉、糊精、乳糖中的一种、几种或全部；矫味剂为蜂蜜、单糖浆、橙皮糖浆、樱桃糖浆和桂皮糖浆中的一种、几种或全部；助流剂为滑石粉、微粉硅胶和二氧化硅中的一种、几种或全部；防腐剂为苯甲酸及其钠盐、对羟基苯甲酸酯类及其钠盐、山梨酸及其钾盐、乙酸钠中的一种、几种或全部；粘合剂为淀粉浆、微晶纤维素、明胶、聚乙烯醇中的一种、几种或全部；崩解剂为干淀粉、羧甲基淀粉钠(cms-na)、低取代羟丙基纤维素(l-hpc)、交联羧甲基纤维素钠(ccmc-na)、交联聚维酮(pvpp)中的一种、几种或全部。
[0019]
在本发明的实施方式中，所述的保健配方可制成片剂、丸剂、散剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒、口服液、饮料、糖果、饼干或其他食品上可接受的剂型。
[0020]
本发明还提供了上述保健配方的制备方法，包括以下步骤：
[0021]
(1)在一干净容器内按配比称量sod、5-htp、苹果酸镁、维生素和辅料；
[0022]
(2)将10-20份sod，5-10份苹果酸镁和20％-60％体积的纯水在600-800rpm转速，50-60℃条件下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0023]
(3)将5-htp10-25份和维生素0.01-0.1份缓慢多次加入到(2)中溶液中，在加入的同时逐步加入25％-50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(2)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0024]
(4)最后加入辅料10-20份及10％-50％体积的纯水，完全搅拌均匀后，得到所需溶液，制成相应剂型进行无菌分装。
[0025]
在本发明的实施方式中，步骤(2)中的无菌分装为使用紫外照射进行灭菌。
[0026]
本发明还提供了包含上述保健配方的保健食品等。
[0027]
与现有配方相比，本发明的有益效果是：
[0028]
1.sod具有很好的抗氧化效果，5-htp能够显著改善睡眠质量，减少疲劳感，两者协同作用能够显著增强抗氧化能力，消除过量氧自由基，同时还能起到改善睡眠质量的作用。
[0029]
2.同时苹果酸镁可与部分维生素复配，具有协同作用，能够起到促进蛋白质及酶的合成的效果；同时苹果酸镁还具有缓解慢性疲劳综合征的症状，能够有效减轻疲劳感。
[0030]
3.一般的改善睡眠的产品仅使用了5-htp这一种有效成分，本配方在此基础上还直接补充sod酶，能够有效清除自由基，缓解睡眠不足带来的疲惫感。
[0031]
4.传统sod不稳定，在高温或偏酸偏碱条件下易失活，本发明采用中科欣扬超稳定sod酵母粉，不易在体内失活，能更好的发挥作用；并且很多抗氧化剂很不稳定，在制备过程中需要严格的防氧化操作，且产品的货架期较短，不能以溶液形式存在，而中科欣扬的sod非常稳定且具有很强的抗氧化活性，因此能够以多种形式存在，且延长了产品的货架期。
[0032]
5.与其它配方不同，本配方还改进了相应的制备工艺，使之具有更好的配伍效果和使用价值。
附图说明
[0033]
图1实施例1～5和对比例1～8的粉剂的超氧阴离子清除率实验结果。
[0034]
图2实施例1～5和对比例1～8的粉剂的酶活稳定性实验结果。
具体实施方式
[0035]
下面结合实施例对本发明作进一步的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0036]
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0037]
本发明提供一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳和改善睡眠的保健配方，包括以下重量份的原料，包括sod 10-20份，5-htp 10-25份，苹果酸镁5-10份，维生素0.01-0.1份，辅料10-20份。
[0038]
人体的生命功能细胞是由酶类组成的，酶是由蛋白质和一些化学元素组成的有机物，人类乃至地球上的生物离开酶类就无法生存，中医所解密的气血平衡，实际上就是酶和自由基的平衡，自由基是生物体的代谢产物，具有生物活性和不同的功能，很多自由基也是人类生命的卫士，超氧阴离子自由基可以附着人体细胞、器官内外，细胞和器官上的超氧阴离子自由基是一种垃圾，这些累积的垃圾会导致细胞失去应有的功能，超氧阴离子自由基就如铁器上的锈斑，会破坏细胞的代谢并导致其死亡。sod就是专注于清除超氧阴离子自由基的一种酶，把超氧阴离子自由基转化为水和氧气排出体外，可以使细胞恢复功能，阻止细胞衰老。补充外源sod可以有效提升机体抗氧化能力，延缓机体衰老，从而能够有效缓解机体疲劳。其中，本发明所用到的sod为中科欣扬超稳定sod，酶活为10000-50000iu/g。
[0039]
5-htp是一种不参与蛋白质合成的天然氨基酸。在哺乳动物体内，5-htp是神经递质血清素与褪黑素的前体，对睡眠、痛觉、体温、食欲与行为等生理功能具有调节作用，由于其的生物学和药理特性及其安全、稳定等优点，已被成功用于抑郁症、失眠和偏头痛等疾病的治疗。
[0040]
苹果酸镁(magnesium malate)是一种营养补充剂，其成分主要包含镁和苹果酸，这两种成分都对细胞的生成和存储能量有较大好处。其中的镁还能与部分维生素产生协同效应，对蛋白质和氨基酸的适当功能有较好的帮助。并且一些营养学专家和医生认为苹果酸镁有助于缓解慢性疲劳综合征的症状。慢性疲劳综合症的特点是疲劳感突然发作，会让人整日虚弱无力。此外，其对身体产生三磷酸腺苷(atp)有帮助，这是一种让细胞存储能量
1.6mg、维生素b 130mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱46mg、烟酰胺0.6mg)，辅料20份(糊精13份，二氧化硅1份，淀粉浆6份)，纯水37.92份。
[0054]
(1)将sod 18份，苹果酸镁6份和60％体积的纯水在600rpm转速，50℃条件下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0055]
(2)将5-htp 18份和维生素0.08份(维生素a0.7mg、维生素e10mg、维生素c 38mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 130mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱46mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入30％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0056]
(3)最后加入辅料20份((糊精13份，二氧化硅1份，淀粉浆6份)及10％体积的纯水，完全搅拌均匀后，得到所需溶液，制成胶囊进行无菌分装。
[0057]
实施例4
[0058]
本发明的一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：sod 14份，5-htp 16份，苹果酸镁8份，维生素0.05份(维生素a0.7mg、维生素e 9mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.5mg、维生素b61.5mg、维生素b 128mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱47mg、烟酰胺0.6mg)，辅料20份(糊精5份，淀粉5份，葡萄糖5份，微晶纤维素5份)，纯水41.95份。
[0059]
(1)将sod 14份，苹果酸镁8份和30％体积的纯水在700rpm转速，55℃条件下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0060]
(2)将5-htp 16份和维生素0.05份(维生素a0.7mg、维生素e 9mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.5mg、维生素b6 1.5mg、维生素b 128mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱47mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0061]
(3)最后加入辅料20份(糊精5份，淀粉5份，葡萄糖5份，微晶纤维素5份)及20％体积的纯水，完全搅拌均匀后，得到所需溶液，制成颗粒进行无菌分装。
[0062]
实施例5
[0063]
本发明的一种含sod和和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：sod 10份，5-htp 20份，苹果酸镁7份，维生素0.05份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 35mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.5mg、维生素b6 1.5mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱46mg、烟酰胺0.6mg)，各组分混合均匀后加入辅料20份(糊精5，淀粉10，蜂蜜5)，纯水42.95份。
[0064]
(1)将sod 10份，苹果酸镁7份和25％体积的纯水在800rpm转速，60℃条件下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0065]
(2)将5-htp 20份和维生素0.05份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 35mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.5mg、维生素b6 1.5mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱46mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入25％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0066]
(3)最后加入辅料20份(糊精5，淀粉10，蜂蜜5)及50％体积的纯水，完全搅拌均匀后，得到所需溶液，制成丸剂进行无菌分装。
[0067]
对比例1在实施例2的基础上省略sod
[0068]
本发明的一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：5-htp 25份，苹果酸镁10份，维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)，辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)，纯水54.93份。
[0069]
(1)将苹果酸镁10份和40％体积的纯水在600-800rpm转速，50-60℃条件下下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0070]
(2)将5-htp 25份和维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0071]
(3)最后加入辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)及10％体积的纯水，完全搅拌均匀后，进行压片，制成片剂进行无菌分装。
[0072]
对比例2在实施例2的基础上省略5-htp
[0073]
本发明的一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：sod20份，苹果酸镁10份，维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)，辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)，纯水59.93份。
[0074]
(1)将sod20份，苹果酸镁10份和40％体积的纯水在600-800rpm转速，50-60℃条件下下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0075]
(2)将维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0076]
(3)最后加入辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)及10％体积的纯水，完全搅拌均匀后，进行压片，制成片剂进行无菌分装。
[0077]
对比例3在实施例2的基础上省略苹果酸镁
[0078]
本发明的一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：sod20份，5-htp 25份，维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)，辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)，纯水44.93份。
[0079]
(1)将sod20份和40％体积的纯水在600-800rpm转速，50-60℃条件下下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0080]
(2)将5-htp 25份和维生素0.07份(维生素a0.7mg、维生素e 8mg、维生素c 36mg、维生素d 0.2mg、维生素、b1 0.6mg、维生素b2 1.6mg、维生素b6 1.6mg、维生素b 125mg、烟酸0.9mg、叶酸0.7mg、泛酸4mg、胆碱43mg、烟酰胺0.6mg)缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0081]
(3)最后加入辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)及10％体积的纯水，完全搅拌均匀后，进行压片，制成片剂进行无菌分装。
[0082]
对比例4在实施例2的基础上省略维生素
[0083]
本发明的一种含sod和5-htp的抗氧化、抗疲劳及改善睡眠的保健配方，其中各组分含量为：sod20份，5-htp 25份，苹果酸镁10份，辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)，纯水35份。
[0084]
(1)将sod20份，苹果酸镁10份和40％体积的纯水在600-800rpm转速，50-60℃条件下下混合搅拌均匀，搅拌均匀后冷却至37℃；
[0085]
(2)将5-htp 25份缓慢多次加入到(1)中溶液中，在加入的同时逐步加入50％体积的纯水，同时搅拌条件维持(1)中所述条件，直至搅拌均匀；
[0086]
(3)最后加入辅料10份(交联羧甲基纤维素钠5份，糊精3份，二氧化硅1份，淀粉浆1份)及10％体积的纯水，完全搅拌均匀后，进行压片，制成片剂进行无菌分装。
[0087]
对比例5
[0088]
将实施例2的sod替换为谷胱甘肽，其余组成和制备过程同实施例2，制备得到所需溶液。
[0089]
对比例6
[0090]
将实施例2的操作工艺进行变动，直接将sod、5-htp、苹果酸镁、维生素等进行混合，其余组成同实施例2，制备得到所需溶液。
[0091]
对比例7
[0092]
将实施例2的5-htp替换为褪黑素，其余组成和制备过程同实施例2，制备得到所需溶液。
[0093]
对比例8
[0094]
将实施例2的sod替换为普通sod(来源于猪血提取，酶活为50000u)时，其余组成和制备过程同实施例2，制备得到所需溶液。
[0095]
实施例7
[0096]
抗氧化能力测试：
[0097]
超氧阴离子清除实验，按试剂盒说明书配置好所需溶液，按下表1加入试剂进行反应。
[0098]
表1试剂盒说明书
[0099][0100]
定义：在反应系统中，每升血清(浆)在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1 mg的维生素c所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。
[0101]
计算公式：计算公式：
[0102][0103]
超氧阴离子清除率实验结果如图1所示。由图可以看出，sod和5-htp复配显示出更强的抗超氧阴离子抑制率，其中实施例2的超氧阴离子清除率最高，为96.96％，同时，未添加sod的对比例1，几乎没有超氧阴离子清除能力。另外，添加了其它抗氧化成分而未添加中科欣扬sod成分的对比例则表现出较为一般的超氧阴离子自由基清除能力，例如对比例5的清除率仅为51.01％，这也可以看出，相较于一般的抗氧化成分，中科欣扬sod具有更强的自由基清除率。而制作工艺的不同也会影响产品的自由基清除率，直接混合搅拌均匀后，其自由基清除率仅为60.66％，这也表明，本实施例2所采用的多次分批缓慢加入的工艺具有较好的效果。
[0104]
实施例8
[0105]
酶活稳定性检测：
[0106]
酶活性测定参照修改的marklund方法也即gbt5009.171-2003邻苯三酚自氧化法进行。分析步骤如下：
[0107]
(1)邻苯三酚自氧化速率测定
[0108]
在25℃左右，于10ml比色管中一次加入a液2.35ml，蒸馏水2.00ml，b液0.15ml。加入b液立即混合均匀并加入比色皿中，分别测定在325nm波长条件下初始值和1min后的吸光值，二者之差即为邻苯三酚自氧化速率
△a325
(min-1
)。
[0109]
(2)样液和sod酶液抑制邻苯三酚自氧化速率测定
[0110]
按邻苯三酚自氧化速率测定步骤分别加入一定量样液或酶液使抑制邻苯三酚自氧化速率约为1/2
△a325
(min-1
)，即δa
′
325
(min-1
)为0.030。
[0111]
sod活性测定加样顺序见下表：
[0112]
表2 sod活性测试加样顺序
[0113][0114][0115]
计算公式如下：
[0116]
(1)酶粉：
[0117][0118]
式中：
[0119]
u/g：
‑‑‑‑‑‑‑
sod酶活力单位；
[0120]
△a325
：
‑‑‑‑
邻苯三酚自氧化速率；
[0121]
δa
′
325
：
‑‑‑
样液或sod酶液抑制邻苯三酚自氧化速率；
[0122]
v：
‑‑‑‑‑‑‑‑‑
所加酶液或样液体积，单位为毫升(ml)；
[0123]
d：
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
酶液或样液的稀释倍数；
[0124]
4.5
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
反应液总体积，单位为毫升(ml)。
[0125]
(2)酶液：
[0126][0127]
式中：
[0128]
u/ml：
‑‑‑‑‑‑
sod酶活力单位；
[0129]
△a325
：
‑‑‑‑‑
邻苯三酚自氧化速率；
[0130]
δa
′
325
：
‑‑‑‑
样液或sod酶液抑制邻苯三酚自氧化速率；
[0131]
v：
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
所加酶液或样液体积，单位为毫升(ml)；
[0132]
d：
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
酶液或样液的稀释倍数；
[0133]
4.5
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
反应液总体积，单位为毫升(ml)。
[0134]
注：(1)在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％，
[0135]
(2)测活需恒温25℃，
[0136]
(3)邻苯三酚现配现用。
[0137]
酶活高温稳定性测试：
[0138]
在高温(80℃)条件下孵化产品1h后迅速冷却至室温，比较孵化前后的酶活情况，以酶活保存率表示。酶活保存率＝高温孵化前酶活/高温孵化后酶活
×
100％。
[0139]
酶活保存率结果如图2所示。由图2可知，sod与5-htp、苹果酸镁、维生素等进行复配后，显示出了更强的高温酶活保存率，其中实施例2中，80℃下sod酶活保存率最高，为
99.64％。而对比例8中采用的是猪血提取的sod，其高温稳定性与中科欣扬超稳定sod相比，存在较大差距，其sod高温酶活保存率仅为19.28％，这也说明，本发明专利能够耐受高温，以长效保持较高活性，应用前景较大。
[0140]
实施例9
[0141]
抗疲劳效果测试：
[0142]
以下通过小鼠实验对本发明的保健配方的抗氧化、抗疲劳功能进行说明。
[0143]
实验中所采用的受试物为：实施例1、2、3、4、5和对比例1、2、3、4、5、6、7、8。
[0144]
实验中所采用的动物来源和身体状况：普通健康雌性小鼠270只，体重18～20g。小鼠随机分为14组，每组20只，分别为空白组、实验组1-5组、对照组1-8组及空白组。
[0145]
空白组按0.4ml/20g剂量灌服生理盐水，试验组和对照组按5mg/20g剂量灌服受试物。每日灌服一次，连续灌服10天。第11天眼眶取血测定sod，解剖肝脏和脑细胞测定mda含量(丙二醛mda检测试剂盒)。
[0146]
小鼠游泳试验：每组各取10只，于末次给药后30min开始试验，将小鼠负重5％，置于6cm
×
6cm
×
36cm水池中游泳，水深30cm，水温25℃
±
0.5℃，每池10只小鼠，记录小鼠开始游泳至死亡时间，作为小鼠游泳时间。
[0147]
小鼠爬杆试验：每组各取10只，于末次给药后30min开始试验，用长度1m直径0.8cm玻璃棒，实验前每鼠练习两次，每次1分钟，第3次正式试验，记录小鼠爬杆时间。
[0148]
表3不同实验组小鼠抗氧化数据
[0149]
组别大脑mda肝脏mdasod实验组118.555.24271.36实验组215.954.39293.26实验组316.824.49291.24实验组417.564.92287.26实验组517.694.99289.98对照组120.886.12263.17对照组217.354.67290.87对照组317.964.86286.57对照组418.485.13273.49对照组518.945.46270.26对照组619.365.79269.18对照组719.895.82267.23对照组820.165.97265.94.空白组20.866.13263.77
[0150]
表4不同实验组小鼠抗疲劳数据
[0151]
[0152][0153]
由表3可知，实验组2与对照组1可明显看出，在添加了中科欣扬sod后，小鼠肝脏及脑细胞中mda含量明显降低，尤其是实验组2中肝脏及脑中mda分别比对比例低了30.90％和39.41％，而血清中sod活力则比对照组1提高了10.26％，这表明中科欣扬sod对其mda的清除效果，同时也能起到一定提升血清sod活力的能力。同时，从对照组5中可以看出，换用了其它抗氧化成分，并没有达到中科欣扬sod的效果。另外，对照组6也看出，直接混合的工艺对小鼠mda的清除效果较分批缓慢混合的工艺较差。而由表4还可以看出，当使用褪黑素替换5-htp后，小鼠的抗疲劳效果并没有实验组2好，小鼠的游泳时间及爬杆时间明显低于实验组2，这其中可能的原因是sod与5-htp存在一定的协同作用，而与褪黑素并未有协同作用。综上可以看出，服用实验组2的保健配方，能明显提高小鼠血清sod活力，显著降低小鼠肝脏和脑细胞中的mda含量，表明本发明保健配方具有抗氧化作用。且试验组服用保健配方后能明显延长小鼠游泳时间和爬杆时间，表明本发明具有抗疲劳提高耐力作用。
[0154]
实施例10
[0155]
睡眠改善试验：
[0156]
公开招募并选择符合纳入标准的志愿者100人，所选取的实验对象既往健康无其它影响本研究的病症；
[0157]
纳入标准：年龄主要为20-50岁；使用匹兹堡睡眠质量指数问卷进行人群筛选，合格志愿者纳入实验组；能够资源进行试验并完成记录；
[0158]
本次试验共征集了140名符合要求的受试者，随机分成13组，每组10人。设置5组实施组，8组对比组，1组空白组。分别使用实施例1、2、3、4、5和对比例1、2、3、4、5、6、7、8进行试验。
[0159]
服用方法：每日睡前一小时将此品与温水一起吞服。空白组不吞服药品，仅进行温水吞服。
[0160]
本实验时间为6周，实验期间不改变志愿者的饮食和生活习惯。志愿者连续服用样品4周，在停服时及停服2周后进行疗效评价。
[0161]
评价指标：睡眠质量采用匹兹堡睡眠质量指数(psqi)自量评估表，共0～21分。分数高低表示睡眠质量，分数越低睡眠质量越好。
[0162]
计算公式：睡眠质量改善(服用4周)＝服用前评分-服用4周评分；
[0163]
睡眠质量改善(停服2周)＝服用4周评分-停服两周评分；
[0164]
根据psqi评估，各测试组评分如表5所示。
[0165]
表5实验组睡眠质量比较
[0166][0167]
由表5可知，各实验组均对睡眠质量具有一定的改善，其中实施例2表现出更好的睡眠改善作用，而对比例2中并未改善睡眠质量，原因很可能是因为对比例2中并没有添加5-htp这种有效成分。同时，即便是停止服用2周，实施例2也表现出了一定的改善睡眠的作用，这也表明本发明的保健配方具有较好的持续性。另外，对比例3及对比例4和实施例2相比也可以看出，在没有添加苹果酸镁或维生素时，其改善睡眠的效果也有所下降。再有，对比例7将5-htp替换成了褪黑素，但其改善睡眠效果并未有实施例2强，这其中可能的原因有两个，首先是褪黑素与sod等配方成分没有协同作用，再者是因为褪黑素与5-htp在人体代谢机制不同，褪黑素并不能被人体有效利用，从而表现出较差的改善睡眠的效果。综上所述，本发明保健配方，采用sod、5-htp和苹果酸镁等复配，协同增效，可以有效提高机体内超氧阴离子自由基的清除效果、抗疲劳并有改善睡眠的作用。
[0168]
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。