一种富含荷载β-胡萝卜素脂质颗粒花生乳的制备方法

一种富含荷载
β-胡萝卜素脂质颗粒花生乳的制备方法
技术领域
1.本发明涉及饮料制品加工技术领域，涉及一种通过有机溶剂注射法制备结构稳定且具有较高荷载率和辅助吸收因子的β-胡萝卜素脂质体颗粒溶液，并将其利用到水酶法制备低脂花生乳的制备方法。


背景技术：

2.β-胡萝卜素具有很强的抗氧化活性与清除自由基的能力。β-胡萝卜素具有促进细胞分裂、提高机体免疫力、促进胚胎发育以及维持视力等功能。然而，由于β-胡萝卜素多不饱和烯烃的存在，其在室温下为结晶态，熔点为182℃，不溶于水，微溶于油并且结构极不稳定，在光、氧、自由基、金属离子和高温等的作用下，容易出现降解和异构化等。研究表明，β-胡萝卜素的异构化使其维生素原活性和抗氧化性都显著降低。这在很大程度上限制了β
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胡萝卜素在食品、医药和化工领域的应用。
3.脂质体作为一种纳米级递药系统，可以将活性成分或者药物包裹起来，并在不同场所进行传递，提高活性物质的稳定性，降低光、氧等对活性成分的破坏。同时，还具有较好的缓释作用，并且无毒性，组织相容性较好。有机溶液注入法操作简单，成功率高，适合水溶性和油溶性药物分子的包埋。
4.水酶法提取水相制备花生乳是依据“油水不相溶”原理，在粉碎后的花生中加入水，调节体系ph，使水溶性蛋白和油脂分离，并利用蛋白酶破除乳状液提取水相。与传统压榨法相比，水酶法提取水相制备花生乳具有操作简单、能耗低、不添加有机溶剂，产品稳定性更好等优点，特别是提取过程中，水相中蛋白质可以最大程度地保持天然状态，能够作为食品原料。水酶法提取花生油后的水相是一个高蛋白低脂肪的体系，是制备低脂花生乳饮料的理想基料。


技术实现要素：

5.本发明提供了一种通过有机溶剂注射法与水酶法制备富含荷载β-胡萝卜素脂质颗粒花生乳制备方法。该方法不仅提高了β-胡萝卜素的稳定性与溶解率，解决了传统胡萝卜素容易降解氧化的缺点并且丰富了花生乳的营养价值降低了花生乳中的脂肪含量，为了实现上述目的，本发明提出如下技术方案：
6.一种富含荷载β-胡萝卜素脂质颗粒花生乳制备方法，其特征在于，包括：
7.步骤1：配置荷载β-胡萝卜素的脂质体溶液。
8.步骤2：制备花生乳原料。将花生去皮筛选后，进行粉碎、加酶、水提、离心、去油、消毒操作。
9.步骤3：取步骤2中间层水相，加入柠檬酸、乳清蛋白粉、菊糖和荷载β-胡萝卜素的脂质体溶液。
10.步骤4：均质：将步骤3所得溶液进行均质，即可得到荷载β-胡萝卜素脂质颗粒花生乳。
11.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤1中β-胡萝卜素溶于三氯甲烷，二氯甲烷，石油醚其中的一种中，所得溶液中β-胡萝卜素的浓度应为0.3-4mg/ml。
12.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于权利要求2中所述的β-胡萝卜素溶液中加入胆固醇，谷甾醇，维生素d其中的一种，其在溶液中的浓度应为2-10mg/ml。再加入大豆磷脂，卵磷脂其中的一种，其在溶液中的浓度应为5-18mg/ml。
13.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于权利要求2中所述的β-胡萝卜素溶液加入聚乙二醇维生素e琥珀酸酯、辛烯基琥珀酸酯、α-生育酚琥珀酸酯中的一种，添加量为 2-20mg/ml。
14.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于权利要求4中所述的溶液溶于5-20ml甲醇，乙醇，正丁烷其中的一种中。将有机溶剂混合液注入20-50ml超纯水中。再将溶液进行旋转蒸发，温度应为60-70℃，转速应为300-500rpm/min，均质时间应为10-30min。得到的脂质体悬浮液应在0-10℃下保存。
15.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤2中所述的花生需在ph 7-9的弱碱溶液中浸泡2-8h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。在对花生进行粉碎时，磨隙应在 0.04-0.06mm，磨浆时加入温度为70-90℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的10-20倍。
16.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤2中粉碎后，加入木瓜蛋白酶，纤维酶，果胶酶中的一种。
17.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤2中的水提是加入用温度80℃以上的水冲洗搅拌，反复进行2-3次，此时乳液的ph值为6.8-7.1。5000rpm/min离心10min后，去除油脂，然后进行消毒，应将花生乳液加热，当温度达到60-80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫，当花生乳液温度达94-96℃、维持1-2min，达到杀菌和消毒的目的。
18.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤3中的乳清蛋白粉的添加量应为1-10g/l, 柠檬酸的添加量应为0.1-1.5g/l，菊糖的添加量应为30-40mg/l,步骤1荷载β-胡萝卜素脂质体溶液添加量为5.0-35.0ml/l。
19.作为本发明的进一步优选方案，其特征在于步骤4中的均质温度应为70-90℃，并用胶体磨进行二次均质。均质后的花生乳立即装罐，在0-4℃条件下贮藏。
20.本发明具备如下有益效果
21.β-胡萝卜素通过脂质体包埋后结构稳定性，溶解性大大增加。同时，脂质体中富含辅助吸收因子，能够增强营养素在肠道中的吸收，提高生物利用率。并一方面，利用水酶法得到的花生乳液体均一，不需要添加额外的乳化剂就可以使花生乳维持良好的品相，具有高蛋白低脂的特点，二次均质后，花生乳的口感更细腻。
具体实施方式
22.以下对本发明的实施例进行清楚、完整的描述，所描述的实施例仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定发明。
23.实施案例1
24.(1)配置β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。取10mg胡萝卜素与三氯甲烷10ml,配置成1mg/ml 的β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。
25.(2)取1mlβ-胡萝卜素-三氯甲烷溶液、100mg大豆磷脂、50mg的胆固醇、辛烯基琥珀酸酯10mg溶于10ml乙醇中。
26.(3)将有机溶液注入20ml超纯水中,65℃，400rpm/min旋转蒸发20min，400rpm/min， 50℃均质15min，得到荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液，在4℃下保存。
27.(4)制备花生乳原料。花生在ph 8的弱碱溶液中浸泡6h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.05mm，磨浆时加入温度为75℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的15倍。
28.(5)加入木瓜蛋白酶进行酶解后，加入用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行3次，此时乳液的ph值为7.1。5000rpm/min离心10min后，去除油脂。
29.(6)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
30.(7)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉3g,柠檬酸0.8g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液15ml，菊糖的添加量为40mg。
31.(8)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
32.(9)添加β-胡萝卜素花生乳产品中β-胡萝卜素荷载量的测定和计算方法：取约200μl 样品，加入2.5ml体积比为2：3的乙醇/正己烷的混合有机相进行萃取，体系涡旋震荡10s 后静置1-2min转移β-胡萝卜素正己烷层至10ml容量瓶中，继续添加1.5ml正己烷，重复上述操作，直至样品中的β-胡萝卜素萃取完毕，最后定容，测定吸光度，根据工作曲线进行计算，可得β-胡萝卜素的含量，计算公式如下：
33.实施案例2
34.(1)配置β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。取20mg胡萝卜素与三氯甲烷10ml,配置成2mg/ml 的β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。
35.(2)取1mlβ-胡萝卜素-三氯甲烷溶液、80mg卵磷脂、60mg谷甾醇、α-生育酚琥珀酸酯 10mg溶于20ml乙醇中。
36.(3)将有机溶液注入20ml超纯水中65℃，500rpm/min旋转蒸发30min，500rpm/min， 50℃均质15min，得到荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液,在4℃下保存。
37.(4)制备花生乳原料。花生在ph 8的弱碱溶液中浸泡10h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.05mm，磨浆时加入温度为80℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的14倍。
38.(5)加入胶原酶进行酶解后,加入用温度100℃的水冲洗搅拌，反复进行3次，此时乳液的 ph值为7.0。5000rpm/min离心10min后，去除油脂。
39.(6)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
40.(7)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉5g,柠檬酸2g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液20ml，菊糖的添加量为30mg。
41.(8)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
42.实施案例3
43.(1)配置β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。取10mg胡萝卜素与三氯甲烷10ml,配置成1mg/ml 的β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。
44.(2)取1mlβ-胡萝卜素-三氯甲烷溶液、50mg卵磷脂、40mg谷甾醇辛烯基琥珀酸酯15mg、溶于8ml乙醇中。
45.(3)将有机溶液注入30ml超纯水中65℃，400rpm/min旋转蒸发20min，400rpm/min， 50℃均质15min，得到荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液，在4℃下保存。
46.(4)制备花生乳原料。花生在ph8的弱碱溶液中浸泡6h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.05mm，磨浆时加入温度为85℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的20倍。
47.(5)加入半纤维素酶进行酶解后，加入用温度100℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为7.0。5000rpm/min离心10min后，去除油脂。
48.(6)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
49.(7)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉2g,柠檬酸0.5g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液20ml，菊糖的添加量为50mg。
50.(8)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
51.对比案例1
52.(1)配置β-胡萝卜素溶液。取10mg胡萝卜素溶于20mg葵花籽油中。
53.(2)制备花生乳原料。花生在ph 8的弱碱溶液中浸泡6h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.05mm，磨浆时加入温度为75℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的15倍。
54.(3)加入木瓜蛋白酶进行酶解后，加入用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行3次，此时乳液的ph值为7.1。5000rpm/min离心10min后，去除油脂。
55.(4)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
56.(5)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉3g,柠檬酸0.8g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液20ml，菊糖的添加量为40mg。
57.(6)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
58.对比案例2
59.(1)配置β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。取20mg胡萝卜素与三氯甲烷10ml,配置成2mg/ml 的β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。
60.(2)取1mlβ-胡萝卜素-三氯甲烷溶液、80mg卵磷脂、60mg谷甾醇、α-生育酚琥珀酸
酯10 mg溶于20ml乙醇中。
61.(3)将有机溶液注入20ml超纯水中65℃，500rpm/min旋转蒸发30min，500rpm/min， 50℃均质15min，得到荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液,在4℃下保存。
62.(4)制备花生乳原料。花生在ph 8的弱碱溶液中浸泡10h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.05mm，磨浆时加入温度为80℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的14倍。
63.(5)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
64.(6)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉5g,柠檬酸2g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液15ml，菊糖的添加量为30mg。
65.(7)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
66.对比案例3
67.(1)配置β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。取10mg胡萝卜素与三氯甲烷10ml,配置成1mg/ml 的β-胡萝卜素-三氯甲烷溶液。
68.(2)取1mlβ-胡萝卜素-三氯甲烷溶液、50mg卵磷脂、40mg谷甾醇辛烯基琥珀酸酯15mg、溶于8ml乙醇中。
69.(3)将有机溶液注入30ml超纯水中65℃，400rpm/min旋转蒸发20min，400rpm/min， 50℃均质15min，得到荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液，在4℃下保存。
70.(4)制备花生乳原料。花生在ph 8的弱碱溶液中浸泡6h，进行软化处理，然后去皮，弃去有色液。将花生粉碎，磨隙应在0.04mm，磨浆时加入温度为85℃的热稀碱液，添加量为干花生仁重量的20倍。
71.(5)加入半纤维素酶进行酶解后，加入用温度100℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为7.0。5000rpm/min离心10min后，去除油脂。
72.(6)用温度90℃的水冲洗搅拌，反复进行2次，此时乳液的ph值为6.8。将花生乳液加热，当温度达到80℃、液面起泡微沸时撇去部分泡沫。当花生乳液温度达94℃、维持2min，消毒完成。
73.(7)静止后取500ml中间层水相加入乳清蛋白粉2g,柠檬酸0.5g和配置好的荷载β-胡萝卜素的脂质体悬浮液10ml，菊糖的添加量为50mg。
74.(8)花生乳在70℃下均质后，再用胶体磨进行二次均质，灌装，得到荷载β-胡萝卜素颗粒的花生乳。
75.表1不同花生乳中β-胡萝卜素含量的荷载率
[0076][0077]
实施案例1与对照案例1相比：相对条件下，实施案例1因为对β-胡萝卜素进行了包埋处理，所以胡萝卜素的溶解性与稳定性得到了充分提高，且花生乳的溶液均一性更好，无悬浮颗粒。
[0078]
实施案例2与对照案例2相比：利用水酶法后花生乳溶液更加均一稳定，品相更好，口感更细腻。
[0079]
实施案例3与对照案例3相比：相对条件下，实施案例3的花生粉碎度更高，所以用水酶法时，酶解的效率和产率更好，水相和油相的分离程度更高，花生乳的乳化性更好，得到的产品均一性更好。