一种降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法

1.本发明属于青贮饲料技术领域，尤其涉及一种降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法。


背景技术：

2.高粱隶属于禾本科高粱族高粱属，在世界各地热带、亚热带、温带地区均有广泛分布。高粱具有以下几个特点。1.光呼吸较低，而光合效率极高，是小麦、大豆和水稻等c3植物的2～3倍，是目前生物学产量最高的作物之一。2.高粱起源于高温、干旱的非洲大陆，恶劣的环境条件使它具有很强的抗逆性，对不同土壤类型及气候有较广得适应性。3.糯高粱是我国优质白酒的主要酿造原料，优质酿酒糯高粱是高品质白酒的重要保障。
3.再生高粱是高粱茎节上的休眠腋芽收割后从茎基部节发生分蘖，或割穗收获后，从植株上部一二节萌发出分枝，在暖温带和亚热带地区分蘖或分枝能抽穗成熟，达到一次播种多次收获的目的。然而在西南地区高粱—油菜轮作区，5月收获油菜后播种高粱，8月底收获第一茬，11月中旬再生高粱才能达到成熟，使得油菜播种期无法达到要求(10月播种)。因此，为了满足油菜-高粱轮作体系，第二茬再生高粱只能收获营养体或直接还田。目前有关再生高粱饲用的报道较少，也没有关于再生高粱进行青贮饲用的研究。
4.青贮是在厌氧环境下，自然附生在植株表面的乳酸杆菌，通过发酵将植物组织内部的可溶性碳水化合物转化为有机酸(包括乳酸、乙酸等)，并使饲料中的ph值迅速降低，在酸性环境下抑制腐败菌群的生长繁殖，使得饲料的贮存时间和饲料的品质得以延长。青贮饲料由于适口性好、营养丰富、利于长期保存等特性成为家畜的优良饲料来源。研究表明，甜高粱在发酵时会生成许多的氨基酸类、微生物蛋白类、免疫因子及促生长因子等物质，其发酵后青贮中的钙、磷含量高于玉米青贮，且钙、磷的比例更合理，青贮中钾的含量较高，牲畜采食甜高粱青贮饲料后其生长性能较好同时还不经常生病，可等价于20～40％的精饲料。但是，普通糯高粱品种，特别是其再生植株是否也有类似的青贮效果尚不清楚。目前再生高粱青贮品质方面也无相关报道。
5.综上所述，目前尚没有针对再生糯高粱的青贮技术，也不明确再生高粱青贮是否适宜做青贮饲料用；其次，再生糯高粱存在氢氰酸含量高于饲喂动物安全值(200mg/kg鲜重)的缺陷。且黑曲霉在食品中可以降低生氰糖苷含量，但尚不明确其作为青贮添加剂对青贮饲料中氢氰酸的去除效果。因此，亟需设计一种将黑曲霉作为青贮添加剂并分析再生糯高粱作为青贮饲料的饲用性能以及对氢氰酸去除效果的技术方案。
6.通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：1.目前尚不明确再生高粱青贮是否适宜做青贮饲料用；2.目前尚没有针对再生糯高粱的青贮技术；3.再生糯高粱存在氢氰酸含量高于饲喂动物安全值(200mg/kg鲜重)的缺陷；4.现有技术中尚不明确黑曲霉作为青贮添加剂对青贮饲料中氢氰酸的去除效果。


技术实现要素：

7.为解决上述问题，本发明提供了一种降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，以解决再生糯高粱青贮饲料中氢氰酸含量高的问题，有效提高再生糯高粱青贮饲料的营养品质，且工艺简单、成本低廉、易于操作。
8.为实现上述目的，本发明提供的方案如下：一种降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，所述降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法包括：
9.于抽穗扬花期收割全株再生糯高粱，切碎后添加黑曲霉菌液，再制作青贮饲料；室温下发酵60d后分析青贮饲料营养成分、发酵品质和氢氰酸含量，从而确定再生糯高粱青贮方法；明确黑曲霉作为青贮添加剂对青贮饲料中氢氰酸的去除效果，最终达到提高再生高粱青贮发酵品质及饲喂动物的效果；
10.其中，所述青贮饲料营养成分包括干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和可溶性总糖，所述发酵品质包括ph、铵态氮、乙酸、丙酸、丁酸和乳酸。
11.进一步，所述降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法包括以下步骤：
12.步骤一，再生糯高粱品种选择；
13.步骤二，再生糯高粱的收获；
14.步骤三，再生糯高粱青贮前处理；
15.步骤四，黑曲霉菌液添加处理；
16.步骤五，装填、封口与保存。
17.进一步，所述步骤一中的再生糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱。
18.选择经农业部或省级农作物品种审定委员会审定的丰产性好、品质优、抗逆性强且适宜当地生态条件的糯高粱品种。
19.进一步，所述步骤二中，选择抽穗杨花期刈割距地表5cm的再生高粱备用。
20.进一步，所述步骤三中的再生糯高粱青贮前处理包括：将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm，水分控制在65～75％。
21.进一步，所述步骤四中的黑曲霉菌液添加处理包括：
22.按照每3kg再生高粱添加150ml黑曲霉菌液和50ml无菌水的比例，原料切碎后立即加入添加剂，并混合均匀。
23.进一步，所述步骤五中，将切碎的原料装入青贮袋内，每袋200g；
24.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
25.本发明的另一目的在于提供一种应用所述的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法得到的青贮饲料的相关指标测定方法，所述青贮饲料的相关指标包括干物质、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、ph、氨态氮、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸以及氢氰酸含量，所述青贮饲料的相关指标测定方法包括：
26.(1)青贮饲料和原料营养成分测定：对青贮饲料和原料进行预处理；干物质量测定采用烘干法，粗蛋白质含量测定采用凯氏定氮法，粗纤维含量测定采用酸碱消煮法，粗脂肪含量测定采用醚浸出法，粗灰分含量测定采用灰化法，可溶性总糖测定采用蒽酮比色法；
27.(2)青贮饲料发酵品质测定：ph值测定采用ph法，乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量测定采用气相色谱法，氨态氮含量测定采用苯酚-次氯酸钠比色法；
28.(3)青贮饲料质量评定：采用日本v-score评分体系进行饲料质量评定；
29.(4)氢氰酸含量测定：采用异烟酸-吡唑啉酮法按照gb/t5009.36-2016食品中氰化物的测定方法进行青贮饲料中氢氰酸含量的测定。
30.进一步，所述步骤(1)中的青贮饲料和原料的预处理包括：按试验要求进行青贮饲料和原料取样，置于105℃烘箱中杀青30min，再置于65℃烘干至恒重，将所得到的烘干样用粉碎机粉碎，过40目筛保存自封袋中，作为待测样品。
31.进一步，所述步骤(2)中，称取开封后的样品20g置于三角瓶中，加入180ml蒸馏水，4℃下浸提24h，制成青贮浸提液；用快速定性滤纸过滤，所获得的滤液用于测定ph值、有机酸和氨态氮含量。
32.色谱条件为：汽化室参数为载气氮气，分流比40：1，进样量0.4μl，温度220℃；色谱柱参数为db-ffap毛细管色谱柱恒流模式，流量2.0ml/min，平均线速度38cm/s；柱温箱参数为程序升温120℃保持3min后，以10℃/min上升至180℃保持1min；检测器参数为氢气流量40ml/min，空气流量450ml/min，柱流量和尾吹气流量45ml/min，火焰离子检测器温度250℃。
33.结合上述的技术方案和解决的技术问题，请从以下几方面分析本发明所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
34.第一、针对上述现有技术存在的技术问题以及解决该问题的难度，紧密结合本发明的所要保护的技术方案以及研发过程中结果和数据等，详细、深刻地分析本发明技术方案如何解决的技术问题，解决问题之后带来的一些具备创造性的技术效果。具体描述如下：
35.本发明提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，选择西南地区种植范围较广的糯高粱，将黑曲霉菌液作为青贮添加剂，分析再生糯高粱作为青贮饲料的饲用性能以及对青贮饲料中氢氰酸的去除效果。
36.本发明于抽穗扬花期收割全株再生糯高粱，切碎后添加黑曲霉菌液，再制作青贮饲料，室温下发酵60d后分析青贮饲料营养成分(干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、可溶性总糖)、发酵品质(ph、铵态氮、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸)和氢氰酸含量，从而确定一种再生糯高粱青贮方法，明确黑曲霉作为青贮添加剂对青贮饲料中氢氰酸的去除效果，最终达到提高再生高粱青贮发酵品质及饲喂动物的效果。
37.黑曲霉是再生糯高粱进行青贮发酵的优良促进剂，可提高发酵饲料品质，同时对氢氰酸有较好的去除效果。实验结果表明，添加黑曲霉菌液有效提高了青贮中乳酸、粗蛋白含量，明显降低了青贮中ph、干物质、氨态氮/总氮比值、粗纤维、粗灰分含量。氢氰酸降解效果以处理组iii(即每3千克青贮中添加150ml黑曲霉菌液+50ml无菌水)为最佳。从节约成本角度考虑，本发明实施例4(处理iii组)是进行氢氰酸去除、青贮品质提高的最佳处理。
38.第二，把技术方案看作一个整体或者从产品的角度，本发明所要保护的技术方案具备的技术效果和优点，具体描述如下：
39.针对再生糯高粱作为青贮饲料，其氢氰酸含量高于饲喂动物安全值(200mg/kg鲜重)的缺陷，本发明提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，通过添加黑曲霉菌液使青贮再生糯高粱乳酸含量增加，ph值下降，氢氰酸含量下降，最终达到提高再生高粱青贮发酵品质及饲喂动物的效果。
40.本发明解决了再生糯高粱青贮饲料中氢氰酸含量高的问题，有效提高再生糯高粱
青贮饲料的营养品质，且工艺简单、成本低廉、易于操作。
41.第三，本发明的技术方案填补了国内外业内技术空白：
42.目前尚不明确再生糯高粱青贮是否适宜做青贮饲料用，而本发明提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，证明了再生糯高粱可作为青贮饲料使用。其次，再生糯高粱存在氢氰酸含量高于饲喂动物安全值(200mg/kg鲜重)的缺陷，研究表明黑曲霉在食品中可以降低生氰糖苷含量，而本发明提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，证明了黑曲霉作为青贮添加剂不仅可以提高青贮饲料的发酵品质，而且可去除青贮饲料中的氢氰酸。
43.目前在西南地区高粱—油菜轮作区，5月收获油菜后播种高粱，8月底收获第一茬，11月中旬再生高粱才能达到成熟，使得油菜播种期无法达到要求(10月播种)。因此，为了满足油菜-高粱轮作体系，第二茬再生高粱只能收获营养体或直接还田，不能充分利用，造成浪费。而本发明将再生的糯高粱制成青贮用来饲喂动物，既满足了油菜-高粱轮作体系，又充分利用了饲料资源。
附图说明
44.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
45.图1是本发明实施例提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法流程图。
具体实施方式
46.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
47.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
48.一、解释说明实施例。为了使本领域技术人员充分了解本发明如何具体实现，该部分是对权利要求技术方案进行展开说明的解释说明实施例。
49.本发明实施例提供了一种利用黑曲霉降低青贮再生糯高粱中氢氰酸的方法，选用再生糯高粱秸秆切碎装袋发酵制备而成。
50.如图1所示，本发明实施例提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法包括以下步骤：
51.s101，再生糯高粱品种选择：选择具有再生特性的酿酒高粱品种；
52.s102，再生高粱的收获：选择抽穗杨花期刈割距地表5cm的再生高粱；
53.s103，再生高粱青贮前处理：将全株高粱人工剪碎至2cm，水分控制在65％～75％；
54.s104，黑曲霉菌液添加处理：按照每3kg再生高粱添加150ml黑曲霉菌液和50ml无菌水的比例，混合均匀；
55.s105，装填、封口与保存：将切碎的原料装入塑料袋内，用真空封口机抽真空后密
封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏。
56.作为优选实施例，本发明实施例提供的降低再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的方法，具体包括以下步骤：
57.步骤一，再生糯高粱品种选择；
58.这里，选择经农业部或省级农作物品种审定委员会已审定的糯高粱品种，要求丰产性好，品质优，抗逆性强，适宜当地生态条件，确保其在当地大面积推广使用。
59.步骤二，再生糯高粱的收获；
60.再生高粱是高粱茎节上的休眠腋芽收割后从茎基部节发生分蘖，所以第一茬刈割时要距地表5cm，确保留下第一节，保证萌发。
61.步骤三，再生糯高粱青贮前处理；
62.切碎是为了便于装袋和贮藏，且切短的植物组织能渗出大量汁液，有利于乳酸菌生长，加速青贮过程。水分控制在65～75％，是因为适当的水分是微生物正常活动的重要条件，青贮原料含水量达65～75％时，最适乳酸菌繁殖，水分过低，影响微生物的活性，也难以压实，造成好气性菌大量繁殖，使饲料发霉腐烂；水分过多，糖浓度低，易结块。
63.步骤四，黑曲霉菌液添加处理；
64.原料切碎后立即加入添加物，目的是让原料快速发酵。
65.步骤五，装填、封口与保存；
66.抽真空是因为青贮饲料主要依靠乳酸菌的发酵作用(乳酸菌是厌氧菌，依靠植物中的糖分生存)在缺氧的环境下乳酸菌发育繁殖将饲料中的糖分变成乳酸，随着乳酸菌的不断繁殖，乳酸不断积累，酸度不断增强。
67.本发明实施例提供的青贮饲料的相关指标包括干物质、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、可溶性总糖、ph、氨态氮、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸以及氢氰酸含量；其中，青贮饲料相关指标的测定方法包括：
68.(1)青贮饲料和原料营养成分测定：对青贮饲料和原料进行预处理；干物质量测定采用烘干法，粗蛋白质含量测定采用凯氏定氮法，粗纤维含量测定采用酸碱消煮法，粗脂肪含量测定采用醚浸出法，粗灰分含量测定采用灰化法，可溶性总糖测定采用蒽酮比色法；
69.(2)贮饲料发酵品质测定：ph值测定采用ph法，乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量测定采用气相色谱法，氨态氮含量测定采用苯酚-次氯酸钠比色法；
70.(3)青贮饲料质量评定：采用日本v-score评分体系进行饲料质量评定；
71.(4)氢氰酸含量测定：采用异烟酸-吡唑啉酮法按照gb/t5009.36-2016食品中氰化物的测定方法进行青贮饲料中氢氰酸含量的测定。
72.本发明实施例提供的青贮饲料和原料的预处理包括：按试验要求进行青贮饲料和原料取样，置于105℃烘箱中杀青30min，再置于65℃烘干至恒重，将所得到的烘干样用粉碎机粉碎，过40目筛保存自封袋中，作为待测样品。
73.本发明实施例提供的贮饲料发酵品质测定方法中，称取开封后的样品20g置于三角瓶中，加入180ml蒸馏水，4℃下浸提24h，制成青贮浸提液；用快速定性滤纸过滤，所获得的滤液用于测定ph值、有机酸和氨态氮含量。
74.色谱条件为：汽化室参数为载气氮气，分流比40：1，进样量0.4μl，温度220℃；色谱柱参数为db-ffap毛细管色谱柱恒流模式，流量2.0ml/min，平均线速度38cm/s；柱温箱参数
为程序升温120℃保持3min后，以10℃/min上升至180℃保持1min；检测器参数为氢气流量40ml/min，空气流量450ml/min，柱流量和尾吹气流量45ml/min，火焰离子检测器温度250℃。
75.二、应用实施例。为了证明本发明的技术方案的创造性和技术价值，该部分是对权利要求技术方案进行具体产品上或相关技术上的应用实施例。
76.实施例1
77.本发明实施例提供的再生糯高粱青贮饲料改良制作方法包括以下步骤：
78.(1)再生糯高粱品种选择
79.本发明适用的糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱；
80.(2)再生高粱的收获
81.选择抽穗杨花期刈割再生高粱(距地表5cm)，备用；
82.(3)再生高粱青贮前处理
83.将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm左右，水分控制在65～75％左右；
84.(4)黑曲霉菌液添加处理
85.按照(200ml无菌水)/3kg、确保混合均匀；
86.(5)装填与封口
87.将切碎的原料装入青贮袋内，每袋约200g；
88.(5)封口与保存
89.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
90.实施例2
91.本发明实施例提供的再生高粱青贮饲料改良制作方法包括以下步骤：
92.(1)再生糯高粱品种选择
93.本发明适用的糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱；
94.(2)再生高粱的收获
95.选择抽穗杨花期刈割再生高粱(距地表5cm)，备用；
96.(3)再生高粱青贮前处理
97.将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm左右，水分控制在65～75％左右；
98.(4)黑曲霉菌液添加处理
99.按照(50ml黑曲霉菌液+150ml无菌水)/3kg、确保混合均匀；
100.(5)装填与封口
101.将切碎的原料装入青贮袋内，每袋约200g；
102.(6)封口与保存
103.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
104.实施例3
105.本发明实施例提供的再生高粱青贮饲料改良制作方法包括以下步骤：
106.(1)再生糯高粱品种选择
107.本发明适用的糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱；
108.(2)再生高粱的收获
109.选择抽穗杨花期刈割再生高粱(距地表5cm)，备用；
110.(3)再生高粱青贮前处理
111.将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm左右，水分控制在65～75％左右；
112.(4)黑曲霉菌液添加处理
113.按照(100ml黑曲霉菌液+100ml无菌水)/3kg、确保混合均匀；
114.(5)装填与封口
115.将切碎的原料装入青贮袋内，每袋约200g；
116.(6)封口与保存
117.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
118.实施例4
119.本发明实施例提供的再生高粱青贮饲料改良制作方法包括以下步骤：
120.(1)再生糯高粱品种选择
121.本发明适用的糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱；
122.(2)再生高粱的收获
123.选择抽穗杨花期刈割再生高粱(距地表5cm)，备用；
124.(3)再生高粱青贮前处理
125.将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm左右，水分控制在65～75％左右；
126.(4)黑曲霉菌液添加处理
127.按照(150ml黑曲霉菌液+50ml无菌水)/3kg、确保混合均匀；
128.(5)装填与封口
129.将切碎的原料装入青贮袋内，每袋约200g；
130.(6)封口与保存
131.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
132.实施例5
133.本发明实施例提供的再生高粱青贮饲料改良制作方法包括以下步骤：
134.(1)再生糯高粱品种选择
135.本发明适用的糯高粱品种为具有再生特性的酿酒高粱；
136.(2)再生高粱的收获
137.选择抽穗杨花期刈割再生高粱(距地表5cm)，备用；
138.(3)再生高粱青贮前处理
139.将全株再生糯高粱人工剪碎至2cm左右，水分控制在65～75％左右；
140.(4)黑曲霉菌液添加处理
141.按照(200ml黑曲霉菌液)/3kg、确保混合均匀；
142.(5)装填与封口
143.将切碎的原料装入青贮袋内，每袋约200g；
144.(6)封口与保存
145.用真空封口机抽真空后密封，将封口后的袋装青贮饲料置于室温避光保存，贮藏60天。
146.上述试验材料来源于重庆市北碚区西南大学实验基地(29
°
81＇n，106
°
40＇e)，选抽穗扬花期的再生糯高粱(晋渝梁3号)进行刈割，并作为青贮试验材料。黑曲霉(aspergillus nigervan tieghem)购于北京北纳创联生物技术研究院。试验采用完全随机设计。不同处理分别为：实施例1和实施例2简要说明，实施例1和实施例2室温下分别青贮60d后开袋进行相关测定分析。
147.相关指标测定包括：干物质、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、可溶性总糖、ph、氨态氮、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸(％)以及氢氰酸含量(mg/kg)。
148.1.测定方法
149.1.1青贮饲料和原料营养成分测定
150.按试验要求进行青贮饲料和原料取样，置于105℃烘箱中杀青30min，再65℃烘干至恒重，将所得到的烘干样用粉碎机粉碎，过40目筛保存自封袋中，作为待测样品。干物质(dry matter，dm)含量测定采用烘干法，粗蛋白质(crude protein，cp)含量测定采用凯氏定氮法，粗纤维(crude fiber，cf)含量测定采用酸碱消煮法，粗脂肪(ethanol extract，ee)含量测定采用醚浸出法，粗灰分(crude ash，ash)含量测定采用灰化法，可溶性总糖(water soluble carbohrrdrate，wsc)含量测定采用蒽酮比色法。
151.1.2青贮饲料发酵品质测定
152.称取开封后的样品20g置于三角瓶中，加入180ml蒸馏水，4℃下浸提24h，制成青贮浸提液。用快速定性滤纸过滤，所获得的滤液用于测定ph值、有机酸和氨态氮含量。ph值测定采用ph法，乳酸(lactic acid，la)、乙酸(acetic acid，aa)、丙酸(propionic acid，pa)、丁酸(butyric acid，ba)含量测定采用气相色谱法，氨态氮(ammonia-n，an)含量测定采用苯酚-次氯酸钠比色法。色谱条件为：汽化室参数为载气氮气(n2)，分流比40：1，进样量0.4μl，温度220℃；色谱柱参数为db-ffap毛细管色谱柱恒流模式，流量2.0ml/min，平均线速度38cm/s；柱温箱参数为程序升温120℃保持3min，然后以10℃/min上升至180℃保持1min；检测器参数为氢气(h2)流量40ml/min，空气流量450ml/min，柱流量+尾吹气流量45ml/min，火焰离子检测器(fid)温度250℃。
153.2.青贮饲料质量评定标准
154.采用日本v-score评分体系进行评定(引自《日本粗饲料评定手册》(2001))。满分为100分，据此将青贮饲料品质分为3个等级：良好(80分以上)，尚可(60～80分)，不良(60分以下)，评定结果如表1所示。
155.表1青贮饲料质量评定结果
[0156][0157]
3.氢氰酸含量测定
[0158]
采用异烟酸-吡唑啉酮法。参照gb/t5009.36-2016食品中氰化物的测定。
[0159]
三、实施例相关效果的证据。本发明实施例在研发或者使用过程中取得了一些积极效果，和现有技术相比的确具备很大的优势，下面内容结合试验过程的数据、图表等进行描述。
[0160]
本发明实施例提供的青贮原料的营养成分如表2所示。
[0161]
表2青贮原料的营养成分
[0162][0163]
表3黑曲霉对再生糯高粱青贮饲料营养成分的影响
[0164][0165]
注：同行不同小写字母代表显著差异(p《0.05)；实施例1：ck组，每3千克青贮料中添加200ml无菌水；实施例2：处理i，每千克青贮料中添加50ml黑曲霉菌液+150ml无菌水；实施例3：处理ii，每千克青贮料中添加100ml黑曲霉菌液+100ml无菌水；实施例4：处理iii，每千克青贮料中添加150ml黑曲霉菌液+50ml无菌水；实施例5：处理iv，每千克青贮料中添加200ml黑曲霉菌液，下同。
[0166]
由表3可知，与对照组相比，各处理组的cp含量都有显著升高(p《0.05)，且处理iii组cp含量显著高于处理i组、处理ii和处理iv组(p《0.05)；各处理组与对照组间wsc及ee含量无显著差异；与对照组相比，各处理组的dm、cf和ash含量都有显著降低(p《0.05)，且处理iii组dm和cf含量显著低于处理i组、处理ii和处理iv组(p《0.05)；处理ii组、iii组和iv组的ash含量显著低于处理i组(p《0.05)。
[0167]
表4黑曲霉对再生糯高粱青贮饲料发酵品质的影响
[0168][0169]
注：nd表示未检测到。
[0170]
由表4可知，与对照组相比，各处理组的ph值都显著降低(p《0.05)，且所有处理组都小于4.2，符合优良青贮的要求；与对照组相比，各处理组的la含量都显著增加(p《0.05)、aa含量和氨态氮/总氮比值显著降低(p《0.05)；对照组和各处理组间的pa含量无显著差异(p《0.05)；对照组和各处理组在发酵过程中均未检测到ba；表明添加黑曲霉菌液可以提高再生糯高粱青贮饲料品质。
[0171]
表5黑曲霉再生糯高粱青贮饲料品质评定
[0172][0173][0174]
由表5可知，各处理组v-score评分都在90分(良好水平)以上，高于对照组，且处理ⅲ组评分最高。
[0175]
表6黑曲霉对再生糯高粱青贮饲料氢氰酸含量的影响
[0176][0177]
由表6可知，与对照组相比，各处理组的氢氰酸含量值都显著降低(p《0.05)，且所有处理组都低于饲喂动物的安全值(200mg/kg)。
[0178]
试验结论：黑曲霉是再生糯高粱进行青贮发酵的优良促进剂，可提高发酵饲料品质，同时对氢氰酸有较好的去除效果。研究表明：添加黑曲霉菌液有效提高了青贮中乳酸、粗蛋白含量，明显降低了青贮中ph、干物质、氨态氮/总氮比值、粗纤维、粗灰分含量。氢氰酸降解效果以处理组iii(即每3千克青贮中添加150ml黑曲霉菌液+50ml无菌水)为最佳。从节约成本角度考虑，实施例4(处理iii组)是进行氢氰酸去除、青贮品质提高的最佳处理。
[0179]
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。