一种富含柚皮苷提取物及其制备方法

1.本发明涉及柚皮活性物质提取技术领域，具体涉及一种富含柚皮苷的提取物及其制备方法。


背景技术：

2.柚子是我国主要的经济果蔬品种之一，种植面积和产量均居世界首位，占世界柚类总产量的一半以上。柚子是体积最大的柑橘水果，果皮较厚，柚皮占到整个柚子重量的40-50%，由于受到传统加工工艺和加工技术等方面的限制，柚子果皮在绝大多数情况下都被当作废弃物扔掉，造成资源极大浪费。
3.柚皮苷是一种双氢黄酮类化合物，广泛存在于柚子皮和柚囊衣中，具有抗癌、抗氧化、降低胆固醇等一系列生理活性作用，具有重要的经济价值和社会效益。
4.目前，对于柚皮苷提取方法主要有以下几种：（1）水溶液提取法：水溶液提取法是功能性物质成分提取较为原始的方法，提取工艺简单、成本低，但传统的水溶液提取法提取时间长、提取率较低。（2）有机溶剂法：有机溶剂提取法是提取柚皮苷最常用一种方法，但有机溶剂法工艺相对繁杂，有机溶剂用量大，安全系数低，不适宜在工业生产中进行应用。（3）超临界流体萃取：超临界流体萃取能最大程度保留提取物的原有属性，但其设备昂贵，不适合应用于工业生产中。（4）酶提取法：酶具有高度的选择性，针对不同提取材料，选择合适的酶可以极大地提高提取效率，但酶对提取环境比较敏感，在提取过程中要严格控制酶反应的温度及ph，工业生产中对设备要求较高。
5.综上所述，寻找一种提取高效、操作简便、经济、安全且适于工业化生产的制备方法，从柚子皮中提取柚皮苷，具有重要意义。


技术实现要素：

6.本发明的目的之一是提供一种富含柚皮苷的提取物，目的之二是提供该提取物的制备方法，以弥补现有技术的不足。
7.为达到上述目的，本发明采取的具体技术方案为：一种富含柚皮苷提取物，该提取物是从柚子皮中进行微压水浸提取得到的，柚皮苷的含量在80%以上。
8.所述富含柚皮苷提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：（1）柚子皮挑选：将新鲜、无腐烂变质的柚皮剥下，切成1 cm左右的块状；（2）烘干：将柚子皮低于60℃烘干至水分含量≤ 5%；（3）粉碎、过筛：用高速万能粉碎机将柚子皮粉碎过筛备用；（4）提取：按一定体积比，在柚皮粉中加入水加热加压进行提取，趁热抽滤，得到提取物。
9.进一步的，所述步骤（1）中柚子可以选用重庆梁平柚。
10.进一步的，所述步骤（2）中温度为55℃。
11.进一步的，所述步骤（3）中过40目筛。
12.进一步的，所述步骤（4）中质量体积比为料（柚皮粉）：液（蒸馏水）= 1:10；提取温度为80-120℃；提取压力为0.11-0.14 mpa；提取时间为10-120 min。
13.本发明的优点和有益效果：本发明的提取工艺使用水做提取试剂，所获得的提取液中柚皮苷含量高，且制备工艺价格低廉，经济环保，安全性高，工艺简单易于实现工业化，可以快速、稳定、规模化的提取柚皮中的黄酮类化合物，适于工厂化生产柚皮中的黄酮类物质。
14.本发明提取获得的提取物具有良好的dpph清除能力，具有很好的抗氧化活性，可以应用于饮料、化妆品等深加工领域。
附图说明
15.图1是实施例1中制备得到的提取液hplc色谱图。
16.图2是实施例2中制备得到的提取液hplc色谱图。
17.图3是实施例3中制备得到的提取液hplc色谱图。
18.图4是本发明制备工艺中不同加热温度条件下提取物中柚皮苷含量。
19.图5是本发明制备工艺中不同加热温度条件下提取物中柚皮苷提取率。
20.图6是本发明制备工艺中不同加热温度条件下提取物dpph清除率。
具体实施方式
21.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
22.本发明实施例中揭露的数值是近似值，而并非确定值。在误差或者实验条件允许的情况下，可以包括在误差范围内的所有值而不限于本发明实施例中公开的具体数值。
23.实施例1：一种富含柚皮苷的提取物的制备方法，该制备方法包括以下步骤：（1）柚子皮挑选：选用重庆梁平柚，将新鲜、无腐烂变质的柚皮剥下，切成1cm的块状；（2）烘干：将柚子皮55℃烘干至水分含量≤ 5%；（3）粉碎、过筛：用高速万能粉碎机将柚子皮粉碎，过40目筛备用；（4）常压加热水提：按体积比为料（柚皮粉）：液（蒸馏水）= 1:10，在柚皮粉中加入水进行提取，提取温度为80℃，提取时间为120 min。提取后趁热抽滤，得到提取物。
24.实施例2：一种富含柚皮苷的提取物的制备方法，该制备方法包括以下步骤：（1）柚子皮挑选：选用重庆梁平柚，将新鲜、无腐烂变质的柚皮剥下，切成1 cm的块状；（2）烘干：将柚子皮55℃烘干至水分含量≤ 5%；（3）粉碎、过筛：用高速万能粉碎机将柚子皮粉碎，过40目筛备用；（4）微压加热水提：按体积比为料（柚皮粉）：液（蒸馏水）= 1:10，在柚皮粉中加入
水进行提取，提取温度为110℃，提取时间为120 min，压力为0.11 mpa。提取后趁热抽滤，得到提取物。
25.实施例3：一种富含柚皮苷的提取物的制备方法，该制备方法包括以下步骤：（1）柚子皮挑选：选用重庆梁平柚，将新鲜、无腐烂变质的柚皮剥下，切成1 cm的块状；（2）烘干：将柚子皮55℃烘干至水分含量≤ 5%；（3）粉碎、过筛：用高速万能粉碎机将柚子皮粉碎，过40目筛备用；（4）微压加热水提：按体积比为料（柚皮粉）：液（蒸馏水）= 1:10，在柚皮粉中加入水进行提取，提取温度为120℃，提取时间为120 min，压力为0.14 mpa。提取后趁热抽滤，得到提取物。
26.实施例4、5本发明采用液相色谱（hplc）法测定提取液中柚皮苷含量。
27.hplc色谱条件：色谱柱：agilent zorbax eclipse plus c18（100
ꢀ×ꢀ
4.6mm, 3.5
ꢀµ
m）流动相：乙腈（a）和水（b），采用梯度洗脱，洗脱程序为：（1）0-8 min，23% a；（2）8-13 min，65% a；（3）14-16 min，70% a；（4）17-18 min，73% a；（5）19-20 min，23% a；柱温：40℃；流速：1.0 ml
·
min-1
，进样量为 10.0
ꢀµ
l；检测波长：280 nm；分别取5 ml实施例1-3中得到的富含柚皮苷的提取物加入5 ml乙酸乙酯萃取，保留上层萃取液，将下层萃取液重新加入5 ml乙酸乙酯进行萃取，重复2-3次，合并萃取液，于55℃下旋转蒸发浓缩，待旋蒸瓶中剩1 ml左右液体时，取下氮吹至出现白色至浅黄色颗粒。向旋蒸瓶中加入5 ml色谱级甲醇复溶，过0.45
ꢀµ
m滤膜获得柚皮黄酮提取物，进行液相色谱分析。
28.实施例4得到的hplc色谱图分别如图1-3所示，根据hplc色谱谱图峰面积，可知柚皮提取物中柚皮苷占比为80.63%-89.84%。提取物中柚皮苷含量及提取率测试结果如表1，实施例1-3中柚皮提取物中柚皮苷的含量为0.335-0.721 mg/ml，提取率为1.72%-3.74%。测试结果表明，微压条件下提取物中柚皮苷含量明显高于常压条件下提取，微压加热条件更有利于柚皮苷的提取。如图4、5所示，在微压提取条件下，本发明制备的富含柚皮苷的提取物提取率可以达到3.74%，提取率高。有效的解决了现有技术中水溶液提取法柚皮苷提取率低的问题，并且使用水做提取试剂，价格低廉，经济环保，安全性高，工艺简单易于实现工业化，可以快速、稳定、规模化的提取柚皮中的柚皮苷。
29.表1 提取液中柚皮苷浓度和柚皮苷含量
本发明采用分光光度法测定柚皮提取液中dpph清除率。
30.将实施例1-3中得到的富含柚皮苷的提取物稀释10倍后，测试其dpph清除能力，测试结果表明提取物dpph清除能力为59.29%-82.14%，实施例1-3的dpph清除率如图6所示，本发明制备的富含柚皮苷的提取物具有清除dpph自由基活性的功效，表明其在生化水平上具有抵御氧化损伤的能力，具有产品开发的潜力。
31.本发明一种富含柚皮苷的提取物的制备方法，在原来水提工艺的基础上，进行加热加压提取，并对加热加压进行了优化和改进，发现在微压条件下，提取无中柚皮苷浓度较高。本发明对水提条件进行了优化，提高了柚皮中柚皮苷的提取率。获得所述的提取物，柚皮苷含量为0.335
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0.721 mg/ml，dpph清除能力为59.29%-82.14%。
32.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不构成对权利要求范围的限制，本领域内技术人员可以想到的其他实质上等同的替代，均在本发明保护范围。