含唾液酸的组合物及其在益生菌增殖和调节免疫中的应用的制作方法

本发明涉及益生菌，尤其涉及一种含唾液酸的组合物及其在益生菌增殖和调节免疫中的应用。

背景技术：

1、对于婴儿而言，母乳喂养是最为理想的，但是由于多种原因只能用牛乳或其他动物乳来替代母乳喂养。人们发现，母乳的具体组成随着哺乳期的时间推进而变化。母乳可以分为初乳（哺乳期0-5天）、早期乳（6-15天）、过渡乳（哺乳期16-30天）和成熟乳（31-360天）四个阶段，其蛋白质、脂肪、碳水化合物等成分呈现动态变化。母乳的这些变化，可能是为了更好地适应婴幼儿在不同阶段对营养物质和发育所需。婴幼儿营养组合物也在深入研究不同阶段中具有更加精细和贴近母乳的配方。

2、已知母乳中含有丰富的免疫成分，如乳铁蛋白、免疫球蛋白、乳脂球膜等，已有丰富的研究证实它们在调节肠道微生态、抑制病原菌定植、与免疫细胞相互作用促进免疫球蛋白igg、iga活化、促进中性粒细胞发育、防止上呼吸道病毒感染、降低过敏、促进婴幼儿免疫功能发育等方面的作用。

3、这些免疫分子多数为聚糖修饰的糖缀合物，包括糖蛋白、糖肽、糖脂等，还包括由单糖单元组成的游离母乳低聚糖等结构。

4、唾液酸（n-乙酰基神经氨酸）是一种对哺乳动物发育、细胞识别、细胞黏附和信号传导至关重要的链状糖分子，也是母乳中糖缀合物及母乳低聚糖末端常见的单糖单元。唾液酸可被唾液酸结合免疫球蛋白凝集素受体（siglecs）识别，抑制或激活免疫细胞。唾液酸与蛋白或脂质连接形成的糖缀合物，是潜在的siglecs反式配体，可能提高siglecs的亲和力。

5、已知人类初乳（hc）、过渡期（ht）和成熟乳（hm）中n-聚糖呈现动态变化，从hc、ht、hm中分别鉴定了27、37和33种n-聚糖，其中唾液酸化n-聚糖的相对含量增加，并且发现在哺乳期间岩藻糖基化n-糖减少。

6、乳铁蛋白是一种由上皮细胞持续分泌的多功能免疫蛋白，存在母乳、泪液和中性粒细胞中，是母乳中含量丰富且具备重要生理功能的一种蛋白。乳铁蛋白具有多种功能，其抗菌特性最突出。

7、“唾液酸化乳铁蛋白”是指碳水化合物以寡糖形式在乳铁蛋白上的天冬酰胺的侧链氨基部分（-nh2）连接、且寡糖基末端为唾液酸的乳铁蛋白。从结构上来讲，乳铁蛋白是一个包含约700个氨基酸的多肽链，此肽链的两端是两个同源球状域，即n-环和c-环。n-环对应第1-333个氨基酸残基，而c-环对应第345-692个氨基酸残基，这两个域由一段短链α-螺旋相连接。n-环和c-环都包含金属离子（如铁、锌等）结合位点和糖基化位点（即可以和碳水化合物进行糖基化反应的氨基酸）。一般来说，牛乳铁蛋白的糖基化位点为第233位、第368位、第476位、以及第545位的天冬酰胺残基（asparagine，asn）；人乳铁蛋白的糖基化位点为第138位和第479位天冬酰胺残基（asn 138 和asn 479）。

8、有研究认为母乳蛋白的糖基化可能会阻断或调节病原体与上皮表面细胞的结合，这可能是母乳喂养的婴儿胃肠道受到保护、免受感染的原因。

9、已有的母乳替代品和婴幼儿营养品主要考虑母乳中蛋白、脂质和碳水化合物的种类、数量和功能，但很少考虑糖缀合物在泌乳过程中的聚糖变化对肠道菌群的影响及其功能，使得婴幼儿无法得到与母乳喂养相同或相似的健康益处。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种组合物。

2、本发明的目的之二在于提供组合物的应用。

3、本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

4、一种组合物，其特征在于，按照重量百分比计，包括唾液酸化乳铁蛋白5-10%，和/或，唾液酸化乳脂球膜70-90%，所述组合物中总唾液酸的含量大于0.1mg/g。

5、作为本发明可选的方案，所述组合物还包括益生菌菌粉。补充合适的益生菌有助于受试者的健康成长，特别地，补充的益生菌可以利用唾液酸化乳铁蛋白和/或唾液酸化乳脂球膜上的唾液酸为碳源，促进自身的生长，从而更好地助于受试者健康，例如有利于肠道健康、促进排便、提高免疫等。

6、所述受试者可以包括不同年龄段的人群，例如婴幼儿群体、青少年群体、成年人群体和中老年人群体。

7、作为本发明可选的方案，所述益生菌菌粉包括双歧杆菌菌粉和/或乳杆菌菌粉。双歧杆菌是人体肠道的一类益生菌，乳杆菌也是人体肠道中一种常见的菌，补充合适的双歧杆菌、乳杆菌，可以调节肠道菌群的平衡，改善肠道功能，提高免疫功能等。此外，双歧杆菌和乳杆菌具有唾液酸代谢能力，它们可以利用唾液酸化乳铁蛋白和/或唾液酸化乳脂球膜上的唾液酸为碳源，促进自身的生长，从而更好地助于受试者健康。

8、作为本发明可选的方案，所述双歧杆菌包括长双歧杆菌、短双歧杆菌、动物双歧杆菌、乳双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中的一种或任意组合；优选地，所述双歧杆菌包括动物双歧杆菌bb12和/或长双歧杆菌bb536。

9、作为本发明可选的方案，所述乳杆菌包括鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌和发酵乳杆菌中的一种或任意组合；优选地，所述鼠李糖乳杆菌包括鼠李糖乳杆菌lgg；所述发酵乳杆菌包括发酵乳杆菌lc40(cect5716)。

10、作为本发明可选的方案，按照重量百分比计，所述组合物还包括益生菌菌粉0.5-20%；优选地，所述益生菌菌粉的占比为0.5-10%，更加优选地为1-5%，例如，所述组合物中益生菌菌粉的占比为0.5%，0.8%，1%，1.3%，2%，2.6%，3%，3.5%，4%，4.5%，5%，6%，7%，8%，9%，10%等。

11、作为本发明可选的方案，所述组合物中的唾液酸由唾液酸化乳铁蛋白和/或唾液酸化乳脂球膜提供，即所述组合物中的唾液酸仅由唾液酸化乳铁蛋白和/或唾液酸化乳脂球膜提供，不包含游离的唾液酸。例如，当所述组合物同时包含唾液酸化乳铁蛋白和唾液酸化乳脂球膜时，组合物中的唾液酸仅由唾液酸化乳铁蛋白和唾液酸化乳脂球膜提供。

12、作为本发明可选的方案，本发明所提供的组合物，可以包含游离的唾液酸，即所述组合物包含唾液酸化乳铁蛋白，和/或，唾液酸化乳脂球膜外，还可以包含游离的唾液酸。

13、作为本发明可选的方案，按照重量百分比计，所述组合物包括唾液酸化乳铁蛋白5-10%，唾液酸化乳脂球膜70-90%，益生菌菌粉0.5-20%；所述组合物中的总唾液酸含量大于0.5mg/g。

14、作为本发明可选的方案，按照重量百分比计，所述组合物包括唾液酸化乳铁蛋白5-10%，唾液酸化乳脂球膜70-90%，益生菌菌粉0.5-10%；所述组合物中的总唾液酸含量大于0.5mg/g。

15、作为本发明可选的方案，按照重量百分比计，所述组合物包括唾液酸化乳铁蛋白6-9%，唾液酸化乳脂球膜75-85%，益生菌菌粉1-5%；所述组合物中的总唾液酸含量大于0.8mg/g。

16、作为本发明可选的方案，按照重量百分比计，所述组合物包括唾液酸化乳铁蛋白8.5%，唾液酸化乳脂球膜90%，益生菌菌粉1.5%；所述组合物中的总唾液酸含量大于1mg/g。

17、作为本发明可选的方案，所述组合物中的总唾液酸含量为1~25mg/g，优选为1~20mg/g，也可以为1~2mg/g，更加具体地，可以为1mg/g、1.3mg/g、1.4mg/g、1.5mg/g、2mg/g、5mg/g、10mg/g、15mg/g、20mg/g等。

18、作为本发明可选的方案，所述唾液酸化乳铁蛋白中的唾液酸含量为20~50μg/g；所述唾液酸化乳脂球膜中的唾液酸含量为1300~1800μg/g。

19、作为本发明可选的方案，所述益生菌菌粉中益生菌的活菌数为1×106~1×1012 cfu/g（cfu/ml）。

20、作为本发明可选的方案，所述组合物用于调节肠道内的唾液酸水平；

21、和/或，所述组合物用于调节肠道内益生菌水平；

22、和/或，所述组合物用于调节免疫。

23、作为本发明可选的方案，所述组合物用于促进肠道内具有唾液酸代谢能力的益生菌生长，所述益生菌包括双歧杆菌和/或乳杆菌；

24、和/或，所述组合物用于调节细胞因子no、tnf-α、il-1β、il-6、il-10和il-12的水平，以调节免疫系统的功能。

25、本发明的目的之二采用如下技术方案实现：

26、本发明还提供了将目的之一任一项所述的组合物在制备食品、保健品、药品和营养补充剂中的应用。

27、作为本发明可选的方案，所述食品包括乳粉和乳液。所述食品可以为婴幼儿食品、青少年食品、或中老年人食品。所述乳粉可以为婴幼儿乳粉、青少年乳粉、或中老年人乳粉。所述乳液可以为婴幼儿乳液、青少年乳液、或中老年人乳液。

28、本发明还提供了将目的之一任一项所述的组合物在制备调节肠道内唾液酸水平产品中的应用。

29、例如，一种用于调节肠道内唾液酸水平的产品，包括目的之一任一项所述的组合物。

30、本发明还提供了将目的之一任一项所述的组合物在制备调节肠道内益生菌水平产品中的应用。优选地，所述调节肠道内益生菌水平包括促进肠道内具有唾液酸代谢能力的益生菌生长，所述益生菌包括双歧杆菌和/或乳杆菌。

31、例如，一种用于调节肠道内益生菌水平的产品，包括目的之一任一项所述的组合物。

32、本发明还提供了将目的之一任一项所述的组合物在制备调节免疫力产品中的应用。

33、例如，一种用于调节免疫力的产品，包括目的之一任一项所述的组合物。

34、本发明还提供了一种营养制品，所述营养制品包括目的之一任一项所述的组合物。所述营养制品除了包括奶粉外，还可以包括液体奶、酸奶、奶酪、婴幼儿米粉等。

35、本发明还提供了一种奶粉，所述奶粉包括目的之一任一项所述的组合物，所述奶粉中唾液酸的重量百分比为0.07-0.25%；更加优选地，所述奶粉中唾液酸的重量百分比为0.07-0.15%，即所述奶粉中，唾液酸在奶粉中的含量为70-150mg/100g奶粉。

36、本发明还提供了一种奶粉，所述奶粉包括目的之一任一项所述的组合物，所述组合物在所述奶粉中的重量百分比为3-10%，优选地为3-8%。更加优选地，所述组合物在所述奶粉中的重量百分比为3.7-4.3%，即在所述奶粉中，100g奶粉含有3.7-4.3g所述组合物（所述组合物可以为唾液酸化乳铁蛋白和唾液酸化乳脂球膜的组合，优选为唾液酸化乳铁蛋白、唾液酸化乳脂球膜和益生菌菌粉的组合）。

37、本发明所提供的奶粉，奶粉中的唾液酸除了可以由唾液酸化乳铁蛋白和唾液酸化乳脂球膜提供外，还可以由奶粉中的其它成分提供，例如游离的唾液酸、唾液酸化母乳低聚糖，神经节苷脂等。

38、本发明所提供的奶粉，所述奶粉包括婴幼儿奶粉、青少年奶粉、成年人奶粉和中老年人奶粉。

39、本发明所提供的奶粉，除了包含目的之一任一项所述的组合物外，还可以包括其他成分，例如，其他成分可以包括以下中的一种或多种：蛋白质、氨基酸、碳水化合物、低聚糖、脂质、膳食纤维、益生元、必需脂肪酸、核苷酸、维生素、矿物质和其它微量营养素。

40、其中，蛋白质可以包括但不限于：酪蛋白、α-乳白蛋白、乳清、大豆蛋白、大米蛋白、玉米蛋白、燕麦蛋白、大麦蛋白、小麦蛋白、黑麦蛋白、豌豆蛋白、菜籽(油菜籽)蛋白、卵蛋白、葵花籽蛋白、马铃薯蛋白、鱼蛋白、肉蛋白、血清白蛋白或免疫球蛋白，以及它们的任意组合。

41、氨基酸可以包括但不限于：亮氨酸、苏氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、精氨酸、丙氨酸、组氨酸、脯氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、丝氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，以及它们的任意组合。

42、碳水化合物可以包括但不限于：乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精或淀粉，以及它们的任意组合。

43、低聚糖可以包括但不限于：低聚半乳糖(gos)、低聚果糖(fos)、异麦芽低聚糖(imo)、低聚木糖(xos)、低聚阿拉伯木糖(axos)、低聚甘露糖(mos)、大豆低聚糖、2’-唾液酸乳糖、2’-唾液酸乳糖胺、3’-唾液酸乳糖、3’-唾液酸乳糖胺、6’-唾液酸乳糖、6’-唾液酸乳糖胺、2’-岩藻糖基乳糖或乳糖-n-新四糖，以及他们的任意组合。

44、脂质可以包括但不限于：棕榈油精、高油酸葵花油、高油酸红花油、亚麻籽油、核桃油、芥花油、鱼油、椰子油、牛乳脂或1,3-二油酸2-棕榈酸甘油三酯，以及它们的任意组合。

45、膳食纤维可以包括但不限于：聚葡萄糖、可溶性纤维、大豆纤维或菊粉，以及它们的任意组合。

46、益生元可以包括但不限于：聚葡萄糖（pdx）、半乳糖、低聚半乳糖(gos)、低聚果糖(fos)、异麦芽低聚糖(imo)、低聚木糖(xos)、低聚阿拉伯木糖(axos)、低聚甘露糖(mos)、大豆低聚糖等。

47、必需脂肪酸可以包括但不限于：亚油酸(la)、α-亚麻酸(ala)和多不饱和脂肪酸(pufa)、dha、神经节苷脂(单唾液酸神经节苷脂3(gm3)和双唾液酸神经节苷脂3(gd3))、磷脂(诸如鞘磷脂、磷脂磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷酯酰丝氨酸)等。

48、核苷酸可以包括但不限于：单磷酸胞苷(cmp)、单磷酸尿苷(ump)、单磷酸腺苷(amp)或单磷酸鸟苷(gmp)，以及它们的组合。

49、维生素、矿物质和其它微量营养素可以包括但不限于：维生素a、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b9、维生素b12、维生素e、维生素k、维生素c、维生素d、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸、l-肉碱以及它们的组合。矿物质通常以盐的形式添加。

50、相比现有技术，本发明的有益效果在于：

51、本技术方案所提供的组合物，可有效的调节肠道微生态，调节免疫，促进肠道具有唾液酸代谢能力的菌群生长，增强对炎症因子的抑制效果。