具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶及其制备法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及茶饮料技术领域，更具体地设及一种具有抗氧化协同增效作用最佳配 比的桂花茶及其制法和用途-用于抗衰老、抗癌、降血糖。
【背景技术】
[0002] 桂花，又名木禪、岩桂，是中国传统十大花弁之一，原产于中国西南喜马拉雅山东 段。现广泛栽种于淮河流域及W南地区，其适合生长的区域北可抵黄河下游，南可至两广、 海南等地。桂花品种繁多，大约有152个品种，可分为四个品系，即四季桂、丹桂、银桂、金 桂。桂花除了观赏美化W外，还具有较高的营养和药用价值。对于桂花的成分研究已经具 备一定的基础，其主要活性成分为黄酬类化合物、Ξ祗类化合物、苯乙醇巧类化合物等。桂 花提取物具有抗氧化及清除自由基、抗炎、降血糖、降血脂及抑菌等生理作用。茶叶作为我 国重要经济作物，在中国已经有3000余年的历史，民间素有"不可一日无茶"之说，而对它 的成分研究也是比较成熟。茶叶中所含的生物活性成分主要有生物碱、茶多酪、多糖等，在 抗癌、抗衰老、降血脂等方面也有重要的作用。
[0003] W桂花和茶叶做原料制作的桂花茶是中国特产茶，它香气柔和、味道可口，为大众 所喜爱。桂花茶是时下比较受欢迎的饮品，在我国的消费市场已具有一定的规模。它是两 种单品的复合物，而它们各自所含的部分化学成分都有清除自由基的作用。然而，迄今为止 人们对桂花茶混合物中两种单品相互作用的研究非常少。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶及 其制备方法和用途。
[0005] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花 茶，该桂花茶由桂花干：茶叶=3~5:1的质量比混合而得。
[0006] 作为本发明的具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的改进：桂花为四季桂、丹 桂、金桂、银桂。
[0007] 作为本发明的具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的进一步改进：茶叶为西湖 龙井、祁Π红茶、安溪铁观音、普巧茶。
[0008] 作为本发明的具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的改进：桂花干：茶叶= 4:1的质量比。
[0009] 本发明还同时提供了上述具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的制备方法，包 括W下步骤：
[0010](a)、利用冻干-真空微波联合干燥技术制备桂花干：
[0011] 先进行真空冷冻干燥：将桂花在-55~-65°c(较佳为-60°c)的超低溫中速冻 2. 5~3. 5h(较佳为3h)后，于冷阱溫度0°C真空度IPa的条件下干燥，直至桂花中的水分 含量为35~45% (质量％，例如为37%);
[0012] 然后将上述真空冷冻干燥处理后的桂花进行真空微波干燥，直至所得的桂花干中 的水分含量为9~11% (质量％ );
[0013] 该桂花干作为加工桂花茶的原料； 阳014] 化）、加工桂花茶：将桂花干和茶叶按相应质量比（即桂花干：茶叶=3~5:1，较 佳为4:1)拼和后，先于48~52°C(较佳为50°C)加溫誓制22~28min(较佳为25min)， 然后于8~12°C冷却25~50分钟（从而实现快速充分冷却），最后置于密闭的环境中做 后续的吸香处理18~22天（较佳为20天）；得桂花茶。
[0015] 备注说明：上述吸香处理能让茶叶更加充分吸收花香和实现更加牢固的吸附作 用，从而获得作为成品的桂花茶。
[0016] 作为本发明的具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的制备方法的改进：
[0017] 所述步骤（a)中真空微波干燥为：真空度为0. 〇95MPa，微波功率2W/g。
[0018] 作为本发明的具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的制备方法的进一步改进： 所述步骤化）中吸香处理时的密闭环境的溫度为25~35°C。
[0019] 本发明还同时提供了上述具有最佳抗氧化协同增效作用的桂花茶的用途：用于制 备抗衰老的保健品或食品。
[0020] 在本发明中，茶叶均是通过市购的方式获得，其含水量《5%。
[0021] 本发明为选择抗氧化协同最佳配比，曾采用等高线图解分析法比较桂花茶的抗氧 化能力，W下为具体的实验步骤：
[0022] 一、检测桂花茶叶抗氧化能力的方法如下：
[0023](a)、清除ABTS自由基能力测定方法
[0024] 分别配置7. 4mMABTSW及2. 6mM过硫酸钟水溶液，临用前等体积混合，37°C避光 反应12h，配成ABTS胆备液，稀释45倍后使用，胆备液可保存一周，稀释液现配现用。取稀释 一定倍数的样品6μL于96孔板，加入180μL稀释过的ABTS储备液，37°C避光反应60min 后于734nm处测定吸光度，平行Ξ组实验测定。 阳0巧]化）、清除DPPH自由基能力测定方法
[00%] 实验前精确称取2m曲PPH溶于适量甲醇中，定容至现配现用。取稀释一定倍 数的所得6μL样品，加入234uLDPPH，37°C避光反应60min，于515皿波长处测吸光度，平行 Ξ组实验测定。
[0027] 二、运用等高线图解分析法对其抗氧化协同增效作用进行评价，通常包括W下几 个步骤：
[0028](a)、
[0029] 样品提取：称取桂花茶Ig于烧杯中，加入45血沸水后55°C水浴中放置30min，然 后使用纱布过滤，定容到50mL容量瓶中，得桂花提取液；长期保存需置于-20°C冰箱中。
[0030] 在实际中，桂花茶对人体的作用是在经过唾液、胃液及肠液的消化吸收之后发挥 作用，故此，对桂花茶进行模拟消化实验。根据人类摄食的特点，将体外消化模型分为Ξ个 阶段，分别为口腔消化阶段、胃消化阶段和肠消化阶段，模拟消化液配制见表1。
[0031] 表1模拟消化液组成
[0032]
[0033]
[0034] 提取液的预处理（即进行模拟消化实验）：
[0035] 配制完成后，取lOmL桂花茶提取液与烧杯中，加入3mL唾液，37°C条件下水浴恒溫 5min，加入6mL胃液37°C条件下避光化，加6mL肠液于其中摇匀，然后加入到透析袋中并将 其放入500mL大烧杯中，在其中加入约150mL0. 9%化C1使消化液浸没，继续37°C条件避 光反应化。将透析液在47°C下旋蒸，并用蒸馈水定容到lOmU分装后存放在-20°C冰箱中。 样品预处理完成，即，得到桂花茶消化后样品。
[0036] 备注说明：
[0037] 将上述"桂花茶"相应的改成"茶"、"桂花"，如同上文进行样品提取、提取液的预处 理（即进行模拟消化实验），从而相应获得茶消化后样品、桂花消化后样品。
[0038] 化）、测定桂花茶在抗氧化实验中的IC50值，构建等高线图，W桂花的IC50值为横 坐标，W茶叶的IC50值为纵坐标，连接横纵坐标的IC50值，构成相加线及其95%置信区间， 各个提取物的IC50W及相连的95%的置信限可W通过各个提取物的对数剂量-效应关系 线性回归曲线得出（至少四个剂量）。
[0039] (c)、从理论上选取桂花茶叶的固定比例，固定比例的混合药物的IC50,add值，可 通过下述公式计算：1巧0,add=I巧0,A/(P1+RXP2)其中，R为两物质单独应用时的效价 比，P1为桂花在混合物中所占比例，P2为茶叶在混合物中所占比例。 W40] (d)、确定固定桂花茶比例的混合物在实验中实际得到的ICwmu值，ICwmu即由实 验确定的固定比例的桂花茶获得50%效应时所需的总量，该值可W从桂花茶的剂量-效应 曲线上求得。 阳0川 （e)、采用Studenttest等统计方法对各比例比较。
[00创 讯、根据桂花茶的ICs。值位置判断他们之间的相互作用。当理论ICsegdd和各自 的实验ICwmu没有显著性差异时，则表明桂花和茶叶相互作用的类型为相加；如果ICeemu显 著低于ICsCadd(在相加线下方）时，则说明桂花和茶叶具有协同作用；如果ICsCmu显著高于 ICwgdd(在相加线上方）时，则说明桂花和茶叶具有括抗作用。
[00创备注说明：图2和图3中，CI是指相互作用指数；
[0044]
W45]式中，瓜5。止》瓜5。止》分别为复合组中4,6两种抗氧化剂的^5。值，^5。,4,咕。^ 分别为AB两种抗氧化剂单独作用时的IC50值。
[0046] 本发明还利用UPLC方法分析了桂花茶（桂花：茶叶配比为3:1~5:1)的主要功 能性成分。具体操作如下：
[0047] (a)、W色谱级甲醇为溶剂，将心茶氨酸化-CA巧、没食子酸（GA)、没食子儿茶素 (GC)、红景天巧（SAL)、表没食子儿茶素巧GC)、儿茶素（C)、咖啡因（CAF)、咖啡酸（CAC)、 表没食子儿茶素没食子酸醋巧GCG)、没食子儿茶素没食子酸