一种益生菌发酵枇杷叶的组合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种益生菌发酵枇杷叶组合物及其制备方法，属于功能性保健品领 域。
【背景技术】
[0002] 枇杷叶(Eriobotrya japonica Thunb.)为蔷薇科植物枇杷的叶子。有清肺止咳， 和胃利尿，止渴的功效。中国大部分地区均有栽培，分布于中南及陕西、甘肃、江苏、安徽、浙 江、江西、福建、台湾、四川、贵州、云南等地，全年均可采收。枇杷叶是我国长期收录于药典 的中药，因其药效对人体特别安全，无副作用，于2014年被批准为新资源食品（国卫计委 【2014】20号）。
[0003] 目前，对于枇杷叶产品的开发，主要集中于将不同原料简单的配比，做成具有不同 功效的保健饮品，如清热润肺饮料其制备方法(专利号：CN201310592032)、一种枇杷保健 饮料及其制备方法(专利号：CN201310605007)等，这些方法简单粗放，虽具有一定功效，但 真正能被人体所吸收利用的有效成分微乎其微，浪费严重，故对枇杷叶应进行深开发，使产 品有效成分得以充分利用，科技含量更高，以满足消费者的需求。
[0004] 人体肠道中寄居着大量的微生物种群，其中益生菌对人体健康起着至关重要的作 用。益生菌可以分解代谢上消化道系统不能分解代谢的食物成分，产生短链脂肪酸，为胃肠 粘膜细胞提供营养物质。同时对于口服药物尤其是天然药物的某些成分可以进行分解代 谢，将药物的前体物质转化成为活性药物成分而发挥作用。
【发明内容】
[0005] 本发明是利用现代生物技术，将枇杷叶经益生菌发酵，体外模拟人体肠道环境，提 前对枇杷叶中的各种有效成分，进行分解，使其进入人体后直接被吸收，减轻人体负担，同 时添加益生元，调节人体肠道环境。
[0006] 本发明的一个目的在于提供一种益生菌发酵枇杷叶的组合物，所述的组合物为枇 杷叶经干燥，粉碎成粉，经水浸，添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉和甜味剂，添加无机 盐，灭菌后经益生菌发酵处理，添加聚葡萄糖、低聚果糖浆，得到益生菌发酵枇杷叶的组合 物。
[0007] 所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌。
[0008] 该益生菌发酵枇杷叶的组合物具有有清肺止咳，和胃利尿，止渴，调节肠道菌群平 衡，改善胃肠功能等作用。
[0009] 本发明的另一个目的是提供一种益生菌发酵枇杷叶的组合物的制备方法，包括以 下步骤： (1)粉碎:将干燥枇杷叶粉碎，细度在100目以上(通常采用普通的粉碎技术制备枇杷叶 粉，经粉碎后，原料的比表面积增加，从而更有利于原料有效成分的溶出，大大增加了原 料有效成分的提取率）。
[0010] (2)制备提取物:取枇杷叶粉，加入蒸馏水浸泡30分钟，向浸泡液中添加葡萄糖、蛋 白胨、酵母膏、酵母粉，添加无机盐，添加甜味剂，调节PH值6.5-7.0，115°C灭菌50分钟，得 到无菌枇杷叶提取物。
[0011] (3)发酵：当无菌枇杷叶提取物温度降至39°C时，接种预培养的体积百分比各为 0.5%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约3~8小时后，再次接种预培养的体积百 分比各为0.5%的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续发酵20~22小时。当pH值降至4.2以下 时，降低发酵温度至28°C，继续发酵至pH值降至4.0，结束发酵，即得到益生菌发酵枇杷叶 液。
[0012] (4)调配、灭活:将(3)中益生菌发酵枇杷叶液过管式离心机过滤、离心，得离心液； 离心液中添加聚葡萄糖、低聚果糖浆(G 55L)，搅匀溶解；115°C左右灭菌15分钟后，得益生 菌发酵枇杷叶的组合物。
[0013] 上述制备方法中，在步骤(2 )中所取枇杷叶粉在蒸馏水浸泡液中的重量g/体积ml 百分比为6-10%。
[0014] 上述制备方法中，在步骤(2 )中加入重量g/体积ml百分比为0.5~1.5%的葡萄糖、重 量g/体积ml百分比为0.1~1%的蛋白胨、重量g/体积ml百分比为0.05~0.2%的酵母霄、重量g/ 体积ml百分比为0.01~0.1%的酵母粉，所述的无机盐为K 2HP〇4.3H20 0 . lg/100ml、KH2P〇4 0.1g/100ml、FeS〇4.7H2〇 5.0mg/100ml、ZnS〇4.7H2〇 4.4mg/100ml、MgS〇4.7H20 50mg/100ml。
[0015] 上述制备方法中，为了改善饮品的口感，在步骤(2)中调节pH值前添加一定量的甜 味剂，所述的甜味剂为重量g/体积ml百分比为3%的蔗糖、重量g/体积ml百分比为0.008%的 二氯鹿糖。
[0016] 在步骤(4)中加入重量g/体积ml百分比为1~5%的聚葡萄糖、重量g/体积ml百分比 为0.1~0.7%的低聚果糖浆(G 55L)。
[0017]上述制备方法中，在步骤(3)中所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、 青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌;所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、干酪乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌或植物乳杆菌。
[0018] 本发明的再一个目的是提供本发明所述的益生菌发酵枇杷叶的组合物在制备改 善呼吸系统疾病、调节胃肠道功能的食品或保健食品中的应用。
[0019] 本发明所述的益生菌发酵枇杷叶的组合物，在制备具有清肺止咳，和胃利尿，止 渴，调节肠道菌群平衡，改善胃肠功能的保健品或饮品中的应用。例如，可将本发明的多株 益生菌发酵枇杷叶或其上清液，按照已知的常规方法，添加一种或多种具有相同、相似或不 同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合 成的其他功能成份或其混合物，配制成适于口服的合剂、乳剂等。
[0020] 也可将本发明的多株益生菌发酵枇杷叶组合物通过适当的干燥方法，制得固体粉 末，添加一种或多种具有相同、相似或不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协 同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他功能成份或混合物，配制成适于口服的胶 囊、片剂、颗粒剂等剂型。
[0021] 本发明具有以下优点： 1、本发明对枇杷叶进行粉碎处理，产品对人体呼吸道无刺激性，与传统的去毛工艺相 比，简单、高效，降低了劳动强度和生产成本。
[0022] 2、本发明对枇杷叶有效成分进行高压、高温提取，大大增加了原料有效成分的提 取率。
[0023] 3、本发明将枇杷叶粉直接加入到益生菌发酵培养基中，经高压、高温提取其有效 成分，带原料渣进行发酵，提高了枇杷叶的利用率，优化了工艺流程。
[0024] 4、本发明模拟人体肠道环境，利用多株益生菌进行发酵，使枇杷叶的有效成分变 为易于被肠道吸收的活性物质，提高了利用率，减少了人体肠道负担。
[0025] 5、利用枇杷叶为益生菌生长提供充足的营养，益生菌亦使枇杷叶的效用得到提 尚。
[0026] 6、本组合物中加入不被人体吸收的水溶性膳食纤维聚葡萄糖和低聚果糖，口感酸 甜适口，状态稳定，可极大地改善人体肠道环境。
[0027] 7、本组合物未添加任何防腐剂，经高温灭菌、无菌灌装，保质期长，饮用方便、安 全。
【具体实施方式】
[0028] 以下通过【具体实施方式】的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限 制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本 发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
[0029]实施例1:取枇杷叶粉在蒸馏水浸泡液中的重量g/体积ml百分比为6-10%。
[0030] -种益生菌发酵枇杷叶的组合物的制备，具体方法如下： 取干燥枇杷叶，粉碎过100目筛，按重量g/体积ml比6%取枇杷叶粉加蒸馏水浸泡30分 钟； 向浸泡液中加入葡萄糖0.7%(重量g/体积ml )、蛋白胨0.4%(重量g/体积ml )、酵母膏 0 · 13%(重量g/体积ml)、酵母粉0 · 07%(重量g/体积ml)、无机盐(K2HP〇4· 3H20 0 · lg/100ml、 KH2PO4 0.1g/100ml、FeS(V7H2〇 5.0mg/100ml、ZnS〇4'7H2〇 4.4mg/100ml、MgS(V7H2〇 50mg/ 100ml)、蔗糖3 · 0%(重量g/体积ml)和三氯蔗糖0 · 008%(重量g/体积ml)。调节pH 6 · 5-7 · 0， 115°C左右灭菌50分钟，得到无菌枇杷叶提取物； 当提取物温度降至39°C左右时，接入预培养好的两歧双歧杆菌(正常人体分离，经中国 科学院微生物研究所鉴定)和短双歧杆菌(AS 1.2213)菌液，接种量均为0.5%(体积/体积）。 发酵6小时后再接入预培养的植物乳杆菌(AS 1.19)菌液，接种量为0.5%(体积/体积）。37°〇 继续发酵22小时，pH值降至4.2以下，降低发酵温度至28°C，继续发酵至pH降至4.0,结束发 酵，即得到益生菌发酵枇杷叶液。
[0031 ]将益生菌发酵枇杷叶液过管式离心机离心，得离心液。向离心液中加入聚葡萄糖 2%(重量g/体积ml)、低聚果糖浆(G 55L)0.7%(重量g/体积ml)，搅匀溶解，得半成品。将半成 品进行高压灭菌，115°C左右灭菌15分钟后，于无菌条件下灌装，得益生菌发酵枇杷叶饮品 成品（规格为100mL/瓶）。
[0032] 实施例2: 一种益生菌发酵枇杷叶的组合物的制备，具体方法如下： 取干燥枇杷叶，粉碎过100目筛，按重量g/体积ml比8%取枇杷叶粉加蒸馏水浸泡