一种马西替坦微球及其制备方法与流程

本申请涉及药物制剂领域。具体而言，本发明涉及一种马西替坦微球制剂及其制备方法。

背景技术：

肺动脉高压指各种原因引起的肺动脉压力持久增高，为罕见的慢性综合病症，表现为肺动脉缩小、破损及血压过高。其病因复杂，诊断、治疗棘手是该治疗领域长期以来发展缓慢的主要原因。据估计，仅美国和欧洲就有13万肺动脉高压患者。在中国，由于人口基数较大，致病因素较多，肺动脉高压的发病率被大大低估。如果患者在肺动脉高压发作后的2年内没有得到有效的治疗，其存活率仅为40％-55％。

马西替坦是actelion制药公司研制的一种内皮素(endothelin，et)受体拮抗剂，可以抑制由内皮素引起的血管收缩，对eta受体、etb受体具有双重抑制作用，可用于治疗肺动脉高压、肺纤维等疾病。马西替坦分子式为c19h20br2n6o4s，化学名称：n-[5-(4-溴苯基)-6-[2-[(5-溴-2-嘧啶基)氧]乙氧基]-4-嘧啶基]-n′-丙基磺酰胺，结构如式(i)所示：

现有马西替坦片(商品名opsumit)，其规格为10mg/片，每天服用一次。临床研究显示，在用opsumit治疗患者中观察到最常见不良反应(比安慰剂更频3％或以上)有贫血、鼻咽炎/咽炎、支气管炎、头痛、流感和泌尿道感染。作为内皮素受体拮抗剂，马西替坦经口服给药后还存在肝毒性、胚胎胎儿毒性等风险。

已经有研究表明，粒径在7-30μm的微球在静脉注射后，可以被 肺毛细血管床机械性滤取，从而具有肺靶向性。因此，为了降低马西替坦片的副作用，需要开发一种制备马西替坦微球的方法，使所得微球的平均粒径在7-30μm的范围内。

技术实现要素：

本发明的发明人经过研究，提出一种制备马西替坦微球制剂的方法。

本发明的制备马西替坦微球制剂的方法，包括以下步骤：

(1)将聚合物载体材料和马西替坦先后溶于油相溶剂，作为油相；以乳化剂的水溶液作为水相；

(2)在室温下，将所述油相加入所述水相中并进行匀质化，形成o/w乳剂；

(3)将所述o/w乳剂加入至稳定剂的水溶液中，搅拌，使油相溶剂完全挥发；

(4)离心分离微球，并用蒸馏水洗涤，干燥。

相应地，本发明还提供根据上述方法制备的马西替坦微球制剂。

附图说明

图1是示出了实施例1的马西替坦微球的粒径分布图。

图2是示出了实施例2的马西替坦微球的粒径分布图。

图3是示出了实施例3的马西替坦微球的粒径分布图。

图4是示出了实施例4的马西替坦微球的粒径分布图。

图5是示出了实施例5的马西替坦微球的粒径分布图。

图6是示出了实施例6的马西替坦微球的粒径分布图。

图7是示出了实施例7的马西替坦微球的粒径分布图。

图8是示出了实施例8的马西替坦微球的粒径分布图。

图9是示出了实施例9的马西替坦微球的粒径分布图。

图10是示出了实施例10的马西替坦微球的粒径分布图。

图11是示出了实施例11的马西替坦微球的粒径分布图。

图12是示出了实施例2的马西替坦微球制剂的体外释放度随时间变化的曲线。

具体实施方式

本发明提供一种制备马西替坦微球制剂的方法，包括以下步骤：

(1)将聚合物载体材料和马西替坦先后溶于油相溶剂，作为油相(分散相)；以乳化剂的水溶液作为水相(连续相)；

(2)在室温下，将所述油相加入所述水相中并进行匀质化，形成o/w乳剂；

(3)将所述o/w乳剂加入至稳定剂的水溶液中，搅拌，使油相溶剂完全挥发；

(4)离心分离微球，并用蒸馏水洗涤，干燥。

在本发明上下文中，所述聚合物载体材料指常用的可生物降解的聚合物材料，包括但不限于聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)、聚乳酸(pla)、聚乙醇酸(pga)、聚己内酯(pcl)或聚三亚甲基碳酸酯(ptmc)，最优选聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

在本发明的上下文中，所述油相溶剂通常具有以下性质：(1)能溶解聚合物；(2)在连续相中的溶解度小；(3)具有高的蒸汽压和低沸点；(4)毒性小。在本文中，所述油相溶剂一般指有机溶剂，包括但不限于二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯，或上述任意两种溶剂的混合物，最优选为二氯甲烷。

在本发明的上下文中，所述乳化剂选自聚乙烯醇(pva)、甘油硬脂酸酯、聚乙二醇油酸酯和吐温-80，最优选聚乙烯醇。

在本发明的上下文中，所述稳定剂选自聚乙烯吡咯烷酮(pvp)或聚乙烯醇，优选聚乙烯吡咯烷酮。

在本发明的一个优选实施方案中，其中在步骤(2)中，油相与水相的体积比为1∶1至1∶40，优选为1∶5至1∶30，最优选为1∶15。

在本发明的一个优选实施方案中，其中在步骤(2)中，匀质化在6000-12000rpm，优选7000-10000rpm，最优选8500rpm下进行。

在本发明的一个优选实施方案中，其中在步骤(3)中，所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液的质量浓度为0.01％至0.5％，优选0.01至0.3％，最优选0.1％。

相应地，本发明还提供一种通过本发明的方法制备的马西替坦微球制剂，其特征在于，至少80％的所述马西替坦微球的粒径在7-30μm 范围内。

在本发明的一个优选实施方案中，本发明的马西替坦微球制剂的载药量为1％-7％，优选2％-5％，最优选3％-4.5％。

在本发明的一个优选实施方案中，本发明的马西替坦微球制剂的包封率为60％以上，优选70％以上，更优选80％以上，最优选90％以上。

实施例

以下结合实施例对本发明做进一步的详细描述。以下实施例不应被解释为对本发明的限制。凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

采用乳化-溶剂挥发法制备载药微球。称取600mgplga和30mg马西替坦溶于2.82g二氯甲烷中，作为油相，以0.5％pva水溶液为水相，在室温下以1∶15的比例将油相加入到水相中，以7000rpm高速剪切120s，形成o/w乳剂。将所得o/w乳剂以体积比1∶3加入到搅拌状态的0.1％pvp水溶液中，继续搅拌3h，使二氯甲烷充分挥发，得到本发明的马西替坦微球。随后离心分离所述马西替坦微球，用蒸馏水洗涤3次后，干燥。

按以下方法测定所得微球的包封率、载药量和粒径。

称取微球5mg，于15ml离心管中，加入0.5ml二氯甲烷，超声使微球溶解，再加入2.5ml甲醇，涡旋10min，11000r/min离心10min，取上清液。用hplc测定微球中马西替坦的含量。

载药量＝(微球中马西替坦质量/微球总质量)×100％

包封率＝(微球中马西替坦质量/投入马西替坦总质量)×100％

将微球分散在纯水中，经超声分散后用激光粒度仪检测微球平均粒径及粒径分布。

经测定，所得微球的包封率为88.92％，载药量4.02％，平均粒径为23.5μm，且80.2％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图1。

实施例2：

按与实施例1相同的方法制备载药微球，除了剪切速率为8500rpm。经测定，所得微球的包封率为93.76％，载药量4.37％，平均粒径为16.8μm，且91.6％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图2。

实施例3：

按与实施例1相同的方法制备载药微球，除了剪切速率为10000rpm。经测定，所得微球的包封率为85.76％，载药量4.15％，平均粒径为11.6μm，且86.3％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图3。

从实施例1-3的结果可以看出，剪切速率的大小影响微球的粒径：在7000rpm-10000rpm的范围内，剪切速率越大，微球粒径随之变小。最优选地，剪切速率为8500rpm。

实施例4：

按与实施例2相同的方法制备载药微球，除了油水相比例为1∶8。经测定，所得微球的包封率为86.76％，载药量4.00％，平均粒径为12.9μm，且84.5％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图4。

实施例5：

按与实施例2相同的方法制备载药微球，除了油水相比例为1∶25。经测定，所得微球的包封率为89.76％，载药量4.22％，平均粒径为24.9μm，且82.5％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图5。

实施例4和5的结果表明，随着水相体积增大，微球粒径也随之变大。

实施例6：

以pcl代替plga，用与实施例2相同的方法制备载药微球。经测定，所得微球的包封率为73.76％，载药量3.32％，平均粒径为13.4μm，且80.9％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图6。

实施例7：

以丙酮作为有机相，用于实施例2相同的方法制备载药微球。经测定，所得微球的包封率为63.15％，载药量3.17％，平均粒径为12.7 μm，且86.5％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图7。

实施例8：

以0。5％的甘油硬脂酸酯水溶液作为乳化剂，用与实施例2相同的方法制备载药微球。经测定，所得微球的包封率为83.76％，载药量3.96％，平均粒径为27.7μm，有55.6％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图8。

实施例9：

用0.1％pva水溶液代替0.1％pvp水溶液作为稳定剂，用与实施例2相同的方法制备载药微球。经测定，所得到微球包封率为86.22％，载药量4.25％，平均粒径为29.8μm，有45.6％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图9。

实施例10：

按与实施例2相同的方法制备载药微球，除了稳定剂pvp浓度为0.01％。经测定，所得到微球包封率为90.20％，载药量4.17％，平均粒径为22.5μm，有84.6％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图10。

实施例11：

按与实施例2相同的方法制备载药微球，除了稳定剂pvp浓度为0.3％。经测定，所得到微球包封率为89.23％，载药量4.21％，平均粒径为18.8μm，有88.9％的微球粒径分布在7～30μm，粒径分布见图11。

实施例12：释放度的测定

以实施例2的马西替坦微球制剂作为样品，精密称取冷冻干燥后的马西替坦微球制剂，加入到37.5℃、ph7.4的磷酸缓冲液中，在恒温振荡器中以100rpm的速度震荡，分别于1、2、4、8、12、24、48、72、96、144、168h取样，并在取样后补充相同体积的等温释放介质。用高效液相色谱法检测药物累积释放量(见表1)，绘制微球体外释放随时间变化的曲线(图12)。

表1：马西替坦微球体外释放结果