本发明涉及半边莲提取物的制备方法和新用途，特别涉及半边莲提取物在制备用于治疗肺高血压的药物中的应用，属于医药领域范畴。
背景技术：
：肺高血压(pulmonaryhypertension，ph)是一大类以肺动脉压力增高，伴或不伴有小肺动脉病变为特征的恶性肺血管疾病，往往引起右心功能衰竭甚至死亡。ph已成为一类严重威胁人类身心健康的常见疾病。诊断标准为：在海平面状态下、静息时、右心导管检查肺动脉平均压（mpap）≥25mmhg。ph可呈现为肺动脉高血压(pah)形式，以其特发性(ipah)或遗传性(hpah)形式并且还联合其他疾病(apah)例如结缔组织病、门静脉高压等发生。ph产生机制尚未完全清楚，目前认为其发生机制同改变一氧化氮信号通路信号分子、肺血管炎症损伤以及氧化-抗氧化系统平衡失衡等作用有关。目前用于治疗ph的药物包括使用钙通道阻滞剂、利尿剂、内皮素受体拮抗剂、前列环素、可溶性鸟苷酸环化酶(guanalatecyclise)和磷酸二酯酶抑制剂。这些药物对ph有一定的治疗效果，但总体来说，ph的药物治疗效果未能让人满意，仍然有很多ph患者因右心衰竭而死亡；或者接受正规治疗后仍有严重的症状，难以提高生活质量，且这些化学药物的副作用特性可导致进一步降低生活质量。因此，发挥中医药优势，寻找安全、经济的治疗ph的中药，对改善ph患者的预后和提高其生活质量具有重要意义。半边莲为桔梗科半边莲属植物半边莲lobeliachinensislour.的干燥全草，具利尿消肿、清热解毒之功效，常用于治疗痈肿疔疮、蛇虫咬伤、臌胀水肿、湿热黄疸、湿疹湿疮等，是《中国药典》2010年版收录的常用中药品种，其主要化学成分有黄酮、生物碱和香豆素类等。本发明人发现半边莲提取物可以降低pah大鼠的肺动脉压力作用和右心室肥大指数，可用于防治肺动脉高压及肺动脉高压引起的相关心血管疾病。技术实现要素：本发明的目的在于提供可用于防治肺高血压的半边莲提取物的制备方法，以及按本发明技术方案制备的半边莲提取物在用于防治肺动脉高压药物中的应用。本发明所述的半边莲提取物，可通过以下方法制备：半边莲药材，用10～90%（v/v）的乙醇溶液热回流提取1～3次，每次提取时间一般为1～3h，每次溶剂体积用量为药材重量的6～12倍，合并提取液，减压浓缩，加水稀释，加到已处理好的大孔吸附树脂上，先后以水、有机溶剂洗脱，收集有机溶剂洗脱液浓缩，浓缩干燥，即得。所用的洗脱有机溶剂优选乙醇、甲醇、丙酮；有机溶剂浓度为5～95%（v/v）的水溶液。大孔吸附树脂优选hpd100型或d101型。所制备的半边莲提取物适用于制备口服制剂，如胶囊剂、片剂、茶剂、颗粒剂等。具体方法是将有效量的半边莲提取物与医药上可接受的赋形剂或/和添加剂配合，制成适合于人体使用的不同剂型的药物。本发明所述的半边莲提取物在用于防治肺动脉高压药物中的应用，其特征为口服，每日服用剂量为50~500mg。本发明所治疗的肺高血压包含肺动脉高压、慢性缺氧性疾病相关的肺高血压、慢性血栓栓塞性肺高血压、由多种未知因素导致的肺高血压的任意一种或几种病症。本发明所治疗的肺动脉高压包含特发性肺动脉高压、药物和毒物相关性肺动脉高压、危险因素或疾病相关性肺动脉高压、肺静脉闭塞病和(或)肺毛细血管瘤样病所致的肺动脉高压、新生儿持续性肺动脉高压中的任意一种或几种病症。本发明所治疗的危险因素或疾病相关性肺动脉高压，其中所述的危险因素或疾病为结缔组织病、hiv感染、门静脉高压、遗传性心脏病、血吸虫病、慢性溶血性贫血的一种或多种因素。本发明所治疗的慢性缺氧性疾病相关的肺高血压包含慢性阻塞性肺疾病、间质性肺疾病；其他限制性或阻塞性肺疾病、呼吸睡眠暂停、肺泡低通气疾病、慢性高原病、先天性膈疝、支气管肺发育不良的任意一种或几种病症。具体实施方式下面通过具体实施例对该发明作进一步的描述。实施例1：防治肺动脉高压的半边莲提取物的制备方法：取半边莲药材500g，加入70%乙醇热回流3次，每次回流2h，每次溶剂用量5l，合并提取液，减压浓缩，加水搅拌稀释，加到已处理好的1kghpd100型大孔吸附树脂柱上，先用水洗至收集液无色，再用70%乙醇洗脱至无色或很浅，合并70%乙醇洗脱液浓缩干燥，得提取物。实施例2：半边莲提取物对肺叶切除联合野百合碱引起sd大鼠肺动脉压高压的影响2.1.实验动物：sd大鼠，3月龄，雄性，200±20g，48只2.2实验药物及器材：半边莲提取物、野百合碱（购自sigma公司）、水合氯醛、乌拉坦、压力换能器和powerlab生理信息采集与处理系统2.3采用肺叶切除联合野百合碱（mct）注射建立重度pah模型：大鼠称体重，12%乌拉坦经腹腔注射（8ml/kg）麻醉后，16g动静脉留置针行气管插管，连接harvard呼吸机(潮气量2ml；频率，80次/分；peep1.0cmh20。左侧第四肋间进胸，结扎并切除左侧肺叶，大鼠肺叶为左侧1叶，右侧4叶，关胸。手术结束后脱离呼吸机，保暖、持续吸氧4小时。继续饲养1周后，按60mg/kg单次腹腔注射mct，mct注射1周后开始给药，给药4周。空白对照组：假手术+生理盐水（等体积i.p.）1次+给予生理盐水（i.g）模型组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予等体积生理盐水（i.g）半边莲提取物低剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予受试药（100mg/kg/d，i.g）半边莲提取物中剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+受试药（200mg/kg/d，i.g）半边莲提取物高剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予受试药（400mg/kg/d，i.g）阳性药组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予西地那非（7.5mg/kg/d）2.4血流动力学测量和右心室肥厚检测：mct注射后第4周，测量大鼠平均肺动脉压。大鼠以10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔内注射麻醉后，从右颈外静脉插管至肺动脉干，接压力换能器和powerlab生理信息采集与处理系统(adinstruments)，当置入导管进入右心室稳定后记录其右室收缩压（rvsp），监护仪出现肺动脉波形时，待其稳定后记录平均肺动脉压(mpap)。测完rvsp后，完整切下大鼠心脏，沿房室交界处剪去左右心房及大血管，分离右心室(rv)和左心室+室间隔(lv+s)，用滤纸吸干水分后称质量，计算rv/(lv+s)值即右心室肥厚指数(rvhi)。2.5统计分析：应用spss17.0统计软件进行统计学分析，数据均以mean±s.e表示，组间比较采用单因素方差分析。p<0.05为差异有显著性意义。2.6实验结果2.6.1实验动物死亡情况：本实验共用sd大鼠48只，死亡2只，mct组死亡2只，大鼠死亡前表现为呼吸困难、口鼻发绀。2.6.2半边莲提取物对pah大鼠rvsp的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，半边莲提取物低剂量(p<0.05)、中剂量(p<0.01)和高剂量(p<0.001)、西地那非组(p<0.01)能显著降低rvsp，且呈剂量依赖性；与阳性药比较，半边莲提取物高剂量组对pah大鼠rvsp的降低效果更好。2.6.3半边莲提取物对pah大鼠mpap的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，半边莲提取物中剂量(p<0.05)和高剂量(p<0.001)、西地那非(p<0.01)组能显著降低mpap；与阳性药比较，半边莲提取物各组对pah大鼠mpap的降低效果没有显著性差异。2.6.4半边莲提取物对pah大鼠rvhi的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，半边莲提取物中剂量(p<0.01)和高剂量(p<0.001)能显著降低rvhi；与阳性药比较，半边莲提取物中剂量和高剂量组对pah大鼠rvhi的降低效果更好（见表1）。表1.半边莲提取物对pah大鼠rvsp、mpap、rvhi的影响组别nrvsp(mmhg)mpap(mmhg)rvhi(%)空白对照组820.73±0.3213.07±0.2722.33±0.42模型组643.23±0.79###34.62±0.92###52.17±1.19###半边莲提取物低剂量组838.16±0.73*###30.57±0.86###48.51±1.24###半边莲提取物中剂量组833.08±0.97**###27.54±1.23*###42.76±1.52**###半边莲提取物高剂量组831.77±1.12***##24.58±1.44***###37.81±1.58***###西地那非组836.54±1.09**###26.23±1.07**###48.33±1.85###注：与正常组比较###p﹤0.001，与模型组比较*p﹤0.05，**p﹤0.01，***p﹤0.001结论以上结果说明，半边莲提取物对肺叶切除联合野百合碱引起sd大鼠肺动脉压高压的平均肺动脉压(mpap)、右室收缩压（rvsp），右心室肥厚指数(rvhi)有明显减轻作用。半边莲提取物具有防治pah的作用。当前第1页12