本发明涉及南沙参皂苷的制备方法和新用途，特别涉及南沙参皂苷在制备用于治疗肺动脉高压的药物中的作用，属于中医药领域范畴。
背景技术：
：肺动脉高压(pulmonaryarterialhypertension，pah)是以肺血管阻力和肺动脉压力进行性升高为特点的一种病理生理状态，其主要特征是由肺小动脉收缩、血管增生与重构而引起肺血管阻力进行性升高，进而引起右室负荷过重，导致右心室肥厚，最终可致患者死于右心衰竭。其血流动力学诊断标准为：海平面静息状态下，右心导管检测肺动脉平均压≥25mmhg。pah危害大、病死率高。pah产生机制尚未完全清楚，目前认为其发生机制同改变一氧化氮信号通路信号分子、肺血管炎症损伤以及氧化-抗氧化系统平衡失衡等作用有关。目前pah的靶向治疗药物主要有3类，包括前列环素类似物、内皮素受体拮抗剂(endothelinreceptorantagonists，era)和磷酸二酯酶5（phosphodiesterase，pde-5）抑制剂，其应用可明显改善患者的生存时间和生存状况。三类靶向药物在pah的治疗地位毋庸质疑，但总体来说，pah的药物治疗效果未能让人满意，仍然有很多pah患者因右心衰竭而死亡；或者接受正规治疗后仍有严重的症状，难以提高生活质量，且pah靶向治疗药物多为进口药物，价格昂贵，未列入基本医疗保险药品目录，且肝脏毒性作用明显，而长期联合服药又是pah患者必须面对的问题。因此，发挥中医药优势，寻找安全、经济的治疗pah的中药，对改善pah患者的预后和提高其生活质量具有重要意义。南沙参为桔梗科植物轮叶沙参或沙参的干燥根，始载于《神农本草经》：“味苦微寒，主血积惊气、除寒热、补中益肺气、久服利人”，是清肺养阴、祛痰镇咳的常用中草药之一。现代研究证明，南沙参含有多糖、β-谷甾醇及其衍生物、三萜、磷脂等多种成分，并具有祛痰、强心、抗真菌、免疫调节、抗辐射、抗衰老、清除自由基、保肝等多种药理作用，其开发应用很有前景。发明人通过研究发现南沙参皂苷可用于防治肺动脉高压及肺动脉高压引起的心血管疾病。技术实现要素：本发明的目的在于提供可用于防治肺动脉高压的南沙参皂苷的制备方法，以及按本发明技术方案制备的南沙参皂苷在用于防治肺动脉高压药物中的应用。本发明所述的南沙参皂苷，可通过以下方法制备：南沙参药材，洗净，切碎，用5～75%（v/v）的乙醇溶液热回流提取1～3次，每次提取时间一般为1～3h，每次溶剂体积用量为药材重量的5～15倍，合并提取液，减压浓缩，加水稀释，加到已处理好的大孔吸附树脂上，先后以水、25～95%（v/v）的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得。所用的乙醇洗脱液浓度优选35～55%（v/v）。大孔吸附树脂优选hpd100型或d101型。所制备的南沙参皂苷适用于制备口服制剂，如胶囊剂、片剂、茶剂、颗粒剂等。具体方法是将有效量的南沙参皂苷与医药上可接受的赋形剂或/和添加剂配合，制成适合于人体使用的不同剂型的药物。本发明所述的南沙参皂苷在用于防治肺动脉高压药物中的应用，其特征为口服，每日服用剂量为100~500mg。本发明所治疗的肺动脉高压为特发性肺动脉高压、遗传性肺动脉高压、药物和毒物相关性肺动脉高压、危险因素或疾病相关性肺动脉高压、肺静脉闭塞病和(或)肺毛细血管瘤样病所致的肺动脉高压、新生儿持续性肺动脉高压中的任意一种或几种病症。本发明所治疗的遗传性肺动脉高压为bmpr2、alkl、eng、smad9、cav1、kcnk3中一个或过个基因突变导致的肺动脉高压。本发明所治疗的危险因素或疾病相关性肺动脉高压，所述危险因素或疾病为结缔组织病、hiv感染、门静脉高压、遗传性心脏病、血吸虫病、慢性溶血性贫血等一种或多种因素。具体实施方式下面通过具体实施例对该发明作进一步的描述。实施例1：防治肺动脉高压的南沙参皂苷制备方法：取南沙参药材500g，洗净、切碎，加入50%乙醇热回流3次，每次回流2h，每次溶剂用量5l，合并提取液，减压浓缩，加水搅拌稀释，加到已处理好的1kghpd100型大孔吸附树脂柱上，先用水洗至收集液无色，再用50%乙醇洗脱至无色或很浅，合并50%乙醇洗脱液浓缩干燥，得南沙参皂苷。实施例2：南沙参皂苷对肺叶切除联合野百合碱引起sd大鼠肺动脉压高压的影响2.1.实验动物：sd大鼠，3月龄，雄性，200±20g，48只2.2实验药物及器材：南沙参皂苷、野百合碱（购自sigma公司）、水合氯醛、乌拉坦、压力换能器和powerlab生理信息采集与处理系统2.3采用肺叶切除联合野百合碱（mct）注射建立重度pah模型：大鼠称体重，12%乌拉坦经腹腔注射（8ml/kg）麻醉后，16g动静脉留置针行气管插管，连接harvard呼吸机(潮气量2ml；频率，80次/分；peep1.0cmh20。左侧第四肋间进胸，结扎并切除左侧肺叶，大鼠肺叶为左侧1叶，右侧4叶，关胸。手术结束后脱离呼吸机，保暖、持续吸氧4小时。继续饲养1周后，按60mg/kg单次腹腔注射mct，mct注射1周后开始给药，给药4周。空白对照组：假手术+生理盐水（等体积i.p.）1次+给予生理盐水（i.g）模型组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予等体积生理盐水（i.g）南沙参皂苷低剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予受试药（30mg/kg/d，i.g）南沙参皂苷中剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+受试药（60mg/kg/d，i.g）南沙参皂苷高剂量组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予受试药（120mg/kg/d，i.g）阳性药组：肺叶切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+给予西地那非（7.5mg/kg/d）2.4血流动力学测量和右心室肥厚检测：mct注射后第4周，测量大鼠平均肺动脉压。大鼠以10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔内注射麻醉后，从右颈外静脉插管至肺动脉干，接压力换能器和powerlab生理信息采集与处理系统(adinstruments)，当置入导管进入右心室稳定后记录其右室收缩压（rvsp），监护仪出现肺动脉波形时，待其稳定后记录平均肺动脉压(mpap)。测完rvsp后，完整切下大鼠心脏，沿房室交界处剪去左右心房及大血管，分离右心室(rv)和左心室+室间隔(lv+s)，用滤纸吸干水分后称质量，计算rv/(lv+s)值即右心室肥厚指数(rvhi)。2.5统计分析：应用spss17.0统计软件进行统计学分析，数据均以mean±s.e表示，组间比较采用单因素方差分析。p<0.05为差异有显著性意义。2.6实验结果2.6.1实验动物死亡情况：本实验共用sd大鼠48只，死亡4只，mct组死亡2只，南沙参低剂量死亡1只，南沙参高剂量死亡1只，大鼠死亡前表现为呼吸困难、口鼻发绀。2.6.2南沙参皂苷对pah大鼠rvsp的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，南沙参皂苷中剂量(p<0.01)和高剂量(p<0.05)、西地那非组(p<0.01)能显著降低rvsp，且呈剂量依赖性；与阳性药比较，南沙参皂苷各组对pah大鼠rvsp的降低效果没有显著性差异。2.6.3南沙参皂苷对pah大鼠mpap的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，南沙参皂苷中剂量(p<0.01)和高剂量(p<0.01)、西地那非(p<0.01)组能显著降低mpap；与阳性药比较，南沙参皂苷各组对pah大鼠mpap的降低效果没有显著性差异。2.6.4南沙参皂苷对pah大鼠rvhi的结果显示，与空白对照组比较，模型组与各给药组均有显著性差异(p<0.001)；与模型组比较，南沙参皂苷中剂量(p<0.05)和高剂量(p<0.05)能显著降低rvhi；与阳性药比较，南沙参皂苷中剂量组对pah大鼠rvhi的降低效果更好（见表1）。表1.南沙参皂苷对pah大鼠rvsp、mpap、rvhi的影响组别nrvsp(mmhg)mpap(mmhg)rvhi(%)空白对照组820.73±0.3213.07±0.2722.33±0.42模型组643.23±0.79###34.62±0.92###52.17±1.19###南沙参皂苷低剂量组740.17±1.83###32.18±1.64###48.94±1.17###南沙参皂苷中剂量组836.79±0.95**###26.94±0.93**###45.17±1.35*###南沙参皂苷高剂量组738.77±2.18*##27.28±1.56**###46.83±0.95*###西地那非组836.54±1.09**###26.23±1.07**###48.33±1.85###注：与正常组比较##p﹤0.01，###p﹤0.001；与模型组比较*p﹤0.05，**p﹤0.01结论：以上结果说明，南沙参皂苷对肺叶切除联合野百合碱引起sd大鼠肺动脉压高压的平均肺动脉压(mpap)、右室收缩压（rvsp），右心室肥厚指数(rvhi)有明显减轻作用。南沙参皂苷具有防治pah的作用。当前第1页12