本发明涉及乳酸菌
技术领域：
，具体是一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
：乳酸菌(lacticacidbacteria，LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。这类细菌在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性。乳酸菌能够调节机体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡，提高食物消化率和生物价，降低血清胆固醇，控制内毒素，抑制肠道内腐败菌生长繁殖和腐败产物的产生，制造营养物质，刺激组织发育，从而对机体的营养状态、生理功能、细胞感染、药物效应、毒性反应、免疫反应、肿瘤发生、衰老过程和突然的应急反应等产生作用。现有的乳酸菌制品单一，营养单一，功效单一且效果不明显。亚洲女性比西方白种人女性的肌肤由于人种原因更易受到色斑，暗沉，色素沉着等皮肤问题的困扰。然而，目前市场上的美白淡斑产品普遍存在着安全性不高，大量使用人工合成的有刺激性的功效原料等情况，或者采用中草药提取物都过于粗糙简陋，有效物含量低，完全无法满足化妆品市场对于产品的外观、效果以及越来越严格的安全性测试要求。此外，随着生活水平的提高和生活节奏的改变，三高症(即高血压、高血糖和高血脂)，已经很普遍，降糖降脂方法很多，有饮食疗法、运动疗法、药物疗法及临床治疗等。这些方法或多或少都有不足之处，有的还易引起副作用，如腹泻、厌食等。目前还没有利用乳酸菌用于解决上述所有问题的相关产品。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种既能有效地降糖降脂、又能有效地美白淡斑的复合乳酸菌制剂及其制备方法和应用，以解决上述
背景技术：
中提出的问题。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌2-7份、光合菌1-5份、雪莲33-40份、青梅10-17份、桔梗8-16份。作为本发明进一步的方案：所述美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌3-6份、光合菌2-4份、雪莲35-38份、青梅12-15份、桔梗10-14份。作为本发明进一步的方案：所述美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌5份、光合菌3份、雪莲37份、青梅13份、桔梗12份。本发明另一目的是提供一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂的制备方法，由以下步骤组成：1)将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒15-18min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮70-80min，过滤取滤液，得桔梗液；2)将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵45-50min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。本发明又一目的是提供所述复合乳酸菌制剂在制备美白淡斑食品中的应用。本发明又一目的是提供所述复合乳酸菌制剂在制备降血糖食品中的应用。本发明又一目的是提供所述复合乳酸菌制剂在制备降血脂食品中的应用。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明在各原料的协同作用下使其具有显著的美白淡斑、降糖降脂效果，安全有效，起效快，持续时间长，使肌肤自然健康白，对身体无任何毒副作用，还具有降血压、降低外周血管阻力、扩张冠状动脉、增加冠脉流量、降低心肌耗氧量、强心、增加心输出量、抗心肌缺血，抗血小板聚集、改善血液流变性、消除氧自由基、增强耐缺氧能力和利尿等作用，可用于预防、治疗糖尿病和高脂血症。本发明能够抑制酪氨酸酶的活性，对黑色素形成的各个阶段都起到抑制作用，清除自由基，减少黑色素的产生，抑制炎症，并为肌肤提供充足的养分促进其新陈代谢。本发明所采用的原料均是纯天然的，其制备过程简单、易操作、生产成本低，适于工业化生产。具体实施方式下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1本发明实施例中，一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌2份、光合菌1份、雪莲33份、青梅10份、桔梗8份。将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒15min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮70min，过滤取滤液，得桔梗液。将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵45min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。实施例2本发明实施例中，一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌7份、光合菌5份、雪莲40份、青梅17份、桔梗16份。将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒18min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮80min，过滤取滤液，得桔梗液。将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵50min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。实施例3本发明实施例中，一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌3份、光合菌2份、雪莲35份、青梅12份、桔梗10份。将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒16min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮75min，过滤取滤液，得桔梗液。将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵48min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。实施例4本发明实施例中，一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌6份、光合菌4份、雪莲38份、青梅15份、桔梗14份。将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒16min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮75min，过滤取滤液，得桔梗液。将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵48min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。实施例5本发明实施例中，一种美白淡斑的复合乳酸菌制剂，由以下按照重量份的原料组成：乳酸菌5份、光合菌3份、雪莲37份、青梅13份、桔梗12份。将雪莲粉碎、过150目筛，然后加入其质量3倍的食用乙醇，在72℃的温度下搅拌至干，然后在220℃的温度下焙炒16min，制得雪莲粉；将青梅与其质量3倍的去离子水混合并榨汁，过滤取滤液，然后将其加热沸腾8min，冷却得青梅汁；将桔梗与其质量6倍的去离子水混合，武火煮开，文火煎煮75min，过滤取滤液，得桔梗液。将雪莲粉与青梅汁、桔梗液混合均匀，再加入光合菌混合均匀，并在31℃的温度下发酵48min，然后加入乳酸菌混合均匀，并在34℃的温度下发酵4.5h，在120℃、时间6s的条件下瞬时灭菌，再经52℃烘干制得复合乳酸菌制剂。对比例1除不含有光合菌与雪莲外，其配方及制备过程与实施例5一致。对比例2仅含有光合菌与雪莲，其制备过程与实施例5一致。实施例6美白淡斑效果评价一、实验目的通过对比分析评价上述各实施例所制得的复合乳酸菌制剂的美白淡斑效果。二、实验方法实验分组：本实验分为实验组和对照组，其中实验组为上述实施例1-5所制得的复合乳酸菌制剂，对照组为上述对比例1-2所制得的复合乳酸菌制剂及对比例3一市售美白口服液。测试对象：上述各组均为中年女性30名，30-40岁，身体健康，无皮肤病和过敏病史，非敏感皮肤，能够按规范使用复合乳酸菌制剂，并配合工作人员按要求完成评价工作，具有一定表述能力，能真实反应使用后的感受；测试仪器：VISA数字皮肤分析仪(美国)、MexameterMX18(CKElectronicGmbH，德国)；使用方法：每天早晚食用1次，每次服用1g，持续使用4周。测试分析：通过对比使用前和使用4周后面部色斑对比图，评价实验组和对照组所述复合乳酸菌制剂美白淡斑效果。三、实验结果具体结果参见表1。表1美白淡斑效果测试结果表改善明显(例)有一定效果(例)无明显改善(例)实施例12091实施例22271实施例32550实施例42640实施例53000对比例151411对比例20624对比例32820从表1可知，实施例1-5美白淡斑效果明显优于对比例1-3，对比实施例5和对比例1-2的美白淡斑效果可得出：利用各原料形成的复合乳酸菌制剂，其可从整体起到从内到外的美白淡斑的协同效果；对比实施例3和实施例1-5的美白淡斑效果可知，本发明效果优于现有的市售美白口服液，起到提高美白淡斑的效果。实施例7毒性试验急性毒性试验一、试验材料：动物：昆明种小鼠，体重18-25g，雌雄各半，山东大学生物试验室育种。药物：实施例5。二、方法：1、LD50计算：采用改良寇氏法，将小鼠随机分成5组，每组10只，雌雄各半，将本发明加蒸馏水溶解，配成最大浓度，按小鼠最大允许容量给药，所给剂量按生药量依次为18，14.4，11.5，9.2，7.4(g.kg-1)，在动物禁食(不禁水)18小时后，一日内分两次给药(间隔半小时)，每次0.5ml，观察动物死亡情况。2、最大耐受剂量测定(MTD值)：取小鼠20只，雌雄各10只。将本发明实施例5加蒸馏水溶解，配成最高浓度，按动物的最大耐受量，以注射灌喂器能抽动为准。在动物禁食(不禁水)18小时后，一日内分两次给药(间隔半小时)，每次0.5ml(每ml含生药0.36g)，总药量为18g生药/kg.d，相当成人50kg体重用量的300倍。给药后连续观察7天。三、试验结果：在LD50计算中当用最大允许浓度和最大允许容量给予小鼠时(18g/kg.d)，未见小鼠死亡，即未测出LD50，只可求最大耐受剂量，在7天观察期中，动物其食欲、活动、毛色、精神状态等皆正常，发育正常，未见有死亡。即选用相当于临床剂量的300倍药量，并无不良反应发生，表明急性毒性极小，MTD＞18g/kg.d。急性毒性及长期毒性的试验结果急性毒性试验：通过小白鼠一次性灌胃给予本发明实施例5，最高浓度35％，最大灌胃容量0.4ml/10g，剂量14g/kg(每g药粉相当于10g生药)，连续观察7天，未发现任何毒性反应，因浓度和剂量无法增加，故未能测出该药的LD50。最大耐受量测定：以最高浓度，最大灌胃容量，小白鼠灌胃给药3次，间隔5小时，然后连续观察7天，无一例死亡。药粉剂量为＞42g/kg.日(每g药粉相当于10g生药)，按公斤体重计算相当于成人日用量的420倍。长期毒性试验：为观察长期用药是否产生毒性反应，分别给予大鼠本发明饲服，按成人日用量的70倍和35倍(即7g/kg/日和3.5g/kg/日)，连续给喂8周，未见大鼠的行为、进食、体重出现异常，与对照组比，血常规，肝肾功能，各种重要脏器均无异常改变，在所用药剂量范围内，未曾发现本发明的任何毒副反应。实施例81材料和方法1.1材料1.1.1药物：本发明复合乳酸菌制剂(本发明实施例5)；盐酸二甲双胍(上海华氏制药)。1.1.2动物昆明种小鼠96只，雌雄各半，体重(20.5±2.5)g，均由山东医药大学动物实验中心提供。1.2方法1.2.1造模与分组糖尿病：动物购回，适应性喂养1周后，随机分为正常非糖尿病组8只和实验组40只，实验组于造模前禁食12小时，造模采用STZ55mg/kg一次性腹腔注射，给药后24小时测血糖、尿糖，连续3天，尿糖定性+++以上，血糖值超过16.5mmol/L，并持续不变者，确定为糖尿病形成。将造模成功小鼠随机分为5组，模型对照组、二甲双胍组、本发明高、中、低浓度组。高脂血症：动物购回，适应性喂养1周后，随机分为正常非高脂血症组8只和实验组40只，实验组于造模前禁食12小时，造模给予1周以上含1％胆固醇，20％猪油、2％胆酸钠、1％丙基硫嘧啶的高脂乳剂，每天1次，连续7天。将造模成功小鼠随机分为5组，模型对照组、二甲双胍组、本发明高、中、低浓度组。1.2.2给药和测定方法正常对照组和模型对照组(ig等体积的生理盐水)；盐酸二甲双胍组(ig，0.20g/kg)；本发明组(分别每天ig本发明2.0g/kg，3.0g/kg，4.0g/kg)。各组分别灌胃给药，1次/d，连续30天。末次给药前12h禁食，给药后2h，摘眼取血，用全自动生化分析仪测定血糖和血脂。1.2.3统计学处理所有数据用“-χ±S”表示，数据采用SPSS11.5统计软件分析处理，多组间比较若方差齐性用单向方差分析，若方差不齐用秩和检验，组内前后比较用配对t检验。2结果2.1降糖实验由表2可知，本发明高、中、低浓度组均能显著降低高血糖小鼠模型的血糖，与模型对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。2.3降脂实验由表3可知，本发明高、中、低浓度均能明显降低高血脂小鼠模型的TC、TG含量，与模型对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。表2本发明液对小鼠血糖的影响(-χ±S)注：与正常对照组比较，△△P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；NS，生理盐水。表3本发明对小鼠血脂的影响(-χ±S)注：与正常对照组比较，ΔΔP＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；NS，生理盐水。对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。当前第1页1 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