本发明涉及组织修复技术领域,具体涉及一种抗炎组织修复生长因子缓释材料、制备方法及用途。
背景技术:
现有的牙周引导组织再生术中常常使用富血小板纤维蛋白作为生长因子等的缓释材料,以促进牙周组织再生。
富血小板纤维蛋白(PRF)是第二代的血小板浓缩制品,包括血小板、生长因子、白细胞细胞因子和纤维蛋白膜。血小板纤维蛋白具有促进成纤维细胞增殖和胶原合成增加的能力。
血小板纤维蛋白已广泛用于软、硬组织修复和再生的各种牙周外科手术后的改善。然而在骨缺损的修复最初阶段,宿主的炎症反应起到重要作用,组织的修复离不开炎症反应,并且过度的炎症反应会降低骨修复的能力。血小板纤维蛋白的制备过程中虽然可能会聚集一些免疫细胞,但远远达不到在组织再生初期的抗炎效果。
技术实现要素:
为改善现有技术的不足,提供一种能有效降低组织修复过程中炎症反应的缓释材料,本发明提供了一种组织修复生长因子缓释材料,包括血小板纤维蛋白和阿司匹林。
本发明另外提供了一种抗炎组织修复生长因子缓释材料的制备方法,包括如下步骤:
S1:制备阿司匹林复合液;
S2:静脉取血;
S3:将阿司匹林复合液与静脉血混合,离心,中间层胶冻状物质即为抗炎的组织修复生长因子缓释材料——富血小板纤维蛋白和阿司匹林复合物。
其中,所述步骤S1包括:将阿司匹林溶于二甲基亚砜溶液,之后将含阿司匹林的二甲基亚砜溶液与磷酸盐缓冲液混合,制成复合液。
其中,所述步骤S3中,离心速度介于2500-3500r/min,离心时间介于8-12min。
其中,所述步骤S2中,静脉取血的供体为动物或人,静脉取血的方式是静脉抽血。
其中,所述步骤S1中,所制备的阿司匹林复合液的浓度介于250-350 微克/毫升。
其中,所述步骤S3中,所制备的阿司匹林复合液与静脉血的混合液中,阿司匹林的浓度介于90-110 微克/毫升。
其中,所述步骤S3中,阿司匹林复合液与静脉血液的体积比为1:2。
本发明同时提供了一种如前所述的抗炎组织修复生长因子缓释材料的用途,其主要用于牙周引导组织再生或骨组织再生。
本发明提供的组织修复生长因子缓释材料及其制备方法,可有效促进组织再生,调节局部免疫及干细胞功能,降低炎症反应,促进再生效果。
具体实施方式
为了对本发明的技术方案及有益效果有更进一步的了解,下面详细说明本发明的技术方案及其产生的有益效果。
本发明提供了一种抗炎组织修复生长因子缓释材料,包括血小板纤维蛋白和阿司匹林。
因此,本发明提供的组织修复生长因子缓释材料,相比较传统的组织修复生长因子缓释材料,在富血小板纤维蛋白支架网络中添加了阿司匹林,发明人经过长期研究发现,在组织再生早期加入抗炎因子可以有效地促进骨组织的再生,而诸多抗炎因子中,阿司匹林与血小板纤维蛋白结合后这种效果最显著。具体的,富血小板纤维蛋白在作为生长因子缓释材料的同时,也可以作为阿司匹林的支架材料。
同时,阿司匹林的局部应用可以有效改善骨组织修复再生的效果。阿司匹林能够在骨缺损局部随着血小板纤维蛋白的降解缓慢释放,调节局部免疫及干细胞功能,达到促进骨再生的效果。
本发明提供的组织修复生长因子缓释材料,主要通过下述方法制备而成:
S1:制备阿司匹林复合液;
S2:静脉取血;
S3:将阿司匹林复合液与静脉血混合,离心,中间层胶冻状物质即为抗炎的组织修复生长因子缓释材料——富血小板纤维蛋白和阿司匹林复合物。
具体的,阿司匹林复合液的制备方法如下:将阿司匹林溶于二甲基亚砜溶液,之后将含阿司匹林的二甲基亚砜溶液与磷酸盐缓冲液混合,制成复合液。
具体的,所述步骤S3中,离心速度介于2500-3500r/min,离心时间介于8-12min。发明人经实验发现,离心速度介于2500-3500r/min,离心时间介于8-12min时,能够有效将含阿司匹林的富血小板纤维蛋白从血液中分离出来,较佳的,可将离心速度设为3000r/min,离心时间设为10min。
具体的,为了有效的促进局部骨组织再生,本发明在制备所述抗炎富血小板纤维蛋白材料时,选择的供体为动物或人类,静脉取血的方式为自体静脉抽血。
选用患者自体血,能够保证安全性,杜绝了因使用异体血液造成的传染疾病的发生;自体血取用方便,通过静脉抽血,操作简单,临床技术要求低,患者易于接受,费用低廉;患者易于接受。
较优的,所述步骤S1中,所制备的阿司匹林复合液的浓度介于250-350微克/毫升。
较优的,所述步骤S3中,所制备的阿司匹林复合液与静脉血的混合液中,阿司匹林的浓度介于90-110 微克/毫升。更佳的,所制备的阿司匹林复合液与静脉血的混合液中,阿司匹林的浓度为100 微克/毫升。
较优的,所述步骤S3中,阿司匹林复合液与静脉血液的体积比为1:2。
本发明提供的组织修复生长因子缓释材料,主要可用于牙周引导组织再生或骨组织再生。
对本发明提供的血小板纤维蛋白和阿司匹林复合物分别在4摄氏度及37摄氏度条件下进行释放动力学实验;具体的实验方法为:将血小板纤维蛋白/阿司匹林复合物取出,放入离心管浸入用1毫升PBS溶液。在不同时间点0.5h,1h,1.5h,2h,2.5h,3h,4h,4.5h,6h,8h,10h,24h,48h取浸泡溶液50 微升。混合10 微升替硝唑,涡旋振荡,离心,取20微升上清进行高效液相色谱检测。
实验结果表明:血小板纤维蛋白和阿司匹林复合物能够缓慢释放阿司匹林,在局部起到持续抗炎的效果。
本发明的有益效果为:
1、通过在传统的血小板纤维蛋白膜中增加阿司匹林,使得血小板纤维蛋白在作为缓释材料的同时, 也可以作为阿司匹林的支架材料。
2、加入的阿司匹林能够在骨缺损局部随着血小板纤维蛋白的降解缓慢释放,调节局部免疫及干细胞功能,达到促进骨再生的效果,尤其在组织再生早期,能够有效改善骨组织再生效果。
3、相对于现有的复合物只能够单纯地释放血液内含有的生长因子,本发明加入的阿司匹林作为一种具有抗炎作用的安全性高的药物,与复合物混合后,能够有效地起到缓释的作用,从而达到“持续”、“缓释”的作用,能够降低炎症反应。
虽然本发明已利用上述较佳实施例进行说明,然其并非用以限定本发明的保护范围,任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围之内,相对上述实施例进行各种变动与修改仍属本发明所保护的范围,因此本发明的保护范围以权利要求书所界定的为准。