辛伐他汀在制备预防高分压氧导致的肺型氧中毒的药物中的应用的制作方法

本发明属于医药制备领域，特别涉及辛伐他汀在制备高分压氧导致的肺型氧中毒的药物中的应用。

背景技术：

在临床应用呼吸机治疗呼吸衰竭病人、高压氧治疗减压病及潜水作业中采用氧气呼吸装置时，由于周围环境气压过高(或潜水深度过大)、氧浓度过高及吸入60-200kPa高压氧时间过长，超过了机体的适应能力，会导致肺型氧中毒的发生。由于呼吸系统接触的氧分压高于其它器官，同时对氧比较敏感，所以肺脏是氧中毒的主要靶器官。肺型氧中毒的主要临床表现有咳嗽、胸骨后疼痛，呼吸急促，严重者可出现肺水肿、出血、甚至呼吸衰竭。从而影响了潜水作业的进行和临床高分压氧气的应用。

对于氧中毒的发病机理，至今尚未完全明确。以往研究表明，氧气在体内的代谢产物，氧自由基可能是肺型氧中毒产生的启动因素。当机体吸入过量的氧，产生的氧自由基超过体内抗氧化酶代谢能力，累积的自由基就会对各器官产生有害作用。虽然国内外进行了大量的研究，但目前对于肺型氧中毒的防治仍十分有限：氧自由基损伤肺泡上皮细胞的机制研究尚未完全明确，临床上也缺乏特效的防治肺型氧中毒的药物。

辛伐他汀为羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-COA)还原酶抑制剂，可抑制内源性胆固醇的合成，发挥降脂作用。适用于高脂血症、冠心病合并高胆固醇血症及血管硬化的患者。但未有研究证实可应用于预防肺型氧中毒。

技术实现要素：

本发明的目的是提供辛伐他汀在预防高分压氧导致的肺型氧中毒药物中的应用，辛伐他汀可显著降低高分压氧导致的肺型氧中毒的肺渗透性、肺组织损伤、炎症反应及肺上皮细胞的凋亡。

本发明提供的技术方案是将辛伐他汀用于制备预防高分压氧导致的肺型氧中毒的药物。

上述应用，需要将辛伐他汀溶于生理盐水中，配制成0.5-2mg/mL的注射剂使用。

所述辛伐他汀的腹腔注射的剂量是5-20mg/kg/d。优选的，所述辛伐他汀的腹腔注射的剂量是20mg/kg/d。

所述辛伐他汀的使用时间为高分压氧暴露前3天，每天一次。最后一次注射为高分压氧暴露前1h。

本发明的有益效果为：

1、本发明提供了辛伐他汀在制备高分压氧导致的肺型氧中毒的药物中的应用，实验表明，辛伐他汀可以显著降低高分压氧导致的肺通透性增加，降低肺水肿及支气管肺泡灌洗液中的蛋白含量，减轻肺脏炎症，减少肺细胞凋亡的比例，从而减轻肺型氧中毒导致的肺损伤。

2、本发明为临床上更合理的将辛伐他汀应用在预防高分压氧导致的肺型氧中毒中提供了实验数据。

附图说明

图1是实施例1中，不同剂量的辛伐他汀预防性使用，对高分压氧导致的小鼠肺型氧中毒模型中肺湿干重比的影响对比图。

图2是实施例1中，辛伐他汀预防性使用对高分压氧导致的小鼠肺型氧中毒模型中肺组织损伤的影响对比图。其中图A为空气暴露+生理盐水组小鼠肺组织病理图；图B为高分压氧暴露+生理盐水组小鼠肺组织病理图；图C为辛伐他汀20mg/Kg预防组小鼠肺组织病理图，放大倍数均为200倍。

图3是实施例2中，辛伐他汀预防性使用对高分压氧导致的小鼠肺型氧中毒模型中肺渗透性的改变对比图，其中图A为肺组织湿干重比；图B为肺泡灌洗液蛋白含量。

图4是实施例2中，辛伐他汀预防性使用对高分压氧导致的小鼠肺型氧中毒模型中肺组织前致炎性因子及凋亡蛋白的改变对比图，其中图A为肺组织前致炎性因子；图B为肺组织凋亡蛋白。

图5是实施例3中，eNOS抑制剂L-NAME可完全消除辛伐他汀对高分压氧导致的小鼠肺型氧中毒的保护作用，其中图A为辛伐他汀使用后可增加小鼠肺组织中eNOS酶表达量；图B为L-NAME应用后对肺组织湿/干比及肺泡灌洗液中蛋白含量的影响；图C为L-NAME应用后对肺组织凋亡蛋白表达的影响；图D为L-NAME应用后对肺组织中致炎性因子的影响。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步说明：

本发明的实验所用的辛伐他汀购自美国默沙东公司。

实施例1

实验用注射药物：利用生理盐水，将辛伐他汀配制成0.5-2mg/mL的溶液，制备成注射剂。

实验动物和分组：雄性健康C57BL/6小鼠50只，体重20-25g，购于上海斯莱克实验动物有限公司。

将小鼠随机分为空气暴露+生理盐水组、高压氧暴露+生理盐水组、高压氧暴露+辛伐他汀5mg/Kg组、高压氧暴露+辛伐他汀10mg/Kg组、高压氧暴露+辛伐他汀20mg/Kg组，每组10只。

实验方法：高分压氧暴露前3天，辛伐他汀组通过腹腔分别注射辛伐他汀(5、10、20mg/kg)，对照组通过腹腔注射等体积生理盐水。第3天注射完后1h将实验动物置于动物氧舱内，加压至0.23MPa，100％氧气暴露6h后，2分钟内减压出舱。取小鼠肺组织进行检测。

图1所示，空气暴露对照组小鼠肺组织的湿干重比为4.47±0.11(平均值±标准差)，高分压氧暴露+生理盐水组的湿干重比为4.81±0.23，和空气暴露对照组相比较，明显增高，提示肺渗透性增加。高分压氧暴露+辛伐他汀5mg/Kg组的湿干重比为4.62±0.15，10mg/Kg组为4.59±0.14，20mg/Kg组为4.49±0.09。其中20mg/Kg组肺湿干重比和高分压氧暴露+生理盐水组相比，显著下降，p值＜0.05，说明辛伐他汀20mg/Kg预处理可显著降低肺渗透性。

对各组小鼠的肺组织病理检查发现，高分压氧暴露+生理盐水组小鼠肺泡结构破坏，肺泡壁水肿明显，肺泡腔内可见嗜伊红色液体和红细胞渗出。辛伐他汀干预组，小鼠肺泡结构破坏、肺泡壁水肿及肺泡腔内出血情况明显减轻。具体见图2所示，其中图A为空气暴露+生理盐水组小鼠肺组织病理图；图B为高分压氧暴露+生理盐水组小鼠肺组织病理图；图C为辛伐他汀20mg/Kg预防组小鼠肺组织病理图，放大倍数均为200倍。

结论：通过比较不同剂量辛伐他汀对高分压氧导致的肺型氧中毒的干预作用，显示辛伐他汀20mg/Kg干预为最佳优先剂量，因此在后续的实验中，我们采用20mg/Kg作为实验的干预剂量。

实施例2

实验用注射药物：利用生理盐水，将辛伐他汀配制成2mg/mL的溶液，制备成注射剂。

实验动物和分组：雄性健康C57BL/6小鼠40只，体重20g，购于上海斯莱克实验动物有限公司。

将小鼠随机分为空气暴露+生理盐水组、空气暴露+辛伐他汀组、高压氧暴露+生理盐水组、高压氧暴露+辛伐他汀组，每组10只。

实验方法：高分压氧暴露前3天，辛伐他汀组通过腹腔注射辛伐他汀(20mg/kg)，对照组通过腹腔注射等体积生理盐水。第3天注射完后1h将实验动物置于动物氧舱内，加压至0.23MPa，100％氧气暴露6h后，2分钟内减压出舱。取小鼠肺组织进行检测。

实验结果显示，辛伐他汀可显著降低高分压氧导致的肺渗透性增加。和空气暴露组相比较，高压氧暴露+生理盐水组小鼠肺组织的湿干比重和肺泡灌洗液中蛋白含量显著上升，而辛伐他汀干预可明显降低肺组织湿干比重及肺泡灌洗液中的蛋白含量(图3)。

如图4所示，和空气暴露组相比较，高压氧暴露+生理盐水组小鼠肺组织中前致炎性因子，TNF-α、IL-6及IL-1β的含量，TUNEL阳性细胞数的表达量明显增加，而辛伐他汀预防性使用可显著降低小鼠肺组织中前致炎性因子及凋亡蛋白的含量。

结论：辛伐他汀预防性使用对高分压氧导致的肺型氧中毒具有明显的保护作用，可降低因高分压氧导致的肺组织渗透性增高、降低前致炎性因子及凋亡蛋白的表达。

实施例3

实验用注射药物：利用生理盐水，将辛伐他汀配制成2mg/mL的溶液，制备成注射剂。采用生理盐水将一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)配制成2mg/mL的注射剂。

实验动物和分组：雄性健康C57BL/6小鼠40只，体重20g，购于上海斯莱克实验动物有限公司。

将小鼠随机分为空气暴露+生理盐水组、高压氧暴露+生理盐水组、高压氧暴露+辛伐他汀组、高压氧暴露+辛伐他汀+L-NAME组，每组10只。

实验方法：高分压氧暴露前3天，辛伐他汀组及辛伐他汀+L-NAME组通过腹腔注射辛伐他汀(20mg/kg)，对照组通过腹腔注射等体积生理盐水。第3天高压氧暴露前1h，辛伐他汀+L-NAME组同时腹腔注射L-NAME(20mg/Kg)。注射完后1h将实验动物置于动物氧舱内，加压至0.23MPa，100％氧气暴露6h后，2分钟内减压出舱。取小鼠肺组织进行检测。

实验结果显示，L-NAME可完全消除辛伐他汀对高分压氧导致的肺型氧中毒的保护作用。

图5显示，和高压氧暴露+辛伐他汀组相比较，L-NAME组小鼠肺组织的湿干重比、支气管肺泡灌洗液蛋白含量明显增高，和高压氧暴露+生理盐水组无明显差异。

图5显示，L-NAME组小鼠肺组织的湿/干比、肺泡灌洗液中蛋白含量、前致炎性因子TNF-α及IL-6的含量及凋亡蛋白cleaved-caspase-3的含量和高压氧暴露+辛伐他汀组相比较，明显上升，和高压氧暴露+生理盐水组无明显差异。

实验结论：eNOS在辛伐他汀对高压氧导致的肺型氧中毒的保护作用中起着关键性的调控作用。

综上所述，通过上述实验可证实，辛伐他汀可通过上调eNOS的表达及活性，降低肺脏渗透性，减轻肺脏炎症，降低肺组织细胞的凋亡率，从而对肺型氧中毒起到保护作用。

以上所述为本发明的较佳实施例而已，但本发明不应该局限于该实施例所公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改，都落入本发明保护的范围。