对肝脏起到保护作用的中药药对及其制备方法与流程

文档序号:14814066发布日期:2018-06-30 05:29阅读:484来源:国知局

本发明涉及动物用中药领域,尤其涉及对动物肝脏起到保护作用的中药药对及其制备方法。



背景技术:

在机体发热疼痛时,常使用解热药,进行降热止痛,常见的解热药的不良反应有:过敏反应,胃肠道反应胃炎、溃疡、肝肾损害以及其他未知损害。尤其对于肝肾功能不好的人群来说,使用解热药,更要慎重。

药对,又称对药、对子,是临床上常用的、相对固定的两味药物的配伍形式,是中药配伍中的最小单位。药对在中医辨证施治的过程中,具有优化药物组合的功效,能起到协同作用,并相互纠正其偏性,或有相反相成的作用,疗效较之单味药堆砌可以成倍的提高。药对不是两味药物的随机组合,其配伍符合中药“七情和合”理论和组合法度。

柴胡为伞形科植物柴胡或陕叶柴胡的干燥根。苦,微寒,入肝、胆、心包、三焦经。具有和解退热,疏肝理气,升举阳气的效果。黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根,苦,寒,入肺、胆、大肠经。具有清热燥湿,泻火解毒,安胎的作用。肝脏缺血再灌注损伤能促进肝内胆管上皮细胞凋亡的发生,小柴胡汤预处理可减轻肝内胆管上皮细胞的损伤,还有实验表明二甲基亚硝胺导致的慢性肝纤维化大鼠模型给予柴胡后,从血液生化学、肝组织胶原蛋白含量、肝细胞凋亡比较春柴胡及北柴胡的保肝作用,结果发现春柴胡和北柴胡各剂量组均能不同程度地降低慢性肝纤维化模型动物的死亡率,肝功能指标也均有不同程度的改善。还有研究表明,柴胡多糖对辐射损伤的小鼠在造血功能和脏器损伤方面具有非常显著的保护作用和免疫增强的效果。柴胡皂苷对感染乙肝病毒的人肝细胞有细胞毒作用,因此而发挥治疗乙肝的疗效。有研究证实柴胡皂苷可防治大鼠肝纤维化,现代的研究表明以培养液中谷丙转氨酶(ALT)活性变化为指标,黄芩的水提液也具有保肝作用。还有的研究表明黄芩茎叶总黄酮具有保护肝细胞、抑制HSC活化和纤维组织增生、抗肝纤维化作用。



技术实现要素:

为解决上述问题,本发明提供一种对动物肝脏起到保护作用的的中药药对及其制备方法。

本发明的技术方案为:对动物肝脏起到保护作用的中药药对,包括柴胡和黄芪,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=2-4:1。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材4-10倍体积的冷水浸泡25-40min,回流提取,加热微沸25-40 min,提取2-5次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心15-40 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,步骤(2)为以药材5倍体积的冷水浸泡30min,回流提取,加热微沸30min,提取3次,得提取液。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,步骤(4)中,离心时间为20min。

中药原料的益处

柴胡为伞形科植物柴胡或陕叶柴胡的干燥根。苦,微寒,入肝、胆、心包、三焦经。具有和解退热,疏肝理气,升举阳气的效果。

黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根,苦,寒,入肺、胆、大肠经。具有清热燥湿,泻火解毒,安胎的作用。

本发明以中兽医药学理论为指导,从中医整体观念、肝胃同冶出发,达到对肝损伤的防治作用,从而保证动物的健康良性生长,且本发明的柴胡-黄芩药对组合物对肝脏的保护作用优于柴胡、黄芩单品的作用,也优于其他配比的柴胡-黄芩的组合物。

具体实施方式

实施例1

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=2-4:1。

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材4-10倍体积的冷水浸泡25-40min,回流提取,加热微沸25-40 min,提取2-5次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心15-40 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实施例2

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=2:1。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材5倍体积的冷水浸泡30 min,回流提取,加热微沸30 min,提取3次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心20 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实施例3

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=5:2。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材4倍体积的冷水浸泡40 min,回流提取,加热微沸40 min,提取2次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心15 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实施例4

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=3:1。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材10倍体积的冷水浸泡25 min,回流提取,加热微沸25 min,提取5次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心40 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实施例5

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=7:2。

所述的对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材8倍体积的冷水浸泡35 min,回流提取,加热微沸35 min,提取3次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心30 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实施例6

对动物肝脏起到保护作用的中药药对,所述原料的重量份数比为,柴胡:黄芩=4:1。

对动物肝脏起到保护作用的中药药对的制备方法,其制备步骤为:

(1)按重量份数比称取柴胡和黄芩;

(2)以药材6倍体积的冷水浸泡31 min,回流提取,加热微沸40 min,提取4次,得提取液;

(3)提取液合并后浓缩成含生药1 g/mL。

(4)在浓缩液中加入乙醇,加入乙醇的过程中不断搅拌至乙醇浓度为60%,静置,3000 rpm/min离心35 min,分离得上清液;

(5)上清液继续浓缩至无醇味,得最终药物的浓度为1.4 g/mL。

实验对照

以下通过实验对本发明进一步证明:

1、柴胡-黄芩药对对小鼠肝脏指数的影响

选用0.1% 的CCl4花生油溶液构建小鼠肝脏损伤模型。选取健康昆明小鼠260只,随机分为13组,分别为空白组、模型组、柴胡组、黄芩组、低配A组、低配B组、低配C组、药物A组、药物B组、药物C组、高配A组、高配B组、高配C组。

空白组每日正常饲喂,不经任何处理;

模型组和其它组给予0.1% CCl4花生油溶液腹腔注射(10 mL/kg)后,然后每日正常饲喂。除此之外,模型组按每kg 体重每日灌胃给予20 g生理盐水一次,连续30天;

柴胡组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的柴胡提取物一次,连续30天;

黄芩组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的黄芩提取物一次,连续30天;

低配A组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为1:1的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天;

低配B组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为1:2的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天;

低配C组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为1:3的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天;

药物A组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g实施例2制备的柴胡-黄芩药对提取物一次,连续30天;

药物B组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g实施例3制备的柴胡-黄芩药对提取物一次,连续30天;

药物C组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g实施例6制备的柴胡-黄芩药对提取物一次,连续30天;

高配A组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为5:1的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天;

高配B组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为8:1的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天;

高配C组,按每kg 体重每日灌胃给予20 g按实施例1的制备方法制备的重量份配比为10:1的柴胡-黄芩的提取物一次,连续30天。

给药30天后称量小鼠体重,采血。然后对小鼠进行乙醚麻醉处死并解剖,摘取小鼠肝脏,称取湿重,计算肝脏指数:肝脏重量(mg)÷小鼠体重(g)。实验结果可看出,CCl4处理过的小鼠的体重有所减轻,肝脏指数增高,柴胡-黄芩药对能够降低由CCl4导致的肝脏指数的升高,但在统计学上无显著差异。结果如表一:

2、柴胡-黄芩药对对小鼠肝组织中SOD含量的影响

对整体肝脏进行称量后小心剪下小块肝脏,并进行称量,放入灭菌并冰冻过的研钵中,然后加入组织匀浆液快速进行研磨,制成20%的肝组织匀浆液,在4℃条件下以3000 rpm/min离心20 min,取上清液。用试剂盒测定肝组织匀浆液中的SOD含量。

结果显示,模型组,柴胡组,黄芩组,低配A、B、C组,药物A、B、C组,高配A、B、C组小鼠肝组织匀浆液中的SOD含量均低于未经任何处理的空白组小鼠,且模型组与空白组相比有显著差异(p<0.05)。柴胡组,黄芩组,低配A、B、C组,药物A、B、C组,高配A、B、C组小鼠肝组织匀浆液中的SOD含量高于模型组小鼠。且药物A、B、C组小鼠肝组织匀浆液中的SOD含量显著高于其它组小鼠,柴胡、黄芩、柴胡-黄芩均可以提高损伤的肝组织中的SOD含量,柴胡-黄芩重量份配比为2-4:1则可以显著提高损伤的肝组织中的SOD含量。结果如表二:

*表示与模型组相比,有显著差异(p<0.05)

3、柴胡-黄芩药对对小鼠血清中ALT、AST含量的影响

眼球采血后,血液常温放置30 min,然后在4 ℃条件下以3000 rpm/min离心10 min,取上清,用生化仪检测血清中的ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)的含量。结果如表三:

*表示与模型组相比,有显著差异(p<0.05).

实验表明:CCl4造成小鼠急性肝损伤的病理过程与动物肝脏损伤相似,在小鼠 CCl4急性肝损伤时,模型组的实验动物血清 ALT、AST 水平明显升高,重量份配比2-4:1的柴胡-黄芩药对组的组合药物能显著降低肝损伤血清ALT、AST的升高,具有很好的降血脂作用和肝脏保护作用。从与柴胡、黄芩提取物组的对比可以发现,柴胡-黄芩药对组的组合药物的活性明显优与柴胡组和黄芩组的活性,且重量份配比2-4:1的柴胡-黄芩药对组的组合药物的活性明显优与其它重量份配比的柴胡-黄芩组。

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