本发明属于中药技术领域，特别涉及一种治疗冠心病的中药组合物的制备工艺。
背景技术：
冠心病在中老人中的发病率越来越高，而且呈现出逐渐向年轻化的发展态势。冠心病患者通常会伴随心悸、心绞痛、心供血不足等状况，不能从事体力劳动，严重的生活不能自理，甚至死亡。目前治疗冠心病常用西药，价格昂贵，毒副作用也非常大，而目前应用中药治疗或辅助治疗只能减轻患者痛苦，不能根治，且疗效也不能令人满意。因此临床上对疗效显著、安全性好、使用方便的中药制剂仍为急需。
CN101554466公开的冠心活血胶囊是一种治疗冠心病的中药组合物，它是由下述药材组成：丹参230g，荜茇70g，沉香115g，降香51g，肉豆蔻76g，山柰38g，广枣76g，檀香25g，沙棘76g，紫檀25g。其制备工艺如下：丹参、荜茇、山柰、广枣、沙棘、肉豆蔻提取三次，第一次加14倍量75％乙醇加热回流2小时，第二次加12倍量75％乙醇加热回流2小时，第三次加10倍量75％乙醇加热回流2小时，回收乙醇；沉香、降香、紫檀、檀香的粗粉8倍水浸泡5小时后提取挥发油，提取2次，每次14小时，其水提液过滤，药渣加8倍水加热回流2小时，过滤，合并提取液，浓缩，干燥后得到干膏粉。
文献资料报道丹参含有丹参酮和丹酚酸B、檀香含有挥发油檀香醇、降香含有挥发油、黄酮类化合物、紫檀香主含紫檀素、高紫檀素、安哥拉紫檀素，肉豆蔻含有挥发油、脂肪酸、蔗糖等成分；广枣含有黄酮和没食子酸等成分；沙棘主含黄酮和异黄酮类化合物，沉香含有挥发油及黄酮类成分，山柰含有山柰酚，荜茇含有挥发油、胡椒碱。上述药材中的有效成分既有醇溶性有效成分丹参酮、黄酮、异黄酮类化合物、生物碱、绿原酸及甾醇类化合物，又含有水溶性有效成分丹酚酸B及多糖，同时还含有挥发油。但上述工艺中未能将肉豆蔻中的挥发油进行提取。沉香中虽然含有挥发油，但其中含有的黄酮类成分生理活性更强，具有明显的清楚氧自由基的功效。因此，有必要对上述制备工艺进行改进，使其更好的发挥疗效。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种治疗冠心病的中药组合物的制备工艺，
所述的中药组合物含有以下成分：丹参400-480重量份、檀香44-52重量份、降香89-107重量份、紫檀香44-52重量份、肉豆蔻132-158重量份、广枣132-158重量份、沙棘132-158重量份、沉香200-240重量份、荜茇122-146重量份、山柰66-80重量份，优选为丹参440g重量份，檀香48g重量份，降香98g重量份，紫檀香48g重量份，肉豆蔻145g重量份，广枣145g重量份，沙棘145g重量份，沉香220g重量份，荜茇134g重量份，山柰73g重量份。
根据药物有效成分的理化性质，生产实际情况，经过反复实验、研究、分析比较而制定制备工艺如下：
(1)檀香、降香、紫檀香破碎成粗粉、肉豆蔻磕碎加入水浸泡，回流提取，得挥发油及水提液，备用；
(2)步骤(1)中所得挥发油加入含β-环糊精包合，得挥发油包合物，备用；
(3)丹参加乙醇加热回流提取，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩成清膏，备用；
(4)步骤(3)丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味加乙醇加热回流提取，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成清膏，备用；
(5)步骤(1)-(4)中的十味药渣合并加水煎煮，煎液滤过，滤液与步骤(1)水提液合并，浓缩加乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇并浓缩成清膏，备用；
(6)步骤(3)-(5)所得清膏合并，喷雾干燥，加入步骤(2)挥发油包合物，混匀，即得中药组合物。
步骤(1)优选为：檀香、降香、紫檀香破碎成粗粉、肉豆蔻磕碎加入6-10倍量水，浸泡1-3小时，回流提取4-8小时，更优选为檀香、降香、紫檀香破碎成粗粉、肉豆蔻磕碎加入8倍量水，浸泡2小时，回流提取8小时；
步骤(2)优选为：步骤(1)中所得每毫升挥发油加入含3-5gβ-环糊精的饱和水溶液在40～60℃条件下包合1-3小时，更优选为每毫升挥发油加入含4gβ-环糊精的饱和水溶液在60℃条件下包合2小时；
步骤(3)优选为：丹参加6-10倍量的60～90％乙醇加热回流提取1-3次，每次1.5～2.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.03～1.08(40℃测)的清膏，备用，更优选为丹参加10倍量的90％乙醇加热回流提取3次，每次1.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(40℃测)的清膏；
步骤(4)优选为：步骤(3)中丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味加6-10倍量40～80％乙醇加热回流提取1～3次，每次1.5～2.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.03～1.08(40℃测)的清膏，更优选为步骤(3)丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味加10倍量60％乙醇加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(40℃测)的清膏；
步骤(5)优选为：步骤(1)-(4)中的十味药渣合并加6-10倍量水煎煮1～3次，每次1～3小时，煎液滤过，滤液与步骤(1)水提液合并，浓缩至相对密度1.05～1.08(40℃测)的清膏，加乙醇使含醇量达60～80％，静置使沉淀，取上清液，回收乙醇并浓缩至至相对密度1.05～1.08(40℃测)的清膏；更优选为步骤(1)-(4)中的十味药渣合并加8倍量水煎煮2次，每次2小时，煎液滤过，滤液与步骤(1)水提液合并，浓缩至相对密度1.06(40℃测)的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时使沉淀，取上清液，回收乙醇并浓缩至至相对密度1.05(40℃测)的清膏；
步骤(6)所得组合物加适合的辅料可以制成胶囊剂，颗粒剂，片剂等口服制剂。
具体实施方式
实施例1挥发油提取工艺
文献报道，处方中檀香、降香、紫檀香、肉豆蔻四味药材含有挥发油，挥发油具有芳香开窍之功效。为探索处方中挥发油的提取工艺，以挥发油的收集量为检测指标，采用正交试验的方法对挥发油的提取工艺进行了系统研究。设计考察因素为：浸泡时间、加液量和蒸馏时间，各因素确定三个水平，详见表1。
表1冠心活血胶囊挥发油提取工艺考察因素及水平
实验方法：取样品9份，每份精密称取檀香25g、降香51g、紫檀香25g、肉豆蔻76g，按照正交试验L9(34)表的条件安排试验，以挥发油提取仪测定各样品挥发油的收集量。将测定结果列入表2中，结果见表2。
表2 L9(34)正交实验设计表及实验结果
结果表明：各因素的影响规律为：A＞B＞C，最佳工艺条件为A2B2C1，即8倍加液量，浸泡2小时，提取8小时。
表3挥发油提取工艺方差分析
结果表明：方差分析结果表明各因素水平之间无显著性差异，所以根据直观分析结果挥发油提取工艺最终定为8倍加液量，浸泡2小时，提取8小时。
实施例2挥发油包合工艺
为减少挥发油在贮存期的挥发，我们采用β-环糊精包合。根据文献资料和生产实际情况确定，考察因素为：油与β-环糊精的比例、包合温度、包合时间，各因素确定三个水平，详见表4。
表4冠心活血胶囊挥发油包合工艺考察因素及水平
实验方法：精密吸取挥发油9份，每份10ml，以饱和水溶液法按L9(34)正交设计表所列实验条件进行包合，置冰箱中静置24小时。抽滤、包合物在40℃条件下干燥后并带入公式，包合物实际重量/(β-CD+投油量)×100％，计算包合物收得率，并列入表5中，结果见表5。
表5 L9(34)正交实验设计表及实验结果
结果表明：各因素的影响规律为：C＞A＞B＞，最佳工艺条件为A2B1C2，即油∶环糊精1∶4，60℃包合2小时。
表6挥发油包合工艺方差分析
结果：方差分析结果表明各因素水平之间无显著性差异，所以根据直观分析结果挥发油包合工艺最终定为每ml挥发油加入含4g的β-环糊精饱和溶液在60℃条件下包合2小时。
实施例3丹参酮醇提工艺
设计考察因素为：醇浓度、加液量、回馏时间和回馏次数，各因素确定三个水平，详见表7。
表7冠心活血胶囊丹参醇提取工艺考察因素及水平
试验方法：取样品9份，每份精密称取丹参300g，按照正交试验L9(34)表的条件安排试验，提取完成后，回收乙醇，浓缩，定容至1000ml容量瓶中，得9份提取液样品。各样品液摇匀，各取1ml，分别置三角瓶中蒸干，加入甲醇50ml，回流1h，过滤，定容，备用。精密称取丹参酮IIA(批号：110766200417)2.04mg于10ml容量瓶中，精密吸取2ml，用甲醇定容至25ml，备用。将上述提取的9份样品液，用微孔滤膜过滤，弃去初滤液，收集续滤液于EP管中，进样10μl，以甲醇/水＝75∶25为流动相，气体压力3.0kpa，检测器温度70℃，测定丹参酮IIA的含量。结果见表8。
表8丹参酮II A的含量
将表中含量测定结果，经数理统计学处理，结果见表9.
表9 L9(34)正交实验设计表及实验结果
结果表明：各因素的影响规律为：B＞D＞C＞A，最佳工艺条件为A3B3C3D3即90％的乙醇溶液，10倍加液量，回流提取2.5h，提取3次。将表9数据经统计学处理后进行方差分析，结果见表10。
表10方差分析表
方差分析结果表明：B因素水平之间具有显著性的差异，A、C、D因素水平之间无显著性的差异。
结果：结合直观分析结果和方差分析结果，冠心活血胶囊中丹参醇提最佳工艺条件为：A3B3C3D3，即药材每次加入10倍量的90％乙醇，回流提取2.5小时，提取3次。
实施例4总黄酮提取工艺
文献报道，处方中山柰、广枣、沙棘、沉香、荜茇的活性成分为黄酮类化合物，黄酮类化合物具有安神，缓解心绞痛，改善心律，抗心血管疾病等作用。为探索处方中总黄酮的提取条件，以狼毒色原酮为标准品总黄酮含量为考察指标，采用正交试验的方法对总黄酮提取工艺进行了系统研究。
设计考察因素为：醇浓度、加液量，回流时间和提取次数，各因素确定三个水平，详见表11。
表11冠心活血胶囊总黄酮醇提取工艺考察因素及水平
实验方法：取样品9份，每份精密称取沉香115g，广枣76g，沙棘76g，山柰38g，荜茇70g，共计375g。置5000ml磨口烧瓶中，按L9(34)正交设计表安排实验。提取完成后，回收乙醇，浓缩，分别定容至1000ml容量瓶中，摇匀。精密量取各样品液10ml至蒸发皿中，蒸干，残渣加10ml甲醇加热提取1h，过滤，滤渣用甲醇冲洗，滤液定容至25ml容量瓶，摇匀，备用。经检测狼毒色原酮和冠心活血胶囊中的总黄酮在297nm处均有相似的吸收峰，故选择297nm为测定波长。
线性关系的考察和标准曲线的制备：取干燥至恒重的狼毒色原酮对照品，精密量取1ml，加适量的70％乙醇定量在10ml容量瓶中，制成每1ml中含色原酮100μg的溶液，摇匀，即得。精密吸取0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml对照品溶液制成一系列标准溶液。摇匀，静置15分钟后，以提取液作为参比溶液(70％乙醇)，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录V A)，把紫外-可见分光光度计打到UV处，以70％的乙醇为空白，在297nm波长处测定吸收度。以吸收度对溶液浓度进行回归分析，结果浓度在5.00-25.00μg/ml范围内呈良好线性关系。回归方程Y＝0.0361X+0.0031，r＝0.9994。结果见表12。
表12总黄酮测定的标准曲线数据
样品液的含量测定：取上述9份样品液，每份精密量取0.2ml，用甲醇定容至25ml容量瓶中，摇匀，在297nm波长处测定吸光度值，代入回归方程计算各样品中总黄酮的含量，结果见表13：
表13冠心活血胶囊总黄酮的含量测定结果
将表13中含量测定结果，经数理统计学处理，结果见表14
表14 L9(34)正交实验设计表及实验结果
结果表明：各因素的影响规律为：D＞C＞A＞B，最佳工艺条件为A2B2C2D3，即60％的乙醇溶液，8倍加液量，回流提取2h，提取3次。将表14数据经统计学处理后进行方差分析，结果见表15。
表15方差分析表
方差分析结果表明：各因素水平之间无显著性差异。从生产实际出发最终工艺条件为A2B2C2D3，即60％的乙醇溶液，10倍加液量，回流提取2h，提取2次。
实施例5丹参药渣水提工艺
文献报道，处方中丹参含有水溶性有效成分丹酚酸B及多糖。为保证水溶性有效成分能够充分提取我们通过正交设计对水提工艺进行了优化。根据生产实际情况确定考察因素为浸泡时间、加液量、提取时间和提取次数。各因素确定三个水平。详见16。
表16冠心活血胶囊丹参水提工艺考察因素及水平
实验方法：取样品9份，每份精密称取丹参230g，沉香115g，广枣76g，沙棘76g，山柰38g，荜茇70g，檀香25g、降香51g、紫檀香25g、肉豆蔻76g，置10000ml磨口烧瓶中，按表17L9(34)正交设计表安排实验。提取完成后，减压浓缩，分别定容至1000ml容量瓶中，摇匀。各取1ml置三角瓶中蒸干，加入甲醇50ml，回流1h，过滤，定容，备用。按照中国药典2005版。
丹酚酸B的含量测定方法测定各样品液中丹酚酸B的含量，并列入表17中，结果见表17。
表17 L9(34)正交实验设计表及实验结果
结果表明：各因素的影响规律为：C＞B＞A＞，最佳工艺条件为A2B2C2即每次8倍加液量，回流提取2.0h，提取2次。将表17数据经统计学处理后进行方差分析，结果见表18。
表18水提工艺方差分析表
方差结果表明；方差分析结果表明各因素水平之间无显著性差异，所以根据直观分析结果水提工艺最终定为：药材每次加入8倍量水煎煮，煎煮二次，每次2小时。
综上提取工艺研究结果表明：冠心活血胶囊中丹参醇提最佳工艺条件为：A3B3C3D3，即药材每次加入10倍量的90％乙醇，回流提取2.5小时，提取3次。方差分析结果表明，B因素(溶剂加入量)水平之间具有显著性的差异，A(醇浓度)、C(提取时间)、D(提取次数)因素水平之间具无显著性的差异。总黄酮最佳提取工艺条件为A2B2C2D3，即60％的乙醇溶液，8倍加液量，回流提取2h，提取3次，方差分析结果表明各因素水平之间无显著性差异。所以从生产实际出结合方差分析结果，冠心活血胶囊醇提最终工艺条件为丹参加入10倍量的90％乙醇，回流提取2.5小时，丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味药材加入60％的乙醇溶液，8倍加液量，回流提取2h，提取2次。挥发油提取工艺条件为药材加入8倍量水，浸泡2小时，水蒸气蒸馏法提取8小时。挥发油β-环糊精包合工艺条件为油∶环糊精1∶4，60℃包合2小时。水提最佳工艺条件为，每次8倍加液量，回流提取2.0小时，提取2次。
实施例6醇沉工艺研究
精密称取样品3份，每份样品中分别含有丹参1624g、檀香200g、降香408g、紫檀香200g、肉豆蔻608g、广枣608g、沙棘608g、沉香920g、荜茇560g、山柰3052g。按最佳工艺条件A3B2C2，即每次8倍加液量，回流提取2.0h，提取2次。按上述条件提取完成后，浓缩，定容至50L容量瓶中，将其平均分成五份，按表19进行醇沉浓度筛选，以丹酚酸B含量为检测指标。结果见表19.
表19冠心活血胶囊醇沉浓度筛选表
结果表明：醇沉浓度为60％时，醇沉效果良好，丹酚酸B含量下降较少。
实施例7浸提出膏量研究
精密称取样品3份，每份样品中分别含有丹参406g、檀香50g、降香102g、紫檀香50g、肉豆蔻152g、广枣152g、沙棘152g、沉香230g、荜茇140g、山柰763g。分别按前述最佳工艺提取，以上十味，檀香、降香、紫檀香、肉豆蔻四味磕碎后采用水蒸气蒸馏法提取挥发油备用(药材中加入8倍量水，浸泡20min，回流提取8h，挥发油提取量1.3％)，β-环糊精包合(每毫升挥发油加入含4g的β-环糊精饱和溶液在60℃条件下包合2小时)，包合物、药渣及水提液备用。丹参乙醇提取，(药材加入10倍量的90％乙醇，回流提取2.5小时，)滤过，回收乙醇，浓缩至相对密度1.05(40℃测)，浓缩液备用。丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味药材用60％乙醇提取(加入10倍量，60％乙醇，回流提取2h，提取2次)滤液合并，滤过，回收乙醇，浓缩至相对密度1.05(40℃测)，浓缩液备用。醇提药渣及檀香、降香、紫檀香、肉豆蔻药渣合并加水煎煮(加入8倍量水，回流提取2h，提取2次)，滤过，滤液与檀香、降香、紫檀香、肉豆蔻水蒸气蒸馏液合并，浓缩至相对密度1.06(40℃测)加入乙醇使醇浓度为60％静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度1.05(40℃测)，浓缩液与上述浓缩液合并，喷雾干燥(提取液密度为1.05，以19ppm的速度进入机器腔体内，在110-120温度下干燥)，将上述喷雾干燥粉与β-环糊精包合物混合至均匀，计算出膏量。结果见表20。
表20冠心活血胶囊浸提出膏量一览表
结果表明：冠心活血胶囊浸提出膏量平均为20.82％。
实施例8冠心活血胶囊的制备
丹参440g、檀香48g、降香98g、紫檀香48g、肉豆蔻145g、广枣145g、沙棘145g、沉香220g、荜茇134g、山柰73g。
制备工艺：檀香、降香、紫檀香破碎成粗粉、肉豆蔻磕碎加入8倍量水，浸泡2小时，回流提取8小时，得挥发油，药渣及水提液备用；每毫升挥发油加入含4gβ-环糊精的饱和水溶液在60℃条件下包合2小时，得挥发油包合物备用。丹参加10倍量的90％乙醇加热回流提取三次，每次1.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(40℃测)的清膏，备用；丹参药渣与广枣，沙棘，沉香，山柰，荜茇五味加10倍量60％乙醇加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(40℃测) 的清膏，备用。以上十味药渣合并加8倍量水煎煮2次，每次2小时，煎液滤过，滤液与挥发油水提液合并，浓缩至相对密度1.06(40℃测)的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时使沉淀，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(40℃测)的清膏；上述清膏合并，喷雾干燥，加入挥发油包合物及总量1％重量的硬脂酸镁，混匀，装入胶囊，制成胶囊剂。
本发明是结合最佳实施例进行描述的，然而在阅读了本发明的上述内容后，本领域技术人员能领会在公开的实施例中做许多改变也可获得相同或类似的结果，而不超出本发明的构思、精神和范围。更具体地说，显然有些化学和生理性的相关试剂可代替本文所公开的试剂而得到相同或类似的结果。所有类似的取代和修饰对本领域技术人员来说，显然都认为是本发明的精神、范围和构思及权利要求范围内的，即所有上述这些等价形式都同样落于本发明的权利要求书所限定的范围。本工艺路线的应用，用于“冠心活血制剂”的规模化生产，制成不同形式的产品(如药物制剂，食品和保健品)都属于本发明的权利要求范围内。