降血脂、抗动脉粥样硬化的蒙药组合物及制备方法和应用与流程

本发明涉及蒙药组合物技术领域，尤其是涉及一种降血脂、抗动脉粥样硬化的蒙药组合物及制备方法和应用。

背景技术：

脂类代谢与心血管疾病密切相关，高脂血症则是引发动脉粥样硬化的主要原因之一，特别是血清总胆固醇水平增高是致动脉粥样硬化的危险指标。由于脂肪代谢或运转异常使血浆一种或多种脂质高于正常称为高脂血症，脂质不溶或微溶于水必须与蛋白质结合以脂蛋白形式存在，因此，高脂血症常为高脂蛋白血症，表现为高胆固醇血症、高甘油三酯血症或两者兼有，临床上分为两类：原发性，罕见，属遗传性脂代谢紊乱疾病；继发性，常见于控制不良糖尿病，饮酒、甲状腺功能减退症、肾病综合征，肾透析、肾移植、胆道阻塞，口服避孕药等。据中国近年的调查统计显示，国内冠心病的患病率已达到60％以上，其中50％左右的有高血脂症。心肌梗塞患者中高甘油三脂血症患者已达80％左右，而且高血脂又是诱发脑血管病的主要原因。

动脉粥样硬化是一组动脉硬化的血管病中常见的最重要的一种，其特点是受累动脉病变从内膜开始。一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，病变常累及弹性及大中等肌性动脉，一旦发展到足以阻塞动脉腔，则该动脉所供应的组织或器官将缺血或坏死。由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样，因此称为动脉粥样硬化。动脉粥样硬化是心脑血管病的主要病理基础，因本病所导致的冠心病、脑中风等疾病，具有发病率高、致残率高、死亡率高及复发率高等特点，已成为危害人类健康的“头号杀手”。加强对动脉粥样硬化的防治是降低心脑血管病及死亡率的关键。心脑血管急性事件的最主要发病机制是AS易损斑块破裂、血小板激活及血栓形成。因此，提高斑块的稳定性是防治心脑血管急性事件发生的关键。

目前，国内外对高血脂症的治疗方法有两种，一是饮食疗法，而限制饮食疗法在降低了高血脂的同时又给人体的正常营养来源造成某种成分及程度的失调，而且达到疗效的目的的时间是漫长的。二是西医降脂疗法存在不同程度的副作用，造成肠道不良反应，而且不能根治，停药后其胆固醇、甘油三酯等指标又明显的上升。有些药物还存在着药效不能持久，停药后出现反弹，必须长期不间断的服用的缺点。这些问题影响着药物的疗效，给患者增加经济负担。

抗动脉粥样硬化的药物虽然以西药为主，但传统医药与民族医药具有安全、低毒等特点，倍受医家和学者的重视，特别是蒙药在治疗动脉粥样硬化方面具有一定的优势，毒副作用小而且一般不会有停药反应，但是现在治疗动脉粥样硬化的传统蒙药虽有抗动脉粥样硬化的作用，但存在治疗效果不够明显，且配方繁琐、用药量大的突出问题，现有蒙药中鲜有疗效确切的降血脂、抗动脉粥样硬化蒙药。

因此，开发一种制备方法简便，快速有效，不易复发，配方简单，用药量小，且无不良反应的能够降血脂、抗动脉粥样硬化的蒙药组合物，也日益成为研发的重点。

技术实现要素：

本发明的一个目的在于提供一种降血脂，抗动脉粥样硬化的蒙药组合物，以克服现有技术中的治疗时间长，停药反弹，配方复杂，用药量大，有明显副作用的技术问题。

本发明的第二个目的在于提供一种降血脂，抗动脉粥样硬化的蒙药组合物的制备方法，具有制备方法简便，剂型多样的优点。

本发明的第三个目的在于提供一种降血脂，抗动脉粥样硬化的蒙药组合物在制备降血脂、抗动脉粥样硬化的药物或保健食品中的应用。

本发明提供的一种降血脂、抗动脉粥样硬化的蒙药组合物，所述蒙药组合物由以下重量份的组分组成：牛黄1－20份、珍珠1－100份、麝香1－20份、栀子提取物1－10份、荜茇提取物0.1－10份、红花提取物1－10份、白云香1－100份。

进一步地，所述蒙药组合物由以下重量份的组分组成：牛黄1份、珍珠25份、麝香1份、栀子提取物1份、荜茇提取物0.6份、红花提取物1份、白云香4份。

进一步地，所述栀子提取物由以下方法制得：取栀子粉末10g，加入60％乙醇120mL，60℃加热回流提取1h，放至室温，过滤；滤液浓缩至无乙醇，将栀子提取浓缩液冻干5h后干燥8h，得到粉末状栀子提取物2.831g；所述粉末状栀子提取物中栀子苷的含量为4.6％。

进一步地，所述荜茇提取物由以下方法制得：取粉碎后的荜茇1000g，加入石油醚2500mL，61℃回流提取3h，放至室温，抽滤；将所得第一滤液浓缩为橙色浓缩液并回收石油醚，将所得滤渣用乙醇重复再提取2次；待所述浓缩液产生黄色沉淀后抽滤，所得第二滤液浓缩至无石油醚，50℃下真空干燥2小时得到固体；将所述固体加入乙醇并搅拌，使所述固体重结晶，抽滤后得第三滤液；将所述第三滤液中加入活性炭，73℃回流脱色40min，抽滤得第四滤液；将所述第四滤液浓缩至30－40mL，放至室温，待有淡黄色晶体析出后抽滤，并洗涤所述晶体；将所述晶体真空干燥后，得到粉末状荜茇提取物50g；所述粉末状荜茇提取物中胡椒碱的含量为95％。

进一步地，所述红花提取物由以下方法制得：取红花粉末10g，加入50％乙醇120mL，70℃加热回流提取2h，放至室温，过滤；滤液浓缩至无乙醇，将红花提取浓缩液冻干5h后干燥8h，得粉末状红花提取物3.111g；所述粉末状红花提取物中红花黄色素的含量为61.72％。

进一步地，将所述蒙药组合物粉碎后，与药学上可接受的载体混合，湿法造粒，低温干燥，制备成固体药物制剂。

进一步地，所述低温干燥的温度为50℃。

进一步地，所述药学上可接受的载体包括糊精、淀粉、蔗糖。

优选地，所述药学上可接受的载体为淀粉。

进一步地，所述固体药物制剂为片剂、胶囊、冲剂。

优选地，所述固体药物制剂为胶囊。

进一步地，本发明还提供了本发明所述的蒙药组合物在制备降血脂、抗动脉粥样硬化的药物或保健食品中的应用。

本发明提供的降血脂，抗动脉粥样硬化的蒙药组合物，具有快速有效，不易复发，配方简单，用药量小，且无不良反应的优点。

本发明提供的降血脂，抗动脉粥样硬化的蒙药组合物的制备方法，具有制备方法简便，剂型多样的优点。

附图说明

图1a为抗动脉粥样硬化的动物实验正常对照组家兔主动脉HE染色结果图；

图1b为抗动脉粥样硬化的动物实验高脂模型组家兔主动脉HE染色结果图；

图1c为抗动脉粥样硬化的动物实验传统西药组家兔主动脉HE染色结果图；

图1d为抗动脉粥样硬化的动物实验高剂量组家兔主动脉HE染色结果图；

图1e为抗动脉粥样硬化的动物实验中剂量组家兔主动脉HE染色结果图；

图1f为抗动脉粥样硬化的动物实验低剂量组家兔主动脉HE染色结果图；

图1g为抗动脉粥样硬化的动物实验传统蒙药组家兔主动脉HE染色结果图；

图2a为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验正常对照组家兔主动脉HE染色结果图；

图2b为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验高脂模型组家兔主动脉HE染色结果图；

图2c为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统西药组家兔主动脉HE染色结果图；

图2d为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验实验组家兔主动脉HE染色结果图；

图2e为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统蒙药组家兔主动脉HE染色结果图；

图3a为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验正常对照组家兔主动脉Masson染色图；

图3b为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验高脂模型组家兔主动脉Masson染色图；

图3c为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统蒙药组家兔主动脉Masson染色图；

图3d为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统西药组家兔主动脉Masson染色图；

图3e为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验实验组家兔主动脉Masson染色图；

图4a为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验正常对照组家兔主动脉油红O染色图；

图4b为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验高脂模型组家兔主动脉油红O染色图；

图4c为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统蒙药组家兔主动脉油红O染色图；

图4d为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验传统西药组家兔主动脉油红O染色图；

图4e为稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验实验组家兔主动脉油红O染色图。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本发明提供了一种蒙药组合物，其由以下组分组成：牛黄1－20份、珍珠1－100份、麝香1－20份、栀子提取物1－10份、荜茇提取物0.1－10份、红花提取物1－10份、白云香1－100份。

本发明提供的蒙药组合物中，栀子提取物由以下方法制得：取栀子粉末10g，加入60％乙醇120mL，60℃加热回流提取1h，放至室温，过滤；滤液浓缩至无乙醇，将栀子提取浓缩液冻干5h后干燥8h，得到粉末状栀子提取物2.831g；所述粉末状栀子提取物中栀子苷的含量为4.6％。本发明方法制备的栀子提取物中栀子苷的含量与市售的栀子提取物中栀子苷的含量相比，提高了12％。

本发明提供的蒙药组合物中，荜茇提取物由以下方法制得：取粉碎后的荜茇1000g，加入石油醚2500mL，61℃回流提取3h，放至室温，抽滤；将所得第一滤液浓缩为橙色浓缩液并回收石油醚，将所得滤渣用乙醇重复再提取2次；待所述浓缩液产生黄色沉淀后抽滤，所得第二滤液浓缩至无石油醚，50℃下真空干燥2小时得到固体；将所述固体加入乙醇并搅拌，使所述固体重结晶，抽滤后得第三滤液；将所述第三滤液中加入活性炭，73℃回流脱色40min，抽滤得第四滤液；将所述第四滤液浓缩至30－40mL，放至室温，待有淡黄色晶体析出后抽滤，并洗涤晶体；将所述晶体真空干燥后，得到粉末状荜茇提取物50g；所述粉末状荜茇提取物中胡椒碱的含量为95％。本发明方法制备的荜茇提取物中胡椒碱的含量为95％以上，与市售的荜茇提取物中胡椒碱的含量相比，提高了10％。

本发明提供的蒙药组合物中，红花提取物由以下方法制得：取红花粉末10g，加入50％乙醇120mL，70℃加热回流提取2h，放至室温，过滤；滤液浓缩至无乙醇，将红花提取浓缩液冻干5h后干燥8h，得粉末状红花提取物3.111g；所述粉末状红花提取物中红花黄色素的含量为61.72％－70.32％。本发明方法制备的红花提取物中红花黄色素的含量与市售的红花提取物中红花黄色素的含量相比，提高了12％。

本发明还提供了所述蒙药组合物的制备方法，将1－20份牛黄、1－100份珍珠、1－20份麝香、1－10份栀子提取物、0.1－10份荜茇提取物、1－10份红花提取物、1－100份白云香粉碎后，与药学上可接受的载体混合，湿法造粒，低温干燥，制备成固体药物制剂。

在一个优选的实施方式中，药学上可接受的载体为淀粉，也可根据需要适应性调整为糊精或蔗糖。

在一个优选的实施方式中，固体药物制剂为胶囊，也可根据需要适应性调整为片剂或冲剂。

另外，本发明还提供了所述蒙药组合物在制备降血脂、抗动脉粥样硬化的药物或保健食品中的应用。

实施例1

按照如下组方，分别按照重量份数称取适量原料，其中牛黄1份、珍珠25份、麝香1份、栀子提取物1份、荜茇提取物0.6份、红花提取物1份、白云香4份，然后，按照如下步骤制备本实施例的蒙药组合物：

将本发明蒙药组合物各组分粉碎后混合，加淀粉104份，湿法造粒，50℃干燥，配置成颗粒，灌胶囊。

实施例2

按照如下组方，分别按照重量份数称取适量原料，其中牛黄1份、珍珠1份、麝香1份、栀子提取物1份、荜茇提取物0.1份、红花提取物1份、白云香1份，然后，按照如下步骤制备本实施例的蒙药组合物：

将本发明蒙药组合物各组分粉碎后混合，加糊精104份，湿法造粒，50℃干燥，配置成颗粒，打为片剂。

实施例3

按照如下组方，分别按照重量份数称取适量原料，其中牛黄20份、珍珠100份、麝香20份、栀子提取物10份、荜茇提取物10份、红花提取物10份、白云香100份，然后，按照如下步骤制备本实施例的蒙药组合物：

将本发明蒙药组合物各组分粉碎后混合，加蔗糖104份，湿法造粒，50℃干燥，配置成颗粒。

对比例1

将辛伐他汀片加入蒸馏水中溶解，配制成浓度为1mg/mL的混悬液。

对比例2

将传统蒙药额尔敦－乌日勒加入蒸馏水中溶解，配制成浓度为80mg/mL的混悬液。

为了有助于充分的说明本发明提供的蒙药组合物的治疗效果，现结合具体的实验详细介绍如下。

需要注意的是，如未明确指出，本实验例中提到的试剂、仪器或者设备均为常规的试剂、仪器或者设备，所用到的方法，均为常规的方法。

降血脂活性的动物试验

(一)材料与仪器

实验动物：二级雄性Wistar大鼠，体重170±10g，许可证号：SCXK(京)2006－2009，级别SPF/AF，由北京维通利华实验动物中心提供。

实验药品及试剂：总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白试剂盒由中生北控物科技股份有限公司生产；胆固醇由北京化学试剂公司生产；胆酸钠由北京海淀区微生物培养机制品厂生产；辛伐他汀由江苏联环药业股份有限公司生产；额尔敦－乌日勒由内蒙古蒙药股份有限公司生产生产，批号100336。

基础饲料配方：面粉20％，米粉10％，玉米20％，麸皮25％，豆料20％，骨粉2％，鱼粉2％，食盐0.9％，维生素0.1％；

高脂饲料配方：胆固醇3％，猪油10％，胆酸钠0.5％，基础饲料86.5％。

实验仪器：意大利产PRONTO EVOLUTION(奔腾加强型)全自动生化分析仪；上海产TDL－5－A离心机。

(二)实验方法

分组及给药：取雄性Wistar大鼠70只，体重180±10g，实验前在实验环境下(室温20￣～24℃，湿度50％～￣60％，自由饮水)用普通标准饲料饲喂3天后，按体重随机分成7组，每组10只。采用预防性受试给药，给药第1天开始喂养高脂饲料每只20g/天以构建大鼠高血脂模型，每日给药前对大鼠进行体重测定，按体重以1mL/100g的给药量连续给药14天。灌胃时间：每天上午10：30。

1组为正常对照组，饲喂普通标准饲料每只20g/天，灌胃同体积的蒸馏水；

2组为高脂模型对照组，饲喂高脂饲料每只20g/天，灌胃同体积的蒸馏水；

3组为传统西药对照组，饲喂高脂饲料每只20g/天，按照10mg/kg的比例灌胃对比例1提供的辛伐他汀水溶液；

4组为高剂量实验组，饲喂高脂饲料每只20g/天，按照300mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

5组为中剂量实验组，饲喂高脂饲料每只20g/天，按照150mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

6组为低剂量实验组，饲喂高脂饲料每只20g/天，按照75mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

7组为传统蒙药对照组，饲喂高脂饲料每只20g/天，按照800mg/kg的比例灌胃对比例1提供的额尔敦－乌日勒水溶液。

测定与观察方法：各组灌胃给药14天，在第15天时禁食不禁水12小时，尾静脉取血，采用酶比色法在全自动生化仪上测定血清总胆固醇值、甘油三酯值、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白。对所得数据进行统计学处理，与均数±标准差表示，差异显著性以T检验判定。

(三)实验结果

每隔5天按鼠体重计算给药量。体重变化见表1，各组从1、5、10、15天体重增长正常，平均体重各组间无异常变化。

表1各组大鼠平均体重变化记录(g)

各剂量实验组对大鼠血脂的影响，采用酶比色法在全自动生化仪上测定血清总胆固醇值(TC)、甘油三酯值(TG)、高密度脂蛋白(HDL－C)和低密度脂蛋白(LDL－C)，结果如表2所示。

表2实验组各剂量组对大鼠血脂的影响(mmol/L，)

从表2表3中可以看出，给予药物干预对于大鼠体重没有明显影响。高脂模型组与正常对照组比较，总胆固醇值升高，而且两组比较有极显著差异，说明大鼠高血脂模型造模成功。

1.对血清TC的影响

高脂模型组血清TC较正常对照组极显著升高(P＜0.001)；与高脂模型组比较，各剂量实验组各组TC有不同程度的降低，即低剂量组、传统蒙药组与高脂模型组比较有差异(P＜0.05)、中剂量组与高脂模型组比较有显著性差异(P＜0.01)、高剂量组和传统西药组与高脂模型组比较均有极显著性差异(P＜0.001)，表明各剂量实验组具有与传统西药辛伐他汀同样的显著降低大鼠血清TC的作用，且呈剂量依赖性。与传统蒙药组比较，高剂量实验组TC显著低于传统蒙药组(P＜0.05)，表明本发明实施例1提供的蒙药组合物降低胆固醇作用优于传统蒙药。

2.对血清TG的影响

高脂模型组TG较正常对照组升高(P＜0.01)，与高脂模型组比较，实验组低、中剂量组和传统西药组有差异(P＜0.05)，而高剂量组有显著性差异(P＜0.01)，表明本发明实施例1提供的蒙药组合物有降低高脂血症大鼠血清TG的作用，其效果优于传统西药辛伐他汀。与传统西药组比较，高剂量组TG显著降低(P＜0.05)；与传统蒙药组比较，高剂量组TG显著低于传统蒙药组(P＜0.05)，表明本发明实施例1提供的蒙药组合物降低TG的作用优于传统西药辛伐他汀和传统蒙药。

3.对血清LDL－C的影响

高脂模型组较正常对照组血清LDL－C极显著升高(P＜0.001)；实验组低、中剂量组与高脂模型组比较有差异(P＜0.05)、高剂量组和传统西药组与高脂模型组比较均有显著性差异(P＜0.01)，表明本发明实施例1提供的蒙药组合物与传统西药辛伐他汀同样具有显著的降低HLP大鼠血清LDL－C的作用，且呈剂量依赖性。

4.对血清HDL－C的影响

高脂模型组较正常对照组血清HDL－C降低(P＜0.05)；高剂量组和传统西药组能升高HDL－C(P＜0.05)，而实验组低、中剂量组与高脂模型组间无显著性差异(P＞0.05)。表明本发明实施例1提供的蒙药组合物与传统西药辛伐他汀具有一定的升高大鼠HDL－C的作用。

通过以上实验结果可见，本发明实施例1提供的蒙药组合物各剂量组和传统蒙药均可明显降低高脂模型大鼠血清中TC、TG及LDL－C，同时还升高HDL－C，且其作用与传统西药辛伐他汀相比差异无显著性。以上结果表明本发明实施例1提供的蒙药组合物的降血脂功能不仅可与降脂西药辛伐他汀媲美，而且在降低TC和TG方面优于传统蒙药。且药品用量减少了62.5％。

抗动脉粥样硬化的动物实验

(一)材料与仪器

实验动物：健康日本雄性大耳白家兔，体重2.0±0.2kg，由北京大学医学部实验动物科学部提供，许可证号：SCXK(京)2005－0002。

实验药品及试剂：辛伐他汀由山东罗欣药业股份有限公司生产，批号090723；额尔敦－乌日勒由内蒙古蒙药股份有限公司生产生产，批号100336；胆固醇，北京爱普华美生物科技有限公司生产，批号：20090715；蛋黄粉，北京金健力蛋粉厂生产。猪油为市售。

基础饲料配方：干草粉40％，豆饼10％，麸皮13％，小麦7％，玉米粉23％，鱼粉1.5％，酵母粉3％，骨粉1.5％，食盐0.8％，复方维生素0.1％，微量元素0.1％；

高脂饲料配方：胆固醇1.5％，猪油5％，蛋黄粉10％，基础饲料83.5％。

实验仪器：生物组织包埋机，TB－718，湖北泰微医疗科技有限责任公司；组织切片机，RM2235，德国Leica公司；烤片机，HI1220，德国Leica公司；全自动组织脱水机，ST5020，德国Leica公司；显微镜，Olympus bx51，上海赖氏电子科技有限公司；图像采集系统，nymicro DSSTM；图像分析系统，Image－pro Plus 5.1；Masson染液：货号DO26，南京建成科技有限公司；油红O染液：货号DO27，南京建成科技有限公司提供。

(二)实验方法

分组及给药：取70只家兔随机分为7组，实验前在实验环境下(室温18±2℃；相对湿度40±15％，自由饮水)用普通标准饲料饲喂3天后，按体重随机分成7组，每组10只。

1组为正常对照组，饲喂基础饲料，灌胃同体积的蒸馏水；

2组为高脂模型对照组，饲喂高脂饲料，灌胃同体积的蒸馏水；

3组为传统西药对照组，饲喂高脂饲料，按照5mg/kg的比例灌胃对比例1提供的辛伐他汀水溶液；

4组为高剂量实验组，饲喂高脂饲料，按照150mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

5组为中剂量实验组，饲喂高脂饲料，按照75mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

6组为低剂量实验组，饲喂高脂饲料，按照37.5mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

7组为传统蒙药对照组，饲喂高脂饲料，按照400mg/kg的比例灌胃对比例1提供的额尔敦－乌日勒水溶液。

测定与观察方法：连续喂养90天，在饲喂高脂饲料的同时灌胃给药，每天灌胃1次，90天后处死家兔，取主动脉进行指标检测。统计学分析：采用SPSS13.0软件包进行数据分析。计量资料以表示，两组均数间差异采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

(三)实验结果

1.实验动物一般状况

实验中家兔健康状况良好，其中有5只(高脂模型组、传统西药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组各1只)因腹泻、感冒而死亡，其余家兔精神状态良好、行为活动、毛色、饮水、粪便未见明显异常，体重增长速度组间无差异。

2.对家兔主动脉病理形态学的影响

(1)主动脉肉眼观察

正常对照组家兔动脉壁结构正常，无粥样病损，无脂质斑块形成。高脂模型组家兔主动脉内膜粗糙不平，肉眼可见有大量黄白色条纹状脂纹及斑块，向内膜表面显著隆起，其中有2例主动脉内膜70％为粥样斑块，几乎占满整段动脉内膜，其它略平些。高剂量组内膜普遍无太大病损，其中有3例内膜光滑基本无增厚，无明显粥样病损，无脂质斑块，其它有病变的主动脉亦较高脂模型组减轻，呈早期脂纹期改变。中剂量组和传统西药组各例家兔主动脉虽有黄白色条纹状脂纹及斑块，但多数例主动脉内膜的条纹状脂纹较高脂模型组少。低剂量多数例内膜增厚，有粥样斑块形成。油红0染色后，斑块面积占主动脉总面积百分比经统计学处理，各剂量实验组、传统西药组、传统蒙药组与高脂模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。高剂量组与传统蒙药组比较有显著性差异(P＜0.05)，见表3。

表3各组家兔主动脉油红O染色后图像分析结果()

与高脂模型组比较^▲P＜0.05；与传统蒙药组比较：^#P＜0.05。

(2)主动脉光镜观察

正常对照组主动脉结构形态正常，内膜完整光滑，中膜细胞排列整齐，结构清晰，弹力板完整，未见任何异常。高脂模型组形成典型AS病变，动脉壁局部平滑肌细胞减少，细胞排列紊乱，可见明显脂质核形成及内膜损伤。光镜下给药各组病变程度均减轻。结果如图1所示。

各组蜡封切片HE染色，应用MOTIC AE20显微镜及高清晰彩色医学图文分析系统进行病变取图病理学观察及定量分析，各组随机取图进行测量内膜与中膜厚度，计算内膜中模厚度比值，结果见表4。通过表5的结果可知，与正常对照组比较，高脂模型组I和I/M显著增大(P＜0.05)，而给药各组I及I/M均较高脂模型组得到改善(P＜0.05)，高剂量组与传统蒙药组比较有显著性差异(P＜0.05)。

表4各组家兔主动脉内膜与中膜病理形态学定量分析比较()

与高脂模型组比较^▲P＜0.05；与传统蒙药组比较：^#P＜0.05。

以上研究结果显示，家兔喂养高脂饲料90天后可形成明显的粥样斑块，但同时给予中剂量以上的本发明实施例1提供的蒙药组合物和传统西药、传统蒙药，均可明显缩小动脉粥样硬化斑块面积，减少对内皮细胞，弹力板的损伤，减少泡沫细胞的数量，减轻血管中膜平滑肌细胞(SMC)的增殖。从家兔主动脉油红O染色后图像分析结果和家兔主动脉内膜与中膜病理形态学定量分析可以看出，高剂量的本发明实施例1提供的蒙药组合物抗动脉粥样硬化的作用优于传统蒙药。

稳定动脉粥样硬化易损斑块的动物实验

(一)材料与仪器

实验动物：健康雄性新西兰家兔50只，体重2.0±0.2kg，由北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂提供，许可证编号：SCXK(京)2011－0006。

实验药品及试剂：辛伐他汀由山东罗欣药业股份有限公司生产，批号090723；额尔敦－乌日勒由内蒙古蒙药股份有限公司生产生产，批号100336；胆固醇：由北京爱普华美生物科技有限公司生产，批号：20120715蛋黄粉：由北京金健力淡粉厂生产，批号：20120618；猪油：市售；戊巴比妥钠：由中国医药集团上海试剂公司生产，批号：F20030816；肝素钠注射液：由天津生物化学制药有限公司生产，批号：20110313，规格：1.25万U/2ml；青霉素钠：由华北制药股份有限公司生产，批号：Y1207622，规格：160万U/瓶；牛血清白蛋白(Albumin，bovine，fraction V)CAS Number：9048－46－8，由内蒙古呼和浩特市泽生试剂公司提供；Masson染液：货号DO26，南京建成科技有限公司；油红“O”染液：货号DO27，南京建成科技有限公司提供。

基础饲料配方：干草粉34.5％，豆饼8.6％，麸皮11.2％，小麦6％，玉米粉20％，鱼粉1.3％，酵母粉2.2％，骨粉1.3％，食盐0.7％，复方维生素0.1％，微量元素0.1％；

高脂饲料配方：胆固醇1％，猪油5％，蛋黄粉8％，加基础饲料86％。

实验仪器：2.5mm×20mm PTCA扩张导管，美国波士顿科学公司；0.014英寸导引导丝，美国波士顿科学公司；电子天平：BSA124S－CW型，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司；生物组织包埋机，TB－718，湖北泰微医疗科技有限责任公司；组织切片机，RM2235，德国Leica公司；烤片机，HI1220，德国Leica公司；全自动组织脱水机，ST5020，德国Leica公司；显微镜，Olympus bx51，上海赖氏电子科技有限公司；图像采集系统，nymicro DSSTM；图像分析系统，Image－pro Plus5.1。

(二)实验方法

分组及给药：取60只雄性新西兰家兔，单笼饲养。予基础饲料适应性喂养1周后，随机分为正常对照组(10只)和造模组(50只)。正常对照组饲喂基础饲料，每只予150g/日；造模组饲喂高脂饲料100g/只/日(早)，普通饲料50g/只/日(晚)，自由饮水，至24周实验结束。第2周(高脂饲料喂养1周后)经家兔耳缘静脉一次性注射牛血清白蛋白500mg/只。第4周行股动脉球囊损伤术。第8周造模成功(经主动脉病理学检查)后，将造模组随机分为：

1组为正常对照组，灌胃同体积的蒸馏水；

2组为高脂模型组，灌胃同体积的蒸馏水；

3组为传统西药组，按照5mg/kg的比例灌胃对比例1提供的辛伐他汀水溶液；

4组为实验组，按照150mg/kg的比例灌胃实施例1提供的蒙药组合物；

5组为传统蒙药组，按照400mg/kg的比例灌胃对比例1提供的额尔敦－乌日勒水溶液。

以上各组灌胃每日1次，至24周实验结束。

测定与观察方法：于实验第24周末，在3％戊巴比妥钠(1mL·kg^－1)麻醉下进行体外心脏采血，4000r/min离心15min取血清，贮存于－20℃冰箱中待测；随后耳缘静脉空气栓塞处死实验动物，开胸腹，迅速取出自主动脉瓣至股动脉结扎处之间血管段，尽快剥离动脉外壁脂肪组织，沿背侧面纵行切开铺平，生理盐水冲洗干净后，肉眼观察斑块。然后取主动脉弓段约1cm放入10％中性甲醛溶液中固定，用于病理组织学检查，其余用油红O染色。统计学分析：采用SPSS16.0统计软件进行数据分析。所有数据经正态性检验后以表示，两组均数间差异采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

(三)实验结果

1.实验动物一般状况

实验过程中实验家兔死亡13只，主要因感冒、腹泻、麻醉意外死亡，有47只家兔完成实验。造模组家兔在造模过程中出现不同程度的精神差，反应迟钝，活动少，毛发稀疏等表现，其中，高脂模型组最明显，给药各组家兔的症状要轻于高脂模型组。正常对照组实验兔未见以上表现。每2周称量体重1次，各组实验家兔体重随时间变化均有不同程度增加，同一时间点各组间体重差异无显著性差异(P＞0.05)。结果见表5。

表5各组实验家兔体重比较(mmol/L)

2.对家兔血脂水平的影响

与正常对照组比较，高脂模型组家兔血清TC、TG、LDL－C、HDL－C均明显升高，其中TC、LDL－C升高显著；给药各组较高脂模型组TC、TG、LDL－C显著降低(P＜0.05)，表明传统西药、传统蒙药与本发明实施例1提供的蒙药组合物都能降低家兔血清TC、TG、LDL－C的水平，而对HDL－C效果不明显。本发明实施例1提供的蒙药组合物在降低TG方面优于传统蒙药，结果如表6。

表6各组家兔血脂检测比较(mmol/L)

与正常对照组比较，^＊P＜0.05，^＊＊P＜0.01；与高脂模型组比较，^△P＜0.05，与传统蒙药比^#P＜0.05.

3.病理组织形态学观察

正常对照组家兔主动脉血管内膜比较光滑，无粥样病损，无脂质斑块形成。光镜下内皮细胞完整，内弹力膜清晰，未见断裂，内膜无增厚，中膜平滑肌细胞排列有序，外膜纤维结缔组织未见异常。高脂模型组家兔主动脉内膜粗糙不平，肉眼可见浅黄色大小不等斑块沉积，光镜下可见血管内膜增厚明显，内皮细胞脱落，粥样斑块形成，斑块表面覆盖薄纤维帽，胶原含量和平滑肌含量较少，内皮下见脂质浸润，脂质核心大，脂质核心内大量泡沫细胞及炎性细胞浸润，中膜平滑肌细胞增殖，向内膜迁移，斑块内可见新生的小血管。相比之下，给药各组家兔主动脉病变程度相对较轻，光镜下可见主动脉内皮有不同程度损伤，脱落，内皮细胞下有少量泡沫细胞和炎性细胞聚集，纤维帽较厚，胶原含量较多等。结果如图2、3、4所示。

4.光镜下病例组织形态学定量分析

在光镜下观察血管组织形态学改变，同时采用Image－pro Plus5.1图像分析系统测量主动脉壁纤维帽厚度(FCT)、内中膜厚度(IMT)，并计算纤维帽厚度与内中膜厚度比值(FCT/IMT)HE染色结果显示，与高脂模型组相比，传统蒙药组、实验组和传统西药组斑块纤维帽厚度均增高(P＜0.05)；与高脂模型组比较，传统蒙药组、实验组和传统西药组家兔内中膜厚度降低(P＜0.05)；与传统蒙药组相比，实验组纤维帽厚度增高(P＜0.05)。结果见表7。

表7各组家兔动脉壁纤维帽厚度、内中膜厚度、纤维帽度/内中膜厚度比值比较()

与高脂模型组比较，^△P＜0.05，与传统蒙药比^#P＜0.05

油红O染色和Masson染色结果显示，与高脂模型组比较，各给药组家兔动脉斑块内脂质核心面积减少(P＜0.05)；与传统蒙药组相比，实验组组脂质核心面积减少明显(P＜0.05)。与高脂模型组比较，各给药组家兔动脉斑块内胶原面积增加(P＜0.05)；与传统西药组相比，实验组、传统蒙药组胶原面积无显著性差异(P＞0.05)；实验组组与传统蒙药组比，无统计学差异(P＞0.05)。实验结果见表8。

表8各组家兔动脉斑块内脂质面积/斑块面积、胶原面积/斑块面积比较(％)

与高脂模型组比较，^△P＜0.05，与传统蒙药比^#P＜0.05。

本研究利用高脂饮食、免疫损伤加球囊拉伤术方法制备粥样易损斑块家兔模型，并给予本发明实施例1提供的蒙药组合物进行干预治疗，并与传统蒙药进行比较，传统西药做阳性对照，给予相应药物干预16周。通过肉眼、光镜对各组家兔主动脉组织结构、内皮功能等的病理形态进行检测。结果显示：实验组和传统蒙药组家兔粥样易损斑块病变程度均显著轻于高脂模型组，表明本发明实施例1提供的蒙药组合物和传统蒙药均对家兔粥样易损斑块具有明显的治疗作用，且本发明实施例1提供的蒙药组合物优于传统蒙药。同时，通过对家兔主动脉内膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)及内膜中膜厚度比(IT/MT)，内中膜厚度(IMT)、纤维帽厚度(FCT)、纤维帽厚度与内中膜厚度比、胶原面积与斑块面积比、脂核面积与斑块面积比等指标进行检测，结果显示：本发明实施例1提供的蒙药组合物和传统蒙药均具有较好的稳定家兔粥样易损斑块的作用，且本发明实施例1提供的蒙药组合物优于传统蒙药。

以上动物实验研究中，本发明实施例1提供的蒙药组合物的动物给药量较传统蒙药给药量减少62.5％。即大鼠应用本发明实施例1提供的蒙药组合物高剂量300mg/kg，传统蒙药是800mg/kg；家兔应用本发明实施例1提供的蒙药组合物高剂量150mg/kg，传统蒙药是400mg/kg。结果表明，本发明实施例1提供的蒙药组合物在临床中患者的用药量课明显减少，更便于服用，提高患者的依从性。

为了有助于更好地体现本发明提供的药物的疗效，现结合具体的临床数据介绍如下。

本发明提供的蒙药组合物降血脂、抗动脉粥样硬化的临床试验

临床资料：临床病例共150例，其中男性83例，女性67例；年龄最小39岁，最大72岁；病程最短3个月，最长11年；所有病例均患有高血压、高血脂、冠心病、脑梗塞或心肌梗塞。

治疗方法：服用本发明实施例1方法制备的胶囊，每个病人每次3粒，每日2次，口服3个月为1个疗程。

疗效判定标准：

临床治愈：自觉症状体征消失，专科检查结果连续3次在正常值范围内，并能巩固；

显效：自觉症状体征大部分消失，专科检查结果明显好转，基本正常或接近正常；

有效：自觉症状体征明显改善，专科检查结果有所好转；

无效：治疗前后症状体征和专科检查数值基本无改善。

治疗效果：

临床痊愈127人，显效16人，有效5人，无效2人。治愈率84.67％，显效率10.67％，有效率3.33％，无效率1.33％，总有效率98.67％。

典型病例1：王某，男，66岁。经多家医院确诊为高脂血症、冠心病，查血总胆固醇7.53mmol/L、甘油三酯2.97mmol/L、低密度脂蛋白胆固醇5.25mmol/L，头晕、胸闷、胸痛，服用丹参片、脑血通、速效救心丸等心脑血管疾病药，不见好转，服用本发明实施例1方法制备的胶囊，第3天胸闷痛缓解，15天头晕减轻，2个月后医院检查，总胆固醇6.20mmol/L、甘油三酯1.81mmol/L、低密度脂蛋白胆固醇4.02mmol/L，血脂水平明显降低，3个月后复查血脂降到正常范围，临床诸证消失，临床治愈。且服药过程中未出现任何不适的副作用，停药1年半后回访未复发。

典型病例2：董某某，女，47岁，治疗前，彩超诊断显示：左、右颈总动脉分叉处分别探及9.7×3.7mm、9×3.5mm强回声斑块，服用本发明实施例1方法制备的胶囊90天后，彩超诊断显示：颈总动脉分叉处探及不规则强回声斑块，大者：右侧2.3×0.9mm，左侧5.1×1.6mm，起到明显的治疗效果。且服药过程中未出现任何不适的副作用，停药2年后回访未复发。

本发明通过科学配伍、准确验证，从大量蒙药中，筛选得出本发明提供的蒙药组合物。本发明提供的蒙药组合物经过动物实验和临床统计的检验，具有明确的降血脂、抗动脉粥样硬化的效果。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。