组合MDM2抑制剂和BTK抑制剂的治疗方法与流程

本发明涉及用于治疗癌症的药物和方法，其包含具有鼠双微体2(mdm2)抑制活性的化合物和具有布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制活性的化合物的组合。

背景技术：

p53已知为抑制细胞的癌变的重要因子。p53是一种转录因子，其响应于各种应激而诱导参与细胞周期和细胞凋亡的基因的表达。p53被认为通过其转录调节功能来抑制细胞的癌变。事实上，在约一半的人癌症病例中观察到p53基因的缺失或突变。

同时，为一种e3泛素连接酶的鼠双微体2(mdm2)的过表达已知为一种细胞癌变的因素，所述细胞尽管在正常的p53存在下仍发生癌变。mdm2是一种其表达由p53诱导的蛋白。mdm2通过如下方式来负调节p53：结合p53的转录活性结构域以降低p53的转录活性、从细胞核输出p53和通过充当针对p53的泛素连接酶来介导p53的降解。因此，认为在mdm2过表达的细胞中促进p53的功能失活和降解，导致癌变(非专利文献1)。

注意到此类mdm2的功能，已经尝试了使用抑制mdm2对p53功能的压制的物质作为候选抗肿瘤剂的许多方法。已经报道了靶向mdm2-p53结合位点的mdm2抑制剂的实例，其包括螺羟吲哚衍生物(专利文献1至15和非专利文献1至3)、吲哚衍生物(专利文献16)、吡咯烷-2-甲酰胺衍生物(专利文献17)、吡咯烷酮衍生物(专利文献18)、异吲哚啉酮衍生物(专利文献19和非专利文献4)和二螺吡咯烷化合物(专利文献20)。

布鲁顿酪氨酸激酶(btk)是属于非受体酪氨酸激酶的tec家族的重要信号传导酶，并在除t淋巴细胞和自然杀伤细胞以外的所有造血细胞中表达(非专利文献5)。btk在b细胞信号传导通路中起必不可少的作用，其将细胞表面b细胞受体(bcr)刺激与下游细胞内响应相关联。btk是b细胞发育、激活、信号转导和存活的重要调节因子。

依鲁替尼(pci-32765)是一种具有btk抑制作用的小分子化合物，据报道对b细胞肿瘤和自身免疫性疾病有效(专利文献21和22以及非专利文献6和7)。在欧洲和美国，依鲁替尼被用作抗肿瘤药，用于以套细胞淋巴瘤(mcl)和慢性淋巴细胞白血病(cll)为适应症，并且以弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)和多发性骨髓瘤(mm)为适应症也在开发中(非专利文献7和8)。

引用列表

专利文献

专利文献1：wo2006/091646

专利文献2：wo2006/136606

专利文献3：wo2007/104664

专利文献4：wo2007/104714

专利文献5：wo2008/034736

专利文献6：wo2008/036168

专利文献7：wo2008/055812

专利文献8：wo2008/141917

专利文献9：wo2008/141975

专利文献10：wo2009/077357

专利文献11：wo2009/080488

专利文献12：wo2010/084097

专利文献13：wo2010/091979

专利文献14：wo2010/094622

专利文献15：wo2010/121995

专利文献16：wo2008/119741

专利文献17：wo2010/031713

专利文献18：wo2010/028862

专利文献19：wo2006/024837

专利文献20：wo2012/121361

专利文献21：wo2008/039218

专利文献22：wo2013/059738

非专利文献

非专利文献1：j.am.chem.soc.,2005,127,10130-10131

非专利文献2：j.med.chem.,2006,49,3432-3435

非专利文献3：j.med.chem.,2009,52,7970-7973

非专利文献4：j.med.chem.,2006,49,6209-6221

非专利文献5：curr.opin.immunol.,2000,12,282-288

非专利文献6：pnas,2010,107,13075-13080

非专利文献7：drugs,2014,74,263-271

非专利文献8：can.res.,2015,75,594-604。

发明概述

技术问题

本发明的目的是提供用于治疗癌症的药物和方法，其包含具有mdm2抑制活性的化合物和具有btk抑制活性的化合物的组合。

问题的解决方案

作为广泛研究的结果，本发明人已经发现使用为具有mdm2抑制活性的化合物的(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和为具有btk抑制活性的化合物的依鲁替尼或其药学上可接受的盐的组合特别地产生优异的抗肿瘤效果，并完成了本发明。

具体而言，本发明涉及以下[1]至[15]：

[1]一种用于癌症治疗的药物，其包含组合施用的(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐。

[2]根据[1]的药物，其中(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别作为活性成分包含在不同的制剂中并在相同时间或不同时间施用。

[3]根据[1]的药物，其中(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐包含在单一制剂中。

[4]根据[1]的药物，其中所述药物是包含(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的试剂盒制剂。

[5]一种用于治疗癌症的方法，其包括施用(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的组合。

[6]根据[1]至[4]中任一项的药物，其中(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺的盐是对甲苯磺酸盐。

[7]根据[5]的治疗方法，其中(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺的盐是对甲苯磺酸盐。

[8]根据[1]至[4]和[6]中任一项的药物，其中所述癌症是血液恶性肿瘤、脑肿瘤、头/颈部癌、食管癌、胃癌、阑尾癌、结肠癌、肛门癌、胆囊癌、胆管癌、胰腺癌、胃肠道间质瘤、肺癌、肝癌、间皮瘤、甲状腺癌、肾癌、前列腺癌、神经内分泌瘤、黑素瘤、乳腺癌、子宫体癌、子宫颈癌、卵巢癌、骨肉瘤、软组织肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、肾癌、膀胱癌或睾丸癌。

[9]根据[5]或[7]的治疗方法，其中所述癌症是血液恶性肿瘤、脑肿瘤、头/颈部癌、食管癌、胃癌、阑尾癌、结肠癌、肛门癌、胆囊癌、胆管癌、胰腺癌、胃肠道间质瘤、肺癌、肝癌、间皮瘤、甲状腺癌、肾癌、前列腺癌、神经内分泌瘤、黑素瘤、乳腺癌、子宫体癌、子宫颈癌、卵巢癌、骨肉瘤、软组织肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、肾癌、膀胱癌或睾丸癌。

[10]根据[1]至[4]和[6]中任一项的药物，其中所述癌症是血液恶性肿瘤。

[11]根据[5]或[7]的治疗方法，其中所述癌症是血液恶性肿瘤。

[12]根据[10]的药物，其中所述血液恶性肿瘤是慢性淋巴细胞白血病(cll)、小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)、高危cll、非cll/sll淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤(fl)、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、套细胞淋巴瘤(mcl)、华氏巨球蛋白血症(waldenstrom'smacroglobulinemia)、多发性骨髓瘤(mm)、边缘区淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、非伯基特高级别b细胞淋巴瘤、结外边缘区b细胞淋巴瘤、急性或慢性骨髓性(髓细胞性)白血病、骨髓增生异常综合征或急性淋巴细胞白血病。

[13]根据[11]的治疗方法，其中所述血液恶性肿瘤是慢性淋巴细胞白血病(cll)、小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)、高危cll、非cll/sll淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤(fl)、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、套细胞淋巴瘤(mcl)、华氏巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤(mm)、边缘区淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、非伯基特高级别b细胞淋巴瘤、结外边缘区b细胞淋巴瘤、急性或慢性骨髓性(髓细胞性)白血病、骨髓增生异常综合征或急性淋巴细胞白血病。

[14]根据[1]至[4]、[6]、[8]、[10]和[12]中任一项的药物，其中所述癌症是使用基因签名(genesignature)证实为mdm2抑制剂敏感的癌症。

[15]根据[5]、[7]、[9]、[11]和[13]中任一项的治疗方法，其中所述癌症是使用基因签名证实为mdm2抑制剂敏感的癌症。

发明的有益效果

本发明可用作不良反应(例如体重减轻)少和效果高的治疗癌症的方法和/或抗癌剂。

附图的简要说明

[图1-1]图1-1是显示(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺对甲苯磺酸盐(化合物a)和依鲁替尼的组合使用对衍生自小鼠皮下移植的abc型(活化b细胞型)dlbcl细胞系tmd-8细胞的肿瘤的体内效果以及由其组合施用引起的体重变化的图。符号×描绘未处理对照组，符号空心圆描绘100mg/kg依鲁替尼，符号实心圆描绘200mg/kg依鲁替尼，符号空心三角形描绘25mg/kg化合物a，符号空心正方形描绘25mg/kg化合物a+100mg/kg依鲁替尼，且符号实心正方形描绘25mg/kg化合物a+200mg/kg依鲁替尼。横轴显示肿瘤接种后的天数。上图的纵轴显示由肿瘤大小计算的估计肿瘤体积。下图的纵轴显示相对于施用第一天的体重的体重变化%。横轴上的符号实心三角形描绘每种化合物的施用日。上图的误差条(errorbar)表示se，下图的误差条表示sd。

[图1-2]图1-2是显示(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺对甲苯磺酸盐(化合物a)和依鲁替尼的组合使用对衍生自小鼠皮下移植的abc型(活化b细胞型)dlbcl细胞系tmd-8细胞的肿瘤的体内效果以及由其组合施用引起的体重变化的图。符号×描绘未处理对照组，符号空心圆描绘100mg/kg依鲁替尼，符号实心圆描绘200mg/kg依鲁替尼，符号实心三角形描绘50mg/kg化合物a，符号空心正方形描绘50mg/kg化合物a+100mg/kg依鲁替尼，且符号实心正方形描绘50mg/kg化合物a+200mg/kg依鲁替尼。横轴显示肿瘤接种后的天数。上图的纵轴显示由肿瘤大小计算的估计肿瘤体积。下图的纵轴表示相对于施用第一天的体重的体重变化%。横轴上的符号实心三角形描绘每种化合物的施用日。上图的误差条表示se，下图的误差条表示sd。

实施方案描述

在本发明中，(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺是wo2012/121361中实施例70的化合物。该化合物可以通过wo2012/121361中描述的方法制备(wo2012/121361通过引用整体并入本文)。

在本发明中，依鲁替尼是(r)-1-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮，也称为pci-32765或imbruvica(r)。该化合物可以通过wo2008/039218中描述的方法制备(wo2008/039218通过引用整体并入本文)。

在本发明中，(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺和依鲁替尼可以是各种药学上可接受的盐。

盐的实例可以包括：氢卤化物诸如盐酸盐和氢碘酸盐；无机酸盐诸如硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐和磷酸盐；低级烷磺酸盐诸如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐和乙磺酸盐；芳基磺酸盐诸如苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐；有机酸盐诸如甲酸盐、乙酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐和马来酸盐；氨基酸盐诸如鸟氨酸盐、谷氨酸盐和天冬氨酸盐；碱金属盐诸如钠盐、钾盐和锂盐；碱土金属盐诸如钙盐和镁盐；无机盐诸如铵盐；以及有机胺盐诸如二苄胺盐、吗啉盐、苯基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、n-甲基葡糖胺盐、二乙胺盐、三乙胺盐、环己胺盐、二环己胺盐、n,n'-二苄基乙二胺盐、二乙醇胺盐、n-苄基-n-(2-苯基乙氧基)胺盐、哌嗪盐、四甲基铵盐和三(羟甲基)氨基甲烷盐。

(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺的盐优选是对甲苯磺酸盐。

在本发明中，(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺和依鲁替尼或其药学上可接受的盐可以各自以游离或溶剂化物形式存在。化合物或其盐可以以水合物形式存在，例如通过吸收空气中的水分。溶剂化物没有特别限制，只要其是药学上可接受的。具体而言，溶剂化物优选为水合物、乙醇溶剂化物等。此外，当含有氮原子时，由通式(1)表示的化合物可以为n-氧化物形式。这些溶剂化物和n-氧化物形式也包括在本发明中。

(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺和依鲁替尼或其药学上可接受的盐根据其结构可以具有立体异构体。化合物或盐也包括所有这些立体异构体和任何比例的这些立体异构体的混合物。立体异构体如1996iupc，pureandappliedchemistry68，2133-2222中所定义。当(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺和依鲁替尼或其药学上可接受的盐各自以互变异构体形式存在时，这些互变异构体可以以平衡存在，或者某种形式可以主要存在。所有这些情况都包括在本发明的范围内。互变异构体是指由分子的一个原子的质子转移到另一个原子而产生的异构体。

(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺和依鲁替尼或其药学上可接受的盐可以各自为由于在体内的生理条件下由酶、胃酸等诱导的反应而通过酶促氧化、还原、水解等，或通过胃酸等引起的水解等转化为所需化合物的“药学上可接受的前药化合物”。

前药的实例包括通过酰化、烷基化或磷酸化获得的化合物。

化合物的前药可以根据本领域已知的方法由化合物(1)制备。此外，化合物的前药还包括在生理条件下转化为所需化合物的那些，如“developmentofpharmaceuticalproducts”，第7卷，moleculedesign，第163-198页，hirokawa-shotenltd.(1990)中所述。

在本发明中，术语“肿瘤”和“癌症”可互换使用。此外，在本发明中，肿瘤、恶性肿瘤(malignanttumor)、癌症、恶性新生物(malignantneoplasm)、癌(carcinoma)、肉瘤等可以统称为“肿瘤”或“癌症”。

在本发明中，“基因签名”是指单一基因或由多个基因组成的基因组，其表达模式是生物表型或医学病症的特征，诸如某种疾病的发病率、对某种药物的响应或某种疾病的预后。

在本发明中，“生物样品”是指从个体分离的组织、液体或细胞，或其混合物。其实例可以包括但不限于肿瘤活检、脊髓液、胸膜液、腹腔内液、淋巴、皮肤切片、血液、尿液、粪便、痰液、呼吸器官、肠道、泌尿生殖道、唾液、乳、消化器官和从其收集的细胞。“生物样品”的优选实例可以包括在用于治疗癌症疾病的目的而实施的手术期间获得的测试个体衍生的切除组织的一部分、由疑似患有癌症疾病的测试个体通过活检等收集的组织的一部分以及衍生自胸膜液或腹腔内液的细胞。

生物样品可以是由从个体分离的组织、液体或细胞或其混合物等制备的蛋白质提取物或核酸提取物。蛋白质提取物或核酸提取物可以通过使用本领域本身已知的蛋白质制备方法或核酸制备方法来制备。

本发明的一个方面涉及用于癌症治疗的药物，其包含组合施用的(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐。

在本发明中，包含“组合施用的”(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的“药物”是基于假设两种药物组合施用的药物。

在本发明中，(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的“组合施用”是指两种药物在给定的时段内并入接受者体内。可以施用在单一制剂中含有两种药物的制剂，或者药物可以制备成单独的制剂并单独施用。在制备单独的制剂的情况下，其施用时间没有特别限制。可以同时施用单独的制剂或可以在不同的时间或在不同的日子以交错方式施用单独的制剂。在不同的时间或在不同的日子施用(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的情况下，其施用顺序没有特别限制。通常，这些制剂根据其各自的施用方法施用。因此，这些制剂可以以相同数量的剂量施用或可以以不同数量的剂量施用。此外，在制备单独的制剂的情况下，制剂的各自施用方法(施用途径)可以彼此相同，或者这些制剂可以通过不同的施用方法(施用途径)施用。两种药物不必在体内同时存在，并且可以在给定的时段(例如，1个月，优选1周，更优选几天，甚至更优选1天)并入体内。在施用其它活性成分时，一种活性成分可能从体内消失。

本发明药物剂型的实例包括1)单一制剂的施用，其包含(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐，2)通过相同的施用途径同时施用由(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别制备的两种制剂，3)通过相同的施用途径以交错方式施用由(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别制备的两种制剂，4)通过不同的施用途径同时施用由(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别制备的两种制剂，以及5)通过不同的施用途径以交错方式施用由(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别制备的两种制剂。

在本发明中，两种不同的制剂可以是包含这些制剂的试剂盒的形式。

根据本发明的药物可以含有(3'r,4's,5'r)-n-[(3r,6s)-6-氨基甲酰基四氢-2h-吡喃-3-基]-6"-氯-4'-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4,4-二甲基-2"-氧代-1",2"-二氢二螺[环己烷-1,2'-吡咯烷-3',3"-吲哚]-5'-甲酰胺或其药学上可接受的盐和/或依鲁替尼或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体，并且可以作为各种注射剂诸如静脉内注射剂、肌内注射剂和皮下注射剂或通过各种方法诸如口服施用或经皮施用来施用。药学上可接受的载体是指涉及本发明化合物或含有本发明化合物的组合物从给定器官转运到另一器官的药学上可接受的材料(例如，赋形剂、稀释剂、添加剂和溶剂)。

可以根据施用方法通过选择合适的制剂形式(例如，口服制剂或注射剂)并使用常规用于制备制剂的各种方法制备制剂。口服制剂的实例可包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、锭剂、溶液剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和油性或水性混悬剂。在口服施用中，可以使用游离化合物或盐形式。可以通过与药学上可接受的酸形成酸加成物或通过形成碱金属盐诸如钠盐来制备水性制剂。作为注射剂，可以在制剂中使用稳定剂、防腐剂、溶解助剂等。在将可含有这些助剂等的溶液填充在容器中之后，可以通过冻干等将供使用的制剂制备为固体制剂。此外，一个剂量可以填充在一个容器中，或者两个或更多个剂量可以填充在一个容器中。

固体制剂的实例包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂和锭剂。这些固体制剂可含有药学上可接受的添加剂以及本发明的化合物。添加剂的实例包括填充剂、增量剂、粘合剂、崩解剂、溶解促进剂、皮肤润湿剂和润滑剂。可根据需要选择和混合这些添加剂以制备制剂。

液体制剂的实例包括溶液剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和混悬剂。添加剂的实例包括悬浮剂和乳化剂。可根据需要选择和混合这些添加剂以制备制剂。

药物材料的实例可以包括但不限于：氨基酸诸如甘氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸和赖氨酸；抗菌剂；抗氧化剂诸如抗坏血酸、硫酸钠和亚硫酸氢钠；缓冲剂诸如磷酸盐、柠檬酸盐或硼酸盐缓冲剂、碳酸氢钠和tris-hcl溶液；填充剂诸如甘露醇和甘氨酸；螯合剂诸如乙二胺四乙酸(edta)；络合剂诸如咖啡因、聚乙烯吡咯烷、β-环糊精和羟丙基-β-环糊精；增量剂诸如葡萄糖、甘露糖和糊精；其它碳水化合物诸如单糖和二糖；着色剂；矫味剂；稀释剂；乳化剂；亲水性聚合物诸如聚乙烯吡咯烷；低分子量多肽；盐形成抗衡离子；防腐剂诸如苯扎氯铵、苯甲酸、水杨酸、硫柳汞、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯己定、山梨酸和过氧化氢；溶剂诸如甘油、丙二醇和聚乙二醇；糖醇诸如甘露醇和山梨醇；悬浮剂；表面活性剂诸如脱水山梨醇酯、聚山梨醇酯诸如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80、曲拉通(triton)、氨基丁三醇、卵磷脂和胆固醇；稳定性增强剂诸如蔗糖和山梨醇；弹性增强剂诸如氯化钠、氯化钾、甘露醇和山梨醇；转运剂；赋形剂；和/或药物添加剂。这些药物材料的添加量优选为药物重量的0.01至100倍，特别是0.1至10倍。制剂中优选的药物组合物的配方可以由本领域技术人员根据适用的疾病、适用的施用途径等适当地确定。

药物组合物中的赋形剂或载体可以是液体或固体。适当的赋形剂或载体可以是通常用于注射用水、生理盐水、人造脑脊液和肠胃外施用中的其它材料。可以使用中性生理盐水或含有血清白蛋白的生理盐水作为载体。药物组合物可以含有ph7.0至8.5的tris缓冲剂、ph4.0至5.5的乙酸盐缓冲剂或ph3.0至6.2的柠檬酸盐缓冲剂。这些缓冲剂也可以含有山梨醇或其它化合物。

依鲁替尼或其药学上可接受的盐的制剂的优选实例包括wo2008/039218中描述的制剂、wo2010/009342中描述的制剂、wo2011/153514中描述的制剂、wo2013/059738中描述的制剂、wo2014/071231中描述的制剂、wo2013/159745中描述的制剂、wo2014/168975中描述的制剂、wo2014/194254中描述的制剂和wo2015/017812中描述的制剂(这些文献通过引用整体并入本文)。其更优选的实例包括含有交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁、结晶纤维素和月桂基硫酸钠的胶囊制剂。

本发明的药物可用于哺乳动物，特别是人类的癌症治疗。根据医师的判断，本发明的药物的剂量和施用间隔可以根据疾病的位点、患者的身高、体重、性别或病史进行适当选择。当将本发明的药物施用于人时，相对于一种类型的活性成分，剂量范围为每天约0.01至500mg/kg体重，优选约0.1至100mg/kg体重。优选地，将本发明的活性成分每天一次施用于人，或者将剂量分成两至四次，并以适当的间隔重复施用。此外，如果需要，每日剂量可以超过上述剂量，由医师酌情决定。

对于依鲁替尼或其药学上可接受的盐的施用方法的实例，参见wo2008/039218中描述的方法、wo2010/009342中描述的方法、wo2011/153514中描述的方法、wo2013/059738中描述的方法、wo2014/071231中描述的方法、wo2013/159745中描述的方法、wo2014/168975中描述的方法、wo2014/194254中描述的方法和wo2015/017812中描述的方法，其全部通过引用整体并入本文。该活性成分可以每天一次施用达1周、2周、3周、4周或5周。

待治疗的癌症的类型没有特别限制，只要所述癌症证实为对本发明的通过组合使用进行的治疗敏感。其实例包括血液恶性肿瘤、脑肿瘤、头/颈部癌、食管癌、胃癌、阑尾癌、结肠癌、肛门癌、胆囊癌、胆管癌、胰腺癌、胃肠道间质瘤、肺癌、肝癌、间皮瘤、甲状腺癌、肾癌、前列腺癌、神经内分泌瘤、黑素瘤、乳腺癌、子宫体癌、子宫颈癌、卵巢癌、骨肉瘤、软组织肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、肾癌、膀胱癌和睾丸癌。

其中，优选血液恶性肿瘤。血液恶性肿瘤的实例包括慢性淋巴细胞白血病(cll)、小淋巴细胞性淋巴瘤(sll)、高危cll、非cll/sll淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤(fl)、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、套细胞淋巴瘤(mcl)、华氏巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤(mm)、边缘区淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、非伯基特高级别b细胞淋巴瘤、结外边缘区b细胞淋巴瘤、急性或慢性骨髓性(髓细胞性)白血病、骨髓增生异常综合征和急性淋巴细胞白血病。

从另一角度来看，待治疗的癌症的类型优选为对mdm2抑制剂敏感的癌症，更优选为具有野生型tp53的癌症。

作为用于证实tp53为野生型的方法，其实例包括使用对突变的dna序列特异的探针的微阵列方法(amplichipp53，rochemolecularsystems,inc.等，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21319261)、使用对突变的dna序列特异的探针的pcr(qbiomarkersomaticmutationpcrarrays,qiagenn.v.等)、使用sanger测序仪读取p53基因序列的方法(http://p53.iarc.fr/download/tp53_directsequencing_iarc.pdf)以及使用下一代测序仪读取p53基因序列的方法(truseqamplicon-cancerpanel，illuminahttp://www.illuminakk.co.jp/products/truseq_amplicon_cancer_panel.ilmn，oncomine(r)cancerresearchpanel，lifetechnologiescorp.，http://www.lifetechnologies.com/jp/ja/home/clinical/preclinical-companion-diagnostic-development/oncomine-cancer-research-panel-workflow.html等)。

优选地，也可以将使用基因签名的方法用作预测对mdm2抑制剂的敏感性的方法。用于预测对mdm2抑制剂的敏感性的基因签名的实例包括但不特别限于wo2014/020502中描述的基因组(wo2014/020502通过引用整体并入本文)。更具体而言，可以优选使用包含选自mdm2、cdkn1a、zmat3、ddb2、fdxr、rps27l、bax、rpm2b、sesn1、ccng1、xpc、tnfsf10b和aen中的至少一个基因的基因组(该基因组可以包含所有这些基因)。其其它实例包括wo2015/000945中描述的基因组(wo2014/000945通过引用整体并入本文)。更具体而言，可以优选使用包含选自bax、rps27l、eda2r、xpc、ddb2、fdxr、mdm2、cdkn1a、triap1、bbc3、ccng1、tnfrsf10b和cdkn2a中的至少一个基因的基因组(该基因组可以包含所有这些基因)。基因组中含有的基因数不受限制。当基因签名中含有的基因高度表达时，可以优选使用允许癌症被证实为对mdm2抑制剂敏感的敏感签名。

根据本发明的药物可以与另外的抗肿瘤剂组合使用。其实例包括抗肿瘤抗生素、抗肿瘤植物成分、brm(生物反应调节剂)、激素、维生素、抗肿瘤抗体、分子靶向药物、烷化剂、代谢拮抗剂和其它抗肿瘤剂。

更具体而言，烷化剂的实例包括：烷化剂诸如氮芥、氮芥n-氧化物、苯达莫司汀和苯丁酸氮芥；氮丙啶烷化剂诸如卡波醌和噻替派；环氧化物烷化剂诸如二溴甘露醇和二溴卫矛醇；亚硝基脲烷化剂诸如卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、盐酸尼莫司汀、链脲霉素、氯脲霉素和雷莫司汀；以及白消安、甲苯磺酸英丙舒凡、替莫唑胺和达卡巴嗪。

代谢拮抗剂的各种实例包括：嘌呤代谢拮抗剂诸如6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤和硫肌苷；嘧啶代谢拮抗剂诸如氟尿嘧啶、替加氟、替加氟-尿嘧啶、卡莫氟、去氧氟尿苷、溴尿苷、阿糖胞苷和依诺他滨；和叶酸代谢拮抗剂诸如甲氨蝶呤和三甲曲沙。

抗肿瘤抗生素的实例包括：丝裂霉素c、博来霉素、培洛霉素、道诺霉素、阿柔比星、多柔比星、伊达比星、吡柔比星、thp-阿霉素、4'-表阿霉素和表柔比星；和色霉素a3和放线菌素d。

抗肿瘤植物成分及其衍生物的实例包括：长春花生物碱诸如长春地辛、长春新碱和长春花碱；紫杉烷类诸如紫杉醇、多西他赛和卡巴他赛；和表鬼臼毒素类诸如依托泊苷和替尼泊苷。

brm的实例包括肿瘤坏死因子和吲哚美辛。

激素的实例包括氢化可的松、地塞米松、甲泼尼龙、泼尼松龙、普拉睾酮、倍他米松、去炎松、羟甲烯龙、诺龙、美替诺龙、磷雌酚、炔雌醇、氯地孕酮、米雄烷和甲羟孕酮。

维生素的实例包括维生素c和维生素a。

抗肿瘤抗体和分子靶向药物的实例包括曲妥珠单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗、尼妥珠单抗、地诺单抗、贝伐珠单抗、英夫利昔单抗、伊匹单抗、纳武单抗、派姆单抗、阿维单抗(avelumab)、pidilizumab、阿特朱单抗(atezolizumab)、雷莫芦单抗、甲磺酸伊马替尼、达沙替尼、吉非替尼、厄洛替尼、奥斯替尼(osimertinib)、舒尼替尼、拉帕替尼、达拉菲尼、曲美替尼、考比替尼、帕唑帕尼、帕博西尼、帕比司他、索拉非尼、克唑替尼、威罗菲尼、奎扎替尼、硼替佐米、卡菲佐米、艾沙佐米(ixazomib)和gilteritinib。

其它抗肿瘤剂的实例包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、他莫昔芬、来曲唑、阿那曲唑、依西美坦、柠檬酸托瑞米芬、氟维司群、比卡鲁胺、氟他胺、米托坦、亮丙瑞林、醋酸戈舍瑞林、喜树碱、异环磷酰胺、环磷酰胺、美法仑、l-天冬酰胺酶、醋葡醛内酯、西索菲兰、毕西巴尼、丙卡巴肼、哌泊溴烷、新制癌菌素、羟基脲、乌苯美司、阿扎胞苷、地西他滨、沙利度胺、来那度胺、泊马度胺、艾瑞布林、维甲酸和krestin。

组合的更具体实例包括与chop(环磷酰胺、羟基多柔比星、长春新碱和强的松)的组合、与epoch(依托泊苷、强的松、长春新碱、环磷酰胺和羟基多柔比星)的组合、与hyper-cvad(环磷酰胺、长春新碱、羟基多柔比星和地塞米松)的组合、与ice(异环磷酰胺、卡铂和依托泊苷)的组合、与dhap(高剂量阿糖胞苷(ara-c)、地塞米松和顺铂)的组合、与eshap(依托泊苷、甲泼尼龙、阿糖胞苷(ara-c)和顺铂)的组合、与基于蒽环类药物的化疗的组合、与组蛋白脱乙酰酶抑制剂的组合、与cyp3a4抑制剂的组合、与抗cd37抗体的组合、与bcl-2抑制剂的组合和与pi3-激酶抑制剂的组合。

实施例

在下文中，将参照下面给出的实施例具体说明本发明。然而，本发明不限于这些实施例，并且它们不应以任何限制性方式解释。

(试验例1化合物a和依鲁替尼的组合使用的体内效果研究)

使用磷酸盐缓冲盐水将abc型dlbcl细胞系tmd-8细胞悬浮至1×10⁸个细胞/ml。将0.1ml制备的细胞悬浮液皮下移植到每只nod-scid小鼠(雌性，6周龄)。在肿瘤接种后第6天，证实平均肿瘤体积超过100mm³后，基于其肿瘤体积值将小鼠分组(每组6只小鼠)。通过强制施用向小鼠口服施用25mg/kg或50mg/kg化合物a或100mg/kg或200mg/kg依鲁替尼。对于组合使用组，通过强制施用顺序口服施用25mg/kg或50mg/kg化合物a和100​​mg/kg或200mg/kg依鲁替尼。从分组之日(肿瘤接种后第18天)起，连续5天(肿瘤接种后第18至22天)每天进行一次施用，并且在2天的药物假期后，每天进行1次施用连续4天(肿瘤接种后第25至28天)。使用电子数字卡尺随时间测量肿瘤的长径(mm)和短径(mm)。在评价中使用根据下示计算公式(4)计算的评价日(肿瘤接种后第29天)的肿瘤生长抑制%(tgi%)。此外，使用小动物的自动天平随时间测量体重，并根据下示计算公式(5)计算体重变化%，以研究药物施用对体重的影响。此外，最后一次体重测量的结果用于剂量计算。

tgi(%)=(1-a/b)×100...(4)

a：化合物施用组在评价日的平均肿瘤体积(*)

b：未处理对照组在评价日的平均肿瘤体积(*)

*：肿瘤体积根据1/2×[肿瘤长径]×[肿瘤短径]×[肿瘤短径]计算。

体重变化(%)=个体的平均体重变化%...(5)

各个体的体重变化%=(1-bwn/bws)×100

bwn：第n天的体重

bws：施用开始日的体重。

结果示于图1和表1至3中。