本发明涉及组合，其包含(a)rad001或其医药上可接受的盐，和(b)bez235和其医药上可接受的盐，其用于同时、分开或依序使用以促进和/或增强个体的免疫反应；包含所述组合的医药组合物；促进和/或增强个体的免疫反应的方法，其包含将所述组合投与需要其的个体；所述组合用于制备供促进和/或增强个体的免疫反应用的药剂的用途；和其商业包装。
背景技术：
mtor是进化上保守的丝氨酸/苏氨酸激酶，其在整合呈生长因子、氨基酸和能量形式的环境暗示中起重要作用。在免疫系统的研究中，mtor由于其在感测和整合来自免疫微环境的暗示方面的作用而正逐渐成为免疫功能的关键调节剂。随着对细胞代谢作为免疫细胞功能的重要调节剂的更深了解，mtor正被证明是免疫功能与新陈代谢之间至关重要的环节。mtor具有引导适应性免疫反应的能力，例如促进t细胞、b细胞和抗原呈递细胞的分化、活化和功能。
技术实现要素：
本发明涉及组合，其包含(a)rad001或其医药上可接受的盐，和(b)bez235或其医药上可接受的盐或其医药上可接受的盐，其用于同时、分开或依序使用以促进和/或增强个体的免疫反应。
在一个方面中，本发明提供医药组合物，其包含联合治疗有效地促进和/或增强个体的免疫反应的数量的本发明的组合。
在一个方面中，本发明提供促进和/或增强个体的免疫反应的方法，其包含向需要其的个体投与联合治疗有效地促进和/或增强所述免疫反应的数量的本发明的组合。
在一个方面中，本发明还提供治疗年龄相关病况的方法，其包含向需要其的个体投与一定量的治疗有效地治疗所述年龄相关病况的数量的本发明的组合。
在一个方面中，本发明提供本发明的组合的用途，其用于促进和/或增强个体的免疫反应和用于制备用于促进和/或增强免疫反应的药剂。
在一个方面中，本发明提供本发明的组合用于治疗个体的年龄相关病况的用途。
在一个方面中，本发明提供商业包装，其包含作为活性成分的本发明的组合连同同时、分开或依序使用其以促进和/或增强个体的免疫反应的说明书。
在一个方面中，本发明提供商业包装，其包含(a)rad001或其医药上可接受的盐，和与(b)bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以促进和/或增强个体的免疫反应的说明书。
附图说明
图1显示rad+bez组合疗法的基本原理：s6k和4ebp1二者的协同抑制。
图2显示s6k的协同抑制可能利用0.1mgrad和10mgbez实现。
图3显示4ebp1的协同抑制可利用0.1mgrad和10mgbez实现。
图4显示nad+水平随年龄下降使得长寿蛋白(sirtuin)活性降低，此导致线粒体功能障碍、atp产生下降和随后衰老相关的器官功能障碍。
图5显示rad+bez使得对所有3种流感菌株的免疫反应增加超过20％(临床相关的增加)，而单一疗法仅对于3种菌株中的1种满足此截止值。
图6显示个体自发报告的活力的增加主要在依维莫司(everolimus)+bez235组合队列中。
图7显示在大多数个体中，服用研究药物时出现活力增加且然后在研究药物中断后停止。
图8显示cbez235y2201中登记的个体在日志中记录的其在研究期间所经历的所有感染。
图9显示对在治疗之前和6周安慰剂(9＝53)或rad001+bez235(n＝53)治疗之后自年长个体获得的全血试样实施rnaseq分析。
具体实施方式
本发明涉及组合，其包含(a)rad001或其医药上可接受的盐，和(b)bez235或其医药上可接受的盐，其用于同时、分开或依序使用以促进和/或增强个体的免疫反应。
除非另有明确说明，否则本文所用一般术语经定义具有以下含义：
除非另有说明，否则术语“包含(comprising)”和“包括(including)”在本文中是以其开放性且非限制性意义使用。
除非本文另有指示或上下文明显矛盾，否则在阐述本发明的上下文(尤其在下文权利要求书的上下文)中术语“一(a和an)”和“所述”以及类似指示物均应视为涵盖单数与复数二者。在使用化合物、盐等的复数形式的情况中，此也意指单一化合物、盐等。
术语“组合”或“医药组合”在本文中定义为指呈一个剂量単位形式的固定组合、非固定组合或用于组合投与的多部分的试剂盒，其中rad001或其医药上可接受的盐和bez235或其医药上可接受的盐可同时独立地投与或在允许组合配对物显示合作(例如协同)效应的时间间隔内分开投与。
术语“固定组合”是指活性成分或治疗剂(例如，rad001和bez235)以单一实体或剂量形式同时投与患者。
术语“非固定组合”是指活性成分或治疗剂(例如，rad001和bez235)作为分开的实体或剂量形式同时、并行地或无特定时间限制地依序投与给患者，其中所述投与在需要其的个体(例如，哺乳动物或人类)的体内提供治疗有效水平的两种化合物。
术语“医药组合物”在本文中定义为指待投与个体(例如，哺乳动物或人类)以治疗影响所述个体的特定疾病或病况的含有至少一种治疗剂的混合物或溶液。
术语“医药上可接受”在本文中定义为指那些在合理的医学判断范围内适于与个体(例如，哺乳动物或人类)的组织接触而无过度毒性、刺激性过敏反应和其它问题并发症且与合理益处/风险比相称的化合物、生物制剂、材料、组合物和/或剂型。
如本文所用，术语“组合投与”经定义打算涵盖向单一个体(例如，哺乳动物或人类)投与所选治疗剂，且打算包括其中所述药剂不需要以相同投与途经或同时投与的治疗方案。
如本文所用，术语“治疗(treating或treatment)”包含减轻、减少或减缓个体的至少一种症状或实现疾病、病况和/或病症进展的延迟的治疗。例如，治疗可减少病症的一种或若干种症状或完全根除病症。在本发明的含义内，术语“治疗”还表示阻止、延迟发作(即，疾病临床表达前的时期)和/或降低疾病发展或恶化的风险。
如本文所用，术语“联合治疗有效”或“联合治疗效应”意指治疗剂可以在待治疗的温血动物、尤其人类中优选、但仍显示(优选协同)相互作用(联合治疗效应)的时间间隔分开(以按时间顺序交错方式、尤其顺序特定方式)给与。无论此是何种情形，尤其可通过追踪血液水平来测定，其显示两种治疗剂至少在某些时间间隔期间存在于所治疗人类的血液中。
术语治疗剂组合的“医药有效量”或“治疗有效量”是足以提供超过促进和/或增强免疫反应的基线临床上可观察到的体征和症状的可观察到的改良的量。
如本文所用，术语“协同效应”是指两种药剂(例如(a)rad001或其医药上可接受的盐和(b)bez235或其医药上可接受的盐)产生(例如)促进和/或增强个体的免疫反应的效应的作用，此效应高于所投与每一药物自身效应的简单加和。协同效应可使用(例如)适宜方法计算，所述方法是(例如)s型-emax方程(福特n.h.g.(holford,n.h.g.)和沙纳尔l.b.(scheiner,l.b.),临床药物动力学(clin.pharmacokinet).6:429-453(1981))、洛伊(loewe)加性方程(洛伊s.和穆伊思切克h.(muischnek,h.),实验病理学和药理学的档案(arch.exp.patholpharmacol).114:313-326(1926))及中值效应方程(周t.c.(chou,t.c.)和塔拉利p.(talalay,p.),酶调节进展(adv.enzymeregul).22:27-55(1984))。上文提及的各方程可应用于实验数据以产生相应图表来帮助评估药物组合的效应。与以上提及的方程相关的相应图式分别是浓度-效应曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。
如本文所用，术语“个体”或“患者”包括能够促进和/或增强免疫反应和/或患有年龄相关病况的动物。个体的实例包括哺乳动物，例如人类、犬、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠和转基因非人类动物。在优选实施例中，个体是人类，例如罹患年龄相关病况、有罹患年龄相关病况风险或潜在可能罹患年龄相关病况的人类。
术语“约”或“大约”应具有在给定值或范围的10％内、更优选在5％内的含义。
在免疫反应的情形中，术语“促进”或“增强”是指免疫反应的增加，例如尤其免疫细胞靶向和/或杀死癌细胞、靶向和/或杀死病原体和病原体感染细胞和疫苗接种后保护性免疫的能力的增加。在一些实施例中，保护性免疫是指存在足够免疫反应(例如抗体效价)以保护抵抗表达相同抗原的病原体的继发感染或保护抵抗新病原体。
术语“免疫衰老(immunosenescence或immunoscenescent)”是指免疫功能降低，此尤其导致(例如)对癌症、疫苗接种、传染性病原体的受损免疫反应。其涉及宿主响应感染和尤其通过疫苗接种产生长期免疫记忆的能力。此免疫缺陷是普遍存在的且发现于长和短生命周期物种二者中均随其相对于预期寿命而非时序时间的年龄而变。其被认为是老年人中发病频率和死亡频率增加的主要促成因素。免疫衰老并非随机退化现象，相反其似乎反向重复进化模式且因免疫衰老而受影响的大部分参数似乎处于遗传控制下。免疫衰老有时也可设想为不可避免的暴露于各种抗原(例如病毒和细菌)的连续挑战的结果。
免疫衰老是多因素状况，其在(例如)年老群体中导致许多病理上重要的健康问题。年龄相关的生物学变化(例如，造血干细胞功能下降、pd1+淋巴细胞增加、吞噬细胞、巨噬细胞、树突细胞、单核细胞、t细胞、b细胞和nk细胞功能降低和先天的、细胞介导或体液性免疫力下降)促使免疫衰老的开始。在一个方面中，可通过测量免疫细胞中的端粒长度来测量个体的免疫衰老(参见例如us5741677)。免疫衰老也可通过以下测定：记录个体中低于正常数目的幼稚型cd4和/或cd8t细胞、早期袓b细胞和前b细胞的降低、t和b细胞库(repertoire)的降低、表达pd1的t细胞的数目增加(例如，低于正常数目的pd-1阴性t细胞、cd8+cd28negt细胞的增加、cd57+和/或klrg1+cd8+t细胞的增加、lag-3阳性t细胞数目的增加、t细胞表面糖蛋白的增加、icos、ctla-4、tim-3和/或表达lag-3的cd4t细胞的增加)或在年老个体中对疫苗接种的反应降低。
术语“受损的免疫反应”是指其中个体对(例如)尤其癌症、疫苗接种、病原体感染没有适当免疫反应的状况。在一些实施例中，具有受损的免疫反应的个体预计在预防性接种后不能获得保护性抗体效价水平，或其中个体在治疗性接种之后并未获得细胞介导免疫或疾病负荷的降低。如果个体是已知具有降低的免疫功能或具有降低的免疫功能历史的群体成员(例如老年人、正经历化学疗法治疗的个体、无脾个体、免疫减弱的个体或患有hiv/aids的个体)，那么个体也可具有受损的免疫反应。本文所述的方法允许通过投与低免疫增强剂量的mtor抑制剂(例如，变构mtor抑制剂，例如rad001)治疗受损的免疫反应。
术语“低免疫增强剂量”在与mtor抑制剂(例如变构mtor抑制剂，例如rad001或雷帕霉素(rapamycin)，或催化mtor抑制剂)结合使用时是指mtor抑制剂部分、但非完全抑制mtor活性的剂量，例如如通过p70s6激酶活性的抑制所测量。通过(例如)抑制p70s6激酶评估mtor活性的方法论述于本文中。此剂量不足以产生完全免疫阻抑，但足以增强免疫反应。在实施例中，低免疫增强剂量的mtor抑制剂会使pd-1阳性t细胞的数目或百分比降低和/或使pd-1阴性t细胞的数目或百分比增加或使pd-1阴性t细胞/pd-1阳性t细胞的比率增加。在实施例中，低免疫增强剂量的mtor抑制剂会使幼稚型t细胞数目增加。在实施例中，低免疫增强剂量的mtor抑制剂产生以下中的一或多种：
表达标记物lag-3、ctla-4、icos或tim-3的t细胞的百分比降低
以下标记物中的一或多种在例如记忆t细胞(例如，记忆t细胞前体)上的表达增加：cd62l高、cd127高、cd27+和bcl2；
klrg1或cd57在(例如)幼稚型或记忆t细胞(例如，记忆t细胞前体)上的表达减少；和
记忆t细胞前体(例如，具有以下特征中的任一种或组合的细胞：增加的cd62l高、增加的cd127高、增加的cd27+、减少的klrg1和增加的bcl2)的数目增加；
其中例如与未治疗的个体相比，例如至少瞬时出现上述任一变化。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过90％、至少10％但不超过90％、至少15％但不超过90％、至少20％但不超过90％、至少30％但不超过90％、至少40％但不超过90％、至少50％但不超过90％、至少60％但不超过90％或至少70％但不超过90％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过80％、至少10％但不超过80％、至少15％但不超过80％、至少20％但不超过80％、至少30％但不超过80％、至少40％但不超过80％、至少50％但不超过80％或至少60％但不超过80％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过70％、至少10％但不超过70％、至少15％但不超过70％、至少20％但不超过70％、至少30％但不超过70％、至少40％但不超过70％或至少50％但不超过70％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过60％、至少10％但不超过60％、至少15％但不超过60％、至少20％但不超过60％、至少30％但不超过60％或至少40％但不超过60％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过50％、至少10％但不超过50％、至少15％但不超过50％、至少20％但不超过50％、至少30％但不超过50％或至少40％但不超过50％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过40％、至少10％但不超过40％、至少15％但不超过40％、至少20％但不超过40％、至少30％但不超过40％或至少35％但不超过40％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少5％但不超过30％、至少10％但不超过30％、至少15％但不超过30％、至少20％但不超过30％或至少25％但不超过30％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与以下mtor抑制百分比相关联或提供以下mtor抑制百分比：至少1％、2％、3％、4％或5％但不超过20％、至少1％、2％、3％、4或5％但不超过30％、至少1％、2％、3％、4％或5％但不超过35％、至少1％、2％、3％、4％或5％但不超过40％、或至少1％、2％、3％、4％或5％但不超过45％。
在实施例中，mtor抑制剂的剂量与至少1％、2％、3％、4％或5％但不超过90％的mtor抑制相关联或提供此mtor抑制百分比。
如本文所论述，mtor抑制的程度可表示为p70s6k抑制的程度，例如mtor抑制的程度可通过p70s6k活性的降低水平、例如通过p70s6k底物的磷酸化降低来确定。mtor抑制的水平可通过本文所述的方法(例如，通过布莱(boulay)分析)来评估。
在免疫反应的情形中，术语“促进”或“增强”是指免疫反应的增加，例如尤其免疫细胞靶向和/或杀死癌细胞、靶向和/或杀死病原体和病原体感染细胞和疫苗接种后保护性免疫的能力的增加。在一些实施例中，保护性免疫是指存在足够免疫反应(例如抗体效价)以保护抵抗表达相同抗原的病原体的继发感染。
mtor抑制剂
如本文所用，术语“mtor抑制剂”是指抑制细胞中的mtor激酶的化合物或配体或其医药上可接受的盐。在实施例中，mtor抑制剂是变构抑制剂。在实施例中，mtor抑制剂是催化抑制剂。
变构mtor抑制剂包括中性三环化合物雷帕霉素(西罗莫司(sirolimus))；雷帕霉素相关化合物，其为与雷帕霉素具有结构和功能相似性的化合物，包括例如雷帕霉素衍生物、雷帕霉素类似物(也称为雷帕霉素类似物)和抑制mtor活性的其它大环内酯化合物。
雷帕霉素是由吸水链霉菌(streptomyceshygroscopicus)产生的已知大环内酯抗生素，其具有式a中所示的结构。
参见例如麦卡尔平j.b.(mcalpine,j.b.)等人,抗生素杂志(j.antibiotics)(1991)44:688；施赖伯s.l.(schreiber,s.l.)等人,美国化学会志(j.am.chem.soc.)(1991)113:7433；美国专利第3,929,992号。有许多针对雷帕霉素提出的编号方案。为避免混淆，当在本文中命名特定雷帕霉素类似物时，相对于雷帕霉素利用式a的编号方案给出名称。
可用于本发明中的雷帕霉素类似物是例如o-取代类似物，其中雷帕霉素的环己基环上的羟基经or1置换，其中r1是羟基烷基、羟基烷氧基烷基、酰基氨基烷基或氨基烷基；例如rad001，也称为依维莫司，如us5,665,772和wo94/09010中所述，这些专利的内容均以引用的方式并入。其它适宜雷帕霉素类似物包括26或28位置处经取代的那些。雷帕霉素类似物可为上文所提及类似物的差向异构物，特别地在位置40、28或26中经取代的类似物的差向异构物，且可任选地进一步氢化，例如如us6,015,815、wo95/14023和wo99/15530中所述，这些专利的内容均以引用的方式并入，例如abt578(也称为咗他莫司(zotarolimus))，或us7,091,213、wo98/02441和wo01/14387中所述的雷帕霉素类似物，这些专利的内容均以引用的方式并入，例如ap23573，也称为瑞达福罗莫司(ridaforolimus)。
来自us5,665,772的适用于本发明的雷帕霉素类似物的实例包括(但不限于)40-o-苄基-雷帕霉素、40-o-(4’-羟甲基)苄基-雷帕霉素、40-o-[4’-(1,2-二羟基乙基)]苄基-雷帕霉素、40-o-烯丙基-雷帕霉素、40-o-[3’-(2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4(s)-基)-丙-2’-烯-1’-基]-雷帕霉素、(2’e,4’s)-40-o-(4’,5’-二羟基戊-2’-烯-1’-基)-雷帕霉素、40-o-(2-羟基)乙氧基羰基甲基-雷帕霉素、40-o-(2-羟基)乙基-雷帕霉素、40-o-(3-羟基)丙基-雷帕霉素、40-o-(6-羟基)己基-雷帕霉素、40-o-[2-(2-羟基)乙氧基]乙基-雷帕霉素、40-o-[(3s)-2,2-二甲基二氧环戊-3-基]甲基-雷帕霉素、40-o-[(2s)-2,3-二羟基丙-1-基]-雷帕霉素、40-o-(2-乙酰基)乙基-雷帕霉素、40-o-(2-烟酰基氧基)乙基-雷帕霉素、40-o-[2-(n-吗啉基)乙酰基]乙基-雷帕霉素、40-o-(2-n-咪唑基乙酰基)乙基-雷帕霉素、40-o-[2-(n-甲基-n’-哌嗪基)乙酰基]乙基-雷帕霉素、39-o-去甲基-39,40-o,o-亚乙基-雷帕霉素、(26r)-26-二氢-40-o-(2-羟基)乙基-雷帕霉素、40-o-(2-氨基乙基)-雷帕霉素、40-o-(2-乙酰胺基乙基)-雷帕霉素、40-o-(2-烟酰胺基乙基)-雷帕霉素、40-o-(2-(n-甲基-咪唑-2’-基乙氧基甲酰胺基(carbethoxamido))乙基)-雷帕霉素、40-o-(2-乙氧基羰基氨基乙基)-雷帕霉素、40-o-(2-甲苯基磺酰胺基乙基)-雷帕霉素和40-o-[2-(4’,5’-二乙氧羰基-1’,2’,3’-三唑-1’-基)-乙基]-雷帕霉素。
可用于本发明中的其它雷帕霉素类似物是其中雷帕霉素的环己基环上的羟基和/或28位置处的羟基经羟基酯基团置换的类似物，例如于usre44,768中发现的雷帕霉素类似物，例如西罗莫司脂化物(temsirolimus)。
可用于本发明中的其它雷帕霉素类似物包括以下类似物：其中16位置处的甲氧基经另一取代基、优选(任选地经羟基取代)炔基氧基、苄基、邻甲氧基苄基或氯苄基置换和/或其中39位置处的甲氧基与39碳一起删除，以使得雷帕霉素的环己基环变成缺少39位甲氧基的环戊基环；例如如wo95/16691及wo96/41807中所述，这些专利的内容均以引用的方式并入。这些类似物可进一步经修饰，使得雷帕霉素的40位置处的羟基经烷基化和/或32-羰基经还原。
来自wo95/16691的雷帕霉素类似物包括(但不限于)16-去甲氧基-16-(戊-2-炔基)氧基-雷帕霉素,16-去甲氧基-16-(丁-2-炔基)氧基-雷帕霉素、16-去甲氧基-16-(炔丙基)氧基-雷帕霉素、16-去甲氧基-16-(4-羟基-丁-2-炔基)氧基-雷帕霉素、16-去甲氧基-16-苄基氧基-40-o-(2-羟基乙基)-雷帕霉素、16-去甲氧基-16-苄基氧基-雷帕霉素、16-去甲氧基-16-邻甲氧基苄基-雷帕霉素、16-去甲氧基-40-o-(2-甲氧基乙基)-16-戊-2-炔基)氧基-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-甲酰基-42-去甲-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-羟甲基-42-去甲-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-羧基-42-去甲-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-(4-甲基-哌嗪-1-基)羰基-42-去甲-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-(吗啉基-4-基)羰基-42-去甲-雷帕霉素、39-去甲氧基-40-去氧基-39-[n-甲基,n-(2-吡啶-2-基-乙基)]氨甲酰基-42-去甲-雷帕霉素和39-去甲氧基-40-去氧基-39-(对-甲苯磺酰基亚肼基甲基)-42-去甲-雷帕霉素。
来自wo96/41807的雷帕霉素类似物包括(但不限于)32-去氧-雷帕霉素、16-o-戊-2-炔基-32-去氧-雷帕霉素、16-o-戊-2-炔基-32-去氧-40-o-(2-羟基-乙基)-雷帕霉素、16-o-戊-2-炔基-32-(s)-二氢-40-o-(2-羟基乙基)-雷帕霉素、32(s)-二氢-40-o-(2-甲氧基)乙基-雷帕霉素和32(s)-二氢-40-o-(2-羟基乙基)-雷帕霉素。
另一适宜雷帕霉素类似物是优米莫司(umirolimus)，如us2005/0101624中所述，其内容以引用的方式并入。
在哺乳动物细胞中，雷帕霉素(mtor)激酶的靶标作为多蛋白复合物(阐述为mtorc1复合物或mtorc2复合物)存在，所述复合物感测营养物和活力的利用率并整合来自生长因子和应激信号传导的输入。mtorc1复合物对变构mtor抑制剂(例如雷帕霉素)敏感，是由mtor、gβl和mtor的调节相关蛋白(raptor)构成，且结合至肽脯氨酰异构酶fkbp12蛋白(一种fk506结合蛋白1a,12kda)。与此相比，mtorc2复合物是由mtor、gβl和mtor的雷帕霉素不敏感伴侣蛋白(rictor)构成，且在活体外不结合至fkbp12蛋白。
mtorc1复合物已显示涉及蛋白质翻译控制，其作为生长因子及营养物敏感装置操作用于生长和增殖调节。mtorc1经由两个关键下游底物调节蛋白质翻译：p70s6激酶，其依次磷酸化核糖体蛋白p70s6；和真核翻译起始因子4e结合蛋白1(4ebp1)，其在调整eif4e调节的帽依赖型翻译(cap-dependenttranslation)中起重要作用。mtorc1复合物响应于细胞的活力和营养物内稳态调节细胞生长，且mtorc1复合物的失调在多种人类癌症很常见。mtorc2的功能涉及经由使akt磷酸化来调节细胞存活和肌动蛋白细胞骨架动力学的调节。
mtorc1复合物对变构mtor抑制剂(例如雷帕霉素和衍生物)敏感，其很大部分是由于雷帕霉素的作用模式，所述作用模式涉及与fkbp12形成细胞内复合物并结合至mtor的fkbp12-雷帕霉素结合(frb)结构域。此导致mtorc1的构象变化，据信此构象变化改变并弱化与其支架蛋白raptor的相互作用，进而阻碍诸如p70s6k1等底物接近mtor并磷酸化。雷帕霉素和诸如rad001等雷帕霉素类似物(rapalogue)通过抑制与良性和恶性增殖病症二者相关的mtor超活化而已获得临床相关性。
rad001(在其它地方称为依维莫司
依维莫司是fda批准用于治疗晚期肾癌的药物且在肿瘤学中的一些其它iii期临床试验中仍处于研究中。临床前研究已显示依维莫司能够同时在活体外和活体内抑制多种肿瘤细胞系的增殖，此大概是通过雷帕霉素敏感mtorc1功能的抑制所致。作为雷帕霉素的衍生物，依维莫司是可高效抑制mtorc1功能的一部分(即p70s6激酶(p70s6k)和下游p70s6k底物p70s6)的变构mtor抑制剂。诸如依维莫司(和其它雷帕霉素类似物)的变构mtor抑制剂在抑制mtorc2路径或其akt信号传导所致的活化方面具有很少或没有效果。变构mtor抑制剂的其它实例包括西罗莫司(雷帕霉素，ay-22989)、40-[3-羟基-2-(羟基甲基)-2-甲基丙酸酯]-雷帕霉素(也称为西罗莫司脂化物或cci-779)和瑞达福罗莫司(ap-23573/mk-8669)。变构mtor抑制剂的其它实例包括咗他莫司(abt578)和优米莫司。
另一选择或另外，已发现催化atp竞争性mtor抑制剂直接靶向mtor激酶结构域且靶向mtorc1和mtorc2二者。这些化合物还是比所述变构mtor抑制剂(如雷帕霉素)更有效的mtorc1抑制剂，因为其调整雷帕霉素抗性mtorc1输出，例如4ebp1-t37/46磷酸化和帽依赖性翻译。
bez235是催化mtor抑制剂，其具有化学名称2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧代-8-喹啉-3-基-2,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈和以下化学结构
bez235还可以其单甲苯磺酸盐形式使用。bez235的合成阐述于wo2006/122806中。
作为催化mtor抑制剂，bez235能够关闭mtorc1复合物的全部功能，包括雷帕霉素敏感性(p70s6k的磷酸化和随后p70s6的磷酸化)和雷帕霉素不敏感性(4ebp1的磷酸化)功能二者。bez235根据所用药物浓度而具有差别效应，由此mtor抑制在低浓度(小于100nmol/l)占优势，但双重pi3k/mtor抑制在相对较高浓度(大约500nmol/l)占优势。
通过编号、通用名或商品名来识别的活性成分的结构可自标准概要“默克索引(themerckindex)”的现行版本或自数据库(例如国际专利)(例如，ims世界出版物(imsworldpublications))获得。其相应内容在此引用的方式并入。
包含(a)rad001或其医药上可接受的盐和(b)bez235或其医药上可接受的盐的组合在下文中将称为本发明的组合。
在一个实施例中，本发明是包含(a)rad001或其医药上可接受的盐和(b)bez235或其医药上可接受的盐的组合，其用于同时、分开或依序使用以增强或促进个体中的免疫反应。
在本发明的组合的一个实施例中，rad001呈中性形式。在本发明的组合的另一实施例中，bez235是单甲苯磺酸盐。在本发明的组合的另一实施例中，rad001是以1.01-0.2mg的剂量范围、例如0.1mg投与。在本发明的组合的又一实施例中，bez235是以1-20mg的剂量范围、例如10mg投与。
在本发明的组合的一个实施例中，组合呈立即释放剂型。在本发明的组合的另一实施例中，组合是每周投与一次。在本发明的组合的又一实施例中，组合是每天投与一次。
在本发明的组合的一个实施例中，个体是免疫减弱的。在本发明的组合的另一实施例中，个体是hiv+或患有aids。在本发明的组合的又一实施例中，个体患有传染病。
在本发明的组合的一个实施例中，个体具有受损的免疫反应。在本发明的组合的另一实施例中，个体是免疫衰老的。在本发明的组合的又一实施例中，包含治疗个体的年龄相关病况，例如免疫衰老、肌少症、肌肉萎缩、肌腱僵硬、肌腱损伤、肌腱炎、阿基里斯腱断裂(achillesrupture)、肩部粘连性关节囊炎、足底筋膜炎、风湿性多肌痛、肩袖撕裂、椎管狭窄、网球肘(tenniselbow)、杜普伊特伦挛缩(dupuytren’scontracture)、不宁腿综合症、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、自体免疫疾病、多发性肌炎、痛风、痴呆、亨廷顿氏病(huntington'sdisease)、阿兹海默氏病(alzheimer'sdisease)、脑萎缩、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、路易体痴呆(lewybodydementia)、额颞叶痴呆、帕金森氏病(parkinson’sdisease)、轻度认知障碍、血管性痴呆、中风、短暂性脑缺血发作、三叉神经痛、神经病变、睡眠障碍、失眠症、动脉粥样硬化、动脉硬化、高血压、心功能不全(例如心脏肥厚、收缩功能障碍或舒张功能障碍)、心力衰竭、扩张型心肌病、射血分数保留型心力衰竭、心律失常、瓣膜性心脏病、慢性阻塞性肺病、慢性阻塞性肺病加重、肺气肿、特发性肺纤维化、肺高血圧、肺栓塞、呼吸困难、肝疾病(包括nash和肝硬化)、胆结石、肾结石、巴雷斯特食道症(barrett’sesophagus)、痔疮、褥疮性溃疡、憩室炎、便秘、结肠息肉、痔疮、大便失禁、恶病质、吸收不良、勃起功能障碍、无性欲、白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜变性、视网膜脱落、干眼症、老花眼、跌倒、眩晕、良性前列腺肥大、前列腺癌、预期寿命减少、肾功能受损、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球硬化症、肾小球硬化症、肾硬化、脱水、神经性膀胱、泌尿道感染、膀胱炎、尿失禁、癌症、肥胖、代谢综合症、糖尿病前期、糖尿病、皮肤萎缩、皮肤老化、皱纹、脂溢性角化病、光化性角化病、皮肤癌、晒伤皮肤、酒渣鼻、甲癣、头发灰白、脱发、年龄相关性听力损失、耳鸣、嗅觉损失、牙周病、龋齿、口腔干燥、甲状腺疾病、与线粒体功能障碍相关的疾病、过早衰老综合症和早衰症(包括维尔纳综合症(werner’ssyndrome)和哈钦森吉尔福德早衰综合症(hutchinsonguilfordprogeriasyndrome))、贫血、叶酸缺乏性贫血、凝血病、深静脉血栓形成、恶病质、抑郁和预期寿命减少。
在本发明的一个实施例中，本发明是包含本发明的组合和至少一种医药上可接受的载剂的医药组合物。
在本发明的另一实施例中，本发明是促进或增强个体的免疫反应的方法，所述方法包含向所述个体投与联合治疗有效地促进或增强免疫反应的数量的本发明的组合。
在本发明的又一实施例中，本发明是治疗患有年龄相关病况的个体的方法，所述方法包含向所述个体投与联合治疗有效地对抗所述年龄相关病况的数量的本发明的组合，所述年龄相关病况是例如肌少症、皮肤萎缩、肌肉萎缩、脑萎缩、动脉粥样硬化、动脉硬化、肺气肿、骨质疏松症、骨关节炎、高血压、勃起功能障碍、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、白内障、年龄相关性黄斑变性、前列腺癌、中风、预期寿命减少、肾功能受损、和年龄相关性听力损失、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、肌腱僵硬、心功能不全(例如心脏肥厚和收缩和舒张功能障碍)、免疫衰老、癌症、肥胖和糖尿病。
在本发明的一个实施例中，本发明是本发明的组合用于制备供促进或增强免疫反应用的药剂的用途。
在另一实施例中，本发明是本发明的组合用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗年龄相关病况，例如肌少症、皮肤萎缩、肌肉萎缩、脑萎缩、动脉粥样硬化、动脉硬化、肺气肿、骨质疏松症、骨关节炎、高血压、勃起功能障碍、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、白内障、年龄相关性黄斑变性、前列腺癌、中风、预期寿命减少、肾功能受损、和年龄相关性听力损失、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、肌腱僵硬、心功能不全(例如心脏肥厚和收缩和舒张功能障碍)、免疫衰老、癌症、肥胖和糖尿病。
在一个实施例中，本发明是商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以促进或增强免疫反应的说明书。
在另一实施例中，本发明是商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以治疗年龄相关病况的说明书。
其它益处在于可使用本发明的组合的活性成份的较低剂量，例如剂量需要通常不仅较小，而且以较低频率施加，或可用以减少仅利用组合配对物中的一者所观察到的副作用的发生率。此根据待治疗患者的期望和需要。
通过已确立测试模型可显示，本发明的组合产生本文先前所述的有益效应。所属领域的技术人员完全能够选择相关测试模型来证明所述有益效应。本发明的组合的药理学活性可(例如)在临床研究或活体内或活体外测试程序中证实，如基本上下文所阐述。
在一个方面中，本发明提供医药组合物，其包含联合治疗有效地促进和/或增强个体的免疫反应的数量的本发明的组合。在此组合物中，组合配对物(a)和(b)是以单一调配物或单位剂型通过任何适宜途径投与。单位剂型也可为固定组合。
在其它方面中，本发明提供医药组合物，其单独包含联合治疗有效地促进和/或增强个体的免疫反应的数量的组合配对物(a)和组合配对物(b)，其同时但分开投与或依序投与。
用于分开投与组合配对物或用于以固定组合投与(即，包含本发明的组合的单一盖伦制剂(galenical)组合物)的医药组合物可以本身已知的方式制备且是适于经肠(例如经口或直肠)及不经肠投与个体且包含治疗有效量的至少一种单独组合配对物(例如如上文所指示)或与一或多种医药上可接受的载剂的组合的医药组合物。
新颖医药组合物可含有约0.1％到约99.9％、优选约1％到约60％的活性成分。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体的年龄大于65岁。
在另一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体患有copd。
慢性阻塞性肺病(copd)是以肺部气流的慢性阻塞为特征的肺疾病，其干扰正常呼吸且是不完全可逆的。更熟悉的术语‘慢性支气管炎’和‘肺气肿’不再使用，但现在包括在copd诊断内。copd并非简单的“吸烟过多引起的咳嗽”，而是一种诊断不足、威胁生命的肺疾病。copd诊断是通过称为肺量计检测的简单测试证实，所述肺量计检测测量一个人能够呼吸多深且空气能够多快进入和离开肺部。此一诊断将考虑到具有咳嗽、多痰或呼吸困难(难以呼吸或者呼吸费力)的症状和/或有暴露于疾病的危险因素的病史的任何患者。在肺量计检测不适用的情况下，可使用所有可用工具进行copd的诊断。可使用临床症状和迹象(例如呼吸异常短促和被迫呼气时间增加)帮助诊断。低峰值流量与copd一致，但并非copd所特定的，因此其可由其它肺疾病和测试期间不良表现造成。尽管并非所有存在咳嗽和多痰的个体都会发展到copd，但在气流受限之前的许多年通常会有慢性咳嗽和痰多情况。
在另一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体居住在护理机构。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体居住在协助生活机构。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体居住在专业护理机构。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体居住在康复机构。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体的一或多种日常生活活动需要帮助。
日常生活活动(adl)係人倾向于每天都做而不需要帮助的例行活动。由六种基本的adl：进食、穿衣、沐浴、如厕、移动(走路)和控制大小便。个体执行adl的能力对于决定何种类型的长期护理(例如，护理院护理或家庭护理)和个体需要的承保范围(即，联邦医疗保险(medicare)、医疗补助计划(medicaid)或长期护理保险(long-termcareinsurance))很重要。
adl(日常生活活动)：日常生活中通常做的事情，包括所执行以自我照顾的任何日常活动，例如进食、沐浴、穿衣、整理仪容、工作、做家务和休闲。能够或不能执行adl可在许多病症中作为有能力/失能的非常实用的量度。
在又一实施例中，本发明是根据前述实施例中任一者的本发明的组合，其中个体活动失能。
活动失能或活动障碍是指一个人不能使用其四肢中的一或多个或缺乏行走、抓握或举起物体的力量。轮椅、拐杖或助行器的使用可用于帮助活动。活动障碍可由许多因素(例如疾病、事故或先天性病症)造成且可起因于神经肌肉和骨科损害。
用于经肠或不经肠投与的组合疗法(包括固定组合或非固定组合)的适宜医药组合物是(例如)呈单元剂型的那些，例如糖包衣片剂、片剂、胶囊或栓剂或安瓿。如果未另外指示，那么这些是以本身已知的方式制备，例如借助各种常规混合、粉碎、造粒、糖包衣、溶解、冻干工艺或对所属领域的技术人员显而易见的制作技术制备。应了解，各剂型的个别剂量中所含的组合配对物的单位含量本身无需构成有效量，因为必需有效量可通过投与多个剂量单位来达到。进一步应了解，用于不经肠投与的组合配对物的单位含量可含有较高剂量量的组合配对物，其在投与之前稀释到有效剂量量。
含有药剂组合或药剂组合的个别药剂的单位剂型可呈包封在胶囊(例如，明胶胶囊)内的微片剂形式。为此，可使用用于医药调配物中的明胶胶囊，例如称为capsugeltm的硬明胶胶囊(自辉瑞(pfizer)获得)。
本发明的单位剂型可任选地进一步包含用于医药的其它常规载剂或赋形剂。所述载剂的实例包括(但不限于)崩解剂、结合剂、润滑剂、滑动剂、稳定剂、和填充剂、稀释剂、着色剂、矫味剂以及防腐剂。熟习此项技术者可相对于剂型的特别希望的性质通过常规实验且无任何过度负担下选择上文所提及载剂中的一或多种。所用各载剂的量可在业内常规范围内变化。以下以引用的方式并入的参考文献揭示用于调配口服剂型的技术和赋形剂。参见医药赋形剂手册(thehandbookofpharmaceuticalexcipients)，第4版，罗维(rowe)等人编辑，美国医药协会(americanpharmaceuticalsassociation)(2003)；和雷明顿：药学科学和实践(remington:thescienceandpracticeofpharmacy)，第20版，真纳罗(gennaro)编辑，利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司(lippincottwilliams&wilkins)(2003)。
这些可选额外常规载剂可通过在熔融造粒之前或期间将一或多种常规载剂纳入初始混合物或将一或多种常规载剂与颗粒组合成口服剂型来纳入口服剂型中。在后一实施例中，经组合混合物可(例如)经由v形掺和器进一步掺合，且随后压缩或模制成片剂(例如单片片剂)，由胶囊囊封，或填充于药囊中。
医药上可接受的崩解剂的实例包括(但不限于)淀粉；粘土；纤维素；藻酸盐；树胶；交联聚合物，例如交联聚乙烯吡咯烷酮或交聚维酮(crospovidone)，例如来自国际特种产品公司(internationalspecialtyproducts)(新泽西州韦恩(wayne,nj))的polyplasdonexltm；交联羧甲基纤维素钠(cross-linkedsodiumcarboxymethylcellulose,croscarmellosesodium)，例如，来自fmc的ac-di-soltm；和交联羧甲基纤维素钙；大豆多糖；和瓜尔胶(guargum)。崩解剂可以组合物的约0重量％到约10重量％的量存在。在一个实施例中，崩解剂以组合物的约0.1重量％到约5重量％的量存在。
医药上可接受的结合剂的实例包括(但不限于)淀粉；纤维素和其衍生物，例如微晶纤维素，例如来自fmc(宾夕法尼亚州费城(philadelphia,pa))的avicelphtm，来自陶氏化学公司(dowchemicalcorp.)(密西根州密德兰(midland,mi))的羟丙基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素methoceltm；蔗糖；右旋糖；玉米糖浆；多糖；和明胶。结合剂可以组合物的约0重量％到约50重量％(例如，2重量％到20重量％)的量存在。
医药上可接受的润滑剂和医药上可接受的滑动剂的实例包括(但不限于)胶体二氧化硅、三硅酸镁、淀粉、滑石粉、磷酸三钙、硬脂酸镁、硬脂酸铝、硬脂酸钙、碳酸镁、氧化镁、聚乙二醇、粉状纤维素和微晶纤维素。润滑剂可以组合物的约0重量％到约10重量％的量存在。在一个实施例中，润滑剂可以组合物的约0.1重量％到约1.5重量％的量存在。滑动剂可以约0.1重量％到约10重量％的量存在。
医药上可接受的填充剂及医药上可接受的稀释剂的实例包括(但不限于)粉糖(confectioner’ssugar)、可压缩糖、葡聚糖结合剂(dextrate)、糊精、右旋糖、乳糖、甘露醇、微晶纤维素、粉状纤维素、山梨醇、蔗糖和滑石粉。填充剂和/或稀释剂可(例如)以组合物的约0重量％到约80重量％的量存在。
本发明的组合物的治疗剂产生功效而无毒性的最优比率、个别和组合剂量以及浓度是基于治疗剂对靶位点的可用性的动力学，且是使用所属领域的技术人员已知的方法确定。
根据本发明，治疗有效量的本发明的组合的各治疗剂可同时或依序且以任一顺序投与，且这些组分可分开或作为固定组合投与。例如，根据本发明的治疗感染或衰老相关性疾病的方法可包含(i)投与呈游离或医药上可接受的盐形式的第一药剂(a)，和(ii)投与呈游离或医药上可接受的盐形式的药剂(b)，所述药剂是同时或依序以任一顺序以联合治疗有效量、优选以协同有效量(例如，以对应于本文所述量的每日或间歇剂量)投与。本发明的组合的个别治疗剂可在疗法过程期间在不同时间分开投与或以分次或单一组合形式同时投与。此外，术语“投与”还涵盖使用治疗剂的前药，所述前药在活体内转化成治疗剂本身。因此，本发明应理解为涵盖所有这些同时或交替治疗的方案且术语“投与”应相应地解释。
用于本发明的组合中的各治疗剂的有效剂量可视所用特定治疗剂或医药组合物、投与模式、所治疗的病况和所治疗病况的严重程度而变。因此，本发明的组合的给药方案应根据多种因素(包括投与途径和患者的肾及肝功能)来选择。具有普通技术的临床医师或医师可容易地确定减缓、对抗或阻止病况进展所需的单一活性成分的有效量并开处方。
本发明的组合的各治疗剂的有效剂量与组合中的其它治疗剂相比可需要更频繁地投与治疗剂中的一种。因此，为容许适当给药，经包装医药产品可含有一或多个含有化合物的组合的剂型和一或多个含有治疗剂的组合中的一种但没有所述组合的其它治疗剂的剂型。
当本发明的组合中所用的组合配对物以作为单一药物销售的形式应用时，如果本文其它地方未提及，那么其投与剂量和模式可根据相应销售药物的包装插页上所提供的信息。
rad001、特别是其游离形式优选以每天和/或每周约.01mg到约1mg范围内的剂量经口投与。在优选实施例中，rad001、特别是其游离形式的剂量是以0.1mg/每天的剂量经口投与成年人。
bez235、特别是其对-甲苯磺酸盐优选以每天和/或每周约1mg到约20mg范围内的剂量经口投与。在优选实施例中，bez235、特别是其对-甲苯磺酸盐的剂量是以每天10mg的剂量经口投与成年人。
每一治疗剂用于促进和/或增强个体的免疫反应和/或治疗个体的年龄相关病况的最优剂量可根据经验使用已知方法针对各个体确定，且将取决于多种因素，包括(但不限于)疾病进展程度；个体的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；投与时间和途径；和个体正服用的其它药剂。最优剂量可使用业内熟知的例行测试及程序来确定。
可与载剂材料组合以产生单一剂型的各治疗剂的量将端视所治疗的个体和特定投与模式而变化。在一些实施例中，含有本文所述治疗剂组合的单位剂型将含有在单独投与治疗剂时通常所投与量的所述组合的每一药剂。
剂量频率可端视所用治疗剂和待治疗的特定病况而变化。一般来说，优选使用足以提供有效疗法的最低剂量。通常可使用适于所治疗的病况的分析来监测患者的治疗有效性，所述分析将为所属领域的技术人员所熟悉。
在一个方面中，本发明提供促进和/或增强个体的免疫反应的方法，所述方法包含向需要其的个体投与联合治疗有效地促进和/或增强个体的免疫反应的数量的本发明的组合。
此外，本发明还提供治疗个体的年龄相关病况的方法，所述方法包含向需要其的个体投与一定量的治疗有效地治疗年龄相关病况的数量的本发明的组合。
在一个方面中，本发明提供本发明的组合的用途，其用于增强和/或促进免疫反应和/或用于制备用于增强和/或促进免疫反应的药剂。
在一个方面中，本发明提供本发明的组合用于治疗年龄相关病况和/或用于制备用于治疗年龄相关病况的药剂的用途。
在一个方面中，本发明提供商业包装，其包含作为活性成分的本发明的组合连同同时、分开或依序使用其以增强和/或治疗免疫反应的说明书。
在另一方面中，本发明提供商业包装，其包含作为活性成分的本发明的组合连同同时、分开或依序使用其以治疗年龄相关病况的说明书。
在一个方面中，本发明提供商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以增强和/或促进免疫反应的说明书。
在另一方面中，本发明提供商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以治疗年龄相关病况的说明书。
病原性感染
在另一方面中，本文所提供的方法可用于治疗个体的病原体感染。在一些实施例中，病原体是病毒病原体，例如病毒病原体，例如hiv、导致脑膜炎的病毒、导致脑炎的病毒、a型肝炎、b型肝炎、c型肝炎、狂犬病病毒、脊髓灰质炎病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒、鼻病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、风疹、百日咳、乳头瘤病毒、黄热病病毒、呼吸道合胞病毒、细小病毒、诺沃克病毒(norwalkvirus)、基孔肯尼亚热病毒(chikungunyavirus)、出血热病毒(包括埃博拉病毒(ebolavirus)、登革热病毒(denguevirus))、寨卡病毒(zikavirus)和疱疹病毒(例如水痘、巨细胞病毒和爱泼斯坦巴尔病毒(epstein-barrvirus))。在一些实施例中，感染是病毒感染，例如慢性病毒感染。在一些实施例中，慢性病毒感染是选自a型肝炎、b型肝炎、c型肝炎、爱泼斯坦巴尔病毒、hiv、巨细胞病毒、单纯性疱疹病毒1、单纯性疱疹病毒2、人类乳头瘤病毒、腺病毒和卡波西肉瘤相关性疱疹病毒(kaposi'ssarcoma-associatedherpesvirus)。在一些实施例中，慢性病毒感染包含hiv。
例如，利希特尔费尔德(lichterfeld)与同事观察到，hiv特异性cd8+t细胞显示减小的端粒长度且在抑制pd-1时端粒长度和端粒酶活性增加(参见例如利希特尔费尔德m等人，(2008)血液(blood)112(9):3679-3687)。在另一实例中，pd-1在c型肝炎(hvc)特异性cd8+细胞毒性t淋巴细胞中显著上调(参见例如戈尔登-梅森l(golden-mason,l)(2007)病毒学杂志(j.virol.)81(17):9249-9258)。
在一些实施例中，病毒感染包含病毒性呼吸道感染。在一些实施例中，病毒性呼吸道感染是由鼻病毒、冠状病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒(rsv)、腺病毒和/或副流感病毒引起。在一些实施例中，病毒性呼吸道感染是肺炎。在一些实施例中，病毒性呼吸道感染包括肺脓肿。在一些实施例中，病毒性呼吸道感染包括支气管炎。
在一些实施例中，病原体是细菌病原体，例如尤其选自以下的细菌：脑膜炎球菌(meningococcus)、嗜血杆菌(haemophilus)、肺炎球菌(pneumococcus)、葡萄球菌(staphylococcus)、链球菌(streptococcus)、奈瑟氏菌(neisseria)、莫拉克斯氏菌(moraxella)、大肠杆菌(escherichiacoli)、克雷伯氏菌(klebsiella)、假单胞菌(pseudomonas)、肠杆菌(enterobacter)、变形杆菌(proteus)、沙雷氏菌(serratia)、军团杆菌(legionella)、沙门氏菌(salmonella)、志贺氏杆菌(shigella)、不动杆菌(acinetobacter)、李斯特菌(listeria)、衣原体(chlamydia)和分支杆菌(mycobacterium)。
在一些实施例中，病原体是寄生虫病原体，例如弓形虫(toxoplasma)、利什曼虫(leishmania)和疟疾、克鲁氏锥虫(t.cruzi)、蠕虫(helminth)(例如血吸虫(schistosoma))。
在一些实施例中，病原体是酵母或真菌病原体，例如假丝酵母(candida)、隐球菌(cryptococcus)、球孢子菌(coccidioides)、芽生菌(blastomyces)、曲霉菌(aspergillus)或毛霉菌(mucormycetes)。
衰老和其它病症
在另一方面中，本文所提供的方法可用于治疗个体的衰老。如本文所用，术语“衰老”打算包括所有类型的老化。在一些实施例中，衰老包含免疫衰老。免疫衰老包括随年龄对感染的免疫反应降低且是由t细胞谱系的胸腺退化引起，此导致t细胞产生和输出减少(参见例如岛谷k(shimatani,k)等人，(2009)pnas106(37):15807-15812)。在一些实施例中，存在由pd-1的持续表达界定的真实年龄相关的cd4+或cd8+t细胞群体的群体增加，其抑制t细胞对抗原的反应(参见例如岛谷k等人，(2009)pnas106(37):15807-15812；努内斯c(nunes,c)等人，(2012)临床癌症研究(clinicalcancerresearch)18(3):678-687)。在一些实施例中，衰老包含细胞衰老，其中细胞不再分裂。在一些实施例中，年龄相关的免疫衰老包含由造血干细胞产生的幼稚型淋巴细胞减少(陈(chen),科学信号(sciencesignalling),ra75,2009)。细胞衰老与端粒的逐渐缩短相关联，其伴随每一细胞分裂或p16的细胞内表达而发生。在一些实施例中，衰老包含嗜中性粒细胞、淋巴细胞、nk细胞、巨噬细胞和/或树突细胞的功能的年龄相关的降低(参见例如博拉斯基d(boraschid)等人，(2013)科学·转化医学(scitranslmed)5(185):ps8；库马尔r(kumarr)和伯恩斯ea(burnsea.)(2008)疫苗专家评述(expertrev.vaccines)7(4):467-479)。
术语“年龄相关病况”是指群体中的发生率或在个体中的严重程度与年龄变化相关联的任何疾病、病症或病状。更特定地，年龄相关病况是在大于100,000个个体的所选群体中相对于20-30岁之间的人类个体，在60岁以上的人类个体中的发病率高至少1.5倍的疾病、病症或病状。在一个方面中，本发明涉及治疗包括(但不限于)以下的病况：免疫衰老、肌少症、肌肉萎缩、肌腱僵硬、肌腱损伤、肌腱炎、阿基里斯腱断裂、肩部粘连性关节囊炎、足底筋膜炎、风湿性多肌痛、肩袖撕裂、椎管狭窄、网球肘、杜普伊特伦挛缩、不宁腿综合症、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、自体免疫疾病、多发性肌炎、通风、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、脑萎缩、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、路易体痴呆、额颞叶痴呆、帕金森氏病、轻度认知障碍、血管性痴呆、中风、短暂性脑缺血发作、三叉神经痛、神经病变、睡眠障碍、失眠症、动脉粥样硬化、动脉硬化、高血压、心功能不全(例如心脏肥厚、收缩功能障碍或舒张功能障碍)、心力衰竭、扩张型心肌病、射血分数保留型心力衰竭、心律失常、瓣膜性心脏病、慢性阻塞性肺病、慢性阻塞性肺病加重、肺气肿、特发性肺纤维化、肺高血圧、肺栓塞、呼吸困难、肝疾病(包括nash和肝硬化)、胆结石、肾结石、巴雷斯特食道症、痔疮、褥疮性溃疡、憩室炎、便秘、结肠息肉、痔疮、大便失禁、恶病质、吸收不良、勃起功能障碍、无性欲、白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜变性、视网膜脱落、干眼症、老花眼、跌倒、眩晕、良性前列腺肥大、前列腺癌、预期寿命减少、肾功能受损、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球硬化症、肾小球硬化症、肾硬化、脱水、神经性膀胱、泌尿道感染、膀胱炎、尿失禁、癌症、肥胖、代谢综合症、糖尿病前期、糖尿病、皮肤萎缩、皮肤老化、皱纹、脂溢性角化病、光化性角化病、皮肤癌、晒伤皮肤、酒渣鼻、甲癣、头发灰白、脱发、年龄相关性听力损失、耳鸣、嗅觉损失、牙周病、龋齿、口腔干燥、甲状腺疾病、与线粒体功能障碍相关的疾病、过早衰老综合症和早衰症(包括维尔纳综合症和哈钦森吉尔福德早衰综合症)、贫血、叶酸缺乏性贫血、凝血病、深静脉血栓形成、恶病质、抑郁和预期寿命减少。
实例
以下实例说明上述本发明；然而，其并不打算以任何方式限制本发明的范围。本发明的医药组合的有益效应也可通过所属领域的技术人员原本已知的其它测试模型来测定。
本文所述本发明的组合的效用可在活体外、动物测试方法以及临床研究中证实。例如，本发明式(i)化合物的效应可根据下文所述的方法证实：
实例1：rad001和bez235组合的协同效应
在临床研究中，老年志愿者每天利用四种mtor抑制剂给药方案中的一种治疗达6周：0.5mg/天rad001、0.1mg/天rad001、10mg/天bez235或0.1mg/天rad001+10mg/天bez235。包括组合治疗臂，因为rad001和bez235已显示在活体外协同抑制mtor下游的s6k和4ebp1路径，参见图1、2和3。
给药6周之后，老年志愿者给予2周无药间断期且然后接受流感疫苗接种。研究结果指示，mtor抑制剂疗法增强对流感疫苗接种的反应，其中在0.1mgrad001+10mgbez235组合臂中看到最大功效。与安慰剂相比，对于rad001+bez235组合臂中3/3疫苗株、rad0010.1和0.5mg单一疗法臂中1/3菌株和bez235单一疗法臂中0/3菌株，疫苗接种后4周的gmt比率>1.2，参见图4，其显示rad+bez对于所有3种流感菌株的免疫反应增加超过20％(临床相关的增加)，而单一疗法仅对于3种菌株中的1种满足此截止值。所有给药方案均相对良好耐受。与安慰剂队列相比，在mtor抑制剂队列中看到较高比率的口腔溃疡、恶心、腹泻和皮疹。然而，这些不良事件中的大多数具有轻度严重性，是暂时的且尽管继续服用mtor抑制剂，但已解决。
作为研究的一部分，要求个体在日志中记录所有感染。在0.1mgrad001和10mgbez235组合臂中，感染总数以及泌尿道感染的数量最低。在事后分析(post-hocanalysis)中，与安慰剂相比，呼吸道感染的发生率和严重程度在所有mtor抑制剂治疗臂中均降低。此降低在个体服用研究药物的6周期间最大。
在实验中，个体子组在服用研究药物的同时自发报告活力/运动能力增加。大多数自发报告活力增加的个体在利用rad001+bez235的组合治疗的队列中。利用安慰剂治疗的个体未自发报告活力的增加，参见图5和6，其显示大多数自发报告活力增加的个体是在rad+bez队列中。
枚举的实施例
在第一实施例中，本发明是包含(a)rad001或其医药上可接受的盐和(b)bez235,或其医药上可接受的盐的组合，其用于同时、分开或依序使用以增强或促进个体中的免疫反应。
在第二实施例中，本发明是根据第一实施例的组合，其中rad001呈中性形式。
在第三实施例中，本发明是第一或第二实施例的组合，其中bez235是单甲苯磺酸盐。
在第四实施例中，本发明是根据第一到第三实施例中任一者的组合，其包含投与0.01-0.2mgrad001。
在第五实施例中，本发明是根据第一到第四实施例中任一者的组合，其包含投与0.1mgrad001。
在第六实施例中，本发明是根据第一到第五实施例中任一者的组合，其包含投与1-20mgbez235。
在第七实施例中，本发明是根据第一到第六实施例中任一者的组合，其包含投与10mgbez235。
在第八实施例中，本发明是根据第一到第七实施例中任一者的组合，其中所述组合是立即释放剂型。
在第九实施例中，本发明是根据第一到第七实施例中任一者的组合，其中所述组合是持续释放剂型。
在第十实施例中，本发明是根据第一到第九实施例中任一者的组合，其中所述组合是每周投与一次。
在第十一实施例中，本发明是根据第一到第九实施例中任一者的组合，其中所述组合是每天投与一次。
在第十二实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其中个体免疫减弱。
在第十三实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其中个体是hiv+或患有aids。
在第十四实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其中个体患有传染病。
在第十五实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其中个体具有受损的免疫反应。
在第十六实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其中个体是免疫衰老的。
在第十七实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合，其包含治疗个体的年龄相关病况。
在第十八实施例中，本发明是第十七实施例的组合，其中所述年龄相关病况是选自由以下组成的群组：免疫衰老、肌少症、肌肉萎缩、肌腱僵硬、肌腱损伤、肌腱炎、阿基里斯腱断裂、肩部粘连性关节囊炎、足底筋膜炎、风湿性多肌痛、肩袖撕裂、椎管狭窄、网球肘、杜普伊特伦挛缩、不宁腿综合症、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、自体免疫疾病、多发性肌炎、通风、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、脑萎缩、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、路易体痴呆、额颞叶痴呆、帕金森氏病、轻度认知障碍、血管性痴呆、中风、短暂性脑缺血发作、三叉神经痛、神经病变、睡眠障碍、失眠症、动脉粥样硬化、动脉硬化、高血压、心功能不全(例如心脏肥厚、收缩功能障碍或舒张功能障碍)、心力衰竭、扩张型心肌病、射血分数保留型心力衰竭、心律失常、瓣膜性心脏病、慢性阻塞性肺病、慢性阻塞性肺病加重、肺气肿、特发性肺纤维化、肺高血圧、肺栓塞、呼吸困难、肝疾病(包括nash和肝硬化)、胆结石、肾结石、巴雷斯特食道症、痔疮、褥疮性溃疡、憩室炎、便秘、结肠息肉、痔疮、大便失禁、恶病质、吸收不良、勃起功能障碍、无性欲、白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜变性、视网膜脱落、干眼症、老花眼、跌倒、眩晕、良性前列腺肥大、前列腺癌、预期寿命减少、肾功能受损、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球硬化症、肾小球硬化症、肾硬化、脱水、神经性膀胱、泌尿道感染、膀胱炎、尿失禁、癌症、肥胖、代谢综合症、糖尿病前期、糖尿病、皮肤萎缩、皮肤老化、皱纹、脂溢性角化病、光化性角化病、皮肤癌、晒伤皮肤、酒渣鼻、甲癣、头发灰白、脱发、年龄相关性听力损失、耳鸣、嗅觉损失、牙周病、龋齿、口腔干燥、甲状腺疾病、与线粒体功能障碍相关的疾病、过早衰老综合症和早衰症(包括维尔纳综合症和哈钦森吉尔福德早衰综合症)、贫血、叶酸缺乏性贫血、凝血病、深静脉血栓形成、恶病质、抑郁和预期寿命减少。
在第十九实施例中，本发明是医药组合物，其包含根据第一到第十一实施例中任一者的组合和至少一种医药上可接受的载剂。
在第二十实施例中，本发明是促进或增强个体的免疫反应的方法，其包含向所述个体投与联合治疗有效地促进或增强免疫反应的数量的根据第一到第十一实施例中任一者的组合。
在第二十一实施例中，本发明是治疗患有年龄相关病况的个体的方法，其包含向所述个体投与联合治疗有效地抵抗所述年龄相关病况的数量的根据第一到第十一实施例中任一者的组合。
在第二十二实施例中，本发明是根据第二十一实施例的方法，其中所述年龄相关病况是选自由以下组成的群组：免疫衰老、肌少症、肌肉萎缩、肌腱僵硬、肌腱损伤、肌腱炎、阿基里斯腱断裂、肩部粘连性关节囊炎、足底筋膜炎、风湿性多肌痛、肩袖撕裂、椎管狭窄、网球肘、杜普伊特伦挛缩、不宁腿综合症、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、自体免疫疾病、多发性肌炎、通风、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、脑萎缩、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、路易体痴呆、额颞叶痴呆、帕金森氏病、轻度认知障碍、血管性痴呆、中风、短暂性脑缺血发作、三叉神经痛、神经病变、睡眠障碍、失眠症、动脉粥样硬化、动脉硬化、高血压、心功能不全(例如心脏肥厚、收缩功能障碍或舒张功能障碍)、心力衰竭、扩张型心肌病、射血分数保留型心力衰竭、心律失常、瓣膜性心脏病、慢性阻塞性肺病、慢性阻塞性肺病加重、肺气肿、特发性肺纤维化、肺高血圧、肺栓塞、呼吸困难、肝疾病(包括nash和肝硬化)、胆结石、肾结石、巴雷斯特食道症、痔疮、褥疮性溃疡、憩室炎、便秘、结肠息肉、痔疮、大便失禁、恶病质、吸收不良、勃起功能障碍、无性欲、白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜变性、视网膜脱落、干眼症、老花眼、跌倒、眩晕、良性前列腺肥大、前列腺癌、预期寿命减少、肾功能受损、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球硬化症、肾小球硬化症、肾硬化、脱水、神经性膀胱、泌尿道感染、膀胱炎、尿失禁、癌症、肥胖、代谢综合症、糖尿病前期、糖尿病、皮肤萎缩、皮肤老化、皱纹、脂溢性角化病、光化性角化病、皮肤癌、晒伤皮肤、酒渣鼻、甲癣、头发灰白、脱发、年龄相关性听力损失、耳鸣、嗅觉损失、牙周病、龋齿、口腔干燥、甲状腺疾病、与线粒体功能障碍相关的疾病、过早衰老综合症和早衰症(包括维尔纳综合症和哈钦森吉尔福德早衰综合症)、贫血、叶酸缺乏性贫血、凝血病、深静脉血栓形成、恶病质、抑郁和预期寿命减少。
在第二十三实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合的用途，其用于制备用于促进或增强免疫反应的药剂。
在第二十四实施例中，本发明是根据第一到第十一实施例中任一者的组合的用途，其用于制备用于治疗年龄相关病况的药剂。
在第二十五实施例中，本发明是根据第二十四实施例的组合的用途，其中所述年龄相关病况是选自由以下组成的群组：免疫衰老、肌少症、肌肉萎缩、肌腱僵硬、肌腱损伤、肌腱炎、阿基里斯腱断裂、肩部粘连性关节囊炎、足底筋膜炎、风湿性多肌痛、肩袖撕裂、椎管狭窄、网球肘、杜普伊特伦挛缩、不宁腿综合症、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、自体免疫疾病、多发性肌炎、通风、痴呆、亨廷顿氏病、阿兹海默氏病、脑萎缩、衰老相关性活动失能(例如，衰弱)、认知下降、年龄相关性痴呆、记忆障碍、路易体痴呆、额颞叶痴呆、帕金森氏病、轻度认知障碍、血管性痴呆、中风、短暂性脑缺血发作、三叉神经痛、神经病变、睡眠障碍、失眠症、动脉粥样硬化、动脉硬化、高血压、心功能不全(例如心脏肥厚、收缩功能障碍或舒张功能障碍)、心力衰竭、扩张型心肌病、射血分数保留型心力衰竭、心律失常、瓣膜性心脏病、慢性阻塞性肺病、慢性阻塞性肺病加重、肺气肿、特发性肺纤维化、肺高血圧、肺栓塞、呼吸困难、肝疾病(包括nash和肝硬化)、胆结石、肾结石、巴雷斯特食道症、痔疮、褥疮性溃疡、憩室炎、便秘、结肠息肉、痔疮、大便失禁、恶病质、吸收不良、勃起功能障碍、无性欲、白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜变性、视网膜脱落、干眼症、老花眼、跌倒、眩晕、良性前列腺肥大、前列腺癌、预期寿命减少、肾功能受损、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球硬化症、肾小球硬化症、肾硬化、脱水、神经性膀胱、泌尿道感染、膀胱炎、尿失禁、癌症、肥胖、代谢综合症、糖尿病前期、糖尿病、皮肤萎缩、皮肤老化、皱纹、脂溢性角化病、光化性角化病、皮肤癌、晒伤皮肤、酒渣鼻、甲癣、头发灰白、脱发、年龄相关性听力损失、耳鸣、嗅觉损失、牙周病、龋齿、口腔干燥、甲状腺疾病、与线粒体功能障碍相关的疾病、过早衰老综合症和早衰症(包括维尔纳综合症和哈钦森吉尔福德早衰综合症)、贫血、叶酸缺乏性贫血、凝血病、深静脉血栓形成、恶病质、抑郁和预期寿命减少。
在第二十六实施例中，本发明是商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以促进或增强免疫反应的说明书。
在第二十七实施例中，本发明是商业包装，其包含rad001或其医药上可接受的盐和与bez235或其医药上可接受的盐同时、分开或依序使用以治疗年龄相关病况的说明书。