抗CD22抗体-美登木素缀合物及其使用方法与流程

本申请要求2015年11月9日提交的美国临时申请no.62/252,985的依据35u.s.c.§119(e)的权益，通过援引将其公开内容完整收入本文。引言蛋白质-小分子治疗性缀合物领域进展很大，提供多种在临床上有益的药物及在未来几年中提供更多的承诺。蛋白质缀合物治疗剂可提供数项优点，这是由于例如特异性，功能多样性及相对低的脱靶活性，导致更少的副作用。对蛋白质的化学修饰可通过使它们更加有力，稳定，或多模态而扩充这些优点。通常使用多种标准化学转化在蛋白质上创建及操作翻译后修饰。有多种方法，其中一种能够选择性修饰某些氨基酸的侧链。例如，可以通过首先用水溶性碳二亚胺试剂活化及随后与胺反应来靶向羧酸侧链(天冬氨酸和谷氨酸)。类似地，可以经由使用已活化的酯或异硫氰酸酯来靶向赖氨酸，而且可以用马来酰亚胺和α-卤代-羰基来靶向半胱氨酸硫醇。对于创建在化学上改变的蛋白质治疗剂或试剂的一项重大障碍是以有生物学活性的，同质的形式生成蛋白质。药物或可检测标记物对多肽的缀合可能难以控制，产生在所附着的药物分子的数目和化学缀合的位置方面不同的缀合物的异质混合物。在一些情况中，可能想要使用合成有机化学的工具来控制缀合的位点和/或缀合至多肽的药物或可检测标记物以指导多肽上化学键的精确且选择性的形成。概述本公开内容提供了抗cd22抗体-美登木素缀合物结构。本公开内容还涵盖此类缀合物的生产方法以及使用方法。本公开内容的多个方面包括一种缀合物，其包含至少一个式(i)的经修饰的氨基酸残基：其中z是cr4或n；r1选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；r2和r3每个独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基，或r2和r3任选环状连接以形成5或6元杂环基；每个r4独立选自氢，卤素，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；l是包含-(t1-v1)a-(t2-v2)b-(t3-v3)c-(t4-v4)d-的接头，其中a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4；t1，t2，t3和t4每个独立选自(c1-c12)烷基，取代的(c1-c12)烷基，(eda)w，(peg)n，(aa)p，-(cr13oh)h-，哌啶-4-氨基(4ap)，乙缩醛基团，肼，二硫化物，和酯，其中eda是乙二胺模块，peg是聚乙二醇或经修饰的聚乙二醇，而aa是氨基酸残基，其中w是1至20的整数，n是1至30的整数，p是1至20的整数，而h是1至12的整数；v1，v2，v3和v4每个独立选自下组：共价键，-co-，-nr15-，-nr15(ch2)q-，-nr15(c6h4)-，-conr15-，-nr15co-，-c(o)o-，-oc(o)-，-o-，-s-，-s(o)-，-so2-，-so2nr15-，-nr15so2-和-p(o)oh-，其中q是1至6的整数；每个r13独立选自氢，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基；每个r15独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，羧基，羧基酯，酰基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；w1是美登木素生物碱；且w2是抗cd22抗体。在某些实施方案中，t1选自(c1-c12)烷基和取代的(c1-c12)烷基；t2，t3和t4每个独立选自(eda)w，(peg)n，(c1-c12)烷基，取代的(c1-c12)烷基，(aa)p，-(cr13oh)h-，哌啶-4-氨基(4ap)，乙缩醛基团，肼，和酯；且v1，v2，v3和v4每个独立选自下组：共价键，-co-，-nr15-，-nr15(ch2)q-，-nr15(c6h4)-，-conr15-，-nr15co-，-c(o)o-，-oc(o)-，-o-，-s-，-s(o)-，-so2-，-so2nr15-，-nr15so2-，和-p(o)oh-；其中：(peg)n是其中n是1至30的整数；eda是具有如下结构的乙二胺模块：其中y是1至6的整数且r是0或1；哌啶-4-氨基是每个r12和r15独立选自氢，烷基，取代的烷基，聚乙二醇模块，芳基和取代的芳基，其中任两个相邻的r12基团可以环状连接以形成哌嗪基环；且r13选自氢，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基。在某些实施方案中，t1，t2，t3和t4，和v1，v2，v3和v4选自下表：t1v1t2v2t3v3t4v4(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-----(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co---(c1-c12)烷基-co-(aa)p-----(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-nr15-----(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-nr15---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-----(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15-----(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-(eda)w---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-----(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-conr15-(c1-c12)烷基-co-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co---(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-(aa)p---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-so2-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-conr15-(peg)n-co-(c1-c12)烷基-co-(cr13oh)h-co-----(c1-c12)烷基-conr15-取代的(c1-c12)烷基-nr15-(peg)n-co---(c1-c12)烷基-so2-(c1-c12)烷基-co-----(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-(cr13oh)h-conr15---(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-p(o)oh-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(eda)w-(aa)p---(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15---co---(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15---co-(c1-c12)烷基-nr15-(c1-c12)烷基-co-4ap-co-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-4ap-co-(c1-c12)烷基-co---在某些实施方案中，l选自如下结构之一：其中每个f独立是0或1至12的整数；每个y独立是0或1至20的整数；每个n独立是0或1至30的整数；每个p独立是0或1至20的整数；每个h独立是0或1至12的整数；每个r独立是氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；且每个r’独立是h，氨基酸的侧链基团，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，所述美登木素生物碱是下式的：其中指示美登木素生物碱和l之间的附着点。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，其中所述接头l包括下面的结构：其中每个f独立是1至12的整数；且n是1至30的整数。在某些实施方案中，所述抗cd22抗体结合图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内，氨基酸1-759内，氨基酸1-751内，或氨基酸1-670内的表位。在某些实施方案中，所述抗cd22抗体包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)，其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一；z30是碱性氨基酸或脂肪族氨基酸；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，前提是，当该序列处于缀合物的n端时，x1存在；且x2和x3每个独立是任何氨基酸。在某些实施方案中，所述序列是l(fgly’)tpsr。在某些实施方案中，z30选自r，k，h，a，g，l，v，i，和p；x1选自l，m，s，和v；且x2和x3每个独立选自s，t，a，v，g，和c。在某些实施方案中，所述经修饰的氨基酸残基位于所述抗cd22抗体的重链恒定区的c端。在某些实施方案中，所述重链恒定区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)，其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一；z30是碱性氨基酸或脂肪族氨基酸；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，前提是，当该序列处于缀合物的n端时，x1存在；且x2和x3每个独立是任何氨基酸，且其中所述序列处于氨基酸序列slslspg的c端。在某些实施方案中，所述重链恒定区包含序列spgsl(fgly’)tpsrgs。在某些实施方案中，z30选自r，k，h，a，g，l，v，i，和p；x1选自l，m，s，和v；且x2和x3每个独立选自s，t，a，v，g，和c。在某些实施方案中，所述经修饰的氨基酸残基位于所述抗cd22抗体的轻链恒定区中。在某些实施方案中，所述轻链恒定区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)，其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一；z30是碱性氨基酸或脂肪族氨基酸；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，前提是，当该序列处于缀合物的n端时，x1存在；且x2和x3每个独立是任何氨基酸，且其中所述序列处于序列kvdnal的c端和/或序列qsgnsq的n端。在某些实施方案中，所述轻链恒定区包含序列kvdnal(fgly’)tpsrqsgnsq。在某些实施方案中，z30选自r，k，h，a，g，l，v，i，和p；x1选自l，m，s，和v；且x2和x3每个独立选自s，t，a，v，g，和c。在某些实施方案中，所述经修饰的氨基酸残基位于所述抗cd22抗体的重链ch1区中。在某些实施方案中，所述重链ch1区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)，其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一；z30是碱性氨基酸或脂肪族氨基酸；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，前提是，当该序列处于缀合物的n端时，x1存在；且x2和x3每个独立是任何氨基酸，且其中所述序列处于氨基酸序列swnsga的c端和/或氨基酸序列gvhtfp的n端。在某些实施方案中，所述重链ch1区包含序列swnsgal(fgly’)tpsrgvhtfp。在某些实施方案中，z30选自r，k，h，a，g，l，v，i，和p；x1选自l，m，s，和v；且x2和x3每个独立选自s，t，a，v，g，和c。在某些实施方案中，所述经修饰的氨基酸残基位于所述抗cd22抗体的重链ch2区中。在某些实施方案中，所述经修饰的氨基酸残基位于所述抗cd22抗体的重链ch3区中。本公开内容的多个方面包括一种药学组合物，其包括本文中描述的缀合物和药学可接受赋形剂。本公开内容的多个方面包括一种方法，其中该方法包括对受试者施用有效量的本文中描述的缀合物。本公开内容的多个方面包括一种治疗受试者中的癌症的方法。该方法包括对受试者施用治疗有效量的包括本文中描述的缀合物的药学组合物，其中该施用有效治疗受试者中的癌症。本公开内容的多个方面包括一种将药物投递至受试者中的靶位点的方法。该方法包括对受试者施用包括本文中描述的缀合物的药学组合物，其中该施用有效在受试者中的靶位点处自缀合物释放治疗有效量的药物。附图简述图1，小图a，显示使用标准分子生物学技术沿着抗体主链在期望位置处插入的甲酰甘氨酸生成酶(fge)识别序列。一旦表达，真核细胞内源的fge就催化共有序列内的cys转变成甲酰甘氨酸残基(fgly)。图1，小图b，显示携带醛模块(2个/抗体)的抗体与肼基-异-pictet-spengler(hips)接头和载荷反应以生成位点特异性缀合的adc。图1，小图c，显示经由中间体肼离子进行的hips化学，接着是与亲核性吲哚的分子内烷基化以生成稳定的c-c键。图2显示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的疏水相互作用柱(hic)迹线。图3显示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的hic迹线。图4显示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的反相层析(plrp)迹线。图5显示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的分析性大小排阻层析(sec)分析的图。图6a显示依照本公开文本的实施方案，指示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对wsu-dlcl2细胞的体外效力(％存活力对log抗体-药物缀合物(adc)浓度(nm))的图。图6b显示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对ramos细胞的体外效力(％存活力对log抗体-药物缀合物(adc)浓度(nm))的图。图7显示指示依照本公开文本的实施方案，于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对wsu-dlcl2异种移植物模型的体内功效(均值肿瘤体积(mm3)对天)的图。图8a-8c提供cd22同等型的氨基酸序列(顶部至底部：seqidno://-//)。图9a描绘位点图，显示可能用于生成带醛标签的ig多肽的修饰位点。上部序列是igg1轻链多肽的保守区的氨基酸序列(seqidno://)并显示ig轻链中可能的修饰位点；下部序列是ig重链多肽的保守区的氨基酸序列(seqidno://；genbank登录号aag00909)并显示ig重链中可能的修饰位点。重和轻链编号基于全长重和轻链。图9b描绘igg1(seqidno://)，igg2(seqidno://)，igg3(seqidno://)，igg4(seqidno://)，和iga(seqidno://)的免疫球蛋白重链恒定区的比对，显示免疫球蛋白重链中能提供醛标签的修饰位点。重和轻链编号基于全长重和轻链。图9c描绘免疫球蛋白轻链恒定区(seqidno://)的比对，显示免疫球蛋白轻链中能提供醛标签的修饰位点。图10显示依照本公开文本的实施方案，用于检测各种分析物的elisa格式的图示。图11–依照本公开文本的抗cd22adc是高度单体的，具有1.8的平均dar，且包括单一轻和重链种类。分析抗cd22adc，通过大小排阻层析(图11，小图a)评估百分比单体(99.2％)，通过疏水相互作用(hic；图11，小图b)和反相(plrp)层析(图11，小图c)评估药物-对-抗体比(dar)(1.8)。图12–依照本公开文本的抗cd22adc像野生型抗cd22抗体同等好地结合人cd22蛋白质。使用竞争性elisa来比较抗cd22adc与野生型(wt)抗cd22抗体的结合。数据以均值±s.d.(n＝4)呈现。图13–依照本公开文本的抗cd22adc与野生型抗cd22抗体相似地介导cd22内在化。使用nhl细胞系ramos，granta-519，和wsu-dlcl2来比较由结合wt抗cd22或cat-02-106任一介导的细胞表面cd22的内在化。图14–依照本公开文本的抗cd22adc在体外同等有力地针对亲本和表达mdr1的nhl肿瘤细胞。使用ramos和wsu-dlcl2亲本(wt)细胞(图14，小图a和小图c)和各种改造成表达mdr1的那些系(mdr1+，图14，小图b和小图d)作为抗cd22adc活性的体外细胞毒性研究的靶。使用游离美登木素和用cat-02抗体生成的但使用缬氨酸-瓜氨酸可切割接头缀合至美登木素的αcd22adc作为对照。在另一项对照实验中，将mdr1抑制剂环孢菌素添加至wt或mdr1+wsu-dlcl2细胞(图14，小图e和小图f)。数据以均值±s.d.(n＝2)呈现。图15–依照本公开文本的抗cd22adc并不介导脱靶细胞毒性。将胃肿瘤细胞系nci-n87在浓度渐增的抗cd22adc存在下在体外温育5天。然后，使用基于mts的方法评估细胞存活力。数据以均值±s.d.(n＝2)呈现。图16–抗cd22adc相关adc，缀合至hips-4ap-美登木素接头载荷的抗her2，并不诱导旁观者杀伤。使用her2+nci-n87细胞，her2-ramos细胞，或这两种细胞的共培养物作为靶进行体外细胞毒性研究。使用游离美登木素(2nm)和经由可切割缬氨酸-瓜氨酸(vc)接头缀合mmae的抗her2(2nm载荷)作为旁观者杀伤的阳性对照。抗her2adc以2nm载荷给药。数据以均值±s.d.(n＝2)呈现。图17–依照本公开文本的抗cd22adc在体内有效针对nhl衍生的wsu-dlcl2和ramos异种移植物模型。用单独的媒介或用抗cd22adc(或是(图17，小图a)单剂10mg/kg或是(图17，小图b)多剂10mg/kg，每4天投递，总共4剂(q4dx4))处理携带wsu-dlcl2异种移植物的雌性cb17icrscid小鼠(8只/组)。当肿瘤达到分别用于单或多剂研究的118或262mm3的平均尺寸时启动处理。(图17，小图c)用单独的媒介或用5或10mg/kgcat-02-106q4dx4处理携带ramos异种移植物的雌性cb17icrscid小鼠(12只/组)。当肿瘤达到246mm3的平均尺寸时启动给药。以均值±s.e.m.呈现数据。图18–ramos和wsu-dlcl2细胞表达不同水平的细胞表面cd22。将ramos和wsu-dlcl2细胞与荧光素标记的抗cd22抗体一起温育，然后通过流式细胞术进行分析。在图中显示每种细胞类型的fl1通道(检测荧光素)的均值荧光强度。图19–小鼠体重不受依照本公开文本的抗cd22adc处理影响。显示了异种移植物功效研究中的小鼠的均值体重。(图19，小图a)单剂wsu-dlcl2研究；(图19，小图b)多剂wsu-dlcl2研究；(图19，小图c)ramos研究。误差条指示s.d.。图20–依照本公开文本的抗cd22adc可以在大鼠中给药高至60mg/kg而具有最小限度影响。sprague-dawley大鼠(5只/组)接受一剂6，20，40，或60mg/kgcat-02-106，接着是12天观察期。(图20，小图a)在所示时间监测体重。在给药后5和12天评估(图20，小图b)丙氨酸转氨酶(alt)，和(图20，小图c)血小板计数。数据以均值±s.d.呈现。图21–依照本公开文本的抗cd22adc特异性结合至食蟹猴b细胞。食蟹猴外周血淋巴细胞依照它们的前向和侧向散射概况设门(左上)。将细胞与单独的异硫氰酸荧光素(fitc)缀合的链霉亲合素(sa)(右上)，或与生物素化的抗cd22adc，接着是fitcsa一起温育。与识别t细胞(cd3，左下)或b细胞(cd20，右下)的抗体共温育展现cat-02-106结合b细胞群体的特异性。图22–依照本公开文本的抗cd22adc在人和食蟹猴组织中展现b细胞特异性反应性。抗cd22adc结合至脾的富含b细胞区(顶部)。心组织染色呈阴性(中部)。肺切片呈阴性，散布的白细胞例外(底部)。图23–食蟹猴在60mg/kg重复剂量的依照本公开文本的抗cd22adc不展示观察到的不利影响。对食蟹猴(2只/性别/组)给予10，30，或60mg/kg抗cd22adc，每三周一次，总共2剂，接着是21天观察期。在所示时间监测(图23，小图a)天冬氨酸转氨酶(ast)，(图23，小图b)丙氨酸转氨酶(alt)，(图23，小图c)血小板，和(图23，小图d)单核细胞。数据以均值±s.d.呈现。图24(小图a和小图b)–在食蟹猴中依照本公开文本的抗cd22adc处理减少外周b细胞群体。通过流式细胞术监测来自在毒性研究中登记的食蟹猴的外周血单个核细胞以检测给药前和第7，14，28，和35天在动物中观察到的b细胞(cd20+)，t细胞(cd3+)，和nk细胞(cd20-/cd3-)的比率。数据以均值±s.d.呈现。图25–依照本公开文本的抗cd22adc展示很高的体内稳定性，如通过大鼠药动学研究显示的。对sprague-dawley大鼠(3只/组)给药单剂静脉内推注3mg/kg抗cd22adc。在指定时间收集血浆样品并分析(如图10中所示)总抗体，总缀合物，和总adc浓度。图26显示表3：服用依照本公开文本的实施方案的抗cd22adc的动物中总adc值的药动学和毒动学(tk)参数均值(±sd)的汇总。定义除非另有指示，以下术语具有以下含义。任何未定义的术语具有它们在技术上公认的含义。“烷基”指的是具有1至10个碳原子(诸如1至6个碳原子，或1至5个，或1至4个，或1至3个碳原子)的单价饱和脂肪族烃基。举例而言，这个术语包括直链和支链烃基，诸如甲基(ch3-)，乙基(ch3ch2-)，正丙基(ch3ch2ch2-)，异丙基((ch3)2ch-)，正丁基(ch3ch2ch2ch2-)，异丁基((ch3)2chch2-)，仲丁基((ch3)(ch3ch2)ch-)，叔丁基((ch3)3c-)，正戊基(ch3ch2ch2ch2ch2-)，和新戊基((ch3)3cch2-)。术语“取代的烷基”指的是如下的如本文中定义的烷基，其中烷基链中的一个或多个碳原子(c1碳原子除外)已经任选用杂原子(诸如-o-，-n-，-s-，-s(o)n-(其中n为0至2)，-nr-(其中r为氢或烷基))替换且具有1至5个选自由以下组成的群组的取代基：烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，氧代，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-芳基，-so2-杂芳基，和-nrarb，其中r'和r"可以是相同的或不同的且选自氢，任选取代的烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，芳基，杂芳基，和杂环基。“亚烷基”指的是优选具有1至6个且更优选1至3个碳原子的二价脂肪族烃基，其为直链或支链，且任选间杂有一个或多个选自以下的基团：-o-，-nr10-，-nr10c(o)-，-c(o)nr10-等等。举例而言，这个术语包括亚甲基(-ch2-)，亚乙基(-ch2ch2-)，亚正丙基(-ch2ch2ch2-)，亚异丙基(-ch2ch(ch3)-)，(-c(ch3)2ch2ch2-)，(-c(ch3)2ch2c(o)-)，(-c(ch3)2ch2c(o)nh-)，(-ch(ch3)ch2-)，等等。“取代的亚烷基”指的是有1至3个氢用下文“取代的”的定义中关于碳描述的取代基替换的亚烷基。术语“烷”指的是如本文中定义的烷基和亚烷基。术语“烷基氨基烷基”，“烷基氨基烯基”和“烷基氨基炔基”指的是基团r'nhr"-，其中r'为如本文中定义的烷基且r"为如本文中定义的亚烷基，亚烯基或亚炔基。术语“烷芳基”或“芳烷基”指的是基团-亚烷基-芳基和-取代的亚烷基-芳基，其中亚烷基，取代的亚烷基和芳基在本文中定义。“烷氧基”指的是基团-o-烷基，其中烷基如本文中定义。举例而言，烷氧基包括甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，叔丁氧基，仲丁氧基，正戊氧基，等等。术语“烷氧基”还指的是基团烯基-o-，环烷基-o-，环烯基-o-，和炔基-o-，其中烯基，环烷基，环烯基，和炔基如本文中定义。术语“取代的烷氧基”指的是基团取代的烷基-o-，取代的烯基-o-，取代的环烷基-o-，取代的环烯基-o-，和取代的炔基-o-，其中取代的烷基，取代的烯基，取代的环烷基，取代的环烯基和取代的炔基如本文中定义。术语“烷氧基氨基”指的是基团-nh-烷氧基，其中烷氧基在本文中定义。术语“卤代烷氧基”指的是如下的基团烷基-o-，其中烷基上的一个或多个氢原子已经用卤基取代，而且举例而言包括诸如三氟甲氧基等基团。术语“卤代烷基”指的是如上文描述的取代的烷基，其中烷基上的一个或多个氢原子已经用卤基取代。此类基团的例子包括但不限于氟代烷基，诸如三氟甲基，二氟甲基，三氟乙基等等。术语“烷基烷氧基”指的是基团-亚烷基-o-烷基，亚烷基-o-取代的烷基，取代的亚烷基-o-烷基，和取代的亚烷基-o-取代的烷基，其中烷基，取代的烷基，亚烷基和取代的亚烷基如本文中定义。术语“烷基硫代烷氧基”指的是基团-亚烷基-s-烷基，亚烷基-s-取代的烷基，取代的亚烷基-s-烷基和取代的亚烷基-s-取代的烷基，其中烷基，取代的烷基，亚烷基和取代的亚烷基如本文中定义。“烯基”指的是具有2至6个碳原子和优选2至4个碳原子且具有至少1个和优选1至2个双键不饱和位点的直链或支链烃基。举例而言，这个术语包括联乙烯基，烯丙基，和丁-3-烯-1-基。这个术语内包括顺式和反式异构体或这些异构体的混合物。术语“取代的烯基”指的是具有1至5个取代基或1至3个取代基的如本文中定义的烯基，所述取代基选自烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，氧代，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基和-so2-杂芳基。“炔基”指的是具有2至6个碳原子和优选2至3个碳原子且具有至少1个和优选1至2个三键不饱和位点的直链或支链单价烃基。此类炔基的例子包括乙炔基(-c≡ch)和炔丙基(-ch2c≡ch)。术语“取代的炔基”指的是具有1至5个取代基或1至3个取代基的如本文中定义的炔基，所述取代基选自烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，氧代，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基，和-so2-杂芳基。“炔氧基”指的是基团-o-炔基，其中炔基如本文中定义。举例而言，炔氧基包括乙炔氧基，丙炔氧基，等等。“酰基”指的是基团h-c(o)-，烷基-c(o)-，取代的烷基-c(o)-，烯基-c(o)-，取代的烯基-c(o)-，炔基-c(o)-，取代的炔基-c(o)-，环烷基-c(o)-，取代的环烷基-c(o)-，环烯基-c(o)-，取代的环烯基-c(o)-，芳基-c(o)-，取代的芳基-c(o)-，杂芳基-c(o)-，取代的杂芳基-c(o)-，杂环基-c(o)-，和取代的杂环基-c(o)-，其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。例如，酰基包括“乙酰基”基团ch3c(o)-。“酰基氨基”指的是基团-nr20c(o)烷基，-nr20c(o)取代的烷基，nr20c(o)环烷基，-nr20c(o)取代的环烷基，-nr20c(o)环烯基，-nr20c(o)取代的环烯基，-nr20c(o)烯基，-nr20c(o)取代的烯基，-nr20c(o)炔基，-nr20c(o)取代的炔基，-nr20c(o)芳基，-nr20c(o)取代的芳基，-nr20c(o)杂芳基，-nr20c(o)取代的杂芳基，-nr20c(o)杂环基，和-nr20c(o)取代的杂环基，其中r20为氢或烷基且其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。“氨基羰基”或术语“氨基酰基”指的是基团-c(o)nr21r22，其中r21和r22独立选自由以下组成的群组：氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基且其中r21和r22任选与其所结合的氮连接在一起以形成杂环基或取代的杂环基，且其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。“氨基羰基氨基”指的是基团-nr21c(o)nr22r23，其中r21，r22，和r23独立选自氢，烷基，芳基或环烷基，或其中两个r基团连接以形成杂环基。术语“烷氧基羰基氨基”指的是基团-nrc(o)or，其中每个r独立为氢，烷基，取代的烷基，芳基，杂芳基，或杂环基，其中烷基，取代的烷基，芳基，杂芳基，和杂环基如本文中定义。术语“酰氧基”指的是基团烷基-c(o)o-，取代的烷基-c(o)o-，环烷基-c(o)o-，取代的环烷基-c(o)o-，芳基-c(o)o-，杂芳基-c(o)o-，和杂环基-c(o)o-，其中烷基，取代的烷基，环烷基，取代的环烷基，芳基，杂芳基，和杂环基如本文中定义。“氨基磺酰基”指的是基团-so2nr21r22，其中r21和r22独立选自由以下组成的群组：氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，取代的杂环基且其中r21和r22任选与其所结合的氮连接在一起以形成杂环基或取代的杂环基，且烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基和取代的杂环基如本文中定义。“磺酰基氨基”指的是基团-nr21so2r22，其中r21和r22独立选自由以下组成的群组：氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基且其中r21和r22任选与其所结合的原子连接在一起以形成杂环基或取代的杂环基，且其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基和取代的杂环基如本文中定义。“芳基”或“ar”指的是具有单环(诸如存在于苯基中)或具有多个缩合环的环系统(此类芳香族环系统的例子包括萘基，蒽基和茚满基)的6至18个碳原子的单价芳香族碳环基，所述缩合环可以是或不是芳香族的，前提是附着点经由芳香环的原子。举例而言，这个术语包括苯基和萘基。除非另外受到芳基取代基的定义约束，此类芳基可以任选用1至5个取代基或1至3个取代基取代，所述取代基选自酰氧基，羟基，硫醇基，酰基，烷基，烷氧基，烯基，炔基，环烷基，环烯基，取代的烷基，取代的烷氧基，取代的烯基，取代的炔基，取代的环烷基，取代的环烯基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，酰基氨基，烷芳基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，羧基烷基，氰基，卤素，硝基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，氨基酰氧基，氧酰基氨基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基，-so2-杂芳基和三卤代甲基。“芳氧基”指的是基团-o-芳基，其中芳基如本文中定义，举例而言，包括苯氧基，萘氧基，等等，包括也如本文中定义的任选取代的芳基。“氨基”指的是基团-nh2。术语“取代的氨基”指的是基团-nrr，其中每个r独立选自由以下组成的群组：氢，烷基，取代的烷基，环烷基，取代的环烷基，烯基，取代的烯基，环烯基，取代的环烯基，炔基，取代的炔基，芳基，杂芳基，和杂环基，前提是至少一个r不是氢。术语“叠氮基”指的是基团-n3。“羧基”或“羧酸盐”指的是-co2h或其盐。“羧基酯”或术语“羧基烷基”指的是基团-c(o)o-烷基，-c(o)o-取代的烷基，-c(o)o-烯基，-c(o)o-取代的烯基，-c(o)o-炔基，-c(o)o-取代的炔基，-c(o)o-芳基，-c(o)o-取代的芳基，-c(o)o-环烷基，-c(o)o-取代的环烷基，-c(o)o-环烯基，-c(o)o-取代的环烯基，-c(o)o-杂芳基，-c(o)o-取代的杂芳基，-c(o)o-杂环基，和-c(o)o-取代的杂环基，其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。“(羧基酯)氧基”或“碳酸酯”指的是基团-o-c(o)o-烷基，-o-c(o)o-取代的烷基，-o-c(o)o-烯基，-o-c(o)o-取代的烯基，-o-c(o)o-炔基，-o-c(o)o-取代的炔基，-o-c(o)o-芳基，-o-c(o)o-取代的芳基，-o-c(o)o-环烷基，-o-c(o)o-取代的环烷基，-o-c(o)o-环烯基，-o-c(o)o-取代的环烯基，-o-c(o)o-杂芳基，-o-c(o)o-取代的杂芳基，-o-c(o)o-杂环基，和-o-c(o)o-取代的杂环基，其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。“氰基”或“腈”指的是基团-cn。“环烷基”指的是具有单环或包括稠合，桥连，和螺式环系统的多环的3至10个碳原子的环状烷基。举例而言，合适的环烷基的例子包括金刚烷基，环丙基，环丁基，环戊基，环辛基等等。举例而言，此类环烷基包括单环结构，诸如环丙基，环丁基，环戊基，环辛基，等等；或多环结构，诸如金刚烷基，等等。术语“取代的环烷基”指的是具有1至5个取代基或1至3个取代基的环烷基，所述取代基选自烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，氧代，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基和-so2-杂芳基。“环烯基”指的是具有单环或多环且具有至少一个双键和优选1至2个双键的3至10个碳原子的非芳香族环状烷基。术语“取代的环烯基”指的是具有1至5个取代基或1至3个取代基的环烯基，所述取代基选自烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，酮基，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基和-so2-杂芳基。“环炔基”指的是具有单环或多环且具有至少一个三键的5至10个碳原子的非芳香族环烷基。“环烷氧基”指的是-o-环烷基。“环烯氧基”指的是-o-环烯基。“卤代”或“卤素”指的是氟代，氯代，溴代，和碘代。“羟基”指的是基团-oh。“杂芳基”指的是在环内具有1至15个碳原子(诸如1至10个碳原子)和1至10个选自由氧，氮，和硫组成的群组的杂原子的芳香族基团。此类杂芳基可以具有单环(诸如吡啶基，咪唑基或呋喃基)或环系统中的多个缩合环(例如，在诸如吲哚嗪基，喹啉基，苯并呋喃，苯并咪唑基或苯并噻吩基的基团中)，其中环系统内的至少一个环是芳香族的。为了满足价的要求，此类杂芳基环中的任何杂原子可以与或不与h或取代基基团，例如烷基基团或本文中描述的其它取代基成键。在某些实施方案中，杂芳基的氮和/或硫环原子任选被氧化以提供n-氧化物(n→o)，亚磺酰基，或磺酰基模块。举例而言，这个术语包括吡啶基，吡咯基，吲哚基，苯硫基，和呋喃基。除非另外受到杂芳基取代基的定义约束，此类杂芳基可以任选用1至5个取代基或1至3个取代基取代，所述取代基选自酰氧基，羟基，硫醇基，酰基，烷基，烷氧基，烯基，炔基，环烷基，环烯基，取代的烷基，取代的烷氧基，取代的烯基，取代的炔基，取代的环烷基，取代的环烯基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，酰基氨基，烷芳基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，羧基烷基，氰基，卤素，硝基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，氨基酰氧基，氧酰基氨基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基和-so2-杂芳基，和三卤代甲基。术语“杂芳烷基”指的是基团-亚烷基-杂芳基，其中亚烷基和杂芳基定义于本文中。举例而言，这个术语包括吡啶基甲基，吡啶基乙基，吲哚基甲基，等等。“杂芳氧基”指的是-o-杂芳基。“杂环”，“杂环烷基”，和“杂环基”指的是具有单环或多个缩合环(包括稠合，桥连和螺式环系统)且具有3至20个环原子，包括1至10个杂原子的饱和或不饱和基团。这些环原子选自氮，硫，或氧，其中在稠合环系统中，一个或多个环可以是环烷基，芳基，或杂芳基，前提是附着点经由非芳香环。在某些实施方案中，杂环基的氮和/或硫原子任选被氧化以提供n-氧化物，-s(o)-，或-so2-模块。为了满足价的要求，此类杂环环中的任何杂原子可以与或不与h或一个或多个取代基基团，例如烷基基团或本文中描述的其它取代基成键。杂环和杂芳基的例子包括但不限于氮杂环丁烷，吡咯，咪唑，吡唑，吡啶，吡嗪，嘧啶，哒嗪，吲哚嗪，异吲哚，吲哚，二氢吲哚，吲唑，嘌呤，喹嗪，异喹啉，喹啉，酞嗪，萘基吡啶，喹喔啉，喹唑啉，噌啉，蝶啶，咔唑，咔啉，菲啶，吖啶，菲咯啉，异噻唑，吩嗪，异噁唑，吩噁嗪，吩噻嗪，咪唑烷，咪唑啉，哌啶，哌嗪，吲哚啉，邻苯二甲酰亚胺，1,2,3,4-四氢异喹啉，4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩，噻唑，噻唑烷，噻吩，苯并[b]噻吩，吗啉基，硫吗啉基(也称作噻吗啉基)，1,1-二氧代硫吗啉基，哌啶基，吡咯烷，四氢呋喃基，等等。除非另外受到杂环取代基的定义约束，此类杂环基可以任选用1至5个或1至3个取代基取代，所述取代基选自烷氧基，取代的烷氧基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基，取代的氨基，氨基酰基，氨基酰氧基，氧基氨基酰基，叠氮基，氰基，卤素，羟基，氧代，硫酮基，羧基，羧基烷基，硫代芳氧基，硫代杂芳氧基，硫代杂环氧基，硫醇基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，芳氧基，杂芳基，杂芳氧基，杂环基，杂环氧基，羟基氨基，烷氧基氨基，硝基，-so-烷基，-so-取代的烷基，-so-芳基，-so-杂芳基，-so2-烷基，-so2-取代的烷基，-so2-芳基，-so2-杂芳基，和稠合杂环。“杂环氧基”指的是基团-o-杂环基。术语“杂环硫基”指的是基团杂环-s-。术语“亚杂环基”指的是由如本文中定义的杂环形成的双根基团。术语“羟基氨基”指的是基团-nhoh。“硝基”指的是基团-no2。“氧代”指的是原子(＝o)。“磺酰基”指的是基团so2-烷基，so2-取代的烷基，so2-烯基，so2-取代的烯基，so2-环烷基，so2-取代的环烷基，so2-环烯基，so2-取代的环烯基，so2-芳基，so2-取代的芳基，so2-杂芳基，so2-取代的杂芳基，so2-杂环基，和so2-取代的杂环基，其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。举例而言，磺酰基包括甲基-so2-，苯基-so2-，和4-甲基苯基-so2-。“磺酰氧基”指的是基团-oso2-烷基，oso2-取代的烷基，oso2-烯基，oso2-取代的烯基，oso2-环烷基，oso2-取代的环烷基，oso2-环烯基，oso2-取代的环烯基，oso2-芳基，oso2-取代的芳基，oso2-杂芳基，oso2-取代的杂芳基，oso2-杂环基，和oso2取代的杂环基，其中烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，杂环基，和取代的杂环基如本文中定义。术语“氨基羰氧基”指的是基团-oc(o)nrr，其中每个r独立为氢，烷基，取代的烷基，芳基，杂芳基，或杂环基，其中烷基，取代的烷基，芳基，杂芳基和杂环基如本文中定义。“硫醇基”指的是基团-sh。“硫代”或术语“硫酮基”指的是原子(＝s)。“烷硫基”或术语“硫代烷氧基”指的是基团-s-烷基，其中烷基如本文中定义。在某些实施方案中，硫可以被氧化成-s(o)-。亚砜可以作为一种或多种立体异构体存在。术语“取代的硫代烷氧基”指的是基团-s-取代的烷基。术语“硫代芳氧基”指的是基团芳基-s-，其中芳基如本文中定义，包括也在本文中定义的任选取代的芳基。术语“硫代杂芳氧基”指的是基团杂芳基-s-，其中杂芳基如本文中定义，包括也如本文中定义的任选取代的芳基。术语“硫代杂环氧基”指的是基团杂环基-s-，其中杂环基如本文中定义，包括也如本文中定义的任选取代的杂环基。在本文中的公开内容之外，术语“取代的”当用于修饰指定基团或根时，也可以意味着指定基团或根的一个或多个氢原子每个彼此独立地用如下文定义的相同或不同取代基替换。在关于本文中的个别术语公开的基团之外，除非另有规定，用于取代指定基团或根中的饱和碳原子上的一个或多个氢(单个碳上的任两个氢可以用＝o，＝nr70，＝n-or70，＝n2或＝s替换)的取代基为-r60，卤代，＝o，-or70，-sr70，-nr80r80，三卤代甲基，-cn，-ocn，-scn，-no，-no2，＝n2，-n3，-so2r70，-so2o-m+，-so2or70，-oso2r70，-oso2o-m+，-oso2or70，-p(o)(o-)2(m+)2，-p(o)(or70)o-m+，-p(o)(or70)2，-c(o)r70，-c(s)r70，-c(nr70)r70，-c(o)o-m+，-c(o)or70，-c(s)or70，-c(o)nr80r80，-c(nr70)nr80r80，-oc(o)r70，-oc(s)r70，-oc(o)o-m+，-oc(o)or70，-oc(s)or70，-nr70c(o)r70，-nr70c(s)r70，-nr70co2-m+，-nr70co2r70，-nr70c(s)or70，-nr70c(o)nr80r80，-nr70c(nr70)r70和-nr70c(nr70)nr80r80，其中r60选自由以下组成的群组：任选取代的烷基，环烷基，杂烷基，杂环烷基烷基，环烷基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，和杂芳基烷基，每个r70独立是氢或r60；每个r80独立是r70，或者，两个r80’连同其所键结的氮原子一起形成5，6或7元杂环烷基，所述杂环烷基可以任选包括1至4个相同或不同的选自由o，n和s组成的群组的额外杂原子，其中n可以具有-h或c1-c3烷基取代；且每个m+是具有净的单正电荷的反离子。例如，每个m+可以独立是碱金属离子，诸如k+，na+，li+；铵离子，诸如+n(r60)4；或碱土金属离子，诸如[ca2+]0.5，[mg2+]0.5，或[ba2+]0.5(下标0.5意味着此类二价碱土金属离子的一个反离子可以是本发明的化合物的离子化形式且另一个是典型的反离子诸如氯离子，或本文中公开的两个离子化化合物可以充当此类二价碱土金属离子的反离子，或本发明的双重离子化化合物可以充当此类二价碱土金属离子的反离子)。作为特定例子，-nr80r80意图包括-nh2，-nh-烷基，n-吡咯烷基，n-哌嗪基，4n-甲基-哌嗪-1-基和n-吗啉基。在本文中的公开内容之外，除非另有规定，“取代的”烯，炔，芳基和杂芳基基团中的不饱和碳原子上的氢的取代基是-r60，卤代，-o-m+，-or70，-sr70，-s-m+，-nr80r80，三卤代甲基，-cf3，-cn，-ocn，-scn，-no，-no2，-n3，-so2r70，-so3-m+，-so3r70，-oso2r70，-oso3-m+，-oso3r70，-po3-2(m+)2，-p(o)(or70)o-m+，-p(o)(or70)2，-c(o)r70，-c(s)r70，-c(nr70)r70，-co2-m+，-co2r70，-c(s)or70，-c(o)nr80r80，-c(nr70)nr80r80，-oc(o)r70，-oc(s)r70，-oco2-m+，-oco2r70，-oc(s)or70，-nr70c(o)r70，-nr70c(s)r70，-nr70co2-m+，-nr70co2r70，-nr70c(s)or70，-nr70c(o)nr80r80，-nr70c(nr70)r70和-nr70c(nr70)nr80r80，其中r60，r70，r80和m+如先前定义，前提是在取代的烯或炔的情况中，取代基不是-o-m+，-or70，-sr70，或-s-m+。在关于本文中的个别术语公开的基团之外，除非另有规定，“取代的”杂烷基和环杂烷基中的氮原子上的氢的取代基是-r60，-o-m+，-or70，-sr70，-s-m+，-nr80r80，三卤代甲基，-cf3，-cn，-no，-no2，-s(o)2r70，-s(o)2o-m+，-s(o)2or70，-os(o)2r70，-os(o)2o-m+，-os(o)2or70，-p(o)(o-)2(m+)2，-p(o)(or70)o-m+，-p(o)(or70)(or70)，-c(o)r70，-c(s)r70，-c(nr70)r70，-c(o)or70，-c(s)or70，-c(o)nr80r80，-c(nr70)nr80r80，-oc(o)r70，-oc(s)r70，-oc(o)or70，-oc(s)or70，-nr70c(o)r70，-nr70c(s)r70，-nr70c(o)or70，-nr70c(s)or70，-nr70c(o)nr80r80，-nr70c(nr70)r70和-nr70c(nr70)nr80r80，其中r60，r70，r80和m+如先前定义。在本文中的公开内容之外，在某个实施方案中，取代的基团具有1，2，3，或4个取代基，1，2，或3个取代基，1或2个取代基，或1个取代基。应了解，在上文定义的所有取代的基团中，通过定义本身具有进一步取代基的取代基而得到的聚合物(例如，取代的芳基具有取代的芳基作为取代基，这个取代基本身用取代的芳基取代，而这个取代的芳基进一步用取代的芳基取代，等)不意图包括在本文中。在此类情况中，此类取代的最大数目是三个。例如，本文中具体涵盖的取代的芳基的系列取代限于取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。除非另有指示，本文中未明确定义的取代基的命名通过叫出官能团的末端部分，接下来叫出接近附着点的相邻官能团来达成。例如，取代基“芳基烷氧基羰基”指的是基团(芳基)-(烷基)-o-c(o)-。关于本文中公开的含有一个或多个取代基的任何基团，应了解，当然，此类基团不含空间上不可实现和/或合成上不可行的任何取代或取代样式。另外，主题化合物包括由这些化合物的取代而产生的所有立体化学异构体。术语“药学可接受盐”意味着对于施用于患者，诸如哺乳动物可接受的盐(与对于给定的剂量方案具有可接受的哺乳动物安全性的反离子的盐)。此类盐可以衍生自药学可接受的无机或有机碱和药学可接受的无机或有机酸。“药学可接受盐”指的是化合物的药学可接受盐，所述盐衍生自本领域公知的各种有机和无机反离子，而且仅举例而言，包括钠，钾，钙，镁，铵，四烷基铵，等等；而且当分子含有碱性官能团时，包括有机或无机酸的盐，诸如盐酸或氢氯酸盐，氢溴酸盐，甲酸盐，酒石酸盐，苯磺酸盐，甲磺酸盐，乙酸盐，马来酸盐，草酸盐，等等。术语“其盐”意味着当酸的质子用阳离子诸如金属阳离子或有机阳离子等等替换时形成的化合物。在适用的情况下，盐是药学可接受盐，虽然这对于不意图施用于患者的中间化合物的盐不是必需的。举例而言，本发明化合物的盐包括如下的那些盐，其中化合物被无机或有机酸质子化以形成阳离子，其中无机或有机酸的共轭碱作为盐的阴离子成分。“溶剂合物”指的是通过溶剂分子与溶质的分子或离子组合而形成的复合物。溶剂可以是有机化合物，无机化合物，或二者的混合物。溶剂的一些例子包括但不限于甲醇，n,n-二甲基甲酰胺，四氢呋喃，二甲亚砜，和水。当溶剂是水时，所形成的溶剂合物是水合物。“立体异构体”指的是在空间中具有相同的原子连接但不同的原子排列的化合物。立体异构体包括顺-反异构体，e和z异构体，对映异构体，和非对映异构体。“互变异构体”指的是仅在原子的电子键结和/或质子的位置方面不同的分子的变换形式，诸如烯醇-酮和亚胺-烯胺互变异构体；或含有-n＝c(h)-nh-环原子排列的杂芳基的互变异构形式，诸如吡唑，咪唑，苯并咪唑，三唑，和四唑。本领域普通技术人员会认识到其它互变异构环原子排列是可能的。应了解，术语“或其盐或溶剂合物或立体异构体”意图包括盐，溶剂合物和立体异构体的所有编排，诸如主题化合物的立体异构体的药学可接受盐的溶剂合物。“药学有效量”和“治疗有效量”指的是足以治疗指定的病症或疾病或其一种或多种症状和/或预防疾病或病症发生的化合物的量。提到致瘤性增殖性病症时，药学或治疗有效量包含足以引起肿瘤缩小或降低肿瘤生长速率等的量。“患者”指的是人类和非人类受试者，尤其是哺乳动物受试者。如本文中使用的，术语“治疗”或“处理”意味着对患者，诸如哺乳动物(特别是人类)中的疾病或医学状况的治疗或处理，包括：(a)预防疾病或医学状况发生，诸如对受试者的预防性治疗；(b)改善疾病或医学状况，诸如消除患者中的疾病或医学状况或引起患者中的疾病或医学状况消退；(c)阻抑疾病或医学状况，例如通过减缓或阻滞患者中的疾病或医学状况的发展；或(d)减轻患者中的疾病或医学状况的症状。术语“多肽”，“肽”，和“蛋白质”在本文中可互换使用，指的是任何长度的氨基酸的聚合形式。除非另有特别指示，“多肽”，“肽”，和“蛋白质”可以包括遗传编码的和非编码的氨基酸，化学或生物化学修饰或衍生的氨基酸，和具有经修饰的肽骨架的多肽。这个术语包括融合蛋白，包括但不限于具有异源氨基酸序列的融合蛋白，具有异源和同源前导序列的融合体，含有至少一个n端甲硫氨酸残基(例如，以推动在重组细菌宿主细胞中产生)的蛋白质；带有免疫学标签的蛋白质；等等。“天然氨基酸序列”或“亲本氨基酸序列”在本文中可互换使用，指的是在进行修饰以包括修饰的氨基酸残基之前多肽的氨基酸序列。术语“氨基酸类似物”，“非天然氨基酸”，等等可以互换使用，而且包括在结构和/或整体形状方面与天然存在的蛋白质中通常找到的一种或多种氨基酸(例如ala或a，cys或c，asp或d，glu或e，phe或f，gly或g，his或h，ile或i，lys或k，leu或l，met或m，asn或n，pro或p，gln或q，arg或r，ser或s，thr或t，val或v，trp或w，tyr或y)相似的氨基酸样化合物。氨基酸类似物还包括具有修饰的侧链或骨架的天然氨基酸。氨基酸类似物还包括与天然存在的d型具有相同立体化学的氨基酸类似物，以及l型的氨基酸类似物。在一些情况中，氨基酸类似物分享骨架结构和/或一种或多种天然氨基酸的侧链结构，但是差异在于分子中的一个或多个修饰的基团。此类修饰可以包括但不限于原子(诸如n)取代相关原子(诸如s)，添加基团(诸如甲基或羟基，等)或原子(诸如cl或br，等)，删除基团，取代共价键(单键取代双键，等)，或其组合。例如，氨基酸类似物可以包括α-羟基酸和α-氨基酸，等等。术语“氨基酸侧链”或“氨基酸的侧链”诸如此类可以用于指附着至氨基酸残基的α-碳的取代基，包括天然氨基酸，非天然氨基酸，和氨基酸类似物。氨基酸侧链还可以包括本文中描述的经修饰的氨基酸和/或缀合物的上下文中描述的氨基酸侧链。术语“碳水化合物”诸如此类可用于指单糖，二糖，寡糖，和多糖的单体单元和/或聚合物。术语糖可用于指较小的碳水化合物，诸如单糖，二糖。术语“碳水化合物衍生物”包括如下的化合物，其中感兴趣碳水化合物的一个或多个官能团是取代的(用任何常规取代基替换)，修饰的(使用任何常规化学转变成另一种基团)或缺失的(例如消除或用h替换)。多种碳水化合物和碳水化合物衍生物是可得的，而且可适应用于主题化合物和缀合物。术语“抗体”以最广义使用，而且包括单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)，多克隆抗体，和多特异性抗体(例如双特异性抗体)，人源化抗体，单链抗体，嵌合抗体，抗体片段(例如fab片段)，等等。抗体能够结合靶抗原(janeway,c.,travers,p.,walport,m.,shlomchik(2001)immunobiology,5thed.,garlandpublishing,newyork)。靶抗原可以具有一个或多个结合位点，也称作表位，其受到由抗体的一个或多个可变区形成的互补决定区(cdr)识别。术语“天然抗体”指的是如下抗体，其中抗体的重链和轻链已经由多细胞生物体的免疫系统生成并配对。脾，淋巴结，骨髓和血清是产生天然抗体的组织的例子。例如，由自经过抗原免疫的第一动物分离的抗体产生细胞产生的抗体是天然抗体。术语“人源化抗体”或“人源化免疫球蛋白”指的是所含有的一个或多个氨基酸(例如在框架区，恒定区或cdr中)已经用来自人抗体的处于对应位置的氨基酸替代的非人(例如小鼠或家兔)抗体。一般而言，人源化抗体在人类宿主中产生与相同抗体的非人源化型式相比减小的免疫反应。抗体可以使用本领域已知的多种技术进行人源化，包括例如cdr嫁接(ep239,400；pct公开文本wo91/09967；美国专利no.5,225,539；no.5,530,101；和no.5,585,089)，镶饰或重建表面(ep592,106；ep519,596；padlan,molecularimmunology28(4/5):489-498(1991)；studnicka等,proteinengineering7(6):805-814(1994)；roguska等,pnas91:969-973(1994))，和链改组(美国专利no.5,565,332)。在某些实施方案中，框架替代是通过对cdr和框架残基的相互作用进行建模以鉴定对于抗原结合重要的框架残基及进行序列比较以鉴定在特定位置处的非常见框架残基来鉴定的(参见例如美国专利no.5,585,089；riechmann等,nature332:323(1988))。可用于本发明的人源化抗体的其它方法描述于美国专利no.5,750,078；no.5,502,167；no.5,705,154；no.5,770,403；no.5,698,417；no.5,693,493；no.5,558,864；no.4,935,496；和no.4,816,567，和pct公开文本wo98/45331和wo98/45332。在特定实施方案中，可以依照us20040086979和us20050033031中列出的方法人源化主题家兔抗体。因而，可以使用本领域公知的方法人源化上文所述抗体。术语“嵌合抗体”指的是轻链和重链基因已经通常通过遗传工程改造从属于不同物种的抗体可变区和恒定区基因来构建的抗体。例如，可以将来自小鼠单克隆抗体的基因的可变区段连接至人恒定区段，诸如伽马1和伽马3。治疗性嵌合抗体的一个例子是由来自小鼠抗体的可变域或抗原结合域和来自人抗体的恒定域或效应器域构成的杂合蛋白，虽然可以使用来自其它哺乳动物物种的域。免疫球蛋白多肽的免疫球蛋白轻链或重链可变区由间插3个高变区(也称为“互补决定区”或“cdr”)的框架区(fr)构成。框架区和cdr的界限已被界定(参见“sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,”e.kabat等,u.s.departmentofhealthandhumanservices,1991)。作为组成轻链和重链的组合框架区的抗体的框架区用于定位和对齐(align)cdr。cdr主要负责对抗原的表位的结合。贯穿本公开内容，免疫球蛋白重链和免疫球蛋白轻链中的残基的编号如kabat等,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,5thed.publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md.(1991)所述(通过援引明确收入本文)。“亲本ig多肽”是包含缺乏本文所述醛标记的恒定区的氨基酸序列的多肽。亲本多肽可包含天然序列恒定区，或可包含具有预先存在的氨基酸序列修饰(诸如添加，删除和/或替代)的恒定区。在ig多肽的背景中，术语“恒定区”在本领域被良好理解，是指ig重链或ig轻链的c端区域。ig重链恒定区包括ch1，ch2，和ch3结构域(和ch4结构域，其中重链是μ或ε重链)。在天然ig重链中，ch1、ch2、ch3(以及，如果存在，ch4)结构域正好始于重链可变(vh)区之后(c端)，并且各自在长度上为约100个氨基酸至约130个氨基酸。在天然ig轻链中，恒定区正好始于轻链可变(vl)区之后(c端)，并且在长度上为约100个氨基酸至120个氨基酸。如本文中使用的，术语“cdr”或“互补决定区”意图表示在重和轻链多肽二者的可变区中找到的非连续抗原结合位点。cdr已经记载于kabatetal.,j.biol.chem.252:6609-6616(1977)；kabatetal.,u.s.dept.ofhealthandhumanservices,“sequencesofproteinsofimmunologicalinterest”(1991)；chothiaetal.,j.mol.biol.196:901-917(1987)；和maccallumetal.,j.mol.biol.262:732-745(1996)，其中当彼此比较时定义包括氨基酸残基交叠或子集。无论如何，应用任一定义来指抗体或嫁接抗体或其变体的cdr意图在本文中定义和使用的术语的范围内。下文表1中作为比较列出了涵盖上文引用的每一篇参考文献定义的cdr的氨基酸残基。表1：cdr定义1残基编号遵循kabat等,见上文的命名法2残基编号遵循chothia等,见上文的命名法3残基编号遵循maccallum等,见上文的命名法如提到多肽，肽或蛋白质的氨基酸序列时使用的，“可遗传编码的”意味着氨基酸序列由能够通过编码氨基酸序列的核酸的转录和翻译而产生的氨基酸残基构成，其中转录和/或翻译可以在细胞中或无细胞体外转录/翻译系统中发生。术语“控制序列”指的是推动可操作连接的编码序列在特定表达系统(例如哺乳动物细胞，细菌细胞，无细胞合成，等)中表达的dna序列。例如，适合于原核生物系统的控制序列包括启动子，任选的操纵基因序列，和核糖体结合位点。真核细胞系统可以利用启动子，多腺苷酸化信号，和增强子。核酸当置于与另一核酸序列的功能性关系时是“可操作连接的”。例如，如果前序列或分泌前导的dna表达成参与多肽分泌的前蛋白，那么该前序列或分泌前导序列的dna是可操作连接至该多肽的dna的；如果启动子或增强子影响编码序列的转录，那么该启动子或增强子是可操作连接至该序列的；或者，如果核糖体结合位点的定位推动翻译起始，那么该核糖体结合位点是可操作连接至编码序列的。一般而言，“可操作连接”意味着所连接的dna序列是相连的，而且在分泌前导的情况中，是相连且在阅读框中的。连接通过接合或经由扩增反应来实现。可以依照常规实践使用合成寡核苷酸衔接头或接头来连接序列。如本文中使用的，术语“表达盒”指的是可以插入核酸中(例如通过使用与接合入感兴趣构建体中相容的限制性位点或通过同源重组入感兴趣构建体或宿主细胞基因组中)的核酸(通常是dna)区段。一般而言，核酸区段包含编码感兴趣多肽的多核苷酸，而且盒和限制性位点设计成推动将盒插入正确的阅读框中进行转录和翻译。表达盒还可以包含推动在宿主细胞中表达编码感兴趣多肽的多核苷酸的元件。这些元件可以包括但不限于启动子，最小限度启动子，增强子，响应元件，终止子序列，聚腺苷酸化序列，等等。如本文中使用的，术语“分离的”意图描述处于与化合物天然存在的环境不同的环境中的感兴趣化合物。“分离的”意图包括在实质性富集了感兴趣化合物和/或感兴趣化合物得到部分或实质性纯化的样品内的化合物。如本文中使用的，术语“实质性纯化”指的是自其天然环境移出且至少60％不含，至少75％不含，至少80％不含，至少85％不含，至少90％不含，至少95％不含，至少98％不含，或超过98％不含与其天然相关的其它成分的化合物。术语“生理条件”意图涵盖与活细胞相容的那些条件，例如与活细胞相容的温度，ph，盐度，等主要含水的条件。“反应性配偶”意味着与另一反应性配偶特异性反应以产生反应产物的分子或分子模块。例示性的反应性配偶包括硫酸酯酶基序的半胱氨酸或丝氨酸和甲酰甘氨酸生成酶(fge)，它们反应形成含有甲酰甘氨酸(fgly)替代基序中的半胱氨酸或丝氨酸的转化醛标签的反应产物。其它例示性的反应性配偶包括转化醛标签(例如反应性醛基团)的fgly残基的醛和“醛反应性反应性配偶”，该醛反应性反应性配偶包含醛反应性基团和感兴趣部分，且反应形成反应产物带有修饰的醛标签的多肽，其中感兴趣模块经由修饰的fgly残基缀合至修饰的多肽。“n端”指的是多肽中具有游离胺基团的末端氨基酸残基，在非n端氨基酸残基中的胺基团通常形成多肽的共价骨架的一部分。“c端”指的是多肽中具有游离羧基基团的末端氨基酸残基，在非c端氨基酸残基中的羧基基团通常形成多肽的共价骨架的一部分。如提到多肽或多肽的氨基酸序列时使用的，“内部位点”意味着多肽中不在n端或c端的区域。在进一步描述本发明之前，应了解，本发明并不限于所描述的特定实施方案，所述实施方案当然可以有变化。还应了解，本文中使用的术语仅仅出于描述特定实施方案的目的，并不意图是限制性的，因为本发明的范围会仅受所附权利要求书的限制。在提供数值的范围的情况下，应了解，除非上下文另有明确规定，本发明内涵盖介于该范围的上限和下限之间相隔下限单位十分之一的每个居间值和该规定范围内的任何其它规定值或居间值。这些较小范围的上限和下限可以独立包括在较小范围中，而且也涵盖于本发明内，服从于在规定范围内任何特定排除的界限。在规定范围包括两个界限之一或二者的情况下，排除那些所包括的界限中的任一或两者的范围也包括于本发明中。应了解，为了清楚起见在分开的实施方案的上下文中描述的本发明的某些特征也可以在单个实施方案中组合提供。反之，为简便起见在单个实施方案的上下文中描述的本发明的各种特征也可以分开或以任何合适的子组合提供。本发明具体涵盖且本文中公开了属于本发明的实施方案的所有组合，就像个别且明确地公开每个和每一个组合一样，达到所述组合涵盖主题的程度，例如，作为稳定化合物的化合物(即，可以生成，分离，表征，及测试生物学活性的化合物)。另外，本发明也具体涵盖且本文中公开了各种实施方案及其要素(例如描述此类变量的实施方案中列出的化学基团的要素)的所有子组合，就像本文中个别且明确地公开每个和每一个此类子组合一样。除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。虽然也可以使用与本文中描述的方法和材料类似或等同的任何方法和材料来实施或测试本发明，但是现在描述优选的方法和材料。通过援引将本文中提到的所有出版物收入本文以披露和记载与所引用的出版物有关的方法和/或材料。必须注意，除非上下文另有明确规定，如本文和所附权利要求书中使用的单数形式“一个”，“一种”，和“所述/该”包括复数指示物。应进一步注意，权利要求书可以撰写成排除任何任选要素。这样的话，这个陈述意图充当与列举权利要求的要素或使用“负向”限制相结合来使用诸如“只”，“仅”等排他性术语的在先基础。应了解，为清楚起见在分开的实施方案的上下文中描述的本发明的某些特征也可以在单个实施方案中组合提供。反之，为简便起见在单个实施方案的上下文中描述的本发明的各种特征也可以分开或以任何合适的子组合提供。本文中讨论的出版物仅仅因为它们在本申请的提交日之前公开而提供。本文中的任何内容都不应解释为承认本发明依据在先发明没有先于所述出版物的资格。而且，所提供的出版物的日期可能不同于实际的出版日期，这可能需要独立确认。详述本公开内容提供了抗cd22抗体-美登木素缀合物结构。本公开内容还涵盖此类缀合物的生产方法以及使用方法。在以下章节中更为详细地描述每一种的实施方案。抗体-药物缀合物本公开内容提供了缀合物，例如抗体-药物缀合物。“缀合物”意味着第一模块(例如抗体)与第二模块(例如药物)稳定联合。例如，美登木素缀合物包括与另一个模块(例如抗体)稳定联合的美登木素(例如美登木素活性剂模块)。“稳定联合”意味着在标准条件下一个模块结合至另一个模块或结构。在某些实施方案中，第一和第二模块经由一个或多个共价键彼此结合。在某些实施方案中，缀合物是多肽缀合物，其包括缀合至第二模块的多肽。在某些实施方案中，缀合至多肽的模块可以是多种感兴趣模块任一，诸如但不限于可检测标记物，药物，水溶性聚合物，或用于将多肽固定化至膜或表面的模块。在某些实施方案中，缀合物是美登木素缀合物，其中多肽缀合至美登木素或美登木素活性剂模块。“美登木素”，“美登木素模块”，“美登木素活性剂模块”和“美登木素生物碱”指美登木素和其类似物和衍生物，和药学活性美登木素模块和/或其部分。缀合至多肽的美登木素可以是多种美登木素生物碱模块任一诸如，但不限于美登木素和其类似物和衍生物，如本文中描述的。感兴趣模块可以在多肽的任何期望位点处缀合至多肽。如此，例如，本公开内容提供了如下的经修饰的多肽，其具有在多肽的c端或c端附近的位点处缀合的模块。其它例子包括如下的经修饰的多肽，其具有在多肽的n端或n端附近的位置处缀合的模块。例子还包括如下的经修饰的多肽，其具有在多肽的c端和n端之间的位置处(例如在多肽的内部位点处)缀合的模块。在经修饰的多肽缀合至两个或更多个模块的情况下，上述的组合也是可能的。在某些实施方案中，本公开文本的缀合物包括在氨基酸残基的α-碳处缀合至多肽的氨基酸残基的美登木素。换言之，美登木素缀合物包括如下多肽，其中多肽中的一个或多个氨基酸残基的侧链已经修饰成附着至美登木素(例如经由接头附着至美登木素，如本文中描述的)。例如，美登木素缀合物包括如下多肽，其中多肽中的一个或多个氨基酸残基的α-碳已经修饰成附着至美登木素(例如经由接头附着至美登木素，如本文中描述的)。本公开内容的实施方案包括如下的缀合物，其中多肽缀合至一个或多个模块，诸如2个模块，3个模块，4个模块，5个模块，6个模块，7个模块，8个模块，9个模块，或10个或更多个模块。模块可以在多肽中的一个或多个位点处缀合至多肽。例如，一个或多个模块可以缀合至多肽的单个氨基酸残基。在一些情况中，一个模块缀合至多肽的一个氨基酸残基。在其它实施方案中，两个模块可以缀合至多肽的同一氨基酸残基。在其它实施方案中，第一模块缀合至多肽的第一氨基酸残基且第二模块缀合至多肽的第二氨基酸残基。例如，在多肽在第一氨基酸残基处缀合至第一模块且在第二氨基酸残基处缀合至两个其它模块的情况下，上述的组合也是可能的。其它组合也是可能的，诸如但不限于在第一氨基酸残基处缀合至第一和第二模块且在第二氨基酸残基处缀合至第三和第四模块的多肽，等。多肽中缀合至一个或多个模块的一个或多个氨基酸残基可以是天然存在氨基酸，非天然氨基酸，或其组合。例如，缀合物可以包括缀合至多肽的天然存在氨基酸残基的模块。在其它情况中，缀合物可以包括缀合至多肽的非天然氨基酸残基的模块。如上所述，一个或多个模块可以在单个天然或非天然氨基酸残基处缀合至多肽。如本文中描述的，多肽中的一个或多个天然或非天然氨基酸残基可以缀合至一个或多个模块。例如，多肽中的两个(或更多个)氨基酸残基(例如天然或非天然氨基酸残基)可以每个缀合至一个或两个模块，使得多肽中的多个位点是经过修饰的。如本文中描述的，多肽可缀合至一个或多个模块。在某些实施方案中，感兴趣模块是化学实体，诸如药物或可检测标记物。例如，药物(例如美登木素)可缀合至多肽，或在其它实施方案中，可检测标记物可缀合至多肽。如此，例如，本公开内容的实施方案包括但不限于下述：一个多肽和一个药物的缀合物；一个多肽和一个可检测标记物的缀合物；两个或更多个药物和一个多肽的缀合物；两个或更多个可检测标记物和一个多肽的缀合物；等等。在某些实施方案中，多肽和感兴趣模块经由偶联模块而缀合。例如，多肽和感兴趣模块可以每个结合(例如共价键结)至偶联模块，如此经由偶联模块将多肽和感兴趣模块(例如药物，诸如美登木素)间接地结合在一起。在一些情况中，偶联模块包括肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吲哚基化合物，或肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吲哚基化合物的衍生物。例如，用于经由肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吲哚基偶联模块将感兴趣模块(例如美登木素)偶联至多肽的一种通用方案显示于下文通用反应方案中。肼基-吲哚基和肼基-吡咯并-吲哚基偶联模块在本文中分别也称作肼基-异-pictet-spengler(hips)偶联模块和氮杂-肼基-异-pictet-spengler(azahips)偶联模块。在上文反应方案中，r是缀合至多肽的感兴趣模块(例如美登木素)。如上文反应方案所示，包括2-甲酰基甘氨酸残基(fgly)的多肽与已经修饰成包括偶联模块(例如肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块)的药物(例如美登木素)反应以生成附着至偶联模块的多肽缀合物，如此经由偶联模块将美登木素附着至多肽。如本文中描述的，所述模块可以是多种模块任一，诸如但不限于化学实体，诸如可检测标记物或药物(例如美登木素生物碱)。r’和r”可以每个独立是任何期望取代基，诸如但不限于氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。z可以是cr11，nr12，n，o或s，其中r11和r12每个独立选自上文关于r’和r”描述的任何取代基。其它肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块也是可能的，如本文中描述的缀合物和化合物中显示的。例如，肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块可以修饰成附着(例如共价附着)至接头。照此，本公开文本的实施方案包括经由接头附着至药物(例如美登木素)的肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块。本文中详细描述了可将肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块偶联至药物(例如美登木素)的接头的多种实施方案。在某些实施方案中，多肽可缀合至感兴趣模块，其中多肽是在缀合至感兴趣模块之前修饰的。修饰多肽可产生含有一个或多个适合于缀合至感兴趣模块的反应性基团的经修饰的多肽。在一些情况中，可以在一个或多个氨基酸残基处修饰多肽以提供一个或多个适合于缀合至感兴趣模块(例如如上所述包括偶联模块，诸如肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块的模块)的反应性基团。例如，可以修饰多肽以包括反应性醛基团(例如反应性醛)。反应性醛可以包括在“醛标签”或“ald标签”中，如本文中使用的，“醛标签”或“ald标签”指自已经通过甲酰甘氨酸生成酶(fge)的作用转变成含有2-甲酰甘氨酸残基(在本文中称作“fgly”)的硫酸酯酶基序(例如l(c/s)tpsr)衍生的氨基酸序列。由fge生成的fgly残基也可以称作“甲酰甘氨酸”。换言之，术语“醛标签”在本文中用于指包括“转变后的”硫酸酯酶基序的氨基酸序列(即其中的半胱氨酸或丝氨酸残基已经通过fge的作用转变成fgly的硫酸酯酶基序，例如l(fgly)tpsr)。转变后的硫酸酯酶基序可衍生自包括“未转变的”硫酸酯酶基序的氨基酸序列(即其中的半胱氨酸或丝氨酸残基尚未被fge转变成fgly，但能够转变的硫酸酯酶基序，例如具有序列l(c/s)tpsr的未转变的硫酸酯酶基序)。如在甲酰甘氨酸生成酶(fge)作用于硫酸酯酶基序的语境中使用的，“转变”指硫酸酯酶基序中的半胱氨酸或丝氨酸残基变成甲酰甘氨酸(fgly)残基(例如，cys变成fgly，或ser变成fgly)的生化修饰。醛标签及其在位点特异性蛋白质修饰中的用途的别的方面记载于美国专利no.7,985,783和美国专利no.8,729,232中，通过援引将每一篇的公开内容收入本文。在一些情况中，含有fgly残基的经修饰的多肽可以通过fgly与化合物(例如含有如上所述肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块的化合物)的反应而缀合至感兴趣模块。例如，可以在适合于提供药物缀合至多肽的条件下使含有fgly的多肽接触含有反应性配偶的药物。在一些情况中，含有反应性配偶的药物可包括如上所述肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块。例如，美登木素可以修饰成包括肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块。在一些情况中，美登木素附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基，诸如经由接头共价附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基，如本文中详细描述的。在某些实施方案中，本公开内容的缀合物包括具有至少一个经修饰的氨基酸残基的多肽(例如抗体，诸如抗cd22抗体)。多肽的经修饰的氨基酸残基可以偶联至含有如上所述肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块的药物(例如美登木素)。在某些实施方案中，多肽(例如抗cd22抗体)的经修饰的氨基酸残基可衍生自已经如上所述转变成fgly残基的半胱氨酸或丝氨酸残基。在某些实施方案中，fgly残基缀合至含有如上所述肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块的药物以提供本公开内容的缀合物，其中药物经由肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块缀合至多肽。如本文中使用的，术语fgly’指多肽(例如抗cd22抗体)中偶联至感兴趣模块(例如药物，诸如美登木素生物碱)的经修饰的氨基酸残基。在某些实施方案中，缀合物包括至少一个本文中描述的式(i)的经修饰的氨基酸残基。例如，缀合物可包括至少一个具有式(i)的侧链的经修饰的氨基酸残基：其中z是cr4或n；r1选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；r2和r3每个独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基，或r2和r3任选环状连接以形成5或6元杂环基；每个r4独立选自氢，卤素，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；l是包含-(t1-v1)a-(t2-v2)b-(t3-v3)c-(t4-v4)d-的接头，其中a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4；t1，t2，t3和t4每个独立选自(c1-c12)烷基，取代的(c1-c12)烷基，(eda)w，(peg)n，(aa)p，-(cr13oh)h-，哌啶-4-氨基(4ap)，乙缩醛基团，肼，二硫化物，和酯，其中eda是乙二胺模块，peg是聚乙二醇或经修饰的聚乙二醇，而aa是氨基酸残基，其中w是1至20的整数，n是1至30的整数，p是1至20的整数，而h是1至12的整数；v1，v2，v3和v4每个独立选自下组：共价键，-co-，-nr15-，-nr15(ch2)q-，-nr15(c6h4)-，-conr15-，-nr15co-，-c(o)o-，-oc(o)-，-o-，-s-，-s(o)-，-so2-，-so2nr15-，-nr15so2-和-p(o)oh-，其中q是1至6的整数；每个r13独立选自氢，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基；每个r15独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，羧基，羧基酯，酰基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；w1是美登木素生物碱；且w2是抗cd22抗体。在某些实施方案中，z是cr4或n。在某些实施方案中，z是cr4。在某些实施方案中，z是n。在某些实施方案中，r1选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r1是氢。在某些实施方案中，r1是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r1是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r1是炔基或取代的炔基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r1是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基。在某些实施方案中，r1是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r1是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r1是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-8杂环基或取代的c3-8杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，r2和r3每个独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基，或r2和r3任选环状连接以形成5或6元杂环基。在某些实施方案中，r2选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r2是氢。在某些实施方案中，r2是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r2是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r2是炔基或取代的炔基。在某些实施方案中，r2是烷氧基或取代的烷氧基。在某些实施方案中，r2是氨基或取代的氨基。在某些实施方案中，r2是羧基或羧基酯。在某些实施方案中，r2是酰基或酰氧基。在某些实施方案中，r2是酰基氨基或氨基酰基。在某些实施方案中，r2是烷基酰胺或取代的烷基酰胺。在某些实施方案中，r2是磺酰基。在某些实施方案中，r2是硫代烷氧基或取代的硫代烷氧基。在某些实施方案中，r2是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基。在某些实施方案中，r2是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r2是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r2是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，r3是选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r3是氢。在某些实施方案中，r3是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r3是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r3是炔基或取代的炔基。在某些实施方案中，r3是烷氧基或取代的烷氧基。在某些实施方案中，r3是氨基或取代的氨基。在某些实施方案中，r3是羧基或羧基酯。在某些实施方案中，r3是酰基或酰氧基。在某些实施方案中，r3是酰基氨基或氨基酰基。在某些实施方案中，r3是烷基酰胺或取代的烷基酰胺。在某些实施方案中，r3是磺酰基。在某些实施方案中，r3是硫代烷氧基或取代的硫代烷氧基。在某些实施方案中，r3是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基。在某些实施方案中，r3是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r3是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r3是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-8杂环基或取代的c3-8杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，r2和r3任选环状连接以形成5或6元杂环基。在某些实施方案中，r2和r3环状连接以形成5或6元杂环基。在某些实施方案中，r2和r3环状连接以形成5元杂环基。在某些实施方案中，r2和r3环状连接以形成6元杂环基。在某些实施方案中，每个r4独立选自氢，卤素，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。每个r4的各种可能性更为详细地描述如下。在某些实施方案中，r4是氢。在某些实施方案中，每个r4是氢。在某些实施方案中，r4是卤素，诸如f，cl，br或i。在某些实施方案中，r4是f。在某些实施方案中，r4是cl。在某些实施方案中，r4是br。在某些实施方案中，r4是i。在某些实施方案中，r4是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r4是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r4是炔基或取代的炔基。在某些实施方案中，r4是烷氧基或取代的烷氧基。在某些实施方案中，r4是氨基或取代的氨基。在某些实施方案中，r4是羧基或羧基酯。在某些实施方案中，r4是酰基或酰氧基。在某些实施方案中，r4是酰基氨基或氨基酰基。在某些实施方案中，r4是烷基酰胺或取代的烷基酰胺。在某些实施方案中，r4是磺酰基。在某些实施方案中，r4是硫代烷氧基或取代的硫代烷氧基。在某些实施方案中，r4是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基(例如苯基或取代的苯基)。在某些实施方案中，r4是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r4是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r4是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-8杂环基或取代的c3-8杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，w1是美登木素生物碱。美登木素生物碱的别的描述见本文中的公开内容。在某些实施方案中，w2是抗cd22抗体。抗cd22抗体的别的描述见本文中的公开内容。在某些实施方案中，式(i)的化合物包括接头l。可以利用接头将偶联模块结合至一个或多个感兴趣模块和/或一个或多个多肽。在一些实施方案中，接头将偶联模块结合至多肽或化学实体任一。接头可以在任何便利的位置处结合(例如共价结合)至偶联模块(例如如本文所述)。例如，接头可将肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块附着至药物(例如美登木素)。肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块可用于将接头(和如此药物，例如美登木素)缀合至多肽，诸如抗cd22抗体。在某些实施方案中，l将偶联模块附着至w1，而且如此偶联模块经由接头l间接与w1成键。如上所述，w1是美登木素生物碱，而且如此l将偶联模块附着至美登木素生物碱，例如，偶联模块经由接头l间接与美登木素生物碱成键。可以在主题缀合物和化合物中利用任何便利的接头。在某些实施方案中，l包括选自烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基氨基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基的基团。在某些实施方案中，l包括烷基或取代的烷基基团。在某些实施方案中，l包括烯基或取代的烯基基团。在某些实施方案中，l包括炔基或取代的炔基基团。在某些实施方案中，l包括烷氧基或取代的烷氧基基团。在某些实施方案中，l包括氨基或取代的氨基基团。在某些实施方案中，l包括羧基或羧基酯基团。在某些实施方案中，l包括酰基氨基基团。在某些实施方案中，l包括烷基酰胺或取代的烷基酰胺基团。在某些实施方案中，l包括芳基或取代的芳基基团。在某些实施方案中，l包括杂芳基或取代的杂芳基基团。在某些实施方案中，l包括环烷基或取代的环烷基基团。在某些实施方案中，l包括杂环基或取代的杂环基基团。在某些实施方案中，l包括聚合物。例如，聚合物可以包括聚烷撑二醇及其衍生物，包括聚乙二醇，甲氧基聚乙二醇，聚乙二醇均聚物，聚丙二醇均聚物，乙二醇与丙二醇的共聚物(例如，其中均聚物和共聚物是未取代的或在一端用烷基取代的)，聚乙烯醇，聚乙烯基乙基醚，聚乙烯吡咯烷酮，其组合，等等。在某些实施方案中，聚合物是聚烷撑二醇。在某些实施方案中，聚合物是聚乙二醇。其它接头也是可能的，如下文更为详细地描述的缀合物和化合物中显示的。在一些实施方案中，l是通过式-(l1)a-(l2)b-(l3)c-(l4)d-来描述的接头，其中l1，l2，l3和l4每个独立是接头单元，且a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4。在某些实施方案中，a，b，c和d的和是1。在某些实施方案中，a，b，c和d的和是2。在某些实施方案中，a，b，c和d的和是3。在某些实施方案中，a，b，c和d的和是4。在某些实施方案中，a，b，c和d每个是1。在某些实施方案中，a，b和c每个是1，且d是0。在某些实施方案中，a和b每个是1，且c和d每个是0。在某些实施方案中，a是1且b，c和d每个是0。在某些实施方案中，l1附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。在某些实施方案中，l2，若存在，则附着至w1。在某些实施方案中，l3，若存在，则附着至w1。在某些实施方案中，l4，若存在，则附着至w1。可以在主题接头中利用任何便利的接头单元。感兴趣的接头单元包括但不限于聚合物，诸如聚乙二醇，聚乙烯和聚丙烯酸酯，氨基酸残基，基于碳水化合物的聚合物或碳水化合物残基及其衍生物，多核苷酸，烷基基团，芳基基团，杂环基团，其组合，和其取代型式的单元。在一些实施方案中，l1，l2，l3和l4(若存在的话)中每个包含一个或多个独立选自聚乙二醇，经修饰的聚乙二醇，氨基酸残基，烷基基团，取代的烷基，芳基基团，取代的芳基基团，和二胺(例如包括烷撑二胺的连接基团)的基团。在一些实施方案中，l1(若存在的话)包含聚乙二醇，经修饰的聚乙二醇，氨基酸残基，烷基基团，取代的烷基，芳基基团，取代的芳基基团，或二胺。在一些实施方案中，l1包含聚乙二醇。在一些实施方案中，l1包含经修饰的聚乙二醇。在一些实施方案中，l1包含氨基酸残基。在一些实施方案中，l1包含烷基基团或取代的烷基。在一些实施方案中，l1包含芳基基团或取代的芳基基团。在一些实施方案中，l1包含二胺(例如包含烷撑二胺的连接基团)。在一些实施方案中，l2(若存在的话)包含聚乙二醇，经修饰的聚乙二醇，氨基酸残基，烷基基团，取代的烷基，芳基基团，取代的芳基基团，或二胺。在一些实施方案中，l2包含聚乙二醇。在一些实施方案中，l2包含经修饰的聚乙二醇。在一些实施方案中，l2包含氨基酸残基。在一些实施方案中，l2包含烷基基团或取代的烷基。在一些实施方案中，l2包含芳基基团或取代的芳基基团。在一些实施方案中，l2包含二胺(例如包含烷撑二胺的连接基团)。在一些实施方案中，l3(若存在的话)包含聚乙二醇，经修饰的聚乙二醇，氨基酸残基，烷基基团，取代的烷基，芳基基团，取代的芳基基团，或二胺。在一些实施方案中，l3包含聚乙二醇。在一些实施方案中，l3包含经修饰的聚乙二醇。在一些实施方案中，l3包含氨基酸残基。在一些实施方案中，l3包含烷基基团或取代的烷基。在一些实施方案中，l3包含芳基基团或取代的芳基基团。在一些实施方案中，l3包含二胺(例如包含烷撑二胺的连接基团)。在一些实施方案中，l4(若存在的话)包含聚乙二醇，经修饰的聚乙二醇，氨基酸残基，烷基基团，取代的烷基，芳基基团，取代的芳基基团，或二胺。在一些实施方案中，l4包含聚乙二醇。在一些实施方案中，l4包含经修饰的聚乙二醇。在一些实施方案中，l4包含氨基酸残基。在一些实施方案中，l4包含烷基基团或取代的烷基。在一些实施方案中，l4包含芳基基团或取代的芳基基团。在一些实施方案中，l4包含二胺(例如包含烷撑二胺的连接基团)。在一些实施方案中，l是包含-(l1)a-(l2)b-(l3)c-(l4)d-的接头，其中：-(l1)a-是-(t1-v1)a-；-(l2)b-是-(t2-v2)b-；-(l3)c-是-(t3-v3)c-；且-(l4)d-是-(t4-v4)d-，其中t1，t2，t3和t4，若存在的话，是拴系基团；v1，v2，v3和v4，若存在的话，是共价键或连接官能团；且a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4。如上所述，在某些实施方案中，l1附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。照此，在某些实施方案中，t1附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。在某些实施方案中，v1附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，l2，若存在，则附着至w1。照此，在某些实施方案中，t2，若存在，则附着至w1，或v2，若存在，则附着至w1。在某些实施方案中，l3，若存在，则附着至w1。照此，在某些实施方案中，t3，若存在，则附着至w1，或v3，若存在，则附着至w1。在某些实施方案中，l4，若存在，则附着至w1。照此，在某些实施方案中，t4，若存在，则附着至w1，或v4，若存在，则附着至w1。关于拴系基团t1，t2，t3和t4，可以在主题接头中利用任何便利的拴系基团。在一些实施方案中，t1，t2，t3和t4每个包含一个或多个独立选自(c1-c12)烷基，取代的(c1-c12)烷基，(eda)w，(peg)n，(aa)p，-(cr13oh)h-，哌啶-4-氨基(4ap)，乙缩醛基团，肼，二硫化物，和酯的基团，其中w是1至20的整数，n是1至30的整数，p是1至20的整数，而h是1至12的整数。在某些实施方案中，当a，b，c和d的和是2且t1-v1，t2-v2，t3-v3，或t4-v4中一项是(peg)n-co时，则n不是6。例如，在一些情况中，接头可具有下面的结构：其中n不是6。在某些实施方案中，当a，b，c和d的和是2且t1-v1，t2-v2，t3-v3，或t4-v4中一项是(c1-c12)烷基-nr15时，则(c1-c12)烷基不是c5烷基。例如，在一些情况中，接头可具有下面的结构：其中g不是4。在某些实施方案中，栓系基团(例如t1，t2，t3和/或t4)包括(c1-c12)烷基或取代的(c1-c12)烷基。在某些实施方案中，(c1-c12)烷基是直链或支链烷基基团，其包括1至12个碳原子，诸如1至10个碳原子，或1至8个碳原子，或1至6个碳原子，或1至5个碳原子，或1至4个碳原子，或1至3个碳原子。在一些情况中，(c1-c12)烷基可以是烷基或取代的烷基，诸如c1-c12烷基，或c1-c10烷基，或c1-c6烷基，或c1-c3烷基。在一些情况中，(c1-c12)烷基是c2烷基。例如，(c1-c12)烷基可以是亚烷基或取代的亚烷基，诸如c1-c12亚烷基，或c1-c10亚烷基，或c1-c6亚烷基，或c1-c3亚烷基。在一些情况中，(c1-c12)烷基是c2亚烷基。在某些实施方案中，取代的(c1-c12)烷基是直链或支链取代的烷基基团，其包括1至12个碳原子，诸如1至10个碳原子，或1至8个碳原子，或1至6个碳原子，或1至5个碳原子，或1至4个碳原子，或1至3个碳原子。在一些情况中，取代的(c1-c12)烷基可以是取代的烷基，诸如取代的c1-c12烷基，或取代的c1-c10烷基，或取代的c1-c6烷基，或取代的c1-c3烷基。在一些情况中，取代的(c1-c12)烷基是取代的c2-烷基。例如，取代的(c1-c12)烷基可以是取代的亚烷基，诸如取代的c1-c12亚烷基，或取代的c1-c10亚烷基，或取代的c1-c6亚烷基，或取代的c1-c3亚烷基。在一些情况中，取代的(c1-c12)烷基是取代的c2亚烷基。在某些实施方案中，拴系基团(例如t1，t2，t3和/或t4)包括乙二胺(eda)模块，例如含eda拴系。在某些实施方案中，(eda)w包括一个或多个eda模块，诸如其中w是1至50，诸如1至40，1至30，1至20，1至12或1至6的整数，诸如1，2，3，4，5或6。所连接的乙二胺(eda)模块可以任选是在一个或多个便利的位置处用任何便利的取代基，例如用烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，芳基或取代的芳基取代的。在某些实施方案中，eda模块由下面的结构描述：其中y是1至6的整数，r是0或1，且每个r12独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，y是1，2，3，4，5或6。在某些实施方案中，y是1且r是0。在某些实施方案中，y是1且r是1。在某些实施方案中，y是2且r是0。在某些实施方案中，y是2且r是1。在某些实施方案中，每个r12独立选自氢，烷基，取代的烷基，芳基和取代的芳基。在某些实施方案中，eda中任两个相邻的r12基团可以环状连接，例如形成哌嗪基环。在某些实施方案中，y是1且两个相邻r12基团是烷基基团，环状连接以形成哌嗪基环。在某些实施方案中，y是1且相邻r12基团选自氢，烷基(例如甲基)和取代的烷基(例如低级烷基-oh，诸如乙基-oh或丙基-oh)。在某些实施方案中，拴系基团包括4-氨基-哌啶(4ap)模块(在本文中也称作哌啶-4-氨基，p4a)。4ap模块可以任选是在一个或多个便利的位置处用任何便利的取代基，例如用烷基，取代的烷基，聚乙二醇模块，酰基，取代的酰基，芳基或取代的芳基取代的。在某些实施方案中，4ap模块由下面的结构描述：其中r12选自氢，烷基，取代的烷基，聚乙二醇模块(例如聚乙二醇或经修饰的聚乙二醇)，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r12是聚乙二醇模块。在某些实施方案中，r12是羧基修饰的聚乙二醇。在某些实施方案中，r12包括通过式(peg)k来描述的聚乙二醇模块，它可以由下面的结构表示：其中k是1至20，诸如1至18，或1至16，或1至14，或1至12，或1至10，或1至8，或1至6，或1至4，或1或2的整数，诸如1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19或20。在一些情况中，k是2。在某些实施方案中，r17选自oh，cooh，或coor，其中r选自烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r17是cooh。在某些实施方案中，拴系基团(例如t1，t2，t3和/或t4)包括(peg)n，其中(peg)n是聚乙二醇或经修饰的聚乙二醇连接单元。在某些实施方案中，(peg)n由下面的结构描述：其中n是1至50，诸如1至40，1至30，1至20，1至12或1至6的整数，诸如1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19或20。在一些情况中，n是2。在一些情况中，n是3。在一些情况中，n是6。在一些情况中，n是12。在某些实施方案中，拴系基团(例如t1，t2，t3和/或t4)包括(aa)p，其中aa是氨基酸残基。可以利用任何便利的氨基酸。感兴趣的氨基酸包括但不限于l-和d-氨基酸，天然发生氨基酸，诸如20种主要α-氨基酸和β-丙氨酸任一，非天然发生氨基酸(例如氨基酸类似物)，诸如非天然发生α-氨基酸或非天然发生β-氨基酸，等。在某些实施方案中，p是1至50，诸如1至40，1至30，1至20，1至12或1至6的整数，诸如1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19或20。在某些实施方案中，p是1。在某些实施方案中，p是2。在某些实施方案中，拴系基团(例如t1，t2，t3和/或t4)包括由式-(cr13oh)h-描述的模块，其中h是0或n是1至50，诸如1至40，1至30，1至20，1至12或1至6的整数，诸如1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11或12。在某些实施方案中，h是1。在某些实施方案中，h是2。在某些实施方案中，r13选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在某些实施方案中，r13是氢。在某些实施方案中，r13是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r13是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r13是炔基或取代的炔基。在某些实施方案中，r13是烷氧基或取代的烷氧基。在某些实施方案中，r13是氨基或取代的氨基。在某些实施方案中，r13是羧基或羧基酯。在某些实施方案中，r13是酰基或酰氧基。在某些实施方案中，r13是酰基氨基或氨基酰基。在某些实施方案中，r13是烷基酰胺或取代的烷基酰胺。在某些实施方案中，r13是磺酰基。在某些实施方案中，r13是硫代烷氧基或取代的硫代烷氧基。在某些实施方案中，r13是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基。在某些实施方案中，r13是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r13是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r13是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-8杂环基或取代的c3-8杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，r13选自氢，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基。在这些实施方案中，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基如上文关于r13所述。关于连接官能团v1，v2，v3和v4，可以在主题接头中利用任何便利的连接官能团。感兴趣连接官能团包括但不限于氨基，羰基，酰胺基，氧羰基，羧基，磺酰基，亚砜，磺酰基氨基，氨基磺酰基，硫代，氧基，磷酸基，氨基磷酸酯，硫代氨基磷酸酯，等等。在一些实施方案中，v1，v2，v3和v4每个独立选自共价键，-co-，-nr15-，-nr15(ch2)q-，-nr15(c6h4)-，-conr15-，-nr15co-，-c(o)o-，-oc(o)-，-o-，-s-，-s(o)-，-so2-，-so2nr15-，-nr15so2-和-p(o)oh-，其中q是1至6的整数。在某些实施方案中，q是1至6的整数(例如，1，2，3，4，5或6)。在某些实施方案中，q是1。在某些实施方案中，q是2。在一些实施方案中，每个r15独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。每个r15的各种可能性更为详细地描述如下。在某些实施方案中，r15是氢。在某些实施方案中，每个r15是氢。在某些实施方案中，r15是烷基或取代的烷基，诸如c1-6烷基或取代的c1-6烷基，或c1-4烷基或取代的c1-4烷基，或c1-3烷基或取代的c1-3烷基。在某些实施方案中，r15是烯基或取代的烯基，诸如c2-6烯基或取代的c2-6烯基，或c2-4烯基或取代的c2-4烯基，或c2-3烯基或取代的c2-3烯基。在某些实施方案中，r15是炔基或取代的炔基。在某些实施方案中，r15是烷氧基或取代的烷氧基。在某些实施方案中，r15是氨基或取代的氨基。在某些实施方案中，r15是羧基或羧基酯。在某些实施方案中，r15是酰基或酰氧基。在某些实施方案中，r15是酰基氨基或氨基酰基。在某些实施方案中，r15是烷基酰胺或取代的烷基酰胺。在某些实施方案中，r15是磺酰基。在某些实施方案中，r15是硫代烷氧基或取代的硫代烷氧基。在某些实施方案中，r15是芳基或取代的芳基，诸如c5-8芳基或取代的c5-8芳基，诸如c5芳基或取代的c5芳基，或c6芳基或取代的c6芳基。在某些实施方案中，r15是杂芳基或取代的杂芳基，诸如c5-8杂芳基或取代的c5-8杂芳基，诸如c5杂芳基或取代的c5杂芳基，或c6杂芳基或取代的c6杂芳基。在某些实施方案中，r15是环烷基或取代的环烷基，诸如c3-8环烷基或取代的c3-8环烷基，诸如c3-6环烷基或取代的c3-6环烷基，或c3-5环烷基或取代的c3-5环烷基。在某些实施方案中，r15是杂环基或取代的杂环基，诸如c3-8杂环基或取代的c3-8杂环基，诸如c3-6杂环基或取代的c3-6杂环基，或c3-5杂环基或取代的c3-5杂环基。在某些实施方案中，每个r15独立选自氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，羧基，羧基酯，酰基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在这些实施方案中，氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，羧基，羧基酯，酰基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基取代基如上文关于r15所述。在某些实施方案中，栓系基团包括乙缩醛基团，二硫化物，肼，或酯。在一些实施方案中，栓系基团包括乙缩醛基团。在一些实施方案中，栓系基团包括二硫化物。在一些实施方案中，栓系基团包括肼。在一些实施方案中，栓系基团包括酯。如上所述，在一些实施方案中，l是包含-(t1-v1)a-(t2-v2)b-(t3-v3)c-(t4-v4)d-的接头，其中a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4。在一些实施方案中，在主题接头中：t1选自(c1-c12)烷基和取代的(c1-c12)烷基；t2，t3和t4每个独立选自(c1-c12)烷基，取代的(c1-c12)烷基，(eda)w，(peg)n，(aa)p，-(cr13oh)h-，4-氨基-哌啶(4ap)，乙缩醛基团，二硫化物，肼，和酯；且v1，v2，v3和v4每个独立选自共价键，-co-，-nr15-，-nr15(ch2)q-，-nr15(c6h4)-，-conr15-，-nr15co-，-c(o)o-，-oc(o)-，-o-，-s-，-s(o)-，-so2-，-so2nr15-，-nr15so2-和-p(o)oh-，其中q为1至6的整数；其中：(peg)n是其中n是1至30的整数；eda是具有如下结构的乙二胺模块：其中y是1至6的整数且r是0或1；4-氨基-哌啶(4ap)是且aa是氨基酸残基，其中p是1至20的整数；每个r15和r12独立选自氢，烷基，取代的烷基，芳基和取代的芳基，其中任两个相邻的r12基团可以环状连接以形成哌嗪基环；且r13选自氢，烷基，取代的烷基，芳基，和取代的芳基。在某些实施方案中，t1，t2，t3和t4和v1，v2，v3和v4选自下表，例如下表的一行：t1v1t2v2t3v3t4v4(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-----(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co---(c1-c12)烷基-co-(aa)p-----(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-nr15-----(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-nr15---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-----(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15-----(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-(eda)w---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-----(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-conr15-(c1-c12)烷基-co-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co---(c1-c12)烷基-conr15-(peg)n-co-(aa)p---(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-so2-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(eda)w-co-(cr13oh)h-conr15-(peg)n-co-(c1-c12)烷基-co-(cr13oh)h-co-----(c1-c12)烷基-conr15-取代的(c1-c12)烷基-nr15-(peg)n-co---(c1-c12)烷基-so2-(c1-c12)烷基-co-----(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-(cr13oh)h-conr15---(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-co-(aa)p-nr15-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-nr15-(peg)n-p(o)oh-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-(eda)w-(aa)p---(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15---co---(c1-c12)烷基-conr15-(c1-c12)烷基-nr15---co-(c1-c12)烷基-nr15-(c1-c12)烷基-co-4ap-co-(c1-c12)烷基-co-(aa)p-(c1-c12)烷基-co-4ap-co-(c1-c12)烷基-co---在某些实施方案中，l是包含-(l1)a-(l2)b-(l3)c-(l4)d-的接头，其中-(l1)a-是-(t1-v1)a-；-(l2)b-是-(t2-v2)b-；-(l3)c-是-(t3-v3)c-；且-(l4)d-是-(t4-v4)d-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3是(cr13oh)h，v3是-conr15-，t4是(c1-c12)烷基且v4是-co-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(peg)n，v2是-co-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2缺失，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(peg)n，v2是-nr15-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-nr15-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(c1-c12)烷基，v2是-nr15-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(peg)n，v2是-co-，t3是(eda)w，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2缺失，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(peg)n，v2是-co-，t3是(aa)p，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3是(cr13oh)h，v3是-co-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-co-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr11-，t3是(peg)n，v3是-so2-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3是(cr13oh)h，v3是-conr15-，t4是(peg)n且v4是-co-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(cr13oh)h，v2是-co-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是取代的(c1-c12)烷基，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-so2-，t2是(c1-c12)烷基，v2是-co-，t3缺失，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(c1-c12)烷基，v2缺失，t3是(cr13oh)h，v3是-conr15-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-co-，t4是(aa)p且v4是-nr15-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(aa)p，v2是-nr15-，t3是(peg)n，v3是-p(o)oh-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2缺失，t3是(aa)p，v3缺失，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3是(cr13oh)h，v3是-conr15-，t4是(c1-c12)烷基且v4是-co(aa)p-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(c1-c12)烷基，v2是-nr15-，t3缺失，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-conr15-，t2是(c1-c12)烷基，v2是-nr15-，t3缺失，v3是-co-，t4是(c1-c12)烷基且v4是-nr15-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是(eda)w，v2是-co-，t3是(cr13oh)h，v3是-conr15-，t4是(peg)n且v4是-co(aa)p-。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4是(aa)p且v4缺失。在某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，所述接头通过如下结构之一来描述：在上文所述接头结构的某些实施方案中，每个f独立是0或1至12的整数；每个y独立是0或1至20的整数；每个n独立是0或1至30的整数；每个p独立是0或1至20的整数；每个h独立是0或1至12的整数；每个r独立是氢，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基；且每个r’独立是h，氨基酸的侧链，烷基，取代的烷基，烯基，取代的烯基，炔基，取代的炔基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，取代的氨基，羧基，羧基酯，酰基，酰氧基，酰基氨基，氨基酰基，烷基酰胺，取代的烷基酰胺，磺酰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的杂芳基，环烷基，取代的环烷基，杂环基，和取代的杂环基。在上文所述接头结构的某些实施方案中，每个f独立是0，1，2，3，4，5或6；每个y独立是0，1，2，3，4，5或6；每个n独立是0，1，2，3，4，5或6；每个p独立是0，1，2，3，4，5或6；且每个h独立是0，1，2，3，4，5或6。在上文所述接头结构的某些实施方案中，每个r独立是h，甲基或-(ch2)m-oh，其中m是1，2，3或4(例如2)。在接头l的某些实施方案中，t1是(c1-c12)烷基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是(c1-c12)烷基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是亚乙基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是亚乙基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失。在某些实施方案中，t1是亚乙基，v1是-co-，t2是4ap，v2是-co-，t3是亚乙基，v3是-co-，t4缺失且v4缺失，其中t2(例如4ap)具有下面的结构：其中r12是聚乙二醇模块(例如聚乙二醇或经修饰的聚乙二醇)。在某些实施方案中，接头l包括下面的结构：其中每个f独立是1至12的整数；且n是1至30的整数。在某些实施方案中，f是1。在某些实施方案中，f是2。在某些实施方案中，一个f是2和一个f是1。在某些实施方案中，n是1。在某些实施方案中，上述接头结构的左手侧附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块，且上述接头结构的右手侧附着至美登木素。上文结构中列出的任何化学实体，接头和偶联模块可以适应在主题化合物和缀合物中使用。涉及用于生成缀合物的肼基-吲哚基和肼基-吡咯并-吡啶基化合物和方法的别的公开内容见2013年3月11日提交的美国申请公开文本no.2014/0141025，和2014年11月26日提交的美国申请公开文本no.2015/0157736，其每一篇的公开内容通过援引收入本文。抗cd22抗体如上所述，主题缀合物可包含抗cd22抗体作为取代基w2，其中该抗cd22抗体经过修饰包括2-甲酰甘氨酸(fgly)残基。如本文中使用的，氨基酸可以通过它们的标准名称，它们的标准三字母缩写和/或它们的标准单字母缩写来提到，诸如：丙氨酸或ala或a；半胱氨酸或cys或c；天冬氨酸或asp或d；谷氨酸或glu或e；苯丙氨酸或phe或f；甘氨酸或gly或g；组氨酸或his或h；异亮氨酸或ile或i；赖氨酸或lys或k；亮氨酸或leu或l；甲硫氨酸或met或m；天冬酰胺或asn或n；脯氨酸或pro或p；谷氨酰胺或gln或q；精氨酸或arg或r；丝氨酸或ser或s；苏氨酸或thr或t；缬氨酸或val或v；色氨酸或trp或w；和酪氨酸或tyr或y。在一些情况中，合适的抗cd22抗体特异性结合cd22多肽，其中表位包含cd22抗原内的(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751内的，或氨基酸1-670内的)氨基酸残基。cd22表位可以由与图8a-8c中描绘的人cd22同等型4氨基酸序列的约500个氨基酸至约670个氨基酸的连续区段具有至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％，氨基酸序列同一性的多肽形成。cd22表位可以由与图8a-8c中描绘的人cd22同等型3氨基酸序列的约500个氨基酸至约751个氨基酸的连续区段具有至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％，氨基酸序列同一性的多肽形成。cd22表位可以由与图8a-8c中描绘的人cd22同等型2氨基酸序列的约500个氨基酸至约759个氨基酸的连续区段具有至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％，氨基酸序列同一性的多肽形成。cd22表位可以由与图8a-8c中描绘的人cd22同等型1氨基酸序列的约500个氨基酸至约847个氨基酸的连续区段具有至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％，氨基酸序列同一性的多肽形成。“cd22抗原”或“cd22多肽”可包含与图8a-8c中描绘的cd22同等型1，2，3，或4氨基酸序列的约500个氨基酸至约847个氨基酸(同等型1)，至约759个氨基酸(同等型2)，至约751个氨基酸(同等型3)，或至约670个氨基酸(同等型4)的连续区段具有至少约75％，至少约80％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％，氨基酸序列同一性的氨基酸序列。在一些情况中，合适的抗cd22抗体展现对cd22的高亲和力结合。例如，在一些情况中，合适的抗cd22抗体以至少约10-7m，至少约10-8m，至少约10-9m，至少约10-10m，至少约10-11m，或至少约10-12m，或优于10-12m的亲和力结合cd22。在一些情况中，合适的抗cd22抗体以约10-7m至约10-8m，约10-8m至约10-9m，约10-9m至约10-10m，约10-10m至约10-11m，或约10-11m至约10-12m，或优于10-12m的亲和力结合cd22上存在的表位。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与第二抗cd22抗体竞争结合cd22内的表位和/或与第二抗cd22抗体结合cd22内的相同表位。在一些情况中，与第二抗cd22抗体竞争结合cd22内的表位的抗cd22抗体也结合第二抗cd22抗体的表位。在一些情况中，与第二抗cd22抗体竞争结合cd22内的表位的抗cd22抗体结合与第二抗cd22抗体结合的表位交叠的表位。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体能在在其细胞表面上表达cd22的细胞中诱导凋亡。在一些情况中，适合在主题缀合物中使用的抗cd22抗体会抑制过表达cd22的人肿瘤细胞的增殖，其中该抑制发生在体外，在体内，或在体外和在体内。例如，在一些情况中，适合在主题缀合物中使用的抗cd22抗体将过表达cd22的人肿瘤细胞的增殖抑制至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约40％，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，或超过80％，例如至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约98％，至少约99％，或100％。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含选自iydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)的重链互补决定区(cdr)的抗体竞争结合cd22表位(例如包含cd22抗原内的氨基酸残基的表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751内的，或氨基酸1-670内的表位))。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含选自rasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的轻链cdr的抗体竞争结合cd22表位(包含cd22抗原内的氨基酸残基的表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751内的，或氨基酸1-670内的表位))。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含iydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如包含cd22抗原内的氨基酸残基的表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位))。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如包含cd22抗原内的氨基酸残基的表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751内的，或氨基酸1-670内的表位))。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)和vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如包含cd22抗原内的氨基酸残基的表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751内的，或氨基酸1-670内的表位))。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)和vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含如下氨基酸序列的抗cd22vh区中存在的vhcdr：evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含如下氨基酸序列的抗cd22vl区中存在的vlcdr：diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)中存在的vhcdr和diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)中存在的vlcdr。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含：a)包含具有氨基酸序列evqlvesggglvkpggslx1lscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknx2lylqmx3slraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno:1)的vh区的重链，其中x1是k(lys)或r(arg)；x2是s(ser)或t(thr)；且x3是n(asn)或s(ser)；和b)免疫球蛋白轻链。轻链可具有任何合适的vl氨基酸序列，只要所得抗体特异性结合cd22。例示性的vl氨基酸序列包括：diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno:7；vk1)；diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqpedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno:8；vk2)；和diqmtqspssvsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkapklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqpedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno:9；vk4)。如此，例如，合适的抗cd22抗体可包含：a)包含具有seqidno:1)中所列氨基酸序列的vh区的重链；和包含vk1的vl区的轻链。在其它情况中，合适的抗cd22抗体可包含：a)包含具有seqidno:1)中所列氨基酸序列的vh区的重链；和包含vk2的vl区的轻链。在仍有其它情况中，主题抗cd22抗体可包含：a)包含具有seqidno:1)中所列氨基酸序列的vh区的重链；和包含vk4的vl区的轻链。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含：a)包含氨基酸序列diqmtqspssx1sasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkax2klliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqx3edfatyfcqqgntlpwtfgggtkveik(seqidno:2)的免疫球蛋白轻链，其中x1是l(leu)或v(val)；x2是v(val)或p(pro)；且x3是q(gln)或p(pro)；和b)免疫球蛋白重链。该重链可包含选自下述的氨基酸序列：evqlvesggglvkpggslklscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnakntlylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno:3；vh3)；evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno:4；vh4)；evqlvesggglvkpggslklscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmnslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno:5；vh5)；和evqlvesggglvkpggslklscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno:6；vh6)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含下述氨基酸序列的vh区：evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含下述氨基酸序列的vh区：evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)和包含下述氨基酸序列的vl区：diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)。经修饰的恒定区序列如上所述，抗cd22抗体的氨基酸序列经过修饰包括硫酸酯酶基序，其含有丝氨酸或半胱氨酸残基，能够在体内(例如在细胞中翻译含有ald标签的蛋白质时)或在体外(例如通过在无细胞系统中使含有ald标签的蛋白质接触fge)通过甲酰甘氨酸生成酶(fge)的作用而转化(氧化)成2-甲酰甘氨酸(fgly)残基。此类硫酸酯酶基序在本文中也可以称作fge修饰位点。硫酸酯酶基序醛标签的最小限度硫酸酯酶基序通常长度为5或6个氨基酸残基，通常长度不超过6个氨基酸残基。ig多肽中提供的硫酸酯酶基序长度为至少5或6氨基酸残基，而且可以是例如5-16，6-16，5-15，6-15，5-14，6-14，5-13，6-13，5-12，6-12，5-11，6-11，5-10，6-10，5-9，6-9，5-8，或6-8个氨基酸残基，从而限定长度小于16，15，14，13，12，11，10，9，8或7个氨基酸残基的硫酸酯酶基序。在某些实施方案中，感兴趣多肽包括那些其中相对于天然氨基酸序列已经插入，删除，替代(替换)一个或多个氨基酸残基，诸如2个或更多，或3个或更多，或4个或更多，或5个或更多，或6个或更多，或7个或更多，或8个或更多，或9个或更多，或10个或更多，或11个或更多，或12个或更多，或13个或更多，或14个或更多，或15个或更多，或16个或更多，或17个或更多，或18个或更多，或19个或更多，或20个或更多氨基酸残基以在多肽中提供硫酸酯酶基序的序列。在某些实施方案中，该多肽相对于该多肽的天然氨基酸序列包括氨基酸序列的小于20，19，18，17，16，15，14，13，12，11，10，9，8，7，6，5，4，3或2个氨基酸残基的修饰(插入，添加，删除，和/或替代/替换)。在多肽(例如抗cd22抗体)的天然氨基酸序列含有期望的硫酸酯酶基序的一个或多个残基的情况中，残基修饰的总数可以减少，例如通过天然氨基酸残基侧翼的氨基酸残基的位点规定修饰(插入，添加，删除，替代/替换)来提供期望的硫酸酯酶基序的序列。在某些实施方案中，将靶抗cd22多肽的天然氨基酸序列的修饰程度降至最低，以使插入，删除，替代(替换)，或添加(例如至n或c端)的氨基酸残基的数目降至最低。将靶抗cd22多肽的氨基酸序列修饰程度降至最低可将此类修饰可能对抗cd22功能和/或结构具有的影响降至最低。应当指出，虽然特别感兴趣的醛标签是那些包含至少最小限度硫酸酯酶基序(也称作“共有硫酸酯酶基序”)的，但是会容易领会本公开内容涉及且涵盖更长的醛标签，它们可用于本公开内容的组合物和方法。醛标签可以如此包含5或6个残基的最小限度硫酸酯酶基序，或者可以更长，包含最小限度硫酸酯酶基序且该基序的n和/或c端侧可以侧翼有额外的氨基酸残基。例如，涵盖5或6个氨基酸残基的醛标签，以及超过5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20或更多个氨基酸残基的更长的氨基酸序列。醛标签可以存在于ig重链的c端或附近；例如，醛标签可以存在于天然，野生型ig重链c端的1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10个氨基酸内。醛标签可以存在于ig重链的ch1结构域内。醛标签可以存在于ig重链ch2结构域内。醛标签可以存在于ig重链的ch3结构域内。醛标签可以存在于ig轻链恒定区中，例如卡帕轻链恒定区或拉姆达轻链恒定区中。在某些实施方案中，所使用的硫酸酯酶基序可以通过下式来描述：x1z10x2z20x3z30(i’)其中z10是半胱氨酸或丝氨酸(它还可以通过(c/s)来表示)；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(它还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，例如赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如，a，g，l，v，或i；x1存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸，(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m，s或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；且x2和x3可以独立是任何氨基酸，虽然通常是脂肪族氨基酸，极性，不带电荷氨基酸，或含硫氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g。可以修饰抗cd22重和/或轻链的氨基酸序列以提供式x1z10x2z20x3z30的至少5个氨基酸的序列，其中z10是半胱氨酸或丝氨酸；z20是脯氨酸或丙氨酸残基；z30是脂肪族氨基酸或碱性氨基酸；x1存在或缺失，而且，当存在时，是任何氨基酸，前提是，当该异源硫酸酯酶基序处于多肽的n端时，x1存在；x2和x3每个独立是任何氨基酸，其中该序列在ig恒定区的溶剂可及环区内或附近，且其中该序列不在ig重链的c端。硫酸酯酶基序通常选择成能够被选定fge所转变，例如带醛标签的多肽在其中表达的宿主细胞中存在的fge或要在无细胞体外方法中与带醛标签的多肽接触的fge。例如，其中该fge是真核fge(例如哺乳动物fge，包括人fge)，该硫酸酯酶基序可以是下式的：x1cx2px3z30(i”)其中x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸，(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，s或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸，(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g，或c，例如s，t，a，v或g；且z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，例如赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i。硫酸酯酶基序的具体例子包括lctpsr(seqidno://)，mctpsr(seqidno://)，vctpsr(seqidno://)，lcspsr(seqidno://)，lcapsr(seqidno://)，lcvpsr(seqidno://)，lcgpsr(seqidno://)，ictpar(seqidno://)，lctpsk(seqidno://)，mctpsk(seqidno://)，vctpsk(seqidno://)，lcspsk(seqidno://)，lcapsk(seqidno://)，lcvpsk(seqidno://)，lcgpsk(seqidno://)，lctpsa(seqidno://)，ictpaa(seqidno://)，mctpsa(seqidno://)，vctpsa(seqidno://)，lcspsa(seqidno://)，lcapsa(seqidno://)，lcvpsa(seqidno://)，和lcgpsa(seqidno://)。含fgly序列一旦fge作用于经修饰的抗cd22重和/或轻链，硫酸酯酶基序中的丝氨酸或半胱氨酸就被修饰成fgly。如此，含fgly硫酸酯酶基序可以是下式的：x1(fgly)x2z20x3z30(i”’)其中fgly是甲酰甘氨酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，通常是赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸，(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；且x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g。如上所述，通过fgly与药物(例如如上所述含有肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块的药物)的反应以生成含fgly’硫酸酯酶基序，含有fgly残基的经修饰的多肽可以缀合至药物(例如美登木素生物碱)。如本文中使用的，术语fgly’指硫酸酯酶基序中偶联至药物，诸如美登木素生物碱的经修饰的氨基酸残基(例如式(i)的经修饰的氨基酸残基)。如此，含fgly’硫酸酯酶基序可以是下式的：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，通常是赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；且x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g。在某些实施方案中，式(i)的经修饰的氨基酸残基位于抗cd22抗体的重链恒定区的c端。在一些情况中，该重链恒定区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，通常是赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g；且其中该序列在氨基酸序列qkslslspgk的c端，且其中该序列可包括天然，野生型ig重链恒定区中不存在的1，2，3，4，5，或5至10个氨基酸。在某些实施方案中，该重链恒定区在ig重链的c端包含序列slslspgsl(fgly’)tpsrgs，例如替换天然slslspgk(seqidno://)序列。在某些实施方案中，式(i)的经修饰的氨基酸残基位于抗cd22抗体的轻链恒定区中。在某些实施方案中，该轻链恒定区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，通常是赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g；且其中该序列在氨基酸序列kvdnal(seqidno://)的c端和/或在氨基酸序列qsgnsq(seqidno://)的n端。在某些实施方案中，该轻链恒定区包含序列kvdnal(fgly’)tpsrqsgnsq(seqidno://)。在某些实施方案中，式(i)的经修饰的氨基酸残基位于抗cd22抗体的重链ch1区中。在某些实施方案中，该重链ch1区包含式(ii)的序列：x1(fgly’)x2z20x3z30(ii)其中fgly’是式(i)的经修饰的氨基酸残基；z20是脯氨酸或丙氨酸残基任一(还可以通过(p/a)来表示)；z30是碱性氨基酸(例如精氨酸(r)，而且可以是赖氨酸(k)或组氨酸(h)，通常是赖氨酸)，或脂肪族氨基酸(丙氨酸(a)，甘氨酸(g)，亮氨酸(l)，缬氨酸(v)，异亮氨酸(i)，或脯氨酸(p)，例如a，g，l，v，或i；x1可以存在或缺失，而且，当存在时，可以是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如l，m，v，s或t，例如l，m或v，前提是，当硫酸酯酶基序处于靶多肽的n端时，x1存在；x2和x3可以独立是任何氨基酸，例如脂肪族氨基酸，含硫氨基酸，或极性，不带电荷氨基酸(即，芳香族氨基酸或带电荷氨基酸以外的)，例如s，t，a，v，g或c，例如s，t，a，v或g；且其中该序列在氨基酸序列swnsga(seqidno://)的c端和/或在氨基酸序列gvhtfp(seqidno://)的n端。在某些实施方案中，该重链ch1区包含序列swnsgal(fgly’)tpsrgvhtfp(seqidno://)。修饰位点如上所述，抗cd22抗体的氨基酸序列经过修饰包括硫酸酯酶基序，其含有丝氨酸或半胱氨酸残基，能够在体内(例如在细胞中翻译含有ald标签的蛋白质时)或在体外(例如通过在无细胞系统中使含有ald标签的蛋白质接触fge)通过fge的作用而转化(氧化)成fgly残基。用于生成本公开内容的缀合物的抗cd22多肽包括至少一个ig恒定区，例如ig重链恒定区(例如至少ch1域；至少ch1和ch2域；ch1，ch2，和ch3域；或ch1，ch2，ch3，和ch4域)，或ig轻链恒定区。此类ig多肽在本文中称作“靶ig多肽”或“靶抗cd22抗体”或“靶抗cd22ig多肽”。抗cd22抗体中引入硫酸酯酶基序的位点可以是任何方便的位点。如上所述，在一些情况中，将靶抗cd22多肽的天然氨基酸序列的修饰程度降至最低，以使插入，删除，替代(替换)，和/或添加(例如至n或c端)的氨基酸残基的数目降至最低。将靶抗cd22多肽的氨基酸序列修饰程度降至最低可将此类修饰可能对抗cd22功能和/或结构具有的影响降至最低。抗cd22抗体重链恒定区可包括任何重链同种型的ig恒定区、非天然存在的ig重链恒定区(包括共有ig重链恒定区)。ig恒定区可被修饰以包括醛标签，其中醛标签存在于ig恒定区的溶剂可及性环区内或与其相邻。ig恒定区可被1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个氨基酸，或超过16个氨基酸的插入和/或替代修饰，以提供上述硫酸酯酶基序的氨基酸序列。在一些情况下，醛标记抗cd22抗体包含醛标记ig重链恒定区(例如，至少ch1结构域；至少ch1和ch2结构域；ch1、ch2和ch3结构域；或ch1、ch2、ch3和ch4结构域)。醛标记ig重链恒定区可包括iga、igm、igd、ige、igg1、igg2、igg3或igg4同种型重链或所述重链的任何同种异型变体的重链恒定区序列，例如，人重链恒定区序列或小鼠重链恒定区序列、杂合重链恒定区、合成重链恒定区或共有重链恒定区序列等，所述重链恒定区经修饰包括至少一个可被fge修饰以产生fgly-修饰ig多肽的硫酸酯酶基序。ig重链的同种异型变体在本领域是已知的。参见，例如，jefferis和lefranc(2009)mabs1:4。在一些情况下，醛标记抗cd22抗体包含醛标记ig轻链恒定区。醛标记ig轻链恒定区可包括κ轻链、λ轻链的恒定区序列，例如，人k或λ轻链恒定区、杂合轻链恒定区、合成的轻链恒定区或共有轻链恒定区序列等，所述轻链恒定区序列经修饰包括至少一个可被fge修饰以产生fgly-修饰抗cd22抗体多肽的硫酸酯酶基序。示例性恒定区包括人γ1和γ3区域。除硫酸酯酶基序外，修饰恒定区可具有野生型氨基酸序列或其可具有与野生型氨基酸序列具有至少70％的同一性(例如，至少80％、至少90％或至少95％的同一性)的氨基酸序列。在一些实施方案中，硫酸酯酶基序位于不同于或除ig多肽重链的c-末端以外的位置。如上文中所指出的，分离的醛标记抗cd22多肽可包含经修饰以包括上述硫酸酯酶基序的重链恒定区，其中硫酸酯酶基序位于抗cd22多肽重链恒定区的表面可及性环区内或与其相邻。在一些情况下，靶抗cd22免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于对应于如下区域的一个或多个区域的igg1重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸122-127；2)氨基酸137-143；3)氨基酸155-158；4)氨基酸163-170；5)氨基酸163-183；6)氨基酸179-183；7)氨基酸190-192；8)氨基酸200-202；9)氨基酸199-202；10)氨基酸208-212；11)氨基酸220-241；12)氨基酸247-251；13)氨基酸257-261；14)氨基酸269-277；15)氨基酸271-277；16)氨基酸284-285；17)氨基酸284-292；18)氨基酸289-291；19)氨基酸299-303；20)氨基酸309-313；21)氨基酸320-322；22)氨基酸329-335；23)氨基酸341-349；24)氨基酸342-348；25)氨基酸356-365；26)氨基酸377-381；27)氨基酸388-394；28)氨基酸398-407；29)氨基酸433-451；和30)氨基酸446-451；其中氨基酸编号基于图9b中所述的人igg1的氨基酸编号。在一些情况下，靶抗cd22免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于对应于如下区域的一个或多个区域的igg1重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(人igg1恒定区；图9b中所示的序列)所列的人igg1的氨基酸编号。igg1重链的示例性表面可及性环区包括：1)astkgp(seqidno://)；2)kstsggt(seqidno://)；3)pepv(seqidno://)；4)nsgaltsg(seqidno://)；5)nsgaltsgvhtfpavlqssgl(seqidno://)；6)qssgl(seqidno://)；7)vtv；8)qty；9)tqty(seqidno://)；10)hkpsn(seqidno://)；11)epkscdkthtcppcpapellgg(seqidno://)；12)fppkp(seqidno://)；13)isrtp(seqidno://)；14)dvshedpev(seqidno://)；15)shedpev(seqidno://)；16)dg；17)dgvevhnak(seqidno://)；18)hna；19)qynst(seqidno://)；20)vltvl(seqidno://)；21)gke；22)nkalpap(seqidno://)；23)skakgqpre(seqidno://)；24)kakgqpr(seqidno://)；25)ppsrkeltkn(seqidno://)；26)ypsdi(seqidno://)；27)ngqpenn(seqidno://)；28)tppvldsdgs(seqidno://)；29)healhnhytqkslslspgk(seqidno://)；和30)slspgk(seqidno://)，如图9a和9b中所示。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序在对应于如下区域的一个或多个区域的igg2重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-6；2)氨基酸13-24；3)氨基酸33-37；4)氨基酸43-54；5)氨基酸58-63；6)氨基酸69-71；7)氨基酸78-80；8)87-89；9)氨基酸95-96；10)114-118；11)122-126；12)134-136；13)144-152；14)159-167；15)175-176；16)184-188；17)195-197；18)204-210；19)216-224；20)231-233；21)237-241；22)252-256；23)263-269；24)273-282；25)氨基酸299-302；其中氨基酸编号基于seqidno//(人igg2；也在图9b中描绘)中所示的氨基酸序列的编号。igg2重链的示例性表面可及性环区包括1)astkgp(seqidno://)；2)pcsrstsestaa(seqidno://)；3)fpepv(seqidno://)；4)sgaltsgvhtfp(seqidno://)；5)qssgly(seqidno://)；6)vtv；7)tqt；8)hkp；9)dk；10)vagps(seqidno://)；11)fppkp(seqidno://)；12)rtp；13)dvshedpev(seqidno://)；14)dgvevhnak(seqidno://)；15)fn；16)vltvv(seqidno://)；17)gke；18)nkglpap(seqidno://)；19)sktkgqpre(seqidno://)；20)pps；21)mtknq(seqidno://)；22)ypsdi(seqidno://)；23)ngqpenn(seqidno://)；24)tppmldsdgs(seqidno://)；25)gnvf(seqidno://)；和26)healhnhytqkslslspgk(seqidno://)，如图9b中所示。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序在对应于如下区域的一个或多个区域的igg3重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-6；2)氨基酸13-22；3)氨基酸33-37；4)氨基酸43-61；5)氨基酸71；6)氨基酸78-80；7)87-91；8)氨基酸97-106；9)111-115；10)147-167；11)173-177；16)185-187；13)195-203；14)210-218；15)226-227；16)238-239；17)246-248；18)255-261；19)267-275；20)282-291；21)氨基酸303-307；22)氨基酸313-320；23)氨基酸324-333；24)氨基酸350-352；25)氨基酸359-365和26)氨基酸372-377；其中氨基酸编号基于seqidno://(人igg3；也在图9b中描绘)中所示的氨基酸序列的编号。igg3重链的示例性表面可及性环区包括1)astkgp(seqidno://)；2)pcsrstsggt(seqidno://)；3)fpepv(seqidno://)；4)sgaltsgvhtfpavlqssg(seqidno://)；5)v；6)tqt；7)hkpsn(seqidno://)；8)rvelktplgd(seqidno://)；9)cprcpkp(seqidno://)；10)pkscdtpppcprcpapellgg(seqidno://)；11)fppkp(seqidno://)；12)rtp；13)dvshedpev(seqidno://)；14)dgvevhnak(seqidno://)；15)yn；16)vl；17)gke；18)nkalpap(seqidno://)；19)sktkgqpre(seqidno://)；20)ppsreemtkn(seqidno://)；21)ypsdi(seqidno://)；22)ssgqpenn(seqidno://)；23)tppmldsdgs(seqidno://)；24)gni；25)healhnr(seqidno://)；和26)slspgk(seqidno://)，如图9b中所示。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序在对应于如下区域的一个或多个区域的igg4重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-5；2)氨基酸12-23；3)氨基酸32-36；4)氨基酸42-53；5)氨基酸57-62；6)氨基酸68-70；7)氨基酸77-79；8)氨基酸86-88；9)氨基酸94-95；10)氨基酸101-102；11)氨基酸108-118；12)氨基酸122-126；13)氨基酸134-136；14)氨基酸144-152；15)氨基酸159-167；16)氨基酸175-176；17)氨基酸185-186；18)氨基酸196-198；19)氨基酸205-211；20)氨基酸217-226；21)氨基酸232-241；22)氨基酸253-257；23)氨基酸264-265；24)269-270；25)氨基酸274-283；26)氨基酸300-303；27)氨基酸399-417；其中氨基酸编号基于seqidno://(人igg4；也在图9b中描绘)所示的氨基酸序列的编号。igg4重链的示例性表面可及性环区包括1)stkgp(seqidno://)；2)pcsrstsestaa(seqidno://)；3)fpepv(seqidno://)；4)sgaltsgvhtfp(seqidno://)；5)qssgly(seqidno://)；6)vtv；7)tkt；8)hkp；9)dk；10)yg；11)cpapeflggps(seqidno://)；12)fppkp(seqidno://)；13)rtp；14)dvsqedpev(seqidno://)；15)dgvevhnak(seqidno://)；16)fn；17)vl；18)gke；19)nkglpss(seqidno://)；20)skakgqprep(seqidno://)；21)ppsqeemtkn(seqidno://)；22)ypsdi(seqidno://)；23)ng；24)nn；25)tppvldsdgs(seqidno://)；26)gnvf(seqidno://)；和27)healhnhytqkslslslgk(seqidno://)，如图9b中所示。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括如上所述的硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序在对应于如下区域的一个或多个区域的iga重链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-13；2)氨基酸17-21；3)氨基酸28-32；4)氨基酸44-54；5)氨基酸60-66；6)氨基酸73-76；7)氨基酸80-82；8)氨基酸90-91；9)氨基酸123-125；10)氨基酸130-133；11)氨基酸138-142；12)氨基酸151-158；13)氨基酸165-174；14)氨基酸181-184；15)氨基酸192-195；16)氨基酸199；17)氨基酸209-210；18)氨基酸222-245；19)氨基酸252-256；20)氨基酸266-276；21)氨基酸293-294；22)氨基酸301-304；23)氨基酸317-320；24)氨基酸329-353；其中所述氨基酸编号基于seqidno://(人iga；也在图9b中描绘)所示的氨基酸序列的编号。iga重链的示例性表面可及性环区包括1)asptspkvfplsl(seqidno://)；2)qpdgn(seqidno://)；3)vqgffpqepl(seqidno://)；4)sgqgvtarnfp(seqidno://)；5)sgdlytt(seqidno://)；6)patq(seqidno://)；7)gks；8)yt；9)chp；10)hrpa(seqidno://)；11)llgse(seqidno://)；12)glrdasgv(seqidno://)；13)ssgksavqgp(seqidno://)；14)gcys(seqidno://)；15)caep(seqidno://)；16)pe；17)sgntfrpevhllpppseelalnel(seqidno://)；18)argfs(seqidno://)；19)qgsqelpreky(seqidno://)；20)av；21)aaed(seqidno://)；22)heal(seqidno://)；和23)idrlagkpthvnvsvvmaevdgtcy(seqidno://)，如图9b中所示的。可在ig重链的此类修饰位点的这些氨基酸序列的一个或多个序列内或邻近提供硫酸酯酶基序。例如，可在这些氨基酸序列的一个或多个序列上修饰(例如其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代)ig重链多肽以在这些修饰位点的n-末端和其邻近和/或c-末端和其邻近提供硫酸酯酶基序。或者或此外，可在这些氨基酸序列的一个或多个上修饰(例如其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代)ig重链多肽以在ig重链修饰位点的任意两个残基之间提供硫酸酯酶基序。在一些实施方案中，可修饰ig重链多肽以包括两个基序，所述基序可彼此相邻，或可间隔1、2、3、4或更多个(例如，约1至约25个，约25至约50个或约50至约100个，或更多个)氨基酸。或者或此外，当天然氨基酸序列提供硫酸酯酶基序序列的一个或多个氨基酸残基时，可修饰(例如其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代)ig重链多肽氨基酸序列的修饰位点的选择的氨基酸残基以在修饰位点上提供硫酸酯酶基序。因此可修饰表面可及性环区的氨基酸序列以提供硫酸酯酶基序，其中修饰可包括插入，删除，和/或替代。例如，当修饰在ch1结构域中时，表面可及性环区可具有氨基酸序列nsgaltsg(seqidno://)，并且醛标记序列可为例如nsgalctpsrg(seqidno://)，例如，当nsgaltsg(seqidno://)序列的“ts”残基被“ctpsr”(seqidno://)替代以便硫酸酯酶基序具有序列lctpsr(seqidno://)时。作为其中修饰在ch2结构域中的另一个实例，表面可及性环区可具有氨基酸序列nkalpap(seqidno://)，并且醛标记序列可为例如nlctpsrap(seqidno://)，例如，当nkalpap(seqidno://)序列的“kal”残基被“lctpsr”(seqidno://)替代以便硫酸酯酶基序具有序列lctpsr(seqidno://)时。作为其中修饰在ch2/ch3结构域中的另一个实例，表面可及性环区可具有氨基酸序列kakgqpr(seqidno://)，并且醛标记序列可为例如kakglctpsr(seqidno://)，例如，当kakgqpr(seqidno://)序列的“gqp”残基被“lctps”(seqidno://)替代以便硫酸酯酶基序具有序列lctpsr(seqidno://)时。如上文中所指出的，分离的醛标记抗cd22ig多肽可包含经修饰以包括上述硫酸酯酶基序的轻链恒定区，其中硫酸酯酶基序存在于ig多肽轻链恒定区的表面可及性环区中或与其相邻。轻链恒定区的表面可及性环区的说明性实例示于图9a和9c中。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序存在于对应于如下区域的一个或多个区域的ig轻链恒定区的区域中或与其相邻：1)氨基酸130-135；2)氨基酸141-143；3)氨基酸150；4)氨基酸162-166；5)氨基酸163-166；6)氨基酸173-180；7)氨基酸186-194；8)氨基酸211-212；9)氨基酸220-225；10)氨基酸233-236；其中氨基酸编号基于图9c中所述的人κ轻链的氨基酸编号。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序存在于对应于如下区域的一个或多个区域的ig轻链恒定区的区域中或与其相邻：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人κ轻链；图9c中所示的氨基酸序列)。ig轻链的示例性表面可及性环区(例如，人κ轻链)包括：1)rtvaap(seqidno://)；2)pps；3)gly(参见，例如，图9c中描绘的人κ轻链序列的位置150上的gly)；4)yprea(seqidno://)；5)prea(seqidno://)；6)dnalqsgn(seqidno://)；7)teqdskdst(seqidno://)；8)hk；9)hqglss(seqidno://)；和10)rgec(seqidno://)，如图9a和9c中所示。igλ轻链的示例性表面可及性环区包括qpkaap(seqidno://)，pps，nk，dfypgav(seqidno://)，dsspvkag(seqidno://)，ttp，sn，hks，eg，和aptecs(seqidno://)，如图9c中所示。在一些情况下，靶免疫球蛋白经修饰以包括上述硫酸酯酶基序，其中修饰包括一处或多处氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于对应于如下区域的一个或多个区域的大鼠ig轻链恒定区的区域内或与其相邻：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸121-22；4)氨基酸31-37；5)氨基酸44-51；6)氨基酸55-57；7)氨基酸61-62；8)氨基酸81-83；9)氨基酸91-92；10)氨基酸102-105；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9c中描绘的序列)中所示的大鼠轻链的氨基酸编号。在一些情况中，将硫酸酯酶基序引入抗cd22重链恒定区的ch1区中。在一些情况中，在抗cd22重链的c端处或附近(例如在1至10个氨基酸内)引入硫酸酯酶基序。在一些情况中，在轻链恒定区中引入硫酸酯酶基序。在一些情况中，将硫酸酯酶基序引入抗cd22重链恒定区的ch1区中，例如图9a中所绘igg1重链氨基酸序列的氨基酸121-219内。例如，在一些情况中，将硫酸酯酶基序引入氨基酸序列：astkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkve(seqidno://)中。例如，在一些这些实施方案中，将氨基酸序列galtsgvh(seqidno://)修饰成galctpsrgvh(seqidno://)，其中硫酸酯酶基序是lctpsr(seqidno://)。在一些情况中，在抗cd22重链的c端处或附近引入硫酸酯酶基序，例如，在抗cd22重链的c端1个氨基酸，2个氨基酸，3个氨基酸，4个氨基酸，5个氨基酸，6个氨基酸，7个氨基酸，8个氨基酸，9个氨基酸，或10个氨基酸内引入硫酸酯酶基序。作为一个非限制性例子，可以用氨基酸序列slctpsrgs(seqidno://)替换抗cd22重链的c端赖氨酸残基。在一些情况中，将硫酸酯酶基序引入抗cd22抗体的轻链恒定区中。作为一个非限制性例子，在一些情况中，将硫酸酯酶基序引入抗cd22抗体的轻链恒定区中，其中硫酸酯酶基序在kvdnal(seqidno://)的c端和/或在qsgnsq(seqidno://)的n端。例如，在一些情况中，硫酸酯酶基序是lctpsr(seqidno://)，且抗cd22轻链包含氨基酸序列kvdnallctpsrqsgnsq(seqidno://)。例示性抗cd22抗体在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含选自iydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)的重链cdr的抗体竞争结合cd22表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号是基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含选自rasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的轻链cdr的抗体竞争结合cd22表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸122-127；2)氨基酸137-143；3)氨基酸155-158；4)氨基酸163-170；5)氨基酸163-183；6)氨基酸179-183；7)氨基酸190-192；8)氨基酸200-202；9)氨基酸199-202；10)氨基酸208-212；11)氨基酸220-241；12)氨基酸247-251；13)氨基酸257-261；14)氨基酸269-277；15)氨基酸271-277；16)氨基酸284-285；17)氨基酸284-292；18)氨基酸289-291；19)氨基酸299-303；20)氨基酸309-313；21)氨基酸320-322；22)氨基酸329-335；23)氨基酸341-349；24)氨基酸342-348；25)氨基酸356-365；26)氨基酸377-381；27)氨基酸388-394；28)氨基酸398-407；29)氨基酸433-451；和30)氨基酸446-451；其中氨基酸编号基于图9b中所绘人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号是基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1-847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体与包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)和vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)的抗体竞争结合cd22表位(例如图8a-8c中描绘的cd22氨基酸序列的氨基酸1至847内的，氨基酸1-759内的，氨基酸1-751，或氨基酸1-670内的表位)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vhcdriydms(vhcdr1；seqidno://)，yissgggttyypdtvkg(vhcdr2；seqidno://)，和hsgygssygvlfay(vhcdr3；seqidno://)和vlcdrrasqdisnyln(vlcdr1；seqidno://)，ytsilhs(vlcdr2；seqidno://)，和qqgntlpwt(vlcdr3；seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含如下氨基酸序列的抗cd22vh区中存在的vhcdr：evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含包含如下氨基酸序列的抗cd22vl区中存在的vlcdr：diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)中存在的vhcdr和diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)中存在的vlcdr。在一些情况中，该抗cd22抗体是人源化的。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代；例如，其中硫酸酯酶基序位于ig卡帕恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸12-14；3)氨基酸21；4)氨基酸33-37；5)氨基酸34-37；6)氨基酸44-51；7)氨基酸57-65；8)氨基酸83-83；9)氨基酸91-96；10)氨基酸104-107；其中氨基酸编号基于seqidno://(人卡帕轻链；图9c中所绘氨基酸序列)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vh氨基酸序列evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vl氨基酸序列diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)。在一些情况中，合适的抗cd22抗体包含vh氨基酸序列evqlvesggglvkpggslrlscaasgfafsiydmswvrqapgkglewvayissgggttyypdtvkgrftisrdnaknslylqmsslraedtamyycarhsgygssygvlfaywgqgtlvtvss(seqidno://)；和vl氨基酸序列diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdisnylnwyqqkpgkavklliyytsilhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqqedfatyfcqqgntlpwtfgggtkveikr(seqidno://)。在一些情况中，该抗cd22抗体经过修饰包括如上所述硫酸酯酶基序，其中该修饰包括一个或多个氨基酸残基插入，删除，和/或替代。在某些实施方案中，硫酸酯酶基序位于igg1重链恒定区中对应于下述一项或多项的区域内或附近：1)氨基酸1-6；2)氨基酸16-22；3)氨基酸34-47；4)氨基酸42-49；5)氨基酸42-62；6)氨基酸34-37；7)氨基酸69-71；8)氨基酸79-81；9)氨基酸78-81；10)氨基酸87-91；11)氨基酸100-121；12)氨基酸127-131；13)氨基酸137-141；14)氨基酸149-157；15)氨基酸151-157；16)氨基酸164-165；17)氨基酸164-172；18)氨基酸169-171；19)氨基酸179-183；20)氨基酸189-193；21)氨基酸200-202；22)氨基酸209-215；23)氨基酸221-229；24)氨基酸22-228；25)氨基酸236-245；26)氨基酸217-261；27)氨基酸268-274；28)氨基酸278-287；29)氨基酸313-331；和30)氨基酸324-331；其中氨基酸编号基于seqidno://(图9b中所绘人igg1恒定区)中所列人igg1的氨基酸编号。用于缀合至多肽的药物本公开内容提供了药物-多肽缀合物。药物的例子包括小分子药物，诸如癌症化疗剂。例如，在多肽是对肿瘤细胞具有特异性的抗体(或其片段)的情况中，可以如本文中描述的那样修饰抗体以包括经修饰的氨基酸，它可以随后缀合至癌症化疗剂，诸如影响微管的药剂。在某些实施方案中，药物是具有抗增殖活性的影响微管的药剂，诸如美登木素生物碱。在某些实施方案中，药物是如下结构的美登木素生物碱：其中指示式(i)中美登木素生物碱和接头l之间的附着点。“附着点”意味着符号指示式(i)中美登木素生物碱的n和接头l之间的键。例如，在式(i)中，w1是美登木素生物碱，诸如上述结构的美登木素生物碱，其中指示美登木素生物碱和接头l之间的附着点。如上所述，在某些实施方案中，l是以式-(l1)a-(l2)b-(l3)c-(l4)d-描述的接头，其中l1，l2，l3和l4每个独立是接头单元。在某些实施方案中，l1附着至偶联模块，诸如肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。在某些实施方案中，l2，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，l3，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，l4，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。如上所述，在某些实施方案中，接头-(l1)a-(l2)b-(l3)c-(l4)d-以式-(t1-v1)a-(t2-v2)b-(t3-v3)c-(t4-v4)d-描述，其中a，b，c和d每个独立是0或1，其中a，b，c和d的和是1至4。在某些实施方案中，如上所述，l1附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。照此，在某些实施方案中，t1附着至肼基-吲哚基或肼基-吡咯并-吡啶基偶联模块(例如，如上文式(i)中所示)。在某些实施方案中，v1附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，如上所述，l2，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。照此，在某些实施方案中，t2，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)，或v2，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，如上所述，l3，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。照此，在某些实施方案中，t3，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)，或v3，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。在某些实施方案中，如上所述，l4，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。照此，在某些实施方案中，t4，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)，或v4，若存在，则附着至w1(美登木素生物碱)。本公开内容的实施方案包括如下缀合物，其中多肽(例如抗cd22抗体)缀合至一个或多个药物模块(例如美登木素生物碱)，诸如2个药物模块，3个药物模块，4个药物模块，5个药物模块，6个药物模块，7个药物模块，8个药物模块，9个药物模块，或10个或更多个药物模块。药物模块可以在多肽中的一个或多个位点处缀合至多肽，如本文中描述的。在某些实施方案中，缀合物具有0.1至10，或0.5至10，或1至10，诸如1至9，或1至8，或1至7，或1至6，或1至5，或1至4，或1至3，或1至2范围中的平均药物对抗体比(dar)(摩尔比)。在某些实施方案中，缀合物具有1至2，诸如1，1.1，1.2，1.3，1.4，1.5，1.6，1.7，1.8，1.9或2的平均dar。在某些实施方案中，缀合物具有1.6至1.9的平均dar。在某些实施方案中，缀合物具有1.7的平均dar。平均意味着算术均值。配制剂可以以多种不同方式配制本公开内容的缀合物(包括抗体缀合物)。一般而言，在缀合物是多肽-药物缀合物的情况下，以与缀合至多肽的药物，要治疗的状况，和要使用的施用路径相容的方式配制缀合物。可以以任何合适的形式(例如以药学可接受盐的形式)提供缀合物(例如多肽-药物缀合物)，而且可以配制成用于任何合适的施用路径，例如口服，表面或胃肠外施用。在缀合物作为液体可注射剂提供的情况下(诸如在它们静脉内施用或直接施用入组织中的那些实施方案中)，可以作为即用剂型，或作为由药学可接受载剂和赋形剂构成的可重建的储存稳定的粉剂或液体来提供缀合物。用于配制缀合物的方法可以自容易得到的那些方法加以适应。例如，可以在包含治疗有效量的缀合物和药学可接受载剂(例如盐水)的药学组合物中提供缀合物。药学组合物可以任选地包括其它添加剂(例如缓冲剂，稳定剂，防腐剂，等等)。在一些实施方案中，配制剂适合施用于哺乳动物，诸如适合施用于人的那些。治疗方法本公开内容的多肽-药物缀合物可用于治疗受试者中适合通过施用亲本药物(即缀合至多肽之前的药物)来治疗的疾患或疾病。“治疗”意味着至少实现与困扰宿主的疾患有关的症状的改善，其中改善在广义使用，指的是至少降低与所治疗的疾患有关的参数(例如症状)的量级。这样的话，治疗还包括病理疾患或至少与其有关的症状完全受到抑制(例如防止发生)，或停止(例如终止)的情况，使得宿主不再罹患所述疾患，或至少表征所述疾患的症状。如此，治疗包括：(i)预防，即降低临床症状发生的风险，包括引起临床症状不发生，例如防止疾病进展至有害的状态；(ii)抑制，即阻滞临床症状发生或进一步发展，例如减轻或完全抑制活动性疾病；和/或(iii)缓解，即引起临床症状消退。在癌症的背景中，术语“治疗”包括下述任一或全部：降低实体瘤的生长，抑制癌细胞复制，降低总体肿瘤负荷，和改善一种或多种与癌症有关的症状。要治疗的受试者可以是需要治疗的受试者，其中要治疗的宿主是适合使用亲本药物治疗的宿主。因而，多种受试者可以适合使用本文中公开的多肽-药物缀合物来治疗。一般而言，此类受试者是“哺乳动物”，其中人是感兴趣的。其它受试者可以包括驯养的宠物(例如犬和猫)，牲畜(例如牛，猪，山羊，马，等等)，啮齿动物(例如小鼠，豚鼠，和大鼠，例如在疾病的动物模型中)，以及非人灵长动物(例如黑猩猩和猴)。所施用的多肽-药物缀合物的量最初可以基于亲本药物的剂和/或剂量方案的指导来确定。一般而言，多肽-药物缀合物能给所结合的药物提供靶向投递和/或延长的血清半衰期，如此提供剂量方案中减少的剂或减少的施用中至少一项。如此，相对于在本公开内容的多肽-药物缀合物中缀合之前的亲本药物，多肽-药物缀合物能提供剂量方案中减少的剂和/或减少的施用。而且，如上文所述，因为多肽-药物缀合物能提供受控化学计量的药物投递，所以多肽-药物缀合物的剂量可以基于以每个多肽-药物缀合物基础上提供的药物分子的数目来计算。在一些实施方案中，施用多剂多肽-药物缀合物。多肽-药物缀合物的施用频率可以随多种因素任一而变化，例如症状的严重程度，受试者的状况，等。例如，在一些实施方案中，多肽-药物缀合物每月一次，每月两次，每月三次，每隔一周，每周一次(qwk)，每周两次，每周三次，每周四次，每周五次，每周六次，每隔一天，每天(qd/od)，每天两次(bds/qid)，或每天三次(tds/tid)施用，等。治疗癌症的方法本公开内容提供了用于将癌症化疗剂投递至具有癌症的个体的方法。所述方法对于治疗极其多种癌症是有用的，包括癌瘤，肉瘤，白血病，和淋巴瘤。能使用主题方法治疗的癌瘤包括但不限于食道癌，肝细胞癌，基底细胞癌(皮肤癌的一种形式)，鳞状细胞癌(各种组织)，膀胱癌(包括移行细胞癌(膀胱的恶性肿瘤))，支气管源性癌，结肠癌，结直肠癌，胃癌，肺癌(包括肺的小细胞癌和非小细胞癌)，肾上腺皮质癌，甲状腺癌，胰腺癌，乳腺癌，卵巢癌，前列腺癌，腺癌，汗腺癌，皮脂腺癌，乳头状癌，乳头状腺癌，囊腺癌，髓样癌，肾细胞癌，导管原位癌或胆管癌，绒毛膜癌，精原细胞瘤，胚胎性癌，威尔姆氏瘤(wilm'stumor)，宫颈癌，子宫癌，睾丸癌，骨源性癌，上皮癌，和鼻咽癌，等。能使用主题方法治疗的肉瘤包括但不限于纤维肉瘤，粘液肉瘤，脂肪肉瘤，软骨肉瘤，脊索瘤，骨源性肉瘤，骨肉瘤，血管肉瘤，内皮肉瘤，淋巴管肉瘤，淋巴管内皮肉瘤，滑膜瘤，间皮瘤，尤文氏肉瘤(ewing'ssarcoma)，平滑肌肉瘤，横纹肌肉瘤，和其它软组织肉瘤。能使用主题方法治疗的其它实体肿瘤包括但不限于神经胶质瘤，星形细胞瘤，成神经管细胞瘤，颅咽管瘤，室管膜瘤，松果体瘤，成血管细胞瘤，听神经瘤，少突神经胶质瘤，脑膜瘤，黑素瘤，成神经细胞瘤，和成视网膜细胞瘤。能使用主题方法治疗的白血病包括但不限于：a)慢性骨髓增生综合症(多能造血干细胞的肿瘤性病症)；b)急性骨髓性白血病(多能造血干细胞或限制谱系潜能的造血细胞的肿瘤性转化)；c)慢性淋巴细胞性白血病(cll；免疫学上不成熟且功能上不胜任的小淋巴细胞的克隆性增殖)，包括b细胞cll，t细胞cll，前淋巴细胞性白血病，和毛细胞白血病；和d)急性成淋巴细胞性白血病(特征为成淋巴细胞的积累)。能使用主题方法治疗的淋巴瘤包括但不限于b细胞淋巴瘤(例如伯基特氏淋巴瘤(burkitt'slymphoma))；霍奇金氏淋巴瘤(hodgkin'slymphoma)；非霍奇金氏b细胞淋巴瘤(non-hodgkin'sbcelllymphoma)；等等。实施例提出以下实施例以向本领域普通技术人员提供如何生成和使用本发明的全面公开和描述，并非意图限制发明人视为其发明的范围，也并非意图宣称下面的实验是所实施的所有或唯一实验。已经做出了努力来确保关于所用数值(例如量，温度，等)的准确性，但是一些实验误差和偏差应当考虑在内。除非另有指示，份是重量份，分子量是重量平均分子量，温度是摄氏度，而压力是处于或接近大气压。“平均值”表示算术均值。可以使用标准缩写，例如，bp，碱基对；kb，千碱基；pl，皮升；s或sec，秒；min，分钟；h或hr，小时；aa，氨基酸；kb，千碱基；bp，碱基对；nt，核苷酸；i.m.，肌肉内；i.p.，腹膜内；s.c.，皮下；等等。通用合成规程提供对于合成所公开的化合物有用的普遍知道的化学合成方案和条件的许多一般参考文献是可得的(参见例如smithandmarch,march’sadvancedorganicchemistry:reactions,mechanisms,andstructure,fifthedition,wiley-interscience,2001；或vogel,atextbookofpracticalorganicchemistry,includingqualitativeorganicanalysis,fourthedition,newyork:longman,1978)。本文所述化合物可以通过本领域已知的任何纯化方案来纯化，包括层析，诸如hplc，制备型薄层层析，急骤柱层析和离子交换层析。可以使用任何合适的静止相，包括正相和反相以及离子型树脂。在某些实施方案中，所公开的化合物是经由硅胶和/或氧化铝层析来纯化的。参见例如introductiontomodernliquidchromatography,2ndedition,ed.l.r.snyderandj.j.kirkland,johnwileyandsons,1979；及thinlayerchromatography,ed.e.stahl,springer-verlag,newyork,1969。在用于制备主题化合物的任何工艺期间，保护任何关注分子上的敏感性或反应性基团可能是必需和/或想要的。这可以借助如标准著作中描述的常规保护基团来实现，诸如j.f.w.mcomie,“protectivegroupsinorganicchemistry”,plenumpress,londonandnewyork1973；t.w.greeneandp.g.m.wuts,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,thirdedition,wiley,newyork1999；“thepeptides”；volume3(editors:e.grossandj.meienhofer),academicpress,londonandnewyork1981；“methodenderorganischenchemie”,houben-weyl,4thedition,vol.15/l,georgthiemeverlag,stuttgart1974；h.-d.jakubkeandh.jescheit,“aminosauren,peptide,proteine”,verlagchemie,weinheim,deerfieldbeach,andbasel1982；和/或jochenlehmann,“chemiederkohlenhydrate:monosaccharideandderivate”,georgthiemeverlag,stuttgart1974。可以在方便的后续阶段使用本领域已知方法去除保护基团。可以经由多种不同合成途径使用商品化起始材料和/或通过常规合成方法制备的起始材料来合成主题化合物。下面的方案中描述了可用于合成本文中公开的化合物的合成途径的多个例子。实施例1依照下文所示方案1合成含有4-氨基-哌啶(4ap)基团的接头。方案14-氧代哌啶-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯(200)的合成对带有磁搅动棒的100ml圆底烧瓶添加哌啶-4-酮氢氯化物单水合物(1.53g，10mmol)，fmoc氯化物(2.58g，10mmol)，碳酸钠(3.18g，30mmol)，二氧杂环己烷(20ml)，和水(2ml)。于室温搅动反应混合物1小时。将混合物用etoac(100ml)稀释并用水(1x100ml)萃取。将有机层在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。所得材料在真空中干燥以产生化合物200，为白色固体(3.05g，95％产率)。1hnmr(cdcl3)δ7.78(d,2h,j＝7.6),7.59(d,2h,j＝7.2),7.43(t,2h,j＝7.2),7.37(t,2h,j＝7.2),4.60(d,2h,j＝6.0),4.28(t,2h,j＝6.0),3.72(br,2h),3.63(br,2h),2.39(br,2h),2.28(br,2h)。c20h20no3的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算322.4；发现：322.2。4-((2-(2-(3-(叔丁氧基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯(201)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加哌啶酮200(642mg，2.0mmol)，h2n-peg2-co2t-bu(560mg，2.4mmol)，分子筛(经过活化的粉，500mg)，和1,2-二氯乙烷(5ml)。于室温搅动混合物1小时。对反应混合物添加三乙酸基硼氢化钠(845mg，4.0mmol)。于室温搅动混合物5天。用etoac稀释所得混合物。将有机层用饱和nahco3(1x50ml)，和盐水(1x50ml)清洗，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩以产生化合物201，为油，在没有进一步纯化的情况下结转。13-(1-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)哌啶-4-基)-2,2-二甲基-4,14-二氧代-3,7,10-三氧杂-13-氮杂十七烷-17-酸(202)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加来自先前步骤的n-fmoc-哌啶-4-氨基-peg2-co2t-bu(201)，琥珀酸酐(270mg，2.7mmol)，和二氯甲烷(5ml)。于室温搅动混合物18小时。在etoac和饱和nahco3之间分配反应混合物。用etoac(3x)萃取水层。用hcl(1m)酸化水层直至ph～3。用dcm萃取水层(3x)。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过c18急骤层析(洗脱液10-100％mecn/含0.1％乙酸的水)纯化反应混合物。将含有产物的级分在减压下浓缩，然后与甲苯(3x50ml)一起共沸以去除残余的乙酸以提供534mg(42％，2个步骤)化合物202，为白色固体。1hnmr(dmso-d6)δ11.96(br,1h),7.89(d,2h,j＝7.2),7.63(d,2h,j＝7.2),7.42(t,2h,j＝7.2),7.34(t,2h,j＝7.2),4.25-4.55(m,3h),3.70-4.35(m,3h),3.59(t,2h,j＝6.0),3.39(m,5h),3.35(m,3h),3.21(br,1h),2.79(br,2h),2.57(m,2h),2.42(q,4h,j＝6.0),1.49(br,3h),1.37(s,9h)。c35h47n2o9的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算639.3；发现639.2。(2s)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-8-(哌啶-4-基)-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(203)的合成对酯202(227mg，0.356mmol)，二异丙基乙基胺(174μl，1.065mmol)，n-脱乙酰基美登木素124(231mg，0.355mmol)在2mldmf中的溶液添加pyaop(185mg，0.355mmol)。搅动溶液30分钟。将哌啶(0.5ml)添加至反应混合物并再搅动20分钟。使用梯度0-100％乙腈:水通过c18反相层析纯化粗制反应混合物，提供203.2mg(55％，2个步骤)化合物203。(2s)-8-(1-(3-(2-((2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二甲基-4,7-二氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷二酸17-(叔丁基)酯1-((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)酯(204)的合成搅动哌啶203(203.2mg，0.194mmol)，酯12(126.5mg，0.194mmol)，2,4,6-三甲基吡啶(77μl，0.582mmol)，hoat(26.4mg，0.194mmol)在1mldmf中的溶液30分钟。使用梯度0-100％乙腈:含0.1％甲酸的水通过c18反相层析纯化粗制反应，提供280.5mg(97％产率)化合物204。c81h106cln8o18的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1513.7；发现1514.0。(2s)-8-(1-(3-(2-((2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(205)的合成对化合物204(108mg，0.0714mmol)在500μl无水dcm中的溶液添加357μlsncl4在dcm中的1m溶液。将异质混合物搅动1小时，然后使用梯度0-100％乙腈:含0.1％甲酸的水通过c18反相层析纯化，提供78.4mg(75％产率)化合物205。c77h96cln8o18的ms(esi)m/z：[m-h]-，计算1455.7；发现1455.9。实施例2依照下文所示方案2合成含有4-氨基-哌啶(4ap)基团的接头。方案24-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(210)的合成对带有磁搅动棒的100ml圆底烧瓶添加哌啶-4-酮氢氯化物单水合物(1.53g，10mmol)，一缩二碳酸二叔丁酯(2.39g，11mmol)，碳酸钠(1.22g，11.5mmol)，二氧杂环己烷(10ml)，和水(1ml)。于室温搅动反应混合物1小时。将混合物用水(100ml)稀释并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水清洗，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。在真空中干燥所得材料以产生1.74g(87％)化合物210，为白色固体。1hnmr(cdcl3)δ3.73(t,4h,j＝6.0),2.46(t,4h,j＝6.0),1.51(s,9h)。c10h18no3的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算200.3；发现200.2。4-((2-(2-(3-(叔丁氧基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(211)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(399mg，2mmol)，h2n-peg2-coot-bu(550mg，2.4mmol)，分子筛(经过活化的粉，200mg)，和1,2-二氯乙烷(5ml)。于室温搅动混合物1小时。对反应混合物添加三乙酸基硼氢化钠(845mg，4mmol)。于室温搅动混合物3天。在etoac和饱和nahco3水溶液之间分配所得混合物。将有机层用盐水清洗，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩以提供850mg化合物211，为粘性油。c21h41n2o6的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算417.3；发现417.2。13-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2,2-二甲基-4,14-二氧代-3,7,10-三氧杂-13-氮杂十七烷-17-酸(212)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加4-((2-(2-(3-(叔丁氧基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯211(220mg，0.5mmol)，琥珀酸酐(55mg，0.55mmol)，4-(二甲基氨基)吡啶(5mg，0.04mmol)，和二氯甲烷(3ml)。于室温搅动混合物24小时。通过急骤层析(洗脱液50-100％etoac/己烷)部分纯化反应混合物以产生117mg化合物212，为清澈油，在没有进一步表征的情况下结转。c25h45n2o9的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算517.6；发现517.5。(2s)-8-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2,3-二甲基-4,7-二氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷二酸17-(叔丁基)酯1-((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)酯(213)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加13-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2,2-二甲基-4,14-二氧代-3,7,10-三氧杂-13-氮杂十七烷-17-酸212(55mg，0.1mmol)，n-脱酰基美登木素124(65mg，0.1mmol)，hatu(43mg，0.11mmol)，dmf(1ml)，和二氯甲烷(0.5ml)。于室温搅动混合物8小时。通过c18急骤层析(洗脱液5-100％mecn/水)直接纯化反应混合物以给出18mg(16％)化合物213，为白色薄膜。c57h87cln5o17的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1148.6；发现1148.7。(2s)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-8-(哌啶-4-基)-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(214)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加美登木素生物碱213(31mg，0.027mmol)和二氯甲烷(1ml)。将溶液冷却至0℃并添加四氯化锡(iv)(1.0m溶液，在二氯甲烷中，0.3ml，0.3mmol)。于0℃搅动反应混合物1小时。通过c18急骤层析(洗脱液5-100％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生16mg(60％)化合物214，为白色固体(16mg，60％产率)。c48h71cln5o15的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算992.5；发现992.6。(2s)-8-(1-(3-(2-((2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(215)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加美登木素生物碱214(16mg，0.016mmol)，1,2-二甲基-2-((1-(3-氧代-3-(全氟苯氧基)丙基)-1h-吲哚-2-基)甲基)肼-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯(5)(13mg，0.02mmol)，dipea(8μl，0.05mmol)，和dmf(1ml)。于室温搅动溶液18小时。通过c18急骤层析(洗脱液5-100％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生18mg(77％)化合物215，为白色固体。c77h98cln8o18的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1457.7；发现1457.9。(2s)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-8-(1-(3-(2-((1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(216)的合成对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加美登木素生物碱215(18mg，0.012mmol)，哌啶(20μl，0.02mmol)，和dmf(1ml)。于室温搅动溶液20分钟。通过c18急骤层析(洗脱液1-60％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生15mg(98％)化合物216(在本文中也称作hips-4ap-美登木素或hips-4-氨基-哌啶-美登木素)，为白色固体。c62h88cln8o16的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1235.6；发现1236.0。实施例3实验规程通用的实施了实验来创建位点特异性缀合的抗体-药物缀合物(adc)。位点特异性adc生成包括将非天然氨基酸甲酰甘氨酸(fgly)并入蛋白质序列。为了安置fgly(图1)，使用标准分子生物学克隆技术在抗体重或轻链的保守区中的期望位置处插入短共有序列cxpxr，其中x是丝氨酸，苏氨酸，丙氨酸，或甘氨酸。在共表达甲酰甘氨酸生成酶(fge)的细胞中重组生成这种“带标签的”构建物，该酶共翻译地将标签内的半胱氨酸转变成fgly残基，生成醛官能团(在本文中也称作醛标签)。醛官能团充当生物正交缀合的化学把手。使用肼基-异-pictet-spengler(hips)连接将载荷(例如药物，诸如细胞毒素(例如美登木素))连接至fgly，导致细胞毒素载荷和抗体之间形成稳定的共价c-c键。此c-c键预期对adc在循环和fcrn再循环期间遭遇的生理学相关条件(例如蛋白酶，低ph，和还原剂)是稳定的。可以在多个位置生成携带醛标签的抗体。实施了实验来测试于重链c端(ct)插入醛标签的影响。对通过经hips接头缀合至美登木素载荷而生成的所得adc实施了生物物理和功能表征。带标签的抗体的克隆，表达，和纯化使用标准分子生物学技术于重链c端(ct)插入醛标签序列。对于小规模生成，用人fge表达构建物转染cho-s细胞并使用过表达fge的细胞的集合进行抗体的瞬时生成。对于大规模生成，使用gpex技术(catalent，inc.,somerset，nj)来生成过表达人fge的克隆细胞系(gpex)。然后，使用fge克隆来生成表达抗体的细胞的大批稳定集合。使用蛋白a层析(mabselect，gehealthcarelifesciences,pittsburgh，pa)自条件化培养基纯化抗体。将纯化后的抗体骤冻并保存于-80℃直至进一步使用。生物缀合，纯化，和hplc分析学于37℃在含有0.85％dma的50mm柠檬酸钠，50mmnaclph5.5中将c末端带醛标签的αcd22抗体(15mg/ml)缀合至hips-4ap-美登木素(8个摩尔当量的药物:抗体)达72小时。使用制备规模的疏水相互作用层析(hic；gehealthcare17-5195-01)去除未缀合的抗体，流动相a：1.0m硫酸铵，25mm磷酸钠ph7.0，而流动相b：25％异丙醇，18.75mm磷酸钠ph7.0。使用33％b的等度梯度来洗脱未缀合的材料，接着使用41-95％b的线性梯度来洗脱单和双缀合种类。为了测定最终产物的dar，通过分析性hic(tosoh#14947，grovecity，oh)检查adc，流动相a：1.5m硫酸铵，25mm磷酸钠ph7.0，而流动相b：25％异丙醇，18.75mm磷酸钠ph7.0。为了测定聚集，使用分析性大小排阻层析(sec；tosoh#08541)分析样品，流动相为300mmnacl，25mm磷酸钠ph6.8。结果如上所述将经修饰于重链c端(ct)含有醛标签的αcd22抗体缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷。一旦缀合反应完成，通过制备性hic去除未缀合的抗体并通过切向流过滤在缓冲液交换期间去除剩余游离药物。反应具有高产率，缀合效率≥84％且总产率>70％。所得adc具有1.6-1.9的药物对抗体比(dar)且单体占优势。图2-5显示来自代表性粗制反应和经过纯化的adc的dar，是通过hic和反相plrp层析测定的，而且显示了单体完整性，是通过sec测定的。图2显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的疏水相互作用柱(hic)迹线。图2指示粗制dar通过hic测定为1.68。图3显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的hic迹线。图3指示最终dar通过hic测定为1.77。图4显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的反相层析(plrp)迹线。图4指示最终dar通过plrp测定为1.81。图5显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的带醛标签的抗cd22抗体的分析性大小排阻层析(sec)分析的图。如图5所示，分析性sec指示最终产物为98.2％单体。体外细胞毒性cd22阳性b细胞淋巴瘤细胞系ramos和wsu-dlcl2分别自atcc和dsmz细胞库获得。细胞在补充有10％胎牛血清(invitrogen，grandisland，ny)和glutamax(invitrogen)的rpmi-1640培养基(cellgro，manassas，va)中维持。分配前24小时，将细胞传代以确保对数期生长。在分配那天，在90μl补充有10iu青霉素和10μg/ml链霉素的普通生长培养基(cellgro)中将5000个细胞/孔接种到96孔板上。以各种浓度用10μl稀释的分析物处理细胞，并将板于37℃在5％co2气氛中温育。5天后，添加100μl/孔celltiter-glo试剂(promega，madison，wi)，并使用moleculardevicesspectramaxm5读板仪测量发光。使用graphpadprism软件进行数据分析。结果与游离美登木素相比，αcd22cthips-4ap-美登木素在体外展现非常有力的针对wsu-dlcl2和ramos细胞的活性(图6)。adc和游离药物针对wsu-dlcl2细胞的ic50浓度分别为0.018和0.086nm，针对ramos细胞的ic50浓度分别为0.007和0.040nm。图6a显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对wsu-dlcl2细胞的体外效力的图(％存活力对log抗体-药物缀合物(adc)浓度(nm))。图6b显示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对ramos细胞的体外效力的图(％存活力对log抗体-药物缀合物(adc)浓度(nm))。异种移植物研究给雌性icrscid小鼠(8只/组)皮下接种5x106个wsu-dlcl2细胞。当肿瘤达到平均262mm3时开始处理，此时对动物静脉内给药单独的媒介或ct带标签的αcd22hips-4ap-美登木素(10mg/kg)。每4天进行给药，总共4剂(q4dx4)。一周两次对动物监测体重和肿瘤尺寸。当肿瘤达到平均2000mm3时对动物处以安乐死。结果媒介对照组中的动物的中值终点前时间是16天；因此，计算那天的肿瘤生长抑制(tgi％)。tgi％以下式定义：tgi(％)＝(tv对照组–tv处理组)/tv对照组x100其中tv是肿瘤体积。给药αcd22hips-4ap-美登木素的动物在第16天展现90％tgi，8个肿瘤中的5个经历完全消退(图7)。这些完全消退中的3例直至研究结束(第58天)是持久的。图7显示指示于c端(ct)缀合至附着至hips-4ap接头的美登木素载荷的抗cd22adc针对wsu-dlcl2异种移植物模型的体内功效的图(均值肿瘤体积(mm3)对天)。图7中的垂直箭指示给药，每4天发生，总共4剂(q4dx4)。实施例4导言在美国血液学衍生的肿瘤构成所有新诊断的癌症病例的～10％。在这些中，非霍奇金淋巴瘤(nhl)名称描述一组多样的癌症，全体排名全世界前10位最常诊断的癌症。虽然长期存活趋势正在得到改善，但是对于治疗来帮助具有复发性或顽固性疾病的患者仍然有显著未满足的临床需求，一个原因是经由异型生物质泵(xenobioticpump)，诸如mdr1上调的药物流出。生成了一种位点特异性缀合的对mdr1介导的流出有抗性的靶向cd22且携带不可切割的美登木素载荷的抗体-药物缀合物。构建物针对cd22+nhl异种移植物是有效的且能在食蟹猴中以60mg/kg重复给药而没有观察到的不利影响。总之，数据指示这种药物具有有效用于已经发生针对在先疗法的mdr1相关抗性的具有cd22+肿瘤的患者的潜力。cd22是一种经过临床验证的nhl和all治疗的靶标。依照本公开文本的抗cd22抗体-药物缀合物(adc)可用于治疗复发性/顽固性nhl和all患者。材料和方法使用醛标签技术将抗cd22抗体位点特异性缀合至不可切割的美登木素载荷。在体外在生物物理学上和在功能上表征adc。然后，使用两种异种移植物模型在小鼠中测定体内功效并在大鼠和食蟹猴二者中实施毒性研究。在猴中进行药效学研究，而且药动学和毒动学研究比较功效和毒性研究中的总adc暴露。结果adc在体内是非常有力的，甚至针对已经构造成过表达流出泵mdr1的细胞系。构建物以10mg/kgx4剂针对nhl异种移植物肿瘤模型是有效的，而且在食蟹猴毒性研究中，adc以60mg/kg给药两次而没有观察到不利影响。以这些剂量(如通过auc0-无穷评估的)对总adc的暴露指示实现功效所需要的暴露低于可耐受限度。最后，在接受处理的猴中检查药效学应答证明了b细胞隔室得到选择性消减，指示adc消除靶定细胞而无显著的脱靶毒性。结果指示adc可有效用于已经发生针对在先疗法的mdr1相关抗性的具有cd22+肿瘤的患者。实施例5导言白血病，淋巴瘤，和骨髓瘤在人群中高度流行，在2015年期间在美国占到新诊断的癌症病例的～10％。在这些患者中，b细胞衍生的恶性构成一个多样大组，包括非霍奇金淋巴瘤(nhl)，慢性淋巴细胞性白血病(cll)，和急性成淋巴细胞性白血病(all)。类似地，作为一个范畴，nhl指派约60种淋巴瘤子集，其中约85％是b细胞衍生的，包括弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)，滤泡性淋巴瘤(fl)，和套细胞淋巴瘤(mcl)。共同地，nhl疾病在观察到的最常见癌症类型中，在2012年，在美国排名第7最常见癌症，在全世界排名第10最常见诊断的癌症。虽然对于大多数血癌诊断长期趋势显示5年存活率的改善，但是仍然有显著未满足的临床需求，2004至2010年诊断的16％的cll，30％的all，和30％的nhl患者未能达到5年存活终点。cd22是一种b细胞谱系局限性细胞表面糖蛋白，在大多数b细胞血液学恶性上表达，但是在造血干细胞，记忆b细胞，或其它正常非造血组织上不表达。它的表达样式和快速内在化动力学使之成为抗体-药物缀合物(adc)疗法的靶，而且已经在针对nhl和all的临床试验中验证为如此。在本文中描述的实验中，使用基于醛标签和肼基-异-pictet-spengler(hips)化学的位点特异性缀合技术来放置美登木素载荷，经由不可切割接头偶联至抗体重链c端。遗传编码的醛标签掺入六个氨基酸的序列，lctpsr。共翻译地，过表达的甲酰基甘氨酸生成酶(fge)将共有序列内的半胱氨酸转变成甲酰基甘氨酸残基，其携带醛官能团，与hips-接头-载荷反应以生成adc。这种办法提供对载荷布置和dar二者的控制，而且产生高度均质的adc制备物。位点特异性缀合的adc相对于随机缀合物展示改善的药动学(pk)和功效，很可能是由于制备物中缺乏缀合不足和过度的种类，这可分别产生无效或过度有毒的分子。而且，抗cd22adc上使用的不可切割接头-美登木素载荷对由mdr1进行的流出有抗性且并不介导脱靶或旁观者杀伤。总之，这些特征有助于在临床前研究中观察到的抗cd22adc的功效和安全性。材料和方法通用的所有动物研究依照科研动物护理和使用委员会指导方针进行且在charlesriverlaboratories，aragenbioscience，或covancelaboratories实施。鼠抗美登木素抗体由promab制造并在内部验证。家兔抗af488抗体购自lifetechnologies。辣根过氧化物酶(hrp)缀合的二抗来自jacksonimmunoresearch。用于药效学研究的抗体来自bdpharmingen。细胞系得自atcc和dsmz细胞库，在那里它们通过形态学，核型分析，和基于pcr的办法进行鉴别。带标签抗体的克隆，表达，和纯化使用标准克隆和纯化技术和表达技术生成抗体。生物缀合，纯化，和hplc分析学如drakeetal.,bioconjugatechem.,2014,25,1331-41中所述生成和表征adc。mdr1+细胞系的生成mdr1(abcb1)cdna自sinobiological获得并克隆入具有潮霉素选择标志的pef质粒。使用amaxanucleofectortm仪器依照制造商的说明书电穿孔ramos(atcccrl-1923)和wsu-dlcl2(dsmzacc575)细胞。用潮霉素(invitrogen10687010)选择后，用帕利他赛处理(25nm，长至10天)来富集集合以进一步选择具有功能性mdr1的细胞。在补充有10％胎牛血清(fbs)和1xglutamax(gibco35050-079)的rpmi(gibco21870-092)中在潮霉素选择下维持所得细胞。体外细胞毒性测定法在96孔板(costar3610)中以5x104个细胞/孔的密度在100μl生长培养基中分配细胞系并容许休息5小时。在rpmi中以6倍终浓度实施测试样品的连续稀释并将20μl添加至细胞。于37℃和5％co2温育5天后，使用promegacelltiteraqueousonesolution细胞增殖测定法(g3581)依照制造商的说明书测量存活力。在graphpadprism中计算gi50曲线，使用adc的药物-对-抗体比(dar)值将剂量针对载荷浓度标准化。异种移植物研究给雌性cb17icrscid小鼠皮下接种50％matrigel中的wsu-dlcl2或ramos细胞。一周两次测量肿瘤并依照下式评估肿瘤体积：其中w＝肿瘤宽度和l＝肿瘤长度。当肿瘤达到期望的均值体积时，将动物随机化入8-12只小鼠的组并如下所述给药。在研究结束时或当肿瘤达到2000mm3时对动物处以安乐死。大鼠毒物学研究和毒动学(tk)分析对雄性sprague-dawley大鼠(在研究开始时8-9周龄)给予单剂静脉内6，20，40，或60mg/kg抗cd22adc(5只动物/组)。给药后对动物观察12天。在第0，1，4，8，和11天记录体重。在8小时和在5，9，和12天自所有动物收集血液并用于毒动学分析(所有时间点)和临床化学和血液学分析(第5和12天)。毒动学分析通过elisa实施，使用与关于药动学分析所述相同的条件和试剂。非人灵长类动物毒物学和tk研究对食蟹猴(2只/性别/组)给予2剂(每21天)10，30，或60mg/kg抗cd22adc，接着是21天观察期。在给药前在第1天，和在第8，15，22(给药前)，29，36，和42天评估体重。收集血液用于依照表2中呈现的进度表的毒动学，临床化学，和血液学分析。毒动学分析通过elisa实施，使用与关于药动学分析所述相同的条件和试剂，只是使用cd22-his蛋白质作为总抗体和总adc测量的捕捉试剂。表2：服用3mg/kg抗cd22adc的大鼠中的药动学发现的汇总参数，均值(sd)总ab总adc总缀合物auc0-无穷(天·μg/ml)304(40)218(18)261(26)清除(ml/天/kg)10.0(1)13.8(1)11.6(1)c0.04d73.2(5)83.9(16)76.8(6)t1/2有效(天)*9.48(1)6.13(0.6)7.22(0.6)vss(ml/kg)41.1(3)36.7(7)39.2(3)总抗体测量缀合的和未缀合的ab；总adc是dar敏感性测量；总缀合物测量dar≥1的所有分析物。sd，标准偏差；auc0-无穷，时间0至无穷的浓度对时间曲线下面积；c0.04d，在1小时时观察到的浓度；t1/2有效，有效半衰期；vss，稳态时的分布容积。*半衰期的不确定性以标准误差给出。非人灵长类动物药效学研究通过流式细胞术分析来自在抗cd22adc毒物学研究中登记的食蟹猴的全血样品以评估cd3+，cd20+，和cd3-/cd20-白细胞群体。简言之，对100μl全血小样添加荧光素和藻红蛋白缀合的同种型对照抗体或荧光素缀合的抗cd20和藻红蛋白缀合的抗cd3抗体并在冰上温育30分钟。然后，用氯化铵溶液(stemcelltechnologies)裂解红血球，并将细胞在磷酸盐缓冲盐水+1％fbs中清洗两次。在运行facsdivatm软件的facscantotm仪器上通过流式细胞术分析经过标记的细胞。药动学(pk)研究设计对于小鼠研究，在第一剂后1小时开始且持续贯穿观察期的时间点三只一组对ramos异种移植物实验中使用的动物采样。对于大鼠研究，对雄性sprague-dawley大鼠(3只每组)静脉内给药单次3mg/kgadc推注。在给药后1，8和24小时，和2，4，6，8，10，14，和21天收集血浆。血浆样品保存于-80℃直至使用。pk和tk样品分析通过elisa量化总抗体，总adc(dar敏感性)，和总缀合物(dar≥1)的浓度，如图10中图示的。对于总抗体，缀合物用抗人igg特异性抗体捕捉并用hrp缀合的抗人fc特异性抗体检测。对于总adc，缀合物用抗人fab特异性抗体捕捉并用小鼠抗美登木素一抗，接着是hrp缀合的抗小鼠igg亚类1特异性二抗检测。对于总缀合物，缀合物用抗美登木素抗体捕捉并用hrp缀合的抗人fc特异性抗体检测。结合的二抗使用ultratmbone-stepelisa底物(thermofisher)检测。用硫酸淬灭反应后，通过在配备有softmaxpro软件的moleculardevicesspectramaxm5读板仪上采集450nm处的吸光度来读取信号。使用graphpadprism和microsoftexcel软件分析数据。间接elisacd22抗原结合将maxisorp96孔板(nunc)在pbs中用1μg/ml人cd22-his(sinobiological)于4℃包被过夜。用酪蛋白缓冲液(thermofisher)封闭板，然后以200ng/ml开始以11步系列2倍稀释分配抗cd22野生型抗体和adc。将板于室温摇动温育2小时。在磷酸盐缓冲盐水(pbs)0.1％tween-20中清洗后，用辣根过氧化物酶(hrp)缀合的驴抗人fcγ特异性二抗检测结合的分析物。信号用ultratmb(pierce)显现并用2nh2so4淬灭。使用moleculardevicesspectramaxm5读板仪测定450nm处的吸光度并使用graphpadprism分析数据。在cd22+nhl细胞系上抗cd22adc介导cd22内在化在单独的标记缓冲液[pbs+1％胎牛血清(fbs)]中，或在含抗cd22adc(1μg/测试)的标记缓冲液中温育ramos，granta-519，和wsu-dlcl2细胞(1e6个/测试)。样品于4或37℃放置2小时。然后，将细胞在冰上与荧光素标记的抗cd22一起温育20分钟。在标记缓冲液中清洗2次后，在运行facsdivatm软件的facscantotm仪器上通过流式细胞术分析细胞。4和37℃±adc的细胞之间荧光的差异解读为抗cd22adc介导的内在化。食蟹猴和人组织交叉反应性研究使用生物素化的抗cd22adc和作为对照的生物素化的hips-4ap-美登木素接头载荷缀合的同种型抗体由ensignabiosystemsinc.(richmond，ca)实施组织交叉反应性研究。使用含有皮肤，心，肺，肾，肝，胰腺，胃，小肠，大肠，和脾(阳性对照)的组织微阵列。一抗使用缀合至辣根过氧化物酶的链霉亲合素检测，接着用dab底物显现。hips-4ap-美登木素接头载荷的合成1,2-二甲基肼-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲酯(2)在ch3cn(80ml)中溶解menhnhme·2hcl(1)(5.0g，37.6mmol)。添加et3n(22ml，158mmol)，并通过过滤去除形成的沉淀物。对剩余的menhnhme溶液，于-20℃在2.5小时里逐滴添加fmoccl(0.49g，18.9mmol，0.5eq)溶液。然后将反应混合物用etoac稀释，用h2o，盐水清洗，在na2so4上干燥，并在真空中浓缩。在硅土上通过急骤层析(己烷/etoac＝3:2)纯化残留物以给出3.6g(34％)化合物2。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.75-7.37(m,8h),4.48(brs,2h),4.27(t,j＝6.0hz,1h),3.05(s,3h),2.55(brs,3h)。2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1h-吲哚(4)给烘箱干燥的烧瓶装上吲哚-2-甲醇3，(1.581g，10.74mmol)，tbscl(1.789g，11.87mmol)，和咪唑(2.197g，32.27mmol)，并在ch2cl2(40ml，无水)中悬浮此混合物。16小时后，将反应混合物浓缩成橙色残留物。将粗制混合物在et2o(50ml)中提取，用含水acoh(5％v/v，3x50ml)和盐水(25ml)清洗。合并的有机层在na2so4上干燥并浓缩以给出2.789g(99％)化合物4，为结晶固体，没有进一步纯化就使用。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.29(s,1h),7.57(d,j＝7.7hz,1h),7.37(dd,j＝8.1,0.6hz,1h),7.19–7.14(m,1h),7.12–7.07(m,1h),6.32(d,j＝1.0hz,1h),4.89(s,2h),0.95(s,9h),0.12(s,6h)。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ138.3,136.0,128.6,121.7,120.5,119.8,110.9,99.0,59.4,26.1,18.5,-5.2。c15h24nosi[m+h]+的hrms(esi)，计算：262.1627；发现：262.1625。3-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酸甲酯(6)对吲哚4(2.789g，10.67mmol)在ch3cn(25ml)中的溶液添加丙烯酸甲酯5(4.80ml，53.3mmol)，接着是1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(800μl，5.35mmol)，并将所得混合物回流。18小时后，将溶液冷却并浓缩成橙色油，通过硅胶层析(9:1己烷:etoac)纯化以产生3.543g(96％)化合物6，为无色油。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.58(d,j＝7.8hz,1h),7.34(d,j＝8.2hz,1h),7.23–7.18(m,1h),7.12–7.07(m,1h),6.38(s,1h),4.84(s,2h),4.54–4.49(m,2h),2.89–2.84(m,2h),0.91(s,9h),0.10(s,6h)。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ172.0,138.5,137.1,127.7,122.0,121.0,119.8,109.3,101.8,58.2,51.9,39.5,34.6,26.0,18.4,-5.2。c19h30no3si[m+h]+的hrms(esi)，计算：348.1995；发现：348.1996。3-(2-(羟基甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酸甲酯(7)于0℃对化合物6(1.283g，3.692mmol)在thf(20ml)中的溶液添加氟化四丁基铵在thf中的1.0m溶液(3.90ml，3.90mmol)。15分钟后，将反应混合物用et2o(20ml)稀释，用nahco3(饱和水溶液，3x20ml)清洗，并浓缩成浅绿色油。通过硅胶层析(2:1己烷:etoac)纯化油以产生822mg(95％)化合物7，为白色结晶固体。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.60(d,j＝7.8hz,1h),7.34(dd,j＝8.2,0.4hz,1h),7.27–7.23(m,1h),7.16–7.11(m,1h),6.44(s,1h),4.77(s,2h),4.49(t,j＝7.3hz,2h),3.66(s,3h),2.87(t,j＝7.3hz,2h),2.64(s,1h)。13cnmr(126mhz,cdcl3)δ172.3,138.5,137.0,127.6,122.2,121.1,119.9,109.3,102.3,57.1,52.0,39.1,34.3。c13h15nnao3[m+na]+的hrms(esi)，计算：256.0950；发现：256.0946。3-(2-甲酰基-1h-吲哚-1-基)丙酸甲酯(8)在ch2cl2(20ml)和吡啶(2.70ml，33.5mmol)的混合物中悬浮戴斯-马丁过碘烷(5.195g，12.25mmol)。5分钟后，将所得白色悬浮液转移至3-(2-(羟基甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酸甲酯(7；2.611g，11.19mmol)在ch2cl2(10ml)中的溶液，产生红褐色悬浮液。1小时后，用硫代硫酸钠(10％水溶液，5ml)和nahco3(饱和水溶液，5ml)淬灭反应。用ch2cl2(3x20ml)萃取水层；将合并的提取物在na2so4上干燥，过滤，并浓缩成褐色油。通过硅胶层析(5-50％etoac，在己烷中)的纯化产生2.165g(84％)化合物8，为无色油。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.87(s,1h),7.73(dt,j＝8.1,1.0hz,1h),7.51(dd,j＝8.6,0.9hz,1h),7.45–7.40(m,1h),7.29(d,j＝0.9hz,1h),7.18(ddd,j＝8.0,6.9,1.0hz,1h),4.84(t,j＝7.2hz,2h),3.62(s,3h),2.83(t,j＝7.2hz,2h)。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ182.52,171.75,140.12,135.10,127.20,126.39,123.46,121.18,118.55,110.62,51.83,40.56,34.97。c13h13no3na[m+na]+的hrms(esi)，计算：254.0793；发现：254.0786。3-(2-甲酰基-1h-吲哚-1-基)丙酸(9)对吲哚8(2.369g，10.24mmol)在二氧杂环己烷(100ml)中溶解的溶液添加lioh(4m水溶液，7.68ml，30.73mmol)。在数个小时的过程里逐渐形成浓稠白色沉淀物。21小时后，逐滴添加hcl(1m水溶液，30ml)以给出ph＝4的溶液。浓缩溶液，在etoac(50ml)中溶解所得浅褐色油，并用水(2x50ml)和盐水(20ml)清洗。将有机层在na2so4上干燥，过滤，并浓缩成橙色固体。通过硅胶层析(10-50％etoac，在含0.1％乙酸的己烷中)的纯化产生1.994g(84％)化合物9，为浅黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.89(s,1h),7.76(dt,j＝8.1,0.9hz,1h),7.53(dd,j＝8.6,0.9hz,1h),7.48–7.43(m,1h),7.33(d,j＝0.8hz,1h),7.21(ddd,j＝8.0,6.9,1.0hz,1h),4.85(t,j＝7.2hz,2h),2.91(t,j＝7.2hz,2h)。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ182.65,176.96,140.12,135.02,127.33,126.42,123.53,121.27,118.76,110.55,40.19,34.82。c12h10no3[m-h]-的hrms(esi)，计算：216.0666；发现：216.0665。3-(2-((2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酸(10)对化合物9(1.193g，5.492mmol)和1,2-二甲基肼羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯2(2.147g，7.604mmol)在1,2-二氯乙烷(无水，25ml)中的溶液添加三乙酸基硼氢化钠(1.273g，6.006mmol)。将所得黄色悬浮液搅动2小时，然后用nahco3(饱和水溶液，10ml)淬灭，接着添加hcl(1m水溶液)至ph4。分出有机层，并用ch2cl2(5x10ml)萃取水层。将合并的有机提取物在na2so4上干燥，过滤，并浓缩成橙色油。通过c18硅胶层析(20-90％ch3cn，在水中)的纯化产生1.656g(62％)化合物10，为蜡质粉色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76(d,j＝7.4hz,2h),7.70–7.47(brm,3h),7.42–7.16(brm,6h),7.12–7.05(m,1h),6.37(s,0.6h),6.05(s,0.4h),4.75–4.30(brm,4h),4.23(m,1h),4.10(brs,1h),3.55(brd,1h),3.11–2.69(m,5h),2.57(brs,2h),2.09(brs,1h)。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ174.90,155.65,143.81,141.42,136.98,134.64,127.75,127.48,127.12,124.92,122.00,120.73,120.01,119.75,109.19,103.74,67.33,66.80,51.39,47.30,39.58,39.32,35.23,32.10。c29h30n3o4[m+h]+的hrms(esi)，计算：484.2236；发现：484.2222。1,2-二甲基-2-((1-(3-氧代-3-(全氟苯氧基)丙基)-1h-吲哚-2-基)甲基)肼-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯(red-004)将化合物10(5.006g，10.4mmol)添加至带有干燥的搅动棒的干燥的100ml双颈圆底烧瓶。通过注射器添加40ml无水etoac，并将溶液于20℃搅动5分钟，给出清澈，浅色，黄色-绿色溶液。在冰水浴中将溶液冷却至0℃，并逐滴添加3ml无水etoac中的五氟酚(2098.8mg，11.4mmol)。将溶液于0℃搅动5分钟。通过注射器缓慢地逐滴添加7ml无水etoac中的dcc(2348.0mg，11.4mmol)。将溶液于0℃搅动5分钟，然后自浴中取出并升温至20℃。将反应搅动2小时，冷却至0℃，并过滤以给出清澈，浅色，黄色-绿色溶液。将溶液用50mletoac稀释，用2x25mlh2o，1x25ml5mnacl清洗，并在na2so4上干燥。将溶液过滤，蒸发，并在高真空下干燥，给出6552.5mg(97％)red-004，为稍带绿色-白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ780(d,j＝7.2hz,2h),7.58(m,3h),7.45-7.22(m,6h),7.14(dd(appt.t),j＝7.4hz,1h),6.42&6.10(2brs,1h),4.74(dd(appt.t),j＝5.4hz,2h),3.65-3.18(br,3h),3.08&2.65(2brs,3h),2.88(s,3h)。(s)-3,4-二甲基口恶唑烷-2,5-二酮(red-194)在氮气下于0℃对n-boc-ala-oh(11)(0.005mol)在二氯甲烷(25ml)中的溶液添加1.2个当量的三氯化磷。将反应混合物于0℃搅动2小时，在减压下去除溶剂并用四氯化碳(3x20ml)清洗残留物以给出red-194。甲基-l-丙氨酸(14s,16s,32r,33r,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基酯(red-062)在无水dmf(11ml)中溶解美登木醇(red-063)(4.53g，8mmol)以给出清澈，无色溶液，在n2下将其转移至干燥的双颈圆底烧瓶。添加无水thf(44ml)，接着是dipea(8.4ml，48mmol)。添加red-194溶液(5.4g，42mmol)以给出清澈，无水溶液。将干燥的，细磨的zn(otf)2(8.7g，24mmol)添加至搅动溶液，并将反应混合物于20℃搅动2天。通过添加至70ml1.2mnahco3和70mletoac的溶液来淬灭反应。搅动后，所得混合物生成白色沉淀物，通过过滤去除。将滤出液用etoac(5x70ml)萃取，干燥(na2so4)并浓缩以给出略带红色的橙色油。在ch2cl2(15ml)中溶解，并使用biotage系统(在2xbiotageultra10gsamplet上吸附，在2xbiotageultra100g筒上用meoh在ch2cl2中的0-20％梯度纯化)纯化以生成4.38gred-062，为浅桃色固体(95％de，93.7％期望的非对映体)。4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(13)对带有磁搅动棒的100ml圆底烧瓶添加哌啶-4-酮氢氯化物单水合物(12)(1.53g，10mmol)，一缩二碳酸二叔丁酯(2.39g，11mmol)，碳酸钠(1.22g，11.5mmol)，二氧杂环己烷(10ml)，和水(1ml)。于室温搅动反应混合物1小时。将混合物用水(100ml)稀释并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水清洗，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。在真空中干燥所得材料以产生1.74g(87％)化合物13，为白色固体。1hnmr(cdcl3)δ3.73(t,4h,j＝6.0),2.46(t,4h,j＝6.0),1.51(s,9h)。c10h18no3的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算200.3；发现200.2。4-((2-(2-(3-(叔丁氧基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(14)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加化合物13(399mg，2mmol)，h2n-peg2-coot-bu(550mg，2.4mmol)，分子筛(经过活化的粉，200mg)，和1,2-二氯乙烷(5ml)。于室温搅动混合物1小时。对反应混合物添加三乙酸基硼氢化钠(845mg，4mmol)。于室温搅动混合物3天。在etoac和饱和nahco3水溶液之间分配所得混合物。将有机层用盐水清洗，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩以提供850mg化合物14，为粘性油。c21h41n2o6的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算417.3；发现417.2。13-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2,2-二甲基-4,14-二氧代-3,7,10-三氧杂-13-氮杂十七烷-17-酸(red-195)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加化合物14(220mg，0.5mmol)，琥珀酸酐(55mg，0.55mmol)，4-(二甲基氨基)吡啶(5mg，0.04mmol)，和二氯甲烷(3ml)。于室温搅动混合物24小时。通过急骤层析(洗脱液50-100％etoac/己烷)部分纯化反应混合物以产生117mg化合物red-195，为清澈油，在没有进一步表征的情况下结转。c25h45n2o9的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算517.6；发现517.5。(2s)-8-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2,3-二甲基-4,7-二氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷二酸17-(叔丁基)酯1-((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)酯(red-196)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加red-195(445mg，0.86mmol)，hatu(320mg，0.84mmol)，dipea(311mg，2.42mmol)，和二氯甲烷(6ml)。于室温搅动反应混合物5分钟。将所得溶液添加至red-062(516mg，0.79mmol)，并于室温搅动反应混合物另外30分钟。通过急骤层析(洗脱液3-10％meoh/dcm)直接纯化反应混合物以给出820mg(90％)red-196，为浅褐色固体。c57h87cln5o17的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1148.6；发现1148.8。(2s)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-8-(哌啶-4-基)-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(red-197)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加red-196(31mg，0.027mmol)和二氯甲烷(1ml)。将溶液冷却至0℃并添加四氯化锡(iv)(1.0m溶液，在二氯甲烷中，0.3ml，0.3mmol)。于0℃搅动反应混合物1小时。通过c18急骤层析(洗脱液5-100％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生16mg(60％)red-197，为白色固体(16mg，60％产率)。c48h71cln5o15的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算992.5；发现992.6。(2s)-8-(1-(3-(2-((2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(red-198)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加red-197(16mg，0.016mmol)，1,2-二甲基-2-((1-(3-氧代-3-(全氟苯氧基)丙基)-1h-吲哚-2-基)甲基)肼-1-羧酸(9h-芴-9-基)甲基酯(12)(13mg，0.02mmol)，dipea(8μl，0.05mmol)，和dmf(1ml)。于室温搅动溶液18小时。通过c18急骤层析(洗脱液5-100％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生18mg(77％)red-198，为白色固体。c77h98cln8o18的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1457.7；发现1457.9。(2s)-1-(((14s,16s,33s,2r,4s,10e,12e,14r)-86-氯-14-羟基-85,14-二甲氧基-33,2,7,10-四甲基-12,6-二氧代-7-氮杂-1(6,4)-夹氧氮杂环己烷-3(2,3)-夹氧杂环丙烷-8(1,3)-夹苯环十四烷-10,12-二烯-4-基)氧基)-8-(1-(3-(2-((1,2-二甲基肼基)甲基)-1h-吲哚-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二甲基-1,4,7-三氧代-11,14-二氧杂-3,8-二氮杂十七烷-17-酸(red-106)对带有磁搅动棒的干燥的闪烁管添加red-197(18mg，0.012mmol)，哌啶(20μl，0.02mmol)，和dmf(1ml)。于室温搅动溶液20分钟。通过c18急骤层析(洗脱液1-60％mecn/水)直接纯化反应混合物以产生15mg(98％)化合物red-106，为白色固体。c62h88cln8o16的ms(esi)m/z：[m+h]+，计算1235.6；发现1236.0。结果和讨论抗cd22adc的生成和初始表征所使用的抗cd22抗体(cat-02)是rfb4抗体的人源化变体。使用克隆细胞系生成c端带标签的抗cd22抗体，生物反应器滴度1.6g/l和97％的半胱氨酸转变成甲酰基甘氨酸。合成hips-4ap-美登木素接头载荷(上文描述)并缀合至带醛标签的抗体。表征所得adc(图11)，通过大小排阻层析评估百分比单体(99.2％)，并通过疏水相互作用(hic)和反相(plrp)层析评估药物-对-抗体比(dar)(1.8)。分别使用基于elisa的方法(图12)和基于流式细胞术的方法(图13)就针对人cd22蛋白质的亲和力和cd22+细胞上的内在化而言比较adc与野生型(不带标签的)抗cd22抗体。对于这两种功能度量，adc表现与野生型抗体同等好，指示缀合对这些参数没有影响。抗cd22adc不是mdr1的底物且并不促进脱靶或旁观者杀伤在体外针对ramos和wsu-dlcl2hnl肿瘤细胞系测试抗cd22adc的效力。将活性与游离美登木素和用cat-02抗cd22抗体经由可切割缬氨酸-瓜氨酸二肽接头缀合至美登木素生成的相关adc的活性比较。两种adc均显示针对野生型ramos和wsu-dlcl2细胞的亚纳摩尔活性(图14，小图a和小图c)。在那些细胞改造成表达异型生物质流出泵mdr1的变体中，只有本公开文本的抗cd22adc保留其原始效力(图14，小图b和小图d)。通过对比，游离美登木素的效力低～10倍，而携带可切割美登木素的adc本质上没有活性。在一项对照实验中，用mdr1抑制剂环孢菌素共处理wsu-dlcl2细胞对野生型细胞没有影响但恢复游离美登木素和可切割adc在mdr1+细胞中的原始效力(图14，小图e和小图f)。总之，这些结果指示本公开文本的抗cd22adc的活性代谢物不是mdr1流出的底物。在相关体外细胞毒性研究中，本公开文本的抗cd22adc对抗原阴性细胞系nci-n87没有影响(图15)，指示它在5天细胞培养期里没有脱靶活性。而且，缀合至hips-4ap-美登木素接头载荷的基于抗her2的adc并不介导与抗原阳性细胞共培养的抗原阴性细胞的旁观者杀伤(图16)，暗示本公开文本的抗cd22adc的活性代谢物，会与抗her2adc缀合物的活性代谢物一样，也不会介导旁观者杀伤。抗cd22adc有效针对nhl异种移植物模型针对wsu-dlcl2和ramos异种移植物模型评估抗cd22adc的体内功效(图17)，它们分别表达相对较高和较低量的cd22(图18)。在一项单剂研究中，对携带wsu-dlcl2肿瘤的小鼠给予10mg/kg抗cd22adc或媒介对照。当肿瘤平均为118mm3时启动给药。在接受adc的动物中，25％(8只中的2只)具有部分响应，肿瘤到第31天消退至4mm3。到第31天抗cd22adc处理组和媒介对照组分别具有415和1783mm3的均值肿瘤体积。接下来，在一项多剂研究，每4天用10mg/kg抗cd22adc或媒介对照处理携带wsu-dlcl2异种移植物的小鼠，总共4剂。当肿瘤平均为262mm3时启动给药。在接受adc的动物中，75％(8只中的6只)显示完全响应，这些中的38％(8只中的3只)持续至研究结束(第59天)，即最后一剂后43天。通过对比，媒介对照组到第17天达到2191mm3的均值肿瘤体积。最后，在一项多剂研究中，每4天用5或10mg/kg抗cd22adc或媒介对照处理携带ramos异种移植物的小鼠，总共4剂。当肿瘤平均为246mm3时启动给药。正如预期的，对分别接受5或10mg/kg剂量，展现63％或87％肿瘤生长延迟的的组观察到剂量效应。具体而言，媒介对照，5，和10mg/kg剂量给药组的终点前时间中值分别为12，19，和22天。在所有三项研究中，在抗cd22adc剂量给药组中没有观察到对小鼠体重的影响(图19)。在大鼠和食蟹猴中抗cd22adc直至60mg/kg得到较好耐受抗cd22adc并不结合啮齿类动物cd22，然而，在这些动物中给药adc提供与接头-载荷的脱靶毒性和安全性有关的信息。如上文提到的，在小鼠异种移植物研究中没有观察到剂量给药对体重或临床观察的影响。在一项探索性大鼠毒性研究中(图20)，对动物(5只每组)给予单剂静脉内6，20，40，或60mg/kg抗cd22adc并在给药后观察12天。所有动物存活直至研究结束。以60mg/kg给药的动物经历体重相对于媒介对照组降低10％。与最小限度至轻度肝胆损害一致的临床化学变化在第5天在给予≥40mg/kg的动物中发生，而且包括丙氨酸转氨酶(alt)，天冬氨酸转氨酶(ast)，和碱性磷酸酶(alp)活性升高。大多数变化到第12天逆转。关于血液学，血小板计数中等至显著降低在第5天在给予≥40mg/kg的动物中发生且到第12天完全逆转。与发炎一致的变化在第5和12天在给予≥40mg/kg的动物中发生，而且包括嗜中性粒细胞和单核细胞计数轻度至中等升高，球蛋白浓度轻度升高，和清蛋白:球蛋白比降低。抗cd22adc并不结合食蟹猴cd22(图21)且在猴中具有与人相比相似的组织交叉反应性概况(图22)。因此，食蟹猴代表一种适宜模型，在其中测试这种adc的上靶和脱靶毒性二者。在一项探索性重复给药研究中，每三周一次对猴(2只/性别/组)给予10，30，或60mg/kg抗cd22adc，总共2剂，接着是21天观察期。所有动物存活直至研究终止。临床观察，体重，或食物消耗中没有发生抗cd22adc相关变化。临床病理学变化大多在给予≥30mg/kg的动物中发生，而且与最小限度肝损害，血小板消耗和/或隔绝升高，和发炎一致(图23)。这些发现在30和60mg/kg和在第一和第二剂后是相似的，而且其程度预期不会与显微镜检查变化或临床效应有关。给予≥30mg/kg的动物中与最小限度肝损害一致的变化由alt，ast，和alp活性升高组成，它们到第21和42天部分逆转。在给药1周内观察到的血小板计数轻度至中等降低到第21和42天大部分逆转。与发炎一致的变化由嗜中性粒细胞和单核细胞计数最小限度至中等升高，球蛋白浓度轻度至中等升高，和清蛋白浓度最小限度降低组成。在食蟹猴中施用抗cd22adc导致b细胞消减为了评估抗cd22adc在交叉反应性物种中的药效学作用，在来自在重复给药毒性研究中登记的食蟹猴的样品中监测外周血单个核细胞群体。具体而言，使用流式细胞术来检测在给药前和在第7，14，28，和35天在动物中观察到的b细胞(cd20+)，t细胞(cd3+)，和nk细胞(cd20-/cd3-)的比率(图5)。在给药前抗cd22adc处理的动物中，b细胞包括平均11.6％的总淋巴细胞；这个值到第35天下降至平均3.8％，代表测量到的b细胞群体相对于基线水平平均降低68％(图24)。b细胞消减在10至60mg/kg的所有剂量给药组间是相似的，指示最低剂量足以获得该作用。同时，媒介对照处理的动物中的b细胞，和所有组中的t细胞和nk细胞(未显示)在处理过程里很大程度没有变化。结果指示抗cd22adc能够在体内选择性介导食蟹猴cd22+细胞消减而不导致不利的脱靶毒性。抗cd22adc在小鼠，大鼠，和食蟹猴中的药动学和毒动学为了评估抗cd22adc的体内稳定性，在大鼠中进行了一项药动学(pk)研究。在接受单剂3mg/kg抗cd22adc后监测动物(3只/组)的外周血中总抗体，总adc，和总缀合物的浓度达21天(表2和图25)。如图10中所示，总adc和总缀合物测定法分别采用dar敏感性和dar不敏感性测量。对所有三种分析物获得的pk参数是相似的，指示缀合物在循环中很大程度上是稳定的。例如，总抗体，总adc，和总缀合物的消除半衰期分别是9.48，6.13，和7.22天。接下来，随时间测量来自上文所述ramos多剂功效研究的小鼠的外周血中的抗cd22adc分析物浓度。这项分析的目的是测定在异种移植物研究中以有效剂量实现的总adc暴露水平(图26)。为了这个基准，回忆在ramos模型中22天里4剂10mg/kg导致87％肿瘤生长延迟，而且在wsu-dlcl2模型中28天里4剂10mg/kg导致75％的动物展现完全响应(没有可触知的肿瘤剩余)。小鼠中4剂10mg/kg的时间0至无穷的浓度对时间曲线下面积(auc0-无穷)均值是2530±131(s.d.)天·μg/ml。最后，评估来自在先前所述大鼠和食蟹猴毒性研究中剂量给药的动物的毒动学血浆样品中的抗cd22adc分析物浓度(图26)。这些分析的目的是测定以与观察到的毒性的存在或缺失有关的剂量实现的总adc暴露水平。关于大鼠研究，c最大和auc0-无穷值一般与剂量成比例。60mg/kg剂量的均值auc0-无穷是5201±273天·μg/ml。关于猴研究，c最大和auc0-无穷值一般与剂量成比例。第一剂60mg/kg的均值auc0-无穷是6140±667天·μg/ml。在食蟹猴模型中抗体结合至抗原，然而，清除(未显示)在所有剂量给药组间是相似的。这指示低(10mg/kg)剂量足以饱和靶介导的清除机制，而且因此抗原介导的清除并不显著影响这项研究的结果。这一观察结果与抗cd22adc处理对b细胞消减的药效学作用一致，其程度在所有剂量给药组间是相似的。结论生成了对由表达mdr1的细胞进行的流出有抗性的位点特异性缀合至美登木素载荷的cd22靶向性adc。adc具有1.8的dar，展示较好的生物物理特征，且针对两种nhl异种移植物模型在体内介导范围为显著的(87％)肿瘤生长延迟至完全响应的功效。这种功效是以大大低于与毒性有关的暴露水平的暴露水平实现的；确实，在重复给药食蟹猴毒性研究中，甚至在最高剂量60mg/kg也没有观察到不利作用的记录，指示可使用更高剂量。抗cd22adc具有功效和安全性的组合。作为另一个优点，许多根本组件(包括靶抗原，亲本抗体，和基于美登木素的细胞毒性载荷)已经在人中使用且已经关于安全性和毒性进行较好地研究。基于食蟹猴(它是一种用于投射人药动学和毒性概况的合理模型)，这些研究的结果指示抗cd22adc对nhl患者具有治疗性用途，诸如那些已经由于mdr1上调而发生顽固性疾病的。虽然已经参考其具体实施方案描述了本发明，但是本领域技术人员应当了解，在不违背本发明的真正精神和范围的情况下可以做出各种变化且可以取代等效方案。另外，可以做出许多修改以使特定的情况，材料，物质组合物，工艺，一个或多个工艺步骤适应本发明的目的，精神和范围。所有这些修改意图在本发明所附权利要求的范围内。当前第1页12