本发明涉及一种护肤品技术领域，具体涉及一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水及其制备方法。
背景技术：
超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，ec1.15.1.1，简称sod)，是广泛存在生物体内的酸性金属酶，能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢，有效地防御自由基对有机体的伤害，是生物体内最佳的自由基清除剂，具有抗炎症、抗病毒、抗辐射、抗衰老等作用，被广泛应用在医药、化妆品、食品等领域。
海洋微生物为了适应极端的海洋环境，具有低温、耐压、嗜盐等特性，其分泌的sod也进化出许多有价值的酶学特性，如对温度具有更高的抗性，在耐受理化方面也表现出较高的稳定性等。海洋低温酶具有低温下高活力及高催化效率，可大大缩短处理时间并省却昂贵的加热/冷却系统，因而在节能方面有相当大的进步；经过温和的热处理即可使低温酶的活力丧失，而低温或适温处理不会影响产品的品质等特性。鉴于低温sod在自然和生理温度下的应用优势，海洋低温sod在医疗保健、食品、化妆品等方面具有广泛的应用前景和开发潜力。
爽肤水也称紧肤水、化妆水等，它的作用就在于再次清洁以恢复肌肤表面的酸碱值，并调理角质层，使肌肤更好地吸收，并为使用保养品做准备。所以洗完脸之后，使用爽肤水可以迅速补充水分。市面上爽肤水的种类很多，不同成分制成的爽肤水其功效不一样。本发明添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水较其他爽肤水抗皱保湿效果更好，绿色天然无危害。
技术实现要素：
本发明的目的是为了弥补现有技术的不足，提供一种抗皱保湿效果更好、性质更温和的保湿爽肤水及其制备方法。
本发明所采用的技术方案为：一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，其配方按重量份包括如下组分：
玫瑰纯露：90-100，橄榄液：7-9，薰衣草精油：3-5，泛醇：2-4，低温超氧化物歧化酶：3-5，防腐剂：1-2。
进一步地，所述的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，包括下述重量份的原料，玫瑰纯露：95，橄榄液：8，薰衣草精油：4，泛醇：3，低温超氧化物歧化酶：4，防腐剂：1.5。
上述的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，所述低温超氧化物歧化酶的制备方法为：
(1)粗酶液的制备：无菌操作，将活化好的海黏假交替单胞菌接种到液体发酵培养基中，于20℃，160r/min发酵48h，发酵菌液于4℃，6000r/min离心30min，得到湿菌体，4℃，6000r/min离心30min，湿菌体用磷酸缓冲液溶解。于480w超声波冰浴下破碎30min(破碎5s，间隔5s)，破碎后，4℃，12000r/min离心15min，上清即为粗酶液，上述液体发酵培养基配方百分比为：葡萄糖2.0，酵母膏0.5，陈海水配制，ph自然；
(2)硫酸铵沉淀：制备6份25ml粗酶液，分别向其中加入固体冷硫酸铵，使其饱和溶液浓度分别20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，4℃盐析16h，ph7.8磷酸缓冲液溶解沉淀蛋白，确定低温超氧化物歧化酶活性最高硫酸铵盐析条件；
(3)超滤浓缩：将盐析完成样品转入经过预处理的(截留分子量10kda)超滤管，4℃，6000r/min，超滤30min，去除so42-和部分小分子蛋白，移液枪小心取出浓缩液，4℃，保藏备用。部分溶于磷酸缓冲液，测定低温超氧化物歧化酶酶活力，计算蛋白回收率；
(4)sephadexg-100柱层析：用ph7.8磷酸缓冲液平衡sephadexg-100凝胶柱，待基线平衡后，取2ml超滤后酶液加入ph7.8磷酸缓冲液平衡过的sephadexg-100凝胶柱(ф1.6cm×60cm)，调节设置自动收集器，每管收集2ml左右，根据显示器上的洗脱峰，确定含低温超氧化物歧化酶各管，收集并测定其酶活力，合并含酶活力各管，4℃，保藏备用；
(5)喷雾干燥：喷雾干燥的参数设置为进口温度110℃、出口温度为60℃、压力位2kgf/cm2、液体流速为5ml/min，喷雾干燥中的保护剂中海藻糖、蔗糖、海藻酸钠的用量为2％-5％，可溶性淀粉的用量为6％-8％，保护剂的总用量控制在10％以内，即得到低温超氧化物歧化酶。
上述的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，所述防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一种或几种。
所述低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，其制备方法包括以下步骤：
(1)在一个干净的容器中称量薰衣草精油，加入橄榄液，充分搅拌均匀；
(2)在上述溶液中加入玫瑰纯露、泛醇、低温超氧化物歧化酶、防腐剂，再轻轻搅拌均匀；
(3)上述溶液在超净台经过滤除菌后，无菌分装，检验合格后包装入库。
进一步地，步骤(3)中所述过滤除菌为使用滤菌器进行过滤除菌。常用过滤器有薄膜滤菌器、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器等；过滤除菌使用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，以达到无菌目的。
超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，ecl.15.1.1，sod)是一种源于生命体的活性物质，能够清除生物体在新陈代谢过程中产生的超氧阴离子自由基。本发明所使用的低温超氧化物歧化酶为微生物中所提取，经发酵获得低温超氧化物歧化酶粗酶液。sod只有在具有生物活性状态下，才具有酶的功能。即“一清、五抗、一提高”，一清：即清除过量的超氧阴离子自由基；五抗即：抗氧化、抗辐射、抗衰老、抗疲劳、抗炎；一提高：即提高机体免疫力。
玫瑰含有丰富的维他命成份及天然植物精华供给肌肤所必需的酸素，延缓皮肤老化，从而使皮肤变的更加洁净、滑嫩；玫瑰具有温和清洁肌肤，有效清除面部多余的油脂及污物，消炎，镇静肌肤的作用。
薰衣草具有极强杀菌消炎功效，迅速进入毛囊清除痘痘细菌，消灭表皮青春痘、粉刺、痤疮等，修复受损细胞，促进细胞再生；舒缓修护过敏性肤质，缓解因压力、精神紧张和情绪低落引起的皮肤天然抵抗能力减弱，恢复皮肤自我修护机能，强化肌肤对外界的抵抗力。肌肤过干过油，都是由于表层水油不平衡所引起，薰衣草深层调节皮肤ph值，控制表皮肌肤油脂分泌，恢复肌肤水油平衡的最佳状态。
泛醇(99％)是维生素b5的前体，故又称维生素原b5，它含有不少于99％含量的泛醇，它是一种无色至微黄色透明粘稠的液体，具轻微的特殊气味。广泛用于医药、食品、化妆品及液体制剂中。泛醇进入人体内能转化为泛酸，进而合成辅酶a，促进人体蛋白质、脂肪、糖类的代谢，保护皮肤和粘膜，改善毛发光泽，防止疾病的发生。泛醇可防治小皱纹、炎症、日晒、糜烂，防止脱发，促进生发，保持头发湿润，减少头发分叉，防止干脆及断裂，对头发起保护、修复、护理作用。
有益效果：本发明所述的保湿爽肤水，性质温和，能长时间维持肌肤的水润感，并且抗皱效果更好；而且能减轻敏感肌肤的瘙痒症状，尤其适合敏感肌人群在闷热的夏季使用，给肌肤带来凉爽舒适的感觉。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
实施例1：
一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，其配方按重量份包括如下组分：玫瑰纯露90份，橄榄液7份，薰衣草精油5份，泛醇2份，低温超氧化物歧化酶5份，防腐剂1份。
在一个干净的容器中称量薰衣草精油，加入橄榄液，充分搅拌均匀，加入玫瑰纯露、泛醇、低温超氧化物歧化酶、防腐剂，再轻轻搅拌均匀，上述溶液在超净台经过滤滤膜除菌后，无菌分装，检验合格后包装入库。
所述低温超氧化物歧化酶的制备方法为：
(1)粗酶液的制备：无菌操作，将活化好的海黏假交替单胞菌接种到液体发酵培养基中，于20℃，160r/min发酵48h，发酵菌液于4℃，6000r/min离心30min，得到湿菌体，4℃，6000r/min离心30min，湿菌体用磷酸缓冲液溶解。于480w超声波冰浴下破碎30min(破碎5s，间隔5s)，破碎后，4℃，12000r/min离心15min，上清即为粗酶液，上述液体发酵培养基配方百分比为：葡萄糖2.0，酵母膏0.5，陈海水配制，ph自然；
(2)硫酸铵沉淀：制备6份25ml粗酶液，分别向其中加入固体冷硫酸铵，使其饱和溶液浓度分别20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，4℃盐析16h，ph7.8磷酸缓冲液溶解沉淀蛋白，确定低温超氧化物歧化酶活性最高硫酸铵盐析条件；
(3)超滤浓缩：将盐析完成样品转入经过预处理的(截留分子量10kda)超滤管，4℃，6000r/min，超滤30min，去除so42-和部分小分子蛋白，移液枪小心取出浓缩液，4℃，保藏备用。部分溶于磷酸缓冲液，测定低温超氧化物歧化酶酶活力，计算蛋白回收率；
(4)sephadexg-100柱层析：用ph7.8磷酸缓冲液平衡sephadexg-100凝胶柱，待基线平衡后，取2ml超滤后酶液加入ph7.8磷酸缓冲液平衡过的sephadexg-100凝胶柱(ф1.6cm×60cm)，调节设置自动收集器，每管收集2ml左右，根据显示器上的洗脱峰，确定含低温超氧化物歧化酶酶各管，收集并测定其酶活力，合并含酶活力各管，4℃，保藏备用；
(5)喷雾干燥：喷雾干燥的参数设置为进口温度110℃、出口温度为60℃、压力位2kgf/cm2、液体流速为5ml/min，喷雾干燥中的保护剂中海藻糖、蔗糖、海藻酸钠的用量为2％-5％，可溶性淀粉的用量为6％-8％，保护剂的总用量控制在10％以内，即得到低温超氧化物歧化酶。
所述防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一种或几种。
实施例2：
一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，其配方按重量份包括如下组分：玫瑰纯露95份，橄榄液8份，薰衣草精油4份，泛醇3份，低温超氧化物歧化酶4份，防腐剂1.5份。
在一个干净的容器中称量薰衣草精油，加入橄榄液，充分搅拌均匀，加入玫瑰纯露、泛醇、低温超氧化物歧化酶、防腐剂，再轻轻搅拌均匀，上述溶液在超净台经过滤滤膜除菌后，无菌分装，检验合格后包装入库。
所述低温超氧化物歧化酶的制备方法同实施例1。
所述防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一种或几种。
实施例3：
一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水，其配方按重量份包括如下组分：玫瑰纯露100份，橄榄液9份，薰衣草精油3份，泛醇4份，低温超氧化物歧化酶3份，防腐剂2份。
在一个干净的容器中称量薰衣草精油，加入橄榄液，充分搅拌均匀，加入玫瑰纯露、泛醇、低温超氧化物歧化酶、防腐剂，再轻轻搅拌均匀，上述溶液在超净台经过滤滤膜除菌后，无菌分装，检验合格后包装入库。
所述低温超氧化物歧化酶的制备方法同实施例1。
所述防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一种或几种。
试验例1本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水的晒后修复作用
实验材料：本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水
实验方法：面部外用
剂量设置：0.5ml/天
试验群体：22岁-40岁女性
实验结果：夏季太阳下暴晒后，面部皮肤出现红色晒斑。喷用添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水1-2次后红斑即可消失。
试验例2本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水的嫩肤作用
实验材料：本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水
实验方法：面部外用
剂量设置：1ml/天
试验群体：23岁-50岁女性居多
实验结果：使用两周，皮肤变得水嫩、弹性增加
试验例3本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水的抗粉刺作用
实验材料：本发明的一种添加低温超氧化物歧化酶的保湿爽肤水
实验方法：面部外用
剂量设置：0.2ml/天
试验群体：22岁-40岁女性居多
实验结果：使用一周，粉刺减轻或脱落。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。