本发明涉及药物提取物、提取物中有效成分的提取及应用
技术领域：
，具体涉及一种蛞蝓提取物、提取物中有效成分及其提取分离方法，还涉及蛞蝓提取物在戒毒方面的用途。
背景技术：
：毒品是一种能够使人形成瘾癖的麻醉药品和精神药品，它对人体机理、人体身心健康以及社会环境都会产生严重的危害，而且毒品的类型也越来越多样化，从鸦片、大麻发展到海洛因、k粉、冰毒等。戒毒、禁毒一直是世界性难题，至今未能有很好的解决办法，全球戒毒方式均以强制性戒毒或以毒攻毒的替代疗法进行戒毒。强制性戒毒既痛苦而又艰辛漫长；以美沙酮、纳曲酮等替代疗法是以一种毒品代替另一种毒品，或者暂时性阻断阿片受体，但都不能彻底让戒毒者从生理和心理上摆脱毒品，容易反弹和复吸，正如以低度白酒代替高度酒治疗酗酒一样，只不过以致瘾性稍微小的毒品替代了高致瘾性的毒品。多年来人们一直在寻找一种安全无依赖性的戒毒药物而无果。而中药是我国特有的中医药理论与实践的产物，资源丰富，历史悠久，也是人类最早应用的纯天然有机物质，若能发挥中医中药的优势，研制出一种具有戒毒药效的物质对进一步开发戒毒药品或戒毒食品将具有重大意义。蛞蝓，又名碾沐，为足襞蛞蝓科动物覆套足襞蛞蝓vaginulusalte(ferussac)的干燥全体。覆套足襞蛞(vaginulalte(ferussac))；《广西壮药质量标准第二卷》，【性味与归经】中医咸，寒。归肺、肝、大肠经。壮医咸，寒。【功能与主治】中医祛风定惊，清热解毒，消肿止痛。用于中风僻，筋脉拘挛，惊痫，喘息，咽肿，喉痹，痈肿，丹毒，痰核，痔疮肿痛，脱肛。壮医清热毒，调气道，通龙路。用于货烟妈(咽炎)、墨病(哮喘)，尊寸(脱肛)，兵嘿细勒(疝气)，呗农(痈疮)，京瑟(闭经)，蜈蚣咬伤。目前，尚未见以蛞蝓用于脱毒或戒毒药物的相关报道。技术实现要素：：本发明的目的是提供一种具有戒毒药效的蛞蝓提取物及其有效成分，本发明还提供该提取物及其有效成分的提取分离方法。该提取物具有明显的镇静催眠作用，对吗啡和苯丙胺引起的小鼠兴奋性具有抑制作用，对吗啡依赖大鼠戒断症状具有脱毒治疗效果，为中药提取戒毒物质开发戒毒药品、保健食品、食品提供新思路。本发明的技术方案如下：一种蛞蝓提取物，蛞蝓经超临界co2萃取或以有机溶媒回流提取、皂化得反应液，反应液采用有机溶剂萃取，萃取液回收有机溶剂制备而得。进一步的，所述有机溶媒包括正已烷、乙醇、甲醇、丙酮、三氯甲烷、油、汽油、石油醚、正丁醇、乙醚和乙酸乙酯等中的一种或两种；所述蛞蝓，包括覆套足襞蛞蝓(vaginulusalte(ferussac))、大蛞蝓(limaxmaximusl.)、黄蛞蝓(l.flavusl.)、野蛞蝓(agriolimaxagrestisl.)，双线粘液蛞蝓(phiolomycusbilineatus)的一种或多种；所述有机溶剂包括乙醚、乙酸乙酯和正丁醇中的一种或两种。一种以上所述的蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：s1.将蛞蝓粉碎得蛞蝓粉；s2.将蛞蝓粉投入至超临界co2萃取器中萃取，制得萃取物；s3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，制得反应液a；s4.将反应液a加入有机溶剂萃取，分取有机溶剂层，用水洗涤有机溶剂层至水洗液呈中性后，分取有机溶剂层，减压回收有机溶剂，得稠膏a，即为蛞蝓提取物。一种以上所述的蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓粉碎得蛞蝓粉；t2.将蛞蝓粉投入至多功能提取罐中，加入有机溶媒回流提取，过滤，提取液减压回收有机溶媒，制得稠膏b；t3.将稠膏b、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，制得反应液b；t4.将反应液b加入有机溶剂萃取，分取有机溶剂层，用水洗涤有机溶剂层至水洗液呈中性后，分取有机溶剂层，减压回收有机溶剂，得稠膏c，即为蛞蝓提取物。一种以上所述蛞蝓提取物的有效成分，其包括：进一步的，所述结构式中的r为或以上所述蛞蝓提取物有效成分的提取分离方法，包括以下步骤：w1.取稠膏a或稠膏c，加入甲醇，加热溶解，过滤，放冷，静置，析出结晶；w2.取结晶，通过制备型中压液相分离，液相条件为：制备型中压液相，反相c18柱，溶剂系统为甲醇:乙腈:异丙醇:水(70:20:6:4)，流速为50ml/mun。以上所述蛞蝓提取物在制备用于戒毒的药品、保健食品、食品方面的用途。本发明取得的有益效果1、本发明通过现代提取分离方法，结合大量药理实验筛选，得到具有镇静催眠作用，且对吗啡和苯丙胺引起的兴奋性具有抑制作用，并对吗啡依赖大鼠戒断症状经过用药可达到生理脱毒效果，且无身体及精神依赖性的蛞蝓提取物。2、本发明蛞蝓提取物可制备成药品、保健食品、食品，方便临床应用，同时有利于促进中药提取戒毒物质开发，对进一步开发戒毒药品、保健食品、食品具有重大意义。3、本发明提供的蛞蝓提取物及其中有效成分的提取分离方法，操作简单易行，提取的有效部位收率高，可操作性强，适合工业化大生产。具体实施例方式一、一种蛞蝓提取物的制备实施例1一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：s1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；s2.将处理好的蛞蝓粉60kg投入至超临界co2萃取器中进行萃取，萃取压力为25kpa，温度为65℃，流量为400pv，萃取时间为4h，制得萃取物，备用；s3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为85℃，反应时间为2h，制得反应液a，放冷备用；s4.将反应液a加入乙醚萃取，分取乙醚溶液，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙醚溶液，减压回收乙醚，得稠膏a，即为蛞蝓提取物。实施例2一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将处理好的蛞蝓粉100kg投入至多功能提取罐中，加入正已烷回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收正已烷，制得稠膏b，备用；t3.将稠膏b、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为90℃，反应时间为3h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏c，即为蛞蝓提取物。实施例3一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：s1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；s2.将处理好的蛞蝓粉100kg投入至超临界co2萃取器中进行萃取，萃取压力为25kpa，温度为65℃，流量为500pv，萃取时间为4h，制得萃取物，备用s3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为90℃，反应时间为3h，制得反应液a，放冷备用；s4.将反应液a加入正丁醇萃取，分取正丁醇溶液，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取正丁醇溶液，减压回收正丁醇，得稠膏a，即为蛞蝓提取物。实施例4一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将处理好的蛞蝓粉80kg投入至多功能提取罐中，加入混合溶剂(正已烷：乙醇＝1:1)回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收溶剂，制得稠膏b，备用；t3.将稠膏b、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为85℃，反应时间为2h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏c，即为蛞蝓提取物。实施例5一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将处理好的蛞蝓粉180kg投入至多功能提取罐中，加入混合溶剂(三氯甲烷：丙酮＝1：1)回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收溶剂，制得稠膏b，备用；t3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为100℃，反应时间为4h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，合并，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏c，即得蛞蝓提取物。实施例6一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将步骤1处理好的蛞蝓粉80kg投入至多功能提取罐中，加入混合溶剂(正丁醇：石油醚＝1:1)回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收溶剂，制得稠膏b，备用；t3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为90℃，反应时间为2.5h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏c，即为蛞蝓提物。实施例7一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：s1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；s2.将处理好的蛞蝓粉100kg投入至超临界co2萃取器中进行萃取，萃取压力为25kpa，温度为65℃，流量为500pv，萃取时间为4h，制得萃取物，备用；s3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为95℃，反应时间为3.5h，制得反应液a，放冷备用；s4.将反应液a加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，合并，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏a，即为蛞蝓提取物。实施例8一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将处理好的蛞蝓粉100kg投入至多功能提取罐中，加乙酸乙酯回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收溶剂，制得稠膏b，备用；t3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为90℃，反应时间为3h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙醚萃取，分取乙醚溶液，合并，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙醚溶液，减压回收乙醚，得稠膏c，即为蛞蝓提取物。实施例9一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：t1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；t2.将处理好的蛞蝓粉100kg投入至多功能提取罐中，加入混合溶剂(甲醇:乙酸乙酯＝1:1)回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收溶剂，制得稠膏b，备用；t3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为90℃，反应时间为3h，制得反应液b，放冷备用；t4.取反应液b加入乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯溶液，用去离子水洗涤6次至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取乙酸乙酯溶液，减压回收乙酸乙酯，得稠膏c，即为蛞蝓提取物。实施例10一种蛞蝓提取物的制备方法，包括以下步骤：s1.将蛞蝓去除杂质，粉碎成20目，备用；s2.将中处理好的蛞蝓粉180kg投入至超临界co2萃取器中进行萃取，萃取压力为25kpa，温度为65℃，流量为500pv，萃取时间为4h，制得萃取物，备用；s3.将萃取物、氢氧化钾和水按照重量比“萃取物:氢氧化钾:水＝1:1:1.5”加入反应釜中，混匀，加热搅拌发生皂化反应，加热温度为100℃，反应时间为4h，制得反应液a，放冷备用；s4.将反应液a加入正丁醇萃取，分取正丁醇溶液，合并，用去离子水洗涤至水洗液呈中性(ph＝7)后，分取正丁醇溶液，减压回收正丁醇，得稠膏a，即为蛞蝓提取物。二、蛞蝓提取物中有效成分的制备一种蛞蝓提取物的有效成分，其结构通式为其包括：菜籽甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、麦角甾醇、链甾醇、胆固醇，其中菜籽甾醇的结构特征为豆甾醇的结构特征为β-谷甾醇的结构特征为胆固醇的结构特征为实施例11一种蛞蝓提取物中有效成分的制备方法，包括以下步骤：w1.取实施例5制备所得的稠膏c，加入甲醇，加热溶解，过滤，放冷，静置，析出结晶，过滤，得结晶；w2.取结晶，通过制备型中压液相分离，液相条件为：制备型中压液相，反相c18柱，溶剂系统为甲醇:乙腈:异丙醇:水(70:20:6:4)，流速为50ml/mun，得各有效成分。实施例12：一种蛞蝓提取物中有效成分的制备方法，包括以下步骤：w1.取实施例10制备所得稠膏a，加入甲醇，加热溶解，过滤，放冷，静置，析出结晶，过滤，到结晶；w2.取结晶，通过制备型中压液相分离，液相条件为：制备型中压液相，反相c18柱，溶剂系统为甲醇:乙腈:异丙醇:水(70:20:6:4)，流速为50ml/mun，得各有效成分。三、戒毒药效试验：为了验证本发明的提取物的戒毒药效，本发明进行了以下实验：实验一：取昆明种小鼠90只，雌雄各一半，随机分为9组。其中①组设为空白对照组，给大鼠皮下注射生理盐水，剩余②—⑨组按剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型，皮下注射吗啡，每天给药2次，每12小时一次，剂量从每次25mg/kg起，逐日递增，于第6天增至每次160mg/kg，注射量为0.2ml/100g，各组给药体积相同。到实验第7天，停用吗啡，进行纳洛酮催促戒断试验。各组分别给予不同处理：①组，空白对照组，给予同容量植物油；②组，吗啡模型组，给予同容量植物油；③组，阳性药对照组，给予美沙酮20mg/kg；④、⑤组分别为本发明实施例1制得的蛞蝓提取物低、高剂量组，给予蛞蝓提取物的剂量分别为0.24g/kg、0.48g/kg；⑥、⑦分别为本发明实施例3制得的蛞蝓提取物低、高剂量组，给予蛞蝓提取物的剂量分别为0.4g/kg、0.8g/kg；⑧、⑨分别为本发明实施例3制得的蛞蝓提取物低、高剂量组，给予蛞蝓提取物的剂量分别为0.32g/kg、0.64g/kg。各组连续给药3天。大鼠饮水、进食自由。分别在治疗第1天和第3天给药1h后，给予纳洛酮(8mg/kg)催瘾，观察30min内各组小鼠的跳跃反应和催促戒断前后体重变化，结果见表1、表2。表1吗啡依赖小鼠催促戒断跳跃反应次数序号组别第1天(次/30min)第3天(次/30min)①空白对照组0.4±0.6990.5±0.84②吗啡模型组63.2±14.6512.5±6.09③阳性药对照组25.1±6.922.9±6.81④实施例1低剂量组28.5±9.1910.8±2.06⑤实施例1高剂量组25.0±10.1812.18±1.18⑥实施例3低剂量组13.5±10.298.2±5.86⑦实施例3高剂量组35.0±12.286.5±2.68⑧实施例6低剂量组14.5±9.197.8±5.26⑨实施例6高剂量组24.0±10.185.18±3.28表1中数据表明，给小鼠连续注射吗啡7天后，经纳洛酮催促，吗啡依赖小鼠均出现明显的跳跃反应，不给予吗啡的空白对照组，在给予纳洛酮后，小鼠无明显戒断症状，蛞蝓提取物灌胃给药后，低、高剂量组小鼠出现跳跃反应次数均有所减少，与吗啡模型组比较提取物高低剂量以及阳性对照组小鼠的跳跃次数均显著减少，小鼠对吗啡依赖小鼠的催促戒断症状具有治疗作用，能抑制吗啡依赖小鼠催促戒断的跳跃反应。表2各组小鼠体重差值(催促前后体重差)序号组别第1天(g)第3天(g)①空白对照组0.19±0.170.34±0.31②吗啡模型组0.53±0.190.55±0.29③阳性药对照组0.22±0.190.46±0.23④实施例1低剂量组0.28±0.890.34±0.13⑤实施例1高剂量组0.20±0.190.24±0.03⑥实施例3低剂量组0.98±0.130.16±0.14⑦实施例3高剂量组0.86±0.210.13±0.12⑧实施例6低剂量组0.61±0.110.39±0.28⑨实施例6高剂量组0.53±0.210.29±0.26(p＜0.05，p＜0.01与空白对照组比较；p＜0.05，p＜0.015与吗啡对照组比较)从表2中数据可知，各吗啡依赖小鼠经纳洛酮催促后，随着戒断症状的出现，小鼠体重均明显下降，给予提取物治疗后，小鼠体重有所增加，在戒断的d1,蛞蝓提取物低、高组体重差异与吗啡模型组，有显著差异，戒断低3天，各组小鼠体重变化无明显差异，可见，本发明的蛞蝓提取物对吗啡依赖小鼠的体重下降有促进恢复的作用。实验二：取昆明种小鼠80只，雌雄各一半，禁食12h，饮水不限。将小鼠随机分为8组，即空白对照组；阳性药对照组(艾司唑仑2mg/kg)；本发明实施例1制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.24g/kg)、高剂量组(0.48g/kg)；本发明实施例3制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.4g/kg)、高剂量组(0.8g/kg)；本发明实施例6制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.32g/kg)、高剂量组(0.64g/kg)。将各组小鼠放入yls-1a多功能小动物自主活动记录仪中，适应5min后，测定小鼠给药前的自主活动次数，记录时间为10min。按上述剂量给各组小鼠给药，空白对照组给予同体积生理盐水灌胃。给药后30min，给每只小鼠腹腔注射吗啡(10mg/kg)。15min后放入记录仪内观察并记录小鼠10min内的活动次数，结果见表3。表3蛞蝓提取物对吗啡诱导兴奋性的影响(p＜0.05，p＜0.01与空白对照组比较；p＜0.05，p＜0.015与吗啡对照组比较)从表中数据可知，给空白对照组小鼠注射吗啡后，小鼠的活动次数明显增加，与给药相比有显著差异,p＜0.01，预先给予阳性药艾司唑仑，可明显抑制吗啡诱导小鼠兴奋作用，蛞蝓提取物低、高剂量组对吗啡是兴奋性作用均有不同程度的抑制作用，与空白对照组比较有明显差异，可见蛞蝓提取物对吗啡引起的小鼠兴奋性提高具有一定的抑制作用。实验三：取昆明种小鼠80只，雌雄各一半，禁食12h，饮水不限。将小鼠随机分为8组，即空白对照组；阳性药对照组(艾司唑仑2mg/kg)；本发明实施例1制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.24g/kg)、高剂量组(0.48g/kg)；本发明实施例3制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.4g/kg)、高剂量组(0.8g/kg)；本发明实施例6制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.32g/kg)、高剂量组(0.64g/kg)。将各组小鼠放入yls-1a多功能小动物自主活动记录仪中，适应5min后，测定小鼠给药前的自主活动次数，记录时间为10min。按上述剂量给各组小鼠灌胃给药，空白对照组给予同体积生理盐水灌胃。给药后30min，给每只小鼠腹腔注射苯丙胺(8mg/kg)。15min后放入记录仪内观察并记录小鼠10min内的活动次数，结果见表4。表4蛞蝓提取物对苯丙胺诱导兴奋性的影响从表6中数据可知，从表中数据可知，给空白对照组小鼠注射苯丙胺后，小鼠的活动次数明显增加，与给药相比有显著差异,p＜0.01，预先给予阳性药艾司唑仑，可明显抑制吗啡诱导小鼠兴奋作用，蛞蝓提取物低、高剂量组对吗啡是兴奋性作用均有不同程度的抑制作用，与空白对照组比较有明显差异，可见蛞蝓提取物对苯丙胺引起的小鼠兴奋性提高具有一定的抑制作用。实验四：取昆明种小鼠80只，雌雄各一半，禁食12h，饮水不限。将小鼠随机分为8组，即空白对照组；阳性药对照组(艾司唑仑2mg/kg)；本发明实施例1制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.24g/kg)、高剂量组(0.48g/kg)；本发明实施例3制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.4g/kg)、高剂量组(0.8g/kg)；本发明实施例6制得的蛞蝓提取物低剂量组(0.32g/kg)、高剂量组(0.64g/kg)。按上述各组剂量给药，空白对照组给予同体积生理盐水。45min后给每只小鼠戊巴比妥钠50mg/kg，然后记录各组小鼠的睡眠时间(以给药后小鼠翻正反射消失为入睡时间，翻正反射消失至恢复为睡眠时间)，结果见表5、表6。表5蛞蝓提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响序号组别小鼠睡眠时间(min)①空白对照组25.8+5.01②阳性药对照组66.22+13.77③实施例1低剂量组39.5+11.46④实施例1高剂量组32.8+9.56⑤实施例3低剂量组27+3.591⑥实施例3高剂量组26+2.17⑦实施例6低剂量组39.5+11.46⑧实施例6高剂量组45.7+9.56从表5中数据可知，蛞蝓提取物给药后可使戊巴比妥钠阈下睡眠剂量所致小鼠睡眠时间明显延长，蛞蝓提取物低、高组与空白对照组比较有显著性差异蛞蝓提取物能延长戊巴比妥钠阈剂量的小鼠睡眠时间。表6蛞蝓提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间表6可见，给空白对照组在给予阈下睡眠剂量的戊巴比妥钠后，仅有2只小鼠入睡，阳性对照组20只小鼠18只入睡，蛞蝓提取物低、高剂量组均有入睡小鼠，各组小鼠入睡个数有显著性差异，可见所述本发明的蛞蝓提取物具有明显的镇静催眠作用。试验五取sprague-dawley大鼠50只，雌雄各一半，随机分为5组，即阴性对照；吗啡对照组；本发明实施例1组；实施例3组；实施例6组。吗啡对照组及蛞蝓提取物组均采用递增给药法，吗啡对照组皮下注射盐酸吗啡，每天给药2次。按剂量递增原则，吗啡的给药剂量均从每次5mg/kg起，依次增加，至每次60mg/kg，连续用至第7天。实施例组按剂量递增原则，灌胃给药，每天2次，实施例1组剂量从0.5g/kg起，逐日递增至1.8g/kg，实施例3组剂量从0.5g/kg起，逐日递增至3.0g/kg，实施例6组剂量从0.5g/kg起，逐日递增至2.4g/kg，连续用至第7天。阴性对照组每天给予同容量植物油，给药时间及次数与蛞蝓提取物组相同。第8天给各组大鼠给予纳洛酮(5mg/kg)催促，观察催促戒断后30min内大鼠的戒断状态及催促戒断1h前后体重变化情况。表7蛞蝓提取物催促戒断反应及体重变化体重下降是阿片类药物成瘾及戒断的一个重要体征。从表中数据可知，吗啡对照组大鼠经纳洛酮催促后，大鼠的戒断症状分值和体重下降均明显高于阴性对照组，表明吗啡组大鼠形成了明显的身体依赖性，蛞蝓提取物组大鼠按照剂量递增法连续给药7天，经纳洛酮催促，戒断症状不明显，大鼠的评分值及体重下降与阴性对照组比较均无明显差异，可见本发明的蛞蝓提取物对大鼠催促戒断无依赖性作用即蛞蝓不具有身体依赖的特性。经多项动物实验证明，本发明制得的具有戒毒药效的提取物对吗啡依赖大鼠或小鼠的戒断症状具有脱毒治疗效果，对吗啡和苯丙胺引起的小鼠兴奋性具有抑制作用，并且具有镇静催眠作用。所述提取物急性毒性安全，无身体和精神依赖性，未来可用于戒毒药品、保健食品、食品的开发。以上内容是结合具体的优选的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，其还可以对这些已描述的实施例做出若干替代或变型，而这些替代或变型方式都应当视为属于本发明的保护范围。当前第1页12