本发明涉及到的是加压包裹法制作的快速调整药物释放速度的纳米壳聚糖。
背景技术：
纳米壳聚糖是目前最为重要的纳米技术产品之一，广泛应用于生物制药、疾病诊断、净化处理、环境监测、油漆涂料、化妆品等众多领域。纳米壳聚糖作药物载体时，它的超微小体积更容易穿过组织间隙，通过毛细血管壁、胃粘膜、肠粘膜甚至皮肤角质层，将所载的药物直接运输到靶向部位，缓慢释放，达到药物缓释和靶向给药的目的。该技术很好地改善了药物性能，解决当前影响药物疗效的诸多问题，在药物缓释上受到人们越来越多的关注。
纳米壳聚糖是目前最为重要的纳米技术产品之一，广泛应用于生物制药、疾病诊断、净化处理、环境监测、油漆涂料、化妆品等众多领域。纳米壳聚糖作药物载体时，它的超微小体积更容易穿过组织间隙，通过毛细血管壁、胃粘膜、肠粘膜甚至皮肤角质层，将所载的药物直接运输到靶向部位，缓慢释放，达到药物缓释和靶向给药的目的。该技术很好地改善了药物性能，解决当前影响药物疗效的诸多问题，在药物缓释上受到人们越来越多的关注。
壳聚糖（chitosan）是甲壳质脱乙酰化衍生物，广泛分布于甲壳类动物、昆虫和部份微生物细胞壁中。是仅次于纤维素的第二大多糖类，资源十分丰富。由于壳聚糖比甲壳质更具优异生物特性，现已广泛应用于生物医学、化学化工、食品工业、化妆品工业、轻工业、农业、环保治污和微电子等领域。成为全球开发研究的热点之一。我国各类壳聚糖产品多数为普通尺寸壳聚糖，未能真正展示壳聚糖的生物活性和优异医学特性的全貌，而纳米技术的介入是解决上述问题的途径。
研究发现，药物的释放行为可通过在微球外表面，修饰高分子聚合物包覆层的亲疏水性和厚度控制。如peg-pla的亲疏水性因二者分子量的不同而不同，因此可以通过使用具有不同分子量的peg-pla包覆层控制药物的释放行为。
但是聚合物包覆层控制药物的释放行为受到聚合物浓度、分子量、包覆层厚度等多种因素的影响，因此，实验室中需要找到一种可以快速调整聚合物包覆层控制药物的释放速度的方法，以利于研究在不同药物释放速度下，载药纳米壳聚糖的性质。
技术实现要素：
有鉴于此，为了解决上述问题，本发明提供一种加压包裹法制作的快速调整药物释放速度的纳米壳聚糖。
加压包裹法制作的快速调整药物释放速度的纳米壳聚糖，包括内核为装载药物的纳米壳聚糖，外层为高分子聚合物包裹层，纳米壳聚糖表面的高分子聚合物包裹层高低不平，且单个纳米壳聚糖表面有些局部包裹有高分子聚合物层、有些局部未包裹高分子聚合物层，其特征为在上述纳米壳聚糖制作过程中，将纳米壳聚糖粉末分散均匀，平铺在平整光洁且表面强度足够的平面上，再将另一个平整光洁且硬度足够的表面压在纳米壳聚糖粉末上进行加压，调整好加压压力，然后逐滴在纳米壳聚糖粉末周围滴加高分子聚合物溶液，润湿即可，常温下保持通风至溶液挥发完毕。
进一步的，内核为壳聚糖-硅胶纳米。
进一步的，包裹高分子高分子聚合物后的纳米壳聚糖直径1000nm。
进一步的，纳米壳聚糖包封率为60-80%。
进一步的，纳米壳聚糖内核直径600nm-800nm。
进一步的，将包裹层中的高分子聚合物，为peg或者pla-peg或者pla-peg-pla。
高分子聚合物包覆层是致密且表面多孔结构，其释放内部药物的速度与其包裹时溶液的浓度（分子量）和包裹层厚度有关。为了得到不同释放速度的包裹层，传统技术需要调整溶液分子量或者多次反复实行包裹。每得到一次不同释放速度的包裹层，都必须进行一次完整的从微球制作-载药-包裹外层的工艺。而且不符合要求（释放速度）的实验品只能丢弃，浪费时间和药品。而且包裹时使用的氯仿有毒，采用多次包裹来调节包裹层厚度的工艺，对实验者不安全。采用本申请中结构的包裹层，即可快速调节包裹层释放速度。当需要配置不同释放速度的包裹层时，只需使得纳米壳聚糖表面的高分子聚合物包裹层高低不平，单个纳米壳聚糖表面局部包裹有高分子聚合物层、局部未包裹高分子聚合物层。此时包裹层的控制内部药物释放的速度，取决于表面包裹情况（有包裹层的地方药物释放慢，没有包裹层或者包裹层薄的地方释放快，单个微粒的释放速度因此得到改变），修改包裹情况（包裹层高低不平、局部包裹有高分子聚合物层、局部未包裹）即可制作出不同释放速度的包裹层。
高分子聚合物包覆纳米壳聚糖以后，纳米壳聚糖结构为球状，其在加压以后，互相之间紧密结合，表面互相之间重叠，重叠的程度和加压压力基本呈线性关系。当浸润在高分子聚合物的氯仿溶液内后，微球未重叠的表面包裹上高分子聚合物层，重叠的表面未包裹到。风干以后，形成表面高低不平，局部包裹高分子聚合物层、局部未包裹高分子聚合物层的微球。该微球的药物释放速度和高分子聚合物层溶液分子量及微球表面包裹程度有关。当高分子聚合物层溶液分子量不变只，药物释放速度只与加压压力（微球表面在加压时，互相之间重叠的程度、压力大小）有关。因此通过本技术方案，实验室里可以快速调整peg-pla包覆层控制药物的释放速度以利于研究在不同药物释放速度下，纳米壳聚糖的性质。
附图说明
图1是本发明的结构示意图。
具体实施方式
1.1材料
壳聚糖(cs，分子量为5000da，脱乙酰度为85%)，浙江澳兴。dl-硫辛酸99%(la)、硬脂酸98%(sa)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc)、n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)、二硫苏糖醇(dtt)，均购自阿拉丁试剂(中国)有限公司。甲酸溶液(浓度为88%)、甲醛溶液(浓度为40%)、无水乙醇均为分析纯，购自天津试剂批发公司。
1.2接枝壳聚糖的制备
取1g壳聚糖溶于70ml去离子水中，将硬脂酸(硬脂酸与壳聚糖的氨基的摩尔比为0.2:1)与1.6gedc和0.95gnhs溶于35ml乙醇中(edc和nhs与羧基的摩尔比均为10:1)，室温下预反应0.5h后滴加入壳聚糖的水溶液中，60℃下反应2d。反应结束后，产物于去离子水中透析2d，每天更换透析水2次，透析袋的截留分子量为3500da。透析液冷冻干燥后得到硬脂酸修饰的壳聚糖(cs-sa)。
将cs-sa经同样的方法再接枝硫辛酸(硫辛酸与壳聚糖的氨基的摩尔比为0.2:1)，得终产物硬脂酸和硫辛酸接枝的壳聚糖(cs-sa-la)。全程避光操作。
1.3氨基的甲基化
将接枝壳聚糖cs-sa-la溶于一定量的88%的甲酸水溶液中，加入适量的甲醛溶液(甲醛与接枝壳聚糖上的自由氨基摩尔比分别为0.25:1、1:1和100:1)，搅拌均匀后，60℃下反应8~12h，产物用去离子水透析3d，每天更换透析水3次，透析袋的截留分子量为3500da。透析液冷冻干燥后得到终产物甲基化的接枝壳聚糖(me-cs-sa-la)。
1.4改性壳聚糖纳米粒子的制备
纳米粒子的制备：取cs-sa-la和me-cs-sa-la两种改性壳聚糖各10mg分别分散在10ml去离子水中，磁力搅拌3h，然后冰水浴中超声10次(每次6s，间隔1s)，在6000r/min下离心20min，取上清液冷冻干燥，即得到两种改性壳聚糖的纳米粒子。全程避光操作。
纳米粒子的交联：取改性壳聚糖纳米粒子cs-sa-la冻干样品重新分散于二次水中，浓度为0.2mg/ml。用0.2mol/l的pbs缓冲溶液(ph=9.0)调节ph值至8.5，然后充氮气10min，加入相对于接枝的硫辛酸10%(摩尔比)的dtt，氮气环境下室温反应22h，然后暴露于空气中透析1d，透析外液为二次水，每5h换水1次。再冷冻干燥透析内液，即得到交联的改性壳聚糖纳米粒子(cross-linkedcs-sa-la)。全程避光操作。
1.4改性壳聚糖纳米粒子外表面的修饰
将纳米壳聚糖粉末分散均匀，平铺在平整光洁且表面强度足够的平面上，再将另一个平整光洁且硬度足够的表面压在纳米壳聚糖粉末上进行加压，调整好加压压力，然后逐滴在纳米壳聚糖粉末周围滴加高分子聚合物溶液，润湿即可，常温下保持通风至溶液挥发完毕。
如图1，内核1为纳米壳聚糖，peg和pla-peg包裹层2因为包裹时互相之间紧密挤压，从而在包裹层2表面造成深浅不一的缺口21。且单个纳米壳聚糖表面有些局部包裹有peg和pla-peg包覆层2、有些局部22未包裹peg和pla-peg包覆层2。