包含天然提取物的舌下组合物及其用途的制作方法

本发明涉及天然提取物和包含所述提取物的组合物的领域。本发明特别涉及这种组合物作为食品补充剂的用途。
背景技术：
：自工业革命以来，我们呼吸的空气大为退步，特别是被强氧化剂物质污染，而大气中的这种变化，通常被称为“空气污染”，对人类和环境具有可怕的后果，例如影响全世界数百万人的呼吸问题。其他环境因素造成呼吸不良，例如暴露于过敏原(例如，尘螨、蟑螂、动物皮屑和霉菌)、暴露于香烟烟雾、由于交通污染或高臭氧水平导致的低空气质量、暴露于室内挥发性化合物(例如甲醛)、暴露于pvc中存在的邻苯二甲酸酯和暴露于高水平的内毒素、来自诸如农业工作、土木工程、采矿业等职业来源的环境风险。鉴于这种日益显著的空气污染，需要开发新物质和新制剂以改善呼吸健康。技术实现要素：在这种背景下，发明人鉴定了包含树枝提取物部分的新型组合物，所述树枝提取物优选来自树脂树，其富含多酚并表现出抗氧化和/或抗炎性质。更具体地，发明人意外地证实，配制在舌下组合物中的这些提取物具有改善的抗氧化功效，同时保持抗炎效应，并且适合于改善呼吸健康、缓解关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或提高耐力以及改善性欲和/或生育能力。因此，本发明涉及一种舌下组合物，其包含相对于所述组合物总重量至少约10重量％的树枝提取物部分，所述树枝提取物优选来自至少一种树脂树，所述树枝提取物部分包含相对于所述提取物的总重量至少约50、优选至少70、更优选至少90重量％的多酚和小于约10重量％的萜烯。特别地，所述树枝提取物部分的多酚包含：相对于所述提取物的总重量-约25至约50重量％的羟罗汉松脂酚(hydroxymatairesinol)，-约5至约15重量％的落叶松脂酚(lariciresinol)，和-约5至约15重量％的开环异落叶松脂酚(secoisolariciresinol)。在一个具体实施方式中，所述舌下组合物的树枝提取物部分选自欧洲冷杉(abiesalba)、欧洲云杉(piceaabies)、垂枝桦(betulapendula)、欧洲红松(pinussylvestris)、西伯利亚冷杉(abiessibirica)、西伯利亚红松(pinussibirica)、香脂冷杉(abiesbalsamea)、北美香柏(thujaoccidentalis)、北部白雪松(northernwhite-cedar)、瑞士五针松(pinuscembra)、花旗松(pseudotsugamenziesii)、欧洲落叶松(larixdecidua)、白云杉(piceaglauca)、黑云杉(piceamariana)、蓝云杉(piceapingens)、梳状冷杉(abiespectinata)、高山冷杉(abieslasiocarpa)、班克松(pinusbanksiana)、欧洲黑松(pinusnigra)、海岸松(pinuspinaster)、脂松(pinusresinosa)、美洲落叶松(larixlariciana)、西伯利亚落叶松(larixsibirica)、北美乔柏(thujaplicata)、欧洲山毛榉(fagussylvatica)、白杨(populusalba)、黑杨(populusnigra)、欧洲山杨(populustremula)、populustremulus、异叶铁杉(tsugahetewphylla)、扭叶松(pinuscontorta)、弗吉尼亚桧(juniperusvirginiana)，及其混合物。在一个优选实施方式中，所述树脂树选自欧洲冷杉和/或欧洲云杉。在另一个具体实施方式中，所述提取物的多酚选自羟罗汉松脂酚、落叶松脂酚、开环异落叶松脂酚及其任何差向异构体。在一个优选实施方式中，本发明的舌下组合物包含相对于所述组合物的总重量约10至约50重量％的如本文公开的树枝提取物部分。在一个特定实施方式中，所述舌下组合物还包含增稠剂、甜味剂、崩解剂、分散剂、润滑剂和/或流动剂。在一个更优选的实施方式中，本发明的舌下组合物包含：相对于所述组合物的总重量-约10至约50重量％、优选约10至约40重量％、更优选约10至约20重量％的所述提取物；-约40至约90重量％、优选约50至约80重量％的微晶纤维素；-约0.01至约2重量％、优选约0.50至约1.50重量％的网状羧甲基纤维素钠；和-约0.01至约2重量％、优选约0.50至约1.50重量％的硬脂酸镁。在另一个特定实施方式中，如本文定义的舌下组合物还包含至少一种用于呼吸健康的活性成分和/或至少一种膳食补充剂。优选地，所述至少一种用于呼吸健康的活性成分选自来自下列各项的提取物：冷杉属(abies)、西伯利亚冷杉、金虎尾(acerola)、欧蓍草(achelleamillefolium)、熊葱(alliumursinum)、药用蜀葵(althaeaofficinalis)、穿心莲(andrographispaniculata)、茴芹、苹果、蛔蒿(artemisiacina)、疆南星(arumkorolkowii)、匐地车叶草(asperulahumifusa)、黄芪属(astragalus)、avenca、秘鲁香脂(aalsamperu)、aiebersteiniamultifidi、阿米芹(bishop'sweed)、黑云杉、黑茴香籽(blackseed)、蓝莓、紫草、巴西胡椒树(brazilianpeppertree)、蜂斗菜、茶树(camelliasinensis)、carapia、猫薄荷、葛缕子、锡兰肉桂(cinnamomumverum)、锡兰肉桂(cinnamomumzeylanicum)、柑橘、葡萄柚(citrusparadisi)、甜橙(citrussinenses)、洋甘菊(chamomile)、灌木(chaparral)、小球藻、毛喉鞘蕊(coleusforskohlii)、款冬(coltsfoot)、古巴香脂树(copaiba)、姜黄(curcumalonga)、柠檬香茅(cymbopognoncitratus)、cychopelarriumintybus、蒲公英、丹参、茅膏菜属(drosera)、紫松果菊属(echinacea)、embauba、英国常春藤(englishivy)、桉树、澳洲尤加利(cucapyptusradiate)、espinheira、月见草(eveningprimrose)、旋果蚊子草(filipendulaulmaria)、冷杉、连翘、墨角藻(fucusvesiculosus)、大蒜、断肠草、美洲格尼帕树(genipaamericana)、雷公根(gotukola)、银杏树、人参、大车前(greatplantain)、格兰第菊、马兜铃属(guaco)、mikaniaglomerataspreng、guandu、山楂树、洋常春藤(hederahelix)、山葵、木贼、印度乳香(indianfrankincense)、juazeiro、juniperusseravschanica、justiciapaniculata、伽蓝菜、克拉草(khella)、猕猴桃、落叶松、薰衣草、薰衣草花、半边莲、光滑金虎尾(malpighiaglabra)、五脉白千层(melaleucaquinquenervia)、圆叶锦葵(malvaneglecta)、甘牛至(origanummajorana)、欧夏至(marrubiumvulgare)、辣木、香桃木、荨麻、家黑种草(nigellasativa)、牛至(origanumvulgare)、高丽参(panaxginseng)、保哥果、天竺葵、白千层、薄荷、辣薄荷(menthapiperita)、甘牛至、狭花天竺葵(pelargoniumsidoides)、胡椒薄荷、紫苏属(perilla)、picrorhiza、松树、胡椒属(piper)、余甘子(phyllanthusemblica)、大车前(plantagomajor)、车前草、毛喉鞘蕊花(plectranthusbarbatus)、黄花九轮草(primulaveris)、皂树、红三叶草、迷迭香、迷迭香属、药用鼠尾草(salviaofficinalis)、莎蔓芭亚蕨(samambaia)、五味子、罗汉果(siraitiagrosvenorii)、soiaisoflavoni、龙爪槐(sophorajaponica)、酸模、大豆、钝顶螺旋藻(spirulinaplatensis)、甜橙(sweetorange)、丁香(syzygiumaromaticum)、药用蒲公英(taraxacumofficinale)、诃子(terminaliachebula)、毗黎勒(terminaliabelerica)、铺地百里香(thymusserpyllum)、银斑百里香(thymusvulgaris)、番茄、款冬(tussilágofárfara)、酒神菊(vassourinha)、毛蕊花(verbascumthapsus)、绵毛荚蒾(viburnumlantana)、白夏至草以及北美圣草(yerbasanta)，和/或选自α-亚麻酸、α-硫辛酸、阿拉伯半乳聚糖、精氨酸、吐鲁香脂、β-葡聚糖、双歧杆菌、啤酒酵母、菠萝蛋白酶、咖啡因、胆碱、辅酶q-10、冬虫夏草、二十碳五烯酸(epa)、毛喉素、鱼油、γ-氨基丁酸(gaba)、谷胱甘肽、绿霉、青口贻贝、肌醇、乳酸杆菌、亚油酸、叶黄素、番茄红素、狭叶胡椒、n-乙酰半胱氨酸(nac)、吡哆醇、蜂胶、碧萝芷(pycnogenol)、鹌鹑蛋、槲皮素、白藜芦醇、藏红花、硒、舍雷肽酶、鲨鱼肝、umckaloabo、乳清蛋白、酸奶和玉米黄质。优选地，所述至少一种膳食补充剂是抗坏血酸、维生素或矿物质，选自铜、钙、镁、锌、维生素a、维生素b1、维生素b2、维生素b3、维生素b5、维生素b6、维生素b8、维生素b9、维生素b12、维生素c、维生素d、维生素e、维生素k、铁、碘、锰和钼。本发明的另一个目的是如本文定义的舌下组合物作为食品补充剂的非治疗用途，优选用于改善呼吸健康和/或用于改善性欲和/或生育能力。本发明的再一个目的是如本文定义的舌下组合物作为食品补充剂的非治疗用途，优选作为运动食品补充剂，尤其用于缓解关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或改善耐力。本发明还涉及一种试剂盒，其包含如本文定义的舌下组合物(例如食品补充剂组合物)和包装说明书或用户说明书，所述说明书包括所述组合物待用于呼吸健康和/或用于关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或耐力和/或性欲和/或生育能力的信息。发明详细描述发明人已经鉴定了新的舌下组合物，其包含树枝提取物部分，优选来自树脂树，所述树枝提取物富含多酚，并且已经通过几种方法证明，这样的提取物与抗氧化参比化合物如碧萝芷、α-生育酚(维生素e)和特罗克斯(trolox，维生素e样)相比以及与它的主要代谢产物如肠内酯和肠二醇相比，表现出改善的抗氧化和抗自由基活性。本发明的树枝提取物部分还表现出抗炎性质，所述抗炎性质通过所述提取物对花生四烯酸5-脂氧合酶(5-脂氧合酶或5-lox或5-lo)和前列腺素-内过氧化物合酶2(环氧合酶-2或cox-2))的抑制作用以及通过羟罗汉松脂酚(hmr)对白介素-1β(il-1β)、肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、5-脂氧合酶和前列腺素-内过氧化物合酶2的抑制作用来说明。本发明涉及如本文所公开的舌下组合物，其包含树枝提取物部分，所述树枝提取物优选来自至少一种树脂树，所述树枝提取物部分包含相对于所述提取物的总重量至少约50、优选至少70、更优选至少90重量％的多酚和小于约10重量％的萜烯。树枝提取物部分通常，本发明的提取物从树脂树的树枝部分通过标准提取方法获得，所述方法包括以下步骤：(a)提取，(b)分离液体/固体(过滤)，(c)浓缩，和(d)干燥。优选地，所述树枝提取物部分是干提取物。在一个具体实施方式中，所述舌下组合物的树枝提取物部分选自欧洲冷杉、欧洲云杉、垂枝桦、欧洲红松、西伯利亚冷杉、西伯利亚红松、香脂冷杉、北美香柏、北部白雪松、瑞士五针松、花旗松、欧洲落叶松、白云杉、黑云杉、蓝云杉、梳状冷杉、高山冷杉、班克松、欧洲黑松、海岸松、脂松、美洲落叶松、西伯利亚落叶松、北美乔柏、欧洲山毛榉、白杨、黑杨、欧洲山杨、populustremulus、异叶铁杉、扭叶松、弗吉尼亚桧及其混合物。在一个优选实施方式中，所述树枝提取物部分来自至少一种树脂树，所述树脂树优选选自欧洲冷杉、欧洲云杉、欧洲红松、西伯利亚冷杉、西伯利亚红松、香脂冷杉、北美香柏、北部白雪松、瑞士五针松、花旗松、欧洲落叶松、白云杉、黑云杉、蓝云杉、梳状冷杉、高山冷杉、班克松、欧洲黑松、海岸松、脂松、美洲落叶松、西伯利亚落叶松、北美乔柏、异叶铁杉、扭叶松、弗吉尼亚桧及其混合物。更优选地，所述树枝提取物部分是来自欧洲冷杉和/或欧洲云杉的树枝部分。用于本文时，“树枝部分”包括除了树干之外的树的部分。树枝部分包括例如叶、枝条、树皮、茎、芽和木结。在一个特定实施方式中，所述“树枝部分”不包括木结。在另一个特定实施方式中，所述“树枝部分”包括叶、枝条、树皮、茎和芽，并且尤其没有木结。本发明的舌下组合物的树枝提取物部分包含相对于提取物的总重量至少约50、60、70重量％、优选80重量％、更优选至少约90重量％的多酚和小于约10、8、6重量％、优选小于约5重量％的萜烯。多酚是一种结构类别的化学品，其特征在于存在众多的酚结构单元。当多酚在植物中被发现时，它们也可被称为“木酚素(lignan)”。作为在树脂树中发现的多酚或木酚素的实例，可以列举下列：-具有下式的羟罗汉松脂酚(hmr)：-具有下式的落叶松脂酚：-具有下式的开环异落叶松脂酚：和-具有下式的liovil：萜烯是一种大量而多样的有机化合物类别，由各种植物、特别是树脂树产生。萜烯是由具有分子式c5h8并由下式表示的异戊二烯单元通过生物合成得来的：作为树脂树中发现的主要萜烯，可以列举o-愈创木酚、萜二醇水合物、香草醛、2,5-二甲基苯丁酸、松柏醇、姜黄酮、保幼酮、脱氢保幼酮、泪杉醇和桉树脑(1,8-桉油酚)。本发明舌下组合物的具有改善的抗氧化效应的树枝提取物部分富含的多酚多于萜烯，并且特别地，包含相对于提取物的总重量小于约10重量％的萜烯。用于本文时，术语“约”将被本领域普通技术人员理解，并且将根据它所使用的上下文而在某种程度上变化。如果所述术语的使用，鉴于使用它的上下文而言，对于本领域普通技术人员是不明确的，则“约”将意指该特定项最多加减10％、优选5％。优选地，本发明的树枝提取物部分的多酚选自羟罗汉松脂酚(hmr)、落叶松脂酚、开环异落叶松脂酚及其任何差向异构体。用于本文时，术语“差向异构体”是指仅一个手性中心(stereogeniccenter)的构型上不同的非对映异构体。术语“非对映异构体”是一类彼此不可重合的、非镜像的立体异构体。例如，“羟罗汉松脂酚的差向异构体”是指如下式所示的非对映异构体7s、8r、8’r和7r、8r、8’r：在一个优选实施方式中，本发明树枝提取物部分包含：相对于所述提取物的总重量-约25至约50重量％的羟罗汉松脂酚，-约5至约15重量％的落叶松脂酚，和-约5至约15重量％的开环异落叶松脂酚。本发明的舌下组合物的树枝提取物部分还可以包含在树脂树中少量存在的任何其他化合物，例如如上所述的萜烯，并通常是桉树脑(1,8-桉油酚)。然而，由于桉树脑的毒性是有名的，它优选以少量存在，优选相对于所述提取物的总重量小于约10重量％，更优选小于约2重量％，并且更加优选小于约1重量％。在一个优选实施方式中，所述树枝提取物部分包含相对于所述提取物的总重量小于1重量％的桉树脑。如实施例所证实的，本发明的舌下组合物的树枝提取物部分富含多酚，即包含至少约90重量％的多酚，除了它的抗炎活性外，还具有改善的抗氧化活性，并因此适用于呼吸健康应用。这样的树枝提取物部分由于其改善的抗氧化活性允许缓解或防止关节疼痛和/或改善耐力，因此也适用于运动练习，例如慢跑和跑步。舌下组合物本发明涉及一种舌下组合物，其包含如本文定义的树枝提取物部分。特别地，本发明的组合物还可包含任何赋形剂，包括稀释剂和/或载体。这样的赋形剂当施用于动物、优选人类时，不会产生不利的、过敏的或其他不良反应。对于人类施用，组合物应满足例如fda(食品和药品管理局(foodanddrugadministration))生物制品标准办公室(officeofbiologicsstandards)所要求的无菌性、产热原性、一般安全性和纯度标准。在本发明的环境下，所述组合物适用于舌下施用。适于这样施用的形式的实例包括但不限于，片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、软膏剂、糊剂、乳膏剂、喷雾剂、凝胶剂、脂质体形式、贴剂如透皮贴剂或粘膜粘附贴剂。本发明的组合物通过舌下途径施用，从而允许避免所述提取物的多酚例如被消化道代谢，以保持有效和优化的抗氧化效应。如通过本申请的实施例所证实的，本发明的树枝提取物部分与其主要代谢物即肠溶二醇和肠内酯相比，具有更大的抗氧化和抗自由基效应。根据这种舌下施用，所述树枝提取物部分的多酚不会被消化道代谢，并且表现出改善的抗氧化或抗自由基活性，同时具有抗炎活性。适用于舌下施用的赋形剂、稀释剂和/或载体的实例包括但不限于，水、磷酸盐缓冲盐水(pbs)、厌氧磷酸盐缓冲盐水、碳酸氢钠、着色剂、增稠剂、甜味剂、包衣剂、稀释剂、粘结剂、崩解剂、分散剂、润滑剂、流动剂等。着色剂包括例如二氧化钛(e171)、二氧化铁(e172)和亮黑bn(e151)。增稠剂包括，例如但不限于，甘油单硬脂酸酯和淀粉如谷物淀粉(cornstarch)、玉米淀粉(maizestarch)、马铃薯淀粉和大米淀粉。甜味剂包括，例如但不限于，阿斯巴甜、龙舌兰糖浆、甜叶菊提取物、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、赤藓糖醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、糖精、三氯蔗糖、蔗糖、果糖、纽甜、乙酰磺胺酸钾、爱德万甜(advantame)、环己基氨基磺酸盐。包衣剂包括，例如但不限于，精制菜籽油、豆油、花生油、大豆卵磷脂和鱼明胶。稀释剂包括，例如但不限于，乳糖、一水合乳糖和淀粉。粘结剂包括，例如但不限于，聚维酮、预胶化淀粉、树胶(gum)、蔗糖、聚乙二醇(peg)4000和peg6000。崩解剂包括，例如但不限于，微晶纤维素、羧甲基淀粉钠如a型羧甲基淀粉钠以及网状羧甲基纤维素钠。分散剂包括，例如但不限于，聚氧乙二醇二硬脂酸酯。润滑剂包括，例如但不限于，硬脂酸镁和滑石粉。流动剂包括，例如但不限于，胶态无水二氧化硅和胶态二氧化硅。特别地，本发明的舌下组合物还包含增稠剂、甜味剂、崩解剂、分散剂、润滑剂和/或流动剂。在一个优选实施方式中，所述增稠剂是谷物淀粉。在另一个优选实施方式中，所述甜味剂是果糖。在另一个优选实施方式中，所述崩解剂是微晶纤维素和/或网状羧甲基纤维素钠。在另一个优选实施方式中，所述润滑剂是硬脂酸镁和/或滑石粉，更优选硬脂酸镁。在另一个优选实施方式中，所述分散剂是聚氧乙二醇二硬脂酸酯。在一个特定实施方式中，本发明的组合物包含相对于所述组合物的总重量至少约10重量％、优选约10至50重量％、更优选约10至约40重量％、更加优选约10至约35重量％的如本申请中所定义的树枝提取物部分。本发明的优选组合物包含：相对于所述组合物的总重量-约10至约50重量％、优选约10至约40重量％、更优选约10至约35重量％如上文所定义的树枝提取物部分；-约40至约90重量％、优选约50至约80重量％、更优选约60至约70重量％的微晶纤维素；-约0.01至约5重量％、优选约0.50至约2重量％、更优选约0.50至约1.50重量％、更加优选约0.80至约1.30重量％的网状羧甲基纤维素钠；和-约0.01至约5重量％，优选约0.50至约2重量％、更优选约0.60至约1.80重量％的硬脂酸镁。本发明的更优选组合物包含：-50-150mg如本文所定义的树枝提取物部分；-200-250mg、优选约230mg的微晶纤维素；-1-10mg、优选约4mg的网状羧甲基纤维素钠；-30-70mg、优选约50mg的聚氧乙二醇二硬脂酸酯；-1-10mg、优选约3mg的硬脂酸镁；和-1-10mg、优选约3mg的滑石粉。本发明的另一种更优选组合物包含：-30-100mg、优选40-60mg、更优选约50mg如本文所定义的树枝提取物部分；-150-200mg、优选约165mg的微晶纤维素；-1-10mg、优选约3mg的网状羧甲基纤维素钠；-30-70mg、优选约50mg的聚氧乙二醇二硬脂酸酯；-1-10mg、优选约4mg的硬脂酸镁；-1-5mg、优选约3mg的胶态二氧化硅；-10-50mg、优选约20mg的果糖；和-5-30mg、优选约10-20mg、更优选约17mg的谷物淀粉。本发明的舌下组合物通过将如上所定义的成分混合、继之以直接压缩进行压片的步骤来制备，如图5所示。应用由于如本文所公开的树枝提取物部分的改善的抗氧化和抗炎活性，包含所述提取物的舌下组合物可用作食品补充剂。在另一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种膳食补充剂或食品补充剂。用于本文时，“食品补充剂”或“膳食补充剂”旨在提供可能以其它方式不能足量摄入的营养素。根据fda，食品补充剂是非药用药品的产品，并且也必须符合如1994年“膳食补充剂健康和教育法案(dietarysupplementhealthandeducationact)”中规定的标准。它们一般通过口服和/或舌下施用来施用。食品补充剂包括，例如但不限于，维生素、矿物质、脂肪酸、氨基酸、草药等。在另一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种膳食补充剂，例如矿物质、维生素和抗坏血酸。在一个优选实施方式中，所述至少一种膳食补充剂选自铜、钙、镁、锌、维生素a、维生素b1、维生素b2、维生素b3、维生素b5、维生素b6、维生素b8、维生素b9、维生素b12、维生素c、维生素d、维生素e、维生素k、铁、碘、锰、钼和抗坏血酸。第一种应用是本发明的舌下组合物用于改善呼吸健康的优选作为食品补充剂的非治疗用途。用于本文时，表述“呼吸健康”还意味着促进最佳肺功能并防止肺系统功能的改变。因此，本发明涉及本发明的舌下组合物用于改善呼吸健康的用途，优选其非治疗用途。实际上，在这种情况下，待治疗的对象是健康的，即没有任何呼吸或肺部疾病，例如哮喘、copd(慢性阻塞性肺病)、慢性支气管炎、肺气肿、肺炎、肺癌。本发明还涉及改善对象、优选人类的呼吸健康的方法，所述方法包括通过舌下途径向所述对象施用有效量的如本文所定义的舌下组合物。用于本文时，表述“有效量”是指本发明组合物用以获得足够的抗炎和抗氧化活性从而改善对象的呼吸健康的最小量。更具体地，本发明的树枝提取物部分或组合物的有效量范围为约1ng/kg至约10g/kg体重。优选地，本发明的树枝提取物部分或组合物的有效量范围为约10ng/kg至约1g/kg、更优选约100ng/kg至约100mg/kg、更加优选约500ng/kg至约50mg/kg体重。本发明还涉及如本文所定义的树枝提取物部分在制备用于改善呼吸健康的本发明舌下组合物中的用途。本发明还可以涉及用于改善呼吸健康的本发明舌下组合物。在这种情况下，待治疗的对象有呼吸或肺部疾病或者容易罹患呼吸或肺部疾病。在一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种用于呼吸健康的活性成分。更特别地，所述用于呼吸健康的活性成分选自植物提取物，所述植物例如冷杉属、西伯利亚冷杉、金虎尾、欧蓍草、熊葱、药用蜀葵、穿心莲、茴芹、苹果、蛔蒿、疆南星、匐地车叶草(asperulahumifusa)、黄芪属、avenca、秘鲁香脂、aiebersteiniamultifidi、阿米芹、黑云杉、黑茴香籽、蓝莓、紫草、巴西胡椒树、蜂斗菜、茶树、carapia、猫薄荷、葛缕子、锡兰肉桂(cinnamomumverum)、锡兰肉桂(cinnamomumzeylanicum)、柑橘、葡萄柚、甜橙(citrussinense)、洋甘菊、灌木、小球藻、毛喉鞘蕊、款冬(coltsfoot)、古巴香脂树、姜黄、柠檬香茅、cychopelarriumintybus、蒲公英、丹参、茅膏菜属、紫松果菊属、embauba、英国常春藤、桉树、澳洲尤加利、espinheira、月见草、旋果蚊子草、冷杉、连翘、墨角藻、大蒜、断肠草、美洲格尼帕树、雷公根、银杏树、人参、大车前(greatplantain)、格兰第菊、马兜铃属、mikaniaglomerataspreng、guandu、山楂树、洋常春藤(hederahelix)、山葵、木贼、印度乳香、juazeiro、juniperusseravschanica、justiciapaniculata、伽蓝菜、克拉草、猕猴桃、落叶松、薰衣草、薰衣草花、半边莲、光滑金虎尾、五脉白千层、圆叶锦葵、甘牛至、欧夏至、辣木、香桃木、荨麻、家黑种草、牛至、高丽参、保哥果、天竺葵、白千层、薄荷、辣薄荷、甘牛至、狭花天竺葵、胡椒薄荷、紫苏属、picrorhiza、松树、胡椒属、余甘子、大车前(plantagomajor)、车前草、毛喉鞘蕊花、黄花九轮草、皂树、红三叶草、迷迭香、迷迭香属、药用鼠尾草、莎蔓芭亚蕨、五味子、罗汉果、soiaisoflavoni、龙爪槐、酸模、大豆、钝顶螺旋藻、甜橙(sweetorange)、丁香、药用蒲公英、诃子、毗黎勒(terminaliabelerica)、铺地百里香、银斑百里香、番茄、款冬(tussilágofárfara)、酒神菊、毛蕊花、绵毛荚蒾、白夏至草以及北美圣草。所述用于呼吸健康的活性成分也可以选自α-亚麻酸、α-硫辛酸、阿拉伯半乳聚糖、精氨酸、吐鲁香脂、β-葡聚糖、双歧杆菌、啤酒酵母、菠萝蛋白酶、咖啡因、胆碱、辅酶q-10、冬虫夏草、二十碳五烯酸(epa)、毛喉素、鱼油、γ-氨基丁酸(gaba)、谷胱甘肽、绿霉、青口贻贝、肌醇、乳酸杆菌、亚油酸、叶黄素、番茄红素、狭叶胡椒、n-乙酰半胱氨酸(nac)、吡哆醇、蜂胶、碧萝芷、鹌鹑蛋、槲皮素、白藜芦醇、藏红花、硒、舍雷肽酶、鲨鱼肝、umckaloabo、乳清蛋白、酸奶和玉米黄质。在一个优选实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种用于呼吸健康的活性成分和至少一种膳食补充剂。第二种应用是本发明的舌下组合物的非治疗用途，所述舌下组合物优选作为食品补充剂，更优选作为运动食品补充剂。更特别地，所述运动食品补充剂用于缓解和/或防止疼痛，特别是关节和/或肌肉疼痛，用于防止痉挛，和/或用于改善耐力和/或用于防止使用兴奋剂(doping)行为。体育锻炼伴随着营养物质氧化的显著增加以满足能量需求。在锻炼期间，许多生理系统和多种生化相互作用开始运行。然而，最重要的相互作用和限制表现的相互作用在心肺系统和骨骼肌之间。实际上，氧消耗量比休息时倍增10或20倍。耐力可以定义为保持长期且紧张用力的能力。显然耐力对运动员来说至关重要。没有它，他的能力受到限制。耐力的提高是运动员、甚至业余爱好者的主要目标之一。运动实际上是结合了技术、力量和耐力的一整套。提高耐力不仅允许维持更长久的用力，还可以增加体育活动的舒适度和愉悦感。良好的耐力允许骑自行车者愉快地登高和长途跑步者漫跑几个小时。在竞赛中，耐力使两名具有相似技能的运动员之间产生差异：忍受最大疲劳的运动员将在比赛结束时把控得更好，并且更有可能获胜。练习耐力对也是健康有一定益处的。定期进行体育锻炼防止高血压、糖和脂肪过剩——造成动脉堵塞(以及因此造成心血管疾病)的三个因素。此外，它有助于对抗其他疾病，如骨质疏松症、2型糖尿病和一些癌症。还知道运动增强免疫系统、增加心脏容积(由此增加它的效率)和赋予呼吸能力。最后，它维持肌肉质量并避免肌肉萎缩。在训练中，如在竞赛中，耐力运动员面临能量损失和自由基生成，这会减慢他们的表现、损害他们的恢复并且可能导致痉挛或疲劳。这种自由基生成一般伴随着抗氧化防御的增加，但氧化应激可能超过适应能力。因此，用抗氧化剂来帮助身体改善表现是一致的。还有，rena和torresb(brainres.reb.，2009，60(1)，57-64)已经表明il-1β在疼痛和炎症期间的作用，并且已经提议阻断il-1β可以是缓解关节疼痛的战略途径。此外，samad等(nature，2001，410，471-475)已经证明抑制il-1β降低了中枢产生的炎症性疼痛超敏性，以及martin等(americanjournalofphysiology，2006，291，1344-1348)提议脑il-1β增加在肌肉损伤性锻炼后的疲劳中起重要作用。在一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种活性成分，例如可用作食品运动补充剂。更特别地，所述活性成分可选自：维生素b1，维生素b2，维生素b3，维生素b5，维生素b6，维生素b8，维生素b9，维生素b12，维生素c，维生素d，维生素d3，维生素e，维生素h，维生素k，维生素pp，菠萝蛋白酶，肉毒碱，酪蛋白，酒石酸氢胆碱，软骨素，铜，肌酸，铬，二甲基甘氨酸(dmg)，氨基葡萄糖，idebedone，铁，碘(iode)，异亮氨酸，l-甘氨酸，亮氨酸，镁，麦芽糖糊精，锰，鸟氨酸，q10，硒，螺旋藻，牛磺酸，缬氨酸，乳清蛋白，锌，大蒜(alliumsativum)，山金车，朝鲜蓟，节旋藻，黄芪(膜荚黄芪(astragalusmembranaceus))，香蕉，啤酒酵母，β-胡萝卜素，桦，蓝莓，咖啡因，积雪草(centellaasiatica)，正金鸡纳(cinchonaofficinalis)，小球藻，冬虫夏草(cordyceps)，冬虫夏草(cordycepssinensis)，cynorhodon，紫花紫椎菊(echinaceapurpurea)，狭叶紫椎菊(echinaceaangutifolia)，白色紫锥菊(echinaceapallid)，五加，紫堇，梣，爪钩草(harpagophytum)，爪钩草(harpagophytumprocumbens)，沙棘(hippophaerhamnoides)，积雪草(hycdrocotyleasiatica)，生姜，银杏(ginkobiloba)，人参(ginseng)，枸杞，绿茶，瓜拉纳(paulliniacupana)，枣，迈因葶苈(lepidiummeyenii)，番茄红素，光滑金虎尾，荨麻(nettle)，橄榄叶，直管草，人参(panaxginseng)，海枣(phoenixdactylifera)，花粉，红景天(rhodiolarosea)，迷迭香(rosmarinusofficinalis)，白柳(salixalba)，西洋接骨木(sambucusnigra)，saturjea，五味子(schisandrachinensis)，中华球果菌(sphaeriasinenses)，螺旋藻，蓟，百里香，trigonellefenugrec，蒺藜(tribulusterrestris)，荨麻(urtica)，缬草(valerianaofficinalis，valerianeradix)，和催眠睡茄(withaniasomnifera)。在一个优选实施方式中，本发明的舌下组合物还包含硒。本发明的舌下组合物还可以在运动练习之前和/或之后由对象服用，特别是在关节健康、关节支持的前景中，通常用于缓解和/或防止关节疼痛和/或防止肌肉疼痛和痉挛和/或用于提高耐力。本发明的舌下组合物可以施用一次(用于即刻效应)或在一段时间内施用(用于长期效应)，例如在一周、几周、一个月或几个月期间施用。治疗周期可以基于训练周期来确定。因此，本发明的一个目的是本发明的舌下组合物优选作为运动食品补充剂特别是在缓解关节疼痛和/或防止肌肉疼痛和痉挛和/或改善耐力中的非治疗用途。另一个目的涉及一种在对象、优选人类、更优选运动员中缓解和/或防止关节疼痛和/或防止肌肉疼痛和痉挛和/或改善耐力的方法，所述方法包括通过舌下途径向所述对象施用有效量的如本文定义的舌下组合物。如本文所述，“运动员”是练习运动例如跑步、慢跑和任何需要身体活动的运动的人。在这种环境下，职业运动员和进行体育活动作为爱好的运动员之间没有区别。本发明的舌下组合物适合于专业运动员或者进行运动作为爱好的普通运动员。本发明的另一个目的是如本文所定义的树枝提取物部分在制造本发明的舌下组合物中的用途，所述舌下组合物用作运动食品补充剂、特别是用于缓解和/或防止关节疼痛和/或防止肌肉疼痛和痉挛和/或提高耐力。本发明的另一个目的是用于缓解和/或防止关节疼痛的本发明舌下组合物。在这种情况下，待治疗的对象或运动员有关节疼痛或容易遭受关节疼痛，并且直至更严重的疾病，例如关节融合、关节感染、骨关节炎和类风湿性关节炎等。对于运动应用，本发明的舌下组合物还可包含至少一种如上定义的膳食补充剂或食品补充剂和/或至少一种如上定义的用于呼吸健康的活性成分。第三种应用是本发明的舌下组合物优选作为食品补充剂用于改善性欲的非治疗用途。另一个目的涉及改善对象、优选人类的性欲的方法，所述方法包括通过舌下途径向所述对象施用有效量的如本文所定义的舌下组合物。实际上，众所周知氧化应激对性欲有负面影响。正如所知，抗氧化剂可以缓解氧化应激，于是它们帮助扩张血管、改善血液循环和对抗勃起功能障碍。实际上，通过放松个体的被称为海绵体(corporacavernosa)的那部分中的血管来刺激生殖器区域的性细胞。海绵体是海绵状的球，微小的神经被位于阴茎和阴蒂内的血管包围。对于男性来说，勃起和最佳感觉是由阴茎海绵体的正常功能支配的。在女性中，性快感和达到性高潮经常取决于阴蒂海绵体的活动。当在性兴奋时段期间充血时，海绵体(corpuscavernosum)变得活跃；它的刺激取决于生殖器肌肉的松弛。一氧化氮及其代谢物，环状gmp，是诱导生殖器肌肉松弛的两种主要生化物质，并因此增加流向海绵体的血液。特别地，最近的研究表明，抗氧化剂可以逆转内皮功能障碍，由此改善血液流向阴茎。他们通过中和自由基来做到这一点，自由基导致相关血管中的氧化应激和内皮损伤。研究人员已经表明，抗氧化补充剂可以改善勃起功能。还有，eggert-kruse(fertilsteril.，2007，87，810-823)已经讨论了il-1β在患有抑郁症的患者中的作用，众所周知抑郁症降低性欲。在一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种活性成分，例如可用作改善性欲的活性成分。更特别地，所述活性成分可选自：维生素a，维生素b，维生素b3，维生素b6，维生素b9，维生素c，维生素d，维生素e，精氨酸，cdp胆碱，cfmnitro，二甲基甘氨酸(dmg)，薯蓣素，薯蓣皂苷配基，五加属(eleutherococcus)，谷氨酰胺，纤细薯蓣皂苷，异亮氨酸，l-精氨酸，亮氨酸，亚油酸，l-赖氨酸，l-正缬氨酸，镁，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nadh)，泛酸，原纤细薯蓣皂苷，硒，水飞蓟宾，缬氨酸，锌，欧洲七叶树(aesculushippocastanum)，牛膝，圣洁莓(agnuscastus)，当归(angelicasinensis)，节旋藻，印度人参(ashwagandha)(催眠睡茄)，黄芪，膜荚黄芪，燕麦(avenasativa)，欧洲小檗(berberisvulgaris)，胡椒素，咖啡因，卡图巴(catuba)(erythroxylumcatuaba)，辣椒素，辣椒(cayennepepper)，积雪草，辣椒(chillipepper)，肉桂(cinamon)，香樟(cinnamomumcamphora)，肉桂(cinnanomumcassia)，肉苁蓉，柑橘，瓜氨酸，蛇床子(cnidium)，藏掖花(cnicusbenedictus)，蛇床子(cnidiummonnieri)，冬虫夏草，欧洲山茱萸(cornusmas)，山茱萸(cornusofficinalis)，姜黄，菟丝子(cuscuta)，菟丝子(cuscutachinensis)，锁阳茎，达米阿那(turneraaphrodisiaca)，起绒草(dipsacusfullonum)，小豆蔻(elettariacardamomum)，淫羊藿(epimedium)(箭叶淫羊藿(epimediumsagittatum))，淫羊藿(epimede)(山羊草，长距淫羊藿)，杜仲(eucommia)，杜仲(eucommiaulmoides)，丁香(eugeniacaryophyllata)，东革阿里(longjack根)，erythroxylumvaccinifolium，达米阿那(特纳草(turneradiffusa))，胡芦巴(trigonellafoenumgraecum)，红花(floscarthami)，香车叶草(galiumodoratum)，大蒜，生姜，银杏，人参(ginseng)，枸杞，绿茶，山楂(fructuscrataegi)，肉苁蓉(herbacistanches)，独活，海马，沙棘(hippophaerhamnoides)，组氨酸，淫羊藿苷，吕宋果(ignatiaamara)，枣，猕猴桃，毒莴苣(lactucavirosa)，迈因葶苈(lepidiummeyenii)，川芎(ligusticumwallichii)，风茄(mandragoraofficinarum)，玛卡(迈因葶苈)，苦瓜(momordicacharantia)，刺毛黧豆(mucunapruriens)，铁青树(muirapuama)(acantheavirilis)，巴西榥榥木(ptychopetalumolacoides))，卡姆果(myrciariadubia)，烟酸，白藓牛至(origanumdictamnus)，芍药(paeonialactiflora)，人参(panaxginseng)，瓜拉纳，胡椒，胡椒碱，苯乙胺，远志(polygalatenuifolia)，原薯蓣皂苷，川芎根(radixligusticiwallichii)，红莓，印度姜黄(rhizomacucurmae)，红景天，richeriagrandis，玫瑰，大马士革玫瑰(rosadamascena)，迷迭香，锯叶棕，藏红花，香薄荷，锯叶棕浆果(锯棕榈(fructusserenoae))，五味子(schizandra)，五味子(schisandrachinensis)，玄参，川乌(sichuanaconite)，水飞蓟(silybummarianum)，穗菝葜(smilaxaspera)，螺旋藻，牛磺酸，蒺藜(terrestris)，东革阿里(eurycomalongifolia)，蒺藜(tribulusterrestris)，trigonellefenugrec，荨麻，香草，圣洁莓(vitexagnus-castus)，小麦胚芽，茯苓(wolfiporiaextensa)以及育亨宾。本发明的另一个目的是如本文定义的树枝提取物部分在制造用于改善性欲的本发明舌下组合物中的用途。本发明的另一个目的是用于改善性欲的本发明的舌下组合物。第四种应用是本发明的舌下组合物优选作为食品补充剂用于改善生育能力、尤其是男性生育能力的非治疗用途。精子被不饱和脂肪酸形成的膜保护，所述膜可被通过氧化应激生成的自由基破坏。正是这种氧化应激导致近三分之一部分的不育男性的不育。此外，过剩的自由基可阻止一氧化氮合成，从而引起勃起功能障碍。此外，2005年进行的实验表明，摄入更多抗氧化剂的男性产生最大量的精液和最强壮的精子。还有，dousset等(humanreproduction，1997，12，1476-1479)研究了男性不育症中的血液激素状态，并观察到不育症患者的il-1β增加。在一个特定实施方式中，本发明的舌下组合物还包含至少一种活性成分，例如可用作改善生育能力的活性成分。更特别地，所述活性成分可选自：维生素b1，维生素b2，维生素b3，维生素b6，维生素b8，维生素b12，维生素d，维生素d3，维生素e，维生素c，维生素k，虾青素，β-胡萝卜素，菠萝蛋白酶，钙，胆碱，铬，铜，coq10，dhea，叶酸盐，叶酸，碘，肌醇，l-乙酰半胱氨酸，l-精氨酸，l-肉毒碱，l-谷胱甘肽，硫辛酸，锰，镁，褪黑素，n-乙酰半胱氨酸，二十八烷醇，ω3脂肪酸，泛酸，对氨基苯甲酸，黄体酮，红三叶草花，硒，锌，欧蓍草(achilleamillefolium)，当归(angelicasinensis)，总状升麻(actaearacemosa)，牛蒡(arctiumlappa)，圣洁莓(agnuscastus)((vitexagnuscastus))，芦荟(aloevera)，当归(angelicasinensis)，艾蒿(artemisiavulgaris)，印度人参，总序天冬(asparagusracemosus)，燕麦，黑升麻(blackcohosh)，总状升麻(cimicifugaracemosa)(actaearacemosa)，柑橘，蒲公英，当归(dongquai)，东革阿里，黄地百合(falseunicorn)，人参，人参属，光果甘草(glycyrrhizaglabra)，蜂蜜，七叶树，水飞蓟(ilybummarianum)，欧益母草(leonuruscardiaca)，迈因葶苈(maca)，亚麻(linumusitatissimum)，番茄红素，奶蓟，月见草(oenotherabiennis)，香芹(petroselinumcrispum)，何首乌(polygonummultiflorum)，蜂胶，巴西榥榥木，覆盆子叶，红三叶草，红树莓，蜂王浆，藏红花，芝麻(sesamumindicum)，五味子(schisandrachinensis)，西伯利亚人参，刺荨麻，药用蒲公英，红车轴草(trifoliumpratense)，蒺藜，异株荨麻(urticadioica)，圣洁莓以及催眠睡茄。本发明的另一个目的是如本文定义的树枝提取物部分在制造用于改善生育能力的本发明舌下组合物中的用途。本发明的另一个目的是用于改善生育能力的本发明的舌下组合物。本发明的另一个目的是一种试剂盒，其包含如本文定义的组合物和包装说明书或用户说明书，所述说明书包括所述组合物待用于呼吸健康和/或用于关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或耐力和/或性欲和/或生育能力的信息。附图说明图1：通过dpph法评价本发明的提取物(天然提取物)、羟罗汉松脂酚(hmr)、肠二醇、肠内酯和碧萝芷的抗自由基活性。图2：本发明的提取物(天然提取物)及其主要代谢物(肠二醇和肠内酯)的抗氧化活性评价，表示为特罗克斯(方形图案)和维生素e(虚线)的等效量。图3：通过技术评价本发明的提取物(天然提取物)、碧萝芷和羟罗汉松脂酚(hmr)的总抗氧化能力，表示为总抗氧化剂的毫摩尔数/克产物。图4：通过技术评价本发明的提取物(天然提取物)及其主要代谢物(肠二醇和肠内酯)的总抗氧化功效，表示为总抗氧化剂的毫摩尔数/克产物。图5：含有植物粉末的片剂的制造过程图。图6a：通过测量hmr(本发明提取物的代表性多酚化合物)在10、30和100μm下对tnf-α和il-1β细胞因子的抑制效应来评价本发明提取物的抗炎活性。图6b和6c：在5μg/mllps诱导之后，通过测量hmr(本发明提取物的代表性多酚化合物)在10、30和100μm下对tnf-α(图6b)和il-1β(图6c)细胞因子的抑制效应来评价本发明提取物的抗炎活性。图7：通过测量10μm的所述提取物和10μm的hmr对5-lo和cox-2的抑制效应来评价本发明提取物的抗炎活性。本发明的其他方面和优点将在下面的实验部分中公开。具体实施方式实施例1：舌下组合物1.树枝提取物部分的提取过程将54kg由欧洲云杉和欧洲冷杉树枝部分制成的天然原料放入提取器中(例如配备尼龙膜的lavergne型底部过滤型提取器)，并用15％乙醇水溶液(v/v)作为溶剂以1/10的材料/溶剂比在40℃提取24小时。通过使用旋转干燥器获得液/固分离。将固体提取物置于所述提取器中，并用15％乙醇水溶液(v/v)作为溶剂以1/10的材料/溶剂比在40℃提取1小时。通过使用旋转干燥器获得液/固分离。合并这两个液体提取物，用蒸发器(例如wiegand型落流蒸发器)在60℃和真空下进行液体提取物的浓缩。使用不锈钢喷雾干燥器(例如apvpsd52型雾化塔)通过雾化进行所述提取物的干燥，得到3.88kg干提取物。2.制备本发明组合物的过程用于制造片剂的设备可包括turbula混合器、配备有直径10mm的凸形冲头的压片机frogerais、精密天平ohaus。通过直接压缩各种赋形剂和植物提取物的混合物来进行压片。如图5所示，组合物b的制造图包括称取成分的阶段，第一混合阶段接着是两次连续的混合，这个之后添加硬脂酸镁和胶态二氧化硅。进行的各种控制涉及粉末混合物的均匀性、所得片剂的重量、不含植物粉末的粉末的压片、以及haussner的角度。更具体地，第一次混合时长为30分钟。第二次和第三次混合时长分别为3分钟。在工业上，有可能有必要在各个混合阶段结束时考虑筛分阶段。使用组合物a的特定成分，按照如图5所示的过程获得组合物a。3.舌下制剂3.1舌下组合物a3.2舌下组合物b来自欧洲云杉和欧洲冷杉的树枝提取物部分50mg微晶纤维素166.70mg网状羧甲基纤维素钠3.33mg硬脂酸镁4.36mg果糖26.70mg玉米淀粉16.70mg胶态二氧化硅2.70mg实施例2：本发明的树枝提取物部分的抗氧化和抗自由基活性评价2.1.dpph(2,2-二苯基-1-苦肼基)测定(burda和oleszek：“类黄酮的抗氧化和抗自由基活性(antioxidantandanti-radicalactivitiesofflavonoids)”，j.agric.foodchem.，2001，49，2774-2779)。为了研究所述提取物的抗自由基活性，已经使用了dpph试验。dpph自由基具有紫色，其在自由基化合物存在下被还原时变成黄色。用分光光度计测量的颜色强度与所测试化合物的抗自由基活性成反比。将溶解在甲醇中的不同稀释度的蜜蜂样品添加到3.9ml的6.1×10-5mdpph●甲醇溶液中。通过校准曲线计算反应介质中的准确初始dpph●浓度(cdpph●)。在517nm(分光光度计)下相对于由含有除了dpph●之外的所有试剂的样品构成的空白，监测dpph●的漂白30min。样品对dpph●的清除活性表示为ic50(mg/ml)，并从剂量-响应曲线外推得到。所述测定用本发明的提取物、羟罗汉松脂酚(hmr)、肠二醇、(法国海洋松树皮提取物，参比抗氧化化合物)一式四份(n＝4)地进行。抗自由基活性表示为ec50的值(ec50值越小对应的抗氧化活性越强)。如图1所示，本发明的树枝提取物部分的抗氧化活性优于hmr、肠二醇、肠内酯和碧萝芷。实际上，本发明的树枝提取物部分令人惊讶地显示出0.13mg/ml的ec50(降低50％dpph自由基的有效浓度)，小于hmr(ec50＝0.20mg/ml)和碧萝芷(ec50＝0.21mg/ml)的ec50。另外，本发明的提取物显示出0.13mg/ml的ec50，小于它的代谢物——即肠二醇(ec50＝0.28mg/ml)和肠内酯(ec50＝0.30mg/ml)的ec50。2.2.特罗克斯等效抗氧化能力(teac)测定(rer.，pellegrinin.，proteggentea.，pannalaa.，yangm.，rice-evansc.：“应用改良的abts自由基阳离子脱色测定的抗氧化活性(antioxidantactivityapplyinganimprovedabtsradicalcationdecolorizationassay)”，freeradicalbiology&medicine，1999，26(9)，1231–1237)。本发明的提取物的总抗氧化活性与参比抗氧化化合物(α-生育酚，特罗克斯)和它的代谢物(肠二醇和肠内酯)相比，源于其抑制自由基abts·+的能力，所述自由基得自abts(2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-酸6-磺酸)的铵盐)。abts自由基阳离子(abts●+)通过使7mmabts储液与2.45mm过硫酸钾反应并在使用之前让所述混合物在室温下黑暗中静置12-16小时而产生。接下来将abts●+溶液用pbs(磷酸盐缓冲盐水)(ph7.4)稀释至在734nm处的吸光度为0.5并在30℃下平衡。200μl的abts●+和(10，20，35，50，70，80μl)的产物溶液(0.5mg/l)混合并用缓冲溶液调节至300μl。温育15min后，测量光密度。所述测定一式四份地进行(n＝4)。功效表示为ec50的值(ec50值越小对应的抗氧化活性越强)。如表1中所示，本发明的天然提取物令人惊讶地显示在该测定中具有0.020mg/ml的最小ec50值(在平衡时除去50％abts的有效浓度)。表1：在teac测定中获得的ec50值另外，图2强调了所述树枝提取物部分与其主要代谢物之间抗氧化功效的醒目差异。实际上，1g所述天然提取物的抗氧化活性相当于1.07g的特罗克斯(方形图案)和1.53g的维生素e(虚线)，而1g肠内酯的抗氧化活性相当于0.13克特罗克斯(方形图案)和0.19g维生素e(虚线)，1g肠二醇的抗氧化活性相当于0.15g特罗克斯(方形图案)和0.22g维生素e(虚线)。2.3.氧自由基吸收能力(orac)测定(oub.，hampsch-woodillm.和priorr.l.：“利用荧光素作为荧光探针的改良的氧自由基吸收能力测定的开发和验证(developmentandvalidationofanimprovedoxygenradicalabsorbancecapacityassayusingfluoresceinasthefluorescentprobe)”，j.agric.foodchem.，2001，49(10)，4619-4626)通过orac方法测量抗氧化能力是基于在含有抗氧化性化合物的食品基质中由于荧光素(fl)与过氧自由基roo*的反应而引起的荧光素的荧光下降的检测。以激发波长为485nm和发射滤光片为528nm读取荧光。在ph7.4的75mm磷酸盐缓冲溶液中制备aaph溶液和fl。该反应的对照是特罗克斯，它也在相同的缓冲液中制备。将六个不同量(10，20，35，50，70，80μl)的浓度为0.5mg/l的产物置于含有fl的微孔板的孔中，并用缓冲溶液调节至相同的体积(80μl)。所述混合物在37℃预温育30min，然后使用多通道移液枪快速添加aaph溶液(220μl)。将微孔板立即放入读数器中，每6min记录荧光直至240min。使用含有fl和aaph的空白，用磷酸钠缓冲液代替抗氧化溶液。抑制能力表示为参比化合物当量(μm)，并通过将荧光素的曲线下面积(auc)积分来量化。所述测定一式四份(n＝4)地进行。所测试样品的功效表示为参比orac单位/克产物(值越高对应的抗氧化活性越强)。结果在表2中示出。表2：本发明的树枝提取物部分、碧萝芷、hmr、肠二醇和肠内酯的抗氧化活性。值表示为当量单位(μmol参比化合物/克测试产物)。结果显示，1克的所述树枝提取物部分的抗氧化活性分别相当于2400μmol的特罗克斯、1300μmol的维生素c、1200μmol的维生素e(生育酚)和310μmol的β-胡萝卜素的总抗氧化能力。令人惊讶的是，所述树枝提取物部分的抗氧化活性大大高于1g碧萝芷、1g羟罗汉松脂酚(hmr)和1g所述天然提取物的代谢物(肠二醇和肠内酯)的抗氧化活性。2.4.总抗氧化能力测定(氧化应激)(总抗氧化能力/总氧化能力)技术是基于氧化还原反应的电化学性质：抗氧化剂和氧化剂之间的平衡[www.ie-antioxydants.com]。所述测定一式四份(n＝4)地进行(值越高对应的抗氧化功效最佳)。如图3所示，本发明的天然提取物的总抗氧化功效(10.31mmol/g当量的抗氧化剂)令人惊讶地优于碧萝芷(8.82mmol/g当量的抗氧化剂)和hmr(4.99mmol/g当量的抗氧化剂)。下表3总结了所述天然提取物、碧萝芷和hmr相对于参比抗氧化化合物即维生素e(生育酚)、特罗克斯和β-胡萝卜素的抗氧化活性的值。令人惊讶的是，所述树枝提取物部分在所测试产物中显示出最佳的抗氧化活性。实际上，1克本发明的树枝提取物部分相当于2.2g的维生素e、1.29g的特罗克斯和5.53g的β-胡萝卜素的抗氧化功效。表3：相对于参比化合物的抗氧化活性树枝提取物部分碧萝芷hmr维生素e*2.221.901.07特罗克斯*1.291.100.62β-胡萝卜素*5.534.742.68*参比化合物克数/克测试产物如图4所示，在该测定中本发明的树枝提取物部分与其主要代谢物的功效之间的差异，表示为总抗氧化剂的毫摩尔数/克产物(所测试产物的总体抗氧化特征的量度；值越高对应的抗氧化功效最佳)。实际上，发明人意外地发现，所述树枝提取物部分的总抗氧化功效(10.31mmol/g当量抗氧化剂)比其代谢物(肠二醇(1.07mmol/g当量抗氧化剂)和肠内酯(1.06mmol/g当量的抗氧化剂))的抗氧化功效高至少十倍。2.5.结论发明人意外地表明，与参比化合物如碧萝芷、α-生育酚(维生素e)和特罗克斯(维生素e样)相比，本发明的天然树枝提取物部分具有更高的抗氧化活性，从而证明了对于呼吸健康、对于缓解关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或对于改善耐力以及对于改善性欲和/或生育能力的改善的功效。发明人还意外地表明，本发明的天然树枝提取物部分与其主要代谢物(肠内酯和肠二醇)相比具有更大的抗氧化活性，从而证明了当所述组合物通过避免代谢的途径如舌下途径施用时的改善的功效。实施例3：hmr(本发明的树枝提取物部分的代表性多酚化合物)的抗炎活性评价白介素-1β(il-1β)和肿瘤坏死因子-α(tnf-α)介导许多炎性疾病的发展。因此，il-1β和tnf-α构成合适的生物标志物，以表征本发明的树枝提取物部分的化合物的抗炎性质。外周血单核细胞(pbmc)从健康供体的外周血(etablissementdusang)根据kümmerle等(jmedchem.2012，55，7525–7545)略作修改来制备。使用histopaque梯度(sigma)分离pbmc，在hanks平衡盐溶液(sigma)中洗涤，然后在补充有10％(v/v)胎牛血清(fbs)(paa)、100u/ml青霉素和100μg/ml链霉素(paa)的rpmi-1640培养基(sigma)中培养。将pbmc接种到96孔板(8×104个细胞/孔)中，并用5μg/mllps(脂多糖，sigma)刺激，达到每孔总体积为120μl。将hmr重悬于dmso中并在10、30和100μm(dmso1％)下一式两份地进行测试。没有lps刺激的细胞被视为生物无活性的对照(基础细胞因子水平)。细胞培养在37℃(5％co2)下实现。24小时后，将pbmc上清液转移到384孔板中。根据供应商的建议，使用htrf技术(cisbiobioassays)对tnf-α(62tnfpec)、il-1β(62il1pec)进行细胞因子检测。使用envision多标记读数器(perkinelmer)采用供应商推荐的参数在温育3小时后进行读数。结果呈现在下面的表4和图6a、6b和6c中。表4：hmr在10、30和100μm下对tnf-α和il-1β的抑制％结果显示了hmr对il-1β和tnf-α的抑制作用，从而证明了所述天然树枝提取物部分和包含这种提取物的舌下组合物的抗炎效应。还有，图6b和6c特别显示了hmr分别对tnf-α和il-1β的剂量依赖性抑制效应。实施例4：hmr和本发明的树枝提取物部分的抗炎活性评价前列腺素-内过氧化物合酶2(环加氧酶-2；cox-2)和花生四烯酸5-脂氧合酶(5-脂氧合酶；5-lox；5-lo)是众所周知的参与炎症的酶。人cox-2抑制测定：将所测试化合物、参比化合物或水(对照)在室温下与酶(≈0.2μg)在含有90mmtris-hcl(ph8.0)、1.98mm苯酚和1.02μm苏木精的缓冲液中预温育20min。此后，通过添加2μm花生四烯酸引发反应，并将所述混合物在室温下温育5min。对于基础对照测量，从反应混合物中省略花生四烯酸。温育后，通过添加1mhcl、然后1mtris/hcl(ph8.0)、然后冷却至4℃来终止反应。然后添加荧光受体(d2标记的pge2)和荧光供体(用铕穴合物标记的抗pge2抗体)。120min后，使用微孔板读数器(envision，perkinelmer)在λex＝337nm、λem＝620nm和λem＝665nm下测量对应于残留pge2量的荧光转移。通过将在665nm处测量的信号除以在620nm处测量的信号(比率)来确定酶活性。结果表示为对照酶活性的抑制百分比。标准抑制性参比化合物是ns398，其在每个实验中以几种浓度进行测试以获得抑制曲线，由此计算它的ic50值。参考文献：glaser，k.，sung，m.l.，o'neill，k.，belfast，m.，hartman，d.，carlson，r.，kreft，a.，kubrak，d.，hsiao，c.l.和weichman，b.(1995)，相比人pghs-1，依托度酸选择性抑制人前列腺素g/h合酶2(pghs-2)(etodolacselectivelyinhibitshumanprostaglanding/hsynthase2(pghs-2)versushumanpghs-1).eur.j.pharmacol.，281：107-111。人5-lo抑制测定：将测试化合物、参比化合物或水(对照)在室温下与104个裂解细胞/孔在含有50mmtris-hcl(ph7.4)、5mmcacl2、2mmedta、1μmatp和50nm荧光探针二氢罗丹明123的缓冲液中预温育5min。然后使用微孔板读数器(envision，perkinelmer)在λex＝485nm和λem＝535nm下测量荧光强度。t＝0时的这种测量允许检测任何化合物在这些波长下对所述荧光检测方法的干扰。此后，通过添加25μm的底物花生四烯酸引发反应，并将所述混合物在室温下温育20min。通过添加含有67％乙腈和0.2％乙酸的缓冲液终止反应，并在相同波长(t＝20)下测量由反应产物罗丹明123发出的荧光强度。通过从t＝20时测量的信号中减去在t＝0时测量的信号来确定所述酶活性。结果表示为对照活性的抑制百分比。标准抑制性参比化合物是ndga，其在每个实验中以几种浓度进行测试以获得抑制曲线，由此计算它的ic50值。参考文献：pufahl，r.a.，kasten，t.p.，hills，r.，gierse，j.k.，reitz，b.a.，weinberg，r.a.和masferrer，j.l.(2007).人5-脂氧合酶的基于荧光的酶测定法的开发(developmentofafluorescence-basedenzymeassayofhuman5-lipoxygenase).anal.biochem.，364：204.结果呈现在下表5和图7中。表5：hmr(10μm)和树枝提取物部分(相当于10μm)对5-lo和cox-2的抑制％结果显示了hmr和树枝提取物部分对5-lo和cox-2的抑制效应，从而证明了所述天然树枝提取物部分和包含这种提取物的舌下组合物的抗炎效应。结论发明人意外地表明，根据本发明的舌下组合物，其中多酚不被代谢，具有更大的抗氧化活性，同时保持抗炎活性。因此，表现出这样双重活性的这种舌下组合物适用于改善呼吸健康、缓解关节疼痛和/或肌肉疼痛和痉挛和/或改善耐力以及改善性欲和/或生育能力。当前第1页12