本发明属于生物医药领域，涉及一种桑根酮d的新用途，尤其一种桑根酮d在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物或药物组合物中的应用。
背景技术：
：由于现代生活方式和高脂饮食的增加，肥胖成为一个全球性的问题，引起了广泛的关注。肥胖是能量吸收和能量消耗长期失衡的结果，并且肥胖是多种代谢疾病的重要诱因，例如高脂血症、高血压、动脉硬化、非胰岛素依赖性糖尿病、冠心病以及某些类型的癌症。因此，发现和制备降血脂及减肥药物非常必要，而其中一个重要的靶点是减少消化器官中脂肪的消化和吸收。胰脂肪酶(也称为三酰甘油酰基水解酶，pl)是人体中的一种丝氨酸水解酶，是负责三酰甘油酯在胃肠道中水解的关键酶，能够吸收50％-70％的膳食脂肪，对于调节脂肪的消化和吸收有重要作用。胰脂肪酶由胰腺分泌并进入十二指肠中发挥作用，通过肝脏分泌的胆汁的协作，可以将脂肪分解为脂肪酸和甘油。因此，抑制脂肪酶及其相关脂质的吸收成为治疗高脂血症及肥胖的一个重要方法。奥利司他是一种极其有效的胰脂肪酶抑制剂，并且已经被临床认证作为抗肥胖药物，但奥利司他及其衍生物会引起胃肠道副作用，例如油斑、大便失禁、胃肠胀气和腹部痉挛等。因此，从中草药中开发出一种安全、高效的胰脂肪酶抑制剂有重要的意义。桑白皮(moricortex)是桑科植物桑morusalbal.的干燥根皮，性甘、寒，归肺经，是一味重要的传统中药材，同时，桑白皮也是目前批准的可作为保健食品的物品之一。桑白皮具有泻肺平喘，利水消肿的功能。该化合物主要从桑白皮中提取所得，并且桑根酮d是桑白皮的主要黄酮类物质。近些年来，很多的研究表明，桑根酮d在降血压、抑菌、抗炎、抗癌、治疗心脏病以及治疗动脉粥样硬化方面起着重要作用。cn103156869a公开了一种从桑白皮、桑枝、桑叶中提取的桑根酮c、桑根酮d及以桑根酮c、桑根酮d为主要成分的组合物的医药新用途，具体的说是桑根酮c、桑根酮d单一成分及桑根酮c、桑根酮d与桑皮素、桑皮苷、氧化白藜芦醇、白藜芦醇、脱氧野尻霉素组成的组合物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物中的应用，该组合物可以是由含有以上化学成分的药材分别提取后按照一定比例配比，也可以将同时含有以上化学成分的药材利用几种提取方法提取后得到的组合物。此方法还意外的发现桑白皮、桑枝、桑叶中除脱氧野尻霉素等生物碱外，还含有桑根酮c、桑根酮d具有比脱氧野尻霉素等生物碱更强的α-葡萄糖苷酶抑制的药理活性。cn105497290a公开了一种治疗肝腹水的药物组合物及其制备方法，此方法提供的药物组合物是以桑根酮d、面根藤、厚皮香花、甜叶菊苷、金鸡菊噢、松叶菊碱为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗肝腹水疗效显著。cn105641170a公开了一种治疗食道癌的药物组合物，以青藏龙胆、弹刀子菜、羟基吴茱萸碱、圆叶肿柄菊素f、桑根酮d为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗食道癌疗效显著。然而，桑根酮d对于胰脂肪酶的抑制作用一直未见报道，也没有利用桑根酮d治疗高脂血症及肥胖的报道。同时，鉴于当前被认证的临床抗肥胖药物-奥利司他较为严重的胃肠道副作用，若能开发出较为安全、有效的新型脂肪酶抑制剂，可避免服用减肥药过程中较为严重的胃肠道副作用，同时对胰脂肪酶起到很好的抑制作用，更好的治疗肥胖及高血脂症。技术实现要素：针对现有技术中研究的空白以及现状中的需求，本发明的目的在于提供一种桑根酮d在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物中的应用，为高血脂症和肥胖的防治以及新药物的开发，提供了新策略，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：第一方面，本发明提供了一种桑根酮d在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物或药物组合物中的应用，其中，桑根酮d的结构式如下所示：在本发明中，桑根酮d可应用在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物中，也可应用在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物组合物中。在本发明中，意外地发现，桑根酮d的单体化合物或含有该化合物的植物提取物或膳食补充剂，可通过强效抑制胰脂肪酶进而减少膳食脂肪的消化和吸收，发挥其降血脂及减肥的功效，并且桑根酮d作为“药食同源”中草药-桑白皮的主要成分，在桑白皮中的含量超过500μg/g干重，口服后直接靶向作用于胃肠道中的胰脂肪酶，根据中华人民共和国药典，推荐桑白皮口服剂量为6-12g/d，表明桑根酮d的用量超过7mg/d，在胃肠系统中的局部暴露量达到约2.5μm，远高于桑根酮d对胰脂肪酶的抑制常数(ki＝0.43μm)，提示其体内药物暴露浓度能够发挥出其对胰脂肪酶抑制的高效性，进而改善机体脂肪的消化和吸收，从而达到降血脂及减肥的目的。而现有技术中，桑根酮d仅仅报道了对于α-葡萄糖苷酶抑制的作用以及在一些药物组合物中的药理作用，完全没有研究报道桑根酮d对于胰脂肪酶的作用。优选地，所述桑根酮d的纯度为98％-100％，例如可以是98％、98.2％、98.5％、98.7％、98.9％、99％、99.2％、99.5％、99.6％、99.8％、99.9％或100％等。本发明提供的桑根酮d的在上述纯度范围内，可以安全有效地进行应用。一般地，桑根酮纯度在90％以上均可以达到正常的药理效果。优选地，所述药物的剂型包括混悬剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂、注射剂、栓剂、灌肠剂、气雾剂、贴剂或滴剂中的任意一种。优选地，所述药物还包括药理学上可接受的辅料。优选地，所述辅料包括载体、稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、ph调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。在本发明中，桑根酮d可单独给药也可以与辅料搭配组成适当的剂型进行给药。一般优选添加适量的辅料进行搭配给药。在本发明中，当药物的剂型制备为片剂时，可包含有赋形剂，例如微晶纤维素、淀粉或碳酸钙等；也可以包含崩解剂，例如可以是交联羧甲基纤维素钠等；当药物的剂型为胶囊剂时：其可制备成为硬胶囊或软胶囊，桑根酮d及辅料可以制备成为粉末状或颗粒状填充进入胶囊中；此外，当药物制备为混悬剂时，还可在加入矫味剂、助悬剂等调节口味与口感等；当药物的剂型为乳剂时，可适当添加乳化剂、助溶剂来调节溶解度、乳化度进行给药。示例性地，当药物制备成为片剂时，可包括桑根酮d、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、淀粉和硬脂酸镁组成，通过湿法制粒，压片制备成为片剂，其中桑根酮d的有效含量可以根据试剂的症状效果进行选择，一般桑根酮d作为活性成分的含量为0.01mg-500mg，优选的含量为50mg左右。在本发明中，药物的给药方式可以选择多种方式。例如可以是口服给药、经直肠、非消化道或局部给药等等。在本发明中，优选地给药方式为口服给药，一般以片剂或胶囊剂的方式进行口服给药。另外，片剂或胶囊剂进行口服给药时，可以制备成控释制剂或缓释制剂，根据需要的药效及作用时间，选择合适剂量的控释辅料或缓释辅料。在本发明中，桑根酮d在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物时，药物的药学上可接受的盐同样对于高血脂、肥胖具有良好的作用效果。例如可以将药物制备成为锂盐、钠盐、钾盐、镁盐或钙盐中的任意一种。本发明提供的治疗高血脂和/或肥胖的药物或治疗高血脂和/或肥胖的药物组合物可应用于制备胰脂肪酶抑制剂。本发明中桑根酮d能够强效地抑制胰脂肪酶的活性，并且通过体外实验证实了桑根酮d的作用效果，桑根酮d抑制胰脂肪酶的ic50可达到0.77μm，而胰脂肪酶是脂肪吸收的关键酶，从而达到降血脂和减肥作用，该类化合物可作为胰脂肪酶的新型抑制剂用于制备降血脂及减肥药物。本发明提供的桑根酮d可以与脂肪酶活性中心最大程度结合，达到了高效的抑制作用效果。本发明提供的药物组合物，可以由桑根酮d与天然产物或天然提取物组成，按照不同比例进行搭配，共同作用发挥功效。例如可以是搭配糖类天然产物、香豆素类天然产物、黄酮类天然产物、生物碱类天然产物等等，也可以与人参、枸杞、金银花、三七、甘草等等进行搭配组成药物组合物，进一步发挥良好的功效。本发明提供的药物组合物，也可以是桑根酮d与其他降血脂药物联合使用，降血脂药物例如可以是亚油酸、普罗布考、贝特类药物、羟甲基戊二酸单酰辅酶a还原酶抑制药物中的他汀类药物等等。相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：本发明开发出一种新的制备治疗高血脂和/或肥胖的药物的策略，即以桑根酮d制备治疗高血脂和/或肥胖的药物，桑根酮d的单体化合物或含有该化合物的植物提取物或膳食补充剂，可通过强效抑制胰脂肪酶进而减少膳食脂肪的消化和吸收，发挥其降血脂及减肥的功效。本发明提供的桑根酮d的应用，具有以下几点优势：1.原料价廉易得：以廉价的桑白皮为原料，经提取获得，工艺简单可行，且桑根酮d在桑白皮中含量较高；2.抑制活性强：胰脂肪酶作为人体脂肪代谢的关键酶，桑根酮d对其的半数抑制浓度ic50可达到nm级；3.局部暴露量高：桑根酮d的用量超过7mg/d，并且桑白皮的这种天然成分可以在口服后直接靶向作用于胃肠道的胰脂肪酶，因此桑根酮d在胃肠系统中的局部暴露将达到约2.5μm，远高于此种抑制剂的抑制常数(ki)0.43μm；4.安全性高：桑白皮是批准的可作为保健食品的物品之一，具有良好的安全性，避免了制备的降血脂及减肥药物的副作用。本发明提供的桑根酮d不仅可以单独用药，还可以与各种其他组分共同搭配用药，用途广泛，应用前景广，应用价值高。附图说明图1是本发明实施例3中测定的桑根酮d对胰脂肪酶抑制的ic50曲线图。图2是本发明实施例3中测定的桑根酮d对胰脂肪酶的时间依赖性曲线图。图3a是本发明实施例4测定的桑根酮d抑制胰脂肪酶的动力学曲线图。图3b是本发明实施例4测定的桑根酮d抑制胰脂肪酶的动力学曲线双倒数图。图4a是本发明中桑根酮d与胰脂肪酶的分子模拟对接图。图4b是本发明中桑根酮d与胰脂肪酶的活性中心分子模拟对接图。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。本发明中以下实施例中使用的设备及其型号：荧光发射/激发光谱是由bioteksynergyh1全功能微孔板检测仪检测完成。实施例1本实施例制备桑根酮d片剂准确称取20g桑根酮d单体(纯度大于98％)，加入药用淀粉180g，两者充分混合后制成400片，每片重0.5g，含桑根酮d50mg。实施例2本实施例制备桑根酮d胶囊准确称取20g桑根酮d单体(纯度大于98％)，加入药用淀粉180g，两者充分混合后用20目筛制成颗粒，之后分装并填入空心胶囊，分装成400例胶囊，每粒胶囊重0.5g，含桑根酮d50mg。实施例3桑根酮d对胰脂肪酶抑制的ic50测定以对4-甲基伞形酮油酸酯的水解代谢为探针反应，借助胰脂肪酶体外孵育体系，测定桑根酮d对胰脂肪酶抑制的ic50，结果如图1所示；同时，绘制桑根酮d对胰脂肪酶的时间依赖性抑制曲线，如图2所示。a.200微升体外代谢反应体系中，含有ph7.4的0.1m的磷酸盐缓冲液，胰脂肪酶浓度为2μg/ml，抑制剂终浓度范围为0.1μm-50μm，37℃条件下分别震荡预孵5min、10min、25min；b.向96孔板中加入底物(终浓度10μm)，接着将预孵液加入96孔板，起始反应；于多功能酶标仪对代谢水解产物连续检测40分钟。c.经测定桑根酮d的ic50值为0.77±0.08μm。实施例4桑根酮d对胰脂肪酶抑制的ki测定及其分子模拟对接以对4-甲基伞形酮油酸酯的水解代谢为探针反应，借助胰脂肪酶体外孵育体系，测定桑根酮d对胰脂肪酶抑制的ki，结果如图3a和图3b所示。a.200微升体外代谢反应体系中，含有ph7.4的0.1m的磷酸盐缓冲液，胰脂肪酶浓度为2μg/ml，加入不同浓度的抑制剂，37℃条件下震荡预孵10min；b.向96孔板中加入不同浓度的底物，接着将预孵液加入96孔板中(即在不同底物浓度组加入一系列浓度桑根酮d，以0微摩、1微摩和2微摩为浓度梯度)，起始反应；于多功能酶标仪对代谢水解产物连续检测40分钟。c.经测定桑根酮d的ki值为0.43±0.20μm。通过surflex-dock软件包对胰脂肪酶与配体之间的相互作用模式和亲和力进行研究，具体结果如图4a和图4b所示。生成胰脂肪酶与桑根酮d的生物活性结合构象，能够发现桑根酮d可以与脂肪酶活性中心最大程度结合，证明了桑根酮d对胰脂肪酶高效的抑制作用。实施例5桑根酮d对减缓高脂饮食诱导的大鼠高脂血症及肥胖的研究选取30只成年sd雄性大鼠(体重为180g-200g)随机分为正常组、高脂血症组、桑根酮d组(200mg/kg)，每组10只大鼠。正常组取等量的正常食物饲喂，其他组采用d12492配方所制成的高脂肪、高热量食物进行限制饲喂，第1周内每只鼠饲喂20g，以后每周增加2g，每日饲养分两次供给，吃完后不再添加，自由饮水，至第8周为止。此外，从第4周开始，桑根酮d组按200mg/kg(每日下午)剂量口服灌胃给予桑根酮d。连续进行5周(即4-8实验周)，每2周对小鼠称重。在第8周结束后，从小鼠腹主动脉取血，测定血清中甘油三酯的含量。如表1、表2所示。表1组别例数甘油三酯含量(mmol/l)高脂饮食组105.82±1.08桑根酮d组103.72±0.42表2实验结果显示，给予大鼠桑根酮d能够有效缓解高脂饮食导致的大鼠血液中脂质含量的过度增加以及大鼠体重过度增长，提示桑根酮d可能通过抑制胰脂肪酶进而抑制胃肠道中膳食脂肪的消化和吸收，从而抑制高脂血症和肥胖的发生。申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的桑根酮d在制备治疗高血脂和/或肥胖的药物或药物组合物中的应用，但本发明并不局限于上述工艺步骤，即不意味着本发明必须依赖上述工艺步骤才能实施。所属
技术领域：
的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。当前第1页12