替普瑞酮及其衍生物作为制备治疗毒品成瘾和防止复吸药物的应用的制作方法

本发明涉及替普瑞酮及其衍生物的用途，特别是作为制备治疗毒品成瘾以及防止复吸药物的应用，属于医药技术领域。

背景技术：

毒品成瘾是当今世界的一个严重社会问题，危害极大。常见的毒品包括阿片类毒品和苯丙胺类毒品。常见的阿片类毒品包括吗啡、海洛因和鸦片等。常见的苯丙胺类毒品包括苯丙胺、甲基苯丙胺、麻黄碱、亚甲二氧基甲基苯丙胺等。毒品成瘾是指使用毒品后，可形成精神和躯体上的依赖，停药后会出现严重的戒断症状，是一种慢性复发性脑疾病。通常所指的戒毒是由脱毒、防复吸和回归社会三个密切联系的环节构成。脱毒和防复吸是戒毒的关键。目前，常用的戒毒药物包括：阿片受体激动剂，如美沙酮；非阿片受体激动剂，如可乐定；阿片受体拮抗剂，如钠曲酮，用于脱毒后防复吸；以及一些中药类戒毒药物。虽然这些药物对各种毒品成瘾戒断有一定的治疗作用，但副作用大，复吸率高。因此，开发有效、安全的预防和治疗毒品成瘾的药物仍是当今新药研发的热点之一。

替普瑞酮(geranylgeranylacetone，gga，eisai股份有限公司产品)，即6，10，14，18-四甲基-5，9，13，17-十九烷四烯-2-酮的全反式和单顺式异构体的混合物(重量比为3∶2)，是一种非环状的类异戊二烯化合物，它具有类视色素的骨架，现已被广泛地应用于消化道溃疡的治疗中。据报道，替普瑞酮能够保护各种器官的细胞，如眼睛、脑、心脏(见ishiiy，etal.，investophthalmolvissci2003；44：1982-92；tanitom，etal.；jneurosci2005；25：2396-404；fujikim，etal.，jneurotrauma2006；23：1164-78；yasudah，etal.，brainres2005；1032：176-82；ooiet，etal.，circulation2001；104：1837-43；andsuzukis，etal.，kidneyint2005；67：2210-20).也有报道(日本专利jp-8-133967)将替普瑞酮作为干眼症、眼睛疲劳或眼睛干涩之预防或治疗剂的有效成分。日本专利jp-2000-319170公开了一种含有替普瑞酮、磷脂质、合成表面活性剂和水的澄清的滴眼剂。还有一种已知的由eisai股份有限公司生产的治疗视网膜疾病的药物，是以未知混合比例的顺式-反式替普瑞酮为活性成份。

研究发现gga可以诱导热休克蛋白70(heatshockprotein70，hsp70)和硫氧还蛋白(thioredoxin，trx)的表达(tsurumat，etal.，transplantproc1999；31(1-2)：572-573；hirotak，etal.，biochem.biophys.res.commun2000；275：825-830)。hsp70是一种广泛存在的应激蛋白，其合成能提供生物体对各类有害因素(例如：缺血、缺氧和重金属等)的耐受性，使细胞处于应激状态，快速激活与抗毒有关的蛋白质基因，从而起到保护细胞和生物体的作用。trx是细胞内一种有效的抗氧化剂，能保护细胞、减轻氧化应激所致的损伤。trx能抑制p38mapk和凋亡信号调节激酶1的活性，增强细胞的抗凋亡能力(saitom.，etal.，embo1998；17：2596-2606；hashimotos.，etal.，biochem.biophys.res.commun1999；258：443-447)。

据白洁等报道，eisai股份有限公司生产的用于治疗消化系统溃疡的替普瑞酮，即全反式和单顺式异构体的混合物(混合比例为3∶2)，可以用于预防和/或治疗阿片类毒品的成瘾，并具有防止复吸的作用(见cn104922097a，cn104958281a，cn102266312b)。

众所周知，由eisai股份有限公司生产的替普瑞酮是一种(5e，9e，13e)-替普瑞酮和(5z，9e，13e)-替普瑞酮混合物[重量比例为3∶2。见wo2004/047822，jp-9-169639a，jp专利号4621326，jp-2006-89393a，thejapanesepharmacopoeia，16thedition，以及抗溃疡药施维舒(selbex)的包装说明书].由其它公司出售的替普瑞酮也是(5e，9e，13e)-替普瑞酮和(5z，9e，13e)-替普瑞酮的3∶2混合物(例如，见msds(cat.no.202-1s733；wakapurechemicalindustries，ltd.)。因此，白洁等的报道仅限于eisai股份有限公司生产的包含全反式和单顺式两种异构体的替普瑞酮混合物，而且全反式和单顺式两种异构体的比例为3∶2)。而对其它比例的两种异构体的混合物和每一种异构体单独使用的研究则没有报道。而且，在白洁等的报道中，给实验小鼠的用药量高达800mg/kg体重。因此，有必要对全反式替普瑞酮(5e-gga)、单顺式替普瑞酮(5z-gga)、以及其它比例的两种异构体的混合物在治疗毒品成瘾以及防止复吸中的作用分别进行研究。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种全反式和单顺式替普瑞酮及其衍生物作为制备治疗毒品成瘾以及防止复吸药物的用途。

本发明所述的全反式和单顺式异构体是指在如下结构式(i)中，与r基团相连的双键为反式或顺式，而其它双键的结构如结构式(i)所示。当与r连接的双键是反式时，整个分子被称为全反式异构体；当与r连接的双键是顺式时，整个分子被称为单顺式异构体。

r选自于下面的三种基团：

其中

a是c或s；

b是o或nr⁷；

d是o或nor⁷；

r¹是h，烷基，环烷基，或nr⁸r⁹；

r²是烷基，环烷基，芳香基，oh，nr⁸r⁹，或烷氧基；

r³是烷基，环烷基，芳香基，nr⁸r⁹，或烷氧基；

r⁴是烷基，环烷基，芳香基，oh，nr⁸r⁹，卤素，或烷氧基；

r⁵和r⁶分别是h，烷基，或烷氧基，其中r⁵和r⁶的末端可以相连接而形成一个环状化合物；

r⁷是烷基，环烷基，或芳香基；

r⁸和r⁹分别为h，烷基，oh，或烷氧基。

本发明所述的全反式和单顺式替普瑞酮的比例是指两者之间的重量比例。

本发明所述的替普瑞酮及其衍生物的用途，是将其全反式，单顺式异构体，或两种异构体的混合物作为活性成分制备治疗毒品成瘾和防止复吸的药物。

本发明所述的全反式替普瑞酮和单顺式替普瑞酮的制备，是将市售的替普瑞酮混合物(全反式异构体∶单顺式异构体＝3∶2)在硅胶柱上用适当比例的正己烷/乙酸乙酯或石油醚/乙酸乙酯混合溶剂洗脱，将每个组分在旋转蒸发仪上浓缩以除去溶剂，获得全反式替普瑞酮和单顺式替普瑞酮。

本发明所述的全反式替普瑞酮也可以通过文献报道的方法获得[bull.koreanchem.soc.，2009，30(9)：215-217]。该文献报道的one-pot合成方法见反应式一。

本发明所述的其它替普瑞酮衍生物的制备，可以参考有关文献的合成方法，利用常规的有机合成反应。一些具体化合物的合成见实施方式部分；图1罗列了一些代表性的化合物。

本发明所述的替普瑞酮的用途，全反式异构体的疗效优于单顺式异构体和反/顺式异构体混合物的疗效；全反式异构体所占的比例越大，疗效越显著。

本发明所述的预防和治疗毒品成瘾和防止复吸的药物的成份(或有效成份)为单一的替普瑞酮异构体或两种异构体的混合物(全反式和单顺式比例为3∶2的混合物除外)，还可以加入一种或多种药物上可接受的辅料，以改善药物吸收效果或便于服用。如制成胶囊、丸剂、粉剂、喷雾剂、片剂、膏剂、贴剂，口服液和注射液等。

本发明所述的辅料包括药学领域中常规的填充剂、稀释剂、粘合剂、赋形剂、吸收促进剂、表面活性剂和稳定剂等，必要时还可加入香味剂、色素和甜味剂等。

本发明提供了替普瑞酮及其衍生物的一种新用途，即在制备治疗毒品成瘾和防止复吸药物中的应用。动物实验结果显示：(1)口服各种替普瑞酮[5e-gga，5e-gga/5z-gga(8∶2)，5e-gga/5z-gga(6∶4)，5z-gga)7天后，注射吗啡morphine，mor)，观察其自主运动情况。发现预先口服一定剂量的ggas，能够拮抗吗啡诱发的自主活动增加。(2)口服ggas7天后，对小鼠进行条件位置偏爱实验。发现预先口服一定剂量的ggas，能够拮抗吗啡所引起的位置偏爱行为(见图2)。(3)在注射吗啡前，预先口服ggas，连续6天后，用纳络酮进行催促戒断，观察小鼠的戒断症状(跳跃和直立)。发现预先口服一定剂量的ggas，能够降低纳络酮诱导吗啡成瘾小鼠的跳跃次数和直立次数。上述实验结果表明口服ggas可以对抗吗啡(morphine，mor)成瘾，对吗啡成瘾小鼠的戒断症状具有缓解作用。因此，替普瑞酮可用于阿片类毒品成瘾的预防及治疗。试验结果显示全反式替普瑞酮的效果优于单顺式替普瑞酮的效果，也优于两种异构体的混合物；混合物中全反式替普瑞酮的比例越大，效果越好。

全反式替普瑞酮(5e-gga)用于治疗毒品成瘾具有以下的优点：(1)疗效更显著；(2)安全性高；(3)无成瘾性。

由于全反式替普瑞酮和高比例的反式-顺式(重量比例大于3∶2)替普瑞酮混合物在制备治疗毒品成瘾和防止复吸药物中的应用属首次发现，因此，无论其被单独作为活性成份制成药剂，还是与其他活性成份配伍制成药剂而用于上述毒品成瘾治疗和防止复吸，均在本发明的保护范围之内。

附图说明

图1罗列了一些代表性的化合物。

图2是各种替普瑞酮拮抗吗啡所引起的小鼠位置偏爱行为实验结果图。

具体实施方式

本发明用于测试化合物的nmr和质谱的仪器信息如下：

nmr：

仪器产家名称：bruker

仪器型号(model)：avanceii400

仪器频率：400mhz

测试常用的氘代试剂：cdcl3，d6-dmso

lc-ms：

仪器产家名称：waters

仪器型号(model)：uplc-sqd

测试常用的溶剂a：0.1％甲酸+水

测试常用的溶剂b：0.1％甲酸+乙氰。

实验中采用的实验动物为：spf级c57bl/6小鼠，雄性，6-7周龄，体重22-25g。小鼠单笼隔离饲养，饲喂专用饲料，自由饮食和饮水。

实施例1：全反式和单顺式替普瑞酮的制备

将市售的替普瑞酮混合物(全反式异构体∶单顺式异构体＝3∶2)在硅胶柱上用适当比例的正己烷/乙酸乙酯或石油醚/乙酸乙酯混合溶剂洗脱，将每个组分在旋转蒸发仪上浓缩以除去溶剂，获得全反式替普瑞酮和单顺式替普瑞酮，lcms：ms(m/z)：333(mh+)；353(m+na).由h-nmr(cdcl3)确定是全反式，还是单顺式异构体。

实施例2：全反式替普瑞酮的合成(反应式一)

全反式-替普瑞酮也可以通过文献报道的方法合成[bull.koreanchem.soc.，2009，30(9)：215-217]。该文献报道的one-pot合成方法如下反应式一。在一圆底烧瓶中加入香叶基芳樟醇(r-1)(0.30ml，0.91mmol)、化合物r-2(0.39g，2.28mmol)，对-二甲苯(4.63ml)和异丙氧基铝(0.019g，

反应式一、

0.09mmol)。将反应瓶放入160℃的油浴中，搅拌加热6小时。然后将反应物冷却至室温，旋转蒸发掉溶剂。向残余物中加入饱和碳酸钠水溶液，用二氯甲烷萃取。有机相用无水硫酸镁干燥，过滤浓缩，用硅胶柱层析，洗脱液为正己烷∶乙酸乙酯(40∶1v/v)。¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ1.60(s，12h，20，21，22，23-ch3)，1.68(s，3h，19-ch3)，2.01(m，12h，7，8，11，12，15，16-ch2)，2.14(s，3h，1-ch3)，2.26(m，2h，3-ch2)，2.45(m，2h，4-ch2)，5.09(m，4h，5，9，13，17-ch)。

实施例3：各种重量比例的全反式和单顺式替普瑞酮混合物的制备

将上述制备的全反式替普瑞酮和市售的替普瑞酮以不同的比例混合而制备成所需要的重量比的替普瑞酮异构体混合物，如全反式/单顺式异构体的比例为7∶3，8∶2，9∶1，9.5∶0.5，9.8∶0.2，9.9∶0.1等。在受试的四个替普瑞酮样品中，全反式/单顺式异构体的比例分别为10∶0，8∶2，6∶4，和0∶10。

实施例4：5e，9e，13e-替普瑞酮-2-醇(3)的制备(反应式二)

反应式二、

在一圆底烧瓶中放入5e-gga(1)(1.66g，5mmol)和甲醇(10ml)，氮气保护。将反应瓶放入冰浴中，搅拌下分批加入nabh4(0.19g，5mmol)。然后继续搅拌1小时。向反应瓶中加入40ml蒸馏水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取。有机相拥无水硫酸钠干燥。旋转蒸发掉溶剂后得到3；lcms：ms(m/z)：335(mh⁺).

实施例5：化合物4的制备(反应式三)

反应式三、

在一充氮气的反应瓶中放入丙烯醇r-3(87mg，0.3mmol)，三乙基胺(0.062ml，0.45mmol)和二氯甲烷(1ml)，搅拌冷却至0℃。向反应瓶中滴加1m浓度的乙酰氯/二氯甲烷溶液(0.42ml，0.042mmol)。滴加完毕后，反应液在室温下搅拌过夜。然后向反应瓶中加入碳酸氢钠水溶液，并用二氯甲烷萃取3次。合并后的有机相用水萃取一次，再用无水硫酸钠干燥。旋转蒸发掉溶剂后上硅胶柱层析，用乙酸乙酯∶正己烷(1∶99-2∶98)混合溶剂洗脱，得到一无色液体4。lcms：ms(m/z)：333.4(mh⁺)。

实施例6：替普瑞酮拮抗吗啡诱发的自主活动增加实验

采用小动物自主活动检测装置测定。将小鼠分成7组，每组6只小鼠。对照组(saline)连续7天灌胃给予生理盐水；吗啡组(mor)连续7天灌胃给予生理盐水；5e-gga和吗啡组(10/0+mor)，5e/5z-gga(8∶2)和吗啡组(8/2+mor)，5e/5z-gga(6∶4)和吗啡组(6/4+mor)，5z-gga和吗啡组(0/10+mor)，5e-gga组(5e)，分别连续7天灌胃给予等重量的ggas(300mg/kg体重)。第8天，saline组灌胃给予生理盐水，mor组灌胃给予生理盐水，其它5组分别灌胃给予ggas(300mg/kg体重)，2小时后，saline组腹腔注射生理盐水，mor组和gga+mor组腹腔注射吗啡(20mg/kg)后，放入自主活动检测装置，测定每只小鼠30分钟的自主活动数。结果显示，mor组小鼠经吗啡注射后，自主活动增强；而gga+mor组小鼠经gga预先灌注后，可以拮抗吗啡诱发的自主活动增加(p＜0.05，与mor组小鼠对比)。各种ggas的效果为10∶0＞8∶2＞6∶4＞0∶10。

实施例7：替普瑞酮拮抗吗啡所引起的位置偏爱实验

位置偏爱实验装置是由两个大小完全相同的盒子组成(每个盒子大小为15×15×30cm)，中间有一个可关闭的洞口。小鼠分成7组(每组6只)：对照组(saline)，吗啡组(mor)，5e-gga和吗啡组(10/0+mor)，5e/5z-gga(8∶2)和吗啡组(8/2+mor)，5e/5z-gga(6∶4)和吗啡组(6/4+mor)，5z-gga和吗啡组(0/10+mor)，5e-gga组(5e)。saline组和mor组预先连续7天灌胃给予生理盐水，其它5组预先连续7天灌胃分别给予等重量的ggas(300mg/kg体重)。其中小鼠在第5天和第6天，灌胃注射后，放入位置偏爱实验装置，在两盒子间自由活动，适应2天；第7天，小鼠经灌胃注射后，记录20分钟内小鼠在黑盒子中的时间。第8，10，12，14天，saline组和mor组灌胃给予生理盐水，其它5组灌胃分别给予等重量对应混合物比例的ggas(300mg/kg体重)，2小时后，saline组和5e-gga组腹腔注射生理盐水，mor组和其它4组腹腔注射吗啡(20mg/kg)后，放入黑盒子中20分钟。第9，11，13，15天，saline组和mor组灌胃给予生理盐水，其它5组分别灌胃给予等重量对应混合物比例的ggas(300mg/kg体重)，2小时后，各组小鼠腹腔注射生理盐水后，放入白盒子中20分钟。第16天，打开洞口，使小鼠自由运动，记录20分钟内小鼠在黑盒子中的时间。结果显示，mor组小鼠经吗啡注射后，会对黑盒子产生偏爱行为；而gga+mor组小鼠经gga预先灌注后，拮抗吗啡所引起的位置偏爱行为(p＜0.05，与mor组小鼠对比)。各种ggas的效果为10∶0＞8∶2＞6∶4＞0∶10(见图2)。

实施例8：替普瑞酮缓解纳络酮诱导吗啡成瘾小鼠的戒断症状

将小鼠分成7组(每组6只)：对照组(saline)，吗啡组(mor)，5e-gga和吗啡组(10/0+mor)，5e/5z-gga(8∶2)和吗啡组(8/2+mor)，5e/5z-gga(6∶4)和吗啡组(6/4+mor)，5z-gga和吗啡组(0/10+mor)，5e-gga组(5e)。saline组和mor组预先连续7天灌胃给予生理盐水，其它5组分别预先连续7天灌胃给予等重量对应混合物比例的ggas(300mg/kg体重)。从第8天到14天，saline组和mor组灌胃给予生理盐水，其它5组分别灌胃给予等重量的ggas(300mg/kg体重)，2小时后，saline组和5e-gga组腹腔注射生理盐水，mor组和其它4组分别腹腔注射吗啡(每天注射的剂量为：0，20，40，60，80和300mg/kg)。在最后一次吗啡注射2小时后，各组小鼠腹腔注射2mg/kg纳络酮催促戒断，记录20分钟内老鼠跳跃和直立的次数。结果显示，预先灌注ggas可以降低纳络酮诱导吗啡成瘾小鼠的跳跃次数。预先灌注ggas可以降低纳络酮诱导吗啡成瘾小鼠的直立次数(p＜0.05，与mor组小鼠对比)。各种ggas的效果为10∶0＞8∶2＞6∶4＞0∶10。

实施例9：替普瑞酮拮抗吗啡诱发的条件性位置偏爱实验

采用小动物自主活动检测装置测定，小鼠分成7组，每组6只。对照组连续7天灌胃给予生理盐水；吗啡组(mor)连续7天生理盐水灌胃；其它组分别连续7天灌胃给予等重量对应混合物比例的ggas(300mg/kg体重)。第8天测条件性位置偏爱实验初始时间15分钟。之后分别在第9、11、13、15天，c组，腹腔注射生理盐水，所有给与ggas的5个组分别灌胃给予相对应的ggas(300mg/kg体重)，mor组和gga+mor组腹腔注射吗啡20mg/kg，在第10、12、14、16天各组分别灌胃及腹腔注射生理盐水。在第17天进行条件性位置偏爱实验15分钟，记录伴药箱时间。在第18至25天对小鼠停止给药，之后第26天，进行条件性位置偏爱实验15分钟，记录伴药箱时间，检测位置偏爱是否消退。在第27天复吸点燃，对照组和e-gga组腹腔注射生理盐水，mor组和4个gga+mor组分别腹腔注射吗啡(10mg/kg)，2小时后进行条件性位置偏爱实验15分钟，记录伴药箱时间。图2结果显示，mor组小鼠经吗啡成瘾消退后给予低剂量的吗啡，小鼠偏爱于伴药箱；而gga+mor组小鼠经gga预先灌胃后，可以拮抗吗啡成瘾消退后给予低剂量的吗啡点燃诱发的伴药箱偏爱(p＜0.05，与mor组小鼠对比)。各种ggas的效果为10∶0＞8∶2＞6∶4＞0∶10。