本发明涉及一种超临界萃取法提取益心舒组合物中有效成分的方法，属于益心舒扶正制剂制备
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：益心舒制剂具有益气复脉，活血化瘀，养阴生津。用于气阴两虚，心悸脉结代，胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛。中医在该病的诊治方面积累了丰富的临床经验，中药方剂在治疗心脑血管疾病方面具有独特的优势。胸痛及冠心病心绞痛属中医“胸痹”范畴。胸痹其病因与寒邪内侵、饮食不当、情志失调、年迈体虚等有关，按证候可分为心血瘀阻、痰浊雍塞、阴寒凝滞、心肾阴虚、气阴两虚、阳气虚衰等症型。“心脉痹阻”为本病的主要病理机制，临床大多虚实夹杂，呈本虚表实之候，治疗此病倡用以补为主以，通为用原则，补，主要补气阴，旨在调脏腑气血偏盛偏衰，以治本虚之证，通，主要活血通阳，意在宣通脉络之痹阻，以治标实之侯。益心舒处方均富含多种药物有效成分，而在益心舒制剂中萜类成分起到了关键的作用。目前，益心舒制剂大多采用传统的制备方法：比如水提醇沉法、醇提水沉法。以黄芪的有效成分为例，利用水提醇沉法进行制备，黄芪多糖的提取会比较充分，但黄芪皂苷的得率和含量较低；而利用醇提水沉法制备，则可得到较高得率和含量的皂甙，但黄芪多糖的得率会降低，含量稍有提高。由于需要提取的药物有效成分有多种，通过上述传统的制备工艺得到的益心舒制剂的药物有效成分基本上均为粗提物，提取率和纯度不能满足生产使用的需求，不仅会导致患者的服用量较大，而且还会直接影响产品的质量和临床疗效。技术实现要素：本发明的目的在于，提供一种超临界萃取法提取益心舒组合物中有效成分的方法及其产品，该方法能够提高有效成分的提取率和纯度，从而降低制剂服用量，使得益心舒制剂的治疗效果更好。为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法，将处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂粉碎至0.3～2.0mm，并低温干燥，按处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂单独或者混合后进行萃取；以超临界二氧化碳为萃取剂，萃取2～4h，得第一次萃余物；以超临界二氧化碳为萃取剂，对第一次萃余物进行第二次萃取，萃取2～4h，得第二次萃余物；以超临界二氧化碳为萃取剂，对第二次萃余物进行第三次萃取，萃取2～3h，得第三次萃余物；再以超临界二氧化碳为萃取剂，对第三次萃余物进行第四次萃取，萃取1～2.5h，得第四次萃取液，对第四次萃取液进行减压蒸发、真空干燥，得萜类成分提取物。上述的超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法，第一次萃取过程中，采用石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯或者60％～80％的乙醇作为夹带剂，压力为30～50mpa，温度为40～60℃，二氧化碳流量控制在10～30l/h；第二次萃取过程中，采用石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯或者60％～80％的乙醇作为夹带剂，压力为20～30mpa，温度为40～60℃，二氧化碳流量控制在10～30kg/h；第三次萃取过程中，采用石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯或者70％～95％乙醇为夹带剂，压力为20～40mpa，温度为40～60℃，二氧化碳流量控制在10～30kg/h；第四次萃取过程中，采用石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯或者85％～95％乙醇作为夹带剂，压力为15～30mpa，温度为35～45℃，二氧化碳流量控制在25～35kg/h。上述的超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法，第三次萃取时，向夹带剂中加入物质的量比为4:1的琥珀酸二辛酯磺酸钠/辛基酚聚氧乙烯醚组成的复合表面活性剂，琥珀酸二辛酯磺酸钠的浓度为0.05～0.09mol/l。上述的方法提取得到的萜类成分提取物。为确保益心舒组合物中萜类成分的萃取率，申请人对萃取工艺条件进行了一系列的试验研究和筛选。1、实验仪器(见表1)表一仪器名称生产厂家ah超临界流体萃取装置南通华安超临界萃取有限公司116摇摆式粉碎机海南佳慧食品机械厂r-220旋转蒸发仪瑞士布其公司真空干燥箱上海一恒实验仪器总厂2、中药在提取与有效成分富集纯化工艺中多会使用有机溶剂，如乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等。为了保证制剂的质量，有机溶剂的残留量越低越好。超临界萃取的优点之一便是无有机溶剂残留。以乙醇残留量为例，采用顶空气相色谱法对几种常用提取方法中乙醇的残留量进行比较，结果如表2所示。提取方法超临界萃取法加热回流法离心法乙醇残留量(ug/g)未检出703.66623.853、夹带剂的选择采用不同种类的夹带剂对各有效成分进行超临界萃取，以齐墩果酸为例，采用5％香草醛-冰醋酸、高氯酸显色法测定其含量，萃取率计算公式均为：萃取率(％)＝(有效成分的质量/药材的质量)×100％，所得萃取率如表3所示。由表3可以看出，在超临界状态下，对各有效成分的萃取率由高到低排列为：甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚。由于前述有效成分极性都较大，为了加强萃取环境的极性，一般加入乙醇等分子间引力大的物质作为夹带剂。从实验结果来看，在超临界状态下，以不同种类的有机溶剂作为夹带剂时，甲醇的萃取效率最高，其次是无水乙醇、乙酸乙酯和丙酮，石油醚的萃取效率最低。乙醇的极性不如甲醇，故萃取率也较之低，但是由于乙醇无毒且易与二氧化碳混合，综合考虑下，优选乙醇做夹带剂。4、萜类成分超临界萃取工艺条件筛选为寻找萜类成分较佳的萃取工艺条件，本研究选取不同的萃取压力、萃取温度、萃取时间、夹带剂和co2流量作为考察因素，以齐墩果酸为检测指标，考察各条件下的萃取率，结果见表4。表4由实验可知，萜类成分的最佳超临界萃取工艺条件为：压力20mpa，温度40℃，夹带剂为95％乙醇，co2流量为35kg/h，萃取时间为2.5h。与现有技术相比，本发明采用超临界流体萃取法代替传统的益心舒提取工艺，具有以下优点：1、根据原料药中各有效成分的极性和沸点，有针对性的指定适应的温度、压力、流体流量、时间、夹带剂等萃取条件，逐一萃取，几乎保留产品中全部有效成分，无有机溶剂残留，提高了提取率，采用本发明的制备工艺制得的益心舒制剂，患者的药物服用量减少了，治疗效果更好。2、超临界流体萃取法操作简单方便；采用co2作为萃取剂，有很多优点，比如：价格便宜，纯度高，容易制取，且可以重复循环使用，从而有效地降低了成本；co2是一种不活泼的气体，萃取过程中不发生化学反应，且属于不燃性气体，无味、无臭、无毒、安全性非常好。具体实施方式本发明实施例1：一种超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法为：将处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂粉碎至1.0mm，并低温干燥，按处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂单独或者混合后进行萃取；以超临界二氧化碳为萃取剂，夹带剂为80％的乙醇，压力为40mpa，温度为50℃，二氧化碳流量控制在25l/h，萃取3h，得第一次萃余物；再采用70％的乙醇为夹带剂，压力为30mpa，温度为50℃，二氧化碳流量控制在30kg/h，对第一次萃余物进行第二次萃取，萃取3h，得第二次萃余物；再采用95％乙醇为夹带剂，压力为40mpa，温度为45℃，二氧化碳流量控制在10kg/h，对第二次萃余物进行第三次萃取，萃取2.5h，得第三次萃余物；再以95％乙醇为夹带剂，压力为20mpa，温度为40℃，二氧化碳流量控制在35kg/h，对第三次萃余物进行第四次萃取，萃取2.5h，得第四次萃取液，对第四次萃取液进行减压蒸发、真空干燥，得萜类成分提取物。第三次萃取时，夹带剂中可加入物质的量比为4:1的琥珀酸二辛酯磺酸钠/辛基酚聚氧乙烯醚组成的复合表面活性剂，琥珀酸二辛酯磺酸钠的浓度为0.07mol/l。本发明实施例2：一种超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法为：将处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂粉碎至0.3mm，并低温干燥，按处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂单独或者混合后进行萃取；以超临界二氧化碳为萃取剂，夹带剂为丙酮，压力为30mpa，温度为40℃，二氧化碳流量控制在10l/h，萃取2h，得第一次萃余物；再采用60％的乙醇为夹带剂，压力为20mpa，温度为40℃，二氧化碳流量控制在10kg/h，对第一次萃余物进行第二次萃取，先萃取2h，得第二次萃余物；再采用70％乙醇为夹带剂，压力为20mpa，温度为40℃，二氧化碳流量控制在20kg/h，对第二次萃余物进行第三次萃取，萃取2h，得第三次萃余物；再以85％乙醇为夹带剂，压力为15mpa，温度为35℃，二氧化碳流量控制在25kg/h，对第三次萃余物进行第四次萃取，萃取2h，得第四次萃取液，对第四次萃取液进行减压蒸发、真空干燥，得萜类成分提取物。第三次萃取时，夹带剂中可加入物质的量比为4:1的琥珀酸二辛酯磺酸钠/辛基酚聚氧乙烯醚组成的复合表面活性剂，琥珀酸二辛酯磺酸钠的浓度为0.05mol/l。本发明实施例3：一种超临界萃取法提取益心舒组合物中萜类成分的方法为：将处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂粉碎至2.0mm，并低温干燥，按处方量的人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂单独或者混合后进行萃取；以超临界二氧化碳为萃取剂，夹带剂为乙酸乙酯，压力为50mpa，温度为60℃，二氧化碳流量控制在30l/h，萃取4h，得第一次萃余物；再采用80％的乙醇为夹带剂，压力为25mpa，温度为60℃，二氧化碳流量控制在20kg/h，对第一次萃余物进行第二次萃取，先静态萃取1.5h，再动态萃取1.5h，得第二次萃余物；再采用85％乙醇为夹带剂，压力为30mpa，温度为60℃，二氧化碳流量控制在30kg/h，对第二次萃余物进行第三次萃取，先静态萃取1.5h，再动态萃取1.5h，得第三次萃余物；再以90％乙醇为夹带剂，压力为30mpa，温度为45℃，二氧化碳流量控制在30kg/h，对第三次萃余物进行第四次萃取，萃取时间2.5h，得第四次萃取液，对第四次萃取液进行减压蒸发、真空干燥，得萜类成分提取物。第三次萃取时，夹带剂中可加入物质的量比为4:1的琥珀酸二辛酯磺酸钠/辛基酚聚氧乙烯醚组成的复合表面活性剂，琥珀酸二辛酯磺酸钠的浓度为0.05mol/l。当前第1页12