一种中药组合物在制备治疗疲劳综合征药物中的应用的制作方法

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备治疗疲乏综合征药物中的应用。

背景技术：

疲劳综合征即慢性疲劳综合征（cfs）是一组以持续或反复发作的疲劳，伴有多种神经、精神症状。其病因尚不明确，与长期过度劳累（包括脑力和体力）、饮食生活不规律、工作压力和心理压力过大等精神环境因素以及应激等造成的神经、内分泌、免疫、消化、循环、运动等系统的功能紊乱关系密切。临床表现有：1.心理方面，患者心理方面的异常表现要比躯体方面的症状出现得早，也较为突出。多数表现为心情抑郁，焦虑不安或急躁、易怒，情绪不稳，脾气暴躁，思绪混乱，反应迟钝，记忆力下降，注意力不集中，做事缺乏信心，犹豫不决。2.身体方面，体型常呈现为瘦、胖两类。多数为身体消瘦，有少数也可显示出体态肥胖。后一类患者患有本征的并非少见。多数表现为容颜早衰，面色无华，过早出现面部皱纹或色素斑；肢体皮肤粗糙，干涩，脱屑较多；指（趾）甲失去正常的平滑与光泽；毛发脱落，蓬垢，易断，无光泽。3.运动系统方面，全身疲惫，四肢乏力，周身不适，活动迟缓。有时可出现类似感冒的症状，肌痛、关节痛等。如果时间较长，累积数月或数年，则表现得尤为明显，可有重病缠身之感。4.消化系统方面，主要表现为食欲减退，对各种食品均缺乏食欲，尤以油腻食物最为显著。无饥饿感，有时可出现偏食，食后消化不良，腹胀；大便形状多有改变，便秘、干燥或大便次数增多等。5.神经系统方面，表现出精神不振或精神紧张，初期常有头晕、失眠、心慌、易怒等；后期则表现为睡眠不足、多梦、夜惊、中间早醒、失眠等，甚至嗜睡、萎靡、懒散、记忆力减退等症状。6.泌尿生殖系统方面，伴随精神异常，可以出现尿频，尿急等泌尿系统症状。另外，疲劳过度的人，容器中排尿最易起泡沫，且泡沫停留时间长久。男子出现遗精、阳痿、早泄、性欲减退；女子出现月经不调或提前闭经、性冷淡等。长此下去，可能发生不孕不育症。7.感官系统方面，视觉系统主要表现为眼睛疼痛，视物模糊，对光敏感等；听觉系统则主要表现为耳鸣，听力下降等。

目前，市场上暂无疗效确切的治疗慢性疲劳综合征的药物，而本发明药物可以有效的治疗各种原因引起的疲劳综合征，经试验证实疗效确切，具有较好的市场前景。

技术实现要素：

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备治疗疲劳综合征药物中的应用。

本发明制备治疗疲劳综合征的药物是由如下重量份比例的原料药制成的:黄芪120-360、女贞子100-300、人参30-95、灵芝30-95、莪术65-195、白术30-90、半枝莲65-195、绞股蓝120-360、茯苓30-95、鸡内金15-45、蛇莓65-195、白英65-195、茵陈65-195、徐长卿65-195、土鳖虫10-30、白花蛇舌草65-195。

优选的，该中药组合物由如下重量份的原料药制成:

黄芪120、女贞子300、人参30、灵芝95、莪术65、白术90、半枝莲65、绞股蓝360、茯苓30、鸡内金45、蛇莓65、白英195、茵陈65、徐长卿195、土鳖虫10、白花蛇舌草195。

或

黄芪360、女贞子100、人参95、灵芝30、莪术195、白术30、半枝莲195、绞股蓝120、茯苓95、鸡内金15、蛇莓195、白英65、茵陈195、徐长卿65、土鳖虫30、白花蛇舌草65。

或

黄芪250、女贞子200、人参65、灵芝65、莪术132、白术64、半枝莲128、绞股蓝256、茯苓65、鸡内金30、蛇莓128、白英128、茵陈128、徐长卿128、土鳖虫20、白花蛇舌草128。

优选的，所述中药组合物所用原料药中白术为炒白术。

本发明还提供了所述中药组合物的活性成分由以下步骤制成:

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、女贞子、人参加6-10倍量50-90%乙醇提取1-3次，每次1-4小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，滤液及药渣备用；

(3)、莪术、白术、徐长卿加4-8倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水溶液备用;

(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；

(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣合并，加7-10倍量水，加热煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子滤液和步骤（3）中的水溶液，浓缩至药液在65℃测时相对密度为1.15-1.30，干燥，粉碎，备用;

步骤（4）所得粉碎粉、步骤（3）所得挥发油与步骤（5）所得的干膏粉共同构成该中药组合物的活性成分。

本发明所述中药均可按照《全国中药炮制规范》或《中药大辞典》进行炮制。

本发明药物的剂型为胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。

其中胶囊剂的制备方法，是由以下步骤制成：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、女贞子，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，滤液和人参、女贞子残渣备用；

(3)、莪术、白术、徐长卿，合并提取挥发油，提油时间不少于8小时，挥发油另器收集，残渣及水溶液备用；

(4)、土鳖虫、鸡内金两味动物药，水洗，60℃烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉，灭菌后备用；

(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣合并，加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子醇提液和步骤（3）中的水溶液，浓缩成相对密度1.20-1.25的清膏，干燥，粉碎，备用；

(6)、将步骤(5)所得干膏粉加入填充剂适量，用85%乙醇制粒，得颗粒，备用；

（7）、将步骤(3)中所得挥发油喷入步骤(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉中，混匀，与步骤（6）中所得的颗粒混匀，密闭半小时，装胶囊即得。

本发明药物的其他剂型按比例称取原料药后，采用常规的制备方法制备，例如，范碧亭《中药药剂学》（上海科学出版社1997年12月第1版）记载的制备工艺，制成药剂学可接受的常规剂型。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：peg6000，peg4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料（范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料）。

优选的本发明是通过调节肠道菌群来治疗疲劳综合征。

优选的本发明所述疲乏综合征为躯体性疲劳综合征。

更有选的本发明所述疲乏综合征为精神性疲劳综合征。

更优选为所述疲乏综合征为癌因性疲劳综合征。

本发明药物组合物具有益气养阴、健脾补肾、散结通络的功效，临床用于治疗疲劳综合征，取得了良好的效果。本发明配伍合理，简单易行，为纯中药制剂，不良反应小，可供病人长期使用。

附图说明：

图1：ns组与yzxj组肿瘤重量的比较

图2：每只小鼠平均每日食物摄入量每4天称重一次

图3：每周称量每只小鼠的平均体重，*没有肿瘤原位移植的体重

图4：在干预10天后检测ns组与yzxj组小鼠的身体疲劳力竭游泳时间*p<0.05

图5：在干预10天后检测ns组与yzxj组小鼠悬尾不动的时间，*p<0.05

图6：yzxj组疲劳相关的炎症因子普遍低于ns组，尤其是il-1β和il-6

图7：两组的肝糖原水平，反映了经yzxj治疗后小鼠能量储备能力方面的优势

图8：在ns组与yzxj组中检测到的α多样性的两个指标，chao1代表细菌的丰度

图9：在ns组与yzxj组中检测到的α多样性的两个指标，simpson指数反应细菌的多样性

图10：通过进化信息，使用β多样性的unifrac距离来计算样本间的距离，通过otus富集的信息进一步构建加权的unifrac距离

图11：组间差异大于组内差异，但没有显著的统计学差异(p=0.117)

图12：yzxj对粪便中微生物群系的影响，在门级水平上相对的物种丰度累积图。

具体实施方式

实施例1：

原料药配方为：黄芪250g、女贞子200g、人参65g、灵芝65g、莪术132g、炒白术64g、半枝莲128g、绞股蓝256g、茯苓65g、鸡内金30g、蛇莓128g、白英128g、茵陈128g、徐长卿128g、土鳖虫20g、白花蛇舌草128g。

制备方法为：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、女贞子，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，滤液和人参、女贞子残渣备用；

(3)、莪术、白术(炒)、徐长卿，合并提取挥发油，提油时间8小时，挥发油另器收集，残渣及水溶液备用;

(4)、土鳖虫、鸡内金，水洗，60℃烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉，于3kgy60co-r辐射灭菌后备用；

(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后的残渣合并，加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子醇提液和步骤（3）中的水溶液，浓缩成相对密度1.25的清膏，干燥，粉碎，备用；

(6)、将步骤(5)所得干膏粉加入淀粉134克，用85%乙醇制粒；

(7)、将步骤(3)中所得挥发油用85%乙醇溶解，喷入步骤(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉中，混匀，与步骤（6）中所得的颗粒混匀，密闭半小时，装入1000粒胶囊即得。

实施例2：

原料药配方为：黄芪360g、女贞子100g、人参95g、灵芝30g、莪术195g、炒白术30g、半枝莲195g、绞股蓝120g、茯苓95g、鸡内金15g、蛇莓195g、白英65g、茵陈195g、徐长卿65g、土鳖虫30g、白花蛇舌草65g。

制备方法为：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、女贞子，加6倍量90%乙醇回流提取4小时，提取液回收乙醇至无醇味，滤液和人参、女贞子残渣备用；

(3)、莪术、白术（炒）、徐长卿合并,加4倍量水提取挥发油，提油时间10小时，挥发油另器收集，残渣及水溶液备用;

(4)、土鳖虫、鸡内金，水洗，60℃烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉，于3kgy60co-r辐射灭菌后备用；

(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后的残渣合并，加7倍量水，加热煎煮3次，第一次1小时，第二次2小时，第三次3小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子醇提液和步骤（3）中的水溶液，浓缩成相对密度1.15的清膏，干燥，粉碎，备用；

(6)、将步骤(5)所得干膏粉加入淀粉112克，用78%乙醇制粒；

(7)、将步骤(3)中所得挥发油用85%乙醇溶解，喷入步骤(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉中，混匀，与步骤（6）中所得的颗粒混匀，按常规制剂方法制成1000片片剂。

实施例3：

原料药配方为：黄芪120g、女贞子300g、人参30g、灵芝95g、莪术65g、白术90g、半枝莲65g、绞股蓝360g、茯苓30g、鸡内金45g、蛇莓65g、白英195g、茵陈65g、徐长卿195g、土鳖虫10g、白花蛇舌草195g。

制备方法为：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、女贞子，加10倍量50%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，滤液和人参、女贞子残渣备用；

(3)、莪术、白术、徐长卿合并，加入10倍量水提取挥发油，提油时间6小时，挥发油另器收集，残渣及水溶液备用；

(4)、土鳖虫、鸡内金，水洗，60℃烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉，于3kgy60co-r辐射灭菌后备用;

(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后的残渣合并，加10倍量水，加热煎煮3小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子醇提液和步骤（3）中的水溶液，浓缩成相对密度1.30的清膏，干燥，粉碎，备用；

(6)、将步骤(3)中所得挥发油用80%乙醇溶解，喷入步骤(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉中，混匀，与步骤（5）中所得的干膏粉，按常规制剂方法制成1000丸丸剂。

试验例:为证实本发明药物在治疗疲劳综合征的疗效，用实施例1制得的胶囊剂（以下称yzxj），进行了以下试验研究：

1实验动物和细胞

balb/c小鼠购于河北医科大学动物中心，7w，体重约18~22g，雄性，42只（其中2只接种皮下瘤，剩余40只用于造原位结直肠癌模型）。饲养在河北医科大学第四医院动物实验中心spf级实验室。所有小鼠均于实验前适应性饲养1w，室温25℃±1℃。实验过程中，对动物的操作符合动物伦理学。

小鼠源性结肠癌ct26细胞购自上海细胞典藏委员会。使用含10%胎牛血清、1%青链霉素的rpmi-1640细胞培养液，置于37℃、5％co2的培养箱中培养。用乙二铵四乙酸(edta)／胰酶混合液（gibco公司，美国）进行消化和传代。

2原位结直肠癌小鼠模型的建立

将对数生长期的ct26细胞制备成单细胞悬液，调整细胞浓度至2×10⁷/ml，以0.1ml/只小鼠的剂量注射到两只小鼠右侧腋下。待皮下成瘤直径达1cm左右后，用3%戊巴比妥钠40~45mg/kg腹腔注射麻醉小鼠，分离出皮下瘤，切割成2mm×2mm×1mm大小的肿块，置于生理盐水中备用。同法麻醉其余40只小鼠，常规消毒皮肤，选择下腹正中切口，打开腹腔，找到盲肠并拉出，在距离回盲部约1cm结肠处的肠系膜对侧的浆膜面，用手术刀轻轻刮开浆膜层，将已制备好的新鲜瘤块置于形成的“龛室”中，挤一滴医用胶封闭肿瘤巢，回纳盲肠后关腹。

分组与给药

将小鼠随机分为实验（yzxj）组与对照（ns）组，每组各20只。原位造模后第2d，实验组用yzxj干膏粉混悬液灌胃。按1.6g/kg/d剂量给药，连续灌胃21d；对照组给予相应体积的生理盐水灌胃。第21d麻醉下处死小鼠。取出腹腔内原位结直肠肿瘤并称重。

小鼠疲乏状态的观察

4.1记录小鼠一般情况

观察并记录各组小鼠毛发外观、精神状态、活动度、食量和体重的变化（每4d称重鼠粮；每1w测量小鼠体重）。

4.2躯体性疲乏的测定

采用力竭游泳实验评估躯体性疲乏。所有小鼠于原位造模前置于游泳箱（水温25℃±1℃）进行适应性游泳训练3d，5min/d。给药后第10d，用7%体重的铅块坠于小鼠尾部，将小鼠放入游泳箱中进行力竭游泳实验，并记录力竭游泳时间。力竭游泳标准为小鼠鼻尖沉入水下6s。

4.3精神性疲乏的测定

采用悬尾实验评估精神性疲乏。于给药后第14d，用胶带将小鼠尾部粘在悬尾测试仪上，小鼠头部距测试仪底部5cm，保持室内暗光，适应性悬挂2min后，记录小鼠后4min内不动的时间。

血清中炎症因子的检测

于实验终点摘眼球取血，每只小鼠血量约为1.2ml。血液静置30min后，3000r/min离心10min，取上清液，置于-80℃冰箱中储存备用。按照elisa试剂盒（联科生物技术股份有限公司，杭州，中国）说明书操作，检测血浆中il-1α/β、il-2、il-6、il-10、tnf-α、ifn-γ细胞因子的表达水平。

6肝糖原测定

采用蒽酮法测定肝糖原含量。实验结束后，取下部分肝脏，称取肝脏组织100mg，加入浓碱300μl沸水浴煮20min，以破坏其他成分而保留肝糖原。再用双蒸水配制成浓度为1%的肝糖原检测液，加入用95%浓硫酸溶解的蒽酮显色剂2ml（建成生物工程研究所，南京，中国），混匀后置沸水中煮5min，冷却后于波长620nm处，测定各测定管及标准糖原检测液（0.001mg）的吸光度值，以空白管调零。按照说明书，通过以下公式算出每g肝组织中肝糖原的含量。

肠道菌群的测定

灌药21d后，使用无菌ep管收集粪便（约1g/只），储存于-80℃冰箱。采用16srdna法检测yzxj对原位结肠癌小鼠肠道菌群的影响：基于ions5^tmxl测序平台，构建小片段文库进行单端测序。通过对reads剪切过滤，otus（operationaltaxonomicunits）聚类，并进行物种注释及丰度分析，揭示样品物种构成；进一步通过α多样性分析（alphadiversity）和β多样性分析（betadiversity）寻找样品之间的差异。

统计方法

计量资料采用t检验，以均数±标准差表示；不符合正太分布者采用秩和检验。利用uparse软件对所有样品的全部cleanreads进行聚类，以97%的一致性（identity）将序列聚类成为otus（operationaltaxonomicunits），同时，依据otus中出现频数最高的序列作为otus的代表序列。对otus代表序列进行物种注释，用mothur方法与ssurrna数据库进行物种注释分析（设定阈值为0.8~1），获得分类学信息，并分别在kingdom（界）、phylum（门）、class（纲）、order（目）、family（科）、genus（属）各个分类水平统计各样本的群落组成。使用muscle（version3.8.31）软件进行快速多序列比对，得到所有otus代表序列的系统发生关系。最后对各样品的数据进行均一化处理。使用qiime软件（version1.9.1）计算chao1、simpson指数和unifrac距离，r软件（version2.15.3）进行α及β多样性指数组间差异分析。统计分析在spss（version21.0）中进行，p＜0.05认为差异有统计学意义。

结果

1yzxj对原位结肠癌小鼠疲乏的影响

40只小鼠随机分为ns组和yzxj组各20只，15只因手术操作等原因导致小鼠肠梗阻、肠穿孔死亡，最终ns组14只、yzxj组11只造模成功。实验结束时，ns组原位肿瘤质量为（3.90±0.52）g，yzxj组原位肿瘤质量为（3.40±0.60）g，无统计学意义（t=0.63,p=0.53,）。

1.1对一般情况的影响

给药前，两组小鼠的精神状态、活动度接近。实验过程中，两组小鼠均逐渐出现不同程度的毛发光泽度差、行动迟缓和进食减少等现象。实验结束后，ns组小鼠较yzxj组小鼠的毛发更粗糙、光泽更差；ns组小鼠精神萎靡，行动迟缓，而yzxj组小鼠行动较ns组小鼠灵活多动。

1.2对进食量及体重的影响

每隔4d评估一次小鼠平均进食量。如fig.1d所示，yzxj组小鼠进食量较ns组多，且随着给药时间的延长，yzxj组进食量有上升趋势，但差异未达到统计学意义。

每隔1w称取小鼠体重，最后一次的体重减去肿瘤重量。尽管两组小鼠的体重差异未达到统计学差异，但到了实验后期，yzxj组的体重下降趋势较ns组小鼠减缓。

对原位结直肠癌小鼠疲乏的影响

2.1对躯体性疲乏的影响

两组小鼠力竭游泳时间情况如fig.2a所示。原位造模前，各小鼠游泳时间接近。药物干预后第10d，yzxj组小鼠的力竭游泳时间为（162.80±14.67）s，长于ns组的（117.60±13.42）s（t=2.27,p=0.03）。

2.2对精神性疲乏的影响

fig.2b为悬尾实验结果。可以看出，yzxj组小鼠悬尾静止时间较ns组短【（49.85±4.56）svs（68.83±7.26）s，t=2.22,p=0.04】。

血清炎症因子检测结果

yzxj组小鼠血清中的炎症因子水平普遍低于ns组，但只有il-1β和il-6有统计学差异。yzxj组小鼠血清中的il-1β水平明显低于ns组[（10.29±7.86）pg/mlvs（17.07±7.84）pg/ml，p=0.04]。yzxj组的il-6水平为（92.40±71.43）pg/ml，ns组为（229.44±117.54）pg/ml（p=0.002）。

肝糖原测定结果

ns组肝糖原水平为（2.95±2.06）mg/g，yzxj组肝糖原水平则升高为（5.18±3.11）mg/g（p=0.04）。

肠道菌群的改变

α多样性比较（通过单样本的多样性反应样品内的复杂度）结果显示，yzxj组的菌群丰度及多样性均较ns组高。β多样性比较（反应多样本间的物种差异）结果表明，yzxj组的微生物群落构成较ns组减少。组间群落结构差异显著性检验（anosim分析）显示组间差异大于组内差异，但差异未达到统计学意义（p=0.117）。

为了研究组间具有显著性差异的物种，用metastat方法对组间不同层级的物种丰度进行假设检验，筛选具有显著性差异的菌。结果发现：在门水平，yzxj组小鼠粪便中，拟杆菌门、疣微菌门、放线菌门、蓝藻菌门丰度增加，变形菌门丰度降低。厚壁菌门/拟杆菌门在ns组与yzxj组中分别为0.61和0.41，该比值在yzxj组中下降。在属水平，yzxj组小鼠粪便中拟杆菌门中的parabacteroides、unidentifiedsaprospiraceae、elizabethkingia丰度增加，而变形菌门中的arcobacter（弓形杆菌属），marinobacter（海杆菌属）、alkanindiges、sulfuricurvum、haliangium、thiobacillus（硫杆菌属）丰度降低；小梨形菌属升高；放线菌门中的microbacterium（微杆菌属）、alpinimonas升高，rubrobacter（红杆菌属）、iamia降低。