本发明涉及一种优选从天然来源获得的物质的组合物，其有效治疗高胆固醇血症并预防动脉粥样硬化斑块形成以及心血管疾病。
背景技术：
：高胆固醇血症是一种血脂异常，是一种以高血液胆固醇浓度为特征的病况。由于胆固醇不是水溶性的，所以它通过脂蛋白在血液中运输。脂蛋白根据其密度分为极低密度脂蛋白(vldl)、低密度脂蛋白(ldl)、中等密度脂蛋白(idl)和高密度脂蛋白(hdl)。由非hdl脂蛋白、特别是ldl脂蛋白运输的胆固醇的高血浆水平与动脉粥样硬化和心血管疾病的风险增加相关。相比之下，hdl胆固醇的水平增加被认为是保护性的。心血管疾病是发达国家和发展中国家死亡率的主导原因。在欧洲，心血管疾病每年造成400万人死亡，尽管最近观察到死亡人数有所减少，但这些疾病仍然是死亡率的主要原因。在欧洲，仅冠心病每年造成至少180万人死亡，占总数的20％。流行病学研究已经确定了多种心血管风险因素，包括高血压、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和高血糖症。高血脂症和降低的hdl水平取决于各种相互关联的因素，其可以是行为、环境、遗传(例如，编码脂蛋白的基因中存在突变)或代谢(例如糖尿病)类型。高胆固醇血症、高甘油三酯血症和低血液hdl浓度是动脉粥样硬化和与其相关的疾病，例如心绞痛、心肌梗塞、脑血管疾病和外周血管疾病(静脉和动脉闭塞)的主导原因。使用能够控制血液胆固醇水平，特别是低密度脂蛋白(ldl)水平的药物已导致死亡率降低。有多种药物用于治疗可能与心血管风险相关的疾病，然而，这些活性成分的给药往往与许多副作用有关。第一类药物由离子交换树脂(考来烯胺和考来替泊)组成，其作用机制基于与胆汁酸的相互作用，胆汁酸通过形成离子键而被树脂多价螯合。由于肝脏胆固醇浓度的降低，这导致胆汁酸的合成增加，并因此导致肝细胞上ldl受体的表达增加。离子交换树脂的副作用主要是消化不良、肿胀和血浆甘油三酯浓度增加。第二类药物由他汀类药物组成。它们抑制参与甲羟戊酸酯合成的酶hmg-coa(3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶a还原酶)，而甲羟戊酸酯也是胆固醇生物合成所必需的。对这种生理过程的抑制导致肝脏水平的ldl受体表达增加，结果导致这些脂蛋白的血浆浓度降低。目前，他汀类药物是用于减少胆固醇血症的最广泛使用的药物。具有非常高的发病率的副作用主要是肝毒性，尤其是肌病和横纹肌溶解症。第三类药物由依泽替米贝组成，其与npc1l1(niemann-pickc1样-1蛋白)转运蛋白相互作用，从而抑制饮食中的胆固醇吸收。依泽替米贝的主要副作用是腹痛、肠胃气胀、腹泻、疲劳。该药物可与他汀类药物联合使用。第四类药物由烟酸和结构相关化合物组成，其与gi蛋白偶联受体hm74a蛋白相互作用，从而引起激素敏感性脂肪酶(hsl)活性的抑制，这降低甘油三酯脂解和脂肪酸排泄。此外，这些化合物抑制甘油三酯生物合成中的关键酶，即二酰基甘油乙酰转移酶-2。虽然烟酸是一种维生素，但在使用它的剂量(>1000毫克/天)时，它会出现多种副作用，包括皮肤瘙痒和发红以及消化不良，这限制了其治疗应用。最后，第五类药物由贝特类药物组成，其与pparα(过氧化物酶体增殖物激活蛋白-α)受体相互作用，从而引起脂蛋白脂酶表达增加和apoc-iii表达降低，这导致脂肪酸清除率增加。此外，贝特类药物能够刺激apoa-i和apoa-ii的表达，从而增加血液hdl水平。在这种情况下，也存在各种副作用，包括肌病、胃肠道疾病、皮疹、荨麻疹、头痛、阳痿和贫血。因此，一直需要提供不具有上述副作用或具有降低的副作用的有效对抗高胆固醇血症的可替选治疗。技术实现要素：本发明满足了这些需要以及其它需要，本发明提供了一种组合物，该组合物包含从天然来源获得的活性物质的协同组合，其已被证明在治疗高胆固醇血症方面以及预防动脉粥样硬化斑块形成和相关的心血管疾病方面特别有效。本发明的组合物如所附权利要求1中所限定。本发明的另外特征和优点在从属权利要求中限定。权利要求构成本说明书的组成部分。具体实施方式在下文中提供本发明的一些优选实施方式的详细描述。如前所述，本发明涉及可以从天然来源或通过有机合成获得的活性物质的协同组合，已证明其在治疗高胆固醇血症方面并因此在预防动脉粥样硬化斑块形成和与高胆固醇相关的心血管疾病方面特别有效。在优选的实施方式中，本发明的协同组合物包含一种或多种莫纳可林、姜黄素、原花青素、胡椒碱和可选的辅酶q10和/或植物甾醇或甾烷醇作为活性物质。可用于本发明组合物的其它活性物质是白藜芦醇；多廿烷醇，包括例如二十八烷醇；叶酸；和铬，特别是吡啶甲酸铬。莫纳可林是天然存在的物质，其可以例如通过酵母紫红曲霉(monascuspurpureus)使红米发酵来获得。其中，值得一提的是莫纳可林k，其具有与洛伐他汀相同的化学结构。莫纳可林k是酶3-羟基-3-甲基-戊二酰基辅酶a还原酶(hmg-coa还原酶)的竞争性抑制剂，其干扰胆固醇生物合成所必需的甲羟戊酸酯的产生。hmg-coa还原酶的抑制是由于莫纳可林k的β-羟基酸形式与3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶a之间的结构同源性。许多研究表明，红曲米的使用可导致总胆固醇和ldl胆固醇的降低，同时使hdl胆固醇水平增加。其他研究表明了莫纳可林k降低胆固醇的作用。除了莫纳可林k之外，红色紫红曲霉发酵的大米中也存在其他莫纳可林，即莫纳可林j、莫纳可林l和莫纳可林m，其抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶a还原酶，因此可用于本发明的协同组合物，作为莫纳可林k的可替选者或与莫纳可林k结合。在优选的实施方式中，基于组合物的活性物质的总重量，莫纳可林k、莫纳可林j、莫纳可林l和/或莫纳可林m在本发明组合物中以在0.01％w/w(重量/重量)至10％w/w的范围内，更优选在0.05％w/w至2％w/w的范围内，更加优选在0.5％w/w至1％w/w的范围内的浓度存在。姜黄素具有多种药理活性，包括抗炎活性、抗氧化活性、免疫调节活性、抗肿瘤活性和神经保护活性。该物质是最有力的、天然存在的抗炎药物之一，是从姜黄中提取的。在人类和啮齿动物的许多研究中，姜黄素已被证明有效降低脂质过氧化和血浆胆固醇水平。其中，姜黄素能够作用于lxrα受体，这使得参与从胆固醇生物合成胆汁酸的细胞色素cyp7a1的基因表达增加。这种效果已经在大鼠的体内研究中得到证实：向大鼠施用含有0.1％w/w姜黄素的饮食与cyp7a1表达的显著增加(p<0.05)相关，并且使血浆ldl胆固醇水平降低68％。没药甾酮是一种从印度没药(commiphoramukul)植物中提取的化合物，还具有诱导cyp7a1表达的能力，从而增加胆汁酸的合成。没药甾酮与胆汁酸竞争fxr受体结合，阻止负反馈机制，并且事实上导致胆汁酸合成增加。尽管以与姜黄素的机制不同的机制起作用，但没药甾酮仍然导致增加cyp7a1表达的相同效果，因此可以可替选地或与姜黄素一起用于本发明的协同组合物中。在优选的实施方式中，基于组合物的活性物质的总重量，姜黄素和/或没药甾酮以在1％w/w至90％w/w的范围内，更优选在10％w/w至30％w/w的范围内的总重量浓度存在于本发明的协同组合物中。胡椒碱是属于香草素系的化合物，具有可与香草醛的分子部分重叠的分子部分。该物质是黑胡椒(pipernigruml.)和属于胡椒科一族的其他植物例如荜茇(piperlonguml.)的主要生物碱。胡椒碱已显示出对两种同种型酰基辅酶a：胆固醇酰基转移酶(acat1和acat2)的重要抑制活性，其通过酯化胆固醇起作用。属于胡椒科一族的植物提取物中的其他化学化合物，例如几内亚胡椒碱(guineensine)，也具有相同的作用。acat1和acat2抑制活性非常令人感兴趣，因为acat1和acat2对胆固醇的酯化是对于其插入乳糜微粒中并因此对于其肠吸收的基本过程。此外，acat1和acat2的抑制可以防止巨噬细胞中的脂质积累，从而抑制泡沫细胞形成和动脉粥样硬化斑块形成。胡椒碱还具有针对参与外源性物质代谢的酶的重要抑制活性。特别地，胡椒碱施用已表明导致辅酶q10的生物利用度提高。姜黄素和胡椒碱的共同施用也已表明导致姜黄素的口服生物利用度增加。在优选的实施方式中，基于组合物的活性物质的总重量，胡椒碱和/或几内亚胡椒碱以在0.10％w/w至20％w/w范围内，更优选在0.10％w/w至5％w/w范围内的总重量浓度存在于本发明的协同组合物中。原花青素(procyanidin)是属于单宁类的酚类分子，并具有降低胆固醇的性质。单宁是在自然界中广泛存在的酚类化合物，能够沉淀蛋白质。通常，单宁是高分子量(mw>500da)化合物并且在其结构中具有许多羟基。单宁结构非常不均一。在结构上，它们可以分为3组：1.缩合单宁(或原花色素(proanthocyanidin))；2.可水解的单宁；3.褐藻多酚。原花青素是较大的缩合单宁系的一部分，也称为原花色素。从化学观点来看，它们衍生自黄烷-3-酚化合物，特别是儿茶素和表儿茶素，并且可以具有低聚结构或聚合结构。原花青素具有以下一般结构：在低聚原花青素中，n＝0-5，而在聚合原花青素中，n>5。本发明的目的原花青素具有图中所示的结构，其中n为0-15。这些物质在苹果属植物例如栽培苹果(malusdomesticaborkh.)、红富士苹果(maluspumilamill.)或阿努卡苹果(maluspumilamill.cvannurca)中大量存在，但也存在于其他植物种类例如海岸松或酿酒葡萄中。annurca苹果(maluspumilamill.cvannurca)是一种苹果栽培品种，原产于意大利南部，广泛分布在坎帕尼亚，在坎帕尼亚所产的60％的苹果属于该栽培品种。大量研究表明，与其他栽培品种例如蛇果(reddelicious)、粉红佳人苹果(pinklady)、富士苹果和金冠苹果相比，这种苹果含有最高含量的多酚。苹果提取物中含有的多酚，特别是低分子量原花青素，已经表明能够降低cetp(胆固醇酯转移蛋白)的活性，cetp具有将胆固醇酯从hdl脂蛋白转移至ldl脂蛋白的功能。通过这种方式，苹果多酚可以增加hdl血浆浓度并降低非hdl/hdl胆固醇比值。还已知高分子量原花青素在肠中吸收差，并且具有与胆固醇形成包合物的能力。这是原花青素导致抑制膳食胆固醇吸收的主要机制。根皮苷是仅存在于苹果中的二氢查尔酮，可用于维持正常血浆葡萄糖水平，能够减少肝脏和肠道细胞对葡萄糖的摄取。在优选的实施方式中，原花青素，任选地与根皮苷组合，基于组合物的活性物质的总重量，以在1％w/w至50％w/w范围内，更优选在2.0％w/w至20％w/w范围内的总重量浓度存在于本发明的协同组合物中。辅酶q10(也称为泛醌和泛癸利酮)是一种属于泛醌系的苯醌，它由参与线粒体水平电子转运过程的脂溶性分子组成，在氧化磷酸化过程中起着根本性作用。已知辅酶q10能够抑制低密度脂蛋白过氧化。不只与过氧自由基直接反应，作用机制在于将α-生育酚氧自由基还原成α-生育酚。已经发现补充辅酶q10会导致ldl中泛醇浓度的增加，并降低它们的过氧化性。除了其重要的抗氧化特性外，辅酶q10还具有直接的抗动脉粥样硬化活性。辅酶q10施用的另一个关注的药理作用在于降低收缩压和舒张压。抑制酶3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶a还原酶的莫纳可林k可以降低胆固醇以及甲羟戊酸酯衍生的类异戊二烯化合物(如泛醌和多萜醇)的生物合成。由于这个原因，本发明的协同组合物还包含辅酶q10可以是有用的，辅酶q10的水平通过莫纳可林k或其他莫纳可林的延长使用而降低。在优选的实施方式中，基于组合物的活性物质的总重量，辅酶q10以在0.10％w/w至20％w/w范围内，更优选在0.5％w/w至2％w/w的范围内的重量浓度存在于本发明的协同组合物中。植物甾醇是植物细胞膜的组成部分。它们在结构上与胆固醇相似，但有一些结构差异。术语“植物甾醇”通常用于描述在环的5位具有双键的植物甾醇和其中双键被还原的植物甾烷醇。植物甾醇是从植物油中提取的，植物油例如玉米油、菜籽油、大豆油、葵花籽油、橄榄油。在坚果、种子、水果和蔬菜中也有较小程度的存在。最丰富的甾醇是谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇。它们分别代表饮食中植物甾醇消耗的约65％、30％和3％。另一方面，甾烷醇在自然界中不太丰富，但可以通过植物甾醇的氢化合成。由于与胆固醇的结构相似性，植物甾醇和甾烷醇通过阻断小肠中的胆固醇吸收和降低低密度脂蛋白(ldl)的血液水平起作用。在优选的实施方式中，基于组合物的活性物质的总重量，植物甾醇和/或甾烷醇以在10％w/w至90％w/w的范围内，更优选在从20％w/w至70％w/w的范围内，更加优选在50％w/w至65％w/w的范围内的重量浓度存在于本发明的协同组合物中。本发明的协同组合物制成药物制剂或膳食补充剂，优选以固体口服剂型、液体口服剂型或半固体口服剂型。优选的口服剂型是片剂、胶囊、药囊(sachet)、粉剂、颗粒、丸剂、凝胶、糖浆剂、酏剂、口服溶液、悬剂或乳液。最优选的是药囊和胶囊。优选地，本发明的协同组合物制成口服剂型，其被设计用于施用1mg/天至50mg/天的莫纳可林、10mg/天至2000mg/天的姜黄素和/或没药甾酮、50mg/天至4000mg/天的原花青素(任选地与根皮苷组合)、1mg/天至50mg/天的胡椒碱和/或几内亚胡椒碱和任选的5mg/天至200mg/天的辅酶q10和100mg/天至3000mg/天的植物甾醇和/或甾烷醇。本发明的目的的协同组合物特别有利于用于治疗高胆固醇血症，因为它同时实现不同的作用，特别是血浆ldl水平的降低和hdl水平的增加、肠内胆固醇吸收的抑制和抗动脉粥状硬化作用。总的来说，所有这些都导致心血管疾病，特别是冠状动脉疾病、心脏病发作、心绞痛和中风的风险降低。制剂降低低密度脂蛋白血浆水平的能力取决于组合物成分的以下协同作用：(i)莫纳可林k和其它莫纳可林通常能够抑制酶3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶a还原酶(hmg-coa还原酶)，其是胆固醇生物合成途径中的关键酶。这导致胆固醇合成减少，伴随有肝脏水平的ldl-r受体表达增加和血液ldl浓度低；(ii)姜黄素和/或没药甾酮分别作用于lxrα受体和fxr受体，增加细胞色素cyp7a1的表达，同时因此增加从胆固醇合成胆汁酸。由于肝细胞胆固醇浓度降低，这导致ldl受体(ldl-r)的更高表达。肝细胞膜上数量更多的ldl-r使得血浆ldl浓度降低；(iii)原花青素可以使肠中的胆汁酸复合，从而防止它们再吸收。由于超过95％的合成胆汁酸通常在肠道水平被再吸收，因此该机制的破坏导致其合成增加，同时肝脏胆固醇水平进一步消耗，ldl受体表达增加，并且血浆ldl脂蛋白水平降低。上述活性物质均导致肝脏水平的ldl受体表达增加，但由于其作用基于不同的机制，它们可发挥协同效果。本发明组合物的第二个效果是增加血浆hdl浓度的能力。该作用源于制剂的以下成分的作用的协同效果：(i)原花青素具有抑制cetp(胆固醇酯转移蛋白)活性的能力，cetp参与胆固醇酯从hdl向ldl的转移。通过这种方式，它们能够增加hdl胆固醇水平并降低非hdl胆固醇/hdl胆固醇浓度比；(ii)姜黄素具有增加巨噬细胞和外周组织中abca1转运蛋白表达的能力。以这种方式，它增加了胆固醇从外周组织的流出，胆固醇通过hdl被递送至血浆，从而增加这些脂蛋白的血浆浓度。本发明组合物的第三个效果是降低肠道水平的胆固醇吸收能力，从而降低总胆固醇的血浆浓度。该作用源于以下活性物质的协同效果：(i)原花青素，通过与胆固醇形成复合物，而减少胆固醇的肠道吸收；(ii)植物甾醇与胆固醇竞争与npc1l1(niemann-pickc1样-1蛋白)转运蛋白结合，npc1l1转运蛋白允许胆固醇吸收到肠上皮细胞中。通过这种方式，它们可以减少肠内水平吸收的胆固醇量；(iii)胡椒碱和几内亚胡椒碱具有抑制作为肠道中胆固醇吸收的基础的酶acat2(甾醇o-酰基转移酶)的能力。事实上，胆固醇必须被这种酶酯化，以能够插入乳糜微粒中。通过阻断该过程，胡椒碱限制了胆固醇的肠内吸收，然后胆固醇通过abcg5和abcg8转运蛋白被肠上皮细胞排泄。最后，本发明的组合物具有通过以下机制抑制动脉粥样硬化斑块形成的能力：(i)由上述药理作用引起的降胆固醇活性对于减少动脉粥样硬化过程非常重要；(ii)姜黄素通过作用于lxrα受体，增加abca1转运蛋白的表达，从而使得胆固醇从泡沫细胞中流出更多。此外，由于其抗氧化作用，它抑制ldl氧化。最后，该化合物的抗炎作用有助于减少动脉粥样硬化过程；(iii)辅酶q10具有抗动脉粥样硬化效果，主要与其抗氧化活性和清除自由基活性有关；(iv)原花青素由于其抗氧化活性，而进一步有助于预防动脉粥样硬化斑块的形成。如下面的实验部分所述，与单独各个成分的降低胆固醇、抗动脉粥样硬化、抗炎和抗氧化效果相比，评价了落入本发明范围内的组合物的降低胆固醇、抗动脉粥样硬化、抗炎和抗氧化效果。这使得可以确认存在协同效果。提供以下实施例仅用于说明目的，并不限制如所附权利要求中限定的本发明的范围。实施例以下是制剂的一些实施例，以及相关活性物质的每日剂量。制剂实施例实施例1活性成分量重量浓度(基于总制剂)植物甾醇800mg20.00％姜黄素100mg2.50％原花青素80mg2.00％胡椒碱20mg0.50％莫纳可林k10mg0.25％辅酶q1010mg0.25％总重量药囊4000mg实施例2实施例3活性成分每日剂量植物甾醇800mgannurca苹果d.e.200mg姜黄d.e.150mg黑胡椒d.e.20mg莫纳可林k10mg辅酶q1010mg实施例4活性成分每日剂量植物甾醇800mg海岸松d.e.200mg姜黄d.e.150mg黑胡椒d.e.20mg莫纳可林k10mg辅酶q1010mg实施例5实施例6活性成分每日剂量植物甾醇800mg印度没药d.e.500mgannurca苹果d.e.200mg黑胡椒d.e.20mg莫纳可林k10mg辅酶q1010mg实施例7活性成分每日剂量植物甾醇800mg栽培苹果d.e.200mg姜黄d.e.100mg黑胡椒d.e.20mg莫纳可林k10mg辅酶q1010mg实施例8实施例9(片剂)成分量(mg)红曲米，d.e.3％莫纳可林k166.700姜黄，d.e.95％姜黄素150.000酿酒葡萄，d.e.95％多酚，30％原花青素133.500虎杖，d.e.98％白藜芦醇51.020甘蔗，d.e.98％多廿烷醇，60％二十八烷醇15.000黑胡椒，d.e.95％胡椒碱1.580叶酸0.440吡啶甲酸铬0.370微晶纤维素适量磷酸氢钙适量交联羧甲基纤维素钠适量山嵛酸甘油酯适量硬脂酸镁适量二氧化硅适量实施例10(药囊)在上面的所有表格中，d.e.代表干燥提取物。通过在用完整组合物或其单独成分处理之前和之后实验上确定鼠高胆固醇血症模型中的降胆固醇和抗动脉粥样硬化效果(通过评估血液中总胆固醇、ldl、hdl和甘油三酯的浓度)，可以评估本发明组合物的有效性及其协同效果。类似地，可以参考完整的组合物及其单独成分来评估抗氧化活性和抗炎活性。当前第1页12