阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用及其药物组合物的制作方法

本发明属于医药技术领域，特别涉及阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用及其药物组合物。

背景技术：

帕金森病(parkinson'sdisease，pd)是以中脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性丢失、变性和死亡为主要病理特征的一种神经系统退行性疾病，多发于中老年。其典型的临床表现为静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿态不稳等。pd是仅次于阿尔兹海默病造成中老年人神经变性的杀手，给社会和家庭带来沉重的负担。目前pd发病机制不明确，治疗现状因疗效不佳或副作用明显受限制。因此，寻找有效的治疗方案和药物，来缓解pd患者的症状，具有重要的临床意义。

左旋多巴(l-dopa)目前仍是pd治疗药物中的金标准，左旋多巴是多巴胺(da)的代谢前体，可以通过血脑屏障，进入基底节后经脱羧而成多巴胺，发挥补充多巴胺神经递质缺乏的作用。左旋多巴能够有效改善运动不能和僵直状态，临床常用复方左旋多巴或左旋多巴与其他辅助药物联合治疗。但在应用左旋多巴治疗2～5年后，半数以上的病例开始出现药效的波动性。每次服药后症状改善持续的时间愈来愈短，附加出现多动现象，使病人经常在严重的动作缺失与无法控制的多动状态之间来回摆动，这种症状称为异动症。

lid(左旋多巴诱发异动症)是左旋多巴长期治疗pd过程中最常见的并发症之一，主要表现有舞蹈症及手足徐动症，这些不良反应严重影响了pd患者的治疗和日常生活质量。黑质纹状体进行性多巴胺神经元丢失以及l-dopa的外源性补充与lid密切相关，目前对lid的发病机制仍不完全清楚，而且这些研究均是在临床前的机制研究，目前在临床上仍没有针对lid的治疗方法和药物，因此pd患者lid的预防和治疗仍然是一个亟待解决的临床需求，潜在协同作用策略结合左旋多巴可能为帕金森病提供新的辅助治疗。

阿司匹林(aspirin,asa乙酰水杨酸)是一种白色结晶或结晶性粉末，无臭或微带醋酸臭，微溶于水，易溶于乙醇，可溶于乙醚、氯仿，水溶液呈酸性。其对缓解轻度或中度疼痛，如牙痛、头痛、神经痛、肌肉酸痛及痛经效果较好，亦用于感冒、流感等发热疾病的退热，治疗风湿痛等。近年来发现阿司匹林对血小板聚集有抑制作用，能阻止血栓形成，临床上用于预防短暂脑缺血发作、心肌梗死、人工心脏瓣膜和静脉瘘或其他手术后血栓的形成。现有技术中，尚未有将阿司匹林应用于制备治疗异动症药物的相关报道。

技术实现要素：

为解决现有技术的不足，本发明提供了阿司匹林在治疗异动症方面的应用，以及阿司匹林用于制备治疗异动症药物中的应用及其药物组合物。

本方案中的阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，是指阿司匹林在制备预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物中应用。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，药物是以阿司匹林作为活性成分，加入药用载体或赋形剂制成。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用中，所述药物包括的原料及其重量份数为：阿司匹林10～400份、硬脂酸镁0.1～0.4份、羧甲基淀粉钠4～12份和微晶纤维素50～100份。阿司匹林与羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合，过筛，使其混匀，加入适量水或乙醇制粒，干燥后，整粒，加入硬脂酸镁，然后用冲压装置将颗粒压制成片，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物片剂。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，所述药物包括的原料及其重量份数为：阿司匹林50～400份、硬脂酸镁0.1～0.3份、羧甲基淀粉钠4～12份和淀粉50～100份。将阿司匹林与羧甲基淀粉钠、淀粉混合均匀，加入适量乙醇制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁，然后装入明胶胶囊中，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物胶囊剂。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，所述药物包括的原料及其重量份数为：阿司匹林1～10份和矫味剂1～10份，矫味剂为糊精或蔗糖。将阿司匹林与蔗糖/糊精混合均匀，加入适量水或乙醇制成软材，过筛制粒，干燥，整粒，分装，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物颗粒剂。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，所述药物包括的原料及其重量份数为：阿司匹林10～400份、聚乙醇或豆油100～400份、助悬剂3～10份、乳化剂3～10份、明胶50～100份、甘油10～20份和纯化水50～100份。将明胶置于溶胶罐中，加入纯化水，70℃下加热使溶解，加入甘油，搅拌均匀，真空除去气泡后保温静置，按比例将阿司匹林与聚乙醇/豆油、乳化剂、助悬剂混合均匀，再和制备好的明胶置旋转压囊机，压制成软胶囊，定型，干燥，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物软胶囊剂。为了增加药物的保存时限，可以在制备阶段加入适量的防腐剂来延长药物的保质期。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，所述药物包括的原料及其重量份数为:阿司匹林1～10份和基质20～40份，基质为聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸和单硬脂酸甘油酯中的至少一种。将阿司匹林加水制成均匀糊状，再加入溶融的基质液，加热熔融成澄清液体，倒入已预热的滴丸器中，控制滴制温度和速度，滴入冷凝液中，成丸后吸干冷凝液，收集滴丸，置干燥器内，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物滴丸剂。为了提高滴丸剂的圆整度，可采用甲基硅油作为冷凝液。

所述阿司匹林在制备治疗异动症药物中的应用，所述药物包括的原料及其重量份数为：阿司匹林1～20份、羧甲基纤维素纳1.5份、糖精钠0.1份和纯化水100份。将羧甲基纤维素纳分散在热水中，冷却，然后与含有阿司匹林和糖精钠的含水混悬液混合，将溶液调配成所需体积并混合均匀，灭菌后分装，可得预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物糖浆剂。为了提高药物的口感，可根据实际情况添加矫味剂；为了提高药物的保存时间，可以添加适量的防腐剂。

另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物以阿司匹林作为活性成分，加入药用载体或赋形剂而得，药物组合物用于预防或治疗左旋多巴诱发异动症。

优选的，所述药物组合物制备为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、糖浆剂、粉剂、散剂、栓剂、滴剂、乳剂、注射液、溶液或混悬液。

优选的，所述药物组合物制备为片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂或糖浆剂。

本发明的有益效果：本发明开拓性的将阿司匹林应用于治疗长期服用左旋多巴诱发异动症，不仅对帕金森病的症状有一定的治疗效果，更大的程度上能对长期服用左旋多巴诱发异动症的延缓或者改善效果，降低了帕金森治疗过程中因药物导致的副作用—异动症，发挥单一化合物与药物的协同作用，治疗帕金森病。因此适宜在临床中推广使用。

附图说明

图1是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠口面部aim评分的影响图；

图2是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠上肢aim评分的影响图；

图3是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠轴性aim评分的影响图；

图4是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠总aim评分的影响图；

图5是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠运动能力的影响图；

图6是阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠炎症因子的影响图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式进一步详细说明：

说明书附图中的附图标记的含义：m表示6-ohda(6-羟基多巴)；asa表示阿司匹林，l-dopa表示左旋多巴；#表示另外三组与m组比较，p＜0.05；ω表示另外三组与m+asa组比较：ψ表示另外三组与m+l-dopa组比较：p＜0.05。

实施例1

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物片剂的制备方法，通过以下步骤制备：取阿司匹林10-400毫克、硬脂酸镁0.1～0.40毫克、羧甲基淀粉钠4～12毫克、微晶纤维素50～100毫克，阿司匹林与羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合，过筛，使其混匀，加入适量水或乙醇制粒，干燥后，整粒，加入硬脂酸镁，然后用冲压装置将颗粒压制成片，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林193毫克、硬脂酸镁0.15毫克、羧甲基淀粉钠5.8毫克、微晶纤维素63毫克。

实施例2

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物胶囊剂的制备方法，通过以下步骤制备：取阿司匹林50～400毫克、硬脂酸镁0.1～0.30毫克、羧甲基淀粉钠4～12毫克、淀粉50～100毫克，将阿司匹林与羧甲基淀粉钠、淀粉混合均匀，加入适量乙醇制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁，然后装入明胶胶囊中，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林326毫克、硬脂酸镁0.21毫克、羧甲基淀粉钠5毫克、淀粉86毫克。

实施例3

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物颗粒剂的制备方法，通过以下步骤制备：取阿司匹林1～10克、糊精或蔗糖1～10克、矫味剂和甜味剂适量，将阿司匹林与蔗糖/糊精、矫味剂和甜味剂混合均匀，加入适量水或乙醇制成软材，过筛制粒，干燥，整粒，分装，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林6.8克、糊精或蔗糖3.6克、矫味剂和甜味剂适量。

实施例4

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物软胶囊剂的制备方法，通过以下步骤制备:取阿司匹林10～400毫克、聚乙醇或豆油100～400毫克、助悬剂3～10毫克、乳化剂3～10毫克和明胶50～100毫克、甘油10～20毫克、纯化水50～100毫克及防腐剂适量，将明胶置于溶胶罐中，加入纯化水，70℃下加热使溶解，加入甘油和防腐剂，搅拌均匀，真空除去气泡后保温静置，按比例将阿司匹林与聚乙醇/豆油、乳化剂、助悬剂混合均匀，再和制备好的明胶置旋转压囊机，压制成软胶囊，定型，干燥，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林269毫克、聚乙醇或豆油251毫克、助悬剂5毫克、乳化剂4毫克和明胶79毫克、甘油13毫克、纯化水85毫克及防腐剂适量。

实施例5

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物滴丸的制备方法，通过以下步骤制备:取阿司匹林1～10毫克、基质20～40毫克、甲基硅油适量，将阿司匹林加水制成均匀糊状，再加入溶融的基质液，加热熔融成澄清液体，倒入已预热的滴丸器中，控制滴制温度和速度，滴入甲基硅油冷凝液中，成丸后吸干冷凝液，收集滴丸，置干燥器内，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林8.6毫克、基质32毫克、甲基硅油适量。

实施例6

预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物糖浆剂的制备方法，包括以下步骤:取阿司匹林1～20克、羧甲基纤维素纳1.5克、糖精钠0.1克、矫味剂适量、防腐剂适量和纯化水100毫升，将羧甲基纤维素纳分散在热水中，冷却，然后与含有阿司匹林、糖精钠、矫味剂和防腐剂的含水混悬液混合，将溶液调配成所需体积并混合均匀，灭菌后分装，即得。用量：以阿司匹林活性成分计，给药量为5-50mg/kg。本实施例选取阿司匹林16.3克、羧甲基纤维素纳1.5克、糖精钠0.1克、矫味剂适量、防腐剂适量和纯化水100毫升。

为了确保本发明技术方案的科学、合理、有效，发明人进行了一系列实验。

一、实验材料和仪器

1.1、实验动物

sd雄性大鼠，体重200-250g，购自于第三军医大学大坪医院动物实验中心(许可证：scxk(渝)2012-0005)，动物饲养于遵义医学院基础药理教育部重点实验室spf动物房，各组实验动物自由进食、饮水。

1.2、主要仪器设备

大鼠脑立体定位仪(美国narishige公司)，olympus光学显微镜(日本olympus公司)，bss－110电子分析天平(北京赛多利斯电子天平有限公司)，milliqa纯水处理器(millipore公司)等。

1.3、主要实验试剂

阿司匹林，纯度≥98％(sigma公司)；左旋多巴，纯度≥98％，(sigma公司)，bca试剂盒，ripa裂解液，β-actin小鼠抗大鼠多克隆抗体，cox-2、il-6、inos多克隆抗体。

二、实验方法

2.1、实验分组

30只sd大鼠，雄性，体重200-250g，随机分为5组，每组6只，分别设为：空白组、6-羟多巴胺(6-ohda，8μg)组、6-ohda+左旋多巴(l-dopa，25mg/kg)组、6-ohda+asa(阿司匹林，10mg/kg)组、6-ohda+l-dopa(25mg/kg)+阿司匹林(10mg/kg)组。造模后21天，灌胃给予asa及腹腔注射l-dopa，连续给药21天。

2.2、制备动物模型

用7％水合氯醛(0.5ml/100g)麻醉sd大鼠，在无菌条件下，以前囟为坐标原点，前囟后5.2mm，中线旁2.2mm，硬膜下8.0mm，匀速注入4μl浓度为2μg/μl的6-ohda。

2.3、行为学实验

2.3.1aim评分

大鼠在给药第7、14、21天进行aim评分，在用药后每30min评估1次，持续120min钟，共4次。aim评分：分成4个部分进行评定(上肢aim、口面部aim和轴性aim)，每部分又根据其有无和严重程度分5个等级(0～4)：理论上1只大鼠1次用药后最大平均积分为16分。0：无；1：aim存在不到观察时间的50％；2：aim存在大于观察时间的50％；3：持续存在,刺激使之停止；4：持续存在,刺激不能使之停止。

2.3.2跨步实验

于每次左旋多巴治疗前及治疗30min后进行大鼠前肢运动功能测定：实验者一手固定大鼠躯体后半部及后肢,使其离地，另一手则固定一侧前肢并使另一前肢着地，以大鼠正手方向斜向一侧移动大鼠(于5s内移动90cm)，记录移动时大鼠着地侧前肢触、离地步数，交替测量两侧前肢的跨步数

2.4、取材

各组大鼠分别用7％水合氯醛麻醉后，打开其腹腔，夹闭腹主动脉，剪开胸腔，充分暴露心脏，将透灌针经心尖插至主动脉，止血钳固定并剪开右心耳，以一定的速度灌注0.1mol/lpbs液，至大脑内的血液冲洗干净，直接断头取脑，分离出中脑，于-80℃保存。

2.5、蛋白测定

1)蛋白提取：取出中脑加入适量配置好的ripa裂解液，研磨匀浆，冰上静置20min后，12000转/min，4℃离心15min，收集上清，-80℃保存。

2)bca法检测样品的蛋白浓度。

3)样本蛋白变性：根据各组样本蛋白浓度和体积，确定样本检测的蛋白质量，计算出同质量的蛋白下各组样本检测体积。

4)加样：取出10％nupage凝胶，将其固定在电泳槽中，电泳槽内加满电泳液，垂直拔掉凝胶上的梳子，将检测样品分别加到凝胶孔内，盖上电泳槽盖，连接好正负电极，开始电泳。

5)电泳：首先电压调至70v，电泳约40min，待maker条带开始分离后，电压调至110v，直到maker条带到达下层胶底部，停止电泳。

6)电转：用半干转进行电转，切取所需分子量的凝胶，按滤纸—聚偏二氟乙烯膜(pvdf膜)—凝胶—滤纸的顺序，放入电转盒，设定25v，1.0a，30min开始电转。

7)洗涤：取出pvdf膜，用tbst洗涤，10min一次，洗3次；

8)封闭：5％的脱脂奶粉封闭3h，用tbst洗涤，10min一次，洗3次；

9)加一抗：4℃孵育过夜，用tbst洗涤，10min一次，洗3次；

10)加二抗：室温孵育1h，用tbst洗涤，10min一次，洗3次；

11)曝光；

12)采用quantityone定量分析软件系统对条带进行灰度计算。

2.6、数据的统计分析

实验数据用spss21.0统计软件统计，所有数据以均数±标准差表示，采用单因素方差分析(anova)比较均数的组别差异，方差齐使用lsd法，方差不齐，采用dunnett’st3比较均数的组别差异，p<0.05有统计学意义。

三、实验结果

1、阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠aim评分的影响

采用分成4个部分进行评定(上肢aim、口面部aim、轴性aim)(图1-3)，总分的结果如图所示(图4)。与6-ohda组比较，给予l-dopa后动物的各时间点的各aim评分均有所增加，给药时间越长，aim评分逐步增高，有统计学差异(p＜0.05)；而给予asa治疗，能在一定程度改善大鼠aim评分，在给药第1，7，14和21天，上肢aim、口面部aim和轴性aim评分均有下降的趋势，都有统计学差异(p＜0.05)。由此可知，给予阿司匹林能够改善长期服用左旋多巴导致的异动症。

2、阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠运动能力的影响

通过跨步实验对大鼠的运动能力进行测试，由图5所示，与6-ohda组比较，给予左旋多巴能明显改善大鼠的运动能力(p＜0.05)，单独给予阿司匹林不能改善大鼠的运动功能。但给予阿司匹林与左旋多巴联用后，大鼠的运动功能改善，实验结果证明，阿司匹林在改善异证的同时，并不会影响左旋多巴的疗效。

3、阿司匹林对左旋多巴诱发异动症大鼠炎症因子的影响

异动症的发生与炎症因子的释放密切相关，其结果如图6。与m组的大鼠相比，长期给予左旋多巴，大鼠的炎症因子表达会增加，有统计学差异；但是给予阿司匹林后，能在一定程度减少炎症因子的释放，与m+l-dopa组比较，有统计学差异。由此可知，给予阿司匹林能减少左旋多巴诱发异动症大鼠炎症因子的释放。

总结：本发明从整体实验角度，通过aim评分等方法，验证阿司匹林可以延缓或治疗长期服用左旋多巴导致的异动症，改善运动功能。从而证明阿司匹林对异动症具有治疗作用，并能延缓其发生和发展。

本发明的有益之处在于：本发明提供的一种阿司匹林的应用，即阿司匹林在制备预防或治疗左旋多巴诱发异动症的药物中应用。阿司匹林对长期服用左旋多巴诱发异动症具有防治作用。

(1)阿司匹林在一定程度改善大鼠aim评分，口面部，前肢aim，轴性aim在给药后明显降低，能够改善长期服用左旋多巴导致的异动症。

(2)阿司匹林在改善异动症的同时，并不会影响左旋多巴治疗pd的效果。

(3)阿司匹林能减少左旋多巴诱发异动症大鼠炎症因子的表达。

阿司匹林既能改善异动症的临床症状，又能延缓异动症出现的时间。不仅对帕金森病的症状有一定的治疗效果，更大的程度上能对长期服用左旋多巴诱发异动症的延缓或者改善效果，降低了帕金森治疗过程中因药物导致的副作用—异动症，发挥单一化合物与药物的协同作用，治疗帕金森病。适宜在临床中推广使用。