一种远志皂苷B的应用的制作方法

本发明涉及医药技术领域，具体讲是一种远志皂苷b的应用。

背景技术：

抑郁症是一种中枢神经系致残性疾病，随着社会现代化进程的加快，生活中各种应激因素导致的抑郁症已成为现代社会的常见病和多发病，发病率越来越高，且越来越年轻化。抑郁症以显著而持久的心境低落、睡眠障碍为主要临床特征，15％抑郁患者有自杀行为，给社会和家庭带来严重的感情和经济代价。抑郁症的病因复杂，涉及到交感神经，内分泌和免疫系统等机体多个方面。“单胺假说”是抑郁症机制的主流观点，认为单胺类神经递质5-羟色胺(5-ht)，去甲肾上腺素(na)和多巴胺(da)在抑郁症的病因病理中起着关键作用。临床早期的治疗药物通过抑制单胺氧化酶(mao)的活性，从而减少单胺递质的代谢提高脑内浓度，从而达到治疗目的，如私司立吉林、吗氯贝胺等，但因药物不良反应多已停止使用。目前临床上使用的抗抑郁药一般通过影响单胺递质而发挥作用，如5-ht再摄取抑制剂、na再摄取抑制剂等。这些药物都是化学合成药物，存在着抗抑郁谱窄，不良反应大，易复发等缺点。因此为提高药物疗效，减少药物副作用，从植物中寻找天然、高效、低毒的天然药物成为目前新型抗抑郁药物发展的一个趋势。

远志皂苷b是植物远志(polygala)中的主要活性成分之一。据《神农本草经》记载，植物远志具有咳逆伤中，补不足，除邪气，利九窍，益智慧，耳目聪明，不忘，强志倍力等功能。现代研究表明，制远志粗提物及其皂类化合物具有抗菌、降糖、免疫增强等药理活性[傅晶,张东明,陈若芸.远志属植物的皂苷类成分及其药理作用研究进展.中草药,2006，37,1:144-146.]。远志皂苷b被报道对阿尔茨海默病模型小鼠也有一定治疗效果，在连续口服给药后，显著改善app/ps1转基因小鼠的认知缺陷，这与其降低了脑内的β-淀粉样蛋白水平有关[lix,cuij,yuy,liw,houy,wangx,etal.traditionalchinesenootropicmedicineradixpolygalaeanditsactiveconstituentonjisaponinbreduceβ-amyloidproductionandimprovecognitiveimpairments.plosone，2016，11(3):e0151147.]。此外，研究发现远志皂苷b对d-半乳糖诱导的大鼠学习记忆和认知功能障碍也有一定改善作用。给予远志皂苷b灌胃后，大鼠在水迷宫、被动跳台等行为学实验中的记忆缺陷均有所改善。这种行为改善作用与远志皂苷b调节大鼠海马内白介素、抗肿瘤坏死因子等炎症因子，及sod、mda和gsh-px等氧化应激因子的水平有关[lig,yuj,zhangl,wangy,wangc,chenq.onjisaponinbpreventscognitiveimpairmentinaratmodelofd-galactose-inducedaging.biomedpharmacother.2018,99:113-120.]。本发明提供了远志皂苷b抗抑郁的新用途，国内外现有技术未见报道。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题是，克服以上现有技术的缺点：提供一种远志皂苷b的新用途。

本发明的技术解决方案如下：一种远志皂苷b的应用，用于作为抗抑郁药物的有效成分。

用于抗抑郁药物的有效成分远志皂苷b的含量为1-99wt％。

作为优选，可制成片剂、胶囊剂、丸剂、软胶囊剂、颗粒剂、混悬剂或滴丸的任何一种。

本发明的优点：

1.发现了远志皂苷b的新医疗用途。

2.远志皂苷b为天然植物成分，具有新型、低毒、高效、价廉、来源广泛等优点，药用前景广阔。

3.本发明将成为高效低毒的抗抑郁药物的有益补充。

附图说明

图1远志皂苷b在小鼠悬尾实验中的作用

图2远志皂苷b在小鼠强迫游泳中的作用

具体实施方式

下面用具体实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明不仅局限于以下具体实施例。

实施例一远志皂苷b在小鼠悬尾实验中的作用

动物：成年雄性icr小鼠，4-6周，体重20-22g，每组8-10只。昼夜节律，自然光照，自由摄食饮水。

药物制备及给药：盐酸丙咪嗪、去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺均购于sigma公司，远志皂苷b购自tautobiotech。吗氯呗胺购于北京药理毒理研究所。远志皂苷b溶于双蒸水，测试前30min灌胃给予不同剂量(1mg/kg,3mg/kg,9mg/kg)。吗氯呗胺和丙咪嗪均溶于双蒸水，测试前1h灌胃给予阳性对照药吗氯呗胺20mg/kg，测试前30min腹腔注射给予丙咪嗪10mg/kg。所有药物按1ml药物混合液/100g小鼠体重给药。

悬尾测试：离小鼠尾尖部1cm处贴上胶带，悬挂于离地50cm处。记录6min内后4min内小鼠的不动时间(s)总和。开始时,小鼠头部上下左右活动,企图找到攀抓的地方,一段时间后因失望而活动次数减少,即出现间断性不动。数据采用spss16.0进行t检验，与空白组比，远志皂苷b(3mg/kg，9mg/kg)可以显著减少小鼠悬尾中的绝望不动时间(p<0.05或0.01)，且远志皂苷b(9mg/kg)的效果优于传统抗抑郁药丙咪嗪(p<0.05)(见附图1)。

实施例二远志皂苷b在小鼠强迫游泳实验中的作用

动物分组、药物及给药方法同上。

强迫游泳测试：测试前24h将小鼠放入玻璃容器(高度：25cm；深度：10cm；直径：10cm；温度：24±1℃)中游泳训练15min。测试时间为6min，记录6min内后4min内不动时间的总和。小鼠放入水中后即游泳,寻找栖息的地方,一段时间后便因失望而漂浮不动,当小老鼠停止挣扎,浮在水中保持不动,或仅在水中停止挣扎、保持漂浮姿势或者仅作头部离水的微小动作时视为不动时间(s)。数据采用spss16.0进行t检验，与空白组比，远志皂苷b(3mg/kg，9mg/kg)可以显著减少小鼠强迫游泳实验中的绝望不动时间(p<0.05或0.01)(见附图2)。

实施例三远志皂苷b对脑内单胺氧化酶(mao)的影响

动物分组、药物及给药方法同上。

单胺氧化酶测定：小鼠处死后，分离大脑，将组织称重后加入预冷的磷酸盐缓冲液(ph＝7.8,0.05mol/l)2ml制成组织匀浆液。取a管和b管，分别加入组织匀浆液0.2ml，体积比为20％的曲通0.4ml，磷酸盐缓冲液2.5ml。a管中加入1μmol/l的司立吉林(mao-b抑制剂)，b管加入1μmol/l氯吉林(mao-a抑制剂)。两管混匀孵育(37℃，15min)，抑制相应的mao活性，再加入2.19μmol/l的底物30μl，37℃孵育30min，加入5mol/l的高氯酸0.2ml终止反应，冷却后离心(1500×g，10min)，取上清液0.5ml，加入2.5ml终浓度为1mol/l的氢氧化钠。用荧光分光光度计法测定4-氢奎琳的荧光强度(激发波长：315nm，发射波长380nm)，通过标准曲线确定4-氢喹啉的浓度，采用bradford法测定蛋白含量。数据采用spss16.0进行t检验，与空白组比，远志皂苷b(3mg/kg，9mg/kg)显著抑制单胺氧化酶a的活性(均p<0.05)(见表1)。

表1.远志皂苷b对脑内单胺氧化酶(mao)的影响(x±s,n＝8)

注：与空白组比较，*，p<0.05；**，p<0.01。

实施例四远志皂苷b对不同脑区单胺递质的影响

动物分组、药物及给药方法同上。

前额叶皮层、海马脑区单胺递质(5-ht和na)测定：在给予远志皂苷b或空白溶剂后，小鼠用10％的水合氯醛麻醉后断头取脑，迅速剥离全脑，分理出海马和前额叶皮层，称量后储存于-80℃中。用高效液相电化学检测法检测五-羟色胺(5-ht)、去甲肾上腺素(na)和多巴胺(da)的浓度。每个组织在200μl冰冷的溶液a(0.4mol/l的高氯酸)中超声匀浆。匀浆液避光在冰上放置1h，离心20min(12,000×g,4℃)，丢弃沉淀。取160μl的上清液加入80μl的b液(0.2mol/l柠檬酸钾、0.2mol/ledta、0.3mol/lk2hpo4)，混合液在冰上静置1h，再次离心20min(12,000×g,4℃)。取20μl的混合上清液直接加入到装有c18反相柱(长150mm×内经4.6mm，粒度5μm)和电化学检测器(esacoularray，chelmstord，ma,usa.)的高效液相色谱中，流动相成分为：枸橼酸-柠檬酸钠缓冲液125mmol/l(ph＝4.3)，edta0.1mmol/l，辛烷基磺酸钠1.2mmol/l,16％甲醇。流速:1.0ml/min5个峰全出时间为32min。检测器工作电压分别为：50，100，200，300，400和500mv。脑组织中的单胺及其代谢产物浓度用ng/g湿组织表示。与空白组比，远志皂苷b(1mg/kg，3mg/kg，9mg/kg)可以显著增加小鼠前额叶皮层(表2)和海马(表3)脑区5-ht和na的含量(p<0.05或0.01或0.001)。

表2.远志皂苷b对前额叶皮层单胺递质的影响(x±s,n＝8)

注：与空白组比较，*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001。

表3.远志皂苷b对前海马单胺递质的影响(x±s,n＝8)

注：与空白组比较，*，p<0.05；**，p<0.01。

以上仅是本发明的特征实施范例，对本发明保护范围不构成任何限制。凡采用同等交换或者等效替换而形成的技术方案，均落在本发明权利保护范围之内。