一种星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺的制作方法

文档序号:19728438发布日期:2020-01-18 03:40阅读:329来源:国知局

本发明属于炮制工艺优化技术领域,具体涉及一种星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺。



背景技术:

丹参为唇形科植物丹参的干燥根及根茎,主产于河南、四川等地,味苦,性微寒,入心、归肝经,具有活血散瘀、安神宁心之效。自《神农本草经》记载以来,丹参的炮制方法有去芦头、去苗、洗净、切、酒渍、酒炒、酒洗、酒蒸、炙、熬令紫色、炒令黑黄、焙、米炒、醋拌炒、盐水炒、猪心血拌炒等多种方法。猪心血拌丹参为樟帮特色炮制品种,具有养血宁心的功效。

目前的猪心血拌丹参炮制工艺,对于猪心血拌丹参的炮制并无统一、规范的工艺标准,导致产品质量层次不齐,严重影响其临床安全合理的应用,所以需要寻找出优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺投入使用,以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺,其特征在于:包括以下步骤,

s1、丹参酮iia的测定;

其中,包括以下步骤:

s10、对照品溶液的配置:精密称取丹参酮iia对照品适量,加甲醇制成质量浓度为190mg/l的对照品溶液;

s11、供试品溶液的制备:精密称取生丹参以及丹参炮制品粉末1g,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,超声波处理30min,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液通过0.45μm微孔滤膜滤过制得;

s12、标准曲线制备:分别精密吸取标准品溶液1、2、4、5、6、8、10μl注入液相色谱仪,在设定的色谱条件下条件测定,分别以质量溶度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y),得丹参酮iia的回归方程。

s2、丹酚酸b含量的测定:重复s10-s12步骤,别以质量溶度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y)绘制标准曲线,得到得丹酚酸b的回归方程;

s3、猪心血拌丹参的制备:取从鲜猪心中取出的猪心血适量,加入适量黄酒与生丹参饮片拌匀,闷润至猪心血以及黄酒吸尽后,放入烘箱内烘干即可;

s4、星点设计与效应面分析:

其中,包括以下步骤:

s41、精密称取20份s1中制备的猪心血拌丹参样品每份50g;

s42、选取黄酒用量、猪心血用量、烘干温度为自变量,每个自变量设计5个水平,以丹参酮iia,丹酚酸b含量的总评“归一值”为因变量,进行星选实验,通过designexpert8.0软件进行数据处理,得拟合方程;

s5、综合分析以及用designexpert软件计算,得到猪心血拌丹参的最佳炮制工艺为32%黄酒,24%猪血,烘干温度61℃。

优选的,s1步骤中的设定色谱条件为:色谱柱diamonsilc18(4.6mm×250mm,5μm);以乙睛为流动相a,以0.1%甲酸溶液为流动相b,柱温为30℃,检测波长为270nm,流量体积为1ml/min。

优选的,色谱条件色谱柱diamonsilc18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(22:78)为流动相;柱温为20℃;流速为每分钟1ml;检测波长为286nm。

优选的,在步骤s1和s2中还包括以下步骤;

精密度实验:取同一样品溶液,在相同的色谱条件下,在0、6、12、18、是24h分别进样10μl,记录峰面积,测得丹参酮iia或丹酚酸b的rsd值,确定仪器准确度达标。

稳定性试验:取同一样品溶液,在相同的色谱条件下,在0、6、12、18、24h分别进样10μl,记录峰面积,测得丹参酮iia或丹酚酸b的rsd值。确保供试品溶液在24h内稳定性良好。

本发明的技术效果和优点:该星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺,通过细化得到猪心血拌丹参最佳炮制工艺,为规范地方饮片特殊炮制工艺及质量标准提供参考,产品质量更加稳定。

具体实施方式

本案所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种星点设计-效应面法优化猪心血拌丹参最佳炮制工艺,其特征在于:包括以下步骤,

s1、丹参酮iia的测定;

其中,包括以下步骤:

s10、对照品溶液的配置:精密称取丹参酮iia对照品适量,加甲醇制成质量浓度为190mg/l的对照品溶液;

s11、供试品溶液的制备:精密称取生丹参以及丹参炮制品粉末1g,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,超声波处理30min,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液通过0.45μm微孔滤膜滤过制得;

s12、标准曲线制备:分别精密吸取标准品溶液1、2、4、5、6、8、10μl注入液相色谱仪,在设定的色谱条件下条件测定,分别以质量溶度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y),得丹参酮iia的回归方程,具体方程如下,y=1128.4x-1.4564,r=0.9998,结果表明丹参酮iia进样量在9.5~95μg线性关系良好。

s2、丹酚酸b含量的测定:重复s10-s12步骤,别以质量溶度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y)绘制标准曲线,得到得丹酚酸b的回归方程,具体方程如下为y=346.72x-0.8957,r=0.9999;

s3、猪心血拌丹参的制备;取从鲜猪心中取出的猪心血适量,加入适量黄酒与生丹参饮片拌匀,闷润至猪心血以及黄酒吸尽后,放入烘箱内烘干即可。

s4、星点设计与效应面分析:

其中,包括以下步骤:

s41、精密称取20份s1中制备的猪心血拌丹参样品每份50g;

s42、选取黄酒用量、猪心血用量、烘干温度为自变量,每个自变量设计5个水平,以丹参酮iia,丹酚酸b含量的总评“归一值”为因变量,进行星选实验,通过designexpert8.0软件进行数据处理,得拟合方程;

s5、综合分析以及用designexpert软件计算,得到猪心血拌丹参的最佳炮制工艺为32%黄酒,24%猪血,烘干温度61℃。

s1步骤中的设定色谱条件为:色谱柱diamonsilc18(4.6mm×250mm,5μm);以乙睛为流动相a,以0.1%甲酸溶液为流动相b,柱温为30℃;检测波长为270nm,流量体积为1ml/min。

色谱条件色谱柱diamonsilc18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(22:78)为流动相;柱温为20℃;流速为每分钟1ml;检测波长为286nm。

在步骤s1和s2中还包括以下步骤;

精密度实验:取同一样品溶液,在相同的色谱条件下,在0、6、12、18、是24h分别进样10μl,记录峰面积,测得丹参酮iia或丹酚酸b的rsd值,确定仪器准确度达标。

稳定性试验:取同一样品溶液,在相同的色谱条件下,在0、6、12、18、24h分别进样10μl,记录峰面积,测得丹参酮iia或丹酚酸b的rsd值。确保供试品溶液在24h内稳定性良好。

最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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