一种PARP-1抑制剂及其药物组合物在制备治疗眼部疾病的药物中的应用的制作方法

发明领域

本发明属于parp-1抑制剂领域，具体涉及一种parp-1抑制剂及其药物组合物在制备治疗眼部疾病中的药物中的应用。

背景技术：

青光眼是全球第一位不可逆致盲性眼病以视盘凹陷性萎缩、视网膜神经节细胞凋亡、神经纤维层变薄和视野缺损为特征，病理性眼压升高是其主要危险因素。原发性开角型青光眼(primaryopenangleglaucoma,poag)发病率最高，但其确切发病机制尚未明确。poag患者房水流出通道结构正常，其发病机制尚未明确，可能与遗传等有关。其特点是眼压升高，房角始终开放，即房水外流受阻于小梁网-schlemm管系统。如果不加治疗，持续的眼内压(intraocularpressure，iop)过高，最终可损害视神经，甚至致盲。青光眼的治疗方法主要分为降眼压药、视神经保护药、激光和手术治疗。根据欧洲青光眼学会推荐的渐进式治疗原则，降眼压应首选药物治疗，其次才考虑激光或手术治疗。

药物降眼压策略主要包括减少房水生成与增加房水流出两个方面。房水(aqueoushumor)循环由睫状体(ciliarybody)产生，经过后房(posteriorchamber)、瞳孔(pupil)到达前房(anteriorchamber)，经过与schlemm管邻接的小梁网流出。90％左右的房水经过这个通路流出，75％的流出阻力位于小梁网与schlemm管壁。通过对高眼压cav1ko小鼠进行不同parp-1(polyadp-ribosepolymerase，聚adp核糖聚合酶)抑制剂眼表给药验证，parp-1抑制剂能够快速降眼压，且灌注实验进一步证明parp-1抑制剂能促进房水流出。

迄今为止，尚无直接针对病因治疗的抗青光物药物，往往需要联合多种药物、多次反复用药才能将患者眼压控制在目标眼压范围内，因此降压效果有限，且有很多不良反应。因此，寻找和探究针对病因、疗效好、副作用低的抗青光眼药物具有重要意义。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是：提供疗效好、副作用低的抗青光眼药物，

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案是：使用parp-1抑制剂降低生物体内的眼压。

本发明使用三种parp-1抑制剂dpq【3,4-dihydro-5-[4-(1-piperidinyl)butoxyl]-1(2h)-isoquinolinone，3,4-二氢-5-[4-(1-哌啶基)丁氧基]-1(2h)-异喹啉酮】，bmn673【5-氟-8-(4-氟苯基)-2,7,8,9-四氢-9-(1-甲基-1h-1,2,4-噻唑-5-基)-3h-吡啶并[4,3,2-de]二氮杂萘-3-酮，(他唑来膦)】，pj34hcl【n-(5,6-二氢-6-氧代-2-菲啶基)-2-(二甲基氨基)乙酰胺】，通过增加房水流出率，达到短时间内降压的目的，成为可能治疗青光眼的新型药物。

cav1ko是一种高眼压青光眼模型小鼠，与野生型c57/b6小鼠(wt小鼠)比，房水外流组织中parp-1表达增高。parp-1抑制剂可以降低cav1ko小鼠的眼压和增加经典通路房水外流。林西多明(3-吗啉基-斯德亚胺，sin-1)持续点药诱发的高眼压小鼠中parp-1表达增高，应用parp-1抑制剂可以降低眼压并且降低parp-1的表达，sin-1可以增加猪aap细胞的跨膜电阻(transmembraneresistance，teer)，应用parp-1抑制剂例如pj-34可以降低teer。

一种parp-1抑制剂在制备治疗眼部疾病的药物中的应用，parp-1抑制剂选自dpq，bmn673，pj34hcl中的任意一种，即以下任一结构：

实现上述应用，包含以下步骤：

s1，将所述parp-1抑制剂溶于溶剂中；

s2，cav1ko小鼠眼球眼表给药s1中的parp-1抑制剂。

parp-1抑制剂可以为2ul500um溶于二甲基亚砜(dmso)的dpq，或2ul5mm溶于二甲基亚砜(dmso)的bmn673，或2ul100um溶于磷酸盐缓冲溶液(pbs)的pj34hcl。

疾病选自因眼压高引起的开角型青光眼、闭角型青光眼、急性闭角型青光眼、正常眼压青光眼、头痛、视神经萎缩以及视神经退行性病变。

一种药物组合物，包含parp-1抑制剂，还包含碳酸酐酶抑制剂，前列腺素衍生物，拟胆碱类药物，no供体类药物，rho激酶抑制剂，β受体阻滞剂、α受体激动剂在内的一种或多种一种。

有益效果

1.本发明能针对引起眼压升高的源头即房水流出受阻进行降压。

2.本发明的parp-1抑制剂降压速度快。

3.本发明中的parp-1抑制剂药物副作用小，可以提高患者依从性。

附图说明

图1(a)cav1ko小鼠眼球在眼表给药500umdpq后的眼压变化图

图1(b)wt小鼠眼球在眼表给药500umdpq后的眼压变化图

图2(a)cav1ko小鼠眼球在眼表给药5mmbmn673后的眼压变化图

图2(b)wt小鼠眼球在眼表给药5mmbmn673后的眼压变化图

图3(a)cav1ko小鼠眼球在眼表给药100umpj34后的眼压变化图

图3(b)wt小鼠眼球在眼表给药100umpj34后的眼压变化图

图4cav1ko小鼠离体眼球灌注200umdpq后在不同压力情况下的流出速率图

图5cav1ko小鼠离体眼球灌注200umdpq后的流出速率图

图6cav1ko小鼠与wt小鼠的眼压对比图

具体实施方式

以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。

实验方法

用不同的parp-1抑制剂即dpq，bmn673，pj34hcl分别对cav1ko小鼠和野生型c57小鼠进行眼表给药，对侧眼则给予阴性对照(negativecontrol，nc)。给药后3h后使用眼压计测量眼压。在确认parp-1抑制剂能降眼压后，完整取出小鼠眼球，通过离体眼球灌注模型测量房水流出率。

由图1(a)、图2(a)和图3(a)显示，cav1ko小鼠眼球在分别眼表给药500umdpq、5mmbmn和100umpj342ul×3次，对侧眼分别给予相应等浓度等体积的溶剂dmso、dmso和pbs点药；3小时后，测量结果显示小鼠眼表给药后眼压较对侧眼均有显著下降，p<0.05。如图1(b)、图2(b)和图3(b)显示，由于在cav1ko小鼠小梁网上parp-1比wt小鼠明显增多，所以parp-1抑制剂在wt小鼠上并无显著的降眼压效果。

在给cav1ko小鼠离体眼球灌注200umdpq后，使用33g针穿刺前房，并保持恒压(8mmhg)灌注30分钟，再测量不同压力状态下(6、8、11、15mmhg)，分别在每个压力状态下测量两次测房水流出率，公式如下：

采用空白对照组重复上述实验过程。如图4所示，房水流出率与压力成线性增加，具体线性方程式为：y＝0.01737*x-0.04370，r²＝0.963。

如图5所示，给cav1ko小鼠离体眼球灌注200umdpq，30min后开始测量，实验组房水流出率为0.01737，空白对照组房水流出率0.00436，单位μl/(min·mmhg)，p<0.05)，可见房水流出率在灌注抑制剂dpq后增加。

如图6所示，cav1ko是一种高眼压青光眼模型小鼠，与wt小鼠比，房水外流组织中parp-1表达增高，cav1ko小鼠眼中硝基酪氨酸(nitrotyrosine，nt)升高，可被parp-1抑制剂降低。