本发明涉及中药领域，尤其涉及一种复方中成药颗粒剂和胃颗粒的制备方法。
背景技术：
中药复方颗粒和胃颗粒是6类新药中药复方制剂，由法半夏、生姜、人参、黄芩、黄连、炙甘草和大枣所组成，具有益气和胃，寒热并用，消痞散结，升降协调之功效，广泛应用于溃疡病、慢性胃炎、肠炎等疾病。
中药复方制剂制备的一大问题是其成分复杂，不同药材在一同提取时可能造成相互反应、有效成分降低的问题。例如黄芩常温水浸泡过久，黄芩苷可能由于内源酶降解而含量下降。同时，为保证提取效率而采用过长的提取时间、过量的提取溶剂，又存在耗时耗力、资源浪费等弊端。本发明针对组成药材的有效部位及有效活性成分采用不同提取方法，同时通过正交试验筛选因素水平，使得生产工艺在保证提取效率的同时节省大量资源，适合大规模的工业生产。最后，本发明将最优工艺与质量控制步骤相结合，保证了和胃颗粒的疗效，减少了药品的批间差异。
技术实现要素：
本发明提供一种和胃颗粒的制备方法，按照该方法制得的和胃颗粒有效成分含量较好，质量稳定。
本复方和胃颗粒由以下重量份数的原料制备而成：法半夏9～27份，生姜6～20份，黄连1～5份，黄芩3～10份，人参5～15份，甘草3～15份，大枣5～18份。其制备方法包括以下步骤：
a.生姜榨汁，过滤，并将生姜汁用β-环糊精包合(β-环糊精：生姜汁比例为2:100～15：100，g：ml)，在40～60℃下搅拌包合0.5～2h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物和生姜渣(阴干)备用；
b.黄连单独加入8～24倍量的水(g:ml),加热回流提取1～3次，每次0.5～2h，得到黄连提取液；
c.法半夏、人参、炙甘草、大枣与生姜渣混合，加入8～16倍量的水(g:ml)加热回流提取，加热至快沸腾时，加入黄芩，共提取1～3次，每次0.5～2h，得到其余药材提取液；
d.将黄连提取液和其余药材提取液混合浓缩至密度1～1.3g/ml(40℃)，喷雾干燥得到浸膏粉，进风口温度130-150℃，泵流速为300～500ml/h；
e.将生姜包合物和浸膏粉混合(以生姜6～12份计)，并加适量糊精混合均匀，浸膏粉-生姜包合物混合物：糊精重量比为3：1～8：1，干法制粒即得。
具体实施方式
本发明的制备方法能够在下面通过实施例进一步说明，且以下实例仅用于说明本发明，而不是对本发明的限制。实验所使用药材均符合国家药典标准。
其中，下述实施例中，和胃颗粒及姜汁包合物中6-姜酚的含量测定方法是：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水5ml，振摇后至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次5ml，弃去；取水层，用三氯甲烷提取4次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干后上样于硅胶柱中(100～200目)，正己烷-乙醚(4:1)洗脱10ml，弃去；取5ml正己烷-乙醚(3:2)洗脱，收集洗脱液，蒸干定容至2.5ml容量瓶中；摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以高效液相色谱法进行检测，流动相条件为：乙腈-水(37:63)，等度洗脱，检测波长为280nm，室温，流速为0.9ml/min。
下述实施例中，和胃颗粒中甘草酸铵的含量测定方法是：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇(49.5％～50.5％，v:v))16ml，密塞，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，定容至10ml容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以高效液相色谱法进行检测，流动相条件为：流动相条件为：乙腈-水-冰乙酸(35:65:3)，检测波长254nm，室温，流速为1.0ml/min。
下述实施例中，和胃颗粒中盐酸小檗碱的含量测定方法是：取本品约1.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸(100:1)的混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-盐酸(100:1)补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以高效液相色谱法进行检测，流动相条件为：乙腈-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节ph值至3.0)作为流动相，梯度洗脱(乙腈：磷酸二氢钾溶液＝0～25min，25:75，25～40min，40:60，40～45min，25:75)，检测波长为345nm，室温，流速为1.0ml/min。
下述实施例中，和胃颗粒中黄芩苷的测定方法是：取本品约0.3g，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以高效液相色谱法进行检测，流动相条件为：甲醇：水：磷酸(43:57:0.2)，流速为1.0ml/min，室温，检测波长为315nm。
下列实施例中，提取液总多糖的含量测定方法是：取提取液20ml，用无水乙醇调至乙醇浓度为80％，静置12h后，离心(3000r，10min)，倾去上清液，沉淀用水转移至50ml量瓶中，加水至刻度，取0.5ml至10ml量瓶中，加水至刻度，作为供试品溶液，并参照2015版《药典》一部灵芝多糖的测定方法进行测定。
下列实施例中，提取液人参总皂苷(rb1,rg1,re)的含量测定方法是：取适量提取液，减压蒸干后，精密加入50ml70％乙醇，称重，超声提取30min；放至室温，称重，用70％乙醇补足重量，滤过，取续滤液25ml，滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，用乙醚振摇萃取三次，每次20ml，弃去醚液；水液用水饱和正丁醇萃取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤4次，每次20ml，弃去氨试液；用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液；正丁醇层减压回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，定容至5ml；临用前摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以高效液相色谱法进行检测，流动相条件为：以乙腈-水梯度洗脱--乙腈比例：0～35min，19％；35～55min，19％～29％；55～70min，29％；70～100min，29％～40％。流速为1ml/min，室温，检测波长为203nm。
实施例1：和胃颗粒中有效成分含量测定——共煎煮制备工艺及分步煎煮制备工艺(本发明)对比
(一)实验方法
共制备两份和胃颗粒，分别以共煎煮及分步煎煮(本发明)的方式制备，每份含有72g法半夏，80g生姜，4g黄连，40g黄芩，20g人参，20g甘草，及60g大枣。
1.1药材提取：共煎煮工艺
将所有药材混合，并加入10倍量的水(g:ml)，共进行加热回流提取1次，每次1h。合并提取液，在50℃下减压浓缩至1.3g/ml并干燥为浸膏粉。将浸膏粉与糊精以8：1比例混合，干法制粒即得。
1.2药材提取：分步煎煮(本发明)
(a)生姜榨汁，过滤，并将生姜汁以β-环糊精包合(10:100，g：ml)，在50℃下搅拌包合1h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物和生姜渣(阴干)备用。
(b)黄连单独加入10倍量的水(g:ml),加热回流提取1次，每次1h，得到黄连提取液。
(c)法半夏、人参、炙甘草、大枣与生姜渣混合，加入10倍量的水(g:ml)加热回流提取，加热至快沸腾时，加入黄芩，共提取1次，每次1h，得到其余药材提取液。
(d)合并(b)(c)提取液，在50℃下减压浓缩至1.3g/ml并干燥为浸膏粉。
(e)将生姜包合物和浸膏粉和适量糊精混合，使浸膏粉与糊精重量比为8：1，干法制粒即得。
1.3有效成分的含量测定
取1.1、1.2中制剂适量，并分别测定其中6-姜酚、甘草酸铵、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。
(二)实验结果
通过检测共煎煮工艺及分步煎煮工艺(本发明)所制备和胃颗粒制剂中6-姜酚、甘草酸铵、盐酸小檗碱的含量发现，两种工艺所得和胃颗粒的6-姜酚、甘草酸铵含量基本相同，但共煎煮所得和胃颗粒的盐酸小檗碱、黄芩苷含量明显较低(附表1-1)。这可能是由于黄连、黄芩在共煎煮时，两种成分混合并形成沉淀导致的，而经过优化后分步提取的新工艺能够显著提高这两种成分的含量。附表1-1和胃颗粒的有效成分含量测定结果：共煎煮工艺及分步煎煮工艺(新)
(三)结论
与传统的共煎煮工艺相比，分步煎煮工艺能够显著提高和胃颗粒中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。
实施例2：步骤a——生姜汁包合的工艺筛选
(一)实验方法
1.1生姜汁与β-环糊精的包合比例筛选
取生姜10kg，采用小型实验用榨汁机榨取生姜汁，将所得到的生姜汁抽滤，滤去生姜残屑及生姜淀粉得到生姜汁，搅匀后备用。取5份生姜汁，每份500ml，并分别以1：100、2：100、7.5：100、15：100、20：100的比例(β-环糊精g:生姜汁ml)与β-环糊精进行包合，在50℃下搅拌包合1h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物用于计算包合物收率。其中，包合物的收率的测定方法参考《药典》四部通则2204挥发油测定法甲法。
包合物收率＝[干包合物重量/(环糊精重量+挥发油重量)]*100％
1.2生姜汁包和的最佳温度筛选
对上述包合物进行测定，并得到最佳包和比例范围(见附表1-1)。取生姜汁5份，每份500ml并以x姜汁：100的比例与β-环糊精混合(x姜汁：100为姜汁最佳包合比例范围的中间值)，将5份混合物分别在30℃、40℃、50℃、60℃及70℃下搅拌包合1h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物用于计算包合物收率。
1.3生姜汁包和的最佳时间筛选
对上述包合物进行测定，并得到最佳包和温度范围(见附表2-2)。取生姜汁5份，每份500ml并以x姜汁：100的比例与β-环糊精混合(x姜汁：100为姜汁最佳包合比例范围的中间值)，将5份混合物分别在t姜汁℃下搅拌包合0.25h、0.5h、1.25h、2h、2.5h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物用于计算包合物收率(t姜汁℃为姜汁包合最佳温度范围的中间值)。
(二)实验结果
由附表2-1可见，在相同包合温度、时间条件下，当包合比例为2：100～15：100时，包合物收率在55％以上，因此判断β-环糊精(g)与生姜汁比例为2：100～15：100时包合效果较好，并取最优比例范围的中间值8：100进行包合温度、时间的筛选。
附表2-1.生姜汁与β-环糊精的最佳包和比例筛选结果
由附表2-2可见，在相同包合比例、时间条件下，当包合温度为40℃～60℃时，包合物收率在60％以上，因此判断包合温度为40℃～60℃时包合效果较好，并取最优比例范围的中间值50℃进行包合时间的筛选。
附表2-2.生姜汁与β-环糊精的最佳包和温度筛选结果
由附表2-3可见，在相同包合比例、温度条件下，当包合时间为0.5h～2.0h时，包合物收率在65％以上，因此判断包合时间为0.5h～2.0h时包合效果较好。
附表2-3.生姜汁与β-环糊精的最佳包和时间筛选结果
(三)结论
通过工艺筛选，确定a步骤生姜汁包合的最佳工艺为：生姜汁用β-环糊精包合(β-环糊精：生姜汁比例为2:100～15：100，g：ml)，在40～60℃下搅拌包合0.5～2h后静置，过滤，干燥，得到生姜包合物和生姜渣(阴干)备用。
实施例3：步骤b——黄连以水加热回流提取的工艺筛选
(一)实验方法
1.1黄连提取的最佳溶剂(水)倍量筛选
称取黄连5份，每份100g，分别加入4倍、8倍、16倍、24倍、32倍体积的水(g:ml),加热回流提取1h，共提取1次，并以提取液测定黄连中盐酸小檗碱的含量。
1.2黄连提取的最佳提取时间筛选
对上述提取液进行测定，并得到最佳水倍量范围(见附表3-1)。称取黄连5份，每份100g，并加入x黄连倍量的水(x黄连为黄连提取最佳溶剂倍量范围的中间值)，分别提取0.25h、0.5h、1.25h、2h、2.5h后，共提取1次，并以提取液测定黄连中盐酸小檗碱的含量。
1.3黄连提取的最佳提取次数筛选
对上述提取进行测定，并得到最佳提取时间范围(见附表3-2)。称取黄连5份，每份100g，并加入x黄连倍量的水(x黄连为黄连提取最佳溶剂倍量范围的中间值)，加热回流提取t黄连h(t黄连h为黄连最佳提取时间范围的中间值)，并分别提取1次、2次、3次、4次及5次，分别合并提取液并测定黄连中盐酸小檗碱的含量。
(二)实验结果
由附表3-1可见，提取相同时间及次数时，当溶剂倍量为黄连重量的8～24倍(g:ml)时，小檗碱含量在25mg/g以上，因此判断加入8～24倍量的水较利于黄连中盐酸小檗碱的提取，并取最优范围的中间值16倍量进行提取时间、次数的筛选。
附表3-1.黄连提取的最佳溶剂(水)倍量筛选结果
由附表3-2可见，当加水倍量及提取次数相同时，当提取时间为0.5h～2.0h时，小檗碱含量在27mg/g以上，因此判断取时间为0.5h～2.0h时提取效果较好，并取最优提取时间范围的中间值1.25h进行提取次数的筛选。
附表3-2.黄连提取的最佳时间筛选结果
由附表3-3可见，在相同加水倍量、提取时间条件下，提取1～3次小檗碱含量无明显差异，而当提取次数超过3次时，小檗碱含量无升高趋势，因此判断提取次数为1～3次较为适宜。
附表3-3.黄连提取的最佳次数筛选结果
(三)结论
通过工艺筛选，确定b步骤黄连水提取的最佳工艺为：黄连单独加入8～24倍量的水(g:ml),加热回流提取1～3次，每次0.5～2h，得到黄连提取液。
实施例4：步骤c——其余药材的提取工艺筛选
(一)实验方法
1.1其余药材的最佳提取溶剂(水)倍量筛选
称取5份药材，每份包括每份含有72g法半夏，40g黄芩，20g人参，20g甘草，60g大枣及生姜渣。生姜渣按照80g生姜当量称量，出汁率以70％计。将药材混合，并分别加入4、8、16、24及32倍量水(g:ml)，加热回流提取0.5h(加热至快沸腾时加入黄芩)，共提取1次，并测定提取液中人参总皂苷(rb1,rg1,re)及总多糖的含量。
1.2其余药材的最佳提取时间筛选
对上述提取液进行测定，并得到最佳提取溶剂倍量范围(见附表4-1)。称取5份药材，每份包括72g法半夏，40g黄芩，20g人参，20g甘草，60g大枣及生姜渣。生姜渣按照80g生姜当量称量，出汁率以70％计。将5份药材分别与x其他药材倍量的水混合(x其他药材为其他药材最佳提取溶剂倍量范围的中间值，加热至快沸腾时加入黄芩)，共提取1次，每次分别提取0.25h、0.5h、1.25h、2h、2.5h，得到其余药材提取液，并测定提取液中人参总皂苷(rb1,rg1,re)及总多糖的含量。
1.3其余药材的最佳提取次数筛选
对上述提取进行测定，并得到最佳提取时间范围(见附表4-2)。称取5份药材，每份包括72g法半夏，40g黄芩，20g人参，20g甘草，60g大枣及生姜渣。生姜渣按照80g生姜当量称量，出汁率以70％计。将每份药材与入x其他药材倍量的水(x其他药材为其他药材最佳提取溶剂倍量范围的中间值，加热至快沸腾时加入黄芩)，加热回流提取t其他药材h(t其他药材为其他药材最佳提取时间范围的中间值)，并分别提取1次、2次、3次、4次及5次，分别合并提取液并测定提取液中人参总皂苷(rb1,rg1,re)及总多糖的含量。
(二)实验结果
由附表4-1可见，提取相同时间及次数时，当溶剂倍量为其他药材总重量的8倍以上(g:ml)时，人参总皂苷含量在110mg以上，总多糖含量在15mg以上，结合实验耗时及成本考虑，判断加入8～16倍量的水较利于其他药材的提取，并取最优范围的中间值12倍量进行提取时间、次数的筛选。
附表4-1.其他药材提取的最佳溶剂(水)倍量筛选结果
由附表4-2可见，当加水倍量及提取次数相同时，当提取时间为0.5h以上时，人参总皂苷含量在115mg以上，总多糖含量在20g以上，结合实验耗时及成本考虑，判断提取时间为0.5h～2.0h时提取效果较好，并取最优提取时间范围的中间值1.25h进行提取次数的筛选。
附表4-2.其他药材提取的最佳时间筛选结果
由附表4-3可见，在相同加水倍量、提取时间条件下，提取1～3次时人参总皂苷及总多糖含量无明显差异，而当提取次数超过3次时，人参总皂苷、总多糖含量无升高趋势，因此判断提取次数为1～3次较为适宜。
附表4-3.其他药材提取的最佳次数筛选结果
(三)结论
通过工艺筛选，确定c步骤其他药材水提取的最佳工艺为：法半夏、人参、炙甘草、大枣与生姜渣混合，加入8～16倍量的水(g:ml)加热回流提取，加热至快沸腾时，加入黄芩，共提取1～3次，每次0.5～2h，得到其余药材提取液。
实施例5：步骤e——制剂工艺筛选
(一)实验方法：辅料(糊精)的最佳用量考察
将实例3～实例4中所得黄连提取液、其他药材提取液按照份数比例混合并并浓缩至1.1g/ml，喷雾干燥得到浸膏粉，并按照份数与实例1中的生姜包合物混合均匀(按照72g法半夏，80g生姜，4g黄连，40g黄芩，20g人参，20g甘草，及60g大枣的份数比例混合)。取5份混合物，每份500g，并将其分别与2：1、3：1、6：1、8：1、10：1的比例(混合物：糊精，g:g)混合均匀，并测定成品的成型率和吸湿率。
其中，成型率的测定的方法是：成型率测定：取制得的颗粒，称重，依次通过一号筛和五号筛，并按照下述公式(成型率)进行计算即得。
其中，吸湿性测定的方法是：取制得的颗粒，干燥至恒重备用。取干燥器，加入饱和氯化钠溶液，使相对湿度(rh)为75％。在已恒重的称量瓶中放入2g样品，精确称定，置干燥器内，恒温25℃，24h后称重，按照下述公式(吸湿率)计算即得。
成型率＝通过一号筛但不能通过五号筛的颗粒重量/颗粒重量×100％
吸湿率＝(吸湿后重量—吸湿前重量)/吸湿前重量×100％
(二)实验结果
由附表5-1可见，浸膏粉与糊精重量比为3：1～8：1时，成型率在96％以上，吸湿率在21％以下，因此判断浸膏粉与糊精重量比为3：1～8：1时得到和胃颗粒质量较好。
附表5-1.其他药材提取的最佳次数筛选结果
(三)结论
通过工艺筛选，确定e步骤和胃颗粒干法制粒工艺为：将生姜包合物、适量糊精和浸膏粉混合均匀，浸膏粉：糊精重量比为3：1～8：1，干法制粒即得。