用于治疗闭塞性细支气管炎综合征（BOS）的环孢素制剂的制作方法

本发明涉及包含环孢素a(csa)的药物组合物，其用于在双肺移植患者中预防闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展。
背景技术：
：肺移植已成为多种慢性和终末期肺部疾病的有效治疗选择。随着时间的推移，已经开发了肺保存技术，从而获得令人满意的短期结果(hachemrr,trulockep.bronchiolitisobliteranssyndrome:pathogenesisandmanagement.seminthoraccardiovascsurg2004；16:350-355)。免疫抑制是移植后的一项关键干预措施，通常包括三联疗法，包括全身性环孢素a(csa)或他克莫司，硫唑嘌呤或吗替麦考酚酯和皮质类固醇(knoopc,等人，immunosuppressivetherapyafterhumanlungtransplantation.eurrespirj2004；23:159-171)。单个肺叶的移植以及两个肺叶的移植都是可能的。在以下情况下需行双肺移植：囊性纤维化，原发性肺动脉高压，α-1-抗胰蛋白酶缺乏症，肺气肿伴整体功能不全(emphysemawithglobalinsufficiency)，频繁的严重感染以及特发性肺纤维化合并反复感染。尽管使用环孢素或他克莫司，硫唑嘌呤或吗替麦考酚酯或皮质类固醇进行全身性免疫抑制治疗，但肺移植后的慢性排斥反应是一种严重的肺部并发症，占肺移植死亡的30％，因此对新的治疗选择进行评估非常必要。闭塞性细支气管炎综合征(bos)的发展是肺部慢性移植物失功(pulmonarychronicgraftdysfunction)的主要原因，是肺移植长期幸存者发病和死亡的主要原因，并且仍然是肺移植后长期存活的主要限制。存活五年的移植受者中有60％至70％发生这种情况。bos发展的中位时间约为18个月。尽管bos的发病机制是多因素的，并且尚未完全了解，但由免疫依赖性反应(急性排斥反应)引起的慢性排斥反应仍被认为是在肺移植后bos的主要原因(moffatt-bruces.,"invitedcommentary",annthoracsurg.2009sep；88(3):964-5.doi:10.1016/j.athoracsur.2009.06.014)，尽管使用了全身性钙调神经磷酸酶抑制剂进行免疫抑制(laconoat,等人.arandomizedtrialofinhaledcyclosporineinlung-transplantrecipients.nengljmed2006；354:141-150)。一旦发展为慢性排斥反应，气道损伤就会逐渐发展且不可逆，患者最终会因移植失败或肺炎而死亡。当前，尚无令人满意的用于双肺移植后有效治疗bos的治疗选择。事实证明，使用更高剂量的用于基本免疫抑制的常用药物进行增强免疫抑制是无效的，并且由于药物负担增加，随着时间的推移，它们与更高的不良事件发生率相关。免疫抑制抗体可用于预防急性肺移植排斥反应，但尝试治疗慢性排斥反应的治疗却产生了令人失望的结果。从病理机制的角度来看，这是全面的，因为急性肺移植排斥反应基本上是一种血管炎，始于对血管上皮的有害反应。相反，尽管仍未完全了解所有细节，但可以认同的是，慢性肺排斥的根源在于肺腔，即细支气管，因此是细支气管炎而不是血管炎。因此，全身性施用的药物必须穿过毛细血管-肺泡屏障。经常在晚期(high-stage)bos患者中选择光分离置换疗法作为最后的手段，其执行的目的是出于心理目的，而不是出于医学原因。因此，非常需要用于预防和治疗肺部慢性移植物排斥的新疗法，尤其是在双肺移植后。目前，单肺移植患者的中位生存期为4.6年，而双肺移植患者的中位生存期为6.6年。业已表明，与单肺移植相比，这种不同的存活率与双肺移植后bos发作的显著延迟有关(hadjiliadisd,等人.istransplantoperationimportantindeterminingposttransplantriskofbronchiolitisobliteranssyndromeinlungtransplantrecipients？chest2002；122:1168-1175)。成功预防bos或已经诊断出bos的情况下，bos进展的延迟被认为是改善肺移植结果的主要要求。有人提出，bos的最重要原因是通过主要的组织相容性抗原-或免疫-依赖性机制激活t淋巴细胞(soubaniao,ubertijp.bronchiolitisobliteransfollowinghaematopoieticstemcelltransplantation.eurrespirj2007；29:1007-1019；halloranpf,etal.the"injuryresponse":aconceptlinkingnonspecificinjury,acuterejection,andlong-termoutcomes.transplantproc1997；29:79-81)。从全身应用来看，众所周知，csa通过抑制钙调神经磷酸酶的磷酸酶活性来阻止t淋巴细胞增殖，并降低通常在t细胞活化中诱导的几种细胞因子基因(例如白介素[il]-2)的表达。虽然大多数实体器官移植物无法通过局部免疫疗法获得，但肺移植物是例外，因为它们与外部环境的独特联系使吸入成为一种治疗选择。有人提出将csa局部应用到肺部可能会提高疗效，并有可能减少毒性免疫抑制剂的全身暴露(iaconoa,等人.doserelatedreversalofacutelungrejectionbyaerosolizedciclosporin.amjrespircritcaremed1997；155:1690-1698)。环孢素a是由11个氨基酸组成的环状多肽。它是由真菌物种雪状白僵菌(bevererianivea)产生的代谢产物。环孢素是一种免疫抑制剂，属于钙调神经磷酸酶抑制剂类，在欧洲自1980年代初以来，在大多数移植后治疗方案中已被用于预防器官移植后的移植排斥。wo00/45834a2中描述了雾化的环孢素用于预防和治疗肺部疾病的用途。更具体地说，公开了通过雾化吸入将环孢素递送至移植的肺。环孢素可以以干粉或湿形式(例如在丙二醇中粉雾化的环孢素)施用。然而，该文件未提及以环孢素a脂质体的形式使用环孢素。此外，据报道，没有治疗的受试者发展闭塞性细支气管炎。根据corcoran等人的研究(preservationofpost-transplantlungfunctionwithaerosolcyclosporin.eurrespirj2004；23:378-383)，可以得出结论，大约5mg或更高的csa丙二醇(csa-pg)外周肺沉积将改善移植患者的肺功能，而较低剂量导致肺功能下降。从后者的研究中得出，为了达到治疗效果，应达到≥15mg/周或≥2mg/天csa沉积在肺外周的有效阈值。a.t.iacono等人在eur.resspir.j.2004；23:384-390中报告了对患有闭塞性细支气管炎的肺移植接受者的雾化环孢素治疗。在这项研究中，环孢素也以溶于丙二醇中的粉末形式使用。最值得注意的是，有报道称与单肺移植接受者相比，双肺移植接受者在闭塞性细支气管炎发作后死亡风险增加。一项对58例肺移植患者进行的ii期临床试验显示，吸入csa-pg治疗长达两年后，无bos生存率和总体生存率在统计学上有显著差异，因此csa-pg治疗优于安慰剂治疗(laconoat,等人.arandomizedtrialofinhaledcyclosporineinlung-transplantrecipients.nengljmed2006；354:141-150)。相反，一项多中心的iii期临床试验显示，当将csa用作预防肺移植患者慢性排斥反应的辅助靶向治疗时，没有比标准治疗更高的疗效。这项研究的结果与许多临床前和临床研究相矛盾，这些临床前和临床研究均允许预期治疗反应。从这一结果可以得出结论，向这种高度脆弱的患者人群施用环孢素气雾剂并非没有挑战，并且这些挑战中的一个或多个可能已经影响了研究结果。通过对这些挑战的分析得出的结论是，在吸入治疗或全身置换的情况下，使用更方便的给药系统以更频繁的间隔给药可能证明是成功的(nivenrw,等人.thechallengesofdevelopinganinhaledcyclosporineproductforlungtransplantpatients.respiratorydrugdelivery2012；51-60)。关于csa-pg制剂，已报道了由于长达30分钟的长时间吸入时间，导致患者不耐受和缺乏依从性(corcorante.inhaleddeliveryofaerosolizedcyclosporine.advdrugdelivrev2006；58:11191127)。已知丙二醇是高渗的，患者可能无法忍受，因此需要使用支气管扩张药和局部麻醉药进行预用药(pre-medication)。鉴于这些问题，开发了新的用于吸入的环孢素的脂质体制剂。该制剂在wo2007/065588中描述。此外，已经提出了用于吸入csa的新的吸入系统，其应该允许csa在肺中更有效的沉积。这种系统的例子是振动膜喷雾器。这样的吸入系统通过产生具有适当尺寸的颗粒用于高外周沉积而实现了更好的药物靶向。而且，这种装置的高药物输送速率支持了预期对患者的依从性有利的更短的吸入时间。在ib期临床试验中，在5例双肺移植患者和7例单肺移植患者中研究了10和20mg放射性标记的雾化脂质体csa(l-csa)的肺部沉积和药代动力学。用雾化器产生了气溶胶。向患者施用单剂量10或20mg脂质体csa，耐受性良好。结果表明，分别在肺部沉积了40±6％(对于10mg剂量)和33±7％(对于20mg剂量)。这导致外周肺剂量分别为2.2±0.5mg(对于10mg剂量)和3.5±0.9mg(对于20mg剂量)。假设每天一次或两次以10mg标称药物剂量的l-csa给药，分别可以达到14和28mg/周的外周沉积。10mg和20mg标称剂量的总吸入时间分别为约9±1分钟和20±5分钟。在单肺移植患者中，几乎全部沉积(88-90％)发生在肺移植部分。单肺移植患者和双肺移植患者之间无统计学显著性差异。尽管已经对吸入的csa进行了一些临床前和临床研究，但是关于吸入环孢素对双肺移植患者的实际疗效的结论是矛盾的。因此，目前可获得的研究尚无关于吸入环孢素在治疗肺慢性移植排斥反应(更具体地说是肺移植后闭塞性细支气管炎综合征(bos))的实际疗效方面的任何结论。闭塞性细支气管炎综合征(bos)在生理上已被定义为fev1从移植后的最高值持续下降20％或更大。现有的免疫抑制方案在很大程度上仍然无效。吸入会增加环孢素在肺部的沉积，导致更高的气道浓度，这可能导致bos的治疗效果更好。wo2016/146645a1公开了在预防或治疗单肺移植患者中的肺慢性移植排斥的方法中用作吸入用气雾剂的环孢素液体制剂。在具体实施方案中，肺慢性移植排斥反应的特征在于闭塞性细支气管炎综合征(bos)。但是，该文件在强调出乎意料地成功治疗单肺移植患者亚群的同时，并未为双肺移植患者的治疗得出任何结论，特别是对于已经患有闭塞性细支气管炎(bos)的那些双肺移植患者。鉴于该公开内容，不能预见成功治疗已经发展bos的双肺移植患者。a.iacono等人在《thejournalofheartandlungtransplantation,vol37,no4s,211中报道了用于闭塞性细支气管炎综合征的雾化环孢素a脂质体(l-csa)可以稳定肺功能并改善生存。但是，该文件未提及研究结果，因此未提及针对特定患者亚群(即单肺移植受者或双肺移植受者)的治疗效果。因此，当在接受了双肺移植的患者中发展和诊断出闭塞性细支气管炎综合征(bos)时，仍然需要预防或有效治疗闭塞性细支气管炎综合征(bos)。因此，本发明的目的是提供用于成功地预防或治疗特别是已经发展并被诊断出患有bos(特别是患有更严重形式的bos，例如bos1或bos2)的双肺移植患者的方法。鉴于本公开内容，本发明的其他目的将变得显而易见。技术实现要素：在第一方面，本发明涉及包含环孢素a脂质体(l-csa)的组合物，其用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其中所述组合物通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。在第二方面，本发明涉及用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法，该方法包括以下步骤：(a)确定接受双肺移植并处于发展bos(特别是i级或更高的bos)的风险或随后发展bos(特别是i级或更高的bos)的患者；和(b)通过吸入向所述患者施用治疗有效剂量的气雾化环孢素a脂质体(l-csa)。附图简要说明图1示出了流程图，该流程图总结了临床研究中单肺移植患者和双肺移植患者的入选(enrollment)细节，如下文进一步描述。图2示出了在48周研究期内被诊断患有bos的单肺移植患者和双肺移植患者的bos无进展生存率的kaplan-meier图。图3示出了被诊断患有bos的双肺移植患者的无事件生存率的kaplan-meier图。图4示出了被诊断患有bos的单肺移植患者的无事件生存率的kaplan-meier图。图5示出了随机分组后5年被诊断患有bos的单肺移植患者和双肺移植患者的总生存率的kaplan-meier图。图6示出了l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)的单肺移植患者和双肺移植患者在48周研究期内绝对fev1值变化过程的回归趋势分析；图7示出了l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)的双肺移植患者在48周研究期内绝对fev1值变化过程的回归趋势分析；和图8示出了l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)的单肺移植患者在48周研究期内绝对fev1值变化过程的回归趋势分析。具体实施方式除非说明书另有定义或除非特定上下文指示或另有要求，否则本文使用的以下术语或表达通常应按本节所述进行解释。如本文所使用的术语“由…组成”，“由…构成”和“由…组成”是所谓的封闭式语言，意味着仅存在所提及的组分。如本文所使用的术语“包含”，“包括”和“含有”是所谓的开放语言，意味着还可以存在或可以不存在一个或多个其他组分。术语“活性药物成分”(在整个文档中也称为“api”)是指可用于预防，诊断，稳定，治疗，或(一般而言)管理病状、病症或疾病的任何类型的药物活性化合物或衍生物。如本文所使用的术语“治疗有效量”是指可用于产生期望的药理作用的剂量，浓度或强度。在本发明的上下文中，术语“治疗有效”还包括预防活性。治疗剂量取决于具体的应用情况。根据疾病的性质和严重性、给药途径以及患者的身高和状态，将以本领域技术人员已知的方式确定治疗剂量。在本发明的上下文中，“药物组合物”是至少一种api和至少一种佐剂的制剂，其在最简单的情况下可以是例如含水液体载体，例如水或盐水(saline)。表述“一”或“一个”不排除复数形式；也就是说，单数形式的“一个”，“一个”和“该”应理解为包括复数对象，除非上下文明确指出或另有要求。换句话说，对本公开的单数特征或限定的所有引用应包括相应的复数特征或限定，反之亦然，除非另外明确指出或通过引用的上下文清楚暗示相反。因此，除非另有定义，否则术语“一”，“一个”和“该”与“至少一个”或“一或多个”具有相同的含义。例如，对“一种成分”的提及包括多种成分的混合物等。表述“一个实施方案”，“一实施方案”，“具体实施方案”等是指在本发明的至少一个实施方案中存在与相应的表述结合使用的特定特征、特性或特点，或特征、特性或特点的特定组或组合。这些表述在整个说明书中不同地方的出现不一定是指同一实施方案。此外，在一或多个实施方案中，可以以任何合适的方式组合特定的特征、特性或特点。如本文所使用的术语“治疗”不仅包括能够实现疾病、病症或症状的治愈的治疗干预；而且还包括改善，改良，控制，进展控制等。术语“预防”是指包括预防或延迟疾病、病症或症状的进展，或预防进一步的生长和扩散以及预防在最初改善后或在最初消除疾病、病症或症状的病因后的复发或进展。术语“患者”和“受试者”在本文中是同义词。通常，这些术语是指人类。然而，本发明不仅仅局限于人类，并且如果需要的话，可以在动物中使用。与属性或值相关的术语“基本上”，“大约”，“约”，“实质上”等包括精确的属性或精确的值，以及通常被认为落入相关
技术领域：
所接受的正常范围或可变性内的任何属性或值。例如，“基本上不含水”是指制剂中没有故意包含水，但不排除残留水分的存在。本文中使用的术语“大约”或“约”将补偿制药行业允许的和制药产品固有的可变性，例如由于制造差异和/或时间引起的产品降解而导致的含量差异。该术语允许任何变化，在药物实践中，这将允许所评估的产品被认为在哺乳动物中与所描述规格的请求保护的产品具有生物等效性。如本文所使用的“载体”通常可以意指作为制剂的一部分的任何化合物，构建体或材料，其有助于，允许或改善生物活性化合物或材料的递送。术语“药学上可接受的”是指该化合物或混合物可用于制备药物组合物，药物组合物是通常安全，无毒且生物学上或其他方面均期望的，并且包括对于人类药物用途可接受的药物组合物。在最广泛的意义上，本发明涉及包含环孢素a(csa)的组合物，其用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。此外，本发明涉及包含环孢素a(csa)的组合物，其用于治疗闭塞性细支气管炎综合征(bos)或者用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。在第一方面，更具体地，本发明涉及包含环孢素a脂质体(l-csa)的组合物，其用于在双肺移植患者中预防闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。根据本发明的供使用的组合物包含如下文进一步描述的和例如在上述wo2007/065588中详细描述的治疗有效剂量或量的环孢素a(csa)或更具体地环孢素a脂质体(l-csa)。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的药物组合物可以是液体组合物。在这些实施方案中，根据本发明的供使用的组合物包含l-csa和液体载体或溶媒，其中l-csa可以溶解、分散或悬浮于液体载体或溶媒中。在具体实施方案中，这些组合物包含治疗有效剂量的csa，水性载体液体，选自磷脂(phospholipid)的第一溶解度增强物质和选自非离子型表面活性剂的第二溶解度增强物质以形成脂质体溶解的csa(l-csa)。根据本发明的供使用的组合物可包含的磷脂尤其是天然的或富集的磷脂的混合物，磷脂为例如卵磷脂，例如可商购的phospholipong90，100或lipoid90，s100。因此，在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的组合物可以包含的磷脂可以选自天然磷脂混合物的磷脂。磷脂是含有磷的两亲脂质。它们也被称为磷脂质(phosphatide)，在自然界中起着重要的作用，尤其是作为形成生物膜的双层成分，并且经常用于药物目的的是那些化学衍生自磷脂酸的磷脂。后者是(通常是双)酰化的3-磷酸甘油，其中脂肪酸残基的长度可以不同。磷脂酸的衍生物是，例如，磷酸胆碱或磷脂酰胆碱，其中磷酸基团还被胆碱、以及磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等酯化。卵磷脂是各种磷脂的天然混合物，其通常包含高比例的磷脂酰胆碱。根据本发明的优选的磷脂是卵磷脂以及纯的或富集的磷脂酰胆碱，例如二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱，二棕榈酰基磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆碱。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物包含的选自磷脂的第一溶解度增强物质可以选自磷脂，并且可以是卵磷脂，更具体地，是含有不饱和脂肪酸残基的卵磷脂。在又一个优选的实施方案中，选自磷脂的膜形成物质是卵磷脂，其选自大豆卵磷脂，lipoids100，g90、10，优选lipoids100或类似的卵磷脂。在另外的优选实施方案中，选自磷脂的成膜物质选自lipoids100、lipoids75，特别是lipoids100。在具体实施方案中，上述选自磷脂的第一成膜物质与csa的重量比选自约8：1至约11：1的范围，优选约8.5：1至约10：1的范围，例如大约13：1。根据本发明的供使用的药物组合物可以进一步包含选自非离子型表面活性剂的第二溶解度增强物质或两种或更多种不同的溶解度增强物质。与其他表面活性剂一样，非离子型表面活性剂具有至少一个相当亲水的和至少一个相当亲脂的分子区域。存在有单体低分子量非离子型表面活性剂和具有低聚物或聚合物结构的非离子型表面活性剂。本发明可包含的合适的非离子型表面活性剂的例子包括聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇油酸酯，脱水山梨糖醇脂肪酸酯，泊洛沙姆，维生素e-tpgs(d-α-生育酚-聚乙二醇-1000-琥珀酸酯)和泰洛沙泊(tyloxapol)。在具体实施方案中，选自非离子型表面活性剂的第二溶解度增强物质可以选自聚山梨酯和维生素e-tpgs，优选选自聚山梨酯。在特别优选的实施方案中，选自非离子型表面活性剂的溶解度增强物质是聚山梨酯80。在本发明药物组合物的具体实施方案中，选自磷脂(优选卵磷脂)的第一成膜物质的量大于选自非离子型表面活性剂的第二溶解度增强物质的量。在示例性实施方案中，选自磷脂(优选卵磷脂)的第一成膜物质与选自非离子型表面活性剂(优选聚山梨酯)的第二溶解度增强物质的重量比选自约15：1至约9：1的范围，优选约14：1至约12：1的范围，例如约13：1。在进一步的具体实施方案中，一方面的选自磷脂的第一溶解度增强物质和选自非离子型表面活性剂的第二溶解度增强物质(之和)与另一方面的csa的重量比选自大约5：1至大约20：1的范围，优选大约8：1至大约12：1的范围，更优选大约10：1。在另外的具体实施方案中，选自磷脂(优选卵磷脂)的第一溶解度增强物质、选自非离子型表面活性剂(优选聚山梨酯)的第二溶解度增强物质与csa的重量比选自约15：1：1.5至约5：0.3：0.5的范围，优选约9：0.7：1。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物或更具体地讲，液体组合物包含环孢素a脂质体(l-csa)形式的环孢素a(csa)，或者换句话说，脂质体溶解形式的环孢素a。因此，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物是脂质体制剂。包含csa的脂质体，或者换句话说，csa脂质体(l-csa)主要通过在组合物中包含的磷脂形成，并且优选为单层脂质体。脂质体优选具有例如使用malvernzetasizer装置的光子相关光谱法以z平均值测量的至多约100nm的平均直径，以及也如光子相关光谱法测定的至多约0.5，优选至多约0.4的多分散指数。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物包含含水液体载体。液体载体可包含水和任选的一种或多种生理上可接受的有机溶剂，例如乙醇或丙二醇。然而，在优选的实施方案中，本发明的药物组合物，特别是液体药物组合物的形式，不含或基本上不含有机溶剂，特别是不含丙二醇，或仅包含乙醇作为有机溶剂。根据本发明的供使用的液体组合物可以任选地通过以下制备：提供在合适的液体载体(优选合适的含水液体载体)中的csa的水溶液或混悬液，并在以脂质体形式添加如上所述的至少一种磷脂和至少一种非离子型表面活性剂之后溶解csa。在具体的实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物可以任选地由相应的用于重构(reconstitute)的固体制剂制备，包括在吸入之前将l-csa与水性溶剂或溶媒混合或接触。因此，在一具体的实施方案中，通过重构环孢素a脂质体(l-csa)，优选冻干形式的l-csa，制备根据本发明的供使用的包含csa脂质体(l-csa)的液体组合物。包含l-csa的用于重构的固体制剂可以通过适合于从液体制剂中除去溶剂的任何方法来制备。然而，用于制备这种固体制剂或组合物的方法的优选实例包括冷冻干燥和喷雾干燥。优选地，使用冷冻干燥。为了在干燥过程中保护活性成分，可以掺入冻干保护剂和/或膨胀剂(bulkingagent)，例如糖或糖醇，特别是蔗糖，果糖，葡萄糖，海藻糖，甘露醇，山梨糖醇，异麦芽酮糖醇或木糖醇。在这些试剂中，特别优选蔗糖。包含有效量的活性化合物的固体组合物的部分，即以l-csa形式提供的csa(即单位剂量(unitdose))，优选可溶解或分散在上述含水液体载体中。在具体实施方案中，含水液体载体的体积不大于约10ml。优选地，csa或l-csa的有效量或单位剂量可溶解或分散在体积不超过约5ml，不超过约4ml或甚至不超过约3ml的含水液体载体中。用于重构固体l-csa制剂所需的含水液体载体的体积将取决于活性成分的剂量以及所需的浓度。如果需要较小剂量以达到治疗效果，则较小体积的含水液体载体可能足以溶解或分散包含l-csa的固体制剂。在具体实施方案中，优选将水溶液用作用于重构的含水液体载体。因此，在本发明的液体组合物的优选实施方案中，含水液体载体包含盐水。在具体实施方案中，将盐水溶液用作含水液体载体，其中调节氯化钠的浓度以便产生在重构后具有生理上可接受的重量渗透压摩尔浓度(osmolality)和耐受性的液体制剂。在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物的重量渗透压摩尔浓度在约450至约550mosmol/kg的范围内。但是，通常仍可以容忍一定程度的低渗透压和高渗透压。浓度在31至300mm之间的渗透性阴离子(例如氯离子)的存在可以改善耐受性(weber等人."effectofnebulizertypeandantibioticconcentrationondeviceperformance",paediatricpulmonology23(1997)249-260)。实际上在某些应用中优选高渗制剂。例如，根据本发明的供使用的重构液体组合物的重量渗透压摩尔浓度可以在150至800mosmol/kg的范围内。优选地，含水液体组合物的重量渗透压摩尔浓度为约250至约700mosmol/kg，或约250至600mosmol/kg。最优选地，根据本发明的供使用的水性液体组合物的重量渗透压摩尔浓度为约400至约550mosmol/kg。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物包含基本上由盐水组成的含水液体载体。在这些具体的实施方案以及其他实施方案中，其中含水液体载剂包含其他成分或溶剂，氯化钠的浓度可以在约0.1％至约0.9％(w/v)的范围内。优选地，使用氯化钠浓度为约0.25％(w/v)的盐水溶液，其中术语“w/v”是指每体积含水液体组合物所包含的液体载体溶解的氯化钠的重量。在通过干燥制剂的重构来制备液体组合物的情况下，取决于干燥之前制剂的重量渗透压摩尔浓度，氯化钠的浓度也可以在约0.1％至约0.9％(w/v)的范围内。优选地，使用如上所述的0.25％(w/v)的盐水溶液。当用于制备根据本发明的供使用的液体组合物时，用于重构的包含csa，优选地以l-csa形式的固体组合物可以是药物试剂盒的一部分。这种试剂盒优选包含固体组合物以及用于重构的含水液体载体。在wo03/035030中描述了这种用于制备以气雾剂形式给药的液体组合物的试剂盒。重构后，csa或更确切地说l-csa制剂应具有与干燥前相同的组成。如果该制剂是脂质体制剂，则在重构后它也应包含脂质体。优选地，脂质体的大小在干燥之前和重构之后也相似。关于脂质体的尺寸，特别优选通过光子相关光谱法以z-平均值测量的脂质体的尺寸在40至100nm之间，在用0.25％(w/v)盐水重构后表现出均匀的粒度分布(多分散指数＜0.4)。令人惊奇地发现，如上所述的包含特别是环孢素a脂质体(l-csa)的液体组合物可用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a(csa)的所述液体组合物，向所述患者施用所述组合物。根据本发明，可以有效地预防或治疗(优选治疗)双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(本文也称为“bos”)，或者可以有效地预防或延迟已接受双肺移植的患者(以下也称为“双肺移植患者”)，以及已被诊断出患有bos(尤其是bos1或bos2)的患者中bos的进展。令人惊讶地，当与已经接受单肺移植的患者(在本文中也称为“单肺移植患者”)(尤其是被诊断患有bos的患者)相比时，该治疗或更具体地说是预防或延迟所表现的(manifested)bos进展在双肺移植患者中可以更有效地实现。更具体地，在除了标准免疫抑制疗法(以下也称为“标准治疗”或“soc”)外还吸入根据本发明的供使用的环孢素a脂质体液体制剂的双肺移植患者中实现了显著延迟所表现的bos的进展，甚至是阻止了所表现的bos的进展。在单独接受标准免疫抑制疗法的双肺移植人群中，或与用根据本发明的供使用的含lcsa的组合物治疗或单独使用soc治疗的单肺移植患者相比时，在同一时间范围内均未发现可比较的bos的延迟或预防。应该注意的是，鉴于在wo2016/146645中所公开的临床研究的较早结果，根据本发明的供使用的吸入环孢素组合物对移植类型(双肺移植与单肺移植)的不同作用完全令人惊讶，并且是预想不到的。根据本发明，包含l-csa的液体组合物可用于在双肺移植患者中预防闭塞性细支气管炎综合征(bos)的方法，或用于治疗bos的方法或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法。然而，在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的包含l-csa的液体组合物可用于治疗闭塞性细支气管炎综合征(bos)的方法或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法。bos的存在可以根据对用力呼气容积(fev)进行的肺活量测定来确定。优选地，一秒钟内的用力呼气容积(fev1)的减少被用作bos的存在的指标，并且因此指示发生肺部慢性移植排斥反应的风险。fev1测量可以根据当前的americanthoracicsociety(ats)/europeanrespiratorysociety(ers)spirometryguidelines进行。一秒用力呼气容积(fev1)以升(l)表示。当在没有其他原因的情况下，fev1从患者的最大值持续下降至少20％时，就认为存在bos。bos可以通过相隔至少三周的至少两次fev1测量来确认。移植后的最大值是至少相隔三周获取的两个最佳fev1值。fev1测量应保持持续，并且至少相隔三周进行测量。在评估fev1之前，应停止施用支气管扩张药。假定由于除慢性排斥反应以外的其他原因(例如急性排斥反应或淋巴细胞性支气管炎或感染)引起的fev1降低将对适当的药物治疗产生反应，并且持续不可逆转的功能下降与慢性排斥反应和bos的进展有关。基于fev1减少的百分比，bos分级是可能的(estennem，等人.bronchiolitisobliteranssyndrome2001:anupdateofthediagnosticcriteria.jheartlungtransplant2002；21(3):297-310)。可以应用以下定义和标准：bos0：fev1>基线的90％bos0-p：fev1为基线的81％至90％bos1：fev1为基线的66％至80％bos2：fev1为基线的51％至65％bos3：fev1为基线的50％或更少一般而言，根据本发明的供使用的组合物可用于治疗bos或用于在被诊断出患有bos的双肺移植患者中预防或延迟bos进展的方法，即用于任何级别的bos，例如，bos0，bos0-p，bos1，bos2或bos3，并且优选用于bos1，bos2或bos3。然而，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物尤其可用于治疗被诊断为bos0-p或更高(优选bos1或bos2)的双肺移植患者。在进一步的具体实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物尤其可用于治疗被诊断为bos0-p或bos1的双肺移植患者。实际上，为了能够将单肺移植患者和双肺移植患者作为单一研究中的一个群体进行治疗，单肺移植患者的给药剂量优选约为双肺移植患者的给药剂量的一半。由于活性化合物csa具有局部作用，因此可以预期的是，将目标表面减少一半，剂量减少一半即可获得相同的效果。换句话说，预期当根据移植类型调整剂量时，在单肺移植患者和双肺移植患者中将获得相同的效果。然而，即使在给予相当剂量的情况下，发明人惊奇地发现，在双肺移植群体中，吸入环孢素在预防或延迟所表现的bos(尤其是bos1或bos2)方面的作用更加明显。令人惊讶地发现，当与单独使用标准免疫抑制疗法(soc)的常规治疗相比时，或者在与单肺移植患者比较时，根据本发明的供使用的组合物可以预防或显著延迟或减少在双肺移植后一旦表现并被诊断出的bos的进展，特别是bos1或bos2。因此，用于治疗双肺移植患者的根据本发明的供使用的含csa或l-csa的组合物可以显著地有助于延长和最大化在双肺移植后处于发展bos的风险或已发展bos(更具体地说是bos1或bos2)的患者的生存率和生存时间，因此可以减少或最小化慢性肺移植排斥反应的发生或发展。可以根据预定的给药方案来施用根据本发明的供使用的组合物。更具体地，可以在治疗的每周期间向双肺移植患者施用组合物特定次数。例如，该组合物可以每周施用三次。在优选的实施方案中，每天施用根据本发明的供使用的组合物。在一具体的实施方案中，将根据本发明的供使用的组合物每天两次或甚至若干次施用于处于发展bos风险或被诊断患有bos的所述双肺移植患者。根据本发明的供使用的所述组合物，优选根据本发明的供使用的液体组合物，优选具有约0.5mg/ml至约10mg/ml的csa浓度，或者换句话说，所述液体组合物包含l-csa形式的csa，其浓度为约0.5至约10mg/ml，优选约1至约6mg/ml，更优选约1至约5mg/ml。最优选地，根据本发明的供使用的组合物包含浓度为约4mg/ml的csa(以l-csa的形式)。为了使雾化时间缩短，根据本发明的供使用的组合物的单位剂量的体积优选较低。该体积，也称为“剂量体积”，或“剂量单位体积”，或“单位剂量体积”，应理解为旨在用于单次施用的体积。单位剂量定义为填充在雾化器中用于单次施用的组合物(更具体地讲，液体组合物)中的csa(以l-csa的形式)的剂量。具体地，单位剂量的体积可以小于10ml。优选地，体积为约0.3至约3.5ml，更优选为约1至约3ml。例如，体积为约1.25ml或约2.5ml。如果在重构后获得组合物，则应根据重构的组合物的所需体积来调整液体载体(优选含水液体载体或甚至更优选用于重构的盐水溶液)的体积。对于单肺移植患者，根据本发明的供使用的组合物包含的csa的治疗有效单位剂量优选为每天约1mg至约15mg。最优选地，每天约10mgcsa的有效单位剂量可以应用于单肺移植的患者中。发现处于发展bos风险或被诊断患有bos的双肺移植患者对这种剂量耐受良好。对诊断患有bos的双肺移植患者施用的csa的治疗有效日剂量范围为2mg至30mg。因此，在优选的实施方案中，csa以2至30mg的有效日剂量或5至30mg的有效日剂量给药。在一优选的实施方案中，可以将有效日剂量为约20mg的csa施用于处于发展bos风险或被诊断患有bos的双肺移植患者。应该理解的是，在以l-csa形式施用csa的情况下，以上概述的所有量是指脂质体中包含的csa的量。根据本发明的供使用的组合物(或更优选地，液体组合物)可以有利地通过能够将溶液、胶体制剂或混悬液(例如包含l-csa形式的csa的本发明的组合物)转化成高比例的能够到达肺部外周的液滴的雾化器(nebulizer)雾化并给药。实际上，可以使用喷射雾化器，超声波雾化器，压电雾化器，电动流体雾化器，膜雾化器，电子膜雾化器或电子振动膜雾化器。合适的喷雾器的实例包括(philips),(trudell),lc(pari),lc(pari),lc(pari),(philips/respironics),ih50(beurer),(health&life,schill),microu22(omron),(schill),(boehringer),(pari),(aerogen),aeroneb(aerogen),和(aerogen)设备系列。然而，优选地，特别是在要雾化包含l-csa的液体组合物的情况下，可以使用压电雾化器，电动流体雾化器，膜雾化器，电子膜雾化器或电子振动膜雾化器。在这些情况下，合适的雾化器包括(philips/respironics),ih50(beurer),(health&life,schill),microu22(omron),(schill),(boehringer),(pari),(aerogen),aeroneb(aerogen),和(aerogen)设备系列。在优选的实施方案中，为了将药物csa本身或csa脂质体(l-csa)形式的药物csa靶向下呼吸道，用电子振动膜雾化器将根据本发明的供使用的组合物雾化。在一特别优选的实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物用雾化器(paripharmagmbh)雾化。雾化器用穿孔的振动膜雾化液体药物制剂(例如本发明的组合物)，从而产生雾化剂，该雾化剂具有低弹道动量和可吸入尺寸范围(通常低于5pm)内的高百分比液滴。与传统的雾化器(例如喷射雾化器)相比，雾化器设计用于更快，更有效地雾化药物，因为它具有更高的雾化率，更低的药物浪费以及更高的可用药物百分比(输送剂量(dd)和可吸入剂量(rd))。优选地，合适的雾化器，特别是振动膜雾化器，可以以至少约0.1ml/min的速率或(假设组合物的相对密度通常为约1)以至少约100mg/min的速率递送这种单位剂量。更优选地，雾化器能够分别产生至少约0.15ml/min或150mg/min的输出速率。在进一步的实施方案中，喷雾器的输出速率为至少约0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1ml/min。此外，雾化器的输出速率应选择为实现液体组合物的缩短的雾化时间。显然，雾化时间将取决于将被雾化的组合物的体积以及输出速率。优选地，应选择或调整雾化器以使其能够在不超过约20分钟内使包含有效剂量的活性化合物的一定体积的液体组合物雾化。更优选地，单位剂量的雾化时间不超过约10分钟。甚至更优选地，单位剂量的雾化时间不超过约5分钟。除了提供高递送剂量并具有短雾化时间以外，优选以抑制csa污染环境的方式构造用于以l-csa形式施用csa的雾化器。为此，可以在雾化器的呼气阀上放置一个过滤器。在优选的实施方案中，雾化器包括用于监控例如患者吸入时间，日期和持续时间的特征。这样的特征的一个例子是芯片卡，在该芯片卡上记录了雾化时间和持续时间。可替代地，可以应用无线传输这样的数据到云和/或服务器。这使医务人员可以检查患者的依从性。监控系统可以包括诸如上述的雾化器，控制器，服务器，数据库，云，供应商，医师，健康保险公司和/或电话服务。已经发现，至少65％或至少75％的依从率(adherence)对于在双肺移植患者中获得bos的相关预防或延迟发展是有益的。为了达到至少65％的依从率，处于发展bos的风险或被诊断出患有bos(特别是bos1或bos2)的双肺移植患者，必须在预期吸入周期的至少65％内吸入预期的制剂。例如，以每天两次的吸入方案为基础，这意味着不允许患者在8周内错过超过39次吸入，这相当于每周大约5次吸入。被遗漏的任何吸入，直到吸入完整的单位剂量才进行的任何吸入或因任何其他原因而不足的任何吸入被视为“缺失的”吸入，或者换句话说，不是“预期中”的吸入。更优选地，根据本发明的供使用的制剂以至少75％的依从率吸入，即患者必须在每天两次吸入给药方案的基础上在预期吸入周期的至少75％内按预期吸入制剂。如果在8周内缺失不超过28次吸入，或每周缺失不超过大约3.5次吸入，则可以达到此目的。在另一实施方案中，用于记录雾化时间，日期和持续时间的特征与系统连接，一旦在预定数量的吸入循环中没有及时正确地进行吸入，该系统就会生成信号。由于使用了这种监控系统，无论是否有生成信号的系统，都可以确保患者正确使用雾化器设备。用于产生信号的系统可以包括例如通过传感器检测例如流体储存器中流体的存在，吸入流量、吸入时间、吸入持续时间和/或吸入体积的测量。视觉，听觉或感觉上的反馈可以例如根据影响治疗的相关患者行为和使用因素或应用诊断给出。该反馈可以包括用以改善患者对已定义的医学治疗方案的依从性和/或csa在肺中的沉积和分布的信息。在例如每次吸入的时间，日期和持续时间记录在用于监控的特征上的实施方案中，可以连续地监控患者。在监控系统与产生信号的系统连接的实施方案中，一旦患者的依从性降低到预先定义的依从性极限以下，就可以校正患者的吸气行为。该信号可以是由雾化器本身生成的信号，但是也可以是在远程设备上生成的信号，这会例如通知患者的医生。在被告知缺乏依从性时，医生可以联系患者，以提醒患者正确吸入是成功预防肺部慢性移植物排斥的前提。发明人发现，监控对于肺移植患者尤其是在双肺移植患者中是有用的，因为在依从性患者中液体l-csa组合物吸入制剂的作用更加显著。此外，已经发现在延长的时间(例如至少2周，至少4周，或至少8周，或至少12周，或至少16周，或至少20周，甚至更长的时间)内将本发明的供使用的组合物施用至处于发展bos的风险或被诊断出患有bos的双肺移植患者是有利的。在特别优选的实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物在至少24周，或甚至36周，或甚至48周，或甚至更长的时间，例如12个月，24个月，36个月或甚至数年，例如4年或5年或甚至6年的时间内施用，在这可能指示在双肺移植患者中预防bos或延迟或减少bos的进展，特别是bos1或bos2的进展的情况下。在进一步优选的实施方案中，根据本发明的供使用的组合物的施用在至少24周，优选至少48周的时间内连续每天进行，优选每天一次或甚至更多，优选每天两次。在另一实施方案中，本发明的吸入的csa组合物与肺移植后用于标准免疫抑制疗法的一种或多种活性成分组合使用。因此，在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的液体组合物的特征在于，使用标准免疫抑制疗法(在本文中也称为“soc”)联合治疗所述双肺移植患者。在肺移植后的标准免疫抑制疗法中，可以施用免疫抑制剂和皮质类固醇组中的一种或多种活性成分。免疫抑制剂的实例是属于以下组的化合物：免疫球蛋白(抗体)，细胞周期抑制剂(抗代谢物/抗增殖剂)，例如硫唑嘌呤和麦考酚酸及其盐，以及钙调神经磷酸酶抑制剂，例如环孢素，他克莫司，或mtor抑制剂，如西罗莫司和依维莫司。皮质类固醇的实例是属于以下组的化合物：氢化可的松，甲基泼尼松龙，泼尼松及其任意的盐、酯和衍生物。在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物与一种或多种选自他克莫司，吗替麦考酚酯和/或皮质类固醇的活性成分组合，优选在口服标准免疫抑制疗法中使用。因此，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物与标准免疫抑制疗法联合施用，包括施用选自他克莫司或环孢素、吗替麦考酚酯或西罗莫司、和皮质类固醇中的一种或多种活性成分。在另外的具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物与三重药物疗法组合使用，其中施用钙调神经磷酸酶抑制剂，细胞周期抑制剂和皮质类固醇的组合。优选地，钙调神经磷酸酶抑制剂是他克莫司，细胞周期抑制剂是吗替麦考酚酯，而皮质类固醇是泼尼松。与根据本发明的组合物组合使用的活性成分优选口服施用。在标准免疫抑制疗法的这些情况下，他克莫司的给药剂量通常可达到8-12ng/ml的全血水平(wholebloodthroughlevel，wbtl)，给药剂量优选约0.06mg/kg(相对于被治疗患者的体重)。此外，在标准免疫抑制疗法中，吗替麦考酚酯的施用量通常为约1g，有时高达3g，优选约1g。当在标准免疫抑制疗法下使用泼尼松时，通常以约20至约25mg/天，优选约20mg/天的量施用。结果，当将根据本发明的用于吸入的环孢素液体组合物与这些成分组合使用时，可以减少用于标准免疫抑制疗法的活性成分的常规剂量。换句话说，当不使用吸入的csa或更具体地l-csa时，成功免疫抑制通常所需的剂量(在此定义为通常剂量)通常可以减少。这是有利的，因为全身给药的免疫抑制剂的使用可导致相当大的副作用，其通常是剂量依赖性的。根据本发明的供使用的组合物允许在双肺移植患者中有效治疗或预防bos，或在诊断患有bos的双肺移植患者中有效延迟bos的进展。如前所述，一秒用力呼气容积(fev1)的减少可作为存在bos的指标，因此可作为肺部慢性移植排斥反应的风险指标。因此，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物可用于治疗双肺移植患者中的bos，尤其是bos1或bos2，其中基本上预防了双肺移植患者的bos进展，或分别与治疗开始、随机分组开始或研究开始时的所述患者的fev1值相比，双肺移植患者的bos进展被降低到所述患者的fev1值下降最多50％、或最多40％、或最多30％、或最多20％、或甚至最多15％或10％、或甚至最多5％的水平。在优选的实施方案中，基本上预防了双肺移植患者的bos，特别是bos1或bos2的进展，或分别与治疗开始、随机分组开始或研究开始时的所述患者的fev1值相比，双肺移植患者的bos的进展被降低至所述患者一秒用力呼气容积(fev1)下降最多20％的水平。可以通过用本发明的组合物或根据本发明的方法治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者一段延长的时间来实现该效果，延长的时间为至少2周，或至少4周，或至少8周，或至少12周，或至少16周，或至少20周或甚至更长，例如至少24周，甚至36周，甚至48周或更长时间，例如12个月，24个月，36个月或甚至几年，例如4年或5年或甚至6年，在这可能指示在双肺移植患者中预防bos或延迟或减少bos的进展，特别是bos1或bos2的进展的情况下。在进一步的优选实施方案中，在用所述根据本发明的供使用的组合物治疗所述双肺移植至少24周的时间，随后至少24周未经治疗之后，基本上预防了双肺移植患者的bos的进展，或者分别与治疗开始、随机分组开始或研究开始时的所述患者的fev1值相比，双肺移植患者的bos进展被降低到所述患者的一秒用力呼气容积(fev1)值下降最多20％、优选最多10％的水平。此外，已经发现，根据本发明的供使用的组合物允许处于发展bos的风险或被诊断患有bos(优选被诊断患有bos)的双肺移植患者的无事件生存期显著延长，其中无事件生存期的特征在于生存时间，在该生存时间中，双肺移植患者的fev1降低至少20％，并且/或者不需要再次移植或死亡。此外，根据本发明的供使用的组合物还允许处于发展bos的风险或被诊断患有bos(特别是bos1或bos2)的双肺移植患者的无事件生存期显著延长。因此，在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中从治疗开始起至少12周或至少24周或至少36周或甚至至少48周或更长时间，例如12个月，24个月，36个月或甚至几年，例如4年或5年或甚至6年之后，无事件生存率为至少50％，或至少60％，或至少70％，或至少80％，或甚至至少90％，其中该事件选自fev1下降至少10％或至少20％，和/或需要再次移植或死亡。在优选的实施方案中，在用根据本发明的供使用的所述组合物治疗至少24周后，随后至少24周未经治疗之后，处于发展bos的风险或被诊断患有bos(优选被诊断患有bos)的双肺移植患者的无事件生存率为至少60％，优选至少80％。在进一步的实施方案中，在延长的时间内，例如从处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者的治疗开始起至少2周，或至少4周，或至少8周，或至少12周，或至少16周，或至少20周或更长时间，例如至少24周或甚至36周或甚至48周或甚至更长时间，例如12个月，24个月，36个月或甚至几年，例如4年或5年或甚至6年(然而优选从治疗开始起48周内)，可以显著降低经历选自fev1下降至少10％或至少20％，需要再次移植和/或死亡的事件的风险。因此，根据本发明的供使用的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中与单独使用标准免疫抑制疗法(soc)进行治疗时经历选自fev1下降至少20％，需要再次移植和/或死亡的事件的风险相比，在延长的时间内，例如从用本发明的雾化形式的包含csa或优选l-csa的组合物治疗的肺移植患者的治疗开始起至少2周，或至少4周，或至少8周，或至少12周，或至少16周，或至少20周或更长时间，例如至少24周或甚至36周或甚至48周或甚至更长时间，例如12个月，24个月，36个月或甚至几年，例如4年或5年或甚至6年(优选从治疗开始起至少48周)，经历相应事件的风险(无事件生存率)降低了至少30％(绝对)(abs.)，优选降低了至少35％(绝对)。确定潜在预防或延迟双肺移植患者中bos进展的另一措施是确定fev1的平均每月变化，或更具体地说是每月fev1的损失或下降(δfev1/月，以下也成为“fev1-斜率”(fev1-slope))，如在如上所述的延长时间段内根据定期和重复进行的fev1测量为此类患者所确定的，延长时间段为例如至少12周或至少24周或至少36周或甚至在至少48周后或12个月或甚至24个月或36个月或甚至更长的时间，例如4年，5年或甚至6年，优选是在48周内。因此，在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中fev1的每月变化(δfev1/月)保持基本恒定或其数值为约0至约0.055l/月的范围内(对应于fev1的损失或下降高达0.055l/月)或约0至约0.05l/月或约0至约0.045l/月或约0至约0.04l/月。在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中fev1的每月变化(δfev1/月)保持基本恒定或其数值为约0至约0.04l/月的范围内，意味着fev1的每月损失在约0至约0.04l的范围内。确定潜在预防或延迟在处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者中的bos进展的另一种措施是确定绝对变化，或更确切地说是fev1的绝对损失(δfev1/绝对)(δfev1/abs.)，如根据在治疗开始时和治疗结束时进行的fev1测量为该患者所确定的，特别是在延长时间段(例如至少12周或至少24周或至少36周或甚至至少48周或12个月或甚至24个月或36个月或甚至更长的时间，4年，5年或甚至6年内，优选48周内)后进行。因此，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中在基线(开始治疗)和治疗期结束时间(例如开始治疗后的第48周)之间处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者的fev1的绝对变化(δfev1/绝对)不超过350ml，这意味着所述患者的fev1的总损失不超过350ml，优选不超过300或250或200或甚至150ml。在进一步的实施方案中，基线(治疗开始)与治疗期结束时间(例如处于发展bos的风险或被诊断患有bos(优选被诊断患有bos)的双肺移植患者的治疗开始后第48周)之间的fev1的绝对变化(δfev1/绝对)为150至350ml。确定潜在预防或延迟在处于发展bos的风险或被诊断患有bos并用根据本发明的供使用的组合物治疗的双肺移植患者中的bos进展的又一措施是确定相对变化，或更具体而言，相对于仅接受标准免疫抑制疗法(soc)的患者的fev1的损失的fev1的相对损失(δfev1/相对)，特别是在一段延长的治疗时间后，例如至少12周或至少24周或至少36周内或甚至在48周后或12个月或甚至24个月或36个月或甚至更长的4年，5年或甚至6年，优选48周内。因此，在具体实施方案中，根据本发明的供使用的组合物允许治疗被诊断患有bos的双肺移植患者，其中在开始治疗后至少12周或至少24周或至少36周或甚至至少48周后或12个月或甚至24个月或36个月或更长时间的4年或5年或甚至6年，优选在48周内，与仅使用标准免疫抑制疗法(soc)治疗的患者中fev1的损失相比，用根据本发明的供使用的包含l-csa的组合物治疗的双肺移植患者中fev1的相对变化或差异(δfev1/相对)为至少200ml，或至少250ml，或至少300ml或更多，例如至少350ml或至少400ml。在优选的实施方案中，根据本发明的供使用的包含l-csa的组合物允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos的双肺移植患者，其中从开始治疗48周后，相对于仅用标准免疫抑制疗法(soc)治疗的患者中fev1的损失，fev1的相对损失或差异(δfev1/相对)为约200至约400ml。这意味着，例如，根据这些优选的实施方案，在48周后，用根据本发明的组合物治疗的患者的fev1值比仅用标准免疫抑制疗法(soc)治疗的患者的fev1值高约200至约400ml。根据本发明的供使用的组合物尤其可用于成功治疗那些在治疗开始之前尚未被诊断出气道狭窄的处于发展bos风险或被诊断出患有bos的双肺移植患者，尤其是用于那些在开始治疗后第24周仍未被诊断出气道狭窄的患者，如通过支气管肺泡灌洗(bal)支气管镜检查所确定的。此外，根据本发明的供使用的组合物尤其可用于成功治疗那些处于发展bos的风险或被诊断出患有bos的双肺移植患者，该患者在开始治疗之前尚未被诊断出未经治疗的感染，尤其是用于那些在治疗开始后第24周仍未诊断出未治疗感染的患者。根据本发明的供使用的包含csa(特别是l-csa)的组合物将以雾化形式吸入。但是，这可能有助于大大减少患者的全身暴露。因此，根据本发明的供使用的组合物还允许治疗处于发展bos的风险或被诊断患有bos双肺移植患者，其中通过吸入包含csa的所述液体组合物来治疗的双肺移植患者中csa的平均血药浓度最高100ng/ml，优选最高60ng/ml。在另一方面，本发明提供了包含环孢素a(csa)的组合物在制备用于预防或治疗双肺移植患者中的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的药物中的用途，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。如以上结合本发明的第一方面的组合物所概述的，包含csa的组合物可以以固体或液体形式用于制备根据本发明的该方面的药物。在使用固体组合物的情况下，它们可以用如上所述的合适的液体载体或溶剂进行重构。除此之外，以上结合根据本发明的第一方面使用的组合物公开和描述的所有特征也可以应用于根据本发明的该方面的此类组合物的用途。在另一方面，本发明提供了一种用于预防双肺移植患者中的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法，该方法包括以下步骤：(a)确定接受双肺移植并且处于发展bos的风险或随后发展bos的患者；和(b)通过吸入向所述患者施用治疗有效剂量的雾化环孢素a(csa)。应当指出，对于根据本发明的该方面的方法，以上结合根据本发明的第一方面使用的组合物公开和描述的所有特征也可以应用于根据本发明的这个方面的用于预防双肺移植患者中的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法。然而，为了避免歧义，以下列出了根据本发明的包含环孢素a(csa)(特别是csa脂质体(l-csa))的组合物的编号实施方案供使用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其还包括根据本发明的这个方面的用于预防双肺移植患者中的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法：1.一种包含环孢素a(csa)的组合物，其用于在双肺移植患者中预防闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。2.根据第1项所述的供使用的包含环孢素a(csa)的组合物，在治疗闭塞性细支气管炎综合征(bos)中或预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展中，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。3.根据第1项或第2项所述的供使用的组合物，其中所述双肺移植患者被诊断出患有bos1或bos2。4.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述组合物包含环孢素a脂质体(l-csa)形式的环孢素a。5.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述组合物是液体组合物。6.根据第5项所述的供使用的组合物，其中所述组合物包含含水液体载体。7.根据第6项所述的供使用的组合物，其中所述含水液体载体包含盐水(saline)。8.根据第6项或第7项所述的供使用的组合物，其中含水液体载体基本上由盐水组成，优选地由浓度为0.25％的盐水组成。9.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述液体组合物的csa浓度为0.5-10mg/ml。10.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述液体组合物通过冻干形式的环孢素a脂质体的重构来制备。11.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中环孢素a以5至30mg的有效日剂量施用。12.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中环孢素a以20mg的有效日剂量施用。13.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述组合物每天两次施用至所述患者。14.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述组合物在至少24周的时间内施用。15.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中使用标准免疫抑制疗法联合治疗所述双肺移植患者。16.根据第15项所述的供使用的组合物，其中所述标准免疫抑制疗法包括施用选自他克莫司或环孢素、吗替麦考酚酯或西罗莫司、和皮质类固醇中的一种或多种活性成分。17.根据第15项或第16项所述的供使用的组合物，其中所述标准免疫抑制疗法包括口服施用他克莫司，吗替麦考酚酯和泼尼松。18.根据第15至17项中任一项所述的供使用的组合物，其中，以0.06mg/kg的量施用他克莫司。19.根据第15至18项中任一项所述的供使用的组合物，其中以1g的量施用所述麦考酚酸酯。20.根据第15至19项中任一项所述的供使用的组合物，其中以约20至约25mg/天的量施用泼尼松。21.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述制剂用电子振动膜雾化器雾化。22.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中所述制剂用雾化器雾化。23.根据前述任一项所述的供使用的组合物，其中，阻止了被诊断出患有bos的所述双肺移植患者的bos的进展，或者与治疗开始时的一秒用力呼气容积(fev1)值相比，被诊断出患有bos的所述双肺移植患者的bos的进展被降低到所述患者的fev1-值下降最多20％的水平。24.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中从治疗开始至少48周后，被诊断出患有bos的所述双肺移植患者的无事件生存率为至少60％，其中所述事件选自fev1下降至少20％，需要再次移植和/或死亡。25.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中与单独使用标准免疫抑制疗法(soc)进行治疗时发生选自fev1下降至少20％、需要再次移植和/或死亡的事件的风险相比，用本发明的雾化形式的包含csa的所述组合物治疗的所述双肺移植患者在治疗开始后至少48周内发生相应事件的风险降低了至少30％(绝对)，优选降低了至少35％(绝对)。26.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中，被诊断患有bos的所述双肺移植患者的fev1的平均每月变化(δfev1/月)保持基本恒定或具有约0至约0.04l/月的值。27.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中在被诊断患有bos的所述双肺移植患者的基线(治疗开始)和治疗期结束之间fev1的绝对变化(δfev1/绝对)不超过350ml。28.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中，相对于单独使用标准免疫抑制疗法(soc)治疗的患者的fev1的损失，被诊断患有bos的所述双肺移植患者的fev1的相对损失(δfev1/相对)为至少200ml。29.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中用支气管肺泡灌洗术(bal)通过支气管镜检查确定，所述双肺移植患者在治疗开始之前，优选在治疗开始后的第24周，没有被诊断出患有气道狭窄。30.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中在随机分组之前，优选在治疗开始后的第24周，被诊断出患有bos的所述双肺移植患者未被诊断出患有未经治疗的感染。31.根据前述项目中任一项所述的供使用的组合物，其中在被诊断出患有bos并用包含csa的所述液体组合物治疗的所述双肺移植患者中，csa的最大血药浓度最高100ng/ml，优选最高60ng/ml。32.根据第21或22项所述的供使用的组合物，其中所述雾化器可以以至少约0.1ml/min的速率递送单位剂量。33.用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)，或用于治疗bos或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法，该方法包括以下步骤：(a)确定接受双肺移植并且处于发展bos的风险或随后发展bos的患者；和(b)通过吸入向所述患者施用治疗有效剂量的雾化环孢素a(csa)。34.根据第33项的用于治疗双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于预防或延迟被诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的方法，其用于在诊断为bos的双肺移植患者中治疗闭塞性细支气管炎综合征(bos)或预防或延迟bos的进展，该方法包括以下步骤：(a)确定接受双肺移植并且随后发展bos的患者；和(b)通过吸入向所述患者施用治疗有效剂量的雾化环孢素a(csa)。35.根据第33或34项的方法，其中所述双肺移植患者被诊断出患有bos1或bos2(bosi或ii级)。36.根据第33或34项的方法，其中所述csa以包含环孢素a脂质体(l-csa)的雾化组合物的形式施用。37.根据第33项的方法，其中所述csa以包含环孢素a(csa)的雾化液体组合物的形式施用。38.根据第33项的方法，其中csa以环孢素a脂质体(l-csa)的形式施用。39.根据第36项的方法，其中所述组合物还包含含水液体载体。40.根据第39项的方法，其中含水液体载体包含盐水。41.根据第39或40项的方法，其中含水液体载体基本上由盐水组成，优选地由浓度为0.25％(w/v)的盐水组成。42.根据第37项的方法，其中所述液体组合物的csa浓度为0.5-10mg/ml。43.根据第38项的方法，其中所述液体组合物通过冻干形式的环孢素a脂质体(l-csa)的重构来制备。44.根据第33项的方法，其中以5至30mg的有效日剂量施用环孢素a。45.根据第33项的方法，其中以20mg的有效日剂量施用环孢素a。46.根据第33项的方法，其中所述组合物每天两次施用至所述患者。47.根据第33项的方法，其中在至少24周的时间内施用csa。48.根据第33项的方法，其中使用标准免疫抑制疗法联合治疗所述双肺移植患者。49.根据第48项的方法，其中所述标准免疫抑制疗法包括施用选自他克莫司或环孢素、吗替麦考酚酯或西罗莫司、和皮质类固醇中的一种或多种活性成分。50.根据第48项的方法，其中所述标准免疫抑制疗法包括口服施用他克莫司，吗替麦考酚酯和泼尼松。51.根据第49或50项的方法，其中以0.06mg/kg的量施用他克莫司。52.根据第49或50项的方法，其中以1g的量施用所述麦考酚酸酯。53.根据第49或50项的方法，其中以约20至约25mg/天的量施用泼尼松。54.根据第33项的方法，其中所述制剂用电子振动膜雾化器雾化。55.根据第33项的方法，其中所述制剂用雾化器雾化。56.根据第36项的方法，其中以至少75％的依从率吸入所述制剂。57.根据第33项的方法，其中阻止了处于发展bos的风险或被诊断出患有bos的所述双肺移植患者的bos的进展，或者与治疗开始时的一秒用力呼气容积(fev1)值相比，所述双肺移植患者的bos的进展被降低到所述患者的fev1-值下降最多20％的水平。58.根据第33项的方法，其中从治疗开始至少48周后，处于发展bos的风险或被诊断出患有bos的所述双肺移植患者的无事件生存率为至少60％，其中所述事件选自fev1下降至少20％，需要再次移植和/或死亡。59.根据第33项的方法，其中与单独使用标准免疫抑制疗法(soc)进行治疗时发生选自fev1下降至少20％、需要再次移植和/或死亡的事件的风险相比，用本发明的雾化形式的包含csa的所述组合物治疗的所述双肺移植患者在治疗开始后至少48周内发生相应事件的风险降低了至少30％(绝对)，优选降低了至少35％(绝对)。60.根据第33项的方法，其中被诊断患有bos的所述双肺移植患者的fev1的平均每月变化(δfev1/月)保持基本恒定或具有约0至约0.04l/月的值。61.根据第33项的方法，其中在被诊断患有bos的所述双肺移植患者的基线(治疗开始)和治疗期结束之间fev1的绝对变化(δfev1/绝对)不超过350ml。62.根据第33项的方法，其中相对于单独使用标准免疫抑制疗法(soc)治疗的患者的fev1的损失，被诊断患有bos的所述双肺移植患者的fev1的相对损失(δfev1/相对)为至少200ml。63.根据第33项的方法，其中用支气管肺泡灌洗术(bal)通过支气管镜检查确定，处于发展bos的风险或被诊断患有bos的所述双肺移植患者在治疗开始之前，优选在治疗开始后的第24周，尚未被诊断出患有气道狭窄。64.根据第33项的方法，其中在治疗开始之前，优选在治疗开始后的第24周，处于发展bos的风险或被诊断出患有bos的所述双肺移植患者尚未被诊断出患有未经治疗的感染。65.根据第33项的方法，其中在处于发展bos的风险或被诊断出患有bos并用包含csa的所述液体组合物治疗的所述双肺移植患者中，csa的最大血药浓度最高100ng/ml，优选最高60ng/ml。66.根据第54或55项的方法，其中所述雾化器可以以至少约0.1ml/min的速率递送单位剂量。65.包含环孢素a脂质体(l-csa)的组合物在制备用于预防双肺移植患者的闭塞性细支气管炎综合征(bos)或用于治疗bos或用于预防或延迟诊断患有bos的双肺移植患者中bos的进展的药物的用途，其中通过吸入雾化形式的包含治疗有效剂量的环孢素a的所述组合物，向所述患者施用所述组合物。附图详细描述图1示出了流程图，该流程图总结了在以下实施例中描述的研究中单肺移植患者和双肺移植患者的入选细节。总共评估了43名患者的资格，其中23名患者符合资格标准。随机分组前，一名患者死亡，一名患者退出研究。随机分配21名患者；11名到l-csa治疗组，10名到soc(标准疗法，即标准免疫抑制疗法)治疗组。一名l-csa患者在24周的随访中由于进展性皮肤癌而退出研究。由于该患者的进展性癌症，停止了标准的全身性免疫抑制疗法，并将该患者作为治疗对象进行治疗。图2显示了在48周研究期内被诊断患有bos的单肺移植患者和双肺移植患者的bos无进展生存率的kaplan-meier图(即，单肺移植患者和双肺移植患者之间无区别)。与l-csa相比，soc组患者在研究期间有治疗失败风险更高的趋势(定义为：bos进展，再移植或死亡)(风险比(hazardratio，hr)：3.19；95％的置信区间(95％ci)：0.62-16.5；p＝0.14)。图3示出了仅被诊断患有bos的双肺移植患者的无事件生存率的kaplan-meier图(即，没有单肺移植患者的结果)。l-csa治疗组中被诊断患有bos的双肺移植患者的无事件生存率为83％，而仅接受soc治疗的组为50％。此外，对于双肺移植患者，风险比(hr)为3.43，95％ci为0.31–37.95；p＝0.29，这意味着与接受l-csa治疗的双肺移植患者相比，仅接受soc治疗的双肺移植患者组发生bos进展、需要再次移植或死亡的风险高3.43倍。图4显示了仅单肺移植患者的无事件生存率的kaplan-meier图(即，无双肺移植患者的结果)：l-csa治疗组中单肺移植患者的无事件生存率为80％，而仅接受soc治疗的组为50％。此外，对于单肺移植患者，风险比(hr)为2.78，95％ci为0.29–26.98；p＝0.36，这意味着与接受l-csa的单肺移植患者相比，仅接受soc治疗的单肺移植患者组经历bos进展、需要再次移植或死亡的风险要高2.78倍。图5显示了随机分组后5年单肺移植患者和双肺移植患者总生存率的kaplan-meier图。数据表明对经l-csa治疗的单肺移植患者或双肺移植患者有明显改善：在接受5年随访的11名接受l-csa治疗的受试者中有5名存活(45％)，而最初的10名仅接受soc治疗的患者中有0名存活。经l-csa治疗的患者组的中位生存期为4.1年，而仅接受soc治疗的患者组的中位生存期为2.9年(p＝0.03)。死亡原因是慢性同种异体移植排斥反应，但有2例例外，其中(l-csa)有1例因弥漫性皮肤癌症(disseminatedskincancer)死亡和(soc)有1例因肾衰竭死亡。图6显示了在对随机斜率混合模型中的随机化前和随机化后的测量数据进行调整之后，对单肺移植患者和双肺移植患者的整体fev1发展的分析(即，单肺移植患者和双肺移植患者之间无区别)：在接受l-csa治疗的患者组(11例患者)中，观察到平均绝对fev1值从随机分组时的约1.75l轻微下降到在48周结束时的1.70l，而对于soc治疗的患者组(10位患者；一名患者由于需要人工呼吸而没有进行随机分组后pft测量；该患者被纳入fev1斜率计算中：在该患者进行人工呼吸时，fev1值估算为0；该患者没有进行随机分组后pft(肺功能测试)测量)，观察到fev1值从约1.75l稳定且显著地下降至约1.15l。在对单肺移植患者和双肺移植患者的总体分析中，接受l-csa治疗的患者组的fev1的每月变化(δfev1/月)为-0.007，95％ci为-0.033至0.018，而在soc治疗的患者组中为-0.054，95％ci为-0.100至-0.006(p＝0.10)。图7显示了在l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)中的双肺移植患者(即无单肺移植患者的结果)在48周研究期内的平均绝对fev1值的变化：在经l-csa治疗的患者组(6名患者)中，平均绝对fev1值在整个48周内保持大致恒定在1.8l。与此相反，在相同时期内，soc组中的双肺移植患者组(4名患者)的平均绝对fev1值从大约1.8l显著降低至约1.1l。因此，双肺移植患者的fev1的每月变化(δfev1/月)在l-csa治疗组中为0.000，95％ci为-0.049至0.049，而在soc治疗组中为-0.061，95％ci为-0.096至-0.026(p＝0.07)。图8显示了l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)的单肺移植患者(即无双肺移植患者的结果)在48周研究期内的平均绝对fev1值的变化：在l-csa治疗的患者组(5名患者)中，观察到平均绝对fev1值从在随机分组后即时的大约1.75l降低至随机分组后第48周的大约1.4l。对于soc治疗组中的单肺移植患者组(6名患者；一名患者由于需要人工呼吸而没有进行随机分组后pft测量；该患者被纳入在fev1斜率计算中：在该患者进行人工呼吸时，fev1值估算为0；该患者没有进行随机分组后pft(肺功能测试)测量)，在相同时期内，平均fev1值从大约1.75l显著下降至大约1.05l(由于计算方法，soc治疗组的图表在第1个月结束)。因此，双肺移植患者的fev1的每月变化(δfev1/月)在l-csa治疗组中为-0.029，95％ci为-0.019至0.001，而在soc治疗组中为-0.600，95％ci为-2.074至0.872(p＝0.37)。下列实施例用于举例说明本发明。然而，不应理解为限制本发明的范围：实施例实施例1：液体csa制剂的体外雾化表征制备了由活性物质csa(ph.eur.)和赋形剂lipoids100，聚山梨酯80，乙二胺四乙酸二钠，磷酸氢二钠十二水合物和磷酸二氢钠一水合物组成的吸入用环孢素脂质体液体制剂。将制剂调节至ph(6.5±0.2)和重量渗透压摩尔浓度(350-450mosmol/kg)的生理耐受值。使用带有混合室的雾化器产生气溶胶(aerosol)，混合室的体积约为95ml。使用呼吸模拟，激光衍射和撞击器测量对由该雾化器产生的气溶胶进行了表征。这些测量的结果总结在表1中。表1：用雾化器雾化的环孢素脂质体(l-csa)制剂的气溶胶特性标称药物含量(nominaldrugamount)[mg]15.0±0.4mmd[μm]2.8±0.1dd[％]75.9±2.6rd[％<5μm]67.7±2.8rd[％,<3.3μm]46.7±2.9数值表示为平均值±标准偏差；mmd＝质量中位直径；dd＝输送剂量(雾化器咬嘴(ex-mouthpiece))；rd＝可吸入剂量达到76％的输送剂量(dd)(咬嘴处的量)和约47％的小于3.3μm的小滴可吸入剂量(rd)。小于3.3pm的颗粒很有可能沉积在肺的远端，这被认为是有效保护肺移植的最佳药物沉积部位。通常，小于5μm的气溶胶液滴很可能在整个肺部沉积，因此在某种程度上也应认为是对肺移植进行保护。小于5μm的液滴的可吸入剂量约为68％。根据这些结果，可以得出结论，对于10mg的标称药物量，相应的输送剂量(以mg为单位)将为约7.6mgcsa。低于5和3.3pm的小滴的可吸入剂量(以mg为单位)分别为约6.8和4.7mgcsa。实施例2：重构的csa制剂的体外气溶胶表征将蔗糖作为冻干保护剂添加至实施例1中所述的制剂中。之后，将制剂冻干。在即将雾化之前，用2.3ml的0.25％盐水重构(reconstitute)该制剂。重构后，脂质体的大小在40-100nm(0.040-0.10μm)范围内，多分散指数小于0.40。用具有与实施例1中的雾化器相同的吸入室(即体积约95ml的混合室)的雾化器雾化重构的制剂。重构的制剂产生的气溶胶特征数据的结果如表2所示。与实施例1相比，结果没有实质性差异。表2：用雾化器雾化的重构环孢素脂质体制剂的气溶胶特性填充体积[ml]2.5标称药物含量[mg]10.4±0.0mmad[μm]3.3±0.1gsd1.5±0.0dd[％]75.3±2.6dd[mg]7.9±0.3rd[％,<5μm]65.3±2.8rd[mg,<5μm]6.8±0.3rd[％,<3.3μm]37.7±2.2rd[mg,<3.3μm]3.9±0.2雾化时间[min]7.4±0.1数值表示为平均值±标准偏差；mmad＝空气动力学质量中位直径；gsd＝几何标准偏差；dd＝输送剂量(雾化器咬嘴)；rd＝可吸入剂量实施例3：吸入环孢素治疗bos的临床试验研究入选：评估了43名患者的资格，其中23名患者符合资格标准。在随机分组之前，一名患者死亡，一名患者退出。随机分配21名患者；l-csa治疗组11名，soc治疗组10名。(图1)l-csa治疗组中一名患者在24周的随访期间由于进展性皮肤癌而退出研究。在这种情况下，停止了标准的全身性免疫抑制疗法。如果bos1或bos2患者在随机分组之前以及在第24周以及在临床指征(indicate)时没有未经治疗的感染和没有支气管肺泡灌洗(bal)支气管镜检查的气道狭窄，则符合资格。闭塞性细支气管炎综合征(bos)分级应用如下：基于双月fev1测量，连续进行bos评估。bo的定义是根据estenne等人的出版物中修改的bos标准。(estennem,等人.bronchiolitisobliteranssyndrome2001:anupdateofthediagnosticcriteria.jhaertlungtransplant.2002；21(3):297-310)。应用了以下定义和标准：bos0：fev1>基线的90％bos0-p：fev1为基线的81％至90％bos1：fev1为基线的66％至80％bos2：fev1为基线的51％至65％bos3：fev1为基线的50％或更少研究设计：21名诊断患有bos1级或2级的单肺移植患者或双肺移植患者入选了这项单中心、随机、开放标签的临床试验，评估了对于bos1和bos2(1级-2级)雾化l-csa加上标准免疫抑制疗法的加和与单独的标准免疫抑制疗法(soc)的比较。计划对患者进行48周的随访(在该研究组中进行如下所述的24周的l-csa施用，以及24周的无给药的随访)。在达到主要终点后，soc组中的患者可以转组(crossover)到接受l-csa药物的组；如果主要终点在24周的随访中发生，soc组中的患者可以转入l-csa组。患者被分别分配接受以下治疗：对于单肺移植(slt)患者或双肺移植(dlt)患者(l-csa组)，患者除了接受标准治疗全身性免疫抑制疗法以外还分别接受每日两次5mg/1.25ml或10mg/2.5mll-csa治疗24周，或者(soc组)仅接受标准治疗全身性免疫抑制疗法24周，然后连续24周不使用研究药物(l-csa)。l-csa制剂以在0.25％盐水中的冻干粉形式使用，并使用雾化器(pari，德国)雾化。将过滤器放置在吸入室的排气阀处。此外，雾化器的设计方式只有在将监控了吸入时间和持续时间的钥匙卡(芯片卡)引入雾化器时才能操作。治疗方案：患者被随机分配到l-csa组(治疗)或soc组(不使用csa治疗)。除了由他克莫司(0.06mg/kg；谷水平8-12ng/ml)、吗替麦考酚酯(1gmpobid)或西罗莫司(每天2mgpo；水平7-12ng/ml)和泼尼松(20mg/天)组成的标准免疫抑制疗法以外，还以5mg或10mg剂量每日两次施用l-csa(分别用于单肺移植患者或双肺移植患者)，而soc组仅接受标准免疫抑制疗法。使用时，西罗莫司和他克莫司的合并血药浓度保持在4-5ng/ml之间。治疗医师根据研究中心对临床参数和方案的评估进行调整。预防感染包括缬更昔洛韦，伏立康唑和磺胺甲恶唑/甲氧苄啶。增强的免疫抑制疗法包括脉冲性皮质类固醇(每天静脉注射1gm剂量的甲基强的松龙，连续3天，或者口服泼尼松(100mg逐渐减少至10mg，持续14天)或抗胸腺细胞球蛋白(每天每公斤1.5mg，持续3至5天))。fev1对bos的进展在治疗并发疾病之前和之后进行了验证，至少相隔三周进行了测量，并由两名共同研究人员进行了验证。终点：bos进展的主要终点是：1)fev1从随机下降≥20％；2)死亡；或3)再次移植。次要终点包括肺功能变化，气溶胶耐受性，药代动力学，细胞因子变化和药物毒性。每隔30天收集一次常规实验室数据。通过使用luminex100读卡器的多重测定在随机分组之前和治疗期结束时从bal流体测量细胞因子(il-1β，il-2，il-6，il-8，il-10，il-17，ifn-γ和tnf-α)，并使用biorad的软件进行分析。统计分析：通过kaplan和meier的方法以及对数秩检验(log-ranktesting)比较了bos进展的合并主要终点和总体患者生存期。通过cox比例风险模型评估了作为影响存活的因素的移植类型。数据以风险比(hr)和95％置信区间(95％ci)表示。对于肺功能分析，使用了多元线性混合效应统计模型(procmixed，sas版本9.1.3；sasinstitute，cary，nc)(lairdnm,warejh.random-effectsmodelsforlongitudinaldata；biometric1982；38:963-974)。混合模型分析了随机分组前和随机分组后组内和组间值，以调整可能影响随机分组后功能的变化。通过两因素方差分析比较细胞因子值。混合模型统计数据用于分析实验室值和药物水平。所有结果(包括转组病例)均作为治疗意向进行了分析。对总共242次肺功能检查，42份细胞因子的支气管肺泡灌洗(bal)标本和603份血样进行了分析。结果患者特征：11名患者被随机分配到l-csa组，而10名被随机分配到soc组(见图1)。两组的基线特征和临床管理相似。基线人口统计学特征的分布在各组之间没有显著差异。l-csa的平均治疗时间为167.5±12.5天。没有因l-csa引起的不良事件需要退出研究，并且没有患者失去随访。soc组中达到主要终点的2名患者接受了l-csa的转组治疗，并且一名患者随机分配到l-csa，在最初的24周给药间隔后重新开始l-csa(fev1下降>20％)。一名患者在最初的24周l-csa间隔后退出了研究，因为复发性皮肤癌而需要停止全身性免疫抑制疗法。闭塞性细支气管炎的稳定：通过kaplan-meier总体生存分析对无事件生存率进行分析，即单肺移植患者和双肺移植患者无分层(stratification)，以及单肺移植或双肺移植(在本文中也分别称为“slt”或“dlt”)分层。对在任何时间以任何原因终止他们的试验而没有遇到终点事件的患者进行检查。为了执行分析，定义了全分析集(fas)和按方案分析集(pps)。fas包括所有接受至少一剂量研究治疗的患者。pps包括所有来自fas且没有任何重大违反协议的行为的患者，这些行为被认为损害了科学方面和研究结果的解释(例如，错误的入选，依从率低于75％，禁止使用的合并用药)。与soc组相比，根据l-csa治疗组的主要研究终点观察到bos稳定，并且在双肺接受者和单肺接受者中进行了明确分析：在11名接受l-csa和soc治疗的患者中有9名无事件生存率是82％，而仅接受soc治疗的10名患者中有5名的无事件生存率是50％。(hr(风险比)：3.19；95％ci(置信区间)：0.62-16.50；p＝0.14；见图2)对于双肺移植患者，l-csa治疗组的无事件生存率为83％，而仅接受soc治疗的组为50％。此外，对于双肺移植患者，风险比(hr)为3.43，95％ci为0.31-37.95；p＝0.29，这意味着与接受l-csa治疗的双肺移植患者相比，仅接受soc治疗的双肺移植患者发生bos进展、需要再次移植或死亡的风险高3.43倍。(见图3)对于单肺移植患者，l-csa治疗组的无事件生存率为80％，而仅接受soc治疗的组为50％。此外，对于单肺移植患者，风险比(hr)为2.78，95％ci为0.29-26.98；p＝0.36，这意味着与接受l-csa治疗的单肺移植患者相比，仅接受soc治疗的单肺移植患者组发生bos进展、需要再次移植或死亡的风险仅高2.78倍。(见图4)在l-csa组中发生主要事件(primaryevent)的2例病例中，一例对重新开始l-csa(基于主要终点标准)有反应，另一例接受再次移植；在soc组5例发生主要事件的病例中，有2例接受再次移植，2例需要人工呼吸，而2例从soc转组的病例中有1例对l-csa有反应。从图2至4的kaplan-meier可以看出，当在整个48周的治疗和观察期内进行分析时，l-csa施用至双肺移植患者的效果明显高于单肺移植患者。单肺移植患者的以生存率来衡量的风险比(hr)1：2.78(l-cs-a：soc)，远不如双肺移植患者的风险比1：3.43(l-csa：soc)。随机分配后5年的总体生存率表明，经l-csa治疗的单肺移植患者或双肺移植患者有显著改善：在接受5年随访的11名接受l-csa治疗的参与者中，有5名存活(45％)，而仅接受soc治疗的最初10例患者中有0例存活。经l-csa治疗的患者组的中位生存期为4.1年，而仅接受soc治疗的患者组的中位生存期为2.9年(p＝0.03；见图5)。死亡原因是慢性同种异体移植排斥反应，但有两例除外，(l-csa)有一例因弥漫性皮肤癌死亡和(soc)有1例因肾衰竭死亡。肺功能改变作为在l-csa组和soc组中诊断患有bos的单肺移植患者和双肺移植患者中bos稳定或进展的一项指标，fev1值(第一秒用力呼气后的用力呼气容积)的变化在48周的研究期内已观察到。如图6所示，在调整随机斜率混合模型中的随机分组前和随机分组后的测量数据后，对单肺移植患者和双肺移植患者的总体fev1发展的分析得出了明确的结果：在l-csa治疗患者组(11名患者)中观察到平均绝对fev1值从随机分组时的大约1.75l开始轻微下降到在48周结束时的1.70l，而对于soc治疗的患者组(10名患者；一名患者由于需要人工呼吸而没有进行随机分组后pft测量；该患者被纳入fev1斜率计算中：在该患者进行人工呼吸时，fev1值估算为0；该患者没有进行随机分组后pft(肺功能测试)测量)，观察到fev1值从约1.75l稳定且显著地下降至约1.15l。应注意的是，在对单肺移植患者和双肺移植患者的总体分析中，接受l-csa治疗的患者组的fev1的每月变化(δfev1/月)为-0.007，95％ci为-0.033至0.018，而在soc治疗的患者组中为-0.054，95％ci为-0.100至-0.006(p＝0.10)。如图7所示，在48周的研究期内，在l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)中仅双肺移植患者给出了更为显著的结果：在接受l-csa治疗的患者组(6名患者)中，平均绝对fev1值在整个48周内保持大致恒定在1.8l。与此相反，在相同时期内，soc组中的双肺移植患者组(4名患者)的平均绝对fev1值从大约1.8l显著降低至约1.1l。因此，应注意的是，双肺移植患者的fev1的每月变化(δfev1/月)在l-csa治疗组中为0.000，95％ci为-0.049至0.049，而在soc治疗组中为-0.061，95％ci为-0.096至-0.026(p＝0.07)。如图8所示，在48周的研究期内，在l-csa治疗组(上图；“l-csa”)和soc治疗组(下图；“soc”)中仅单肺移植患者的绝对fev1值的变化表现出相似的趋势：在l-csa治疗的患者组(5名患者)中，观察到平均绝对fev1值从在随机分组后即时的大约1.75l降低至随机分组后第48周的大约1.4l。对于soc治疗组中的单肺移植患者组(6名患者；一名患者由于需要人工呼吸而没有进行随机分组后pft测量；该患者被纳入在fev1斜率计算中：在该患者进行人工呼吸时，fev1值估算为0；该患者没有进行随机分组后pft(肺功能测试)测量)，在相同时期内，平均fev1值从大约1.75l显著下降至大约1.05l(由于计算方法，soc治疗组的图表在第1个月结束)。因此，双肺移植患者的fev1的每月变化(δfev1/月)在l-csa治疗组中为-0.029，95％ci为-0.019至0.001，而在soc治疗组中为-0.600，95％ci为-2.074至0.872(p＝0.37)。当前第1页12