GLP-1受体激动剂及其用途的制作方法

发明领域本文提供作为glp-1r激动剂的苯并咪唑以及4-氮杂-、5-氮杂-、和7-氮杂-苯并咪唑的6-甲酸，制备所述化合物的方法，以及包括将所述化合物施用于需要其的哺乳动物的方法。发明背景由于其患病率日渐增加以及相关的健康风险，糖尿病是重要的公众健康问题。此疾病的特征在于由胰岛素产生、胰岛素作用、或二者的缺陷导致的高水平血糖。已确认出二种主要形式的糖尿病，1型和2型。1型糖尿病(t1d)是于身体的免疫系统破坏胰腺β细胞时发展出的，所述胰腺β细胞是身体内制造激素胰岛素(调节血糖)的唯一细胞。为了生存，患有1型糖尿病的人必须通过注射或泵施用胰岛素。2型糖尿病(通称为t2dm)通常是从胰岛素抵抗时或胰岛素未充分生产以维持可接受的血糖水平时开始的。目前已有供治疗高血糖症且既而治疗t2dm的各种药理学方法(hampp,c.等人useofantidiabeticdrugsintheu.s.,2003-2012,diabetescare2014,37,1367-1374)。这些可分组成六个重要类别，各自通过不同的主要机制起作用：(a)促胰岛素释放药物，包括磺酰基-脲类(例如，格列吡嗪(glipizide)、格列美脲(glimepiride)、格列本脲(glyburide))、美格列奈类(meglitinides)(例如，纳格列定(nateglidine)、瑞格列奈(repaglinide))、二肽基肽酶iv(dpp-iv)抑制剂(例如，西格列汀(sitagliptin)、维格列汀(vildagliptin)、阿格列汀(alogliptin)、度格列汀(dutogliptin)、利格列汀(linagliptin)、沙格列汀(saxogliptin))、以及胰高血糖素样肽-1受体(glp-1r)激动剂(例如，利拉鲁肽(liraglutide)、阿必鲁肽(albiglutide)、艾塞那肽(exenatide)、利西那肽(lixisenatide)、度拉糖肽(dulaglutide)、索马鲁肽(semaglutide))，其通过作用于胰腺β细胞来增强胰岛素的分泌。磺酰基-脲类和美格列奈类的功效和耐受性受限，造成体重增加且常诱发低血糖症。dpp-iv抑制剂的功效有限。已上市的glp-1r激动剂是通过皮下注射施用的肽。利拉鲁肽另外经批准可用于治疗肥胖症。(b)双胍类(例如，二甲双胍(metformin))被认为主要是通过降低肝脏葡萄糖产生而起作用的。双胍类常会造成胃肠紊乱以及乳酸中毒，而进一步限制其用途。(c)α-葡萄糖苷酶的抑制剂(例如，阿卡波糖(acarbose))降低肠葡萄糖吸收。这些药剂常会造成胃肠紊乱。(d)噻唑烷二酮类[例如，吡格列酮(pioglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)]作用于肝脏、肌肉和脂肪组织内的特定受体(过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-gamma))。它们调控脂质机制，既而增强这些组织对于胰岛素作用的反应。经常使用这些药物可能导致体重增加且可诱发水肿和贫血。(e)胰岛素单独或与前述药剂组合用于更严重的病例，且经常使用还可能导致体重增加且伴随低血糖症的风险。(f)钠-葡萄糖协同转运蛋白2(sodium-glucoselinkedtransportercotransporter2)(sglt2)抑制剂(例如，达格列净(dapagliflozin)、恩格列净(empagliflozin)、卡格列净(canagliflozin)、埃格列净(ertugliflozin))抑制肾脏内葡萄糖的再吸收且因而降低血液内的葡萄糖水平。这类新兴药物可能与酮酸中毒和尿道感染相关联。然而，除了glp-1r激动剂和sglt2抑制剂之外，这些药物的功效皆受到限制且未能解决最重要的问题，β细胞功能衰退和相关的肥胖症。在现代社会中，肥胖症是非常普遍的慢性疾病且与许多医学问题相关联，包括高血压、高胆固醇血症以及冠心病。其还进一步与t2dm和胰岛素抵抗高度关联，后者通常伴随高胰岛素血症或高血糖症，或二者。此外，t2dm与冠状动脉疾病风险增加二至四倍有关。目前，可以高效率地消除肥胖症的唯一治疗是减肥手术，但此治疗昂贵且风险高。药理学干预通常不太有效且涉及副作用。因此，显然需要有副作用较少且方便施用的更有效的药理干预。虽然t2dm最常是与高血糖症和胰岛素抵抗相关联，但是与t2dm相关联的其他疾病还包括：肝脏胰岛素抵抗、糖耐量受损、糖尿病性神经病变、糖尿病性肾病变、糖尿病性视网膜病变、肥胖症、血脂异常、高血压、高胰岛素血症和非酒精性脂肪肝病(nafld)。nafld是代谢综合征的肝脏表现，且是一系列的肝脏病况，包含脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、纤维化、硬化和最终的肝细胞癌。nafld和nash被视为主要的脂肪肝疾病，因为它们占了肝脏脂质升高个体的最大比例。nafld/nash的严重性是基于脂质的存在、炎性细胞浸润、肝细胞气球样变、以及纤维化的程度。虽然并非所有患有脂肪变性的个体皆会进展到nash，但是有相当一部分的个体会。glp-1是响应于食物的摄取，由肠内的l-细胞所分泌的30个氨基酸长的肠促胰岛素激素。glp-1已显示出以生理和葡萄糖依赖性方式刺激胰岛素的分泌，降低胰高血糖素分泌、抑制胃排空、降低食欲、以及刺激β-细胞的增殖。于非临床实验中，glp-1通过刺激对于葡萄糖依赖性的胰岛素分泌重要的基因的转录以及通过促进β-细胞新生，来促进持续的β-细胞能力(meier等人，biodrugs.2003;17(2):93-102)。在健康的个体中，glp-1通过刺激胰腺的葡萄糖依赖性胰岛素分泌，导致周边的葡萄糖吸收增加，而在调控餐后血糖水平中起重要作用。glp-1也会遏止胰高血糖素分泌，导致肝脏葡萄糖产量减少。此外，glp-1推迟胃排空且减缓小肠运动，从而推迟食物吸收。在患有t2dm的人中，glp-1的正常的餐后升高不存在或减少(vilsbollt等人，diabetes.2001.50;609-613)。holst(physiol.rev.2007,87,1409)和meier(nat.rev.endocrinol.2012,8,728)描述了glp-1受体激动剂，如glp-1、利拉鲁肽和艾塞那肽-4(exendin-4)，具有通过降低空腹和餐后葡萄糖(fpg和ppg)来改善t2dm患者的血糖控制的三个主要药理活性：(i)增加葡萄糖依赖性胰岛素分泌(改良的第一和第二阶段)，(ii)在高血糖情况下的胰高血糖素遏止活性，(iii)推迟胃排空速率，从而导致膳食所衍生的葡萄糖吸收的减缓。仍然需要有易于施用的心血管代谢和相关疾病的预防和/或治疗。附图简述图1表示化合物实施例7的tris盐的无水(无水物)晶型(形式1)的观察的粉末x射线衍射图。图2表示化合物实施例10的tris盐的无水(无水物)晶型(形式a)的观察的粉末x射线衍射图。发明详述本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐，其中r是f、cl、或-cn；p是0或1；环a是苯基或6-元杂芳基；m是0、1、2、或3；每个r1独立地选自：卤素、-cn、-c1-3烷基、和-oc1-3烷基，其中c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基被0至3个f原子取代；r2是h或-c1-3烷基，其中烷基被0至1个oh取代；每个r3独立地是f、-oh、-cn、-c1-3烷基、-oc1-3烷基、和-c3-4环烷基，或者2个r3可一起环化形成-c3-4螺环烷基，其中若化合价允许，则c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基、环烷基、或螺环烷基可被0至3个f原子和被0至1个-oh取代；q是0、1或2；x-l是n-ch2、chch2、或环丙基；y是ch或n；r4是-c1-3烷基、-c0-3亚烷基-c3-6环烷基、-c0-3亚烷基-r5、或-c1-3亚烷基-r6，其中若化合价允许，则所述烷基可被0至3个独立地选自0至3个f原子的取代基以及0至1个选自-c0-1亚烷基-cn、-c0-1亚烷基-oro、-so2-n(rn)2、-c(o)-n(rn)2、-n(c=o)(rn)、和-n(rn)2的取代基取代；且其中若化合价允许，则所述亚烷基和环烷基可独立地被0至2个独立地选自0至2个f原子的取代基和0至1个选自-c0-1亚烷基-cn、-c0-1亚烷基-oro、和-n(rn)2的取代基取代；r5是4-至6-元杂环烷基，其中若化合价允许，则所述杂环烷基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：0至1个氧代(=o)，0至1个-cn，0至2个f原子，和0至2个独立地选自-c1-3烷基和-oc1-3烷基的取代基，其中若化合价允许，则c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，0至1个-cn，以及0至1个-oro；r6是5-至6-元杂芳基，其中若化合价允许，则所述杂芳基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：0至2个卤素，0至1个选自-oro和-n(rn)2的取代基，以及0至2个-c1-3烷基，其中若化合价允许，则所述烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，以及0至1个-oro；每个ro独立地是h、或-c1-3烷基，其中c1-3烷基可被0至3个f原子取代；每个rn独立地是h、或-c1-3烷基；z1、z2、和z3各自是-crz，或者z1、z2、和z3中的一个是n且其他两个是-crz；且每个rz独立地是h、f、cl、或-ch3。另一实施方案涉及式ii的化合物或其药学上可接受的盐，其中r是f；p是0或1；环a是苯基或吡啶基；m是0、1、或2；每个r1独立地选自：卤素、-cn、-c1-3烷基、和-oc1-3烷基，其中c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基被0至3个f原子取代；r2是h或ch3；x-l是n-ch2、或环丙基；y是ch或n；z3是-crz或n；且rz是h、f、cl、或-ch3。另一实施方案涉及式iii的化合物或其药学上可接受的盐，其中环a是苯基或吡啶基；m是0、1、或2；每个r1独立地选自f、cl、和-cn；r2是h或ch3；且y是ch或n。另一实施方案涉及式iv的化合物或其药学上可接受的盐，其中m是0、1、或2；每个r1独立地选自f、cl、和-cn；r2是h或ch3；且y是ch或n。另一实施方案涉及式v的化合物或其药学上可接受的盐，其中m是0或1；r1是f、cl、或-cn；r2是h或ch3；且y是ch或n。另一实施方案涉及式iv或式v的化合物，其中环a的苯基或吡啶基具有一个r1，其是于相对于所述苯基或吡啶基连接于二氧杂环戊烷的碳呈对位的位置上取代，以提供：或其药学上可其受的盐，其中每个r1独立地选自f、cl、和-cn；r2是h或ch3；且y是ch或n。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，例如，式i或ii的化合物，或其药学上可接受的盐，其中x-l是n-ch2；且y是ch或n。由本文所描述的实施方案，在这种情况下，x是n且l是ch2。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，例如，式i或ii的化合物，或其药学上可接受的盐，其中x-l是chch2；且y是n。由本文所描述的实施方案，在这种情况下，x是ch且l是ch2。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，例如，式i或ii的化合物，或其药学上可接受的盐，其中x-l是chch2；且y是ch。由本文所描述的实施方案，在这种情况下，x是ch且l是ch2。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，例如，式i或ii的化合物，或其药学上可接受的盐，其中x-l是环丙基；且y是n。于其中x-l是环丙基的实施方案中，式i或ii的化合物提供：。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4是-ch2ch2och3、c1-3亚烷基-r5、或c1-3亚烷基-r6。另一实施方案涉及式ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4如对式i的化合物所定义的。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4是-c1-3烷基，其中若化合价允许，则所述烷基可被0至1个选自下列的取代基取代：-c0-1亚烷基-oro、和-n(rn)2。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4是-(ch2)2och3、或-(ch2)2n(ch3)2。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4是-ch2-r5，其中r5是4-至5-元杂环烷基，其中若化合价允许，则所述杂环烷基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：0至2个f原子，和0至1个选自-och3和-ch2och3的取代基。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中杂环烷基是其中若化合价允许，则杂环烷基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代(例如，替代氢)：0至1个氧代(o=)，0至1个-cn，0至2个f原子，以及0至2个独立地选自-c1-3烷基和-oc1-3烷基的取代基，其中若化合价允许，则c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基独立地取代：0至3个f原子，0至1个-cn，和0至1个-oro，或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中杂环烷基是其中若化合价允许，则杂环烷基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代(例如，替代氢)：0至1个-cn，0至2个f原子，以及0至2个独立地选自-c1-3烷基和-oc1-3烷基的取代基，其中若化合价允许，则c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基可独立被0至3个独立地选自下列的取代基独立地取代：0至3个f原子，0至1个-cn，以及0至1个-oro，或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中杂环烷基是其中若化合价允许，则杂环烷基可被0至1个选自下列的取代基取代(例如，替代氢)：-cn，f原子，和0至1个独立地选自-c1-3烷基和-oc1-3烷基的取代基，其中若化合价允许，则c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，0至1个-cn，以及0至1个-oro，或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中杂环烷基是或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中杂环烷基是其中若化合价允许，则杂环烷基可被0至1个甲基取代，其中所述甲基可被0至3个f原子取代。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中杂环烷基是其中杂环烷基是未被取代的。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中-ch2-r5与r4所连接的氮提供：。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r4是-ch2-r6，其中r6是5-元杂芳基，其中若化合价允许，则所述杂芳基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：0至2个卤素，其中卤素独立地选自f和cl，0至1个-och3，和0至1个-ch3、-ch2ch3、-cf3、或-ch2ch2och3。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中杂芳基是其中若化合价允许，则所述杂芳基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代(例如，替代氢)：0至2个卤素，其中卤素独立地选自f和cl，0至1个选自-oro和-n(rn)2的取代基，或0至2个-c1-3烷基，其中若化合价允许，则烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，和0至1个-oro。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中杂芳基是其中若化合价允许，则所述杂芳基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代(例如，替代氢)：0至2个卤素，其中卤素独立地选自f和cl，0至1个选自-oro和-n(rn)2的取代基，或者0至2个-c1-3烷基，其中若化合价允许，则烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，和0至1个-oro。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中杂芳基是其中若化合价允许，则所述杂芳基可被0至1个-c1-2烷基取代基取代，其中若化合价允许，则烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，以及0至1个-oro；且每个ro独立地是h、或-c1-3烷基。可认识到任何取代基皆可替代被取代的碳或氮上的h。被取代的杂芳基的非限制性实例是：。可认识到h被取代基，例如，r6s(r6的任何杂芳基上允许的取代基)替代，以提供：其中r6s是-c1-2烷基，其中若化合价允许，则所述烷基可被0至3个独立地选自下列的取代基取代：0至3个f原子，和0至1个-ro；且每个ro独立地是h、或-c1-3烷基；或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中杂芳基是：。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中z1、z2、和z3各自是crz。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中rz是h。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中z1、z2、和z3各自是ch。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中r3是-ch3、或-cf3；且q是1。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中每个r1独立地是f、cl、或-cn。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中r4是-ch2-r5。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，或其药学上可接受的盐，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中r4是-ch2-r6。另一实施方案涉及本文的其他实施方案的化合物，例如，式i、ii、iii、iv、或v的化合物，其中化合物是游离酸。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物的任何实施方案，或其药学上可接受的盐，其中环a和r2提供：其中：r是f、cl、或-cn；p是0或1；m是0、1、或2；且每个r1独立地选自：卤素、-cn、-c1-3烷基、和-oc1-3烷基，其中c1-3烷基和oc1-3烷基的烷基被0至3个f原子取代。另一实施方案涉及式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其中r2是h。另一实施方案涉及其中r2是h的本发明的化合物，或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-7-氟-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-7-氟-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及其中r2是ch3的本发明的化合物，或其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-3-(1,3-噁唑-2-基甲基)-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-4-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(吡啶-3-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-5-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-2-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-7-氟-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-2-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-7-氟-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-7-氟-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[(2s)-2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[(2s)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[(2r)-2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[(2r)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案涉及本发明的化合物，其中所述化合物是2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2*-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，其中2*的手性来自c56；2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2*-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，其中2*的手性来自p9；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2*-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，其中2*的手性来自17；2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-7-氟-2*-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，其中2*的手性来自96；或2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2*-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-2-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸，其中2*的手性来自c82；或者其药学上可接受的盐。另一实施方案包括化合物，其是2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，或其药学上可接受的盐，其中所述盐是tris盐。另一实施方案包括化合物，其是作为游离酸的2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸。另一实施方案包括化合物，其是或其药学上可接受的盐。另一实施方案包括化合物2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，或药学上可接受的盐，其中所述盐是tris盐{此化合物的tris盐也称为：1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙烷-2-胺鎓2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸盐}。在某些实施方案中，本发明提供2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸的无水tris盐的晶型。在某些进一步实施方案中，2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸的无水(无水物)tris盐的晶型指定为“形式i”，其是根据其关于，例如，本文所描述的粉末x射线衍射(pxrd)的独特固态特征所表征的(例如，基本上如图1所描绘的)。在某些实施方案中，形式i呈现出包含至少两个特征峰的粉末x-射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含至少三个特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含至少四个特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含至少五个特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在3.7±0.2˚和7.3±0.2˚处的特征峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在3.7±0.2˚、7.3±0.2˚和14.7±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些进一步实施方案中，形式i呈现出进一步包含至少一个峰的粉末x射线衍射图，所述峰就2θ而言选自8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；和16.9±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在3.7±0.2˚；7.3±0.2˚；8.5±0.2˚；10.1±0.2˚；14.7±0.2˚；和16.9±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式i呈现出基本上如图1所示的粉末x射线衍射图。依照2θ度数以及相对强度(相对强度≥3.0%)表示的一系列衍射峰提供于上表x1。如粉末衍射领域公知的，峰(反射)的相对强度可随着样品制备技术、样品安装程序以及所使用的特定仪器而改变。此外，仪器变异以及其他因素可影响2-θ数值。因此，xrpd峰归属可变化±约0.2˚。另一实施方案包括化合物，其是作为游离酸的2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸。另一实施方案包括化合物，其是或其药学上可接受的盐。另一实施方案包括化合物，其是作为游离酸的下列化合物：2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[(2s)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2r)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸。另一实施方案包括化合物：其是2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；2-({4-[(2s)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或2-({4-[(2r)-2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸；或其药学上可接受的盐，其中所述盐是tris盐。另一实施方案包括化合物，其是2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，diast-x2：或其药学上可接受的盐。在某些进一步的实施方案中，本发明提供化合物，其是2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，diast-x2，或其tris盐[即1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙烷-2-胺盐]。化合物结构的左边部分上的手性中心标记为“abs”，以表示手性中心只具有一个立体构型(即，非相对于所述手性中心的外消旋体)。在某些实施方案中，本发明提供2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸，diast-x2的无水tris盐的晶型。在某些进一步实施方案中，2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2的无水(无水物)tris盐的晶型指定为“形式a”，其是根据其关于，例如，本文所描述的粉末x射线衍射(pxrd)的独特固态特征所表征的(例如，基本上如图2所描绘的)。在某些实施方案中，形式a呈现出包含至少两个特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；15.7±0.2˚和17.6±0.2˚处。在某些实施方案中，形式a呈现出包含至少三个特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；15.7±0.2˚和17.6±0.2˚处。在某些实施方案中，形式a呈现出包含特征峰的粉末x射线衍射图，所述特征峰就2θ而言选自7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；15.7±0.2˚和17.6±0.2˚处。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在7.7±0.2˚；和17.6±0.2˚处的特征峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式a呈现出包含就2θ而言在7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；和17.6±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；和15.7±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式i呈现出包含就2θ而言在7.7±0.2˚；15.2±0.2˚；15.7±0.2˚和17.6±0.2˚处的峰的粉末x射线衍射图。在某些实施方案中，形式a呈现出基本上如图2所示的粉末x射线衍射图。依照2θ度数以及相对强度(相对强度≥3.0%)表示的一系列衍射峰提供于上表x2。如粉末衍射领域公知的，峰(反射)的相对强度可随着样品制备技术、样品安装程序以及所使用的特定仪器而改变。此外，仪器变异以及其他因素可影响2-θ数值。因此，xrpd峰归属可变化±约0.2˚。在另外的实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，与至少一种药学上可接受的赋形剂的混合物。这包括了包含下列的药物组合物：如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，与至少一种药学上可接受的赋形剂以及一种或多种本文讨论的其他治疗剂的混合物。本发明也包括了下列实施方案：用作药物的如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐；用于预防和/或治疗本文所讨论的心血管代谢和相关疾病(包括t2dm、糖尿病前期、nash、和心血管疾病)的如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐；治疗需要这种预防和/或治疗的对象中的glp-1r激动剂适应的疾病的方法，包括向所述对象施用治疗有效量的如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐；如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗glp-1r激动剂适应的疾病或病况的药物的用途；用于治疗glp-1r激动剂适应的疾病或病况的如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐；或者用于治疗glp-1r激动剂适应的疾病或病况的药物组合物，其包含如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐。每个实例或其药学上可接受的盐可单独地，或者与任何数目的本文所描述的每一个实施方案以任何组合一起成组要求保护。本发明也涉及包含如本文所描述的任一实施方案中所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗和/或预防本文所讨论的心血管代谢和相关疾病(包括t2dm、糖尿病前期、nash、和心血管疾病)。本发明的另一实施方案涉及如本文所描述的任一实施方案所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于治疗和/或预防包括下列的心血管代谢和相关疾病：糖尿病(t1d和/或t2dm，包括糖尿病前期)、特发性t1d(1b型)、成人隐匿性自身免疫糖尿病(lada)、早发型t2dm(eod)、青少年发作的非典型糖尿病(yoad)、青年人的成年型糖尿病(mody)、营养不良相关性糖尿病、妊娠期糖尿病、高血糖症、胰岛素抵抗、肝脏胰岛素抵抗、糖耐量受损、糖尿病性神经病变、糖尿病性肾病变、肾病(例如，急性肾脏障碍、肾小管功能障碍、近端小管的促炎变化)、糖尿病性视网膜病变、脂肪细胞功能障碍、内脏脂肪沉积、睡眠呼吸暂停、肥胖症(包括下视丘性肥胖症和单基因肥胖症)以及相关的合并症(例如，骨关节炎和尿失禁)、进食障碍(包括暴食症、神经性暴食症、以及综合征性肥胖症，例如，prader-willi和bardet-biedl综合征)、因使用其他药剂所造成的体重增加(例如，使用类固醇和抗精神病药所造成的)、过度的糖渴望、血脂异常(包括高脂血症、高甘油三酯血症、总胆固醇增加、高ldl胆固醇、以及低hdl胆固醇)、高胰岛素血症、nafld(包括相关的疾病，例如，脂肪变性、nash、纤维化、硬化、和肝细胞癌)、心血管疾病、动脉粥样硬化(包括冠状动脉疾病)、外周血管疾病、高血压、内皮功能障碍、血管顺应性受损、充血性心力衰竭、心肌梗塞(例如，坏死和细胞凋亡)、中风、出血性中风、缺血性中风、外伤性脑损伤、肺动脉高压、血管成形术后的再狭窄、间歇性跛行、餐后脂血症、代谢性酸中毒、酮病、关节炎、骨质疏松症、帕金森氏病、左心室肥大、外周动脉疾病、黄斑变性、白内障、肾小球硬化、慢性肾衰竭、代谢综合征、x综合征、经前综合征、心绞痛、血栓症、动脉粥样硬化、短暂性脑缺血发作、血管再狭窄、糖代谢异常、空腹血糖受损的病况、高尿酸血症、痛风、勃起功能障碍、皮肤和结缔组织障碍、牛皮癣、足溃疡、溃疡性结肠炎、高apob脂蛋白血症(hyperapoblipoproteinemia)、阿尔兹海默病、精神分裂症、认知功能受损、炎症性肠病、短肠综合征、克罗恩病、结肠炎、肠易激综合征、多囊卵巢综合征的预防或治疗、和成瘾(例如，酒精和/或药物滥用)的治疗。本文所用的缩写如下：本文所用的术语“烷基”意指式-cnh(2n+1)的直链或支链的单价烃基团。非限制性实例包括甲基、乙基、丙基、丁基、2-甲基-丙基、1,1-二甲基乙基、戊基和己基。本文所用的术语“亚烷基”意指式-cnh2n-的直链或支链的二价烃基团。非限制性实例包括亚乙基和亚丙基。本文所用的术语“环烷基”意指含有至少三个碳原子的式-cnh(2n-1)的环状、单价烃基团。非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。本文所用的术语“卤素”指氟、氯、溴、或碘。本文所用的术语“杂环烷基”指其中一个或多个环亚甲基基团(-ch2-)已被选自-o-、-s-或氮的基团替代的环烷基基团，其中氮可提供连接点或者可如各实施方案内所提供地被取代。在氮提供连接点的情况下，杂环烷基的结构图在所述氮上会有一个氢。一般而言，若化合价允许，则杂环烷基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：氧代、-cn、卤素、烷基和-o烷基，且所述烷基可进一步被取代。可注意到，当存在0个取代时，杂环烷基是未被取代的。本文所用的术语“杂芳基”指含有5至6个碳原子的单环芳族烃，其中至少一个环碳原子被选自氧、氮和硫的杂原子替代。这种杂芳基基团可通过环碳原子连接，或者在化合价允许时，通过环氮原子连接。一般而言，若化合价允许，则杂芳基可被0至2个独立地选自下列的取代基取代：卤素、oh、烷基、o-烷基、和氨基(例如，nh2、nh烷基、n(烷基)2)，且烷基可进一步被取代。可注意到，当存在0个取代时，杂芳基是未被取代的。室温：rt(15至25℃)。甲醇：meoh。乙醇：etoh。异丙醇：iproh。乙酸乙酯：etoac。四氢呋喃：thf。甲苯：phch3。碳酸铯：cs2co3。双(三甲基甲硅烷基)氨基锂：lihmds。叔丁醇钠：naotbu。叔丁醇钾：kotbu。二异丙基氨基锂：lda。三乙胺：et3n。n,n-二异丙基乙基胺：dipea。碳酸钾：k2co3。二甲基甲酰胺：dmf。二甲基乙酰胺：dmac。二甲基亚砜：dmso。n-甲基-2-吡咯烷酮：nmp。氢化钠：nah。三氟乙酸：tfa。三氟乙酸酐：tfaa。乙酸酐：ac2o。二氯甲烷：dcm。1,2-二氯乙烷：dce。盐酸：hcl。1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯：dbu。硼烷-二甲硫醚络合物：bh3-dms。硼烷-四氢呋喃络合物：bh3-thf。氢化铝锂：lah。乙酸：acoh。乙腈：mecn。对甲苯磺酸：ptsa。二亚苄基丙酮：dba。2,2’-双(二苯基膦基)-1,1’-联萘：binap。1,1’-二茂铁二基-双(二苯基膦)：dppf。1,3-双(二苯基膦基)丙烷：dppp。3-氯过氧苯甲酸：m-cpba。叔丁基甲基醚：mtbe。甲烷磺酰基：ms。n-甲基吡咯烷酮：nmp。薄层色谱法：tlc。超临界流体色谱法：sfc。4-(二甲基氨基)吡啶：dmap。叔丁氧基羰基：boc。1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐：hatu。石油醚：pe。2-(1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐：hbtu。2-氨基-2-(羟基甲基)丙烷-1,3-二醇：tris。三(二亚苄基丙酮)二钯：pd2(dba)3。1h核磁共振(nmr)光谱在所有的情况下与所提议的结构一致。特征化学位移(δ)以相对于氘代溶剂(在7.27ppm的chcl3；在3.31ppm的cd2hod；在1.94ppm的mecn；在2.50ppm的dmso)中的残留质子信号的百万分率给出，且使用指定主要峰的常规缩写记录：例如，s，单峰；d，双峰；t：三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，宽峰。符号^表示1hnmr峰面积是假定的，因为所述峰被水峰部分遮蔽。符号^^表示1hnmr峰面积是假定的，因为所述峰被溶剂峰部分遮蔽。本文所用的波浪线“”表示取代基与另一基团的连接点。下文所述的化合物和中间体是采用acd/chemsketch2012,fileversionc10h41,build69045(advancedchemistrydevelopment,inc.,toronto,ontario,canada)提供的命名约定命名的。acd/chemsketch2012提供的命名约定是本领域技术人员所熟知的且acd/chemsketch2012提供的命名约定被认为通常与有机化学命名的iupac(internationalunionforpureandappliedchemistry)推荐和cas索引规则相符。可注意到，化学名称可能只有圆括号或可有圆括号和方括号。根据命名约定，立体化学的描述符也可置于名称本身内的不同位置。本领域技术人员可认识到这些格式变异且理解它们提供相同的化学结构。式i、ii、iii、iv、或v的化合物的药学上可接受的盐包括酸加成和碱盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环磺酸盐(cyclamate)、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘二甲酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、蔗糖酸盐(saccharate)、硬脂酸盐、琥珀酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐、1,5-萘二磺酸盐和羟萘甲酸盐(xinofoatesalts)。合适的碱盐由形成无毒盐的碱来形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、双(2-羟基乙基)胺(二乙醇胺)盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、2-氨基乙醇(乙醇胺)盐、钾盐、钠盐、2-氨基-2-(羟基甲基)丙烷-1,3-二醇(tris或氨丁三醇)盐和锌盐。也可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。关于合适盐的评述，参见stahl和wermuth的handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse(wiley-vch,2002)。式i的化合物的药学上可接受的盐可通过以下三种方法中的一种或多种制备：(i)使式i的化合物与期望的酸或碱反应；(ii)使用期望的酸或碱，从式i的化合物的合适前体去除酸或碱不稳定保护基，或将合适环状前体(例如内酯或内酰胺)开环；或(iii)通过与适当酸或碱反应或借助合适离子交换柱，将式i的化合物的一种盐转化为另一种盐。所有三种反应通常均在溶液中进行。所得盐可沉淀出并通过过滤来收集，或可通过蒸发溶剂来回收。所得盐的离子化程度可在完全离子化至几乎未离子化变化。式i的化合物和其药学上可接受的盐可以非溶剂化和溶剂化形式存在。术语“溶剂化物”在本文中用于描述包含式i的化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子络合物。当所述溶剂为水时，采用术语“水合物”。当前公认的有机水合物的分类系统是定义分离位点、通道或金属-离子配位水合物的系统-参见k.r.morris的polymorphisminpharmaceuticalsolids(编辑h.g.brittain,marceldekker,1995)。分离位点水合物是其中水分子通过插入有机分子而彼此分离、不直接接触的水合物。在通道水合物中，水分子位于在其它水分子旁边的晶格通道中。在金属-离子配位水合物中，水分子键合至金属离子。当紧密地结合溶剂或水时，络合物可具有与湿度无关的充分定义的化学计量。然而，当微弱地结合溶剂或水时，如在通道溶剂化物和吸湿化合物中，水/溶剂含量可取决于湿度和干燥条件。在此类情况下，非化学计量将是标准。本发明的范围内还包括多组分络合物(除盐和溶剂化物外)，其中药物和至少一种其它组分以化学计量或非化学计量的量存在。该类型的络合物包括笼形物(药物-主体包括络合物)和共晶体。后者通常定义为经由非共价相互作用结合在一起的中性分子成分的结晶络合物，但也可以是中性分子与盐的络合物。共晶体可通过熔融结晶、通过从溶剂重结晶或通过将所述组分物理研磨在一起来制备。参见o.almarsson和m.j.zaworotko的chemcommun,17,1889-1896(2004)。关于多组分络合物的一般评述，参见haleblian的jpharmsci,64(8),1269-1288(1975年8月)。本发明的化合物可以范围为完全无定形至完全结晶的连续固态存在。术语“无定形”是指其中材料在分子水平缺乏长程有序性(longrangeorder)且可根据温度表现出固体或液体的物理特性的状态。此类材料通常不产生独特x射线衍射图，且尽管表现出固体特性，但更正式地描述为液体。在加热后，发生固体至液体特性的改变，其特征在于状态的改变，通常为二级改变(“玻璃转变”)。术语“结晶”是指其中材料在分子水平上具有规则排序的内部结构且产生具有明确峰的独特x射线衍射图的固相。此类材料在充分加热时也将表现出液体的特性，但从固体至液体的变化的特征在于相变，通常为一级相变(“熔点”)。式i的化合物当经受适合条件时也可以介晶态(介相或液晶)存在。介晶态是在真正结晶状态与真正液体状态(熔体或溶液)之间的中间态。由于温度变化而导致的介晶性被描述为“热致变性的”，且由于添加第二组分(如水或另一种溶剂)而产生的介晶性被描述为“易溶的”。具有形成易溶介相潜能的化合物被描述为“两性”的，且由具有离子极性头基(如-coo-na+、-coo-k+或-so3-na+)或非离子极性头基(如-n-n+(ch3)3)的分子组成。关于更多信息，参见n.h.hartshorne和a.stuart的crystalsandthepolarizingmicroscope，第4版(edwardarnold,1970)。式i的化合物可表现出多晶现象和/或一种或多种异构现象(例如光学异构现象、几何异构现象或互变异构现象)。式i的化合物也可进行同位素标记。此类变化暗示这样的式i的化合物，其被定义为其通过提及其结构特征，且因此在本发明的范围内。含有一个或多个不对称碳原子的式i的化合物可以作为两种或更多种立体异构体存在。当式i的化合物含有烯基或亚烯基时，几何顺式/反式(或z/e)异构体是可能的。当结构异构体可经由低能量屏障互相转化时，可存在互变异构现象(“互变现象”)。这在含有例如亚胺基、酮基或肟基的式i的化合物中可采取质子互变异构现象的形式，或在含有芳族部分的化合物中可采取所谓的价互变异构现象的形式。结果就是，单一化合物可表现出多于一种类型的异构现象。式i的化合物的药学上可接受的盐也可含有光学活性(例如d-乳酸盐或1-赖氨酸)或外消旋(例如dl-酒石酸盐或dl-精氨酸)的抗衡离子。顺式/反式异构体可通过本领域技术人员熟知的常规技术(例如色谱法和分步结晶)来分离。用于制备/分离个别对映异构体的常规技术包括从合适光学纯前体手性合成或使用例如手性高压液相色谱法(hplc)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。或者，含有手性酯的外消旋前体可通过酶促拆分加以分离(参见，例如，a.c.l.m.carvaho等人的intjmolsci29682-29716(2015))。在式i的化合物含有酸性或碱性部分的情况下，盐可使用光学上纯的碱或酸(例如，1-苯基乙基胺或酒石酸)形成。所生成的非对映异构混合物可通过分级结晶分离且一或两个非对映异构盐可通过技术人员熟知的手段，转化为对应的纯对映异构体。或者，外消旋体(或外消旋前体)可与适当的光学活性化合物(例如，醇、胺或苄基氯)共价反应。所生成的非对映异构混合物可通过技术人员熟知的手段，通过色谱法和/或分级结晶，加以分离，而得到呈带有2或多个手性中心的单一对映异构体形式的分离的非对映异构体。使用色谱法(通常为hplc)，在不对称树脂上利用由烃(通常为庚烷或己烷)所组成的移动相(含有0至50体积%(通常为2体积%至20体积%)的异丙醇和0至5体积%的烷基胺(通常为0.1%二乙胺))，可得到呈富含对映异构体形式的式i的手性化合物(和其手性前体)。浓缩洗脱物可得到富集的混合物。可采用使用次-和超临界流体的手性色谱法。可用于本发明的某些实施方案的手性色谱法的方法是本领域已知的(参见，例如，smith,rogerm.,loughboroughuniversity,loughborough,uk;chromatographicscienceseries(1998),75(sfcwithpackedcolumns),pp.223-249和其中所引用的参考文献)。于本文的某些相关实例中，柱获自chiraltechnologies,inc,westchester,pennsylvania,usa,daicel®chemicalindustries,ltd.的子公司,tokyo,japan。当任何外消旋体结晶时，两种不同类型的晶体是可能的。第一种类型是上文所提及的外消旋化合物(真实外消旋体)，其中产生含有等摩尔量的两种对映异构体的一种均质晶体形式。第二种类型是外消旋混合物或聚结物，其中产生等摩尔量的各包含单一对映异构体的两种晶体形式。尽管外消旋混合物中存在的两种晶体形式可具有相同的物理特性，但其与真正外消旋体相比可具有不同的物理特性。可通过本领域技术人员已知的常规技术来分离外消旋混合物。参见，例如，e.l.eliel和s.h.wilen的stereochemistryoforganiccompounds(wiley,1994)。必须强调的是，在本文中，式i的化合物是以单一互变异构形式绘制，所有可能的互变异构形式皆包括于本发明的范围内。本发明包括所有药学上可接受的经同位素标记的式i的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数但是原子量或质量数较自然界占优势的原子量或质量数不同的原子所替代。适合包涵于本发明的化合物中的同位素实例包括：氢的同位素，例如，2h和3h；碳的同位素，例如，11c、13c和14c；氯的同位素，例如，36cl；氟的同位素，例如，18f；碘的同位素，例如，123i和125i；氮的同位素，例如，13n和15n；氧的同位素，例如，15o，17o和18o；磷的同位素，例如，32p；和硫的同位素，例如，35s。某些经同位素标记的式i的化合物，例如，并入放射性同位素的那些，可用于药物和/或底物组织分布研究。鉴于易于并入以及有现成的检测手段，放射性同位素氚，即，3h，以及碳-14，即，14c特别可用于此目的。使用较重的同位素，例如，氘，即，2h替代由于具有较高的代谢稳定性，可提供某些治疗上的优点，例如，体内半衰期增加或剂量要求降低。使用正电子发射同位素，例如，11c、18f、15o和13n替代可用于供检验底物受体占有率的正电子发射断层扫描(positronemissiontopography,pet)研究。式i的经同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术，或者通过与附随的实施例和制备所述的那些类似的方法，使用适当的经同位素标记的试剂替代先前所采用的未经标记的试剂制备。根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括其中结晶溶剂可被同位素取代的溶剂化物(例如，d2o、d6-丙酮、d6-dmso)。实施本发明的一种方式是施用呈前药形式的式i的化合物。因此，本身药理活性小或无的某些式i的化合物的衍生物，在施用于身体内或身体上时，可转化为具有期望活性的式i的化合物，例如，通过水解裂解，特别是酯酶或肽酶所促进的水解裂解。这种衍生物称为“前药”。前药的使用的进一步信息可见于：‘pro-drugsasnoveldeliverysystems’,vol.14,acssymposiumseries(t.higuchi和w.stella)和‘bioreversiblecarriersindrugdesign’,pergamonpress,1987(ed.e.b.roche,americanpharmaceuticalassociation)。还可参照naturereviews/drugdiscovery,2008,7,355和currentopinionindrugdiscoveryanddevelopment,2007,10,550。根据本发明的前药可，例如，通过用本领域技术人员称为“前部分(pro-moieties)”的某些部分替代存在于式i的化合物的适当官能团产生，例如描述于h.bundgaard(elsevier,1985)和y.m.choi-sledeski的‘designofprodrugs’by和c.g.wermuth,‘designingprodrugsandbioprecursors’，practiceofmedicinalchemistry,(第四版),第28章,657-696(elsevier,2015)。因此，根据本发明的前药是(a)式i的化合物内的羧酸的酯或酰胺衍生物；(b)式i的化合物内的羟基基团的酯、碳酸酯、氨基甲酸酯、磷酸酯或醚衍生物；(c)式i的化合物内的氨基基团的酰胺、亚胺、氨基甲酸酯或胺衍生物；(d)式i的化合物内的羰基基团的肟或亚胺衍生物；或者(e)可代谢氧化为式i的化合物内的羧酸的甲基、伯醇或醛基团。根据本发明的前药的某些特定实例包括：(i)在式i的化合物含有羧酸官能(-cooh)的情况下，其酯，例如，其中式i的化合物的羧酸官能的氢被c1-c8烷基(例如，乙基)或(c1-c8烷基)c(=o)och2-(例如，tbuc(=o)och2-)替代的化合物；(ii)在式i的化合物含有醇官能(-oh)的情况下，其酯，例如，其中式i的化合物的醇官能的氢被-co(c1-c8烷基)(例如，甲基羰基)替代或者醇被氨基酯化的化合物；(iii)在式i的化合物含有醇官能(-oh)的情况下，其醚，例如，其中式i的化合物的醇官能的氢被(c1-c8烷基)c(=o)och2-或-ch2op(=o)(oh)2替代的化合物；(iv)在式i的化合物含有醇官能(-oh)的情况下，其磷酸酯，例如，其中式i的化合物的醇官能的氢被-p(=o)(oh)2或-p(=o)(ona)2或-p(=o)(o-)2ca2+替代的化合物；(v)在式i的化合物含有伯或仲氨基官能(-nh2或-nhr，其中r≠h)的情况下，其酰胺，例如，其中式i的化合物的氨基官能的一或两个(视情况而定)氢被(c1-c10)烷酰基、-coch2nh2替代或者氨基被氨基酸衍生化的化合物；(vi)在式i的化合物含有伯或仲氨基官能(-nh2或-nhr，其中r≠h)的情况下，其胺，例如，其中式i的化合物的氨基官能的一或两个(视情况而定)氢被-ch2op(=o)(oh)2替代的化合物；(vii)在式i的化合物内的羧酸基团被甲基基团、-ch2oh基团或醛基团替代的情况下。某些式i的化合物本身可作为其他式i的化合物的前药。两个式i的化合物也可能以前药的形式结合在一起。在某些情况下，式i的化合物的前药可通过将式i的化合物内的两个官能基内部连结(例如，通过形成内酯)而产生。提及式i的化合物时，包括化合物本身和其前药。本发明包括这种式i的化合物以及这种化合物的药学上可接受的盐和所述化合物与盐的药学上可接受的溶剂化物。施用和给药一般而言，本发明的化合物是以有效治疗本文所述的病况的量施用。本发明的化合物可以化合物本身，或者替代地，以药学上可接受的盐的形式施用。就施用和给药的目的而言，化合物本身或其药学上可接受的盐将简单地称为本发明的化合物。本发明的化合物可通过任何适当的途径，以适应于这种途径的药物组合物的形式，以及以对于预期的治疗有效的剂量，进行施用。本发明的化合物可口服、直肠、阴道、肠胃外、或局部施用。本发明的化合物可口服施用。口服施用可包含吞咽，因此化合物会进入胃肠道，或者可采用经颊或舌下施用，藉此，化合物将直接由口进入到血流。在另一实施方案中，本发明的化合物也可直接施用至血流、肌肉、或内脏。肠胃外施用的适当手段包括：静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内和皮下。肠胃外施用所用的适当装置包括：针(包括微针)注射器、无针注射器和输注技术。在另一实施方案中，本发明的化合物也可局部施用至皮肤或黏膜，即，经皮或透皮。在另一实施方案中，本发明的化合物也可鼻内或者通过吸入施用。在另一实施方案中，本发明的化合物可经直肠或阴道施用。在另一实施方案中，本发明的化合物也可直接施用至眼睛或耳朵。本发明的化合物和/或含有所述化合物的组合物的剂量方案是基于各种因素，包括：患者的类型、年龄、体重、性别和医疗状况；病况的严重性；施用的途径；以及所采用的特定化合物的活性。因此，剂量方案可有广泛的变化。在一个实施方案中，就本文所讨论的指定病况的治疗而言，本发明化合物的总每日剂量通常是约0.001至约100mg/kg(即，相对于每kg体重的本发明化合物的mg数)。在另一实施方案中，本发明化合物的总每日剂量是约0.01至约30mg/kg，且在另一实施方案中，约0.03至约10mg/kg，且于又另一实施方案中，约0.1至约3mg/kg。在一天内重复多次(通常不多于四次)施用本发明化合物并不罕见。视需要，通常可使用每天多剂量来增加总每日剂量。就口服施用而言，组合物可以含有0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、30.0、50.0、75.0、100、125、150、175、200、250和500毫克活性成分的片剂形式提供，以对症调节给予患者的剂量。药物通常含有约0.01mg至约500mg活性成分，或在另一实施方案中，约1mg至约100mg活性成分。经静脉施用时，在恒速输注期间，剂量可在约0.01至约10mg/kg/分钟的范围内。根据本发明的适当对象包括哺乳动物对象。在一个实施方案中，人类是适当的对象。人类对象可为任一性别和任何发育阶段。药物组合物在另一实施方案中，本发明包含药物组合物。这种药物组合物包含与药学上可接受的载体一起存在的本发明化合物。也可存在其他药理活性物质。本文所用的“药学上可接受的载体”包括生理兼容的任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。药学上可接受的载体的实例包括下列的一种或多种：水、盐水、磷酸盐缓冲的盐水、葡萄糖、甘油、乙醇等，及其组合，且在组合物内可包括等渗剂，例如，糖、氯化钠、或多元醇(例如，甘露醇或山梨醇)。药学上可接受的物质，例如，润湿剂或少量的辅助物质，例如润湿或乳化剂，提高抗体或抗体部分的保质期或有效性的防腐剂或缓冲剂。本发明的组合物可呈现为各种形式。这些形式包括，例如，液体、半固体和固体剂型，例如，液体溶液(例如，可注射和可输注溶液)、分散体或悬浮液、片剂、丸剂、粉剂、微脂体和栓剂。剂型取决于预期的施用模式和治疗性应用。典型组合物是呈可注射或可输注溶液形式，例如，与含一般抗体的用于人类被动免疫的那些类似的组合物。一种施用模式是肠胃外的(例如，静脉内、皮下、腹膜内、肌内)。在另一实施方案中，抗体通过静脉内输注或注射进行施用。于又另一实施方案中，抗体通过肌内或皮下注射进行施用。固体剂型的口服施用可呈现为，例如，离散的单元，例如，硬或软胶囊、丸剂、扁囊剂、锭剂、或片剂，各含有预订量的至少一种本发明的化合物。在另一实施方案中，口服施用可呈粉剂或粒剂形式。在另一实施方案中，口服剂型是舌下的，例如，锭剂。于这种固体剂型中，式i的化合物一般是与一种或多种佐剂组合。这种胶囊或片剂可含有控释制剂。在胶囊、片剂、和丸剂的情况下，剂型也可含有缓冲剂或可使用肠溶包衣来制备。在另一实施方案中，口服施用可呈液体剂量形式。供口服施用的液体剂型包括，例如，药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆、和酏剂，含有本领域常用的惰性稀释剂(例如，水)。这种组合物也可包含佐剂，例如，润湿剂、乳化剂、悬浮剂、调味剂(例如，甜味剂)、和/或香料。在另一实施方案中，本发明包含肠胃外剂量形式。“肠胃外施用”包括，例如，皮下注射、静脉内注射、腹膜内、肌内注射、胸骨内注射、和输注。可注射制剂(即，无菌可注射水性或油质悬浮液)可根据已知的技艺，使用适当的分散剂、润湿剂、和/或悬浮剂来配制。在另一实施方案中，本发明包含局部剂量形式。“局部施用”包括，例如，透皮施用(例如，经由透皮贴片或离子电渗装置)、眼内施用、或鼻内或吸入施用。供局部施用的组合物也包括，例如，局部凝胶、喷雾、软膏、和乳膏。局部制剂可包括加强活性成分通过皮肤或其他受影响区域的吸收或渗透的化合物。本发明化合物经由透皮装置施用时，使用储库且多孔膜类型或者固体基质变体(solidmatrixvariety)的贴片来完成施用。供此目的的典型制剂包括：凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、撒布粉、敷料、泡沫、薄膜、皮肤贴片、扁片、植入剂、海绵、纤维、绷带和微乳液。也可使用脂质体。典型的载体包括：醇、水、矿油、液体凡士林、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可并入渗透增强剂-参见，例如，b.c.finnin和t.m.morgan,j.pharm.sci.,vol.88,pp.955-958,1999。适合局部施用至眼的制剂包括，例如，滴眼剂，其中本发明的化合物溶于或悬浮于适当的载体。适用于眼或耳施用的典型制剂可呈等渗、ph-调节、无菌盐水内的微粉化悬浮液或溶液的滴剂形式。适用于眼和耳施用的其他制剂包括：软膏、生物可降解(即，可吸收性凝胶海绵、胶原蛋白)和非生物可降解(即，聚硅氧)的植入剂、扁片、晶状体和微粒状或囊泡系统(例如，泡囊(niosome)或脂质体)。聚合物，例如，交联的聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如，羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、或甲基纤维素)、或者异元多糖聚合物(例如，结冷胶(gelangum))，可与防腐剂(例如，苯扎氯铵)一起并入。这种制剂也可通过离子电渗来递送。就鼻内施用或通过吸入的施用而言，本发明化合物方便地自泵式喷雾容器(由患者挤压或泵送)，以溶液或悬浮液的形式递送，或者自使用适当推进剂的加压容器或雾化器，以气溶胶喷雾呈递的形式递送。适于鼻内施用的制剂通常是以干燥粉末的形式(单独、作为混合物(例如，与乳糖的干燥掺合物)、或作为混合组分颗粒(例如，与磷脂，例如，卵磷脂混合))，由干粉吸入器施用；或者作为气溶胶喷雾，由使用或未使用适当推进剂(例如，1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)的加压容器、泵、喷雾、喷雾器(优选为使用电流体动力学来产生细雾的喷雾器)、或雾化器施用。就鼻内用途而言，所述粉末可包含生物黏附剂，例如，壳聚糖或环糊精。在另一实施方案中，本发明包含直肠剂量形式。这种直肠剂量形式可呈，例如，栓剂的形式。可可脂是传统的栓剂基质，但是适当时可使用各种替代物。还可使用药学领域已知的其他载体材料和施用模式。本发明的药物组合物可通过药学的任何熟知的技术例如有效的配制和施用程序制备。前述关于有效配制和施用程序的考虑是本领域熟知的且已描述于标准教科书。药物的配制讨论于，例如，hoover,johne.,remington’spharmaceuticalsciences,mackpublishingco.,easton,pennsylvania,1975;liberman等人,eds.,pharmaceuticaldosageforms,marceldecker,newyork,n.y.,1980；和kibbe等人,eds.,handbookofpharmaceuticalexcipients(3rded.),americanpharmaceuticalassociation,washington,1999。共同施用本发明的化合物可单独使用，或者与其他的治疗剂组合使用。本发明提供了本文所定义的任何用途、方法或组合物，其中本文的任何式i实施方案的化合物、或其药学上可接受的盐、或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物与本文所讨论的一种或多种其他治疗剂组合使用。这将包括用于治疗glp-1r的激动剂适应的疾病或病况的药物组合物，其包含如本文所描述的任一实施方案所定义的式i、ii、iii、iv、或v的化合物，或其药学上可接受的盐，以及一种或多种本文所讨论的其他治疗剂。“组合”施用两种或更多种化合物意指所有化合物是在时间上充分紧密地施用，而使得各化合物可在相同的时间范围产生生物效应。一个药物的出现可能改变其他化合物的生物效应。两种或更多种化合物可同时、并行或相继施用。此外，同时施用可通过在施用之前将混合物混合或者在相同的时间点以分开的剂型在相同或不同的施用位置来进行。“并行施用”、“共同施用”、“同时施用”和“同时地施用”意指将化合物组合施用。在另一实施方案中，本发明提供治疗方法，其包括施用本发明的化合物连同一种或多种其他药物，其中所述一种或多种其他药物可选自本文所讨论的药剂。在一个实施方案中，本发明的化合物与抗糖尿病药一起施用，包括但不限于：双胍类(例如，二甲双胍(metformin))；磺酰脲类(例如，甲苯磺丁脲、格列本脲(glibenclamide)、格列齐特(gliclazide)、氯磺丙脲、妥拉磺脲(tolazamide)、乙酰苯磺酰环己脲(acetohexamide)、格列吡脲(glyclopyramide)、格列美脲(glimepiride)、或格列吡嗪(glipizide))；噻唑烷二酮类(例如，吡格列酮(pioglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)、或洛贝格列酮(lobeglitazone))，glitazar类(例如，沙罗格列扎(saroglitazar)、阿格列扎(aleglitazar)、莫格列扎(muraglitazar)、或替格列扎(tesaglitazar))，格列奈类(meglitinide)(例如，那格列奈(nateglinide)、瑞格列奈(repaglinide))；二肽基肽酶4(dpp-4)抑制剂(例如，西格列汀(sitagliptin)、维格列汀(vildagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、利格列汀(linagliptin)、吉格列汀(gemigliptin)、安奈格列汀(anagliptin)、特力列汀(teneligliptin)、阿格列汀(alogliptin)、曲格列汀(trelagliptin)、度格列汀(dutogliptin)、或奥格列汀(omarigliptin))；格列酮类(例如，吡格列酮(pioglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)、巴格列酮(balaglitazone)、利格列酮(rivoglitazone)、或洛贝格列酮(lobeglitazone))；钠-葡萄糖协同转运蛋白2(sodium-glucoselinkedtransporter2)(sglt2)抑制剂(例如，恩格列净(empagliflozin)、卡格列净(canagliflozin)、达格列净(dapagliflozin)、依格列净(ipragliflozin)、依格列净(ipragliflozin)、托格列净(tofogliflozin)、依碳酸舍格列净(sergliflozinetabonate)、依碳酸瑞格列净(remogliflozinetabonate)、或埃格列净)；sgltl1抑制剂；gpr40激动剂(ffar1/ffa1激动剂，例如，呋格列泛(fasiglifam))；葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(gip)和其类似物；α葡萄糖苷酶抑制剂(例如，伏格列波糖(voglibose)、阿卡波糖(acarbose)、或米格列醇(miglitol))；胰岛素或胰岛素类似物；包括特别指明的药剂的药学上可接受盐以及所述药剂和盐的药学上可接受的溶剂化物。在另一实施方案中，本发明的化合物与抗肥胖药一起施用，包括但不限于：肽yy或其类似物，神经肽y受体二型(npyr2)激动剂，npyr1或npyr5激动剂，大麻素受体一型(cb1r)激动剂，脂酶抑制剂(例如，奥利司他(orlistat))，人proislet肽(hip)，黑皮质素受体4激动剂(例如，setmelanotide)、黑色素聚集激素受体1拮抗剂，法尼醇x受体(farnesoidxreceptor)(fxr)激动剂(例如，奥贝胆酸(obeticholicacid))，唑尼沙胺(zonisamide)，芬他命(phentermine)(单独或与托吡酯(topiramate)组合)，去甲肾上腺素/多巴胺再摄取抑制剂(例如，安非他酮(buproprion))，类鸦片受体拮抗剂(例如，纳屈酮(naltrexone))，去甲肾上腺素/多巴胺再摄取抑制剂与类鸦片受体拮抗剂的组合(例如，安非他酮与纳屈酮的组合)，gdg-15类似物，西布曲明(sibutramine)，胆囊收缩素激动剂，胰淀素和其类似物(例如，普兰林肽(pramlintide))、瘦体素和其类似物(例如，metroleptin)，血清素药(例如，氯卡色林(iorcaserin))，甲硫氨酸氨基肽酶2(metap2)抑制剂(例如，beloranib或zgn-1061)，苯双甲吗啉(phendimetrazine)，二乙胺苯丙酮(diethylpropion)，苄非他明(benzphetamine)，sglt2抑制剂(例如，恩格列净、卡格列净、达格列净、依格列净(ipragliflozin)、依格列净(ipragliflozin)、托格列净、依碳酸舍格列净、依碳酸瑞格列净或埃格列净)，sgltl1抑制剂，双重sglt2/sglt1抑制剂，成纤维细胞生长因子受体(fgfr)调节剂，amp活化的蛋白激酶(ampk)活化剂，生物素，mas受体调节剂，或者胰高血糖素受体激动剂(单独或与另外的glp-1r激动剂组合，例如，利拉鲁肽(liraglutide)、艾塞那肽(exenatide)、度拉糖肽(dulaglutide)、阿必鲁肽(albiglutide)、利西那肽(lixisenatide)、或索马鲁肽(semaglutide))；包括特别指明的药剂的药学上可接受盐以及所述药剂和盐的药学上可接受的溶剂化物。在另一实施方案中，本发明的化合物与下列的一种或多种组合施用：治疗nash的药剂(包括，但不限于：pf-05221304)，fxr激动剂(例如，奥贝胆酸)，pparα/δ激动剂(例如，elafibranor)，合成的脂肪酸-胆酸缀合物(例如，aramchol)，半胱天冬酶抑制剂(例如，恩利卡生(emricasan))，抗赖氨酰氧化酶同系物2(loxl2)单克隆抗体(例如，simtuzumab)，半乳凝素3抑制剂(例如，gr-md-02)，mapk5抑制剂(例如，gs-4997)，趋化因子受体2(ccr2)和ccr5的双重拮抗剂(例如，cenicriviroc)，成纤维细胞生长因子21(fgf21)激动剂(例如，bms-986036)，白三烯d4(ltd4)受体拮抗剂(例如，泰鲁司特(tipelukast))，烟酸类似物(例如，ari3037mo)，asbt抑制剂(例如，volixibat)，乙酰辅酶a羧化酶(acc)抑制剂(例如，ndi010976或pf-05221304)，己酮糖激酶(khk)抑制剂，二酰基甘油基酰基转移酶2(dgat2)抑制剂，cb1受体拮抗剂，抗-cb1r抗体，或者凋亡信号调节激酶1(ask1)抑制剂，包括特别指明的药剂的药学上可接受盐以及所述药剂和盐的药学上可接受的溶剂化物。可与本发明的化合物组合使用用于治疗本文所描述的疾病或障碍(例如，nash)的某些特定化合物包括：4-(4-(1-异丙基-7-氧代-1,4,6,7-四氢螺[吲唑-5,4’-哌啶]-1’-羰基)-6-甲氧基吡啶-2-基)苯甲酸，其是选择性acc抑制剂的实例且于美国专利号8,859,577的实施例9中以游离酸的形式制备，所述专利是国际申请号pct/ib2011/054119的美国国家阶段，其公开内容特此通过引用以其整体并入本文用于所有目的。4-(4-(1-异丙基-7-氧代-1,4,6,7-四氢螺[吲唑-5,4’-哌啶]-1’-羰基)-6-甲氧基吡啶-2-基)苯甲酸的晶型，包括无水单-tris形式(形式1)和单-tris盐的三水合物(形式2)，描述于国际pct申请号pct/ib2018/058966，其公开内容特此通过引用以其整体并入本文用于所有目的；(s)-2-(5-((3-乙氧基吡啶-2-基)氧基)吡啶-3-基)-n-(四氢呋喃-3-基)嘧啶-5-甲酰胺，或其药学上可接受的盐，以及其晶状固体形式(形式1和形式2)是美国专利号10,071,992的实施例1所述的dgat2抑制剂的实例，其公开内容特此通过引用以其整体并入本文用于所有目的；[(1r,5s,6r)-3-{2-[(2s)-2-甲基氮杂环丁烷-1-基]-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基}-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]乙酸，或其药学上可接受的盐(包括其结晶游离酸形式)是己酮糖激酶抑制剂的实例且描述于美国专利号9,809,579的实施例4，所述专利的公开内容特此以其整体并入本文为参考，其公开内容特此通过引用以其整体并入本文用于所有目的；并且fxr激动剂tropifexor或其药学上可接受的盐描述于美国专利号9,150,568的实施例1-1b，其公开内容特此通过引用以其整体并入本文用于所有目的。这些药剂和本发明的化合物可与药学上可接受的媒介物(例如，盐水、林格氏溶液、葡萄糖溶液等等)组合。特定的剂量方案，即，剂量、时机和重复，将取决于特定个体和个体的病史。可接受的载体、赋形剂、或稳定剂在所使用的剂量和浓度下对于接受者无毒性，且可包含：缓冲剂(例如，磷酸盐、柠檬酸盐、和其他有机酸)；盐(例如，氯化钠)；抗氧化剂(包括抗坏血酸和甲硫氨酸)；防腐剂(例如，氯化十八烷基二甲基苄基铵；氯化六羟季铵(hexamethoniumchloride)；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚，丁基或苄基醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如，对羟基苯甲酸甲酯或丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间-甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质(例如，血清白蛋白、明胶、或igs)；亲水性聚合物(例如，聚乙烯吡咯烷酮)；氨基酸(例如，甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸、或赖氨酸)；单糖、二糖、和其他碳水化合物(包括葡萄糖、甘露糖、或糊精)；螯合剂(例如，edta)；糖(例如，蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇)；盐形成抗衡离子(例如，钠)；金属络合物(例如，锌-蛋白质络合物)；和/或非离子表面活性剂(例如，tweentm、pluronicstm或聚乙二醇(peg))。含有这些药剂和/或本发明化合物的脂质体通过本领域已知的方法制备，例如，描述于美国专利号4,485,045和4,544,545的方法。循环时间增加的脂质体公开于美国专利号5,013,556。特别有用的脂质体可通过逆相蒸发方法，使用包含卵磷脂、胆固醇和peg衍生的磷脂酰乙醇胺(peg-pe)的脂质组合物产生。脂质体挤压通过具有限定孔径的过滤器，以得到具有所需的直径的脂质体。这些药物和/或本发明的化合物也可包埋于例如通过凝聚技术或界面聚合制备的微胶囊，例如，分别为羟甲基纤维素或明胶-微胶囊和聚-(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊；包埋于胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微粒、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)或包埋于粗乳液。这种技术公开于remington,thescienceandpracticeofpharmacy,20thed.,mackpublishing(2000)。可使用持续释放制剂。持续释放制剂的适当实例包括含有式i、ii、iii、iv、或v的化合物的固体疏水性聚合物的半透基质，所述基质呈成型制品的形式，例如，薄膜、或微胶囊。持续释放基质的实例包括：聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)、或者聚(乙烯醇))、聚乳酸(美国专利号3,773,919)、l-谷氨酸与7-乙基-l-谷氨酰胺的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物(例如，用于luprondepottm(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林(leuprolideacetate))构成的可注射微球中的那些)、乙酸异丁酸蔗糖酯、以及聚-d-(-)-3-羟基丁酸。用于静脉内施用的制剂必须是无菌的。这可通过，例如，通过无菌过滤膜过滤，容易地完成。本发明的化合物通常置于具有无菌进入孔的容器，例如，具有可通过皮下注射针头刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。适当的乳液可使用市售的脂肪乳液，例如，intralipidtm、liposyntm、infonutroltm、lipofundintm和lipiphysantm制备。活性成分可溶于预混合的乳液组合物或可替代地其可溶于油(例如，大豆油、红花油、棉花籽油、芝麻油、玉米油或杏仁油)以及将磷脂(例如，蛋磷脂、大豆磷脂或大豆卵磷脂)和水混合所形成的乳液。可理解的是，可添加其他成分，例如，甘油或葡萄糖，以调节乳液的张力。适当的乳液通常含有至多20%的油，例如，5至20%。脂肪乳液可包含0.1至1.0μm的脂肪液滴，特别是0.1至0.5μm，且具有在5.5至8.0范围内的ph。乳液组合物可为通过将本发明的化合物与intralipidtm或其组分(大豆油、蛋磷脂、甘油和水)混合制备的那些。用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水性或有机溶剂或其混合物内的溶液与悬浮液，以及粉末。液体或固体组合物可含有适当的如前文所列出的药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，组合物通过口或鼻呼吸途径施用，以达局部或全身功效。于优选的无菌药学上可接受溶剂内的组合物可通过使用气体雾化。雾化溶液可由雾化装置直接吸入或者所述雾化装置可连接至面罩、幕或间歇性正压呼吸器。溶液、悬浮液或粉末组合物可由以适当方式递送制剂的装置施用，优选为口服或经鼻施用。试剂盒本发明的另一方面提供试剂盒，其包含式i、ii、iii、iv、或v的化合物或者包含本发明的式i、ii、iii、iv、或v的化合物的药物组合物。除了本发明的式i、ii、或iii的化合物或其药物组合物之外，试剂盒还可包括诊断或治疗剂。试剂盒也可包括用于诊断或治疗方法的说明。在某些实施方案中，试剂盒包括式i、ii、iii、iv、或v的化合物或其药物组合物和诊断剂。在其他实施方案中，试剂盒包括式i、ii、iii、iv、或v的化合物或其药物组合物。在又另一实施方案中，本发明包含适合用于进行本文所述的治疗方法的试剂盒。在一个实施方案中，试剂盒含有第一剂型，其包含足以进行本发明的方法的量的一种或多种本发明的化合物。在另一实施方案中，试剂盒包含足以进行本发明的方法的量的一种或多种本发明的化合物以及用于所述剂量的容器。制备式i、ii、iii、iv、或v的化合物可通过下文所述的通用和特定方法，使用合成有机化学领域技术人员的共知常识制备。这种共知常识可见于标准参考书，例如，comprehensiveorganicchemistry,ed.bartonandollis,elsevier;comprehensiveorganictransformations:aguidetofunctionalgrouppreparations,larock,johnwileyandsons；和compendiumoforganicsyntheticmethods,vol.i-xii(wiley-interscience出版)。本文所用的原料是市售的或可通过本领域已知的例行方法制备。在式i、ii、iii、iv、或v的化合物的制备中，值得注意的是，本文所述的某些制备方法可能需要保护远端官能团(例如，式i前体中的伯胺、肿胺、羧基)。对于这种保护的需要将根据远端官能团的性质和制备方法的条件而变化。本领域技术人员可容易决定对这种保护的需要。这种保护/脱保护方法的使用也属本领域的技术。保护基和其用途的一般性说明参见：t.w.greene,protectivegroupsinorganicsynthesis,johnwiley&sons,newyork,1991。例如，某些化合物含有伯胺或羧酸官能团，其若未被保护，则可能干扰在分子的其他部位的反应。因此，这种官能团可被适当的保护基保护，所述保护基可在后续的步骤移除。适用于胺和羧酸保护的保护基包括常用于肽合成的那些保护基(例如，就胺类而言，n-叔丁氧基羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、和9-芴基甲氧基羰基(fmoc)；以及就羧酸类而言，低级烷基酯或苄基酯)，其在所述的反应条件下通常不具化学反应性且通常可在不化学性改变式i的化合物中的其他官能团的情况下移除。下文所述的方案旨在提供本发明化合物的制备中所采用的方法的一般性说明。本发明的某些化合物可含有单一或多个手性中心，带有立体化学名称(r)或(s)。对于本领域技术人员显而易见的是，不论材料是对映异构体富集的还是外消旋的，所有的合成转化皆可以类似的方式进行。此外，拆分为所需的光学活性材料可在顺序内的任何所需的点上，使用熟知的方法(例如，本文所述的以及化学文献所述的)来进行。例如，中间体(例如，s4、s7、s8、s24、s40、和s41)以及最终产物(例如，s25和s42)可使用手性色谱法加以分离。或者，手性盐可被利用来分离对映异构体富集的中间体和最终化合物。在下文的方案中，变量x、y、z1、z2、z3、r、r1、r2、r3、r4、m、p、和q是如本文中针对式i、ii、iii、iv、或v的化合物所定义的，除非另有说明。为了简化起见，变量a用于表示环a和其任选取代基r1。就下文所提供的方案而言，x1、x2、x3、和x4各自可独立为离去基，例如，任何烷基或芳基磺酸酯(例如，甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、或三氟甲磺酸酯)、或卤素或者可被胺替代或用于金属介导偶联反应的任何其他基团。x4也可为经保护的羧酸(即，酯)。当保护基识别为pg1时，其可为烷基胺保护基(例如，苄基、二苯甲基、烯丙基等等)；氨基甲酸酯保护基(例如，boc、cbz等等)；或者酰胺保护基(例如，三氟乙酰胺)。当保护基识别为pg2时，其可为酸保护基，例如，甲基、乙基、苄基、叔丁基等等。当保护基识别为pg3时，其可为醇保护基(例如，三甲基甲硅烷基乙氧基乙基)；或者酰基基团(例如，乙酰基、苯甲酰基等等)；或者三烷基甲硅烷基基团(例如，三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基等等)。r2a是h或-c1-2烷基，其中烷基可具有0至1个oh。r4a是c1-2烷基、c0-2亚烷基-c3-6环烷基、c0-2亚烷基-r5、或c1-2亚烷基-r6，其中若化合价允许，则所述烷基、亚烷基、或环烷基可独立被0至3个f原子和0至1个独立地选自c0-1亚烷基-oro和-n(rn)2的取代基取代。被取代的哌啶s8(其中r2=h且y=ch)可如方案1所讨论地制备。芳基或杂芳基溴化物s1可经烷基锂(例如，丁基锂或叔丁基锂)处理，以得到芳基-或杂芳基-锂物种，其可与醛s2反应得到二醇s3。其他的芳基或杂芳基有机金属试剂(例如，但不限于，格氏试剂)也可用于制备s3。反应通常于-70℃左右的温度下进行。然后，可用naio4氧化二醇s3，以提供缩醛s4(r2=h)。化合物s4然后可在钯催化剂和配体络合物存在下，依铃木反应(maluenda和navarro,molecules,2015,20,7528-7557)的方式，与被取代的硼酸或硼酸酯(s5)反应，以提供通式s6的化合物。将烯烃还原以提供一般结构s7的化合物可在氢气氛(15-100psih2)下、醇溶剂(例如，甲醇或乙醇)或可替代地非质子有机溶剂(例如，乙酸乙酯或thf)中、适当的催化剂(例如，载于炭上的钯、载于炭上的pd(oh)2(pearlman催化剂)、pto2(adams催化剂)、或三(三苯基膦)氯化铑(i)(wilkinson催化剂))存在下进行。使用适当的催化剂，可采用转移氢化试剂(例如，甲酸铵或二氢苯，或类似物)。或者，还原可通过本领域技术人员已知的替代方法，使用试剂(例如三乙基甲硅烷或其他甲硅烷)，在酸或金属催化下，或者使用金属还原剂(例如，镁或类似物)来完成。或者，烯烃可通过本领域技术人员已知的方法官能化，以引入r3基团。例如，烯烃可硼氢化以产生醇，其可被烷基化或进一步转化为腈、f或烷基基团。pg1的移除可使用多种描述于文献的方法来执行，以提供胺s8。方案1方案2提供一般结构s4的化合物的替代制备。一般结构s9的适当取代的二醇与一般结构s10a的醛或酮在酸(例如，对甲苯磺酸或对甲苯磺酸吡啶)存在下、于非质子有机溶剂(例如，甲苯或苯)中的反应可得到一般结构s4的化合物。通常使用dean-stark分水器，在回流下加热所述反应，以共沸移除水。二醇s9也可在酸性催化下，与一般结构s10b的环状(虚线存在)或非环状(虚线不存在)缩醛或缩酮反应。同样也适用于使用一般结构s10c的环状或非环状硫缩醛或硫缩酮，在汞盐、温和氧化剂或烷基化试剂的影响下提供化合物s4。或者，通式s9的二醇可在非质子溶剂(例如，甲苯)中、于十二羰基三钌存在下、在100℃左右的温度下，与适当取代的炔s11反应，以得到一般结构s4的化合物(其中r2=ch2r2a)。在其中r2含有醇官能团(例如，ch2oh)的情况下，醇保护基(pg3)(例如，乙酸酯)可并入一般结构s10的化合物。然后，可在后续步骤中，将保护基移除。然后，可使用针对方案1所述的方法，将中间体s4进一步修饰，以提供一般结构s8的胺。方案2如方案3所提供的，将s4转化为一般结构s7的化合物(其中y=n)可通过诸如一般结构s4的化合物与适当取代和保护的哌嗪s12之间在钯或铜催化剂和配体络合物存在下的buchwald-hartwigc-n偶联的方式来完成。这些反应通常是在0至110℃下、在添加有碱(例如，cs2co3、lihmds或naotbu)的非质子有机溶剂(例如但不限于，1,4-二噁烷和phch3)中进行。pg1的移除可使用多种描述于文献的方法来执行，以提供胺s8(其中y=n)。方案3经由方案1-3所描述的方法制备的胺化合物s8可使用经保护的2-溴乙酸酯，在适当碱(例如，k2co3、et3n、nah或lihmds)存在下、于极性非质子溶剂(例如但不限于，dmf、dmac、dmso或nmp)中烷基化，以得到一般结构s13的化合物(x=n，l=ch2)。可进行标准的酯水解，以提供酸s14。若pg2是叔丁基，则可使用标准的酸性脱保护方法(例如，tfa/dcm、hcl/1,4-二噁烷、hcl/etoac或其他适当的条件)，以得到酸s14。若pg2是甲基或乙基，则可使用标准的碱性脱保护方法(例如，于甲醇或乙醇中的水性naoh、或其他适当的条件)，以得到酸s14。方案4一般结构s15的化合物(方案5)可在碱(例如，碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯、乙酸钠、乙酸钾、或乙酸铯)或者有机胺碱(例如，et3n、dipea、dbu等等)存在下、于极性非质子溶剂(例如但不限于，thf、dmf、dmac、dmso或nmp)或质子溶剂(例如，水、meoh、etoh或iproh)或者其混合物中，与胺r4nh2反应，以得到一般结构s16的化合物。应注意到，若实例提供带有拆分的对映异构中心的r4，则其他的对映异构体或其外消旋混合物可通过选择适合的原料得到。优选的x3取代基包括f、cl、和br，优选的x4基团包括cl、br、和-co2-pg2。硝基基团的还原可通过使用金属催化剂(例如，载于炭上的钯或雷氏镍)、于质子溶剂(例如，甲醇或乙醇)或非质子溶剂(例如，dmf、thf或etoac)中在1-6atmh2下氢化来实现。或者，硝基基团可使用铁、锌、sncl2或其他适当的金属，于酸性介质(例如，1nhcl、acoh或水性nh4cl(于thf或甲醇中))中，加以还原，以提供一般结构s17的化合物(方案5a)。例如s18的化合物可通过酰基卤化物依标准方式或者通过羧酸酯经由标准的酰胺偶联方案，加以酰基化，以提供化合物s19。还原为化合物s20可在标准条件下，使用还原剂(例如，lah或bh3-thf或bh3-dms)进行(方案5b)。方案5经由方案5a和5b所述的方法制备的二胺化合物s17和s20，总称为二胺s21(方案6)，可使用一般结构s14的酸，于标准酰胺偶联方案下加以酰化，以得到酰胺s22，其是以100%s22a至100%s22b的混合物形式存在。此胺s22的混合物可通过各种方法环化得到一般结构s23的化合物。胺s22可在微波条件下(10-60分钟，于120-180℃下)，与脱水剂(例如，t3p®)或者烷醇(例如，正丁醇)一起加热，以得到化合物s23。或者，化合物s22的混合物可在酸性条件下(例如，acoh，60-100℃)或碱性条件下(例如，水性naoh或koh(于1,4-二噁烷中)，60-100℃)加热，以提供s23。一般结构s23的化合物(x4=cl、br或i)可通过在15-100psi一氧化碳气氛、20-100℃的温度下、使用适合的醇(例如，meoh或etoh或其他的烷醇)进行的钯催化的羰基化作用，转化为结构s24的酯。酯s24的水解可如方案4所述进行，以提供酸s25。就化合物s22(其中x4=co2-pg2)而言，转化为酯s24是在与如前文所述类似的条件下进行，除了使用碱性环化方法，其中化合物s25可直接自反应混合物分离。就化合物s24(其中x4是co2tbu)而言，脱保护为酸s25可在方案4所述的酸性条件下进行。或者，就化合物s24(其中pg2是c1-c8烷基，例如，甲基、乙基、己基或辛基)而言，酯脱保护可使用本领域技术人员熟知的各种酶(包括酯酶、蛋白酶、肽酶、脂酶、和糖苷酶)来进行。水解反应也可通过使用1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯的水溶液，于室温下处理所述酯来进行。方案6此外，二胺s21可通过数种方法转化为2-氯甲基苯并咪唑s26(方案7)。于非质子溶剂(例如，1,4-二噁烷)中用2-氯乙酰氯或氯乙酸酐处理，然后于40-100℃下加热2-18小时，可得到所需的苯并咪唑s26(其中z1、z2和z3是ch)。在其中z1、z2和z3不都是crz的情况下，于非质子溶剂(例如，1,4-二噁烷)中用2-氯乙酰氯处理30分钟至4小时之后，将溶剂换成酸性介质(例如，acoh或tfa)，然后在40-100℃下加热2-18小时，以提供所需化合物s26。也可在0至80℃的温度下、于非质子溶剂(例如，但不限于，1,4-二噁烷、thf或mecn)中，用氯乙酸酐处理二胺s21，然后在60-100℃下加热2至18小时，以得到所需的化合物s26。此外，可用2-氯-1,1,1-三甲氧基乙烷，于非质子溶剂(例如，但不限于，1,4-二噁烷、thf或mecn)中或质子溶剂(例如，meoh或etoh)中、在酸催化剂(例如，ptsa)存在下，在20-100℃下，处理二胺s21。或者，二胺s21可于非质子溶剂(例如，但不限于，均三甲苯)中与2-羟基乙酸在100-180℃下加热，以提供羟基甲基中间体。羟基甲基基团转化为氯甲基化合物s26可通过标准方法(包括于非质子溶剂中用socl2处理)完成。可在碱(例如，碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、或碳酸氢铯、nah)或者有机胺碱(例如，et3n、dipea、dbu等等)存在下、于极性非质子溶剂(例如，但不限于，thf、mecn、dmf、dmac、dmso或nmp)中，使化合物s8与一般结构s26的化合物反应，以得到化合物s23(x4=cl、br、i)或化合物s24(x4=co2-pg2)，然后，将其用于经由方案6所述的方法得到化合物s25。方案7或者(方案8)，一般结构s26的化合物可在碱(例如，碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、或碳酸氢铯、nah)或者有机胺碱(例如，et3n、dipea、dbu等等)存在下于极性非质子溶剂(例如，但不限于，thf、mecn、dmf、dmac、dmso或nmp)中，与适当取代和保护的哌嗪s12反应，以提供化合物s27(方案8)。pg1的移除可使用多种描述于文献的方法来执行，以提供胺s28。一般结构s23(x4=cl、br或i)或s24(x4=co2-pg2)的化合物的转化可通过诸如一般结构s4的化合物与之前方案3所述之间的buchwald-hartwigc-n偶联的方式来完成。然后，一般结构s23或s24的化合物可用于经由方案6所述的方法得到结构s25的化合物。方案8一般结构s25的化合物也可如方案9所讨论地制备。二醇s9可被保护而得到s29。三甲基甲硅烷基乙氧基甲基基团是优选的保护基。将二醇保护为对应的缩醛(例如，甲醛缩醛)也是优选的。然后，化合物s29可与被取代的硼酸或硼酸酯(s5)反应，并且然后用方案1所述的方法将烯烃还原，以提供一般结构s31的化合物(其中y=ch)。或者，可使用方案3所述的方法，将化合物s29与一般结构s12的哌嗪偶联，以提供s31(其中y=n)。可使用方案7所述的方法，将一般结构s31的化合物脱保护，并且然后与s26偶联，以得到一般结构33的化合物。或者，通过如方案4和6所述地将s32转化为对应的n-乙酸衍生物，并且随后使其与二胺s21缩合，可由s32制备一般结构s33的化合物。使用本领域技术人员已知的方法，将s33脱保护，可提供一般结构s34的二醇，然后，可使用方案2所述的方法，使其与一般结构s11的炔反应，以提供s23或s24。或者，如方案2所讨论的，使用醛、酮或其衍生物，可将s34转化为s23或s24。然后，一般结构s23或s24的化合物可用于经由方案6所述的方法得到结构s25的化合物。方案9一般结构s24和s33的化合物(其中y=n且x-l=环丙基)可如方案10所讨论地制备。可使用本领域技术人员熟知的方法，将保护的哌啶酮s35同系化为不饱合的酯s36。例如，s42与已经使用强碱(例如，叔丁醇锂、叔丁醇钠或叔丁醇钾)去质子化的磷酸酯(例如，(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯)的horner-wadsworth-emmons烯化作用可提供s36。所述反应通常于非质子溶剂如thf或dme中、在0至-50℃左右的温度下进行。s36转化为环丙烷衍生物s37可通过使用衍生自三甲基碘化亚砜(trimethylsulfoxoniumiodide)的氧化锍内鎓盐(sulfoxoniumylid)和碱(例如，叔丁醇钾或氢化钠)处理来完成。使用方案6所述的方法进行s37的脱保护和随后的所得羧酸s38与s21(其中x4=co2pg2)的偶联，可提供一般结构s39的化合物。使用方案3所述的方法进行s39的脱保护和与s4的偶联可得到一般结构s24的化合物(其中y=n且x-l是环丙基)。然后一般结构s24的化合物可用于经由方案6所述的方法得到结构s25的化合物。或者，可使用方案3所述的方法，使s40与s29反应，以提供s33(其中y=n且x-l=环丙基)。然后一般结构s33的化合物可用于经由方案6和9所述的方法得到结构s25的化合物。方案10或者，一般结构s25的化合物(其中y=n且x-l是环丙基)可如方案11所述制备。由s37去除pg1，以提供哌啶衍生物s43。以与方案3所述类似的方式进行的s43与s4的偶联提供s13(其中y=n且x-l是环丙基)。然后，脱保护可提供一般结构s14的化合物，然后，其可用于如方案6所述地制备s25。方案11。【实施例】下文例示本发明的非限制性化合物的合成。其他本发明范围内的化合物可使用这些实施例所例示的方法单独或连同本领域普遍已知的技术制备。一般而言，实验是于惰性气氛(氮气或氩气)下进行，特别是在使用了对于氧或湿气敏感的试剂或中间体的情况下。商业溶剂和试剂通常是在未进一步纯化的情况下使用。视需要，使用无水溶剂，通常为来自acrosorganics的acroseal®产品，来自sigma-aldrich的aldrich®sure/seal™或者来自emdchemicals的drisolv®产品。在其他的情况下，商业溶剂通过装填4å分子筛的柱，直到达到下列水的qc标准：a)<100ppm，对于二氯甲烷、甲苯、n,n-二甲基甲酰胺和四氢呋喃而言；b)<180ppm，对于甲醇、乙醇、1,4-二噁烷、和二异丙基胺而言。就非常敏感的反应而言，溶剂进一步经金属钠、氢化钙、或分子筛处理，且在正要使用前蒸馏。产物通常在进行进一步反应或提交生物测试之前，于真空中干燥。质谱法数据由液相色谱法-质谱法(lcms)、大气压化学电离(apci)或气相色谱法-质谱法(gcms)仪器报告。符号♦表示在质谱中观察到氯同位素模式。手性分离用于在本发明化合物的制备期间，将某些中间体的对映异构体或非对映异构体分离。当手性分离完成时，分离出的对映异构体根据其洗脱顺序，指定为ent-1或ent-2(或者diast-1或diast-2)。在某些实施方案中，指定为ent-1或ent-2的对映异构体可用作原料，以制备其他的对映异构体或非对映异构体。在这种情况下，制备得到的对映异构体根据其原料分别指定为ent-x1和ent-x2；类似地，制备的非对映异构体根据其原料分别指定为diast-x1和diast-x2(或diast-)。在使用多个中间体的合成中，类似地使用diast-y和diast-z命名法。就带有两个手性中心的化合物而言，在各立体中心的立体异构体于不同的时间分离。中间体或实施例的ent-1或ent-2(或者diast-1或diast-2)的指定是指在所述步骤完成的分离的洗脱顺序。可认识到，当手性中心的立体异构体于带有两个或更多个中心的化合物中分离时，分离出的对映异构体是彼此的非对映异构体。举列而言(但非局限)，实施例15和16具有两个手性中心。当中间体c36分离为ent-1(得到中间体p17)和ent-2(得到中间体p18)时，环丙基部分的手性中心被分离。然后，将p18用于制备c70，其具有一个富集在环丙基手性碳上的立体异构体以及在二氧杂环戊烷碳上的立体异构体的混合物。c70然后分离为在二氧杂环戊烷碳上的diast-y1，得到中间体c71，以及在二氧杂环戊烷碳上的diast-y2，得到中间体c72，其中这些中间体富集于单一立体异构体。然后，将c71用于制备实施例15，其名称确定为2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸，diast-x1，三氟乙酸盐[由p18开始，经由c71]。在这些制备中，在混合物经历分离程序之后，手性中心于接近所述中心处确定为“abs”，理解分离的对映异构体可能并非对映异构纯的。典型地，在各手性中心的富集对映异构体是分离物的>90%。优选地，在各中心的富集对映异构体是混合物的>98%。在某些实施例中，对映异构体的旋光度是使用旋光计测量的。根据其观察的旋转数据(或其特定的旋转数据)，顺时针旋转的对映异构体指定为(+)-对映异构体且逆时针旋转的对映异构体指定为(-)-对映异构体。外消旋化合物以未绘出的或描述的立体化学表示，或者以在结构旁出现(+/-)表示；在后者的情况下，所表示的立体化学代表化合物取代基的相对(而非绝对的)构型。通过可检测的中间体进行的反应通常后接lcms，且使其在添加后续的试剂之前进行至完全转化。就参考其他实施例或方法中的程序的合成而言，反应条件(反应时间和温度)可有所不同。一般而言，反应后接薄层色谱法或质谱法，且在适当时经历后处理。纯化可因实验而异：一般而言，选择用于洗脱剂/梯度的溶剂和溶剂比以提供适当的rfs或保留时间。这些制备和实施例中的所有原料是市售的或可通过本领域已知的方法或如本文所述地制备。制备p14-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p1)步骤1：2-溴-6-[(4-氯-2-氟苯基)(羟基)甲基]苯酚(c1)的合成此实验是以相同规模的两个批次进行的。将正丁基锂(于己烷中的2.5m溶液；32.8ml，82.0mmol)缓慢地添加至1-溴-4-氯-2-氟苯(17.2g，82.1mmol)于乙醚(100ml)中的-70℃溶液中，同时将反应混合物的温度维持在低于-60℃。于-70℃下将反应混合物搅拌20分钟后，缓慢地添加3-溴-2-羟基苯甲醛(5.5g，27mmol)于乙醚(100ml)中的溶液，同时将反应温度维持在低于-60℃。于-70℃下进一步搅拌1小时后，通过在-70℃下添加氯化铵水溶液(50ml)，将反应淬灭，并且用水(100ml)稀释所得混合物。在此时点，将两批次合并并且用乙酸乙酯(400ml)萃取；用饱和的氯化钠水溶液(200ml)洗涤有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至7%乙酸乙酯(于石油醚中))提供呈白色固体的c1。合并产量：15.7g，47.4mmol，88%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.44(dd,j=8.0,1.5hz,1h),7.37(dd,j=8.1,8.1hz,1h),7.15(brdd,j=8.5,2.1hz,1h),7.12-7.05(m,2h),6.80(dd,j=7.8,7.8hz,1h),6.78(s,1h),6.31(d,j=4.8hz,1h),3.02(brd,j=4.9hz,1h)。步骤2：4-溴-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯(c2)的合成将过碘酸钠(25.4g，119mmol)于水(105ml)中的溶液添加至c1(15.7g，47.4mmol)于甲醇(450ml)中的溶液中，并且于30℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是，于真空中将其浓缩。用二氯甲烷(500ml)将残留物稀释后，用水(500ml)将其洗涤。然后，使二氯甲烷溶液经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。经由硅胶色谱法(洗脱剂：石油醚)进行的纯化提供呈白色固体的c2。产量：10.0g，30.3mmol，64%。下面的1hnmr数据是由以相同方式但在较小的规模下进行的实验得到的。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.67-7.61(m,2h),7.50(s,1h),7.43(brdd,j=8,2hz,1h),7.09(dd,j=8.3,1.1hz,1h),7.01(dd,j=7.9,1.1hz,1h),6.86(dd,j=8.1,8.1hz,1h)。步骤3：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(c3)的合成将含有c2(8.00g，24.3mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(9.01g,29.1mmol)、碳酸钠(5.15g，48.6mmol)、和[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)[pd(dppf)cl2；888mg，1.21mmol]于1,4-二噁烷(80ml)和水(32ml)中的悬浮液的反应烧瓶抽真空并且装入氮气。重复二次该抽真空的循环，并且然后，于90℃下，将反应混合物搅拌16小时。于真空中将溶剂去除后，使残留物分配于乙酸乙酯(200ml)和水(200ml)。用饱和的氯化钠水溶液(100ml)洗涤有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至4.3%乙酸乙酯(于石油醚中))提供了产物，将其与来自使用c2(2.00g，6.07mmol)所进行的类似反应的物质合并，以得到呈浅黄色胶状物的c3。合并产量：10.3g，23.8mmol，78%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.53(dd,j=8.3,7.8hz,1h),7.23-7.16(m,3h),6.88-6.83(m,2h),6.81-6.76(m,1h),6.34-6.28(brm,1h),4.10-4.05(m,2h),3.61(brdd,j=6,5hz,2h),2.59-2.50(brm,2h),1.48(s,9h)。步骤4：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p1)的合成于50℃、氢气(45psi)下，将c3(10.3g，23.8mmol)和三(三苯基膦)氯化铑(i)(wilkinson催化剂；1.54g，1.66mmol)于甲醇(100ml)中的溶液搅拌18小时。然后，使反应混合物通过硅藻土垫过滤，并且于减压下，使滤液浓缩且经历硅胶色谱法(梯度：0%至9%乙酸乙酯(于石油醚中))。将所得到的物质与来自使用c3(1.67g，3.87mmol)所进行的类似反应的物质合并，以得到呈无色胶状物的p1。合并产量：10.3g，23.7mmol，86%。lcmsm/z456.1♦[m+na+]。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.52(dd,j=8.5,7.6hz,1h),7.23-7.17(m,2h),7.16(s,1h),6.83(dd,j=7.8,7.8hz,1h),6.78-6.69(m,2h),4.35-4.10(brm,2h),2.89-2.71(m,3h),1.89-1.77(m,2h),1.77-1.63(m,2h),1.47(s,9h)。制备p24-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p2)步骤1：4-溴-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯(c4)的合成将1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮(316g，1.83mol)和对甲苯磺酸(6.02g，35.0mmol)添加至3-溴苯-1,2-二醇(330g，1.75mol)于甲苯(1.5l)中的溶液中。对反应仪器配备dean-stark分水器，并且于140℃下，将反应混合物加热60小时，于是，于真空中将溶液浓缩并且使用硅胶色谱法(洗脱剂：石油醚)进行纯化；得到呈黄色油状物与固体的混合物的c4。产量：158g，460mmol，26%。1hnmr(400mhz,氯仿-d):δ7.54(dd,j=8.4,8.4hz,1h),7.17-7.10(m,2h),6.95(dd,j=7.9,1.4hz,1h),6.75(dd,abx模式的组分,j=7.8,1.4hz,1h),6.70(dd,abx模式的组分,j=7.9,7.9hz,1h),2.11(d,j=1.1hz,3h)。步骤2：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(c5)的合成将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(62g,200mmol)和碳酸钠(100g，940mmol)添加至c4(58.0g，169mmol)于1,4-二噁烷(600ml)中的溶液。在添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯化钯(ii)(6.0g，8.2mmol)之后，将反应混合物加热至90℃并且搅拌16小时。然后，添加水(500ml)，并且用乙酸乙酯(2x500ml)萃取所得的混合物。用饱和的氯化钠水溶液(2x500ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至9%乙酸乙酯(于石油醚中))提供呈黄色油状物的c5。产量：56.0g，126mmol，75%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.50(dd,j=8.2,8.2hz,1h),7.17-7.09(m,2h),6.83-6.77(m,2h),6.74(dd,abx模式的组分,j=5.4,3.6hz,1h),6.39-6.33(brm,1h),4.14-4.08(m,2h),3.70-3.56(m,2h),2.66-2.45(m,2h),2.07(d,j=1.1hz,3h),1.50(s,9h)。步骤3：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p2)的合成将三(三苯基膦)氯化铑(i)(wilkinson催化剂；8.10g，8.75mmol)添加至c5(56.0g，126mmol)于甲醇(200ml)中的溶液中，并且于氢气(45psi)下，将反应混合物加热至50℃，持续18小时。然后使其冷却至25℃并且通过硅藻土过滤。于真空中，将滤液浓缩，并且使用硅胶色谱法(第一柱-梯度：0%至9%乙酸乙酯(于石油醚中)；第二柱-梯度：0%至2%乙酸乙酯(于石油醚中))纯化两次，以得到呈黄色固体的p2。产量：37.0g，82.6mmol，66%。lcmsm/z392.1♦[(m-2-甲基丙-1-烯)+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.51(dd,j=8.3,8.0hz,1h),7.17-7.09(m,2h),6.77(dd,abc模式的组分,j=7.8,7.8hz,1h),6.70(dd,abc模式的组分,j=7.7,1.3hz,1h),6.66(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.3hz,1h),4.37-4.13(brm,2h),2.92-2.73(m,3h),2.05(d,j=1.1hz,3h),1.90-1.63(m,4h),1.49(s,9h)。制备p34-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶,对甲苯磺酸盐(p3)步骤1：4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(c6)和4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(c7)的分离将p2(75.2g，168mmol)分离为其组成对映异构体经由sfc(超临界流体色谱法)[柱：chiraltechnologieschiralpakad-h，5µm；流动相：4：1二氧化碳/(含0.2%1-氨基丙-2-醇的2-丙醇)]来进行。第一个洗脱出的化合物指定为c6，并且第二个洗脱出的对映异构体指定为c7。所指出的绝对构型是根据在c8(其衍生自c6，参见下文)上所进行的单晶x射线结构测定指派的。c6-产量：38.0g，84.8mmol，50%。保留时间3.64分钟[柱：chiraltechnologieschiralpakad-h，4.6x250mm，5µm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含0.2%1-氨基丙-2-醇的2-丙醇；梯度：5%b，1.00分钟，然后5%至60%b，历经8.00分钟；流速：3.0ml/分钟；反压：120巴]。c7-产量：36.8g，82.2mmol，49%。保留时间4.19分钟(分析型sfc条件与用于c6的那些相同)。步骤2：4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶,对甲苯磺酸盐(p3)的合成用对甲苯磺酸单水合物(791mg，4.16mmol)处理c7(1.62g，3.62mmol)于乙酸乙酯(36ml)中的溶液并且于45℃下加热。23小时后，使反应混合物冷却至室温并且经由过滤收集固体。用乙酸乙酯与庚烷的混合物(1：1，2x15ml)将其冲洗，以得到呈白色固体的p3。产量：1.37g，2.63mmol，73%。lcmsm/z348.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.53(vbrs,1h),8.29(vbrs,1h),7.65-7.55(m,2h),7.47(d,j=8.1hz,2h),7.35(dd,j=8.4,2.0hz,1h),7.11(d,j=7.8hz,2h),6.88-6.81(m,2h),6.75-6.68(m,1h),3.42-3.33(m,2h),3.11-2.93(m,3h),2.29(s,3h),2.03(s,3h),1.98-1.82(m,4h)。c6转化为用于测定绝对立体化学的4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶，甲磺酸盐(c8)将对甲苯磺酸(377mg,2.19mmol)添加至c6(490mg，1.09mmol)于乙酸乙酯(5.5ml)中的溶液中，并于室温搅拌反应混合物过夜。用另外的乙酸乙酯稀释之后，相继用碳酸氢钠水溶液、水、以及饱和的氯化钠水溶液洗涤反应混合物，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。产量：375mg，1.08mmol，99%。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.59(dd,j=8.3.8.3hz,1h),7.27(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.20(brdd,j=8.4,2.1hz,1h),6.81-6.75(m,1h),6.74-6.67(m,2h),3.18-3.09(m,2h),2.88-2.77(m,1h),2.77-2.67(m,2h),2.02(d,j=0.7hz,3h),1.85-1.73(m,4h)。制备此游离碱(4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶)于乙酸乙酯中的0.1m溶液并且经历盐筛选。在此仅描述甲磺酸盐的形成。将甲磺酸(25μl，39μmol)与底物溶液(0.1m；0.25ml，25µmol)的混合物搅拌过夜。然后，添加充分的甲醇，以将存在的固体溶解，并且添加乙酸乙酯(3ml)。使所得到的溶液在未搅拌的条件下，缓慢地蒸发，以得到c8晶体，其中之一用于下文所述的单晶x射线结构测定。c8的单晶x射线结构测定单晶x射线分析数据收集是于室温下，于brukerd8quest衍射仪上进行的。数据收集由ω和φ扫描组成。通过内在相位(intrinsicphasing)，使用shelx软件套，于斜方晶系空间群p212121中解析结构。然后，通过全矩阵最小二乘法精修结构。所有的非氢原子皆被发现且使用各向异性位移参数(anisotropicdisplacementparameters)精修。经由n1_h1x_o4质子转移，确认甲磺酸盐的形成。由傅立叶差分图(fourierdifferencemap)发现位于氮和氧上的氢原子且以限制的距离将其精修。剩余的氢原子置于计算出的位置上且使其载于其承载原子上。最终的精修包括所有氢原子的各向同性位移参数。采用似然法(hooft，2008)的绝对结构分析是使用platon(spek)进行的。结果指出，绝对结构已经正确地指派；所述方法计算出结构正确的概率为100%。hootf参数报告为0.02，esd为0.0012，并且parson参数报告为0.07，esd为0.009。c7的绝对构型确认为(r)。不对称单元是由一个分子的c8质子化游离碱以及一个分子的去质子化甲磺酸所构成。最终r指数是4.6%。最终的差分傅立叶显示无遗漏或错位的电子密度。相关晶体、数据收集、和精修信息总结于表a。原子坐标、键长、键角、和位移参数列于表b-d。软件和参考文献shelxtl,version5.1,brukeraxs,1997.platon,a.l.spek,j.appl.cryst.2003,36,7-13.mercury,c.f.macrae,p.r.edington,p.mccabe,e.pidcock,g.p.shields,r.taylor,m.towler和.vandestreek,j.appl.cryst.2006,39,453-457.olex2,o.v.dolomanov,l.j.bourhis,r.j.gildea,j.a.k.howard和.puschmann,j.appl.cryst.2009,42,339-341.r.w.w.hooft,l.h.straver和.l.spek,j.appl.cryst.2008,41,96-103.h.d.flack,actacryst.1983,a39,867-881。表a：c8的晶体数据和结构精修表b：c8的原子坐标(x104)以及相当的各向同性位移参数(å2x103)。u(eq)定义为正交uij张量的痕量的三分之一。表c：c8的键长[å]和角[˚]。用于产生等效原子的对称变换。表d：c8的各向异性位移参数(å2x103)。各向异性位移因子指数采取下列形式：-2π2[h2a*2u11+...+2hka*b*u12]。p3，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐的制备4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐(p3，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐)在50℃下，将c13，游离碱(519mg，1.49mmol)和二对甲苯酰基-l-酒石酸(278mg，0.719mmol)于乙腈(7.5ml)中的溶液搅拌1.5小时。使所述混合物以0.2℃/分钟冷却至室温。于室温下15小时后，将混合物加热至65℃并且装入乙腈(15ml)。使所述混合物以0.2℃/分钟冷却至室温。于室温下15小时后，将混合物加热至54℃。3小时后，过滤收集固体，并且于氮气下，35℃下，在真空烘箱中干燥，以提供呈白色固体的p3，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐(217mg，0.296mmol，20%，82%ee)。在50℃下使p3，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐(217mg，0.296mmol，20%，82%ee)于乙腈(8.0ml)中的溶液以0.2℃/分钟冷却至室温。15小时后，过滤收集固体，并且于氮气下、35℃下，在真空烘箱中干燥，以得到呈白色固体的p3，二对甲苯酰基-l-酒石酸盐(190mg，0.259mmol，88%，88%ee)。lcmsm/z348.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.9-8.5(brs,2h),7.79(d,j=8.1hz,4h),7.64-7.54(m,2h),7.34(dd,j=8.4,2.1hz,1h),7.26(d,j=8.0hz,4h),6.87-6.78(m,2h),6.69(dd,j=6.7,2.5hz,1h),5.58(s,2h),3.37-3.28(m,2h,假定的；被水峰部分遮蔽),3.05-2.89(m,3h),2.33(s,6h),2.02(s,3h),1.92-1.80(m,4h)。保留时间：峰1(4.97分钟，次要的)和峰2(5.31分钟，主要的){柱：chiralpakic-u3.0x50mm，1.6μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：于甲醇中的0.1%异丙胺；梯度：10%b，5.00分钟；然后45%b，0.6分钟；流速：1.7ml/分钟；反压：130巴}。制备p44-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p4)于120℃下，将p2(2.00g，4.46mmol)、氰化锌(734mg，6.25mol)、锌(70.1mg，1.07mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁(dppf；198mg，0.357mmol)以及三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(164mg，0.179mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(20ml)中的悬浮液搅拌16小时，于是将其过滤。将滤液与水(50ml)混合并且用乙酸乙酯(3x50ml)将其萃取；然后，相继用水(30ml)和饱和的氯化钠水溶液(20ml)洗涤合并的有机层，并且将其于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至30%乙酸乙酯(于石油醚中))得到固体，用乙腈(15ml)和水(15ml)将其处理并且经历冷冻干燥。如此得到呈浅黄色固体的p4。产量：1.17g，2.67mmol，60%。lcmsm/z461.3[m+na+]。1hnmr(400mhz,氯仿-d)7.71(dd,j=7.7,7.6hz,1h),7.45(dd,j=8.0,1.6hz,1h),7.42(dd,j=10.0,1.5hz,1h),6.79(dd,abc模式的组分,j=7.7,7.6hz,1h),6.72(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.3hz,1h),6.68(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.3hz,1h),4.37-4.14(brm,2h),2.91-2.73(m,3h),2.07(d,j=1.1hz,3h),1.89-1.62(m,4h),1.49(s,9h)。制备p5和p64-溴-2-苯基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯，ent-1(p5)和4-溴-2-苯基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯，ent-2(p6)步骤1：2-溴-6-[羟基(苯基)甲基]苯酚(c9)的合成以反应温度维持在低于-60℃的速率，将苯基锂(于1-丁氧基丁烷中的1.9m溶液；78.5ml，149mmol)缓慢地添加至3-溴-2-羟基苯甲醛(10.0g，49.7mmol)于四氢呋喃(70ml)中的-70℃的溶液中。在-70℃下，将所得到的悬浮液搅拌1小时，并且然后使其温热至室温过夜，于是，将其倒入0℃的氯化铵水溶液(30ml)中。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取该混合物，并且用饱和的氯化钠水溶液(30ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至5%乙酸乙酯(于石油醚中))提供呈黄色固体的c9。产量：6.11g，21.9mmol，44%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.45-7.28(m,6h),7.22-7.18(m,1h),7.06(brd,j=7.7hz,1h),6.77(dd,j=7.9,7.8hz,1h),6.06(brs,1h),2.89(brs,1h)。步骤2：4-溴-2-苯基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯(c10)的合成将过碘酸钠(11.7g，54.7mmol)于水(175ml)中的溶液添加至c9(6.11g,21.9mmol)于甲醇(370ml)中的溶液中。于30℃下，将反应混合物搅拌40小时，于是经由真空浓缩，将大部分的甲醇移除。用二氯甲烷(5x100ml)萃取所得混合物，并且相继用亚硫酸钠水溶液(100ml)和饱和的氯化钠水溶液(100ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩。硅胶色谱法(洗脱剂：石油醚)提供呈无色油状物的c10。产量：4.50g，16.2mmol，74%。lcmsm/z278.5(观察到溴同位素模式)[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.62-7.57(m,2h),7.49-7.43(m,3h),7.04(s,1h),7.00(dd,j=8.0,1.4hz,1h),6.79(dd,abx模式的组分,j=7.8,1.4hz,1h),6.75(dd,abx模式的组分,j=7.9,7.8hz,1h)。步骤3：4-溴-2-苯基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯，ent-1(p5)和4-溴-2-苯基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯，ent-2(p6)的分离使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod，10μm；流动相：3：1二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的甲醇)]，分离出包含c10(5.00g，18.0mmol)的对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体指定为ent-1(p5)，且第二个洗脱出的对映异构体指定为ent-2(p6)；两个皆以黄色油状物的形式得到。p5产量：2.20g，7.94mmol，44%。lcmsm/z277.0(观察到溴同位素模式)[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.63-7.55(m,2h),7.51-7.42(m,3h),7.04(s,1h),7.00(dd,j=8.0,1.3hz,1h),6.80(dd,abx模式的组分,j=7.8,1.4hz,1h),6.75(dd,abx模式的组分,j=7.9,7.8hz,1h)。保留时间3.28分钟(柱：chiraltechnologieschiralcelod-h，4.6x150mm，5µm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的甲醇；梯度：5%至40%b，历经5.5分钟；流速：2.5ml/分钟)。p6产量：2.00g，7.22mmol，40%。lcmsm/z276.9(观察到溴同位素模式)[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.63-7.55(m,2h),7.50-7.42(m,3h),7.04(s,1h),7.00(dd,j=8.0,1.4hz,1h),6.80(dd,abx模式的组分,j=7.8,1.4hz,1h),6.75(dd,abx模式的组分,j=7.9,7.9hz,1h)。保留时间3.73分钟(分析条件与用于p5的那些相同)。制备p74-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p7)步骤1：2-(4-溴-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基)-5-氯吡啶(c11)的合成将5-氯-2-乙炔基吡啶(1.80g，13.1mmol)、3-溴苯-1,2-二醇(2.47g，13.1mmol)和十二羰基三钌(167mg，0.261mmol)于甲苯(25ml)中的混合物脱气1分钟，并且然后于100℃下加热16小时。用乙酸乙酯(30ml)稀释反应混合物并且使其通过硅藻土垫过滤；于真空下，将滤液浓缩并且使用硅胶色谱法(梯度：0%至1%乙酸乙酯(于石油醚中))进行纯化，以提供呈黄色油状物的c11。产量：1.73g，5.30mmol，40%。lcmsm/z325.6(观察到溴-氯同位素模式)[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.63(dd,j=2.4,0.7hz,1h),7.71(dd,abx模式的组分,j=8.4,2.4hz,1h),7.60(dd,abx模式的组分,j=8.4,0.7hz,1h),6.97(dd,j=8.0,1.4hz,1h),6.76(dd,abx模式的组分,j=7.8,1.4hz,1h),6.72(dd,abx模式的组分,j=8.0,7.8hz,1h),2.10(s,3h)。步骤2：4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(c12)的合成将[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)(388mg，0.530mmol)添加至c11(1.73g，5.30mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(1.64g，5.30mmol)、和碳酸铯(5.18g，15.9mmol)于1,4-二噁烷(35ml)和水(6ml)中的悬浮液中。在90℃下，将反应混合物搅拌4小时，于是，用乙酸乙酯(30ml)和水(5ml)将其稀释。于真空中，将有机层浓缩并且使残留物经历硅胶色谱法(梯度：0%至5%乙酸乙酯(于石油醚中))，以得到呈黄色胶状物的c12。产量：1.85g，4.31mmol，81%。lcmsm/z451.0♦[m+na+]。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.62(dd,j=2.5,0.8hz,1h),7.69(dd,abx模式的组分,j=8.4,2.4hz,1h),7.57(dd,abx模式的组分,j=8.4,0.8hz,1h),6.84-6.79(m,2h),6.78-6.73(m,1h),6.39-6.33(brm,1h),4.13-4.07(m,2h),3.68-3.58(m,2h),2.60-2.51(brm,2h),2.07(s,3h),1.49(s,9h)。步骤3：4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(p7)的合成于真空中，将c12(2.61g，6.08mmol)和三(三苯基膦)氯化铑(i)(wilkinson催化剂；563mg，0.608mmol)于甲醇(100ml)中的溶液脱气，并且然后用氢净化；将此抽真空-净化循环进行总共三次。然后，于氢气(50psi)下、60℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是将其过滤。于真空中，将滤液浓缩，并且使用硅胶色谱法(梯度：0%至10%乙酸乙酯(于石油醚中))，将残留物纯化；将所得到的物质与来自c12(110mg，0.256mmol)上所进行的类似氢化的物质合并，以提供呈且浅黄色胶状物的p7。合并产量：2.05g，4.76mmol，75%。lcmsm/z431.3♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.62(d,j=2.3hz,1h),7.69(dd,abx模式的组分,j=8.4,2.4hz,1h),7.57(d,ab四重峰的一半,j=8.4hz,1h),6.79(dd,abc模式的组分,j=7.8,7.7hz,1h),6.72(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.3hz,1h),6.68(brd,abc模式的组分,j=7.9hz,1h),4.32-4.12(brm,2h),2.91-2.73(m,3h),2.05(s,3h),1.90-1.62(m,4h),1.48(s,9h)。制备p8和p94-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯,ent-1(p8)和4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯,ent-2(p9)使用sfc{柱：phenomenexluxamylose-1，5μm；流动相：9：1二氧化碳/[含有0.2%(7m的于甲醇中的氨)的2-丙醇]}，执行将p7(500mg，1.16mmol)分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体指定为ent-1(p8)，且第二个洗脱出的对映异构体指定为ent-2(p9)。p8产量：228mg，0.529mmol，46%。保留时间4.00分钟{柱：phenomenexluxamylose-1，4.6x250mm，5μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：[含有0.2%(7m的于甲醇中的氨)的2-丙醇]；梯度：5%b，1.00分钟，然后5%至60%b，历经8.00分钟；流速：3.0ml/分钟；反压：120巴}。p9产量：229mg，0.531mmol，46%。保留时间4.50分钟(分析条件与用于p8的那些相同)。制备p10{4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酸(p10)步骤1：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶,对甲苯磺酸盐(c13)的合成在60℃下，将p2(5.0g，11mmol)和对甲苯磺酸(4.81g，27.9mmol)于乙酸乙酯(100ml)中的溶液搅拌2小时，于是在真空中将其浓缩，以得到呈黄色胶状物的c13。将此物质直接用于下一个步骤。lcmsm/z347.9♦[m+h]+。步骤2：{4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酸乙酯(c14)的合成将碳酸钾(7.71g，55.8mmol)和溴乙酸乙酯(1.86g，11.2mmol)添加至c13(来自前面的步骤；≤11mmol)于乙腈(150ml)中的溶液中，并且在55℃下，将反应混合物搅拌16小时。然后，将其过滤，并且于真空中将滤液浓缩且使用硅胶色谱法(梯度：0%至30%乙酸乙酯(于石油醚中))进行纯化，以得到呈黄色胶状物的c14。经1hnmr分析，此物质并非完全纯的。产量：3.57g，8.23mmol，75%(经过两个步骤)。1hnmr(400mhz,氯仿-d),仅c14峰：δ7.52(dd,j=8.4,8.0hz,1h),7.17-7.07(m,2h),6.77(dd,abc模式的组分,j=7.8,7.8hz,1h),6.72-6.67(m,2h),4.21(q,j=7.1hz,2h),3.27(s,2h),3.07(m,2h),2.70(tt,j=12.1,3.8hz,1h),2.35(ddd,j=11.5,11.5,2.7hz,2h),2.04(d,j=1.1hz,3h),2.02-1.76(m,4h),1.29(t,j=7.1hz,3h)。步骤3：{4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酸(p10)的合成在25℃下，将c14(3.57g，8.23mmol)和氢氧化钠水溶液(3m；13.7ml，41.1mmol)于甲醇(80ml)和四氢呋喃(40ml)的混合物中的溶液搅拌16小时。于真空中，将溶剂去除后，通过添加1m盐酸，将水性残留物酸化至ph7，并且然后用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，2x100ml)萃取。使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩，以提供呈黄色固体的p10。产量：2.95g，7.27mmol，88%。lcmsm/z406.2♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.61(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.29(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.22(ddd,j=8.4,2.0,0.8hz,1h),6.82(dd,abc模式的组分,j=8.3,7.1hz,1h),6.78-6.72(m,2h),3.65-3.54(brm,2h),3.51(s,2h),3.04-2.88(m,3h),2.23-2.07(m,2h),2.07-1.93(m,2h),2.04(d,j=1.1hz,3h)。制备p112-(氯甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p11)步骤1：3-[(2-甲氧基乙基)氨基]-4-硝基苯甲酸甲酯(c15)的合成将三乙胺(40.7g，402mmol，55.8ml)添加至3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(50g，250mmol)于四氢呋喃(400ml)中的无色溶液中，然后于室温下，逐滴添加2-甲氧基乙胺(30.2g，402mmol)(于四氢呋喃(100ml)中)。在55℃下，将所得的黄色溶液搅拌18小时。将所述溶液冷却至室温并且于减压下浓缩，以去除四氢呋喃。将所得到的黄色固体溶于乙酸乙酯(800ml)并且用饱和的氯化铵水溶液(250ml)洗涤。分离出水相并且用乙酸乙酯(200ml)萃取。用饱和的氯化钠水溶液(3x250ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩，以得到呈黄色固体的c15(60.2g，94%)。1hnmr(600mhz,氯仿-d)δ8.23(d,1h),8.17(brs,1h),7.58(d,1h),7.25(dd,1h),3.95(s,3h),3.69-3.73(m,2h),3.56(m,2h),3.45(s,3h);lcmsm/z255.4[m+h]+。步骤2：4-氨基-3-[(2-甲氧基乙基)氨基]苯甲酸甲酯(c16)的合成将pd/c(10g，94mmol)添加至c15(30g，118mmol)于甲醇(500ml)中的溶液中。于室温、15psi氢气下，将此反应搅拌18小时。使黑色悬浮液通过硅藻土过滤并且用甲醇(500ml)洗涤滤饼。于真空中，将合并的滤液浓缩，以得到呈棕色油状物的c16(26.5g，定量的)，其在静置后固化。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.48(dd,1h),7.36(d,1h),6.69(d,1h),3.87(s,3h),3.77(brs,2h),3.68(t,2h),3.41(s,3h),3.32(t,2h)；lcmsm/z224.7[m+h]+。步骤3：2-(氯甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p11)的合成先后将2-氯-1,1,1-三甲氧基乙烷(3.31ml，24.6mmol)和对甲苯磺酸单水合物(84.8mg，0.446mmol)添加至c16(5.00g，22.3mmol)于四氢呋喃(100ml)中的溶液中。在45℃下，将反应混合物加热5小时，于是于真空中将其浓缩；将残留的油状物溶于乙酸乙酯(10ml)并且加热直到溶液形成。将其缓慢地搅拌，同时冷却至室温过夜。经由过滤收集沉淀并且用庚烷洗涤，以得到呈灰色固体的p11。产量：5.73g，20.3mmol，91%。1hnmr(600mhz,氯仿-d)δ8.12(brs,1h),8.01(brd,j=8.6hz,1h),7.79(d,j=8.4hz,1h),4.96(s,2h),4.52(t,j=5.1hz,2h),3.96(s,3h),3.74(t,j=5.1hz,2h),3.28(s,3h)。步骤4：2-(氯甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯，盐酸盐(p11，hcl盐)的合成将c16(5.0g，24mmol)于1,4-二噁烷(100ml)中的溶液加热至100℃，经由加料漏斗，历经10小时时段，添加氯乙酸酐(4.1g，24.5mmol)于1,4-二噁烷(60ml)中的溶液，并且在100℃下，将反应混合物搅拌另外12小时。第二天，将反应冷却至室温并且于减压下，将1,4-二噁烷去除。将粗制的反应混合物溶于乙酸乙酯并且用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤。分离出乙酸乙酯层，使其经硫酸钠干燥，并且过滤。在不断搅拌下，将4m氯化氢于1,4-二噁烷中的溶液(1.1当量)添加至所述乙酸乙酯溶液。p11的盐酸盐以淡黄色固体的形式沉淀出。将悬浮液搅拌1小时，并且然后通过过滤收集p11的盐酸盐，以得到黄色固体(6.1g，86%)。1hnmr(600mhz,cd3od)δ8.64(s,1h),8.30(d,1h),7.92(d,1h),5.32(s,2h),4.84(m,2h),3.99(s,3h),3.83(t,2h),3.31(s,3h)。lcmsm/z283.2[m+h]+。制备p121-(2-甲氧基乙基)-2-(哌嗪-1-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p12)步骤1：2-{[4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]甲基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c17)的合成将化合物p11(1.59g，5.62mmol)添加至哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.00g，5.37mmol)和碳酸钾(2.97g，21.5mmol)于乙腈(15ml)中的15℃混合物中，并且于55℃下，将反应混合物搅拌12小时。然后，将其与使用p11和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，1.07mmol)进行的类似反应合并，并且将混合物过滤。在滤液于真空中浓缩后，经由硅胶色谱法(梯度：0%至60%乙酸乙酯(于石油醚中))，将残留物纯化，以提供呈淡黄色固体的c17。合并产量：2.30g，5.32mmol，83%。lcmsm/z433.0[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.12(d,j=1.5hz,1h),7.96(dd,j=8.4,1.5hz,1h),7.73(d,j=8.5hz,1h),4.58(t,j=5.4hz,2h),3.95(s,3h),3.89(s,2h),3.73(t,j=5.4hz,2h),3.46-3.37(brm,4h),3.28(s,3h),2.54-2.44(brm,4h),1.45(s,9h)。步骤2：1-(2-甲氧基乙基)-2-(哌嗪-1-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p12)的合成将氯化氢于乙酸乙酯中的溶液(20ml)添加至c17(2.30g，5.32mmol)于二氯甲烷(80ml)中的溶液中。于20℃下，将反应混合物搅拌2小时，于是于真空中将其浓缩。用水(20ml)稀释残留物，通过添加饱和的碳酸氢钠水溶液，将ph调至9-10，并且用乙酸乙酯与甲醇的混合物(10：1，15x50ml)萃取。使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的p12。产量：1.68g，5.05mmol，95%。lcmsm/z332.8[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.13(brs,1h),7.96(brd,j=8.5hz,1h),7.72(d,j=8.5hz,1h),4.59(t,j=5.5hz,2h),3.95(s,3h),3.86(s,2h),3.75(t,j=5.5hz,2h),3.29(s,3h),2.87(t,j=4.8hz,4h),2.50(brm,4h)。制备p136-溴-2-(氯甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶(p13)步骤1：5-溴-n-(2-甲氧基乙基)-2-硝基吡啶-3-胺(c18)的合成于25℃下，将5-溴-3-氟-2-硝基吡啶(400mg，1.81mmol)和2-甲氧基乙胺(408mg，5.43mmol)于四氢呋喃(10ml)中的溶液搅拌2小时，于是将其用乙酸乙酯(100ml)稀释并且用水(50ml)洗涤。用饱和的氯化钠水溶液(50ml)洗涤有机层，使其经硫酸镁干燥，过滤和浓缩，以得到呈黄色固体的c18。产量：430mg，1.56mmol，86%。步骤2：5-溴-n3-(2-甲氧基乙基)吡啶-2,3-二胺(c19)的合成于80℃下，将c18(430mg，1.56mmol)、氯化铵(833mg，15.6mmol)、和铁粉(870mg，15.6mmol)于甲醇(10ml)与水(2ml)的混合物中的溶液搅拌30分钟。将所得到的悬浮液倒入水(50ml)中并且用乙酸乙酯(2x50ml)萃取；使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤和浓缩，以提供呈棕色固体的c19。产量：350mg，1.42mmol，91%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.63(d,j=2.1hz,1h),6.88(d,j=2.0hz,1h),4.33-4.19(brs,2h),3.65(dd,j=5.6,4.6hz,2h),3.40(s,3h),3.22(brt,j=5hz,2h)。步骤3：6-溴-2-(氯甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶(p13)的合成用氯乙酰氯(0.284ml，3.57mmol)处理c19(400mg，1.63mmol)于1,4-二噁烷(8ml)中的溶液，并且于室温下进行搅拌直到lcms分析显示c19完全转化为中间体酰胺为止。于真空中去除1,4-二噁烷后，将残留物溶于三氟乙酸(8ml)并且于80℃下，加热18小时，于是将反应混合物冷却至室温并且于减压下浓缩。将所得到的油状物溶于乙酸乙酯(50ml)并且通过添加饱和的碳酸氢钠水溶液中和。用乙酸乙酯(20ml)萃取水层，并且使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至80%乙酸乙酯(于庚烷中))得到呈固体的p13。产量：176mg，0.578mmol，35%。lcmsm/z306.1(观察到溴-氯同位素模式)[m+h]+。1hnmr(600mhz,氯仿-d)δ8.58(brs,1h),7.89(brs,1h),4.92(s,2h),4.44(t,j=5.0hz,2h),3.71(t,j=5.0hz,2h),3.28(s,3h)。制备p142-{[4-(2,3-二羟基苯基)哌啶-1-基]甲基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p14)步骤1：[(3-溴苯-1,2-二基)双(氧基甲烷二基氧基乙烷-2,1-二基)]双(三甲基甲硅烷)(c20)的合成此反应是以相同规模的两个批次进行的。将n,n-二异丙基乙胺(37.8ml，217mmol)逐滴添加至3-溴苯-1,2-二醇(10.0g，52.9mmol)于四氢呋喃(300ml)中的溶液中。混合物在20℃下搅拌10分钟之后，历经5分钟，逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)甲硅烷(19.2ml，108mmol)，并且于室温(18℃)下持续搅拌16小时。再次添加n,n-二异丙基乙胺(27.6ml，158mmol)，然后于室温(18℃)下逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基](三甲基)甲硅烷(14.0ml，79.1mmol)。于室温下另外2.5小时之后，将反应混合物过滤，并且于真空中将滤液浓缩。在此时点，将来自两个批次的粗制产物合并并且使用硅胶色谱法(梯度：0%至7%乙酸乙酯(于石油醚中))进行纯化，以得到呈无色油状物的c20。经1hnmr分析，此物质并非完全纯的。合并产量：22.9g，50.9mmol，48%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)，仅c20峰：δ7.19(dd,j=8.1,1.5hz,1h),7.12(dd,j=8.3,1.4hz,1h),6.90(dd,j=8.2.8.2hz,1h),5.26-5.19(m,4h),4.00-3.92(m,2h),3.80-3.73(m,2h),1.00-0.91(m,4h),0.03(s,9h),0.00(s,9h)。步骤2：4-(2,3-双{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基}苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(c21)的合成将含有c20(6.11g、13.6mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(5.04g,16.3mmol)、碳酸钠水溶液(1m；40.8ml，40.8mmol)、和[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)(497mg，0.679mmol)于1,4-二噁烷(100ml)中的悬浮液的反应容器抽真空并且装入氮气。重复此抽真空的循环两次，然后，于85℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是用水(40ml)稀释反应混合物并且用乙酸乙酯(3x150ml)萃取。使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并且于真空中浓缩。经由硅胶色谱法(梯度：0%至8%甲醇(于二氯甲烷中))进行纯化，以提供呈黄色油状物的c21。产量：5.47g，9.91mmol，73%。1hnmr(600mhz,氯仿-d)δ7.10(brd,j=8.2hz,1h),6.98(dd,j=7.9,7.9hz,1h),6.81(brd,j=7.7hz,1h),5.79(brs,1h),5.23(s,2h),5.07(s,2h),4.03(brs,2h),3.83-3.74(m,4h),3.59(brs,2h),2.52(brs,2h),1.49(s,9h),1.01-0.89(m,4h),0.01(s,9h),0.01(s,9h)。步骤3：4-(2,3-双{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基}苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(c22)的合成用10%载于炭上的钯(2.94g，2.76mmol)处理c21(12.5g，22.6mmol)于甲醇(300ml)中的溶液并且于40psi和25℃下氢化16小时。此时点的lcms分析表示已转化为产物：lcmsm/z576.0[m+na+]。在过滤反应混合物并用甲醇(2x100ml)洗涤滤饼后，于真空中将合并的滤液浓缩，以得到呈无色油状物的c22。产量：11.2g，20.1mmol，89%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.05-6.97(m,2h),6.83(dd,j=6.9,2.5hz,1h),5.22(s,2h),5.13(s,2h),4.38-4.10(brm,2h),3.90-3.82(m,2h),3.81-3.73(m,2h),3.22(tt,j=12.2,3.5hz,1h),2.79(brdd,j=12.8,12.8hz,2h),1.78(brd,j=13hz,2h),1.65-1.52(m,2h),1.48(s,9h),1.04-0.91(m,4h),0.03(s,9h),0.00(s,9h)。步骤4：4-(2,3-双{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基}苯基)哌啶(c23)的合成将2,6-二甲基吡啶(2.39g，22.3mmol)添加至c22(7.23g，13.0mmol)于二氯甲烷(90ml)中的室温(15℃)溶液，然后逐滴添加三氟甲磺酸三甲基硅酯(3.80g，17.1mmol)。在15℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是添加另外的2,6-二甲基吡啶(909mg，8.48mmol)和三氟甲磺酸三甲基硅酯(1.45g，6.52mmol)。在室温(15℃)下搅拌另外5小时之后，反应混合物的lcms分析显示存在产物：lcmsm/z454.1[m+h]+。于真空中，将反应混合物浓缩，并且相继用氯化铵水溶液(3x100ml)和饱和的氯化钠水溶液(100ml)洗涤残留物，使其经硫酸钠干燥，过滤，且于减压下浓缩，以得到呈棕色油状物的c23(6.6g)。此物质直接用于下一步骤。步骤5：2-{[4-(2,3-双{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基}苯基)哌啶-1-基]甲基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c24)的合成将p11(3.08g，10.9mmol)添加至c23(来自前面的步骤；6.6g，≤13mmol)于乙腈(150ml)中的溶液中，然后添加碳酸钾(10.1g，73.1mmol)，并且于室温(15℃)下，将反应混合物搅拌16小时。在此时点的lcms分析表示存在产物：lcmsm/z700.2[m+h]+。将反应混合物过滤，并且使滤液于真空中浓缩；经由硅胶色谱法(梯度：34%至56%乙酸乙酯(于石油醚中))进行纯化，以得到呈黄色油状物的c24。产率：5.4g，7.7mmol，59%(经过二步骤)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.16-8.12(m,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.73(d,j=8.5hz,1h),7.04-6.96(m,2h),6.86(dd,j=6.7,2.6hz,1h),5.21(s,2h),5.12(s,2h),4.63(t,j=5.5hz,2h),3.95(s,3h),3.93-3.83(m,4h),3.80-3.72(m,4h),3.31(s,3h),3.17-3.06(m,1h),2.99(brd,j=11.2hz,2h),2.35-2.22(m,2h),1.81(brd,ab四重峰的一半,j=12.6hz,2h),1.75-1.61(m,2h),1.04-0.91(m,4h),0.05(s,9h),-0.01(s,9h)。步骤6：2-{[4-(2,3-二羟基苯基)哌啶-1-基]甲基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p14)的合成将氯化氢于1,4-二噁烷中的溶液(4m；96ml，384mmol)添加至c24(6.40g，9.14mmol)于1,4-二噁烷(120ml)中的室温(18℃)溶液中。添加完成后，于室温(18℃)下将反应混合物搅拌16小时，与使用c24(1.00g，1.43mmol)进行的类似反应组合并且于真空中浓缩。用二氯甲烷和甲醇的混合物(20：1，150ml)处理残留物，并且于室温(18℃)下搅拌1小时，于是经由过滤收集固体(4.85g)。用水(100ml)处理此物质，并且通过添加碳酸氢钠水溶液，将混合物调至ph7-8，于室温(18℃)下搅拌30分钟，并且过滤。用水(2x20ml)洗涤滤饼，然后与甲醇(100ml)混合并且于真空中浓缩。用石油醚(100ml)处理所得到的物质并且于室温(18℃)下搅拌30分钟。过滤后，使滤饼与甲苯(30ml)混合并且于真空中浓缩，以提供呈灰色固体的p14。合并产量：2.92g，6.64mmol，63%。lcmsm/z440.1[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.21(d,j=1.6hz,1h),7.81(dd,j=8.5,1.6hz,1h),7.66(d,j=8.5hz,1h),6.64-6.51(m,3h),4.63(t,j=5.3hz,2h),3.88(s,3h),3.84(s,2h),3.75(t,j=5.3hz,2h),3.22(s,3h),2.97-2.78(m,3h),2.18(brdd,j=11,11hz,2h),1.75-1.64(m,2h),1.64-1.49(m,2h)。制备p152-(氯甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p15)此全部顺序于大规模下进行。一般而言，在反应前以及添加试剂之后，反应器抽真空至-0.08至-0.05mpa，并且然后用氮气充填至正常压力。此过程通常重复三次，并且然后评估氧含量，以确保其为≤1.0%。就有机层的萃取和洗涤的过程而言，通常搅拌混合物15至60分钟，并且然后使其在层分离之前静置15至60分钟。步骤1：(2s)-2-[(苄基氧基)甲基]氧杂环丁烷(c25)的合成此反应是以大约相同规模的三个批次进行的。将2-甲基丙-2-醇(774.7kg)装入2000l玻璃衬里反应器。经由固体加料漏斗添加叔丁醇钾(157.3kg，1402mol)，且将混合物搅拌30分钟。然后，以相同的方式添加三甲基碘化亚砜(308.2kg，1400mol)，并且在55℃至65℃下，将反应混合物加热2至3小时，于是在5至20kg/小时的速率下，添加(2s)-2-[(苄基氧基)甲基]氧杂环丙烷(92.1kg，561mol)。在反应混合物维持于55℃至65℃下25小时之后，将其冷却至25℃至35℃，并且通过硅藻土(18.4kg)过滤。用叔丁基甲基醚(3x340kg)冲洗滤饼，并且将合并的滤液转移至5000l反应器，用纯水(921kg)处理，并且在15℃至30℃下搅拌15至30分钟。然后，用氯化钠(230.4kg)于纯水(920.5kg)中的溶液洗涤有机层两次，并且于减压(≤-0.08mpa)、≤45℃下浓缩。添加正庚烷(187kg)，并且于减压(≤-0.08mpa)、≤45℃下，将所得到的混合物浓缩；使用硅胶色谱法(280kg)(柱的顶部有氯化钠(18.5kg))，将有机相纯化。使用正庚烷(513kg)，将粗制物装填入柱，并且然后用正庚烷(688.7kg)和乙酸乙酯(64.4kg)的混合物洗脱。将三个批次合并，以提供呈85%纯的浅黄色油状物的c25(189.7kg，906mmol，54%)。1hnmr(400mhz,氯仿-d),仅c25峰：δ7.40-7.32(m,4h),7.32-7.27(m,1h),4.98(dddd,j=8.1,6.7,4.9,3.7hz,1h),4.72-4.55(m,4h),3.67(dd,abx模式的组分,j=11.0,4.9hz,1h),3.62(dd,abx模式的组分,j=11.0,3.7hz,1h),2.72-2.53(m,2h)。步骤2：(2s)-氧杂环丁-2-基甲醇(c26)的合成通过加料漏斗，将10%载于炭上的钯(30.7kg)添加至在3000l不锈钢高压釜反应器中的85%纯c25(来自前面的步骤，185.3kg，884.8mol)于四氢呋喃(1270kg)中的10℃-30℃溶液中。用纯水和四氢呋喃(143kg)冲洗加料漏斗，并且将冲洗物添加至反应混合物中。在反应器内容物经氮气净化之后，类似地用氢气将其净化，将压力增加至0.3至0.5mpa，并且然后排气至0.05mpa。重复氢气净化五次，于是将氢气压增加至0.3至0.4mpa。然后将反应混合物加热至35℃-45℃。13小时之后，在将氢气压维持于0.3至0.5mpa期间，将混合物排气至0.05mpa，并且经由将压力增加至0.15-0.2mpa并且然后排气至0.05mpa，用氮气净化五次。混合物冷却至10℃至25℃之后，将其过滤，并且用四氢呋喃(2x321kg)冲洗反应器。用此冲洗物浸泡滤饼两次，并且然后将其过滤；在≤40℃下，进行减压(≤-0.06mpa)浓缩，以得到在四氢呋喃(251kg)中的c26(62.2kg，706mol，80%)。步骤3：4-甲基苯磺酸(2s)-氧杂环丁-2-基甲酯(c27)的合成将4-(二甲基氨基)吡啶(17.5kg，143mol)添加至c26(来自前面的步骤；62.2kg，706mol)于四氢呋喃(251kg)中的10℃至25℃溶液和三乙胺(92.7kg，916mol，于1240kg二氯甲烷中)。30分钟后，以20至40分钟间隔，逐份添加对甲苯磺酰氯(174.8kg，916.9mol)，并且在15℃至25℃，将反应混合物搅拌16小时20分钟。添加纯水(190kg)；搅拌后，用碳酸氢钠水溶液(使用53.8kg碳酸氢钠和622kg纯水制备)洗涤有机层，并且然后用氯化铵水溶液(用230kg氯化铵和624kg纯水制备)洗涤。使用纯水(311kg)进行最后洗涤之后，使有机层通过已预先装填了硅胶(60.2kg)的不锈钢nutsche过滤器过滤。用二氯甲烷(311kg)浸泡滤饼20分钟，并且然后过滤；在减压(≤-0.05mpa)和≤40℃下，将合并的滤液浓缩直到剩下330至400l。然后在15-30℃下添加四氢呋喃(311kg)，并且以相同的方式将混合物浓缩至330至400l的最终体积。重复添加四氢呋喃和浓缩，再次达至330至400l的体积，以得到c27(167.6kg，692mmol，98%)于四氢呋喃(251.8kg)中的浅黄色溶液。1hnmr(400mhz,氯仿-d),仅c27峰：δ7.81(d,j=8.4hz,2h),7.34(d,j=8.1hz,2h),4.91(ddt,j=8.0,6.7,3.9hz,1h),4.62-4.55(m,1h),4.53-4.45(m,1h),4.14(d,j=3.9hz,2h),2.75-2.63(m,1h),2.60-2.49(m,1h),2.44(s,3h)。步骤4：(2s)-2-(叠氮基甲基)氧杂环丁烷(c28)的合成在10℃至25℃下将n,n-二甲基甲酰胺(473kg)、叠氮化钠(34.7kg，534mol)、和碘化钾(5.2kg，31mol)合并于3000l玻璃衬里反应器。添加c27(83.5kg，344.6mol，于125.4kg四氢呋喃中)之后，将反应混合物加热至55℃至65℃，持续17小时40分钟，于是将其冷却至25-35℃，并且由底阀鼓入氮气15分钟。然后，添加叔丁基甲基醚(623kg)和纯水(840kg)，并且用叔丁基甲基醚(312kg和294kg)萃取所得水层两次。用纯水(2x419kg)洗涤合并的有机层，同时将温度维持在10℃至25℃，以得到于前述有机层溶液(1236.8kg)中的c28(31.2kg，276mol，80%)。步骤5：1-[(2s)-氧杂环丁-2-基]甲胺(c29)的合成通过加料漏斗，将10%载于炭上的钯(3.7kg)添加至在3000l不锈钢高压釜反应器中的c28[来自前面的步骤，1264kg(31.1kg的c28，275mol)]于四氢呋喃(328kg)中的10℃至30℃溶液。用四氢呋喃(32kg)冲洗加料漏斗，并且将冲洗物添加至反应混合物中。在反应器内容物经氮气净化之后，类似地用氢气将其净化，将压力增加至0.05至0.15mpa，并且然后排气至0.03-0.04mpa。重复此氢气净化五次，于是将氢气压增加至0.05至0.07mpa。将反应温度增加至25℃-33℃，并且将氢气压维持在0.05-0.15mpa下22小时，同时每3至5小时更换一次氢气。然后经由将压力增加至0.15-0.2mpa并且然后排气至0.05mpa，用氮气净化混合物五次。过滤后，将四氢呋喃(92kg和93kg)用于洗涤反应器，并且然后浸泡滤饼。于减压(≤-0.07mpa)和≤45℃下，将合并的滤液浓缩，以得到在四氢呋喃(57.8kg)中的c29(18.0kg，207mol，75%)。1hnmr(400mhz,dmso-d6),仅c29峰：δ4.62(ddt,j=7.6,6.6,5.1hz,1h),4.49(ddd,j=8.6,7.3,5.6hz,1h),4.37(dt,j=9.1,5.9hz,1h),2.69(d,j=5.1hz,2h),2.55-2.49(m,1h),2.39(m,1h)。步骤6：4-硝基-3-{[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]氨基}苯甲酸甲酯(c30)的合成将碳酸钾(58.1kg，420mol)添加至在100l玻璃衬里反应器中的3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(54.8kg，275mol)于四氢呋喃(148kg)中的溶液，并将混合物搅拌10分钟。添加c29(29.3kg，336mol)于四氢呋喃(212.9kg)中的溶液，并且在20℃至30℃下，将反应混合物搅拌12小时，于是添加乙酸乙酯(151kg)，并且使混合物通过硅胶(29kg)过滤。用乙酸乙酯(150kg和151kg)冲洗滤饼，并且于减压(≤-0.08mpa)和≤45℃下，将合并的滤液浓缩至222-281l的体积。在混合物冷却至10℃-30℃之后，添加正庚烷(189kg)，进行搅拌20分钟，并且于减压(≤-0.08mpa)和≤45℃下，将混合物浓缩至222l的体积。于100至300kg/小时的参照速率下，再次将正庚烷(181kg)添加至混合物中，且持续搅拌20分钟。对混合物进行取样，直到残余的四氢呋喃≤5%且剩余的乙酸乙酯为10%至13%为止。将混合物加热至40℃-45℃且搅拌1小时，于是在每小时5℃至10℃的速率下，将其冷却至15℃-25℃，并且然后在15℃至25℃下搅拌1小时。使用不锈钢离心机的过滤提供了滤饼，用乙酸乙酯(5.0kg)与正庚烷(34kg)的混合物将其冲洗，并且然后在10℃-30℃下，与四氢呋喃(724kg)一起搅拌15分钟；过滤提供大部分由c30所组成的黄色固体(57.3kg，210mol，76%)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)8.34(t,j=5.8hz,1h),8.14(d,j=8.9hz,1h),7.63(d,j=1.7hz,1h),7.13(dd,j=8.9,1.8hz,1h),4.99(dddd,j=7.7,6.7,5.3,4.1hz,1h),4.55(ddd,j=8.6,7.3,5.8hz,1h),4.43(dt,j=9.1,6.0hz,1h),3.87(s,3h),3.67-3.61(m,2h),2.67(dddd,j=11.1,8.6,7.7,6.2hz,1h),2.57-2.47(m,1h)。步骤7：2-(氯甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p15)的合成在10℃至30℃下，用10%载于炭上的钯(5.2kg)处理在3000l高压釜反应器中的c30(来自前面的步骤，51.8kg，190mol)于四氢呋喃(678kg)中的溶液。用四氢呋喃(46kg)冲洗加料管，并且将冲洗物添加至反应混合物中。在反应器内容物经氮气净化之后，类似地用氢气将其净化，将压力增加至0.1至0.2mpa，并且然后排气至0.02-0.05mpa。重复此氢气净化五次，于是将氢气压增加至0.1至0.25mpa。在20℃-30℃下搅拌反应混合物，且每2至3小时，用氮气净化混合物三次，并且然后用氢气净化五次；在每次最终的氢气更换之后，将氢气压增加至0.1至0.25mpa。11.25小时总反应时间之后，将反应混合物排气至正常压力，并且经由将压力增加至0.15-0.2mpa并且然后排气至0.05mpa，用氮气净化五次。然后，将其过滤，并且用四氢呋喃(64kg和63kg)冲洗滤饼两次；于减压(≤-0.08mpa)和≤40℃下，将合并的冲洗物和滤液浓缩至128-160l的体积。添加四氢呋喃(169kg)，并且再次将混合物浓缩至128-160l的体积；将此过程总共重复四次，以得到中间体4-氨基-3-{[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]氨基}苯甲酸甲酯的溶液。将四氢呋喃(150kg)添加至此溶液，然后添加2-氯-1,1,1-三甲氧基乙烷(35.1kg，227mol)和对甲苯磺酸单水合物(1.8kg，9.5mol)。在将反应混合物搅拌25分钟之后，于40℃至45℃下，将其加热5小时，于是在减压下将其浓缩至135至181l的体积。添加2-丙醇(142kg)，并且将混合物再次浓缩至135-181l的体积，于是添加2-丙醇(36.5kg)和纯水(90kg)，并且持续搅拌直到得到溶液为止。使用串联液体过滤器(in-lineliquidfilter)将其过滤，并且然后，在20℃至40℃下，在150至400kg/小时的参照速率下，用纯水(447kg)处理。混合物冷却至20℃-30℃之后，将其搅拌2小时，且使用离心机，经由过滤收集固体。用2-丙醇(20.5kg)和纯水(154kg)的溶液冲洗滤饼；干燥后得到呈白色固体的p15(32.1kg，109mol，57%)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.14-8.11(m,1h),8.01(dd,j=8.5,1.1hz,1h),7.79(brd,j=8.6hz,1h),5.26-5.18(m,1h),5.04(s,2h),4.66-4.58(m,2h),4.53(dd,abx模式的组分,j=15.7,2.7hz,1h),4.34(dt,j=9.1,6.0hz,1h),3.96(s,3h),2.82-2.71(m,1h),2.48-2.37(m,1h)。制备p162-(氯甲基)-1-甲基-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p16)将4-氨基-3-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(206mg，1.14mmol)溶于1,4-二噁烷(11.5ml)中并且用氯乙酰氯(109μl，1.37mmol)处理。在100℃下，将混合物搅拌3小时并且冷却至室温。添加三乙胺(0.8ml，7mmol)和庚烷(10ml)并且过滤。于减压下，将滤液浓缩并且通过硅胶色谱法(洗脱剂：40%乙酸乙酯(于庚烷中))，将粗制物纯化，以得到120mg的p16(44%)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.14(s,1h),8.01(d,1h),7.78(d,1h),4.87(s,2h),3.97(s,3h),3.94(s,3h);lcmsm/z239.1[m+h]+。制备p17和p182-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-1(p17)和2-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-2(p18)步骤1：4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(c31)的合成将叔丁醇钾(65.9g，587mmol)于四氢呋喃(500ml)中的溶液添加至(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(132g，589mmol)于四氢呋喃(500ml)中的0℃溶液中，并且于0℃下，将所得到的悬浮液搅拌1小时，于是，将其冷却至-50℃。在-50℃下，逐滴添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(90.0g，452mmol)于四氢呋喃(1.5l)中的溶液，并且然后使反应混合物缓慢地温热至20℃，并且然后在20℃下搅拌16小时。添加水(1l)之后，于真空中浓缩混合物，以去除四氢呋喃。用乙酸乙酯(2x800ml)萃取水性残留物，并且用饱和的氯化钠水溶液(500ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩。用石油醚(200ml)洗涤所得到的物质数次，以提供呈白色固体的c31。产量：95.0g，353mmol，78%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ5.71(s,1h),4.16(q,j=7.2hz,2h),3.55-3.43(m,4h),2.94(brt,j=5.5hz,2h),2.28(brt,j=5.5hz,2h),1.47(s,9h),1.28(t,j=7.0hz,3h)。步骤2：6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二甲酸6-叔丁酯1-乙酯(c32)的合成在20℃下，将叔丁醇钾(71.2g，634mmol)一次性添加至三甲基碘化亚砜(140g，636mol)于二甲基亚砜(800ml)中的溶液中。于20℃下将反应混合物搅拌1.5小时之后，逐滴添加c31(95.0g，353mmol)于二甲基亚砜(800ml)中的溶液，并且于20℃下持续搅拌16小时。然后，添加饱和的氯化钠水溶液(2.0l)；通过添加氯化铵，将所得的混合物中和，并且用乙酸乙酯(3.0l)萃取。相继用水(2x1.0l)和饱和的氯化钠水溶液(2.0l)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。经由硅胶色谱法(洗脱剂：10：1石油醚/乙酸乙酯)进行纯化，以得到呈黄色油状物的c32。1hnmr分析指出存在额外的脂族物质。产量：80g，280mmol，79%。1hnmr(400mhz,氯仿-d),仅c32峰：δ4.19-4.09(m,2h),3.55-3.39(m,3h),3.27(ddd,j=13.0,7.0,4.5hz,1h),1.76-1.64(m,2h),1.56(dd,j=8.0,5.5hz,1h,假定的；被水峰部分遮蔽),1.47(s,9h),1.47-1.37(m,2h),1.27(t,j=7.0hz,3h),1.17(dd,j=5.0,5.0hz,1h),0.93(dd,j=8.0,4.5hz,1h)。步骤3：6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酸(c33)的合成将氢氧化锂单水合物(37.4g，891mmol)一次性添加至c32(80g，280mmol)于四氢呋喃(500ml)和水(500ml)中的混合物中。在25℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是用水(600ml)将其稀释并且用乙酸乙酯(3x300ml)洗涤。丢弃有机层，并且通过添加6m盐酸，将水层酸化至ph3-4。用乙酸乙酯(3x600ml)萃取所得的混合物，并且使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。用石油醚(300ml)研磨残留物，以提供呈白色固体的c33。产量：42.0g，164mmol，59%。lcmsm/z278.2[m+na+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.15-12.03(brs,1h),3.43-3.25(m,3h,假定的；被水峰部分遮蔽),3.23-3.12(m,1h),1.64-1.50(m,2h),1.52(dd,j=7.5,5.5hz,1h),1.39(s,9h),1.39-1.28(m,2h),0.96-0.88(m,2h)。步骤4：1-({4-(甲氧基羰基)-2-[(2-甲氧基乙基)氨基]苯基}氨基甲酰基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(c34)的合成于30℃下，将c33(570mg，2.23mmol)、c16(500mg，2.23mmol)和o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(hatu；1.27g，3.34mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液搅拌30分钟，于是添加三乙胺(902mg，8.91mmol)，并且于30℃下持续搅拌16小时。然后，将反应混合物倒入水(60ml)中并且用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。用饱和的氯化钠水溶液(3x50ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(洗脱剂：1：1石油醚/乙酸乙酯)得到呈棕色油状物的c34，其直接用于下面的步骤。步骤5：2-[6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c35)的合成在50℃下，将c34(来自前面的步骤，≤2.23mmol)于乙酸(15ml)中的溶液搅拌16小时，于是于真空中将其浓缩，以提供呈棕色油状物的c35。此物质直接用于下一个步骤。lcmsm/z444.1[m+h]+。步骤6：2-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c36)的合成将三氟乙酸(5ml)添加至c35(来自前面的步骤；≤2.23mmol)于二氯甲烷(10ml)中的溶液中，并且在25℃下，将所述反应混合物搅拌2小时。于真空中去除溶剂后，经由添加饱和的碳酸钾水溶液(40ml)，将残留物碱化，并且用二氯甲烷和甲醇的混合物(10：1，3x40ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，于真空中浓缩，并且经历硅胶色谱法(洗脱剂：10：1：0.1二氯甲烷/甲醇/浓缩的氢氧化铵)，以得到呈黄色固体的c36。产量：640mg，1.86mmol，83%(经过三个步骤)。lcmsm/z344.1[m+h]+。步骤7：2-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-1(p17)和2-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-2(p18)的分离使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：55：45二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，进行将c36(630mg，1.83mmol)分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的峰指定为ent-1(p17)，且第二个洗脱出的对映异构体指定为ent-2(p18)；两个皆以淡黄色固体的形式分离出。p17产量：300mg，0.874mmol，48%。lcmsm/z344.1[m+h]+。保留时间：5.10分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x150mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%至40%b，历经5.5分钟，然后保持在40%b下3.0分钟；流速：2.5ml/分钟)。p18产量：240mg，0.699mmol，38%。lcmsm/z344.1[m+h]+。保留时间：7.35分钟(分析条件与用于p17的那些相同)。制备p194-氨基-3-{[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}苯甲酸甲酯(p19)步骤1：3-{[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}-4-硝基苯甲酸甲酯(c37)的合成将三乙胺(3.65ml，26.2mmol)添加至3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(1.00g，5.02mmol)和1-(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲胺，二盐酸盐(1.00g，5.05mmol)于四氢呋喃(12ml)与甲醇(8ml)的混合物中的溶液中。在60℃下，将反应混合物搅拌40小时，于是在真空中将其浓缩并且使用硅胶色谱法(梯度：0%至2%甲醇(于二氯甲烷中))进行纯化，以得到呈橙色固体的c37。产量：1.27g,4.17mmol，83%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.24(d,j=8.8hz,1h),7.98-7.91(m,1h),7.68(d,j=1.7hz,1h),7.57(brs,1h),7.33(dd,j=8.8,1.7hz,1h),7.11(brs,1h),4.53(d,j=4.9hz,2h),3.99(q,j=7.3hz,2h),3.95(s,3h),1.47(t,j=7.3hz,3h)。步骤2：4-氨基-3-{[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}苯甲酸甲酯(p19)的合成在氢气球下、25℃下，将湿的载于炭上的钯(144mg)和c37(412mg，1.35mmol)于甲醇(13ml)中的混合物搅拌16小时。然后，使反应混合物通过硅藻土垫过滤并且于真空中将滤液浓缩，以得到呈灰色固体的p19。产量：340mg，1.24mmol，92%。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.66(brs,1h),7.38-7.29(m,2h),6.97(brs,1h),6.67(d,j=7.9hz,1h),4.35(s,2h),4.11(q,j=7.3hz,2h),3.81(s,3h),1.44(t,j=7.3hz,3h)。制备p204-氨基-3-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(p20)步骤1：3-(甲基氨基)-4-硝基苯甲酸甲酯(d1)的合成历经10分钟，将甲基胺(38.4ml，76.8mmol，2m，于四氢呋喃中)逐滴添加至3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(5.10g，25.6mmol)于四氢呋喃(60ml)中的溶液中。添加后，淡黄色的溶液立即变成深橙色，并且在室温下将其搅拌2小时。然后，用乙醚(100ml)稀释反应混合物并且相继用水(50ml)和饱和的氯化钠水溶液(50ml)洗涤有机层。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且于减压下浓缩，以得到5.26g呈深橙色固体的3-(甲基氨基)-4-硝基苯甲酸甲酯(98%)。lcmsm/z211.1[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.22(d,j=8.9hz,1h),8.00(brs,1h),7.56(d,j=1.7hz,1h),7.25(dd,j=8.9,1.7hz,1h,假定的；被溶剂峰部分遮蔽),3.95(s,3h),3.09(d,j=5.1hz,3h)。步骤2：4-氨基-3-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(p20)的合成将d1(5.26g，25.0mmol)于乙醇(150ml)中的溶液添加至预先充装了10%载于炭上的钯(50%水；1g)的500mlparr®瓶中。于室温下，50psi氢气氛下，将混合物摇晃1小时，于是将其过滤并且用乙醇(100ml)冲洗滤饼。于减压下，将滤液浓缩，以得到4.38g呈灰白色固体的p20(97%)。lcmsm/z181.1[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.46(dd,j=8.0,1.9hz,1h),7.34(d,j=1.8hz,1h),6.68(d,j=8.0hz,1h),3.87(s,3h),3.72(brs,2h),3.21(brs,1h),2.91(s,3h)。制备p21和p225-溴-n3-甲基吡啶-2,3-二胺(p21)和5-溴-n3,6-二甲基吡啶-2,3-二胺(p22)中间体p21是根据文献程序(choi,j.y.等人，j.med.chem.2012,55,852-870)合成的。中间体p22是使用相同的方法合成的。制备p232-(氯甲基)-1-[(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p23)步骤1：3-{[(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}-4-硝基苯甲酸甲酯(d2)的合成将1-(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲胺(670mg，6.0mmol)和三乙胺(762mg，7.53mmol)缓慢地添加至3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(1.0g，5.0mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的无色溶液中。于60℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是将其倒入水(30ml)中并且用二氯甲烷(3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，并且于减压下浓缩。通过硅胶色谱法(洗脱剂：20%甲醇(于二氯甲烷中))，将粗制物纯化。用30：1石油醚/乙酸乙酯研磨所得到的黄色固体，以得到呈黄色固体的d2(1.2g，82%)。lcmsm/z290.9[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.25(d,j=8.9hz,1h),7.98-7.92(m,1h),7.70(d,j=1.7hz,1h),7.49(s,1h),7.34(dd,j=8.9,1.7hz,1h),7.12(s,1h),4.54(d,j=5.0hz,2h),3.96(s,3h),3.67(s,3h)。步骤2：4-氨基-3-{[(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}苯甲酸甲酯(d3)的合成将湿的10%载于炭上的钯(1g)添加至d2(5.46g，18.8mmol)于甲醇(160ml)中的悬浮液中。于20℃、1大气压的氢气下，将混合物搅拌36小时。将反应混合物过滤并且用甲醇(200ml)冲洗滤饼。于减压下，将滤液浓缩，以得到呈棕色固体的d3(4.8g，98%)。lcmsm/z260.9[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.56(s,1h),7.18(brd,j=8.1hz,1h),7.12(brs,1h),6.87(s,1h),6.55(d,j=8.2hz,1h),5.50(s,2h),4.84(t,j=5.2hz,1h),4.23(d,j=5.0hz,2h),3.73(s,3h),3.63(s,3h)。步骤3：2-(羟基甲基)-1-[(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(d4)的合成在140℃下，将d3(780mg，3.00mmol)和2-羟基乙酸(342mg，4.49mmol)于1,3,5-三甲基苯(8ml)中的混合物搅拌14小时，并且于25℃下搅拌48小时。对澄清的黄色溶液进行倾析，以得到棕色残留物，将其溶于甲醇(50ml)并且于减压下浓缩。通过硅胶色谱法(洗脱剂：20%甲醇(于二氯甲烷中))，将粗制物纯化，以提供呈黄色泡沫状物的d4(318mg，35%)。lcmsm/z300.9[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.13-8.11(m,1h),7.83(dd,j=8.4,1.6hz,1h),7.71(d,j=8.5hz,1h),7.59(s,1h),6.58(s,1h),5.69(s,2h),4.75(s,2h),3.84(s,3h),3.53(s,3h)。步骤4：2-(氯甲基)-1-[(1-甲基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(p23)的合成于室温下，将亚硫酰氯(990mg，0.60ml，8.32mmol)逐滴添加至d4(500mg，1.66mmol)于二氯甲烷(10ml)和n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中的悬浮液。于室温下，将反应混合物搅拌1小时，然后于减压下浓缩。用二氯甲烷(10ml)研磨所得的棕色残留物。通过过滤收集固体并且用二氯甲烷(5ml)冲洗，以提供呈灰白色固体的p23(431mg，73%)。lcmsm/z318.9♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.17(s,1h),8.31(s,1h),7.93(brd,j=8.5hz,1h),7.82(d,j=8.5hz,1h),7.11(s,1h),5.92(s,2h),5.13(s,2h),3.87(s,3h),3.87(s,3h)。制备p245-氯-2-(氯甲基)-3-甲基-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶(p24)步骤1：6-氯-n-甲基-3-硝基吡啶-2-胺(d5)的合成经由注射器，在0℃下，将甲胺于四氢呋喃中的溶液(2.0m；622ml，1.24mol)逐滴添加至2,6-二氯-3-硝基吡啶(200g，1.04mol)和na2co3(132g，1.24mol)于乙醇(1l)中的悬浮液中。添加完成后，在18℃下，将反应混合物搅拌6小时。将混合物过滤并且于减压下，将滤液浓缩，以得到黄色固体。通过硅胶色谱法(梯度：0%至5%乙酸乙酯(于石油醚中))，将粗制物纯化，以得到呈黄色固体的d5(158g，产率81%)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.72(brs,1h),8.41(d,j=8.6hz,1h),6.76(d,j=8.6hz,1h),3.00(d,j=4.8hz,3h)。步骤2：6-氯-n2-甲基吡啶-2,3-二胺(d6)的合成将铁粉(15.4g，276mmol)添加至d5(15.8g，84.2mmol)于乙酸(100ml)中的混合物中。在80℃下，将反应混合物搅拌3小时，于是使其冷却至室温并且过滤。用乙酸乙酯(2x100)洗涤滤饼。于减压下，将合并的有机层浓缩并且通过硅胶色谱法(洗脱剂：1：1乙酸乙酯/石油醚)，将粗制物纯化，以得到呈棕色固体的d6(8.40g，产率63%)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ6.79(d,j=7.7hz,1h),6.49(d,j=7.7hz,1h),3.00(s,3h)。步骤3：5-氯-2-(氯甲基)-3-甲基-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶(p24)的合成将氯乙酰氯(55.5ml，698mmol)添加至d6(50.0g，317mmol)于1,4-二噁烷(1.2l)中的溶液中，并且在15℃下，将反应混合物搅拌50分钟。然后，于减压下将其浓缩，以得到棕色固体，将其纳入三氟乙酸(1.2l)并且于80℃下搅拌60小时。于减压下，将混合物浓缩，以得到棕色油状物，用乙酸乙酯(1l)将其稀释并且通过添加饱和的碳酸氢钠水溶液将其中和。当二氧化碳放出停息后，分离各层，并且用乙酸乙酯(200ml)萃取水层。将有机萃取物合并，使其经硫酸钠干燥，过滤并且于减压下浓缩。通过硅胶色谱法(梯度：10%至25%乙酸乙酯(于石油醚中))，将粗制物纯化，以得到呈黄色固体的p24(61.0g，产率79%)。lcmsm/z215.7(观察到二氯同位素模式)[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.13(d,j=8.3hz,1h),7.37(d,j=8.4hz,1h),5.11(s,2h),3.84(s,3h)。实施例1和22-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,ent-x1,三氟乙酸盐(1)[来自c39]；和2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,ent-x2,三氟乙酸盐(2)[来自c40]步骤1：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c38)的合成此实验是以相同规模的两个批次进行的。将含有c2(500mg，1.52mmol)、p12(530mg，1.59mmol)、[2’,6’-双(丙-2-基氧基)联苯-2-基](二环己基)磷烷(ruphos；142mg，0.304mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(139mg，0.152mmol)、和碳酸铯(1.48g，4.54mmol)于甲苯(15ml)中的混合物的反应容器抽真空并且装入氮气。重复两次此抽真空的循环，于是，于100℃下，将反应混合物搅拌16小时，与第二个批次合并，并且过滤。将滤液浓缩，并且使残留物经历硅胶色谱法(梯度：0%至60%乙酸乙酯(于石油醚中))，然后经历制备型薄层色谱法(洗脱剂：1：1石油醚/乙酸乙酯)，以得到呈淡黄色固体的c38。合并产量：600mg，1.03mmol，34%。lcmsm/z581.0♦[m+h]+。步骤2：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-1(c39)和2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-2(c40)的分离使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：3：2二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，执行将c38(780mg，1.34mmol)分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体指定为ent-1(c39)，其是以白色固体的形式得到。产量：282mg，0.485mmol，36%。lcmsm/z581.0♦[m+h]+。保留时间1.90分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x50mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%b，0.20分钟，然后5%至40%b，历经1.4分钟，然后维持在40%b下1.05分钟；流速：4.0ml/分钟)。第二个洗脱出的对映异构体指定为ent-2(c40)，使其经历使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：3：2二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]的第二次纯化。这提供了呈淡棕色固体的c40。产量：280mg，0.482mmol，36%。lcmsm/z581.0♦[m+h]+。保留时间2.18分钟(分析条件与用于c39的那些相同)。步骤3：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,ent-x1,三氟乙酸盐(1)[来自c39]的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.30ml，0.60mmol)添加至c39(70mg，0.12mmol)于甲醇(3ml)与四氢呋喃(3ml)的混合物中的溶液中。反应混合物于25℃下搅拌16小时之后，再次添加氢氧化锂水溶液(2m；0.30ml，0.60mmol)，并且持续搅拌另外20小时。然后，经由添加1m盐酸，将反应混合物调节至ph7，并且然后于真空中浓缩，以去除甲醇和四氢呋喃。通过添加三氟乙酸，将残留物调节至ph5-6，并且然后经由反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.1%三氟乙酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：30%至60%b)，将其纯化，以得到呈白色固体的1。产量：40.5mg，59.5μmol，50%。lcmsm/z567.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.37(brs,1h),8.07(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.79(d,j=8.6hz,1h),7.59(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.34(dd,j=10.2,2.0hz,1h),7.30(brdd,j=8.3,2.0hz,1h),7.22(s,1h),6.87(dd,j=8.1,8.1hz,1h),6.63(brd,j=8hz,1h),6.60(brd,j=8hz,1h),4.70(s,2h),4.65(t,j=4.8hz,2h),3.75(t,j=4.8hz,2h),3.59-3.42(m,8h),3.29(s,3h)。步骤4：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌嗪-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,ent-x2,三氟乙酸盐(2)[来自c40]的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.30ml，0.60mmol)添加至c40(69mg，0.12mmol)于甲醇(3ml)与四氢呋喃(3ml)的混合物中的溶液中。将反应混合物于25℃下搅拌16小时之后，再次添加氢氧化锂水溶液(2m；0.30ml，0.60mmol)，并且持续搅拌另外20小时。经由添加1m盐酸，将反应混合物调节至ph7，并且然后于真空中浓缩，以去除甲醇和四氢呋喃。通过添加三氟乙酸，将残留物调节至ph5-6，并且然后经由反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.1%三氟乙酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：30%至60%b)，将其纯化，以得到呈白色固体的2。产量：22.9mg，33.6µmol，28%。lcmsm/z567.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.40-8.35(m,1h),8.07(dd,j=8.6,1.5hz,1h),7.79(d,j=8.6hz,1h),7.59(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.35(dd,j=10.2,2.0hz,1h),7.31(brdd,j=8,2hz,1h),7.22(s,1h),6.87(dd,j=8.3,8.0hz,1h),6.63(brd,j=8hz,1h),6.60(brd,j=8hz,1h),4.68(s,2h),4.65(t,j=4.9hz,2h),3.76(t,j=4.8hz,2h),3.57-3.40(m,8h),3.29(s,3h)。实施例32-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸，三氟乙酸盐(3)步骤1：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶(c13，游离碱)的合成将对甲苯磺酸单水合物(318mg，1.67mmol)添加至p2(300mg，0.670mmol)于乙酸乙酯(3.5ml)中的溶液中。于60℃下，将反应混合物搅拌1小时，于是通过添加饱和的碳酸钾水溶液(20ml)将其碱化，并且用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，3x50ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤并且于真空中浓缩，以提供呈棕色固体的c13，游离碱。产量：230mg，0.661mmol，99%。步骤2：6-溴-2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶(c41)的合成在50℃下，将c13，游离碱(130mg，0.374mmol)、p13(130mg，0.427mmol)、和碳酸钾(172mg，1.24mmol)于乙腈(2ml)中的悬浮液搅拌16小时。然后，使用制备型薄层色谱法(洗脱剂：乙酸乙酯)，将反应混合物纯化，以得到呈棕色油状物的c41。产量：114mg，0.185mmol，49%。lcmsm/z617.1(观察到溴-氯同位素模式)[m+h]+。步骤3：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸甲酯(c42)的合成于80℃、一氧化碳(50psi)下，将c41(114mg，0.185mmol)、1,3-双(二苯基膦基)丙烷(15.3mg，37.1μmol)、乙酸钯(ii)(8.3mg，37μmol)、和三乙胺(187mg，1.85mmol)于甲醇(5ml)与n,n-二甲基甲酰胺(1ml)的混合物中的溶液搅拌16小时。在反应混合物经乙酸乙酯(50ml)稀释之后，用饱和的氯化钠水溶液(2x50ml)将其洗涤，使其经硫酸镁干燥，过滤，且于减压下浓缩。使用制备型薄层色谱法(洗脱剂：乙酸乙酯)进行纯化，以提供呈无色油状物的c42。产量：60.0mg，0.101mmol，55%。lcmsm/z617.2(观察到氯同位素模式)[m+na+]。步骤4：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸,三氟乙酸盐(3)的合成将氢氧化钠水溶液(3m；1.0ml，3.0mmol)添加至c42(60.0mg，0.101mmol)于甲醇(2.0ml)中的溶液中，并且在20℃下，将反应混合物搅拌2小时。然后，通过添加1m盐酸，将其调节至ph7，并且用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，于真空中浓缩，并且使用反相hplc(柱：bostongreenods，5μm；流动相a：0.1%三氟乙酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：10%至95%b)，将其纯化，以得到呈白色固体的3。产量：29.6mg，42.6μmol，42%。lcmsm/z581.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.13(d,j=1.9hz,1h),8.74(d,j=1.9hz,1h),7.63(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.30(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.24(ddd,j=8.4,2.0,0.7hz,1h),6.89-6.84(m,1h),6.82-6.77(m,2h),4.98-4.89(m,2h,假定的；大部分被水峰遮蔽),4.64(t,j=4.8hz,2h),4.04-3.92(brm,2h),3.75(dd,j=5.4,4.2hz,2h),3.51-3.39(m,2h),3.31(s,3h),3.19-3.06(m,1h),2.41-2.24(m,2h),2.24-2.12(m,2h),2.06(d,j=1.0hz,3h)。实施例4和52-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(4)和2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(5)步骤1：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶，三氟乙酸盐(c43)的合成将三氟乙酸(1.3ml)添加至p1(300mg，0.691mmol)于二氯甲烷(5ml)中的溶液中。于29℃下，将反应混合物搅拌2小时，于是使其于真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的c43，其直接用于下一个步骤。步骤2：2-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c44)和2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c45)的合成将p15(204mg，0.692mmol)添加至c43(来自前面的步骤，≤0.691mmol)于乙腈(10ml)中的溶液中，然后添加碳酸钾(956mg，6.92mmol)。于29℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是将其过滤；于真空中，将滤液浓缩，以得到残留物，通过制备型薄层色谱法(洗脱剂：2：1石油醚/乙酸乙酯)将其纯化，以提供呈黄色胶状物的非对映异构体产物的混合物(178mg)。经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod,5µm；流动相：55:45二氧化碳/(含0.1%氢氧化铵的甲醇)]分离为两种产物。以黄色油状物形式得到的第一个洗脱出的非对映异构体指定为c44。产量：44.3mg，74.8μmol，11%(经过两个步骤)。lcmsm/z592.1♦[m+h]+。保留时间4.26分钟(柱：chiraltechnologieschiralcelod-3，4.6x100mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的甲醇；梯度：5%至40%b，历经4.5分钟，然后维持在40%b下2.5分钟；流速：2.8ml/分钟)。经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod，5μm；流动相：3：2二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的甲醇)]，使第二个洗脱出的非对映异构体经历第二次纯化，以提供呈无色油状物的第二个洗脱出的非对映异构体，其指定为c45。产量：38mg，64μmol，9%(经过两个步骤)。lcmsm/z592.1♦[m+h]+。保留时间4.41分钟(分析条件与用于c44的那些相同)。在二氧杂环戊烷处表示的绝对立体化学经由5与5，游离酸样品(由中间体c48合成)的效力相关性(potencycorrelation)指派；所述中间体的绝对立体化学经由c49(c48的半硫酸盐)的单晶x射线结构测定(参见下文)来确定。步骤3：2-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(4)的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.80ml，1.6mmol)添加至c44(44.3mg，74.8μmol)于甲醇(1ml)与四氢呋喃(1ml)的混合物中的溶液中，并且于26℃下，将反应混合物搅拌3小时。然后，通过添加三氟乙酸，将其调节至ph7，并将所得混合物于真空中浓缩并且使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.05%氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：30%至50%b)纯化，以得到呈白色固体的4。产量：26.6mg，44.7µmol，60%。lcmsm/z578.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.31(d,j=1.4hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.6hz,1h),7.66(d,j=8.5hz,1h),7.57(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.34(dd,j=10.1,2.0hz,1h),7.29(brdd,j=8.3,2.0hz,1h),7.20(s,1h),6.86-6.79(m,1h),6.77(brdd,abc模式的组分,j=7.9,1.3hz,1h),6.73(dd,abc模式的组分,j=7.5,1.4hz,1h),5.29-5.18(m,1h),4.9-4.78(m,1h,假定的；被水峰部分遮蔽),4.68(dd,j=15.3,2.7hz,1h),4.54(td,j=8.0,5.9hz,1h),4.44(dt,j=9.2,5.9hz,1h),4.02(ab四重峰,jab=13.9hz,δνab=49.0hz,2h),3.18-3.08(m,1h),3.05-2.96(m,1h),2.81-2.68(m,2h),2.56-2.45(m,1h),2.45-2.30(m,2h),2.03-1.88(m,2h),1.88-1.79(m,2h)。步骤4：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(5)的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.80ml，1.6mmol)添加至c45(38mg，64μmol)于甲醇(1ml)与四氢呋喃(1ml)的混合物中的溶液中，并且在24℃下，将所述反应混合物搅拌2.5小时。然后，通过添加1m盐酸，将其调节至ph7，并且将所得混合物于真空中浓缩并且使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.05氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：29%至49%b)纯化，以提供呈白色固体的5。产量：27.9mg，46.9μmol，73%。lcmsm/z577.9♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.32(d,j=1.4hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.66(d,j=8.5hz,1h),7.56(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.34(dd,j=10.2,2.0hz,1h),7.29(brdd,j=8.3,2.0hz,1h),7.20(s,1h),6.85-6.80(m,1h),6.77(dd,abc模式的组分,j=8.0,1.3hz,1h),6.73(dd,abc模式的组分,j=7.5,1.4hz,1h),5.30-5.20(m,1h),4.9-4.79(m,1h,假定的；被水峰部分遮蔽),4.68(dd,j=15.4,2.7hz,1h),4.62-4.54(m,1h),4.44(dt,j=9.2,5.9hz,1h),4.02(ab四重峰,jab=13.9hz,δνab=44.6hz,2h),3.18-3.09(m,1h),3.06-2.97(m,1h),2.80-2.67(m,2h),2.55-2.30(m,3h),2.02-1.78(m,4h)。实施例5，游离酸的替代合成2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(5，游离酸)步骤1：4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(c46)和4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(c47)的分离使用反相hplc[柱：phenomenexluxamylose-1，5μm；流动相：9：1二氧化碳/(含有0.2%1-氨基丙-2-醇的2-丙醇)]，进行将p1(10g，23mmol)分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体指定为c46，且第二个洗脱出的对映异构体指定为c47，两个皆以无色油状物的形式得到。c46和c47所表示的绝对立体化学是基于在c49(由c47合成)上进行的单晶x射线结构测定指派的(参见下文)。c46产量：4.47g，10.3mmol，45%。保留时间：3.98分钟[柱：phenomenexluxamylose-1，4.6x250mm，5μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.2%1-氨基丙-2-醇的2-丙醇；梯度：5%b，1.00分钟，然后5%至60%b，历经8.00分钟；流速：3.0ml/分钟；反压：120巴]。c47产量：4.49g，10.3mmol，45%。保留时间：4.32分钟(分析型sfc条件与用于c46的那些相同)。步骤2：4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶(c48)的合成将对甲苯磺酸单水合物(566mg，2.98mmol)添加至c47(1.12g，2.58mmol)于乙酸乙酯(26ml)中的溶液中。将反应混合物在45℃下加热16小时之后，使其于真空中浓缩，溶于乙酸乙酯，并且用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤。用乙酸乙酯萃取水层，并且用饱和的氯化钠水溶液洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤并且于减压下浓缩，以得到呈泡沫状白色固体的c48(947mg)，lcmsm/z334.0♦[m+h]+。将此仍含有一些对甲苯磺酸的物质的一部分用于下文c50的合成。将第二份泡沫状的白色固体(440mg)溶于乙酸乙酯(25ml)并且用饱和的碳酸氢钠水溶液(2x15ml)洗涤；使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并且于真空中浓缩，以得到呈无色油状物的c48(350mg)，其不再含有对甲苯磺酸。调节产量：350mg，1.05mmol，88%。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.53(dd,j=8.4,7.8hz,1h),7.22-7.13(m,3h),6.87-6.80(m,1h),6.79-6.71(m,2h),3.23-3.14(m,2h),2.86-2.69(m,3h),1.90-1.68(m,4h)。步骤3：4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶，半硫酸盐(c49)的合成制备c48(来自前面的无色油状物)于乙酸乙酯中的0.1m溶液，并且使其经历盐筛选。在此只描述硫酸盐形成。将硫酸(25μmol)和底物溶液(0.1m，250μl，25µmol)的混合物加热至45℃，持续1小时，使其冷却至室温，并且搅拌15小时。用甲醇(大约150μl)处理所得的悬浮液直到溶液形成为止；使其缓慢地蒸发过夜，直到剩下大约50μl溶剂。通过单晶x射线结构测定分析所得到的晶体之一，将绝对立体化学确立为所显示出的绝对立体化学。c49的单晶x射线结构测定单晶x射线分析数据收集是于室温下，于brukerd8venture衍射仪上进行的。数据收集由ω和φ扫描组成。通过内在相位，使用shelx软件套，于三斜晶系空间群p1中解析结构。然后，通过全矩阵最小二乘法精修结构。所有的非氢原子皆被发现且使用各向异性位移参数精修。由傅立叶差分图发现位于氮上的氢原子且以限制的距离将其精修。剩余的氢原子置于计算出的位置上且使其载于其承载原子上。最终的精修包括所有氢原子的各向同性位移参数。不对称单元是由两个分子的质子化c48，一个分子的双去质子化硫酸，以及一个分子的完全位置占有水所构成。因此，所述结构为半硫酸盐和半水合物。氯氟苯基环是无序的且以60/40的占有率模型化，环在两个位置上翻转。采用似然法(hooft，2008)的绝对结构分析是使用platon(spek)进行的。结果指出，绝对结构已经正确地指派；所述方法计算出结构正确的概率为100.0。hooft参数报告为0.061，esd为0.004，且parson参数报告为0.063，esd为0.005。最终r指数是3.1%。最终的差分傅立叶显示无遗漏或错位的电子密度。相关晶体、数据收集、和精修信息总结于表e。原子坐标、键长、键角、和位移参数列于表f-h。软件和参考文献shelxtl,version5.1,brukeraxs,1997.platon,a.l.spek,j.appl.cryst.2003,36,7-13.mercury,c.f.macrae,p.r.edington,p.mccabe,e.pidcock,g.p.shields,r.taylor,m.towler和j.vandestreek,j.appl.cryst.2006,39,453-457.olex2,o.v.dolomanov,l.j.bourhis,r.j.gildea,j.a.k.howard和h.puschmann,j.appl.cryst.2009,42,339-341.r.w.w.hooft,l.h.straver和a.l.spek,j.appl.cryst.2008,41,96-103.h.d.flack,actacryst.1983,a39,867-881。表e：c49的晶体数据和结构精修。表f：c49的原子坐标(x104)以及相当的各向同性位移参数(å2x103)。u(eq)定义为正交uij张量的痕量的三分之一。表g：c49的键长[å]和角[˚]。用于产生等效原子的对称变换。表h：c49的各向异性位移参数(å2x103)。各向异性位移因子指数采取下列形式：-2π2[h2a*2u11+...+2hka*b*u12]。步骤4：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c50)的合成用n,n-二异丙基乙胺(0.68ml，3.9mmol)处理c48(500mg，来自前面的泡沫状白色固体，就对甲苯磺酸校正：1.25mmol)于乙腈(6ml)中的溶液并且使其于45℃下搅拌5分钟。添加p15(319mg，1.08mmol)之后，在45℃下持续搅拌7.25小时，于是在45℃下，用水(6ml)和乙腈(2ml)稀释反应混合物。使所得的异相混合物冷却至室温并且搅拌72小时。添加更多的水(5ml)，并且在进一步的30分钟的搅拌之后，经由过滤收集固体并且用乙腈和水的混合物(15:85，3x5ml)洗涤，以得到呈带有轻微粉红色特征的白色固体的c50。产量：605mg，1.02mmol，82%。lcmsm/z592.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.17(d,j=1.6hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.73(d,j=8.4hz,1h),7.51(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.19(brs,1h),7.18-7.14(m,2h),6.85-6.79(m,1h),6.76-6.71(m,2h),5.26-5.18(m,1h),4.73(dd,abx模式的组分,j=15.3,5.9hz,1h),4.67(dd,abx模式的组分,j=15.3,3.5hz,1h),4.63-4.55(m,1h),4.38(ddd,j=9.1,6.0,5.9hz,1h),3.94(s,5h),3.03-2.89(m,2h),2.77-2.65(m,2h),2.51-2.39(m,1h),2.34-2.20(m,2h),1.91-1.76(m,4h)。步骤5：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(5，游离酸)的合成将c50(595mg，1.00mmol)于甲醇(10ml)中的悬浮液加热至45℃并且用氢氧化钠水溶液(1m；2.01ml，2.01mmol)处理。于45℃下21小时之后，使反应混合物冷却至室温；然后用柠檬酸水溶液(1m，1ml)将其处理，使ph达5至6。添加水(10ml)，并且将混合物搅拌1小时，于是通过过滤收集固体。用甲醇与水的混合物(1：10，3x5ml)将其洗涤，以得到固体(433mg)。在40℃下，将此物质的一部分(300mg)与庚烷和乙酸乙酯的混合物(1：3，5ml)一起搅拌1小时；在持续的搅拌下冷却至室温后，经由过滤收集固体，并且用庚烷与乙酸乙酯的混合物(3：1，3x3ml)洗涤，以得到呈白色固体的5，游离酸。产量：260mg，0.450mmol，就整个反应而言，相当于65%。lcmsm/z578.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.75(vbrs,1h),8.26(brs,1h),7.79(dd,j=8.4,1.6hz,1h),7.66-7.56(m,3h),7.40(dd,j=8.3,2.0hz,1h),7.35(s,1h),6.87-6.75(m,3h),5.13-5.03(m,1h),4.76(dd,abx模式的组分,j=15.3,7.2hz,1h),4.62(dd,abx模式的组分,j=15.2,2.8hz,1h),4.46-4.38(m,1h),4.34(ddd,j=9.0,5.9,5.8hz,1h),3.84(ab四重峰,jab=13.5hz,δνab=67.7hz,2h),3.00(brd,j=11.2hz,1h),2.84br(d,j=11.3hz,1h),2.71-2.56(m,2h),2.45-2.34(m,1h),2.28-2.08(m,2h),1.84-1.65(m,4h)。通过其生物活性与4和5的生物活性的比较，此物质被确定为与上面的实施例5具有相同的绝对构型，在测定2中，此5，游离酸的样品呈现出25nm的ec50(3个重复的几何平均值)。实施例4和实施例5的铵盐在测定2中的活性分别为>20000nm(2个重复)和20nm(3个重复的几何平均值)。实施例5，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的合成1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸盐(5,1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐)用2-氨基-2-(羟基甲基)丙-1,3-二醇的水溶液(tris，1.0m；0.5ml，1.0mmol)处理5，游离酸(0.50g，0.86mmol)于四氢呋喃(4ml)中的混合物。20小时之后，使混合物与乙醇(2x6ml)于真空中浓缩。用乙醇(4ml)处理所述混合物。搅拌48小时后，经由过滤收集固体，用乙醇(2x10ml)洗涤并且于真空中干燥，以得到呈白色固体的5，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐。产量：410mg，0.586mmol，68%。1hnmr(600mhz,dmso-d6),特征峰：δ8.19(s,1h),7.78(brd,j=8.4hz,1h),7.62-7.58(m,2h),7.55(d,j=8.3hz,1h),7.40(dd,j=8.4,2.0hz,1h),7.35(s,1h),6.85-6.80(m,2h),6.79(dd,j=6.9,2.4hz,1h),5.11-5.05(m,1h),4.73(dd,j=15.2,7.2hz,1h),4.60(dd,j=15.3,2.9hz,1h),4.45-4.39(m,1h),4.34(ddd,j=9.0,6.0,5.8hz,1h),3.91(d,j=13.5hz,1h),3.74(d,j=13.5hz,1h),2.99(brd,j=11.1hz,1h),2.85(brd,j=11.3hz,1h),2.68-2.59(m,2h),2.44-2.37(m,1h),2.25-2.18(m,1h),2.17-2.10(m,1h),1.80-1.69(m,4h)。mp=168°c至178°c。实施例6和72-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(6)和2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(7)步骤1：4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶,对甲苯磺酸盐(c13)的合成在60℃下，将p2(150mg，0.335mmol)和对甲苯磺酸单水合物(159mg，0.836mmol)于乙酸乙酯(2.0ml)中的溶液搅拌3.5小时。将反应混合物于真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的c13，将其直接用于下面的步骤。lcmsm/z348.1♦[m+h]+。步骤2：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c51)的合成将p15(99.1mg，0.336mmol)添加至c13(来自前面的步骤；≤0.335mmol)和碳酸钾(232mg，1.68mmol)于乙腈(5.0ml)中的悬浮液。在60℃下，将反应混合物搅拌10小时，于是将其过滤，并且于真空中，将滤液浓缩。在残留物(390mg)与来自使用c13(≤0.11mmol)进行的类似反应的物质合并之后，用水(20ml)将其稀释并且用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，于真空中浓缩，并且经历制备型薄层色谱法(洗脱剂：1：1二氯甲烷/甲醇)，以提供呈无色油状物的c51，非对映异构体的混合物。合并产量：80.6mg，0.133mmol，30%(经过两个步骤)。lcmsm/z606.2♦[m+h]+。步骤3：2-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c52)和2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c53)的分离经由重复的sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：65：35二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，进行将c51(180mg，0.297mmol)分离为其组成非对映异构体。第一个洗脱出的非对映异构体指定为c52。产量：61.2mg，0.101mmol，34%。lcmsm/z627.9♦[m+na+]。保留时间：5.03分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3,4.6x150mm,3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%至40%b，历经5.5分钟，然后维持在40%b下3.0分钟；流速：2.5ml/分钟)。第二个洗脱出的非对映异构体指定为c53。经分析，此物质证实受到对应乙酯的污染；其以此混合物的形式被带至水解步骤(以产生7)。产量：40.0mg，66.0μmol，22%。lcmsm/z606.0♦[m+h]+。保留时间：5.19分钟(分析条件与用于c52的那些相同)。在二氧杂环戊烷处表示的绝对立体化学经由7与7，游离酸样品(由中间体p3合成，参见下文的实施例7，游离酸的替代合成)的效力相关性指派；p3的绝对立体化学经由c8的单晶x射线结构测定(参见下文)来确定。步骤4：2-({4-[(2r)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(6)的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.990ml，1.98mmol)添加至c52(60mg，99μmol)于甲醇(1.0ml)与四氢呋喃(1.0ml)的混合物中的溶液中，并且在20℃下，将反应混合物搅拌16小时。添加三氟乙酸直到反应混合物的的ph达到7，于是于真空中将其浓缩，并且使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.05%氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：29%至49%b)，将残留物纯化，以得到呈白色固体的6。产量：14.4mg，23.6μmol，24%。lcmsm/z592.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4),特征峰：δ8.35(d,j=1.3hz,1h),7.97(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.67(d,j=8.5hz,1h),7.58(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.21(brdd,j=8.4,1.9hz,1h),6.81-6.75(m,1h),6.74-6.68(m,2h),5.33-5.25(m,1h),4.72(dd,j=15.4,2.7hz,1h),4.49(dt,j=9.1,6.0hz,1h),4.03(ab四重峰,jab=13.9hz,δνab=47.8hz,2h),3.14(brd,j=11hz,1h),3.02(brd,j=11.5hz,1h),2.88-2.78(m,1h),2.77-2.68(m,1h),2.60-2.50(m,1h),2.47-2.32(m,2h),2.03(d,j=1.1hz,3h),2.01-1.87(m,2h),1.87-1.78(brm,2h)。步骤5：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵(7)的合成将氢氧化锂水溶液(2m；0.642ml，1.28mmol)添加至c53(38.9mg，64.2μmol)于甲醇(1.0ml)与四氢呋喃(1.0ml)的混合物中的溶液中。将反应混合物在20℃下搅拌16小时之后，通过添加三氟乙酸，将其调节至ph7，于真空中浓缩，并且使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.05%氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：0%至80%b)，将其纯化，以得到呈白色固体的7。产量：25.1mg，41.2µmol，64%。lcmsm/z591.9♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4),特征峰：δ8.34(d,j=1.5hz,1h),7.98(dd,j=8.5,1.6hz,1h),7.68(d,j=8.5hz,1h),7.58(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.20(brdd,j=8.4,1.9hz,1h),6.81-6.74(m,1h),6.74-6.67(m,2h),5.33-5.23(m,1h),4.73(dd,j=15.4,2.7hz,1h),4.68-4.61(m,1h),4.48(dt,j=9.1,5.9hz,1h),4.05(ab四重峰,jab=13.9hz,δνab=44.1hz,2h),3.15(brd,j=11.7hz,1h),3.03(brd,j=11.6hz,1h),2.87-2.69(m,2h),2.60-2.49(m,1h),2.48-2.33(m,2h),2.03(brs,3h),2.01-1.77(m,4h)。实施例7，游离酸的替代合成2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(7，游离酸)步骤1：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c53)的合成将n,n-二异丙基乙胺(15.1ml，86.9mmol)添加至p3(8.22g，15.8mmol)于乙腈(185ml)中的混合物中；搅拌5分钟之后，添加p15(4.57g，15.5mmol)，并且于45℃下加热反应混合物。4小时后，于真空中，将反应混合物浓缩至其原体积的一半，并且用水(100ml)稀释所得的混合物并且用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。用水(50ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸镁干燥，过滤，并且于真空中浓缩。硅胶色谱法(梯度：50%至100%乙酸乙酯(于庚烷中))得到呈白色固体的c53。产量：8.4g，13.9mmol，88%。lcmsm/z606.1♦[m+h]+。1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ8.30(s,1h),7.82(brd,j=8.4hz,1h),7.67(d,j=8.4hz,1h),7.58-7.53(m,2h),7.33(dd,j=8.4,2.1hz,1h),6.80-6.76(m,2h),6.76-6.72(m,1h),5.14-5.07(m,1h),4.81(dd,j=15.2,7.2hz,1h),4.67(dd,j=15.3,2.8hz,1h),4.51-4.44(m,1h),4.37(ddd,j=8.9,5.9,5.9hz,1h),3.97(d,j=13.6hz,1h),3.87(s,3h),3.78(d,j=13.5hz,1h),3.02(brd,j=11.1hz,1h),2.86(brd,j=11.3hz,1h),2.74-2.60(m,2h),2.48-2.41(m,1h),2.29-2.22(m,1h),2.21-2.14(m,1h),2.02(s,3h),1.83-1.73(m,2h),1.73-1.64(m,2h)。步骤2：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(7，游离酸)的合成将c53(8.40g，14.0mmol)于甲醇(135ml)中的混合物加热至45℃，并且用氢氧化钠水溶液(1m；27.7ml，27.7mmol)处理。20小时后，于真空中，将反应混合物浓缩至其原体积的一半。用水(100ml)稀释所得的混合物，并且使用柠檬酸水溶液(1m，15ml)将ph调节到5-6。过滤所得固体，用水(2x15ml)洗涤，并且将其以在乙酸乙酯(50ml)中的溶液形式转移至分液漏斗；依此方式，将残余水去除。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并且与由类似程序预先制备的四个批次(用于这些反应的c53的量为987mg，1.63mmol；1.15g，1.90mmol；8.57g，14.1mmol；和12.6g，20.8mmol)合并，且于真空中浓缩。用10%乙酸乙酯(于庚烷中)(500ml)处理所得到的黏性固体。4小时后，经由过滤收集固体并且用10%乙酸乙酯(于庚烷中)(2x25ml)洗涤，以得到呈白色固体的7，游离酸。产量：29.4g，0.527mmol，74%(就合并反应而言)。lcms592.2♦[m+h]+。1hnmr(600mhz,dmso-d6):δ12.74(brs,1h),8.28(s,1h),7.80(brd,j=8.4hz,1h),7.64(d,j=8.4hz,1h),7.59-7.52(m,2h),7.33(dd,j=8.4,2.1hz,1h),6.81-6.76(m,2h),6.76-6.72(m,1h),5.14-5.07(m,1h),4.79(dd,j=15.3,7.3hz,1h),4.65(dd,j=15.2,2.8hz,1h),4.51-4.45(m,1h),4.38(ddd,j=9.0,5.9,5.9hz,1h),3.96(brd,j=13.6hz,1h),3.78(brd,j=13.5hz,1h),3.02(brd,j=11.1hz,1h),2.86(brd,j=11.1hz,1h),2.74-2.60(m,2h),2.48-2.41(m,1h),2.29-2.21(m,1h),2.21-2.14(m,1h),2.02(s,3h),1.83-1.74(m,2h),1.74-1.64(m,2h)。通过其生物活性与6和7的生物活性的比较，此物质被确定为与上面的实施例7具有相同的绝对构型，在测定2中，此7，游离酸的样品呈现出4.3nm的ec50(3个重复的几何平均值)。实施例6和实施例7的铵盐在测定2中的活性分别为2400nm(5个重复的几何平均值)和2.9nm(8个重复的几何平均值)。合成7s-1.实施例7，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的合成1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸盐(7,1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐)用2-氨基-2-(羟基甲基)丙-1,3-二醇的水溶液(tris，1.0m；3.55ml，3.55mmol)处理7，游离酸(2.00g，3.38mmol)于四氢呋喃(16ml)中的混合物。18小时后，于真空中，将反应混合物浓缩并且用乙醇(30ml)处理。将此混合物搅拌23小时之后，经由过滤收集固体并且用乙酸乙酯(2x10ml)洗涤，以得到呈白色固体的7，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐。产量：1.41g，1.98mmol，59%。lcmsm/z592.3♦[m+h]+。1hnmr(600mhz,dmso-d6),特征峰：δ8.20(s,1h),7.79(d,j=8.4hz,1h),7.59-7.52(m,3h),7.33(brd,j=8.5hz,1h),6.81-6.72(m,3h),5.14-5.07(m,1h),4.76(dd,j=15.2,7.2hz,1h),4.63(brd,j=15.4hz,1h),4.50-4.44(m,1h),4.37(ddd,j=8.9,5.9,5.9hz,1h),3.94(d,j=13.4hz,1h),3.76(d,j=13.4hz,1h),3.01(brd,j=11.1hz,1h),2.86(brd,j=11.2hz,1h),2.73-2.60(m,2h),2.5-2.41(m,1h),2.27-2.20(m,1h),2.20-2.13(m,1h),2.02(s,3h),1.83-1.64(m,4h)。mp=175°c至180°c。合成7s-2：实施例7，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的替代合成在65℃下将2-氨基-2-(羟基甲基)-1,3-丙二醇(1.0当量，1.93l)于水中的3.3m溶液添加至7，游离酸(3.74kg)于异丙醇(20l)中的溶液中。添加另外的异丙醇(19l)，然后添加甲醇(19l)，同时将温度维持在65℃。历经2小时，将混合物缓慢地冷却至45℃，然后维持在45℃下至少12小时。然后，历经3小时，将混合物冷却至5℃，然后维持在5℃下至少3小时。然后，将混合物过滤并且将固体收集并用乙酸乙酯(2x10ml)洗涤，以得到呈白色固体的7，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐(产量：3.64kg，80.9%)。得到lcms和1hnmr数据，其基本上与上面显示的合成7s-1中的那些相同。实施例7，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的形式i的粉末x射线衍射(pxrd)数据的获得对实施例7的tris盐的白色固体(来自合成7s-1和合成7s-2)进行pxrd分析且发现其为结晶物质(指定为此无水晶型的形式i)。粉末x射线衍射分析是使用装备有cu辐射源的brukeraxsd8endeavor衍射仪进行的。发散狭缝设定在15mm连续照明。衍射的辐射通过psd-lynxeye检测器检测，检测器psd开启设定在2.99度。x射线管电压和电流强度分别设定于40kv和40ma。在cu波长(cukᾱ=1.5418λ)下，于θ-θ测角器中，使用0.01度步长和1.0秒步长时间，由3.0至40.0度2θ收集数据。防散射屏设置为1.5mm的固定距离。在数据收集期间，使样品旋转。通过将样品置于硅低背景样品架制备样品并且在收集期间使其旋转。使用brukerdiffracplus软件，收集数据并且通过evadiffracplus软件进行分析。在峰搜索之前，未处理pxrd数据文件。使用eva软件中的峰搜索算法，将阀值1选择的峰用于进行初步的峰指派。为了确保有效性，手动进行调节；目视检查自动指派的输出，并且将峰位置调节至峰最大值。通常选择相对强度>3%的峰。一般而言，不选择未解析的峰或与噪声一致的峰。usp所规定的与pxrd的峰位置有关的典型误差最多+/-0.2˚2-θ(usp-941)。始终观察到一个衍射图且提供于图1。前文合成7s-2所得到样品的pxrd的以度2θ表示的衍射峰以及相对强度(相对强度>3%)的列表提供于表x1。表x1角(2θ)相对强度(%)3.774.37.383.38.112.58.56.510.16.613.63.514.749.815.27.915.528.715.918.316.960.817.426.317.711.417.913.518.975.419.718.720.2100.020.924.821.514.822.231.722.910.123.534.623.78.224.46.524.98.725.26.425.914.726.448.626.712.527.515.827.96.128.310.529.515.529.812.630.212.130.93.431.716.433.317.234.014.935.84.837.53.238.65.3实施例8和92-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x1(8)[来自c56]；和2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2(9)[来自c57]步骤1：3-氟-4-[2-甲基-4-(哌啶-4-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基]苄腈,对甲苯磺酸盐(c54)的合成将对甲苯磺酸(158mg，0.919mmol)添加至p4(161mg，0.367mmol)于乙酸乙酯(8ml)中的溶液中，并且在65℃下，将反应混合物搅拌16小时。于真空中，将溶剂去除，以提供呈深黄色胶状物的c54；将此物质直接用于下一个步骤。步骤2：2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c55)的合成将碳酸钾(219mg，1.58mmol)添加至c54(来自前面的步骤；≤0.367mmol)于乙腈(3.7ml)中的溶液中，然后添加p15(115mg，0.390mmol)。在50℃下，将反应混合物搅拌20小时，于是用乙酸乙酯(10ml)将其稀释并且过滤。用乙酸乙酯(3x10ml)洗涤滤饼，并且于真空中，将合并的滤液浓缩。硅胶色谱法(梯度：0%至100%乙酸乙酯(于石油醚中))得到呈深黄色油状物的c55。产量：191.0mg，0.320mmol，87%(经过两个步骤)。lcmsm/z619.1[m+na+]。步骤3：2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-1(c56)和2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,ent-2(c57)的分离经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod，5μm；流动相：3：2二氧化碳/2-丙醇]，进行将c55(191mg，0.320mmol)分离为其在二氧杂环戊烷的组成立体异构体。以白色胶状物的形式得到的第一个洗脱出的异构体指定为ent-1(c56)。产量：114mg；此物质含有剩余的乙醇。lcmsm/z597.1[m+h]+。保留时间4.40分钟(柱：chiraltechnologieschiralcelod-3，4.6x100mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的2-丙醇；梯度：5%至40%b，历经4.5分钟，然后维持在40%b下2.5分钟；流速：2.8ml/分钟)。使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod，5μm；流动相：55：45二氧化碳/(含0.1%氢氧化铵的2-丙醇)]，将第二个洗脱出的异构体再纯化，以得到无色胶状物，指定为ent-2(c57)。产量：50mg，83.8μmol，26%。lcmsm/z597.1[m+h]+。保留时间4.74分钟(分析条件与用于c56的那些相同)。步骤4：2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x1(8)[来自c56]的合成用1,3,4,6,7,8-六氢-2h-嘧啶并[1,2-a]嘧啶的水溶液(0.97m，394μl，0.382mmol)处理c56(114mg，0.191mmol)于乙腈(10ml)中的溶液，并且在室温下，将反应混合物搅拌23小时。添加更多的1,3,4,6,7,8-六氢-2h-嘧啶并[1,2-a]嘧啶的水溶液(0.97m，394μl，0.382mmol)，并且持续搅拌6小时，于是通过添加1m盐酸，将ph小心地调节至7至8。于真空中去除挥发物之后，使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.05%氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：30%至50%b)进行纯化，以提供呈白色固体的8。产量：22.2mg，38.1μmol，20%。lcmsm/z583.3[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.19(d,j=1.4hz,1h),7.94(dd,j=8.4,1.5hz,1h),7.77(dd,j=7.7,7.7hz,1h),7.64(dd,j=10.6,1.6hz,1h),7.58(d,j=8.4hz,1h),7.57(dd,j=8.0,1.5hz,1h),6.81-6.75(m,1h),6.75-6.68(m,2h),5.34-5.25(m,1h),4.73(dd,j=15.3,3.0hz,1h),4.67-4.59(m,1h),4.49(dt,j=9.2,6.0hz,1h),3.96(ab四重峰,jab=13.7hz,δνab=41.2hz,2h),3.06(brd,j=11hz,1h),2.95(brd,j=11hz,1h),2.87-2.76(m,1h),2.71(tt,j=12.0,3.9hz,1h),2.61-2.50(m,1h),2.36-2.21(m,2h),2.06(s,3h),1.95-1.72(m,4h)。步骤5：2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2(9)[来自c57]的合成用1,3,4,6,7,8-六氢-2h-嘧啶并[1,2-a]嘧啶的水溶液(0.97m，173μl，0.168mmol)处理c57(50mg，84μmol)于乙腈(10ml)中的溶液。在室温(约25℃)下，将反应搅拌16小时，于是添加额外量的1,3,4,6,7,8-六氢-2h-嘧啶并[1,2-a]嘧啶的水溶液(0.97m，173μl，0.168mmol)，并且在25℃下持续搅拌29小时。然后，通过添加1m盐酸，将反应混合物小心地调节至7至8；于真空中，将所得到的混合物浓缩并且经历反相hplc(柱：xtimate™c18，5μm；流动相a：0.05%氢氧化铵(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：27%至67%b)，以得到呈白色固体的9。产量：18.0mg，30.9μmol，37%。lcmsm/z583.3[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.36-8.33(m,1h),7.97(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.78(dd,j=7.7,7.7hz,1h),7.70-7.63(m,2h),7.57(dd,j=8.0,1.5hz,1h),6.83-6.76(m,1h),6.76-6.71(m,2h),5.34-5.25(m,1h),4.95-4.85(m,1h,假定的；被水峰部分遮蔽),4.73(dd,abx模式的组分,j=15.3,2.7hz,1h),4.68-4.60(m,1h),4.50(dt,j=9.2,6.0hz,1h),4.02(ab四重峰,jab=13.8hz,δνab=48.2hz,2h),3.13(brd,j=11hz,1h),3.01(brd,j=11.5hz,1h),2.89-2.78(m,1h),2.78-2.68(m,1h),2.60-2.50(m,1h),2.45-2.30(m,2h),2.07(brs,3h),2.00-1.86(m,2h),1.83(m,2h)。实施例102-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2(10)[来自p9]步骤1：5-氯-2-[2-甲基-4-(哌啶-4-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基]吡啶,ent-x2,对甲苯磺酸盐(c58)[来自p9]的合成用对甲苯磺酸单水合物(116mg，0.610mmol)处理p9(228mg，0.529mmol)于乙酸乙酯(2.7ml)中的溶液并且于50℃下，将反应混合物加热16小时。然后，使其于室温下搅拌过夜，于是经由过滤收集沉淀并且用乙酸乙酯和庚烷的混合物(1：1，2x20ml)冲洗，以提供呈白色固体的c58。产量：227mg，0.451mmol，85%。lcmsm/z331.0♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.73(d,j=2.4hz,1h),8.61-8.46(brm,1h),8.35-8.18(brm,1h),8.02(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.64(d,j=8.5hz,1h),7.47(d,j=7.8,2h),7.11(d,j=7.8hz,2h),6.89-6.81(m,2h),6.72(五重峰,j=4.0hz,1h),3.45-3.27(m,2h,假定的；被水峰部分遮蔽),3.10-2.91(m,3h),2.28(s,3h),2.02(s,3h),1.97-1.80(m,4h)。步骤2：2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,diast-y2(c59)[来自p9]的合成将n,n-二异丙基乙胺(0.234ml，1.34mmol)添加至c58(225mg，0.447mmol)于乙腈(2.2ml)中的溶液中。于45℃下将此混合物搅拌5分钟之后，添加p15(120mg，0.407mmol)，并且于45℃下持续搅拌16小时，于是再次添加p15(11mg，37μmol)。在搅拌另外3小时之后，用水(2.5ml)处理反应混合物并且使其冷却至室温。添加更多的水(5ml)，并且将所得的浆状物搅拌2小时，于是经由过滤收集固体并且用乙腈与水的混合物(15：85，3x5ml)洗涤，以得到呈灰白色固体的c59(252mg)。1hnmr分析显示此物质含有一些n,n-二异丙基乙胺，且将其直接用于下面的步骤。lcmsm/z589.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)8.61(d,j=2.3hz,1h),8.18(d,j=1.5hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.74(d,j=8.5hz,1h),7.67(dd,abx模式的组分,j=8.4,2.4hz,1h),7.59-7.51(m,1h),6.82-6.75(m,1h),6.74-6.66(m,2h),5.28-5.19(m,1h),4.75(dd,abx模式的组分,j=15.3,6.0hz,1h),4.68(dd,abx模式的组分,j=15.3,3.4hz,1h),4.67-4.58(m,1h),4.41(ddd,j=9.1,5.9,5.9hz,1h),3.95(s,2h),3.95(s,3h),3.07-2.89(m,2h),2.81-2.69(m,2h),2.53-2.41(m,1h),2.37-2.22(m,2h),2.05(s,3h),1.93-1.74(m,4h)。步骤3：2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2(10)[来自p9]的合成将c59(来自前面的步骤；250mg，≤0.407mmol)于甲醇(2ml)中的悬浮液加热至40℃，于是添加氢氧化钠水溶液(1m；0.81ml，0.81mmol)。17小时后，使反应混合物冷却至室温，并且用1m柠檬酸水溶液，将ph调节至5至6。用水(2ml)稀释所得到的混合物，搅拌2小时，并且用乙酸乙酯(3x5ml)萃取；用饱和的氯化钠水溶液(5ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩，以提供泡沫状固体。将此物质纳入乙酸乙酯与庚烷的混合物(1：1，4ml)，加热至50℃，并且然后使其冷却并且搅拌过夜。过滤得到呈白色固体的10。产量：179mg，0.311mmol，76%(经过两个步骤)。lcmsm/z575.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.73(brs,1h),8.71(d,j=2.5hz,1h),8.27(d,j=1.5hz,1h),8.00(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.80(dd,j=8.4,1.6hz,1h),7.64(d,j=8.4hz,1h),7.60(d,j=8.5hz,1h),6.83-6.72(m,3h),5.14-5.06(m,1h),4.77(dd,abx模式的组分,j=15.2,7.2hz,1h),4.63(dd,abx模式的组分,j=15.2,2.8hz,1h),4.50-4.42(m,1h),4.37(ddd,j=9.0,5.9,5.9hz,1h),3.85(ab四重峰,jab=13.6hz,δνab=71.5hz,2h),3.01(brd,j=11.2hz,1h),2.85(brd,j=11.2hz,1h),2.74-2.57(m,2h),2.47-2.38(m,1h),2.29-2.10(m,2h),2.01(s,3h),1.81-1.64(m,4h)。合成10s-1.实施例10，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的合成1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓2-({4-[2-(5-氯吡啶-2-基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸盐,diast-x2(10,1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐)[来自p9]的合成用2-氨基-2-(羟基甲基)丙-1,3-二醇的水溶液(tris，1.0m；2.81ml，2.81mmol)处理10(1.54g，2.68mmol)于四氢呋喃(10ml)中的混合物。24小时后，使反应混合物与乙醇(2x50ml)于真空中浓缩。用乙醇(15ml)处理残留物。搅拌20小时之后，经由过滤收集固体并且用冷乙醇(5ml)洗涤，以得到呈白色固体的10，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐。产量：1.41g，2.03mmol，76%。lcmsm/z575.3♦[m+h]+。1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ8.71(d,j=2.5hz,1h),8.21(brs,1h),8.00(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.79(brd,j=8.4hz,1h),7.60(d,j=8.5hz,1h),7.57(d,j=8.4hz,1h),6.82-6.73(m,3h),5.13-5.07(m,1h),4.74(dd,j=15.3,7.2hz,1h),4.61(dd,j=15.3,2.9hz,1h),4.49-4.43(m,1h),4.37(ddd,j=9.0,5.9,5.9hz,1h),3.93(d,j=13.6hz,1h),3.75(d,j=13.5hz,1h),3.01(brd,j=11.3hz,1h),2.86(brd,j=11.4hz,1h),2.73-2.59(m,2h),2.48-2.37(m,1h),2.27-2.20(m,1h),2.19-2.12(m,1h),2.01(s,3h),1.82-1.66(m,4h)。mp=184°c至190°c。合成10s-2.实施例10，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的替代合成在旋转蒸发仪上、37℃水浴中，将10(8.80gm，15.3mmol)于2-甲基四氢呋喃(90ml)中的混合物真空浓缩以将总体积降低至~54ml。将异丙醇(90ml)添加至所述混合物，并且然后再次将所得到的混合物浓缩至~54ml的体积。将异丙醇(135ml)添加至混合物，然后添加水性tris胺(3m；5.0ml，0.98当量)。于环境温度下，搅拌所得的混合物/溶液；并且在~15分钟内，固体沉淀开始形成。然后，在环境温度下，将混合物搅拌另外5小时。将所得混合物/浆状物冷却至0℃并且将冷却的浆状物搅拌另外约2小时。将浆状物过滤并且用冷的异丙醇(3x15ml)洗涤。使收集到的固体在收集漏斗上风干约90分钟，并且然后转移至真空烘箱，干燥过夜。于50℃/23inhg真空(有少量的氮气排出)下~16小时之后，得到8.66gm呈白色固体的10，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐；99.8面积%(通过uplc)(产量：12.5mmol，81%)。得到lcms和1hnmr数据，其基本上与前文所示的合成10s-1中的那些相同。实施例10，1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓盐的形式a(也称为化合物实施例10的无水tris盐的形式a)的粉末x射线衍射(pxrd)数据的获得对实施例10的tris盐的白色固体(来自合成10s-1和合成10s-2)进行pxrd分析且发现其为结晶物质(指定为形式a)。粉末x射线衍射分析是使用装备有cu辐射源的brukeraxsd8endeavor衍射仪进行的。发散狭缝设定在15mm连续照明。衍射的辐射通过psd-lynxeye检测器检测，检测器psd开启设定在2.99度。x射线管电压和电流强度分别设定于40kv和40ma。在cu波长(cukᾱ=1.5418λ)下，于θ-θ测角器中，使用0.01度步长和1.0秒步长时间，由3.0至40.0度2θ收集数据。防散射屏设置为1.5mm的固定距离。在数据收集期间，使样品旋转。通过将样品置于硅低背景样品架制备样品并且在收集期间使其旋转。使用brukerdiffracplus软件，收集数据并且通过evadiffracplus软件进行分析。在峰搜索之前，未处理pxrd数据文件。使用eva软件中的峰搜索算法，将阀值1选择的峰用于进行初步的峰指派。为了确保有效性，手动进行调节；目视检查自动指派的输出，并且将峰位置调节至峰最大值。通常选择相对强度>3%的峰。一般而言，不选择未解析的峰或与噪声一致的峰。usp所规定的与pxrd的峰位置有关的典型误差最多+/-0.2˚2-θ(usp-941)。前文合成10s-2所得到样品的pxrd的以度2θ表示的衍射峰以及相对强度(相对强度>3%)的列表提供于表x2。表x2角(2θ)相对强度(%)3.918.47.736.38.110.48.73.410.24.114.65.815.230.115.745.516.031.316.88.717.686.019.246.619.525.419.831.420.225.021.1100.021.440.222.237.023.019.824.343.025.09.926.015.827.335.328.214.129.319.729.811.731.69.332.86.034.014.434.512.135.43.036.54.1实施例111-(2-甲氧基乙基)-2-({4-[2-甲基-2-(吡啶-3-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,甲酸盐(11)此整个合成顺序以库形式进行。步骤1：1-(2-甲氧基乙基)-2-({4-[2-甲基-2-(吡啶-3-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c60)的合成用碳酸氢钠(100μmol)，然后用十二羰基三钌(6mg，9μmol)处理p14(44mg，100μmol)和3-乙炔基吡啶(21mg，200μmol)于甲苯(800μl)中的混合物。然后，将反应瓶加盖并且于120℃下摇晃16小时。使用speedvac®浓缩仪去除溶剂提供c60，将其直接用于下一步骤。步骤2：1-(2-甲氧基乙基)-2-({4-[2-甲基-2-(吡啶-3-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,甲酸盐(11)的合成将氢氧化钠水溶液(1.0m；200μl，200μmol)添加至c60(来自前面的步骤，≤100μmol)于甲醇(400μl)与四氢呋喃(400μl)的混合物中的溶液中。将反应瓶加盖并且于80℃下摇晃16小时，于是使用speedvac®浓缩仪，将反应混合物蒸发，并且使用反相hplc(柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：0.225%甲酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：12%至52%b)纯化以得到11。产量：2.2mg，4.2μmol，4%(经过两个步骤)。lcmsm/z529[m+h]+。保留时间：2.47分钟(柱：watersxbridgec18,2.1x50mm，5μm；流动相a：0.0375%三氟乙酸(于水中)；流动相b：0.01875%三氟乙酸(于乙腈中)；梯度：1%至5%b，历经0.6分钟；5%至100%b，历经3.4分钟；流速：0.8ml/分钟)。实施例122-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(12)此整个合成顺序以库形式进行。步骤1：3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-4-硝基苯甲酸甲酯(c61)的合成用n,n-二甲基乙烷-1,2-二胺(18mg，200μmol)和n,n-二异丙基乙胺(78mg，600μmol)处理3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(n,n-二甲基甲酰胺中的0.2m溶液；1ml，200μmol)。将反应瓶加盖并且于50℃下摇晃16小时，于是使用speedvac®浓缩仪，将反应混合物蒸发，以得到c61。此物质直接用于下一个步骤。步骤2：4-氨基-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}苯甲酸甲酯(c62)的合成使用稀盐酸活化锌粉。将甲醇(2ml)添加至c61(来自前面的步骤，≤200μmol)，然后添加氯化钙的水溶液(1.0m；200μl，200μmol)和活化的锌粉(130mg，2.0mmol)。将反应瓶加盖并且于70℃下摇晃16小时，于是将反应混合物过滤。使用speedvac®浓缩仪，将滤液浓缩，并且将残留物纳入水(2ml)中，并且然后用乙酸乙酯(2x3ml)萃取。使用speedvac®浓缩仪，将合并的有机层蒸发，以得到c62(估计为150μmol)，将其直接用于下一个步骤。步骤3：4-[({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酰基)氨基]-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}苯甲酸甲酯(c63)的合成将化合物p10(41mg，100μmol)添加至c62(来自前面的步骤，大约150μmol)，并且用2-羟基吡啶1-氧化物和1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的n,n-二甲基乙酰胺溶液(各0.1m；1ml，各100μmol)处理所述混合物。然后，添加n,n-二异丙基乙胺(39mg，300μmol)，并且将反应瓶加盖并且于50℃下摇晃16小时。然后，使用speedvac®浓缩仪，将反应混合物浓缩，并且使用制备型薄层色谱法进行纯化，以提供c63，将其直接推进至下一个步骤。步骤4：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c64)的合成于加盖的小瓶中，在150℃下，将乙酸(500μl)和c63(来自前面的步骤，≤100μmol)的混合物摇晃2小时，于是使用speedvac®浓缩仪，将反应混合物蒸发。所得到c64直接进行至下面的步骤。步骤5：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸(12)的合成用氢氧化锂水溶液(2.0m；500μl，1mmol)处理c64(来自前面的步骤，≤100μmol)于乙醇(500μl)中的溶液，并且于密封小瓶中，在50℃下，将反应混合物摇晃2小时。在通过添加1.0m盐酸将混合物的ph调节至7之后，使用speedvac®浓缩仪将所得的混合物浓缩，并且然后，经由反相hplc[柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：氢氧化铵(于水中)(ph10)；流动相b：乙腈；梯度：25%至65%b]纯化，以得到12。产量：7.0mg，12μmol，12%(经过三个步骤)。lcmsm/z593[m+h]+。保留时间：2.45分钟(柱：watersxbridgec18,2.1x50mm，5μm；流动相a：0.0375%三氟乙酸(于水中)；流动相b：0.01875%三氟乙酸(于乙腈中)；梯度：10%至100%b，历经4.0分钟；流速：0.8ml/分钟)。实施例132-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-3-(1,3-噁唑-2-基甲基)-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-甲酸(13)步骤1：6-[(1,3-噁唑-2-基甲基)氨基]-5-硝基吡啶-2-甲酸甲酯(c65)的合成将三乙胺(532mg，5.26mmol)添加至1-(1,3-噁唑-2-基)甲胺，盐酸盐(236mg，1.75mmol)和6-氯-5-硝基吡啶-2-甲酸甲酯(386mg，1.78mmol)于四氢呋喃(5ml)中的悬浮液中。于25℃下，将反应混合物搅拌14小时后，将其倒入水(30ml)中并且用二氯甲烷(2x50ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤并且于真空中浓缩；硅胶色谱法(梯度：0%至5%甲醇(于二氯甲烷中))得到呈黄色固体的c65。产量：310mg，1.11mmol，63%。lcmsm/z278.7[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.69-8.61(brm,1h),8.58(d,j=8.4hz,1h),7.65(d,j=0.8hz,1h),7.46(d,j=8.4hz,1h),7.11(d,j=1.0hz,1h),5.07(d,j=5.3hz,2h),3.97(s,3h)。此合成顺序的剩余部分以库形式进行。步骤2：5-氨基-6-[(1,3-噁唑-2-基甲基)氨基]吡啶-2-甲酸甲酯(c66)的合成先后将氯化铵水溶液(5.0m；400μl，2.0mmol)和活化的锌(131mg，2.0mmol)添加至c65(56mg，200μmol)于甲醇(2.0ml)中的溶液中。然后，将反应瓶加盖并且于30℃下摇晃16小时，于是将反应混合物过滤。使用speedvac®浓缩仪，将滤液浓缩，然后使其与水(1.0ml)混合并且用二氯甲烷(3x1.0ml)萃取；使用speedvac®浓缩仪，将合并的有机层蒸发，以提供c66，其是直接用于下面的步骤。步骤3：5-[({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酰基)氨基]-6-[(1,3-噁唑-2-基甲基)氨基]吡啶-2-甲酸甲酯(c67)的合成使p10(81mg，200μmol)与c66(来自前面的步骤，≤200μmol)的混合物与n,n-二甲基乙酰胺混合，并且然后用n,n-二异丙基乙胺(100μl,600μmol)处理。添加含有1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.24m)和2-羟基吡啶1-氧化物(0.1m)的于n,n-二甲基乙酰胺中的溶液(1.0ml，含有240μmol的1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和100μmol的2-羟基吡啶1-氧化物)，并且将反应瓶加盖并且于50℃下摇晃16小时。然后，使用speedvac®浓缩仪，去除挥发物，并且使残留物经历制备型薄层色谱法，以得到c67，将其直接推进到下一个步骤。步骤4：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-3-(1,3-噁唑-2-基甲基)-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-甲酸甲酯(c68)的合成在150℃下，将乙酸(1.0ml)和c67(来自前面的步骤，≤200μmol)的混合物摇晃2小时，于是使用speedvac®浓缩仪蒸发反应混合物。所得的c68直接用于下面的步骤。步骤5：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-3-(1,3-噁唑-2-基甲基)-3h-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-甲酸(13)的合成将氢氧化锂水溶液(2.0m；1.0ml，2.0mmol)添加至c68(来自前面的步骤，≤200μmol)于四氢呋喃(1.0ml)中的混合物。添加甲醇(500μl)后，将反应瓶加盖并且于50℃下摇晃16小时。在使用speedvac®浓缩仪去除挥发物之后，添加二甲基亚砜(1.0ml)，并且使用浓盐酸，将ph调节至7-8。使用反相hplc[柱：ageladurashellc18，5μm；流动相a：氢氧化铵(于水中)(ph10)；流动相b：乙腈；梯度：24%至64%b]，将所得到的混合物纯化，以得到13。产量：3.9mg，6.5μmol，3%(经过四个步骤)。lcmsm/z604[m+h]+。保留时间：3.14分钟(柱：watersxbridgec18,2.1x50mm，5μm；流动相a：0.0375%三氟乙酸(于水中)；流动相b：0.01875%三氟乙酸(于乙腈中)；梯度：1%至5%b，历经0.6分钟；5%至100%b，历经3.4分钟；流速：0.8ml/分钟)。实施例142-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-甲基-1h-苯并咪唑-6-甲酸(14)步骤1：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-甲基-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c69)的合成将n,n-二异丙基乙胺(683μl，3.92mmol)添加至p3(680mg，1.31mmol)于乙腈(5.2ml)中的混合物中；使其于45℃下搅拌5分钟，于是添加p16(319mg，1.34mmol)。在45℃下持续搅拌2.75小时，并且然后在使反应混合物冷却至室温之前，添加水(6ml)并且搅拌30分钟。经由过滤收集固体并且用乙腈与水的混合物(1：4，3x5ml)洗涤，以得到呈白色固体的c69。产量：635mg，1.15mmol，88%。lcmsm/z550.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.15-8.12(m,1h),7.97(dd,j=8.5,1.6hz,1h),7.74(d,j=8.5hz,1h),7.50(dd,j=8.2,8.2hz,1h),7.16-7.07(m,2h),6.79-6.73(m,1h),6.72-6.65(m,2h),3.98(s,3h),3.96(s,3h),3.88(s,2h),3.04-2.93(m,2h),2.76-2.66(m,1h),2.37-2.25(m,2h),2.04(brs,3h),1.89-1.78(m,4h)。步骤2：2-({4-[(2s)-2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-甲基-1h-苯并咪唑-6-甲酸(14)的合成将c69(600mg，1.09mmol)于甲醇(11ml)中的混合物加热至45℃，并且然后用氢氧化钠水溶液(1m；2.2ml，2.2mmol)处理。24小时后，经由添加水性柠檬酸(1m；1.1ml)，将反应混合物调节至ph5-6，并且然后用水(10ml)稀释。使所得的混合物冷却至室温并且搅拌1小时，于是，经由过滤收集沉淀的固体并且用甲醇与水的混合物(1：4；3x5ml)洗涤。这提供了呈白色固体的14。产量：535mg，0.998mmol，92%。lcmsm/z536.1♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.16(d,j=1.5hz,1h),7.81(dd,j=8.4,1.6hz,1h),7.64(d,j=8.4hz,1h),7.59-7.52(m,2h),7.33(dd,j=8.3,2.1hz,1h),6.81-6.70(m,3h),3.94(s,3h),3.84(s,2h),3.01-2.91(m,2h),2.70-2.59(m,1h),2.28-2.16(m,2h),2.02(s,3h),1.73(m,4h)。实施例15和162-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x1,三氟乙酸盐(15)[来自p18，经由c71]；和2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2,三氟乙酸盐(16)[来自p18，经由c72]步骤1：2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c70)[来自p18]的合成用氮气，将p18(240mg，0.699mmol)、c4(275mg，0.800mmol)、碳酸铯(455mg，1.40mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(40.0mg，43.7μmol)、和1,1’-联苯-2,2’-二基双(二苯基磷烷)(binap；52.2mg，83.8μmol)于甲苯(5ml)中的混合物脱气5分钟，并且然后在90℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并且于真空中，将滤液浓缩；制备型薄层色谱法(洗脱剂：1：1石油醚/乙酸乙酯)得到c70，呈黄色油状物的非对映异构体的混合物。产量：165mg，0.272mmol，39%。lcmsm/z628.1♦[m+na+]。步骤2：2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,diast-y1(c71)[来自p18]；和2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯,diast-y2(c72)[来自p18]的分离使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：65：35二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，进行c70(165mg，0.272mmol)中的二氧杂环戊烷上的立体异构体的分离。第一个洗脱出的异构体指定为diast-y1(c71)，并且第二个洗脱出的异构体指定为diast-y2(c72)；两个都以白色固体的形式分离出。c71产量：55.0mg，90.7μmol，33%。lcmsm/z605.9♦[m+h]+。保留时间4.47分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x100mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%至40%b，历经4.5分钟，然后维持在40%b下2.5分钟；流速：2.8ml/分钟)。c72产量：58.0mg，95.7μmol，35%。lcmsm/z628.0♦[m+na+]。保留时间4.88分钟(分析条件与用于c71的那些相同)。步骤3：2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x1,三氟乙酸盐(15)[来自p18，经由c71]的合成将氢氧化钠水溶液(3m；1.0ml，3.0mmol)添加至c71(55.0mg，90.7μmol)于甲醇(2.0ml)与四氢呋喃(1.0ml)的混合物中的溶液中。反应混合物于20℃下搅拌2小时之后，通过添加1m盐酸，将ph调节至7，并且用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，3x30ml)萃取所得的混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并且于真空中浓缩。反相hplc(柱：bostongreenods，5μm；流动相a：0.1%三氟乙酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：10%至95%b)提供呈白色固体的15。产量：35.8mg，50.7µmol，56%。lcmsm/z592.3♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.46(s,1h),8.21(d,j=8.6hz,1h),7.78(d,j=8.6hz,1h),7.54(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.16-7.08(m,2h),6.76(dd,j=8.2,8.1hz,1h),6.55-6.47(m,2h),4.9-4.70(m,2h,假定的；被水峰部分遮蔽),3.82(t,j=4.9hz,2h),3.66-3.56(m,1h),3.50-3.41(m,1h),3.19-3.09(m,1h),3.15(s,3h),3.08-2.99(m,1h),2.63-2.57(m,1h),2.27-2.17(m,1h),2.01(s,3h),1.76-1.66(m,2h),1.62-1.50(m,2h),1.35-1.26(m,1h)。步骤4：2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸,diast-x2,三氟乙酸盐(16)[来自p18，经由c72]的合成将氢氧化钠水溶液(3m；1.0ml，3.0mmol)添加至c72(58.0mg，95.7μmol)于甲醇(2.0ml)与四氢呋喃(1.0ml)的混合物中的溶液中。反应混合物于20℃下搅拌2小时之后，通过添加1m盐酸，将ph调节至7，并且用二氯甲烷与甲醇的混合物(10：1，3x30ml)萃取所得的混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并且于真空中浓缩。反相hplc(柱：bostongreenods，5μm；流动相a：0.1%三氟乙酸(于水中)；流动相b：乙腈；梯度：35%至95%b)提供呈白色固体的16。产量：33.4mg，47.3μmol，49%。lcmsm/z592.2♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.53-8.50(m,1h),8.25(dd,j=8.6,1.4hz,1h),7.80(brd,j=8.6hz,1h),7.57(dd,j=8.4,8.2hz,1h),7.25(dd,j=10.8,2.0hz,1h),7.19(brdd,j=8.4,2.1hz,1h),6.77(dd,j=8.2,8.1hz,1h),6.55-6.50(m,2h),4.9-4.72(m,2h,假定的；被水峰部分遮蔽),3.93-3.80(m,2h),3.68-3.58(m,1h),3.41-3.3(m,1h,假定的；被溶剂峰部分遮蔽),3.25(s,3h),3.22-3.12(m,1h),3.07-2.97(m,1h),2.67(dd,j=8.3,5.8hz,1h),2.28-2.17(m,1h),2.01(d,j=1.0hz,3h),1.86-1.71(m,2h),1.69-1.56(m,2h),1.36-1.26(m,1h)。实施例17和182-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵,ent-1(17)和2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵,ent-2(18)步骤1：4-[({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}乙酰基)氨基]-3-{[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]氨基}苯甲酸甲酯(c73)的合成将o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(566mg，1.49mmol)添加至p19(340mg，1.24mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物中，并且在25℃下，将所述混合物搅拌10分钟。然后，添加p10(503mg，1.24mmol)和n,n-二异丙基乙胺(615μl，3.53mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(7.7ml)中的溶液，并且在25℃下，将反应混合物搅拌16小时，于是将其倒入水(10ml)中并且用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。相继用氯化铵水溶液(3x20ml)和饱和的氯化钠水溶液(2x20ml)洗涤合并的有机层，使其经硫酸钠干燥，过滤，并且于真空中浓缩。使用硅胶色谱法(梯度：0%至5%甲醇(于乙酸乙酯中))纯化后，得到呈淡棕色胶状物的c73。产量：316mg，0.477mmol，38%。lcmsm/z662.2♦[m+h]+。步骤2：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯(c74)的合成在55℃下，将c73(316mg，0.477mmol)于乙酸(14ml)中的溶液搅拌16小时。在高真空下，将溶剂去除，并且使用制备型薄层色谱法(洗脱剂：10：1二氯甲烷/甲醇)，将残留物纯化，以得到呈无色油状物的c74。产量：200mg，0.310mmol，65%。lcmsm/z644.3♦[m+h]+。步骤3：2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵,ent-1(17)和2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-[(1-乙基-1h-咪唑-5-基)甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸铵,ent-2(18)的合成在45℃下，将c74(150mg，0.233mmol)和氢氧化钠水溶液(2m；233μl，0.466mmol)于甲醇(3ml)与四氢呋喃(3ml)的混合物中的混合物搅拌16小时。在通过添加1m盐酸将反应混合物调节至ph7之后，于真空中将其浓缩，以得到17与18的混合物。经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod，10μm；流动相：1：1二氧化碳/(含0.1%氢氧化铵的乙醇)]，将这些对映异构体分离。第一个洗脱出的对映异构体指定为ent-1(17)，且第二个洗脱出的对映异构体指定为ent-2(18)，两个都以白色固体的形式分离出。17产量：45.0mg，69.5μmol，30%。lcmsm/z630.3♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(brs,1h),8.00(brd,j=8.4hz,1h),7.81(s,1h),7.72(d,j=8.2hz,1h),7.56(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.21(dd,j=8.3,2.1hz,1h),6.77(dd,abc模式的组分,j=8.0,7.7hz,1h),6.69(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.2hz,1h),6.67-6.60(m,2h),5.82(s,2h),4.12(q,j=7.2hz,2h),3.89(ab四重峰,jab=14.3hz,δνab=6.9hz,2h),3.00-2.90(m,2h),2.74-2.64(m,1h),2.32-2.21(m,2h),2.02(s,3h),1.82-1.61(m,4h),1.29(t,j=7.3hz,3h)。保留时间5.66分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x150mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的甲醇；梯度：5%至40%b(历经5.5分钟)，然后维持在40%b下3.0分钟；流速：2.5ml/分钟)。18产量：32.8mg，50.7μmol，22%。lcmsm/z630.3♦[m+h]+。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(s,1h),8.00(d,j=8.5hz,1h),7.81(s,1h),7.72(d,j=8.5hz,1h),7.56(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.21(dd,j=8.3,2.0hz,1h),6.77(dd,abc模式的组分,j=7.8,7.8hz,1h),6.69(dd,abc模式的组分,j=7.9,1.2hz,1h),6.67-6.60(m,2h),5.82(s,2h),4.12(q,j=7.3hz,2h),3.89(ab四重峰,jab=14.1hz,δνab=7.4hz,2h),3.01-2.90(m,2h),2.74-2.63(m,1h),2.31-2.21(m,2h),2.02(s,3h),1.82-1.60(m,4h),1.29(t,j=7.3hz,3h)。保留时间5.34分钟(分析型sfc条件与用于17的那些相同)。使用与表2鉴定的实施例类似的程序，使用表2鉴定的适当中间体制备列于表1的化合物。使用本文所讨论的方法，将化合物纯化。最终化合物可以中性物或者酸或碱盐的形式分离出。表1：实施例19-102的结构和iupac名称表2：实施例19-102的制备方法和物化数据实施例编号方法1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ;质谱，观察到的离子m/z[m+h]+或hplc保留时间；质谱m/z[m+h]+(除非另有指明)19实施例15和16;c4,p128.39(brs,1h),8.08(d,j=8.5hz,1h),7.81(d,j=8.6hz,1h),7.60(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.1hz,1h),7.22(dd,j=8.4,2.0hz,1h),6.83(dd,j=8.1,8.1hz,1h),6.60(d,j=7.8hz,1h),6.55(d,j=8.4hz,1h),4.73(s,2h),4.66(t,j=4.9hz,2h),3.77(t,j=4.8hz,2h),3.59–3.43(m,8h),3.30(s,3h^^),2.05(s,3h);581.020实施例4和51;c43,p118.34–8.31(m,1h),8.03(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.78(d,j=8.6hz,1h),7.60(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.36(dd,j=10.2,1.9hz,1h),7.31(dd,j=8.4,1.8hz,1h),7.25(s,1h),6.90(dd,abc模式的组分,j=8.9,6.6hz,1h),6.86–6.80(m,2h),4.79(s,2h),4.60(brt,j=4.8hz,2h),3.95–3.85(m,2h),3.74(dd,j=5.3,4.2hz,2h),3.44–3.33(m,2h),3.28(s,3h),3.15–3.05(m,1h),2.37–2.12(m,4h);566.0♦21实施例4和51;c43,p118.32(dd,j=1.6,0.7hz,1h),8.03(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.78(dd,j=8.5,0.7hz,1h),7.60(dd,j=8.1,7.9hz,1h),7.36(dd,j=10.2,2.0hz,1h),7.31(brdd,j=8.3,1.8hz,1h),7.25(s,1h),6.90(dd,abc模式的组分,j=8.8,6.7hz,1h),6.87–6.80(m,2h),4.79(s,2h),4.60(t,j=4.8hz,2h),3.90(brd,j=12.3hz,2h),3.74(dd,j=5.3,4.2hz,2h),3.38(brdd,j=12.6,12.5hz,2h),3.28(s,3h),3.10(tt,j=11.9,4.0hz,1h),2.37–2.11(m,4h);566.0♦22实施例1和2;p12,p58.37(d,j=1.5hz,1h),8.07(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.79(d,j=8.6hz,1h),7.60–7.54(m,2h),7.50–7.42(m,3h),6.98(s,1h),6.86(dd,j=8.1,8.1hz,1h),6.61(dd,j=7.9,0.9hz,1h),6.59(dd,j=8.4,0.9hz,1h),4.73(s,2h),4.64(t,j=4.8hz,2h),3.75(dd,j=5.4,4.3hz,2h),3.61–3.44(m,8h),3.28(s,3h);515.123实施例1和2;p12,p68.37(brs,1h),8.07(dd,j=8.6,1.5hz,1h),7.79(d,j=8.5hz,1h),7.61–7.54(m,2h),7.51–7.42(m,3h),6.98(s,1h),6.86(dd,j=8.2,8.1hz,1h),6.61(brd,j=8hz,1h),6.59(brd,j=8.5hz,1h),4.69(s,2h),4.64(t,j=4.9hz,2h),3.75(t,j=4.9hz,2h),3.59–3.43(m,8h),3.29(s,3h);515.124实施例4和5;c13,p118.33(dd,j=1.5,0.6hz,1h),8.03(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.79(dd,j=8.5,0.5hz,1h),7.62(dd,j=8.4,8.3hz,1h),7.29(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.22(ddd,j=8.4,2.0,0.7hz,1h),6.88–6.82(m,1h),6.82–6.76(m,2h),4.83(s,2h),4.63(t,j=4.8hz,2h),3.98–3.88(m,2h),3.75(dd,j=5.3,4.2hz,2h),3.47–3.36(m,2h),3.31(s,3h^^),3.10(tt,j=12.0,4.1hz,1h),2.36–2.10(m,4h),2.05(d,j=1.0hz,3h);580.1♦25实施例15和162;c4,p178.51(dd,j=1.5,0.7hz,1h),8.25(dd,j=8.6,1.4hz,1h),7.79(dd,j=8.6,0.7hz,1h),7.57(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.25(dd,j=10.8,2.0hz,1h),7.19(ddd,j=8.4,2.0,0.7hz,1h),6.80–6.73(m,1h),6.55–6.50(m,2h),4.9–4.73(m,2h^),3.92–3.81(m,2h),3.66–3.58(m,1h),3.41–3.3(m,1h^^),3.25(s,3h),3.20–3.12(m,1h),3.05–2.97(m,1h),2.70–2.63(m,1h),2.27–2.17(m,1h),2.01(d,j=1.0hz,3h),1.84–1.71(m,2h),1.67–1.58(m,2h),1.31(brd,j=13hz,1h);592.3♦26实施例15和162;c4,p178.53–8.50(m,1h),8.26(dd,j=8.6,1.4hz,1h),7.81(d,j=8.6hz,1h),7.55(dd,j=8.3,8.2hz,1h),7.16–7.08(m,2h),6.77(dd,j=8.3,7.9hz,1h),6.52(brd,j=8.3hz,1h),6.51(brd,j=7.7hz,1h),4.9–4.74(m,2h^),3.83(t,j=4.8hz,2h),3.68–3.60(m,1h),3.54–3.46(m,1h),3.18–3.09(m,1h),3.14(s,3h),3.09–3.01(m,1h),2.69–2.62(m,1h),2.31–2.21(m,1h),2.01(brs,3h),1.78–1.69(m,2h),1.63–1.52(m,2h),1.33–1.25(m,1h);592.3♦27实施例4和53;p118.32(brs,1h),8.02(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.82–7.76(m,2h),7.73(brd,j=10.0hz,1h),7.67(brd,j=8.0hz,1h),7.35(s,1h),6.96–6.89(m,1h),6.88–6.83(m,2h),4.76(s,2h),4.61(t,j=4.8hz,2h),3.87(brd,j=12.3hz,2h),3.74(t,j=4.8hz,2h),3.39–3.3(m,2h^^),3.29(s,3h),3.15–3.05(m,1h),2.35–2.10(m,4h);557.128实施例11;p143.08分钟4;59629实施例11;p143.12分钟4;55630实施例11;p142.90分钟4;57631实施例11;p142.92分钟4;54632实施例11;p142.88分钟4;55833实施例11;p143.04分钟4;56234实施例11;p142.99分钟5;55335实施例11;p142.92分钟4;57636实施例11;p142.81分钟5;54337实施例11;p142.90分钟4;55838实施例11;p142.91分钟4;54639实施例11;p142.89分钟4;55840实施例11;p143.11分钟4;59641实施例11;p142.97分钟4;56442实施例11;p142.40分钟5;54343实施例12;p102.70分钟4;62144实施例12;p102.49分钟4;63545实施例12;p102.79分钟4;61346实施例12;p102.71分钟4;63547实施例12;p102.85分钟4;65748实施例12;p102.71分钟4;63349实施例12;p102.66分钟4;60750实施例12;p102.43分钟4;61651实施例12;p102.74分钟4;63052实施例12;p102.73分钟4;59353实施例12;p102.79分钟4;61654实施例12;p102.67分钟4;63155实施例12;p102.44分钟4;63056实施例12;p102.77分钟4;60657实施例12;p102.72分钟4;61758实施例12;p102.78分钟4;60359实施例12;p102.82分钟4;62160实施例12;p102.74分钟4;63161实施例12;p102.76分钟4;59262实施例12;p102.45分钟4;63063实施例12;p102.78分钟4;61764实施例12;p102.84分钟4;60665实施例12;p102.56分钟4;61366实施例12;p102.75分钟4;60767实施例12;p102.48分钟4;61968实施例12;p102.75分钟4;64669实施例12;p102.73分钟4;60370实施例12;p102.86分钟5;66171实施例12;p102.77分钟4;65772实施例12;p102.79分钟4;60673实施例12;p102.70分钟4;60274实施例12;p102.45分钟4;61675实施例13;p102.92分钟4;56676实施例13;p102.99分钟4;63177实施例13;p102.94分钟4;61678实施例13;p103.08分钟5;61779实施例13;p103.09分钟4;60680实施例13;p103.02分钟4;60381实施例13;p103.10分钟5;60482实施例11;p142.87分钟4;52883实施例11;p143.00分钟4;59284实施例11;p142.99分钟4;54285实施例11;p142.98分钟4;54286实施例11;p142.97分钟4;56287实施例11;p142.97分钟5;55388实施例11;p142.90分钟4;54289实施例4和56,7;p118.63(ddd,j=4.9,1.8,0.9hz,1h),8.34(dd,j=1.6,0.7hz,1h),8.03(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.90(ddd,j=7.8,7.8,1.7hz,1h),7.80(dd,j=8.5,0.7hz,1h),7.74(ddd,j=7.9,1.1,1.0hz,1h),7.45(ddd,j=7.6,4.9,1.2hz,1h),6.88–6.83(m,1h),6.83–6.76(m,2h),4.83(s,2h),4.63(t,j=4.8hz,2h),3.99–3.88(m,2h),3.75(dd,j=5.3,4.2hz,2h),3.45–3.34(m,2h),3.31(s,3h),3.15–3.03(m,1h),2.41–2.20(m,2h),2.19–2.08(m,2h),2.05(s,3h);529.390实施例4和56,7;p118.63(ddd,j=4.9,1.8,0.9hz,1h),8.34(dd,j=1.6,0.7hz,1h),8.04(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.90(ddd,j=7.8,7.8,1.7hz,1h),7.80(dd,j=8.5,0.7hz,1h),7.73(ddd,j=8.0,1.1,1.0hz,1h),7.45(ddd,j=7.6,4.9,1.2hz,1h),6.88–6.83(m,1h),6.83–6.75(m,2h),4.83(s,2h),4.63(t,j=4.9hz,2h),3.98–3.88(m,2h),3.75(t,j=4.8hz,2h),3.44–3.34(m,2h),3.32(s,3h^^),3.15–3.03(m,1h),2.40–2.19(m,2h),2.18–2.08(m,2h),2.05(s,3h);529.391实施例6和7;p8,p118.59(d,j=2.4hz,1h),8.26(d,j=1.4hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.87(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.68–7.61(m,2h),6.83–6.75(m,1h),6.75–6.67(m,2h),4.67(t,j=5.2hz,2h),4.00(s,2h),3.82(t,j=5.1hz,2h),3.29(s,3h),3.13–3.05(m,2h),2.81–2.70(m,1h),2.45–2.34(m,2h),2.01(s,3h),1.98–1.77(m,4h);563.3♦92实施例6和7;p9,p118.59(d,j=2.3hz,1h),8.26(d,j=1.4hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.87(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.68–7.62(m,2h),6.82–6.76(m,1h),6.74–6.68(m,2h),4.67(t,j=5.2hz,2h),4.00(s,2h),3.82(t,j=5.1hz,2h),3.29(s,3h),3.13–3.04(m,2h),2.76(tt,j=11.8,4hz,1h),2.45–2.34(m,2h),2.01(s,3h),1.97–1.78(m,4h);563.3♦93实施例8和98;p8,p118.97(dd,j=2.1,0.9hz,1h),8.27–8.25(m,1h),8.21(dd,j=8.2,2.1hz,1h),7.96(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.81(dd,j=8.3,0.9hz,1h),7.64(d,j=8.6hz,1h),6.83–6.77(m,1h),6.76–6.68(m,2h),4.68(t,j=5.2hz,2h),3.95(s,2h),3.83(t,j=5.2hz,2h),3.30(s,3h),3.08–2.99(m,2h),2.79–2.69(m,1h),2.39–2.28(m,2h),2.04(s,3h),1.96–1.76(m,4h);554.494实施例8和98;p9,p118.97(dd,j=2.2,0.9hz,1h),8.26(brs,1h),8.21(dd,j=8.2,2.1hz,1h),7.96(dd,j=8.4,1.4hz,1h),7.81(dd,j=8.2,0.9hz,1h),7.64(brd,j=8.5hz,1h),6.83–6.77(m,1h),6.76–6.69(m,2h),4.68(t,j=5.3hz,2h),3.95(s,2h),3.83(t,j=5.2hz,2h),3.30(s,3h),3.08–2.99(m,2h),2.79–2.69(m,1h),2.39–2.28(m,2h),2.04(s,3h),1.96–1.76(m,4h);554.495实施例10;p8,p158.61(dd,j=2.5,0.7hz,1h),8.41(s,1h),8.33(dd,j=1.6,0.7hz,1h),7.97(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.88(dd,j=8.5,2.5hz,1h),7.66(dd,j=8.5,0.6hz,1h),7.65(dd,j=8.5,0.7hz,1h),6.82–6.77(m,1h),6.76–6.69(m,2h),5.32–5.24(m,1h),4.9–4.83(m,1h^),4.71(dd,j=15.4,2.6hz,1h),4.65–4.58(m,1h),4.48(ddd,j=9.2,6.0,5.9hz,1h),4.03(ab四重峰,jab=13.9hz,δνab=49.7hz,2h),3.18–3.11(m,1h),3.06–2.98(m,1h),2.87–2.69(m,2h),2.60–2.49(m,1h),2.46–2.31(m,2h),2.02(s,3h),1.98–1.79(m,4h);574.9♦96实施例6和79,10;p157.01分钟11;610.5♦97实施例6和79,10;p157.89分钟11;610.5♦98c54128.25–8.23(m,1h),8.00(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.89(d,j=0.9hz,1h),7.76(dd,j=7.9,7.6hz,1h),7.70(d,j=8.5hz,1h),7.64(dd,j=10.6,1.5hz,1h),7.57(dd,j=8.0,1.5hz,1h),7.14(d,j=0.9hz,1h),6.78(dd,abc模式的组分,j=7.9,7.8hz,1h),6.70(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.2hz,1h),6.66(brd,abc模式的组分,j=7.9hz,1h),5.94(ab四重峰,jab=17.2hz,δνab=6.5hz,2h),3.96(s,2h),3.02–2.92(m,2h),2.74–2.63(m,1h),2.31–2.21(m,2h),2.05(brs,3h),1.80–1.58(m,4h);594.399c54128.23(d,j=1.4hz,1h),8.00(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.89(d,j=0.9hz,1h),7.76(dd,j=7.9,7.6hz,1h),7.69(d,j=8.5hz,1h),7.64(dd,j=10.6,1.5hz,1h),7.57(dd,j=8.1,1.5hz,1h),7.14(d,j=0.9hz,1h),6.78(dd,abc模式的组分,j=7.8,7.8hz,1h),6.70(dd,abc模式的组分,j=7.8,1.2hz,1h),6.66(brd,abc模式的组分,j=7.9hz,1h),5.94(ab四重峰,jab=17.1hz,δνab=6.6hz,2h),3.96(s,2h),3.01–2.92(m,2h),2.74–2.63(m,1h),2.30–2.20(m,2h),2.05(brs,3h),1.80–1.58(m,4h);594.3100实施例7,游离酸13;p3,c29特征峰:7.80(dd,j=8.5,6.6hz,1h),7.59(dd,j=8.3,8.3hz,1h),7.51(d,j=8.6hz,1h),7.28(dd,j=10.9,2.0hz,1h),7.21(brdd,j=8.4,2.0hz,1h),6.83–6.77(m,1h),6.76–6.71(m,2h),5.32–5.23(m,1h),4.99(dd,j=15.5,7.1hz,1h),4.79(dd,j=15.6,2.8hz,1h),4.72–4.63(m,1h),4.47(ddd,j=9.1,6.0,6.0hz,1h),4.31(ab四重峰,jab=14.4hz,δνab=33.3hz,2h),3.40(brd,j=11.9hz,1h),2.92–2.65(m,4h),2.82(ab四重峰,jab=15.5hz,δνab=37.5hz,2h),2.61–2.49(m,1h),2.13–1.87(m,4h),2.04(s,3h);610.0♦101实施例5,游离酸13;c48,c29特征峰:7.79(dd,j=8.5,6.6hz,1h),7.57(dd,j=8.0,8.0hz,1h),7.49(d,j=8.5hz,1h),7.35(dd,j=10.2,1.9hz,1h),7.30(brd,j=8.4hz,1h),7.22(s,1h),6.88–6.82(m,1h),6.82–6.74(m,2h),5.30–5.21(m,1h),4.95(dd,j=15.4,7.1hz,1h),4.77(brd,j=15.1hz,1h),4.67–4.59(m,1h),4.44(ddd,j=9.1,5.9,5.9hz,1h),4.28(ab四重峰,jab=14.4hz,δνab=31.7hz,2h),3.37(brd,j=12.3hz,1h^^),2.92–2.61(m,4h),2.82(ab四重峰,jab=15.6hz,δνab=37.1hz,2h),2.58–2.47(m,1h),2.12–1.89(m,4h);596.1♦102实施例4和514;p118.34(dd,j=1.6,0.7hz,1h),8.04(dd,j=8.5,1.5hz,1h),7.80(dd,j=8.5,0.7hz,1h),7.66–7.60(m,2h),7.46–7.36(m,3h),6.84–6.76(m,2h),6.74(dd,j=7.2,2.0hz,1h),4.84(s,2h),4.63(t,j=4.7hz,2h),4.01–3.91(m,4h),3.76(dd,j=5.3,4.2hz,2h),3.47–3.37(m,2h),3.32(s,3h),3.19–3.08(m,1h),2.41–2.26(m,2h),2.26–2.13(m,2h);544.2^面积是假定的；峰被水峰部分遮蔽^^面积是假定的；峰被溶剂峰部分遮蔽♦观察到氯同位素模式。1.外消旋甲酯[2-({4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯]经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod-h，5μm；流动相：7：3二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的2-丙醇)]分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体ent-1(c76)用于实施例21的合成，并且将第二个洗脱出的对映异构体ent-2(c77)转化为实施例20。c76保留时间：5.72分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakod-3，4.6x150mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的2-丙醇；梯度：5%至40%b，历经5.5分钟，然后维持在40%b下3.0分钟；流速：2.5ml/分钟)。c77保留时间：6.01分钟(分析型sfc条件与用于c76的那些相同)。2.衍生自c4与p17的偶联的甲酯(2-{6-[2-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基}-1-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯)经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：65：35二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]分离为其在二氧杂环戊烷的组成立体异构体。将第一个洗脱出的异构体diast-1(c78)转化为实施例26；根据1hnmr数据的检查，此物质是实施例15的对映异构体。第二个洗脱出的异构体diast-2(c79)用于实施例25的合成；根据1hnmr数据的检查，此物质是实施例16的对映异构体。c78保留时间：3.60分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x100mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%至40%b，历经4.5分钟，然后维持在40%b下2.5分钟；流速：2.8ml/分钟)。c79保留时间：3.82分钟(分析型sfc条件与用于c78的那些相同)。3.4-(4-溴-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基)-3-氟苄腈经由用对甲苯磺酸(于甲苯中)处理3-氟-4-甲酰基苄腈和3-溴苯-1,2-二醇制备，其中使用dean-stark仪器去除水。然后，在[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯化钯(ii)和碘化亚铜(i)存在下，使此物质与[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基](碘)锌反应，然后使用对甲苯磺酸进行酯裂解，以得到所需的3-氟-4-[4-(哌啶-4-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基]苄腈。4.分析型hplc的条件。柱：watersxbridgec18，2.1x50mm，5μm；流动相a：0.0375%三氟乙酸(于水中)；流动相b：0.01875%三氟乙酸(于乙腈中)；梯度：10%至100%b，历经4.0分钟；流速：0.8ml/分钟。5.分析型hplc的条件。柱：watersxbridgec18，2.1x50mm，5μm；流动相a：0.0375%三氟乙酸(于水中)；流动相b：0.01875%三氟乙酸(于乙腈中)；梯度：1%至5%b，历经0.6分钟；5%至100%b，历经3.4分钟；流速：0.8ml/分钟。6.使用制备p7中针对c12的合成所述的程序由3-溴苯-1,2-二醇和2-乙炔基吡啶合成4-[2-甲基-2-(吡啶-2-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯。随后在载于炭的钯上进行氢化，然后用氯化氢(于乙酸乙酯中)进行处理，以得到所需的2-[2-甲基-4-(哌啶-4-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基]吡啶，盐酸盐。7.外消旋甲酯[1-(2-甲氧基乙基)-2-({4-[2-甲基-2-(吡啶-2-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯]经由sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakad，10μm；流动相：65：35二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体ent-1(c80)用于实施例90的合成，并且将第二个洗脱出的对映异构体ent-2(c81)转化为实施例89。c80保留时间：4.11分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakad-3，4.6x100mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的乙醇；梯度：5%至40%b，历经4.5分钟，然后维持在40%b下2.5分钟；流速：2.8ml/分钟)。c81保留时间：4.62分钟(分析型sfc条件与c80所用的那些相同)。8.将p8和p9转化为对应的氰基取代衍生物使用制备p4中针对由p2合成p4所述的方法进行。9.用原甲酸三甲酯和对甲苯磺酸处理1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮，提供了4-氯-1-(1,1-二甲氧基乙基)-2-氟苯，其在对甲苯磺酸存在下与3-溴-6-氟苯-1,2-二醇反应，以得到4-溴-2-(4-氯-2-氟苯基)-7-氟-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯。使用制备p1中针对由c2合成p1所述的方法，将此物质转化为所需的4-[2-(4-氯-2-氟苯基)-7-氟-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯。10.96和97的在二氧杂环戊烷的立体异构体的分离是使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralpakig，5μm；流动相：3：1二氧化碳/(含0.2%氢氧化铵的2-丙醇)]来进行的。第一个洗脱出的异构体指定为diast-1(96)且第二个洗脱出的异构体指定为diast-2(97)。11.分析型sfc的条件。柱：chiraltechnologieschiralpakig，4.6x100mm，5μm；流动相：7：3二氧化碳/(含0.2%氢氧化铵的2-丙醇)；流速：1.5ml/分钟；反压：150巴。12.使用针对p11的合成所述的方法由3-氟-4-硝基苯甲酸叔丁酯和1-(1,3-噁唑-2-基)甲胺合成2-(氯甲基)-1-(1,3-噁唑-2-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸叔丁酯。随后使用三乙胺进行与c54的反应，以得到2-({4-[2-(4-氰基-2-氟苯基)-2-甲基-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基]哌啶-1-基}甲基)-1-(1,3-噁唑-2-基甲基)-1h-苯并咪唑-6-甲酸叔丁酯，使用sfc[柱：chiraltechnologieschiralcelod-h，5μm；流动相：55:45二氧化碳/(含有0.1%氢氧化铵的乙醇)]，将其分离为其组成对映异构体。第一个洗脱出的对映异构体ent-1(c82)用于99的合成，并且将第二个洗脱出的对映异构体ent-2(c83)转化为98。c82保留时间：1.47分钟(柱：chiraltechnologieschiralpakod-3，4.6x50mm，3μm；流动相a：二氧化碳；流动相b：含有0.05%二乙胺的甲醇；梯度：5%b，0.2分钟，然后5%至40%b，历经1.4分钟，然后维持在40%b下1.05分钟；流速：4ml/分钟)。c83保留时间：1.85分钟(分析型sfc条件与用于c82的那些相同)。13.1-溴-2,3-二氟-4-硝基苯与氰化亚铜(i)在1-甲基吡咯啶-2-酮中、高温下的反应提供了2,3-二氟-4-硝基苄腈，使其经历亚硫酰氯和甲醇，以得到2,3-二氟-4-硝基苯甲酸甲酯。通过使用c29，经由制备p11中针对由3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯合成p11所述的方法，将此物质转化为所需的2-(氯甲基)-7-氟-1-[(2s)-氧杂环丁-2-基甲基]-1h-苯并咪唑-6-甲酸甲酯。14.由乙酸2-氧代-2-苯基乙酯通过与针对c13的合成所述的方法类似地合成所需的[2-苯基-4-(哌啶-4-基)-1,3-苯并间二氧杂环戊烯-2-基]甲醇。choglp-1r克隆h6-测定1利用测量细胞中的camp水平的htrf(均相时间分辨荧光)camp检测试剂盒(camphirangeassaykit;cisbiocat#62am6pej)，以基于细胞的功能测定，来确定glp-1r-介导的激动剂活性。所述方法是细胞所产生的天然camp与染料d2标记的外源camp之间的竞争性免疫测定。示踪剂结合通过穴状化合物标记的mab抗-camp可视化。在标准或实验样品中，特定的信号(即，能量转移)与camp浓度成反比。将编码人类glp-1r的序列(ncbireferencesequencenp_002053.3，包括天然存在的变体gly168ser)亚克隆至pcdna3(invitrogen)并且分离出稳定地表达受体的细胞系(指定为克隆h6)。使用125i-glp-17-36(perkinelmer)的饱和结合分析(过滤测定程序)显示，由此细胞系衍生的血浆膜表达高glp-1r密度(kd:0.4nm,bmax:1900fmol/mg蛋白质)。自冷冻保存移出细胞，再悬浮于40ml的dulbeco’s磷酸盐缓冲盐水(dpbs-lonzacat#17-512q)并且于22℃下，于800xg离心5分钟。然后，将细胞团块再悬浮于10ml生长培养基[dmem/f121：1混合物，含有hepes，l-gln，500ml(dmem/f12lonzacat#12-719f)，10%热灭活胎牛血清(gibcocat#16140-071)、5ml的100xpen-strep(gibcocat#15140-122)、5ml的100xl-谷氨酰胺(gibcocat#25030-081)以及500μg/ml遗传霉素(geneticin)(g418)(invitrogen#10131035)]。于bectondickinsonvicell上，对1ml的生长培养基中的细胞悬浮液样品进行计数，以确定细胞活力以及每ml的细胞计数。然后，用生长培养基调节剩余的细胞悬浮液，以使用matrixcombimultidrop试剂分配器每个孔递送2000个活细胞，并且将细胞分配于白色的384孔组织培养物处理的测定板(corning3570)。然后，在37℃下，于5%二氧化碳的潮湿环境中，将测定板孵育48小时。将各种浓度的各个待测化合物(于dmso)稀释于含有100μm3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(ibmx;sigmacat#i5879)的测定缓冲液(含钙/镁的hbss(lonza/biowhittakercat#10-527f)/0.1%bsa(sigmaaldrichcat#a7409-1l)/20mmhepes(lonza/biowhittakercat#17-737e))。最终的dmso浓度为1%。48小时后，自测定板孔移出生长培养基，并且在37℃下，于5%二氧化碳的潮湿环境中，用20μl的测定缓冲液中连续稀释的化合物处理细胞30分钟。在30分钟的孵育之后，将10μl标记的d2camp和10μl抗-camp抗体(皆以1：20稀释于细胞裂解缓冲液中；如制造商的测定方案所述)添加于测定板的各个孔。然后，于室温下孵育板并且在60分钟后，用envision2104多标记读板仪，使用在330nm的激发以及615和665nm的发射，读取htrf信号的变化。通过内插法由camp标准曲线将原始数据转化为nmcamp(如制造商的测定方案所述)，并且相对于包括于各板的饱和浓度的完全激动剂glp-17-36(1μm)确定效应百分比。使用4-参数逻辑斯谛剂量响应方程，由以曲线拟合程序分析的激动剂剂量-响应曲线，进行ec50确定。choglp-1r克隆c6-测定2利用测量细胞中的camp水平的htrf(均相时间分辨荧光)camp检测试剂盒(camphirangeassaykit;cisbiocat#62am6pej)，以基于细胞的功能测定，来确定glp-1r-介导的激动剂活性。所述方法是细胞所产生的天然camp与染料d2标记的外源camp之间的竞争性免疫测定。示踪剂结合通过穴状化合物标记的mab抗-camp可视化。在标准或实验样品中，特定的信号(即，能量转移)与camp浓度成反比。将编码人类glp-1r的序列(ncbireferencesequencenp_002053.3，包括天然存在的变体leu260phe)亚克隆至pcdna5-frt-to并且使用flp-in™t-rex™系统分离出稳定地表达低受体密度的克隆cho细胞系，如制造商所述(thermofisher)。使用125i-glp-1(perkinelmer)的饱和结合分析(过滤测定程序)显示，由此细胞系(指定为克隆c6)衍生的血浆膜表达低glp-1r密度(kd:0.3nm,bmax:240fmol/mg蛋白质)，相对于克隆h6细胞系。自冷冻保存移出细胞，再悬浮于40ml的dulbeco’s磷酸盐缓冲盐水(dpbs-lonzacat#17-512q)并且于22℃下，于800xg离心5分钟。抽出dpbs，并将细胞团块再悬浮于10ml完全生长培养基(dmem:f121：1混合物，含有hepes，l-gln，500ml(dmem/f12lonzacat#12-719f)，10%热灭活胎牛血清(gibcocat#16140-071)、5ml的100xpen-strep(gibcocat#15140-122)、5ml的100xl-谷氨酰胺(gibcocat#25030-081)、700μg/ml潮霉素(invitrogencat#10687010)和15μg/ml杀稻瘟菌素(gibcocat#r21001))。于bectondickinsonvicell上，对1ml的生长培养基中的细胞悬浮液样品进行计数，以确定细胞活力以及每ml的细胞计数。然后，用生长培养基调节剩余的细胞悬浮液，以使用matrixcombimultidrop试剂分配器每个孔递送1600个活细胞，并且将细胞分配于白色的384孔组织培养物处理的测定板(corning3570)。然后，在37℃下，于潮湿环境(95%o2,5%co2)中，将测定板孵育48小时。将各种浓度的待测化合物(于dmso)稀释于含有100μm3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(ibmx;sigmacat#i5879)的测定缓冲液[含钙/镁的hbss(lonza/biowhittakercat#10-527f)/0.1%bsa(sigmaaldrichcat#a7409-1l)/20mmhepes(lonza/biowhittakercat#17-737e)]。化合物/测定缓冲液混合物中的最终dmso浓度为1%。48小时后，自测定板孔移出生长培养基，并且在37℃下，于潮湿环境(95%o2,5%co2)中，用20μl的测定缓冲液中连续稀释的化合物处理细胞30分钟。在30分钟的孵育之后，将10μl标记的d2camp和10μl抗-camp抗体(皆以1：20稀释于细胞裂解缓冲液中；如制造商的测定方案所述)添加于测定板的各个孔。然后，于室温下孵育板并且在60分钟后，用envision2104多标记读板仪，使用在330nm的激发以及615和665nm的发射，读取htrf信号的变化。通过内插法由camp标准曲线将原始数据转化为nmcamp(如制造商的测定方案所述)，并且相对于包括于各板的饱和浓度的完全激动剂glp-1(1μm)确定效应百分比。使用4-参数逻辑斯谛剂量响应方程，由以曲线拟合程序分析的激动剂剂量-响应曲线，进行ec50确定。在表3中，测定数据以两位(2)有效数字呈现为基于所列出的重复次数(次数)的几何平均值(ec50s)以及算术平均值(emax)。空格意指无所述实施例的数据或者未计算emax。表3：实施例1-102的生物活性*以铵和三氟乙酸盐的形式测试**以铵和1,3-二羟基-2-(羟基甲基)丙-2-胺鎓(tris)盐，以及游离酸形式测试***以铵盐和游离酸形式测试****以甲酸盐和游离酸形式测试。本文所引用的所有专利、专利申请和参考文献特此以其整体通过引用并入。当前第1页12