一种防治和修复疤痕增生的植物精华液及其制备方法与流程

本发明涉及生物医药领域，具体是一种防治和修复疤痕增生的植物精华液及其制备方法。

背景技术：

疤痕是创伤愈合后最常见的并发症之一，一直是外科修复领域研究的难点与热点。疤痕过度增生不但会影响患者的容貌外观，而且产生的痉挛可导致不同程度的功能障碍，为此类患者后期治疗带来沉重的经济和心里负担。

疤痕的形成实际上只是皮肤创伤中的一个阶段，因此了解皮肤愈合的过程对于疤痕修复是至关重要的一环。从病理学的角度，皮肤创伤的治愈一般分为四个阶段：止血，炎症反应，细胞增殖/基质沉淀和皮肤组织重塑，这些阶段是由一连串的免疫细胞和信号分子所介导的。在皮肤创伤愈合的过程中，成纤维细胞，角质细胞和上皮细胞被聚集到损伤部位，而疤痕的形成即开始于创伤愈合的第三阶段。在这一阶段中，成纤维细胞分化为成肌纤维细胞，后者分泌并合成新的ecm(细胞外基质)。新的ecm再经过改造而形成疤痕组织。同时白细胞分泌的细胞因子不仅在成纤维细胞的初始聚集中起直接作用，而且一般的炎症反应在介导疤痕形成的发展中也起着关键作用。目前在疤痕治疗方面，常用的治疗技术有植皮术、激光治疗、皮肤扩张器治疗、切除缝合术等外科手术、磨削术、使用地塞米松等简体激素类药物治疗、冷冻治疗等。这些技术不同程度的缓解了患者的症状，但上述方法中非药物治疗均存在费用较高、患者比较痛苦、手术治疗时间长等不足，愈后易复发。而使用地塞米松等甾体激素类药物治疗可能会对身体造成伤害甚至造成不乎不育、骨质疏松等。

从现有的各种疤痕防治和修复的产品来看，都有一定的局限性。本发明提供一种防治和修复疤痕增生的植物精华液及其制备方法。本发明产品结合中国传统中草药医学和西方药理学，精选自具有去瘀生新、抗炎杀菌、免疫激活、美白淡斑的传统中药三七、人参、甘草、槐米，通过提取纯化技术富集达玛烷型四环五帖皂苷类(人参皂苷rb1、rg1、rd、三七皂苷r1等)、甘草皂苷和黄酮、芸香苷和植物多糖等多种植物活性成分，可以有效激活创伤部位免疫细胞群、抑制巨噬细胞极化、抑制炎症因子和趋势因子表达、抑制成纤维细胞增殖分化，减少ecm(细胞外基质)沉积，同时也可以促进病变周边毛细血管再生，改善微循环，由内而外的防治和修复疤痕增生，且具有很高的安全性。

技术实现要素：

本发明的目的在于提出一种防治和修复疤痕增生的植物精华液及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液，其中，所述植物精华液包括以下重量百分比的原料：三七提取物粉0.5～10％、人参提取物粉0.5～10％、甘草提取物粉0.5～10％、槐米提取物粉0.5～10％、余量为溶剂，各原料与溶剂的重量百分比之总和为100％。

在一些实施方式中，所述植物精华液包括以下重量百分比的原料：三七提取物粉2～10％、人参提取物粉2～10％、甘草提取物粉2～10％、槐米提取物粉2～10％、余量为溶剂，各原料与溶剂的重量百分比之总和为100％。

在一些实施方式中，所述溶剂为重量分数为60％～90％的甘油和去离子水的混合液。

在一些实施方式中，所述溶剂为重量分数为60％～90％的1，3丙二醇和去离子水的混合液。

在一些实施方式中，所述溶剂为重量分数为60％～90％的1，3丁二醇和去离子水的混合液。

在一些实施方式中，所述三七提取物粉经过如下方法制备：

1)将三七根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；

2)将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液和一次提取料渣；

3)向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液和二次提取料渣；

4)将一次滤液和二次滤液合并，浓缩至固含量在10～20％，经喷雾干燥，得到三七提取物粉。

在一些实施方式中，所述人参提取物粉经过如下方法制备：

1)将人参根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；

2)将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液和一次提取料渣；

3)向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液和二次提取料渣；

4)将一次滤液和二次滤液合并，浓缩至固含量在10～20％，经喷雾干燥，得到人参提取物粉。

在一些实施方式中，所述甘草提取物粉经过如下方法制备：

1)将甘草根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；

2)将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液和一次提取料渣；

3)再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液和二次提取料渣；

4)将一次滤液和二次滤液合并，浓缩至固含量在10～20％，经喷雾干燥，得到甘草提取物粉。

在一些实施方式中，所述槐米提取物粉经过如下方法制备：

1)将槐米用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；

2)将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液和一次提取料渣；

3)再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液和二次提取料渣；

4)将一次滤液和二次滤液合并，浓缩至固含量在10～20％，进行喷雾干燥，得到槐米提取物粉。

本发明还提供了一种所述植物精华液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将三七根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；然后将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液；再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液；将两次滤液合并浓缩至固含量在10～20％，进行喷雾干燥，得到三七提取物粉备用；

2)将人参根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；然后将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液；再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液；将两次滤液合并浓缩至固含量在10～20％，进行喷雾干燥，得到人参提取物粉备用；

3)将甘草根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；然后将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液；再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液；将两次滤液合并浓缩至固含量在10～20％，进行喷雾干燥，得到甘草提取物粉备用；

4)将槐米用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用；然后将原料粉加入其重量5～8倍的去离子中，在60～90℃下搅拌提取4～6小时，过滤，得到一次滤液；再向一次提取料渣中加入3～6倍重量的去离子水，在60～90℃下搅拌提取2～4小时，过滤，得到二次滤液；将两次滤液合并浓缩至固含量在10～20％，进行喷雾干燥，得到槐米提取物粉备用。

在一些实施方式中，本发明所述植物精华液由如下方法制备：将三七提取物粉0.5～10％、人参提取物粉0.5～10％、甘草提取物粉0.5～10％、槐米提取物粉0.5～10％进行混合。然后向混合提取物粉中加入余量溶剂，加热至45-80℃回流，搅拌至完全溶解，再加入5～20％活性炭脱色，过滤，过滤液冷却至室温，静置1～3天，再过滤，即得成品。

与现有技术相比，本发明特点和优势是：

本发明为植物配方产品，且组合配方也未见其它相关科研报道，具有独特性和首创性。本发明产品结合中国传统中草药医学和西方药理学，精选至具有去瘀生新、抗炎杀菌、免疫激活、美白淡斑的传统中药三七、人参、甘草、槐米，通过提取纯化技术富集有效活性成分达玛烷型四环五帖皂苷类(人参皂苷rb1、rg1、rd、三七皂苷r1等)、甘草皂苷和黄酮、芸香苷和植物多糖等多，可以有效激活创伤部位免疫细胞群、抑制巨噬细胞极化、抑制炎症因子和趋势因子表达、抑制成纤维细胞增殖分化，减少ecm(细胞外基质)沉积，同时也可以促进病变周边毛细血管再生，改善微循环，由内而外的防治和修复疤痕增生，且具有非常高的安全性。

附图说明

图1：本发明所述植物精华液防治和修复疤痕增生的作用机理图。

图2：反映实施例2对lps诱导raw264.7细胞所产生炎性因子tnf-α、il-6、il-8的抑制效果的柱状图。

图3：反映实施例2对兔耳模型中疤痕面积生成的抑制作用的柱状图。

图4：反映实施例2对兔耳模型疤痕组织中胶原蛋白i浓度的抑制作用的柱状图。

图5：反映实施例2对兔耳模型疤痕组织中胶原蛋白iii浓度的抑制作用的柱状图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本专利的技术方案做进一步详细地说明。

实施例1

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液，所述植物精华液包括以下重量百分比的原料：三七提取物粉2％、人参提取物粉2％、甘草提取物粉2％、槐米提取物粉2％、甘油15％、去离子水77％，各原料的重量百分比之总和为100％。

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将三七根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到三七提取物粉备用。

(2)将人参根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到人参提取物粉备用。

(3)将甘草根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到甘草提取物粉备用。

(4)将槐米用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到槐米提取物粉备用。

(5)按原料总质量百分比，将三七提取物粉2％、人参提取物粉2％、甘草提取物粉2％、槐米提取物粉2％进行混合。

(6)然后向混合提取物粉中加入15％的甘油和77％的去离子水，加热至60℃回流，搅拌至完全溶解，再加入10％活性炭脱色，过滤，过滤液冷却至室温，静置2天，再过滤，即得成品。

实施例2

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液，所述植物精华液包括以下重量百分比的原料：三七提取物粉5％、人参提取物粉5％、甘草提取物粉5％、槐米提取物粉5％、1，2丙二醇10％、去离子水70％，各原料的重量百分比之总和为100％。

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将三七根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到三七提取物粉备用。

(2)将人参根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到人参提取物粉备用。

(3)将甘草根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到甘草提取物粉备用。

(4)将槐米用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到槐米提取物粉备用。

(5)按原料总质量百分比，将三七提取物粉5％、人参提取物粉5％、甘草提取物粉5％、槐米提取物粉5％进行混合。

(6)然后向混合提取物粉中加入10％的1，2丙二醇和70％的去离子水，加热至50℃回流，搅拌至完全溶解，再加入15％活性炭脱色，过滤，过滤液冷却至室温，静置3天，再过滤，即得成品。

实施例3

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液，所述植物精华液包括以下重量百分比的原料：三七提取物粉10％、人参提取物粉10％、甘草提取物粉10％、槐米提取物粉10％、1，3丁二醇18％、去离子水42％，各原料的重量百分比之总和为100％。

一种防治和修复疤痕增生的植物精华液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将三七根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到三七提取物粉备用。

(2)将人参根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到人参提取物粉备用。

(3)将甘草根用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到甘草提取物粉备用。

(4)将槐米用粉碎机打成粉末，过20目筛，得到原料粉备用。然后将原料粉加入其重量6倍的去离子中，在90℃下搅拌提取4小时，过滤，得到一次滤液。再向一次提取料渣中加入4倍重量的去离子水，在90℃下搅拌提取2小时，过滤，得到二次滤液。将两次滤液合并浓缩至固含量在15％，进行喷雾干燥，得到槐米提取物粉备用。

(5)按原料总质量百分比，将三七提取物粉10％、人参提取物粉10％、甘草提取物粉10％、槐米提取物粉10％进行混合。

(6)然后向混合提取物粉中加入15％的1，3丁二醇和45％的去离子水，加热至60℃回流，搅拌至完全溶解，再加入20％活性炭脱色，过滤，过滤液冷却至室温，静置3天，再过滤，即得成品。

本发明产品富含达玛烷型四环五帖皂苷类(人参皂苷rb1、rg1、rd、三七皂苷r1等)、甘草皂苷和黄酮、芸香苷和植物多糖等多，可以有效激活创伤部位免疫细胞群、抑制巨噬细胞极化、抑制炎症因子和趋势因子表达、抑制成纤维细胞增殖分化，减少ecm(细胞外基质)沉积，同时也可以促进病变周边毛细血管再生，改善微循环，由内而外的防治和修复疤痕增生。其可能的作用机理如图1所示。为验证本发明的植物精华液防治和修复疤痕增生的效果，进行以下试验：

一、抗炎活性测试

大量的科研报道证明急慢性炎症的发生和伤口愈合、疤痕形成有着直接和间接的关联，炎性因子可以介导成纤维细胞的增殖和分化，并促进ecm的分泌和沉积，是导致疤痕增生的关键靶点。因此抑制和降低炎症的反应，是防治和修复疤痕增生的重要环节。其中tnf-α、il-6、il-8都是关键的炎性表达因子。

本试验使用lps(lipopolysaccharide，脂多糖，使用浓度1μg/ml)诱导raw264.7(小鼠单核巨噬细胞)发生炎症反应，并使用本发明实施例2产品(使用浓度为500ug/ml)进行处理，最后使用elisa(enzymelinkedimmunosorbentassay，酶联免疫吸附测定)对炎性因子tnf-α、il-6、il-8的表达进行评估。试验结果见图2。

从本试验结果可以看出，当使用lps诱导raw264.7时，tnf-α、il-6、il-8的表达较空白对照组(control)显著增高，说明lps诱导了炎症的发生，当使用浓度为500μg/ml的本发明实施例2进行处理后，tnf-α、il-6、il-8的表达大幅下降，说明本发明产品对lps诱导的炎性因子表达有显著的抑制效果。

二、抑制疤痕增生的动物体测试(兔耳模型)

1.对疤痕面积的影响

试验使用10只健康新西兰兔(体重2.0-2.2公斤)，被平均分成两组：空白组(5只)和治疗组(5只)，在每只兔子的两只兔耳腹测进行圆形穿刺伤口(d＝1cm)，创建疤痕模型。从创伤的第14天开始，治疗组每天使用含有实施例2的2％重量比的无菌水溶液对伤口进行处理10天，空白组使用等量的1％生理盐水处理10天。在第30天时测定疤痕面积差异。以平均标准差表示，结果见图3。

从本试验结果可以看出，在经过实施例2处理后的治疗组的平均疤痕面积较空白组减少了38％，说明本发明产品有抑制疤痕生成的作用，可以显著的降低疤痕的增生。

2.对胶原蛋白的合成影响

在伤口愈合过程中，胶原蛋白的生成可以说是一把双刃剑，一方面它对愈合过程是必要的；另一方面，胶原蛋白的过度生产和过度沉积会导致疤痕的过度增生。而胶原蛋白和ecm的产生主要是由成肌纤维细胞的过度增殖和分泌所介导的。大量对疤痕相关的科研报道中也证明：通过抑制成纤维细胞的增殖和分化，可以抑制胶原蛋白和ecm的过度产生，从而有效抑制疤痕组织的增生。本试验通过对兔耳模型的健康组、对照组、经过实施例2处理后的治疗组中的疤痕组织进行取样，测定其胶原蛋白i和胶原蛋白iii的含量来评价本发明产品对胶原蛋白的影响，从而进一步验证本发明产品对疤痕增生的抑制作用。

在上述两组兔耳模型中，分别在治疗处理后的第7天和第30天对每一组中的一只兔耳的增生性疤痕组织进行取样，同时对任意一个健康部位组织进行取样，即在每一个时间点分为健康组、空白组、治疗组。样本通过处理后，使用elisa(enzymelinkedimmunosorbentassay，酶联免疫吸附测定)对处理后样品进行胶原蛋白i和胶原蛋白iii的含量测定，试验结果见图4和图5。

从试验结果可以看出，经过本发明产品处理过的治疗组中疤痕组织的胶原蛋白i和胶原蛋白iii的含量较空白组有较大幅度下降，且更接近于健康组的浓度。这说明本试验产品可以有效的抑制胶原蛋白的生成，从而抑制疤痕的过度增生。

以上所述仅是本发明的优选实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。