超声造影剂组合物、超声造影剂及其制备方法、声致形变材料的应用与流程

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种超声造影剂组合物、含有该超声造影剂组合物的超声造影剂、一种超声造影剂的制备方法以及该制备方法制备得到的超声造影剂，以及声致形变材料在超声造影剂中的应用。

背景技术：

尽管癌症存活率总体上有所提高，但化疗药物副作用大、易产生耐药。此外，实体肿瘤中血管稀疏且无淋巴引流，导致肿瘤内的组织液压力高，药物输送不良。这些使得癌症依旧是世界第二大致死原因。因此，迫切需要为靶向递送化疗药物制定有效安全的策略。超声诊断是一种成本低廉、无创无辐射的实时成像技术，是现阶段在临床和科研中应用最为广泛的成像方法。超声造影剂(ultrasoundcontrastagents,ucas)是一类经静脉注射后能够显著增强医学超声检测信号和检测灵敏度的诊断试剂，是一种直径约为1-10μm的微泡溶液。微泡能够在高能量超声波作用下破裂发生惯性空化，使其可以负载药物在靶区定点爆破并局部释放药物，发挥靶向递送药物的治疗作用。此外，微泡空化时在局部产生微流和剪切力，刺激内皮细胞膜的孔隙和细胞之间的通道打开，促进治疗药物递送至细胞内。这使得超声靶向微泡击破(utmd)作为一种很有前途的无创靶向给药技术受到了人们越来越多的关注。

现阶段utmd技术的引导与监控主要基于mri进行，空间分辨率为1mm，时间分辨率为1s，不仅设备昂贵、操作复杂，而且很难做到微泡爆破位置的精准引导和治疗效果的实时反馈，甚至会导致不必要的组织损伤。亟需一种能够基于同一超声成像探头同时实现实时成像功能与微泡击破功能的实时超声引导下utmd系统。

然而，为了提高靶点的药物富集浓度、提高药物利用率，往往需要使载药超声造影剂在体内循环较长的时间(>6min，甚至能够>10min)，即需要提高造影剂的稳定性。但超声造影剂稳定性的提高意味着微泡爆破所需要获得的超声能量增大，超声成像探头(mi<1.9)很难完成微泡的击破，这使得基于同一超声成像探头的实时超声引导utmd困难重重。

因此，亟需一种在维持较长体内循环时间的同时，又能够在低能量超声波下发生惯性空化的低机械指数载药超声造影剂，以期在同一超声成像探头作用下同时充当造影剂和药物递送剂的双重作用。

技术实现要素：

本发明的目的在于解决现有的超声造影剂在维持较长循环时间的同时，惯性空化所需能量阈值升高的矛盾，提供一种超声造影剂组合物、含有该超声造影剂组合物的超声造影剂、一种超声造影剂的制备方法以及该制备方法制备得到的超声造影剂，以及声致形变材料在超声造影剂中的应用。本发明的超声造影剂组合物得到的微泡超声造影剂具有较好的稳定性，从而能够在体内循环较长的时间(>6min，优选实施方式中能够>10min，甚至能够达到15min)，同时具有较低的机械指数(超声机械指数mi<1.5)，从而能够在低能量超声波下发生惯性空化；因此本发明的超声造影剂组合物得到的微泡超声造影剂能够在同一超声成像探头作用下同时充当造影剂和药物递送剂。

本发明的发明人发现，通过引入能够在特定声场强度作用下发生形变的声致形变材料，使超声造影剂表面在超声作用下产生弥漫性的应力集中现象，这种表面的局部应力分布的改变将导致造影剂在声场下的力学稳定性显著变差，更容易发生惯性空化，从而使得低机械指数载药超声造影剂的实现成为可能。能够在保证较长体内循环时间的同时，在低机械指数超声波(超声机械指数mi<1.5)条件下，载药超声造影剂就能发生惯性空化并释放药物。

本发明第一方面提供了一种超声造影剂组合物，该超声造影剂组合物包括脂质、稳定剂和声致形变材料，相对于100重量份的所述脂质，所述稳定剂的含量为20-100重量份，所述声致形变材料的含量为1-15重量份；其中所述声致形变材料为能够在其特征响应频率的声波下发生形变的材料，所述特征响应频率为0.01mhz-50mhz。

本发明的上述脂质、稳定剂和声致形变材料的配比即能够实现较好的效果，为了进一步提高稳定性并降低机械指数，优选地，相对于100重量份的所述脂质，所述稳定剂的含量为30-60重量份，所述声致形变材料的含量为3-12重量份；更进一步优选地，相对于100重量份的所述脂质，所述稳定剂的含量为42-50重量份，所述声致形变材料的含量为4-10重量份。

可以理解的是，虽然本发明的微泡超声造影剂能够作为药物递送剂，但是基于生产、运输等的需要，根据一种具体实施方式，本发明的超声造影剂组合物中可以不包括药物。

根据本发明另一种具体实施方式，所述超声造影剂组合物还包括药物，相对于100重量份的所述脂质，所述药物的含量为2-20重量份，优选为6-10重量份。

为了将本发明的产品特定地用作超声造影剂，所述声致形变材料优选为在医学诊断超声波频率(一般为1mhz-30mhz)范围内较为敏感的材料。优选地，所述声致形变材料的特征响应频率为1mhz-30mhz，更优选地为2mhz-20mhz。本发明对声致形变材料的特征响应频率的优选范围的要求并不严格，在临床应用中根据具体声致形变材料，选择其对应的特征响应频率作为超声的中心频率即可。

在本发明中，术语“声致形变材料”是本领域中较少使用或从未使用过的术语，这是因为目前这种材料很少被关注和研究，更从未有人将其用在生物医疗领域，特别是超声造影剂中。本发明的发明人定义的该术语“声致形变材料”，采用与本领域中已经存在的术语“光致形变材料”相类似的含义，即“能够在特定声波条件(频率、强度等)下发生形变的材料”，所述形变可以为扩大、缩小、弯曲等各种形态的变化。能够使特定的材料发生形变的特定的声波频率即为该特定材料的特征响应频率。当某材料的特征响应频率落在医学诊断所用的超声波频率范围内时，即可以用在本发明的超声造影剂中。在使用时，首先将超声频率调整到非特征响应频率下，能够进行常规的超声造影操作，然后将超声频率调整到特征响应频率(无需增强机械指数)，在声致形变材料的影响下，微泡发生空化破裂，微泡空化时产生的力能够释放治疗药物并促进治疗药物递送至细胞内，从而实现在低机械指数超声波条件下能发生惯性空化并释放药物。因此，本发明的超声造影剂能够在同一超声成像探头作用下同时充当造影剂和药物递送剂。

在本发明中，满足上述条件的材料均可以用作本发明的声致形变材料，优选地，所述声致形变材料选自聚n-异丙基丙烯酰胺(pnipam)、聚乙烯基己内酰胺、血卟啉、光卟啉(photofrinii)、中卟啉、卟啉钠(dvdms)、镓卟啉(atx-70)、亲水性二氢卟酚衍生物(atx-s10)、原卟啉、铜原卟啉、四苯基卟啉四磺酸盐、脱镁叶绿酸a、感光蛋白、阿霉素、二氢卟酚e6、孟加拉红、赤藓红b、姜黄素、亚甲蓝、替诺昔康、吡罗昔康、蒿甲醚(lea)和水溶性二氢卟酚衍生物(pad-s31)中的一种或多种；更优选地，所述声致形变材料选自聚n-异丙基丙烯酰胺、聚乙烯基己内酰胺和蒿甲醚中的一种或多种。

在本发明中，所述脂质可以为本领域常规的用于超声造影剂的脂类。优选地，所述脂质为磷脂。为了与本发明的超声造影剂组合物中的其他成分发挥更好的协同作用，更优选地，所述脂质选自1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(dspc)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(dspe)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、1,2-双(二苯基膦)乙烷(dppe)和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg2000)中的一种或多种。

在本发明中，所述脂质优选为两种及多种物质的组合。根据一种优选的具体实施方式，所述脂质由第一脂质和第二脂质以1：(0.05-0.5)(更优选为1：(0.1-0.3))的重量比组合而成，其中所述第一脂质为dppc或dspc，所述第二脂质为dspe、dppe。

在本发明中，所述稳定剂可以为本领域常规的用于超声造影剂的稳定剂。例如，所述稳定剂选自聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段型聚醚(pluronic)、聚乙二醇4000(peg4000)、聚乙二醇2000(peg2000)、聚乙二醇1400(peg1400)、聚乙二醇40s(peg40s)和聚山梨酯-80中的一种或多种。

在本发明中，优选地，所述稳定剂为pluronic，或者所述稳定剂为peg4000、peg2000、peg1400和peg40s中的至少一种与pluronic以(0.5-0.8)：1的重量比的组合。

在本发明的组合物中，这些成分可以单独存在，也可以已经预先进行了结合。例如一种能够商购获得的原料dspe-peg2000，即为脂质dspe与稳定剂peg2000已经预先结合的形式。在本发明的具体实施方式中使用该原料时，用量的计算方法为将其中的dspe和peg2000的投加量分别计算。

在本发明中，所述药物可以为各种实际治疗所需要的药物。优选地，药物选自紫杉醇、羟基喜树碱、阿霉素、博来霉素、吉西他滨、长春瑞宾、香菇多糖、多西他赛和榄香烯中的一种或多种。

本发明第二方面提供了一种超声造影剂，其特征在于，该超声造影剂中含有本发明第一方面所述的超声造影剂组合物。

根据本发明一种具体实施方式，所述超声造影剂中含有大量的气体微泡。

在这种具体实施方式中，优选地，所述气体微泡的粒径为0.1-10μm，更优选为0.5-2μm。

优选地，所述气体微泡中的气体为惰性气体，可以为本领域中常规的用于微泡超声波造影剂的气体，例如选自全氟丙烷、全氟丁烷和六氟化硫中的一种或多种。所述气体微泡的外壳即含有本发明第一方面所述的超声造影剂组合物。

根据本发明另一种具体实施方式，出于便于储存和运输的需要，所述超声造影剂中可以不含有气体微泡。通常本领域将这种状态下的超声造影剂称为超声造影剂成膜溶液，该超声造影剂成膜溶液通过被施加一定的机械力，具体的操作方式可以如本发明第三方面的方法的步骤(4)所示，也可以按照本领域其他常规的方法进行操作，可以得到能够临床使用的含有大量气体微泡的超声造影剂。

在本发明中，术语“超声造影剂”也包括超声造影剂成膜溶液。

根据本发明的具体实施方式，所述超声造影剂由连续相和分散相组成，所述连续相可以为本领域常规的用来制备超声造影剂的连续相，例如磷酸盐(pbs)缓冲溶液；所述分散相中含有本发明第一方面所述的超声造影剂组合物，可以为气体微泡(即形成超声造影剂)或者形成超声造影剂成膜溶液。

本发明第三方面提供了一种制备本发明第二方面所述的超声造影剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将本发明第一方面所述的超声造影剂组合物与溶剂混合，得到a溶液；

(2)将所述a溶液进行第一水浴旋蒸至薄膜形成；和，

(3)向步骤(2)所得物料中加入水合液并进行第二水浴旋蒸至薄膜溶解，得到b溶液；以及任选地，

(4)在所述b溶液中通入气体，进行超声空化形成气体微泡。

在步骤(1)中，所述溶剂的选择没有特别的限定，能够将本发明第一方面所述的超声造影剂组合物溶解并且不发生化学反应即可，例如，所述溶剂为三氯甲烷。

在步骤(2)中，对所述a溶液采用薄膜乳化法进行处理，具体地，将将所述a溶液进行第一水浴旋蒸至薄膜形成。优选地，所述第一水浴旋蒸的温度为45-70℃，更优选为50-60℃；优选地，所述第一水浴旋蒸的压强为负压，例如为0.05-0.5mpa；所述第一水浴旋蒸的时间没有特别的限定，将溶剂基本除去即可，一般地，相对每200mg所述a溶液所用的时间为10-40分钟。

在步骤(3)中，所述水合液与步骤(1)所述溶剂的体积比为1：(1-3)。

在步骤(3)中，优选地，所述水合液为丙三醇(即甘油)与水的混合物或者为丙三醇(即甘油)与酸碱缓冲溶液(如pbs磷酸盐缓冲液)的混合物；优选地，所述水合液中丙三醇的体积含量为10-30％。

在步骤(3)中，优选地，所述第二水浴旋蒸的温度为45-70℃，更优选为50-60℃；所述第二水浴旋蒸的时间没有特别的限定，使薄膜完全溶解即可，一般地，相对每200mg物料所用的时间为10-20分钟。

本发明的步骤(4)根据实际需要任选地实施或者不实施。

在本发明中，步骤(3)所得的b溶液即可以进行生产销售和运输。即，所述b溶液即为本发明第四方面所述的微泡超声造影剂的一种具体实施方式。

当需要临床应用时，本发明的微泡超声造影剂的方法还包括所述步骤(4)。

在步骤(4)中，优选地，所述超声空化的条件包括：功率为6-12kw，时间为2-15min；更优选地，所述超声空化的条件包括：功率为8-12kw，时间为4-10min。

在步骤(4)中，所述气体即为本发明第二方面中所述的气体微泡中的气体。

本发明第四方面提供了根据本发明第三方面的方法制备得到的超声造影剂。

当本发明第三方面的方法不包括步骤(4)时，本发明第四方面的超声造影剂即为不含有微泡的超声造影剂成膜溶液。该状态下的超声造影剂便于运输和储存，但是在临床应用时应当先进行步骤(4)的操作以得到微泡态的超声造影剂。

当本发明第三方面的方法包括步骤(4)时，本发明第四方面的微泡超声造影剂中含有大量的微泡，能够直接用于临床中。

本发明第五方面提供了声致形变材料在超声造影剂中的应用，所述声致形变材料选自聚n-异丙基丙烯酰胺(pnipam)、聚乙烯基己内酰胺、血卟啉、光卟啉(photofrinii)、中卟啉、卟啉钠(dvdms)、镓卟啉(atx-70)、亲水性二氢卟酚衍生物(atx-s10)、原卟啉、铜原卟啉、四苯基卟啉四磺酸盐、脱镁叶绿酸a、感光蛋白、阿霉素、二氢卟酚e6、孟加拉红、赤藓红b、姜黄素、亚甲蓝、替诺昔康、吡罗昔康、蒿甲醚(lea)和水溶性二氢卟酚衍生物(pad-s31)中的一种或多种。

本发明第五方面的应用方式如本发明第一、第二和第三方面所述，在此不再赘述。

通过上述技术方案，本发明与现有技术相比至少具有以下优势：本发明的超声造影剂组合物得到的微泡超声造影剂能够兼具较高的稳定性和较低的机械指数，既能够保证在体内循环较长的时间(>6min，优选实施方式中能够>10min，甚至能够达到15min)，同时又能够实现在低机械指数超声波(超声机械指数mi<1.5)条件下能发生惯性空化并释放药物，从而能够在同一超声成像探头作用下同时充当造影剂和药物递送剂。

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

附图说明

图1是实施例1所得超声造影剂ii1的光学显微镜镜图；

图2是实施例1所得超声造影剂ii1在兔子肾脏中超声诱导爆破前(图2(a))和爆破后(图2(b))的实时超声图像。

具体实施方式

以下将通过实施例对本发明进行详细描述。本发明所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在没有特别说明的情况下，以下实施例所用的物料均为商购的分析纯。

制备例

本制备例用于制备步骤(3)中所使用的水合液，即pbs-丙三醇水合液，该制备例仅为一种具体实施方式，不作为本发明的限定。具体过程包括：

称取kcl0.097g、nacl4.005g、na2hpo4·h2o1.145g和kh2po40.096g至1l的烧杯中，加入去离子水定容至500ml制得磷酸盐缓冲液(pbs溶液)备用。称取pbs溶液85ml，加入15ml丙三醇混合均匀，制得pbs-丙三醇水合液。

实施例1

(i)准备超声造影剂组合物，将其记为i1，包括:

脂质：二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)100mg、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg2000)30mg(其中脂质dspe约8mg，稳定剂peg2000约22mg)；

稳定剂：聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段型聚醚(pluronic)30mg；

声致形变材料：聚n-异丙基丙烯酰胺(pnipam)5mg；

药物：紫杉醇10mg。

(ii)制备超声造影剂，将其记为ii1。

(1)将超声造影剂组合物i1至于容积为250ml的圆底烧瓶中，然后加入三氯甲烷20ml，充分混匀，溶液澄清透明；

(2)通过55℃水浴旋蒸和0.05mpa负压25min除去三氯甲烷，使瓶底上形成均匀的薄膜；

(3)向完成步骤2)后的烧瓶中加入40ml制备例所得水合液，继续通过55℃水浴旋蒸15min，使得薄膜完全溶解，然后取5ml分装于15ml的容器中；

(4)在向容器中通入全氟丙烷的同时，在超声粉碎仪于10kw的强度下作用4分钟，得到超声造影剂ii1。

将所得的超声造影剂ii1进行光学显微镜观测，所得结果如图1所示。从图1中可以看出该造影剂密布有粒径为1μm左右的微泡，微泡的粒径分布窄且溶液中没有明显的杂质，能够满足超声造影剂的造影需求。

以日本长耳白兔为实验对象，在兔左耳经耳缘静脉建立外周静脉通道，在导管末端连接三通管，其中一个通道用于注射本发明制备的载药超声造影剂，一个通道注射生理盐水。用3％(40mg/kg)的戊巴比妥钠对日本大耳白兔进行腹腔麻醉。兔子完全麻醉后，对其右腰部进行脱毛处理方便肾脏造影。将实施例1制备的载药超声造影剂ii1(0.1ml/kg)经兔耳缘静脉团注，并在同一超声成像探头上周期施加超声造影和聚焦超声两种序列。在超声造影模式(中心频率为8mhz)下记录兔肾脏造影情况；接着在聚焦超声模式(中心频率为4mhz(该频率为pnipam的特征响应频率)、机械指数为0.8)下定点击破动脉中的微泡；立即切换造影模式记录兔肾脏在微泡定点击破后的造影情况。该超声诱导爆破前和爆破后的实时超声图像分别如图2(a)和图2(b)所示。在微泡定点击破前后的造影图像中，击破点及其下游血管区域的超声信号发生了明显的变化。在微泡击破前，击破点及其下游血管得到充分灌注，血管边界显影清晰；在微泡击破后，击破点及其下游血管内几乎看不到任何回声信号。

实施例2

(i)准备超声造影剂组合物，将其记为i2，包括:

脂质：dppc100mg、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(dspe)10mg；

稳定剂：聚乙二醇1400(peg1400)20mg、pluronic30mg；

声致形变材料：pnipam10mg；

药物：紫杉醇10mg。

(ii)制备超声造影剂，将其记为ii2。

(1)将超声造影剂组合物i2至于容积为250ml的圆底烧瓶中，然后加入三氯甲烷20ml，充分混匀，溶液澄清透明；

(2)通过55℃水浴旋蒸和0.1mpa负压30min除去三氯甲烷，使瓶底上形成均匀的薄膜；

(3)向完成步骤2)后的烧瓶中加入40ml制备例所得水合液，继续通过55℃水浴旋蒸15min，使得薄膜完全溶解，然后取5ml分装于15ml的容器中；

(4)在向容器中通入全氟丙烷的同时，在超声粉碎仪于10kw的强度下作用6分钟，得到超声造影剂ii2。

实施例3

(i)准备超声造影剂组合物，将其记为i3，包括:

脂质：1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(dspc)100mg、dspe10mg；

稳定剂：聚乙二醇4000(peg4000)20mg、pluronic30mg；

声致形变材料：聚乙烯基己内酰胺5mg；

药物：紫杉醇10mg。

(ii)制备超声造影剂，将其记为ii3。

(1)将超声造影剂组合物i3至于容积为250ml的圆底烧瓶中，然后加入三氯甲烷20ml，充分混匀，溶液澄清透明；

(2)通过55℃水浴旋蒸和0.01mpa负压20min除去三氯甲烷，使瓶底上形成均匀的薄膜；

(3)向完成步骤2)后的烧瓶中加入40ml制备例所得水合液，继续通过55℃水浴旋蒸15min，使得薄膜完全溶解，然后取5ml分装于15ml的容器中；

(4)在向容器中通入全氟丙烷的同时，在超声粉碎仪于10kw的强度下作用8分钟，得到超声造影剂ii3。

实施例4

(i)准备超声造影剂组合物，将其记为i4，包括:

脂质：dppc100mg、1,2-双(二苯基膦)乙烷(dppe)10mg；

稳定剂：聚乙二醇40s(peg40s)20mg、pluronic30mg；

声致形变材料：聚乙烯基内酰胺10mg；

药物：紫杉醇10mg。

(ii)制备超声造影剂，将其记为ii4。

(1)将超声造影剂组合物i4至于容积为250ml的圆底烧瓶中，然后加入三氯甲烷20ml，充分混匀，溶液澄清透明；

(2)通过55℃水浴旋蒸和0.15mpa负压30min除去三氯甲烷，使瓶底上形成均匀的薄膜；

(3)向完成步骤2)后的烧瓶中加入40ml制备例所得水合液，继续通过55℃水浴旋蒸15min，使得薄膜完全溶解，然后取5ml分装于15ml的容器中；

(4)在向容器中通入全氟丙烷的同时，在超声粉碎仪于10kw的强度下作用4分钟，得到超声造影剂ii4。

实施例5

(i)准备超声造影剂组合物，将其记为i5，包括:

脂质：dspc100mg、dspe-peg200030mg(其中脂质dspe约8mg，稳定剂peg2000约22mg)；

稳定剂：pluronic30mg；

声致形变材料：蒿甲醚(lea)5mg；

药物：紫杉醇10mg。

(ii)制备超声造影剂，将其记为ii5。

(1)将超声造影剂组合物i5至于容积为250ml的圆底烧瓶中，然后加入三氯甲烷20ml，充分混匀，溶液澄清透明；

(2)通过55℃水浴旋蒸和0.2mpa负压30min除去三氯甲烷，使瓶底上形成均匀的薄膜；

(3)向完成步骤2)后的烧瓶中加入40ml制备例所得水合液，继续通过55℃水浴旋蒸15min，使得薄膜完全溶解，然后取5ml分装于15ml的容器中；

(4)在向容器中通入全氟丙烷的同时，在超声粉碎仪于10kw的强度下作用4分钟，得到超声造影剂ii5。

实施例6-25

实施例6-25分别参照实施例1进行，所不同的是，将实施例1的5mg声致形变材料pnipam替换为相同重量的其它声致形变材料，具体如下所示：

实施例6替换为血卟啉，得到超声造影剂组合物i6和超声造影剂ii6；

实施例7替换为中卟啉，得到超声造影剂组合物i7和超声造影剂ii7；

实施例8替换为卟啉钠，得到超声造影剂组合物i8和超声造影剂ii8；

实施例9替换为原卟啉，得到超声造影剂组合物i9和超声造影剂ii9；

实施例10替换为铜原卟啉，得到超声造影剂组合物i10和超声造影剂ii10；

实施例11替换为四苯基卟啉四磺酸盐，得到超声造影剂组合物i11和超声造影剂ii11；

实施例12替换为脱镁叶绿酸a，得到超声造影剂组合物i12和超声造影剂ii12；

实施例13替换为photofrinii，得到超声造影剂组合物i13和超声造影剂ii13；

实施例14替换为atx-70，得到超声造影剂组合物i14和超声造影剂ii14；

实施例15替换为atx-s10，得到超声造影剂组合物i15和超声造影剂ii15；

实施例16替换为感光蛋白，得到超声造影剂组合物i16和超声造影剂ii16；

实施例17替换为阿霉素，得到超声造影剂组合物i17和超声造影剂ii17；

实施例18替换为二氢卟酚e6，得到超声造影剂组合物i18和超声造影剂ii18；

实施例19替换为孟加拉红，得到超声造影剂组合物i19和超声造影剂ii19；

实施例20替换为赤藓红b，得到超声造影剂组合物i20和超声造影剂ii20；

实施例21替换为姜黄素，得到超声造影剂组合物i21和超声造影剂ii21；

实施例22替换为亚甲蓝，得到超声造影剂组合物i22和超声造影剂ii22；

实施例23替换为替诺昔康，得到超声造影剂组合物i23和超声造影剂ii23；

实施例24替换为吡罗昔康，得到超声造影剂组合物i24和超声造影剂ii24；

实施例25替换为水溶性二氢卟酚衍生物pad-s31(13,17-bis(1-carboxypropion)carbamoylethyl-3-ethenyl-8-ethoxyiminoethylidene-7-hydroxy-2,7,12,18-tetramethyl-porphyrinsodium)(厂家photochemicalco.,ltd.,okayama,japan)，得到超声造影剂组合物i25和超声造影剂ii25。

实施例26

参照实施例2进行，所不同的是，改变超声造影剂组合物中稳定剂的用量，具体地，稳定剂包括peg140018mg、pluronic18mg。

最终得到超声造影剂组合物i26和超声造影剂ii26。

实施例27

参照实施例2进行，所不同的是，改变超声造影剂组合物中稳定剂的用量，具体地，稳定剂包括peg140040mg、pluronic60mg。

最终得到超声造影剂组合物i27和超声造影剂ii27。

实施例28

参照实施例2进行，所不同的是，改变超声造影剂组合物中声致形变材料的含量，具体地，pnipam含量改为14mg。

最终得到超声造影剂组合物i28和超声造影剂ii28。

实施例29

参照实施例2进行，所不同的是，改变超声造影剂组合物中声致形变材料的含量，具体地，pnipam含量改为2.5mg。

最终得到超声造影剂组合物i29和超声造影剂ii29。

对比例1

参照实施例1进行，所不同的是，不加入声致形变材料pnipam，得到超声造影剂组合物id1和超声造影剂iid1。

对比例2

商购声诺维超声造影剂(厂家braccoimagingb.v.)，将其记为超声造影剂iid2。

对比例3

参照实施例1进行，所不同的是，将pnipam的加入量改为20mg，得到超声造影剂组合物id3和超声造影剂iid3。

测试例

将上述所得的超声造影剂ii1～ii26和iid1～iid3分别进行如下测试：

(1)稳定性测试

超声造影剂在体内的稳定性通过超声造影剂的半衰期来反应，半衰期越长，表明稳定性越高。具体的测试方法包括(以兔子为对象)：

在超声实时成像记录下，在注射超声造影剂后，随机选取超声图像内的一段血管区域，并记录该区域内的平均灰度值变化，达到灰度值最大值a的时间点记录t1，灰度值下降为a的50％的时间点记录为t2，则该种微泡的半衰期为|t1-t2|。注：要保证每次注射的超声造影剂浓度和剂量相同。

将实施例和对比例的超声造影剂所测得的半衰期结果分别记于表1中。

(2)机械指数测试

进行体外富集爆破实验，具体测试方法包括：

在一侧放置钕铁硼磁体的纤维素软管(内径为1mm)中，分别注射相同浓度(10⁶个/ml)的实施例和对比例的超声造影剂，并在生理流速下(100ml/h)进行超声造影剂的体外爆破实验。超声成像/爆破探头采用196阵元、频带宽度为8mhz的线阵探头，在各个实例中将频率设置为相应声致形变材料的特征响应频率(iid1和iid2的频率设置为与ii1相同)，通过控制超声探头的激励脉冲电压，可以控制超声探头发出超声波的机械指数(控制范围为mi＝0.3-1.9，步进为0.1)，观察不同机械指数下微泡的爆破情况，并记录下各实施例和对比例的超声造影剂分别对应的爆破率大于90％时的(爆破率＝|爆破前-爆破后|/爆破前*100％)机械指数，将结果记于表1中。

表1

由上述测试结果可以看出，相对于对比例，本发明的超声造影剂组合物和超声造影剂具有能够兼顾更高的稳定性和更低的机械指数，从而使本发明的超声造影剂同时充当造影剂和药物递送剂成为可能。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。