邻氨基苯甲酸衍生物在制备治疗癌症药物中的用途的制作方法

本发明属于癌症治疗领域，尤其涉及邻氨基苯甲酸衍生物在制备治疗癌症药物的用途。背景内容目前，全世界的癌症发生率、死亡率均呈逐年上升态势，每年患癌人数超过1500万，而因癌症死亡人数超过1000万。临床上常用的治疗癌症的药物以细胞毒类药物为主，但这类抗癌药往往选择性较差、毒副作用较强且易产生耐药性。近年来，随着科学技术的发展，靶向治疗成为癌症治疗的方向。通过靶向特定的基因或蛋白，从而导致癌症细胞特异性死亡，并且减少对正常细胞的副作用。虽然多种靶向药物投入市场，但目前癌症的治疗仍然是一大难题，因此发现新的癌症治疗药物具有重大的意义。邻氨基苯甲酸衍生物是很多药物的药效基团，但关于邻氨基苯甲酸衍生物应用于癌症治疗领域，尚未报导。技术实现要素：本发明的目的是克服现有技术的不足，提供邻氨基苯甲酸衍生物在制备治疗癌症药物中的用途。本发明的技术方案概述如下：邻氨基苯甲酸衍生物在制备治疗癌症药物中的用途，所述邻氨基苯甲酸衍生物用式(i)所示；所述r1为氢或氯；所述r2为：所述邻氨基苯甲酸衍生物为n-(4-戊基肉桂酰胺)邻氨基苯甲酸，其结构式为：n-(4-戊基肉桂酰胺)邻氨基-对氯苯甲酸，其结构式为：n-芴甲氧羰基-邻氨基苯甲酸，其结构式为：所述癌症为肝癌、前列腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌或结直肠癌。所述药物中还包括一种或多种可药用辅料。所述药物与用于治疗肝癌的至少一种另外的药物联用。所述另外的药物为索拉非尼。所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂或栓剂。实验证明邻氨基苯甲酸衍生物对多种人癌细胞的增殖有明显的抑制作用，对人正常细胞基本无毒性作用，且单独使用或与索拉非尼联合使用可以显著抑制人肝癌细胞hepg2移植瘤的生长。附图说明图1是i-a在人不同肝细胞系中的细胞毒性评价。图2是i-a单独或与索拉非尼(sorafenib)联合处理人肝癌细胞hepg2后的细胞存活率。图3a是i-a单独或与索拉非尼(sorafenib)联合给药影响人肝癌细胞hepg2移植瘤生长的直观表现图；图3b是i-a单独或与索拉非尼(sorafenib)联合给药后人肝癌细胞hepg2移植瘤的肿瘤体积随时间的变化曲线图。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合附图和具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应理解这些实施例仅仅用以解释本发明，而并不用于限定本发明的范围。在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。在本发明的实施例中，使用如下原料：本发明的实施例中所涉及的人细胞系均购自中国科学院上海生命科学院细胞库；阿尔玛蓝，购自索莱宝公司，该试剂的货号规格为a7631-5ml(500t)；i-a，购自sigma-aldrich公司，该试剂的货号规格为a8486-5mg；i-b，购自sigma-aldrich公司，该试剂的货号规格为o0766-5mg；i-c，购自sigma-aldrich公司，该试剂的货号规格为446033-5g；索拉非尼(sorafenib)，购自sigma-aldrich公司，该试剂的货号规格为y0002098；6周龄balb/c-nu裸鼠，购自北京维通利华公司。所述邻氨基苯甲酸衍生物优选n-(4-戊基肉桂酰胺)邻氨基苯甲酸，其结构式为：n-(4-戊基肉桂酰胺)邻氨基-对氯苯甲酸，其结构式为：n-芴甲氧羰基-邻氨基苯甲酸，其结构式为：实施例1邻氨基苯甲酸衍生物对各种癌细胞的抑制活性分别取处于对数生长期的人各种癌细胞种于96孔板中(细胞浓度为5000个/孔，100μl/孔)，放入37℃细胞培养箱中培养24小时使细胞贴壁，去除上清，再分别加入100μl含有不同浓度的邻氨基苯甲酸衍生物(100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.125μm、1.5625μm)的新鲜培养基(邻氨基苯甲酸衍生物事先溶解于dmso中，当测试时用完全培养基稀释成所需浓度，注意dmso浓度不能超过0.1％。每个浓度设置3个重复孔，并设置空白对照孔和阴性对照孔)，继续培养48小时后，每孔加入10μl阿尔玛蓝，放入37℃细胞培养箱中培养4小时，用酶标仪测定各孔荧光值，激发光和发射光波长分别设置为540nm和590nm，计算出邻氨基苯甲酸衍生物对测试癌细胞的抑制作用。表1邻氨基苯甲酸衍生物对各种癌细胞的抑制活性(ic50，单位μm)细胞i-ai-bi-chepg225.01±0.4428.43±0.9234.62±1.22pc321.53±1.4329.32±0.0542.13±0.27snu41029.27±0.3224.45±0.3151.17±0.08mfe-28020.96±2.9023.19±0.9237.02±0.93hct11622.92±0.8824.39±1.0440.14±1.27其中hepg2、pc3、snu410、mfe-280、hct116分别表示人肝癌细胞、人前列腺癌细胞、人胰腺癌细胞、人子宫内膜癌细胞、人结直肠癌细胞。表1结果表明，邻氨基苯甲酸衍生物对各种受试癌细胞显示出较强的抑制活性。实施例2i-a在人不同肝细胞系中的细胞毒性评价分别取处于对数生长期的人正常肝细胞lo2、人肝癌细胞hepg2、人肝癌细胞huh7种于96孔板中(细胞浓度为5000个/孔，100μl/孔)，放入37℃细胞培养箱中培养24小时使细胞贴壁，去除上清，再加入100μl含有不同浓度的i-a(100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.125μm、1.5625μm)的新鲜培养基(i-a事先溶解于dmso中，当测试时用完全培养基稀释成所需浓度，注意dmso浓度不能超过0.1％。每个浓度设置3个重复孔，并设置空白对照孔和阴性对照孔)，继续培养48小时后，每孔加入10μl阿尔玛蓝，放入37℃细胞培养箱中培养4小时，用酶标仪测定各孔荧光值，激发光和发射光波长分别设置为540nm和590nm。结果如图1所示，随着浓度不断增加，i-a对人正常肝细胞基本无毒性影响，而对两种人肝癌细胞hepg2和huh7的细胞毒性随着i-a的浓度升高而增强，说明i-a可以选择性杀死肝癌细胞，而对正常肝细胞伤害较低。实施例3i-a单独或与索拉非尼(sorafenib)联合处理人肝癌细胞hepg2后的细胞存活率。取处于对数生长期的人肝癌细胞hepg2种于96孔板中(细胞浓度为5000个/孔，100μl/孔)，放入37℃细胞培养箱中培养24小时使细胞贴壁，去除上清，再加入100μl仅含有30μmi-a、仅含有1μmsorafenib、仅含有2μmsorafenib、含有30μmi-a与1μmsorafenib、含有30μmi-a与2μmsorafenib的新鲜培养基(i-a，sorafenib事先溶解于dmso中，当测试时用完全培养基稀释成所需浓度，注意dmso浓度不能超过0.1％)。每个给药条件设置3个重复孔，并设置空白对照孔和阴性对照孔，继续培养48小时后，每孔加入10μl阿尔玛蓝，放入37℃细胞培养箱中培养4小时，用酶标仪测定各孔荧光值，激发光和发射光波长分别设置为540nm和590nm。结果如图2所示，单独给药i-a可明显抑制人肝癌细胞hepg2细胞增殖，联合给药时，i-a和sorafenib对hepg2细胞增殖有协同抑制作用。实施例4i-a单独或与索拉非尼(sorafenib)联合给药对人肝癌细胞hepg2移植瘤生长的影响取处于对数生长期的人肝癌细胞hepg2，经皮下注射移植于balb/c-nu裸鼠右侧腋窝处，待肿瘤长至约50mm3时，随机分组，每组6只，分别腹腔注射30mg/kgi-a(i-a-30)、60mg/kgi-a(i-a-60)、10mg/kgsorafenib(sor-10)、或联合30mg/kgi-a和10mg/kgsorafenib(i-a-30+sor-10)给药，检测肿瘤随着时间的生长曲线，给药一个月后，取出肿瘤并准确称重。结果如图3所示，单独注射i-a对移植瘤的抑制存在着剂量依赖关系，而i-a和sorafenib对人肝癌细胞hepg2移植瘤的抑制有明显的协同作用，这些结果说明，单独给药i-a或联合i-a与索拉非尼(sorafenib)给药均可以显著抑制人肝癌细胞hepg2移植瘤的生长。邻氨基苯甲酸衍生物还包括一种或多种可药用辅料。药物的剂型优选片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂或栓剂。当前第1页12