含乳铁蛋白的肠溶片和其制造方法与流程

[0001]
本发明涉及含乳铁蛋白的肠溶片和其制造方法。


背景技术：

[0002]
专利文献1～3公开含有乳铁蛋白的肠溶片。这些肠溶片为将含有乳铁蛋白的素片包衣后的片剂。包衣抑制胃中乳铁蛋白的溶出，从而乳铁蛋白主要在肠中从素片中溶出。
[0003]
专利文献1和2公开：硬脂酸盐作为润滑剂被添加到素片中，从而，即使将肠溶片长期储存后，也能够良好地保持在肠中的乳铁蛋白溶出。专利文献3公开：在素片和包衣之间实施预涂层，从而，即使将肠溶片长期储存后，也能够良好地保持在胃中的乳铁蛋白溶出的抑制。
[0004]
【现有技术文献】
[0005]
【专利文献】
[0006]
【专利文献1】wo2016/163460
[0007]
【专利文献2】wo2016/163463
[0008]
【专利文献3】wo2016/035756


技术实现要素：

[0009]
【发明要解决的课题】
[0010]
本发明提供含乳铁蛋白的肠溶片和其制造方法。该肠溶片中，硬脂酸盐作为润滑剂被添加在素片中。因此，即使将肠溶片长期储存后，也可以使乳铁蛋白效率良好地在肠内溶出。此处，特别需要改善在高温下的长期储存后的乳铁蛋白的溶出性。本发明的课题为提供用于尤其是在高温下随时间变化维持乳铁蛋白在肠中的溶出性的改善手段。
[0011]
【解决课题的手段】
[0012]
<1>一种肠溶片，其素片含有(a)乳铁蛋白和(b)结晶纤维素，上述(b)结晶纤维素的堆积密度为0.23g/cm3以上。
[0013]
<2>根据<1>记载的肠溶片，其中，
[0014]
上述(b)结晶纤维素的堆积密度为0.25g/cm3以上，
[0015]
上述(b)结晶纤维素和上述(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)为0.09以上。
[0016]
<3>根据<2>记载的肠溶片，其中，上述重量比(b/a)为60以下。
[0017]
<4>根据<3>记载的肠溶片，其中，上述(b)结晶纤维素和上述(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)为0.65以上2.60以下。
[0018]
<5>根据<2>～<4>中任一项记载的肠溶片，其中，上述素片还含有堆积密度小于0.25g/cm3的其他结晶纤维素。
[0019]
<6>根据<1>～<5>中任一项记载的肠溶片，其中，上述(b)结晶纤维素的平均粒径为20μm以上。
[0020]
<7>一种肠溶片，其中，素片含有(a)乳铁蛋白和(b)结晶纤维素，
[0021]
上述(b)结晶纤维素和上述(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)为0.65以上2.60以下，
[0022]
素片的硬度为7kgf以上，
[0023]
肠溶片的溶出性维持率为70％以上。
[0024]
<8>根据<1>～<7>中任一项记载的肠溶片，其中，上述素片还含有(c)硬脂酸盐。
[0025]
<9>根据<1>～<8>中任一项记载的肠溶片，其中，上述素片被甲基丙烯酸系高分子化合物、虫胶、玉米醇溶蛋白、海藻酸和海藻酸盐中的任一种保护膜成分包衣。
[0026]
<10>根据<9>记载的肠溶片，其中，在上述素片和包衣之间实涂有不含上述保护膜成分的预涂层。
[0027]
<11>根据<1>～<10>中任一项记载的肠溶片，其中，含有上述(a)乳铁蛋白，作为用于脂质代谢的活化、便秘的治疗或预防、肠内菌群的活化、安眠、生长激素的分泌的促进、干眼症和角膜上皮剥离以及由它们引发的眼疾中的任一种的治疗或预防、降低血压、过敏的治疗或预防、免疫的活化、更年期障碍的治疗或预防以及肝功能的活化中的任一种的生理活性成分。
[0028]
<12>一种肠溶片的制造方法，其中，
[0029]
使用压片机将含有(a)乳铁蛋白的粉体和堆积密度为0.23g/cm3以上的(b)结晶纤维素的粉体的混合粉体压片，得到素片，将所述素片包衣。
[0030]
【发明效果】
[0031]
本发明可提供：在含乳铁蛋白的肠溶片和其制造方法中，用于尤其是在高温下随时间变化维持在肠中的乳铁蛋白溶出性的改善手段。
附图说明
[0032]
【图1】显示原料的附着状态(***)的照片。
[0033]
【图2】显示原料的附着状态(**)的照片。
[0034]
【图3】显示原料的附着状态(*)的照片。
具体实施方式
[0035]
<1.肠溶片的构成>
[0036]
本实施方式的肠溶片是用保护膜成分对素片实施了包衣的片剂。素片含有(a)乳铁蛋白和(b)结晶纤维素。一个实施方式中，肠溶片将(a)乳铁蛋白作为生理活性成分送至肠。一个实施方式中，肠溶片将(a)乳铁蛋白作为生理活性成分以外的其他成分送至肠。
[0037]
包衣中的保护膜成分妨碍(a)乳铁蛋白在胃液中的溶出，但是不妨碍其在肠液中的溶出。可在素片和包衣之间进一步实施不含保护膜成分的预涂层。可在包衣的外侧，进一步实施不含保护膜成分的追加包衣。
[0038]
素片可包含(a)乳铁蛋白以外的生理活性成分。一个实施方式中，(a)乳铁蛋白是素片中的生理活性成分内，含量最多的生理活性成分。(a)乳铁蛋白可为素片中的唯一的生理活性成分。
[0039]
本实施方式中，结晶纤维素的堆积密度为0.23g/cm3以上。因此，尤其是在高温下随时间变化可以维持肠溶片在肠中的乳铁蛋白溶出性。以下，解说肠溶片中需要的各成分和其分量。
[0040]
<2-1.(a)乳铁蛋白>
[0041]
乳铁蛋白为分子量约80,000的铁结合性糖蛋白，在1分子上结合2个铁。一个实施方式中，乳铁蛋白与铁结合。一个实施方式中，乳铁蛋白不与铁结合。此后说明的实验例中的乳铁蛋白的铁含量为0.05％以下，是实质上不与铁结合的组合物。
[0042]
乳铁蛋白是具有改善脂质代谢的功能、改善便秘的功能、改善肠内菌群的功能、改善睡眠的功能、促进生长激素的分泌的功能、改善干眼症和角膜上皮剥离以及由它们产生的眼睛障碍的功能、降低血压的功能、改善过敏的功能、改善免疫的功能、改善更年期障碍的功能、改善肝功能的功能和其他功能的生理活性成分。
[0043]
乳铁蛋白被胃蛋白酶消化时，生成具有更强的抗菌活性的肽、乳铁蛋白肽。一个实施方式中，乳铁蛋白为含乳铁蛋白肽的组合物。一个实施方式中，乳铁蛋白是不含乳铁蛋白肽的组合物。此后说明的实验例中的乳铁蛋白是不含乳铁蛋白肽的组合物。
[0044]
一个实施方式中，乳铁蛋白相对于素片的含量为1重量％以上60重量％以下，优选4重量％以上60重量％以下，更优选15重量％以上56重量％以下，进一步优选18重量％以上50重量％以下。
[0045]
通过使该含量为4重量％以上，在压片时可抑制含乳铁蛋白的混合粉体附着于压片机。通过使该含量为15重量％以上，优选17.2重量％以上，可进一步抑制附着。通过使该含量为18重量％以上，优选18.5重量％以上，从而提高初期溶出率。
[0046]
通过使该含量为50重量％以下，优选48.2重量％以下，从而提高压片时的素片的成型性。通过使该含量为45重量％以下，优选41.5重量％以下，从而提高初期溶出率和溶出性维持率。通过使该含量为36.3重量％以下，从而进一步提高压片时的素片的成型性。此外，进一步提高溶出性维持率。通过使该含量为35重量％以下，优选30.8重量％以下，从而进一步提高溶出性维持率。
[0047]
此处，溶出性维持率是指抵抗在肠溶片的储存期间的溶出性的劣化，维持何种程度的溶出率的量度。此外，本实施方式中，溶出性维持率是指在大于40℃的高温下的储存中的溶出性维持率。此外，一个实施方式中，溶出性维持率是指在大于50℃的高温下的储存中的溶出性维持率。此外，一个实施方式中，溶出性维持率是指在达到60℃的高温下的储存中的溶出性维持率。
[0048]
乳铁蛋白例如可从由乳用家畜得到的乳汁中分离。作为乳用家畜，可列举牛、绵羊、山羊、马等，但是，不限定于这些。按照每个采取时期，乳汁可分类为初乳、过渡乳、成熟乳和晚乳。任意时期的乳汁均可使用。也可从处理乳汁得到的物质例如脱脂乳或乳清等中分离乳铁蛋白。实验例中的乳铁蛋白均来自于牛。
[0049]
乳铁蛋白可由转基因生物产生。作为宿主的生物可为动物，可为植物，也可为微生物。此外，宿主也可为培养细胞。作为宿主植物，可列举番茄、稻和烟草。导入的乳铁蛋白基因可为人类和乳用家畜中的任一种的乳铁蛋白基因。可使导入的乳铁蛋白基因突变，生产乳铁蛋白衍生物。这样的乳铁蛋白衍生物包含在本实施方式的乳铁蛋白中。一个实施方式中，乳铁蛋白为直接克隆的未突变的乳铁蛋白。
[0050]
可对分离或生产的乳铁蛋白进行化学处理生成乳铁蛋白衍生物。这样的乳铁蛋白衍生物包含于本实施方式的乳铁蛋白中。一个实施方式中，乳铁蛋白为乳铁蛋白的非衍生物。
[0051]
可使用离子交换色谱法之类的通常方法使乳铁蛋白纯化和浓缩。浓缩的乳铁蛋白的干燥可用冷冻干燥和喷雾干燥中的任一种进行。
[0052]
可在将乳铁蛋白与其他原料粉体混合之前，实施乳铁蛋白的造粒和乳铁蛋白的粉碎等加工。优选将这些加工得到的具有规定的粒径分布或平均粒径的乳铁蛋白粒子与其他原料粉体混合。可对乳铁蛋白粒子进行包衣。
[0053]
乳铁蛋白粒子的平均粒径优选20μm～300μm，更优选20μm～200μm，进一步优选20μm～100μm。下述实验例中，平均粒径取80μm。
[0054]
可使用ro-tap法或激光衍射散射法测定乳铁蛋白粒子的平均粒径。用ro-tap法测定的平均粒径与在重量基准中累积频率为50重量％的粒径相当。另外，本实施例中，乳铁蛋白的堆积密度无特别限定。另外，此处堆积密度是指用粉体最大限度地填充一定容积的容器，以该内部容积作为体积时的密度。
[0055]
本实施例中，乳铁蛋白可以凝集，也可以不凝集。凝集体的乳铁蛋白的表观分子量无特别限定。乳铁蛋白可为每一分子相互分散的。乳铁蛋白的凝集体中可进一步包含其他蛋白质。乳铁蛋白的凝集体中可包含其他蛋白质或乳铁蛋白的肽片段。
[0056]
作为原料使用的乳铁蛋白的浓缩物中，乳铁蛋白的纯度无特别限定。以重量基准计，纯度优选50重量％以上，进一步优选85重量％以上。乳铁蛋白的浓缩物的纯度不必一定为100重量％。一个实施方式中，(a)乳铁蛋白作为从原料例如乳清中纯化的乳铁蛋白浓缩物被混合在素片中。
[0057]
确定乳铁蛋白的含量时，可考虑乳铁蛋白浓缩物中的乳铁蛋白的纯度、纯成分量，即重量。下述实验例中，乳铁蛋白的含量由乳铁蛋白的纯成分量确定。一个实施方式中，纯成分量中包含乳铁蛋白结合的铁。一个实施方式中，纯成分量中不包含乳铁蛋白结合的铁。
[0058]
<2-2.(b)结晶纤维素>
[0059]
一个实施方式中，可通过用酸部分地解聚由纤维性植物得到的α-纤维素，纯化，而得到结晶纤维素。结晶纤维素中的纤维素不赋予官能团等。结晶纤维素中的纤维素为非衍生物纤维素。
[0060]
结晶纤维素提高供于压片的混合粉体中的颗粒间的结合力。结晶纤维素进一步提高乳铁蛋白的溶出性。结晶纤维素相对于素片的含量优选5重量％以上70重量％以下，更优选15重量％以上60重量％以下，进一步优选27重量％以上57重量％以下。
[0061]
通过使该含量为5重量％以上，优选12重量％以上，从而提高压片时的素片的成型性。通过使该含量为15重量％以上，优选18.7重量％，从而提高初期溶出率、溶出性维持率。通过使该含量为23.8重量％以上，从而进一步提高压片时的素片的成型性。此外，进一步提高溶出性维持率。通过使该含量为27重量％以上，优选29.3重量％以上，从而进一步提高溶出性维持率。
[0062]
通过使该含量为57重量％以下，优选56.2重量％以下，从而可以抑制压片时含乳铁蛋白的混合粉体附着于压片机。通过使该含量为45重量％以下，优选43.0重量％以下，从而可以进一步抑制附着。通过使该含量为42重量％以下，优选41.7重量％以下，从而提高初期溶出率。
[0063]
结晶纤维素为颗粒状。结晶纤维素的堆积密度优选0.23g/cm3以上。堆积密度优选0.40g/cm3以下。优选地，堆积密度为0.25g/cm3以上，0.35g/cm3以下。优选地，堆积密度为
0.28g/cm3以上，0.31g/cm3以下。
[0064]
通过使堆积密度为0.23g/cm3以上，从而提高溶出性维持率。通过使堆积密度为0.25g/cm3以上，从而进一步提高溶出性维持率。通过使堆积密度为0.35g/cm3以下，优选0.31g/cm3以下，从而提高压片时的素片的成型性。
[0065]
另外，如上所述，堆积密度是指用粉体最大限度地填充一定容积的容器，以该内部容积作为体积时的密度。片剂中的结晶纤维素粉体被压缩，因此，有时会出现具有与压片前的堆积密度不同的堆积密度的情况。通过压片改变堆积密度时，可以以即将制备混合粉体之前的原料阶段为基准，确定堆积密度。
[0066]
可通过第十七次修订版日本药典的“结晶纤维素”中记载的方法进行堆积密度的测定。使用日本药典指定的设备，此处可使用scott容积计测定堆积密度。以下，只要没有特别说明，堆积密度就指按照日本药典的方法测定的堆积密度。
[0067]
结晶纤维素具有规定的粒径分布。其平均粒径优选20μm以上180μm以下，更优选40μm以上150μm以下。可用ro-tap法或激光衍射散射法测定平均粒径。用ro-tap法测定的平均粒径，与在重量基准中累积频率为50重量％的粒径相当。
[0068]
作为用于测定分散在素片或肠溶片中的结晶纤维素的粒径的方法，可例示如下。首先，用溶解结晶纤维素以外的成分的介质例如水、乙醇等使片剂崩解后，捕集溶媒中的结晶纤维素的粉体。接着，用上述的方法测定捕集的粉体的粒径分布。或者，使用颗粒图像分析装置测定粒径分布。颗粒图像分析装置的例子为，颗粒图像分析“morphologi4”以及颗粒图像分析和拉曼光谱分析装置“morphologi 4-id”，均为spectris株式会社制造。
[0069]
通过使平均粒径为20μm以上，优选40μm以上，更优选50μm以上，从而提高溶出性维持率。通过使平均粒径为180μm以下，优选150μm以下，从而提高压片时的素片的成型性，同时能够抑制含乳铁蛋白的混合粉体附着在压片机上。
[0070]
制备结晶纤维素时，注意堆积密度。可以按照通常的方法进行堆积密度的调整。制备结晶纤维素时，也要注意粒径分布。为了得到具有期望的平均粒径或粒径分布的结晶纤维素，可使用通常的方法。
[0071]
作为结晶纤维素的制备方法，可列举例如日本特开2019-026558号公报的第[0022]～[0024]段的记载。例如可对纤维素分散液进行一次性脱水纯化得到大颗粒。此外，也可通过筛分筛选使粒径分布偏向大颗粒侧。此外，也可通过粉碎提高一次粒子率而得到较小颗粒。其他的通常方法也可用于平均粒径或粒径分布的调整中。
[0072]
可组合多种结晶纤维素原料。可混合堆积密度、或者粒径分布或平均粒径不同的2种以上的结晶纤维素的组。可组合堆积密度不同的2种以上的结晶纤维素，进行调整，使得该堆积密度落在本实施方式的堆积密度的范围内。一个实施方式中，素片可含有堆积密度为0.25g/cm3以上的、优选0.28g/cm3以上的结晶纤维素和堆积密度小于0.25g/cm3的其他结晶纤维素。其他结晶纤维素的堆积密度例如可为0.23g/cm3。其他结晶纤维素的含量优选比堆积密度为0.25g/cm3以上的结晶纤维素的含量少。
[0073]
<2-3.重量比(b/a)>
[0074]
(b)结晶纤维素和(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)优选0.09～60，更优选0.45～15，进一步优选0.9～2.3。
[0075]
通过使重量比(b/a)为0.25以上，从而提高压片时的素片的成型性。通过使重量比
(b/a)为0.45以上，从而提高初期溶出率，同时提高溶出性维持率。通过使重量比(b/a)大于0.63，优选0.64以上，更优选0.65以上，进一步优选0.66以上，从而进一步提高素片的成型性。此外，提高溶出性维持率。通过使重量比(b/a)为0.8以上，优选0.95以上，从而进一步提高溶出性维持率。
[0076]
通过使重量比(b/a)为15以下，优选14.04以下，从而可抑制压片时含乳铁蛋白的混合粉体附着于压片机。通过使重量比(b/a)为4以下，优选2.50以下，从而进一步抑制附着，进一步提高肠溶片的初期溶出率。重量比(b/a)可解释为上述(b)结晶纤维素的重量相对于乳铁蛋白的纯成分量之比。
[0077]
<2-4.(c)硬脂酸盐及其他>
[0078]
素片可进一步含有硬脂酸盐作为润滑剂。硬脂酸盐可为硬脂酸钙和硬脂酸镁中的至少任一种。相对于素片，硬脂酸盐的含量优选0.01重量％以上10重量％以下，更优选0.05重量％以上5.0重量％以下，进一步优选0.1重量％以上3.0重量％以下。通过使该含量在上述下限以上，从而改善附着性，通过使该含量在上述上限以下，从而溶出性良好。作为硬脂酸盐以外的其他润滑剂，可列举蔗糖脂肪酸酯。素片可进一步含有粘合剂、赋形剂、助流剂、崩解剂和其他润滑剂。
[0079]
作为粘合剂，可列举阿拉伯胶、明胶、海藻酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇和羟丙基纤维素。通过使压片前的混合粉体中含有粘合剂，从而，提高素片的压片时的成形性。相对于素片，粘合剂的含量优选0.1重量％以上50重量％以下。
[0080]
作为赋形剂，可列举：麦芽糖醇、糊精、木糖醇、赤藓糖醇、高岭土、可可脂、果糖、硬脂酸、葡聚糖、羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇、磷酸氢钙、磷酸氢钠、蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、乳糖醇、玉米淀粉和马铃薯淀粉。通过素片含有赋形剂，从而提高素片的溶出性、服用性。相对于素片，赋形剂的含量优选0.1重量％以上50重量％以下。
[0081]
作为助流剂，可列举微粒二氧化硅。作为崩解剂，可列举羧甲基纤维素(cmc)、cmc的碱金属盐、部分α化淀粉和低取代度的羟丙基纤维素(hpc)。通过使压片前的混合粉体中含有助流剂，从而提高助流剂以外的粉体的流动性。相对于素片，助流剂的含量优选0.1重量％以上2.0重量％以下。通过使压片前的混合粉体中含有崩解剂，从而提高素片和肠溶片的崩解性。相对于素片，崩解剂的含量优选0.01重量％以上30重量％以下，更优选0.1重量％以上15重量％以下，更进一步优选0.5重量％以上10重量％以下。
[0082]
<2-5.其他生理活性成分>
[0083]
可在素片中进一步添加作为其他生理活性成分的来自于植物的成分、维生素、矿物质、膳食纤维、鱼油、乳酸菌之类的成分。来自于植物的成分可列举可可提取物、荜菝提取物、葛花提取物、丛梗藻(durvillaea)提取物、葡萄籽提取物、松树皮提取物、毛喉鞘蕊花提取物、朝鲜蓟叶提取物、迷迭香提取物、路易波士(rooibos)提取物、番茄提取物、橄榄提取物、田七人参提取物和其他植物提取物。植物提取物的加工物也适宜用作来自于植物的成分。由植物提取物得到的纯化化合物也适宜用作来自于植物的成分。作为化合物可列举覆盆子铜、异黄酮。此外，维生素、矿物质和膳食纤维可为来自于植物的成分，也可为人工合成的成分。维生素可为脂溶性维生素。乳酸菌可为活菌也可为死菌。
[0084]
素片中的其他生理活性成分的含量优选1重量％以上50重量％以下，更优选4重量％以上30重量％以下，进一步优选8重量％以上20重量％以下。通过使该含量为1重量％
以上，从而溶出性良好。通过进一步提高该含量，从而可以使溶出性进一步变良好。通过使该含量为50重量％以下，从而，混合粉体的成形性变良好。通过使该含量进一步降低，从而可以使混合粉体的成形性进一步变良好。
[0085]
此外，通过进一步含有这些其他生理活性成分，从而本实施方式的肠溶片有助于高血糖、过敏、干燥综合征(dry syndrome)等疾病的预防或改善。此外，本实施方式的肠溶片有助于肠内环境的改善。根据本实施方式的肠溶片，在胃中的乳铁蛋白的溶出得到抑制，乳铁蛋白主要在肠中从素片中溶出。因此，可进一步提高乳铁蛋白所具有的疾病的预防或治疗效果。本实施方式中，这些其他生理活性成分进一步提高尤其是针对代谢综合征的乳铁蛋白的预防或治疗的效果。
[0086]
<2-6.包衣和保护膜成分>
[0087]
本实施例的片剂为肠溶片。片剂的素片的上具有包衣。包衣具有保护膜成分。保护膜成分将肠溶性赋予片剂。保护膜成分在胃中不溶解，因此，保护膜成分阻碍胃液与素片中的乳铁蛋白、其他生理活性成分的接触。此后，保护膜成分在肠中溶解，促进肠液和素片的接触。一个实施方式中，肠溶片适合为第十七次修订版日本药典中记载的“肠溶性制剂”。
[0088]
作为保护膜成分，可列举例如甲基丙烯酸系高分子化合物、虫胶、玉米醇溶蛋白、海藻酸和海藻酸盐。它们可以使用1种或并用2种以上。海藻酸盐可为海藻酸铵、海藻酸钠和海藻酸钾中的任意1种或2种以上。作为保护膜成分，优选并用分子量不同的2种以上的化合物。例如可并用2种海藻酸盐。由此，提高肠溶片的耐酸性、在肠中的乳铁蛋白和其他生理活性成分的溶出性。可将不含保护膜成分的预涂层施加在包衣的内侧。
[0089]
可在包衣中添加附着防止剂或着色剂等。作为附着防止剂，可列举二氧化硅和滑石粉。二氧化硅优选微粒二氧化硅。作为着色剂，可列举焦糖、可可、栀子黄色素、胡萝卜素、栀子红色素和萝卜红色素。
[0090]
<2-7.片剂的形状等>
[0091]
片剂的形状、尺寸和重量如果是能够容易服用就无特别限定。形状优选r片、两层r片。尺寸优选为直径5mm以上且小于15mm，厚度3mm以上且小于10mm。此外，素片的重量优选200mg以上400mg以下，更优选250mg以上350mg以下。此外，为了防止包衣时的素片的磨损，素片的硬度优选7kgf以上，更优选9kgf以上，进一步优选10kgf以上。作为素片的硬度的上限，从在肠中的片剂的崩解性的观点考虑，优选20kgf以下。此外，作为肠溶片的硬度，优选20kgf以上40kgf以下。
[0092]
【实施例】
[0093]
<3-1.素片的制作>
[0094]
称量包括(a)乳铁蛋白、(b)结晶纤维素、(c)硬脂酸盐及其他和(d)植物提取物的均为粉体状的原料，混合。原料的各成分的组成比如实验例所示的表2～5所示。通过混合得到总重量为5kg的混合粉体。使用旋转式压片机对混合粉体进行压片，从而得到素片。本实施例中，混合粉体的制备中，不进行造粒。
[0095]
压片机为菊水制作所制造的libla 2。libla 2的设定如下所示。
[0096]-臼杵模具的形状：
[0097]
直径9.0mm，角为2段式的r倒角
[0098]
r1＝3.6mm，r2＝10.5mm，台(land)部＝1.5mm
[0099]
台部表示从片剂的侧面至r面上升部的距离
[0100]-送料靴(feed shoe)的搅拌叶片的转速：60rpm
[0101]
各例均以15kn压片，从而得到素片，测定素片的硬度。该素片的硬度作为成型性的评价的指标。进一步地基于测定结果调整压片压，使素片的硬度为10kgf，之后，再制作初期溶出率和溶出性维持率的评价用素片。此时的压片压的范围为10～18kn。对素片进行包衣后，进行乳铁蛋白的溶出性的评价。
[0102]
<3-2.包衣>
[0103]
用下述组成的第1层包衣液对素片进行预涂层。
[0104]
hpmc(羟丙基甲基纤维素)：6％
[0105]
甘油：2％
[0106]
水：92％
[0107]
用下述组成的第2层包衣液对预涂层的素片进行包衣。
[0108]
hpmc：2.1％
[0109]
甘油：1.1％
[0110]
海藻酸钠：3.2％
[0111]
微粒二氧化硅：0.5％
[0112]
水：93.1％
[0113]
作为包衣装置，使用freund产业制造的盘旋转式包衣机、hicoater fz-lab。首先，对670片素片，以平均2g/min喷雾20℃的第1层包衣液33g，从而进行预涂层。将素片的温度调整为约50℃。第1层包衣液33g中，包含2640mg的除了水之外的成分。将2640mg除以670片，为约3.9mg/片。
[0114]
接着，以平均2g/min喷雾60℃的第2层包衣液163g。喷雾后，在约45℃下干燥2分钟。由上述方法得到肠溶片。每1片肠溶片的包衣中的固体成分的组成如下所示。
[0115]
包衣第1层的固体成分的组成(mg/片)
[0116]
羟丙基甲基纤维素
ꢀꢀ
2.9
[0117]
甘油
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1.0
[0118]
包衣第2层的固体成分的组成(mg/片)
[0119][0120]
<3-3.乳铁蛋白的溶出试验>
[0121]
乳铁蛋白的溶出率(％)的测定，按照第十七次修订版日本药典中收载的片剂的溶出试验法进行试验。具体而言，通过桨叶法以每分钟50转使乳铁蛋白溶出至试验液中。作为试验液，对1个片剂使用900ml的ph约6.8的溶出试验第2液。试验开始2小时后，采集试验液。对溶出至试验液中的乳铁蛋白进行定量，从而算出溶出率。下述试验进行3次，从而根据这些测定值算出溶出率的平均值。另外，预先确认到正常地形成有用ph约1.2的溶出试验第1液进行试验的包衣。因此，进一步地，如果确认到本实施例的片剂相对于溶出试验第2液具
有溶出性的话，则可确认到本实施例的片剂可以作为肠溶片在生物体中使用。
[0122]
(1)如下地求出乳铁蛋白的溶出量。首先，向规定体积50ml的容量瓶中加入75mg乳铁蛋白标准品后，用试验液补足至规定体积，得到1/1的标准溶液。进一步地用试验液稀释该标准溶液，制作1/5、1/20和1/50的标准溶液。用hplc检测各标准溶液中的乳铁蛋白。求得各个标准溶液中的乳铁蛋白的峰面积，从而制作校准曲线。
[0123]
作为乳铁蛋白标准品，使用富士胶片和光纯药工业制造的生物化学用“乳铁蛋白来自于牛乳”。乳铁蛋白标准品的纯度引用和光纯药工业发行的检查成绩书中记载的含量(hplc)的数值。
[0124]
接着，通过hplc检测如上所述采集的试验液中的乳铁蛋白，从而求出乳铁蛋白的峰面积。基于校准曲线，通过峰面积求出各试验液中的乳铁蛋白浓度，从而定量溶出至试验液中的乳铁蛋白。
[0125]
(2)如下求出片剂中的乳铁蛋白的含量。首先，向规定体积50ml的容量瓶中加入乳铁蛋白标准品75mg，然后用3重量％nacl水溶液补足至规定体积，得到1/1的标准溶液。进一步地用3重量％nacl水溶液稀释该标准溶液，制作1/2和1/20的标准溶液。用hplc检测各标准溶液中的乳铁蛋白。求出各个标准溶液中的乳铁蛋白的峰面积，从而制作校准曲线。另外，优选注意(1)的溶出试验和(2)的定量试验中因稀释液即溶出试验液和3重量％nacl水溶液而产生稀释倍率不同这一点，各自制作校准曲线。
[0126]
接着，向规定体积100ml容量瓶中加入片剂和3重量％nacl溶液，使片剂完全溶解后，补足至规定体积得到试料溶液。求出乳铁蛋白的hplc检测峰的面积。进行3次试验。基于校准曲线，通过峰面积求出各试料溶液中的乳铁蛋白浓度，从而对片剂中的乳铁蛋白的含量进行定量。
[0127]
(3)hplc的条件如下。
[0128]-检测器：紫外吸光光度计(测定波长：280nm)
[0129]-色谱柱填充剂：5μm的液相色谱用丁基化聚乙烯醇聚合物凝胶(shodex asahipak c4p-50 4d)
[0130]-色谱柱管：内径4.6mm、长度15cm的不锈钢管
[0131]-保护色谱柱：shodex asahipak c4p-50g 4a
[0132]-色谱柱温度：35℃
[0133]-流动相a：含0.03w/v重量％三氟乙酸的乙腈/氯化钠溶液(3
→
100)混液(10：90)
[0134]-流动相b：含0.03w/v重量％三氟乙酸的乙腈/氯化钠溶液(3
→
100)混液(50：50)
[0135]-浓度梯度：进行25分钟的由a：b(50：50)至a：b(0：100)的直线浓度梯度。
[0136]-流量：0.8ml/分钟
[0137]
<3-4.实验使用的原料一览>
[0138]
【表1】
[0139][0140]
cmc-ca：羧甲基纤维素钙
[0141]
<3-5.成型性的评价>
[0142]
用片剂物性测定机(multicheck6，erweka制造)测定以压片压15kn压缩的素片的硬度。测定的硬度为水平硬度。求出素片间的硬度的平均值(n＝10)。判定基准如下。本实施例中，对得到高硬度的片剂的配方给予成型性良好的评价。
[0143]
***9kgf以上
[0144]
**7kgf以上且小于9kgf
[0145]
*小于7kgf
[0146]
<3-6.对压片机的附着的评价>
[0147]
将素片在压片机中重复压片时，有时会出现素片的原料的混合粉体附着于压片机的情况。观察原料的混合粉体附着于旋转压片机的状态。图1～3为显示原料的附着状态的照片。图1中例示没有原料的附着的状态。图2和图3例示观察到素片的原料的附着ad的状态。
[0148]
如图2和图3所示，附着ad在压片机的盘表面产生。此外，也在臼的壁面产生。附着在盘表面的混合粉体抵抗每一圈的刮刀的刮擦而附着。附着在臼的壁面的混合粉体抵抗每次压片的杵的刮擦而附着。
[0149]
用旋转压片机压片20分钟。目视确认混合粉体开始附着于盘表面或臼的壁面的时间。判定基准如下。
[0150]
***未观察到附着(图1)。
[0151]
**从压片开始算起在20分钟后观察到附着(图2)。
[0152]
*压片刚刚开始后观察到附着(图3)。
[0153]
认为：混合粉体的附着，除了受到混合粉体和金属之间的结合性的影响外，也受到粉体间的结合性的影响。即粉体上越附着粉体，受到刮板、杵的更强的剪切应力，因此，进一步地，粉体越附着。附着有随着时间流逝而增加的倾向。因此，如上，用直至粉体附着的时间进行评价。
[0154]
<3-7.初期溶出率的评价>
[0155]
首先，如上述的<3-3.乳铁蛋白的溶出试验>的记载，对肠溶片进行溶出试验，求出肠溶片中的乳铁蛋白的含量。进一步地，为了得到储存试验前的初期的溶出率，用压片后7天以内的片剂进行试验。判定基准如下。
[0156]
***初期溶出率85％以上
[0157]
**初期溶出率75％以上且小于85％
[0158]
*初期溶出率65％以上且小于75％
[0159]
另外，本次的实验例中，未见初期溶出率小于75％的配方。
[0160]
<3-8.溶出性维持率的评价>
[0161]
如上述的<3-3.乳铁蛋白的溶出试验>所述，对填充在塑料瓶中在60℃下储存12天后的肠溶片进行溶出试验，求出肠溶片中的乳铁蛋白的含量。按照下述式求出溶出性维持率(％)。判定基准如下。
[0162]
溶出性维持率(％)＝100
×
(储存后的溶出量(mg))/(初期的溶出量(mg))
[0163]
水平6：90％以上
[0164]
水平5：85％以上且小于90％
[0165]
水平4：80％以上且小于85％
[0166]
水平3：75％以上且小于80％
[0167]
水平2：70％以上且小于75％
[0168]
水平1：小于70％
[0169]
该60℃下的溶出性维持率的试验，在比专利文献1和2中记载这样的40℃下的溶出性维持率的试验更严苛的条件下，放置肠溶片。因此，例如适宜于评价温带、亚热带的夏季高温下、热带的高温下的肠溶片的溶出性的劣化的难度。
[0170]
<4.配方例>
[0171]
本实施例的片剂的配方不限定于实验例中的配方。例如可调制以下这样的配方。
[0172][0173][0174]
<5.实验例>
[0175]
使用原料按照各种配方制作素片。对于素片的包衣如<3-2.包衣>所示进行。评价从配方c1开始的各配方。所有的配方均为例示，并非限定本发明。
[0176]
表2表示对结晶纤维素的堆积密度的实验例。组成以重量比计。表中，素片所含的成分示于上部分。评价栏显示进行从上述的<3-5.成型性的评价>至<3-8.溶出性维持率的评价>的各试验的结果。其他表中同样。以下，以溶出性维持率的评价结果为中心进行说明。
[0177]
【表2】
[0178][0179]
表2中，配方c1和c2为溶出性维持率水平1。此外，配方w1～w5为溶出性维持率水平2以上。配方w1～w5中作为赋形剂的(b)结晶纤维素的堆积密度为0.23g/cm3以上，因此，可维持储存后的溶出性。
[0180]
表2中，配方w2～w5为溶出性维持率水平3以上的配方。表中，均为水平4以上。(b)结晶纤维素的堆积密度为0.25g/cm3以上，因此，进一步提高溶出性维持率。重量比(b/a)也影响溶出性维持率，这通过后面说明的表3说明。
[0181]
表2中，配方w3～w5为溶出性维持率水平5以上的配方。表中，均为水平6。(b)结晶纤维素的堆积密度为0.28g/cm3以上，同时，平均粒径为50μm以上，因此，进一步提高溶出性维持率。重量比(b/a)也影响溶出性维持率，这通过后面说明的表3说明。
[0182]
表2中，配方w5中，并用堆积密度为0.28g/cm3以上的(b)结晶纤维素和堆积密度小于0.25g/cm3的其他结晶纤维素。配方w5的溶出性维持率水平也保持与配方w3相同的水平。
[0183]
表3表示对重量比(b/a)的实验例。作为各配方共同的(b)结晶纤维素选择的endurance mcc ve-050与配方w3中所用的相同。其堆积密度为0.28g/cm3，平均粒径为50μm。表4中同样。
[0184]
【表3】
[0185][0186]
表3中，配方w6～w7为溶出性维持率水平2的配方。表3中，配方w8～w15为溶出性维持率水平3以上的配方。配方w8～w15中，将重量比(b/a)设定为0.45以上，从而提高溶出性维持率。
[0187]
表3中，配方w9～w15为溶出性维持率水平4以上的配方。配方w9～w15中，将重量比
(b/a)设定为0.66以上，从而进一步提高溶出性维持率。配方w10～w15为溶出性维持率水平5以上的配方。配方w10～w15中，将重量比(b/a)设定为0.95以上，从而进一步提高溶出性维持率。
[0188]
表4表示对其他成分的实验例。
[0189]
【表4】
[0190][0191]
表4中，与表2的配方w3不同，配方w16使用荜菝提取物代替可可提取物。可使素片适当地含有植物提取物等其他生理活性成分，以提高溶出性维持率。
[0192]
表4中，与表2的配方w3不同，配方w17中，提高(b)结晶纤维素的含量以代替省略作为追加的赋形剂的麦芽糖醇。因此，配方w17中，重量比(b/a)为2.01以上。与配方w3相同地，配方w17中的溶出性维持率水平保持在水平6。
[0193]
表4中，与表2的配方w3不同，配方w18含有糊精代替麦芽糖醇。配方w18中，溶出性维持率为水平5。其他配方中，素片含有作为追加的赋形剂的麦芽糖醇和作为崩解剂的羧甲基纤维素的碱金属盐。由此，溶出性维持率水平保持在水平6。
[0194]
表4中，与表2的配方w3相比，配方w19中改变了崩解剂的成分。配方19的肠溶片含有部分α化淀粉代替cmc-ca。配方w19中，溶出性维持率为水平5。
[0195]
表5表示对结晶纤维素的平均粒径的实验例。组成以重量比计。
[0196]
【表5】
[0197][0198]
表5中，配方w20～22使用具有比表2的配方w3、w4中使用的更大的平均粒径的(b)结晶纤维素。在提高溶出性维持率方面，任意的平均粒径均适宜。
[0199]
使表3所示的重量比(b/a)的评价结果和表5所示的平均粒径的评价结果重叠时，认为如下。即，优选地，在将(b)结晶纤维素和(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)设定为2.50以下后，进一步将(b)结晶纤维素的粒径设定为150μm以下。由此，重复压片中，可抑制剩余的原料附着于压片机表面(参见图1～图3)。
[0200]
使表2所示的堆积密度的评价结果、表3所示的重量比(b/a)的评价结果和表5所示的平均粒径的评价结果重合时，认为如下。即，优选地，将(b)结晶纤维素的堆积密度设定为0.31g/cm3以下，进一步地，将(b)结晶纤维素和(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)设定为0.66以上、2.50以下，进一步地，将(b)结晶纤维素的粒径设定为150μm以下。由此，即使使用相同的压片压时，也可以更加提高素片的硬度。这表示混合粉体的成型性提高。
[0201]
使表2所示的堆积密度的评价结果和表3所示的重量比(b/a)的评价结果重合时，认为如下。即，优选地，将(b)结晶纤维素的堆积密度设定为0.28g/cm3以上，进一步地将该粒径设定为50μm以上，进一步将(b)结晶纤维素和(a)乳铁蛋白的重量比(b/a)设定为0.95以上。由此，可得到水平5以上的高溶出性维持率。
[0202]
表6表示确认硬脂酸盐的影响的实验例。组成以重量比计。
[0203]
【表6】
[0204][0205]
除了不添加硬脂酸ca以外，配方c3具有与表2所示的配方c2的组成相同的组成。出乎意外的是，在配方c3和配方c2之间，在高温下的溶出性维持率水平未表现出显著差异。由上可知：仅在素片中混合(c)硬脂酸盐，难以改善高温下的溶出性维持率。
[0206]
配方w23的(b)结晶纤维素的堆积密度比配方c3高。尽管配方w23中未添加硬脂酸盐，但也能够提高溶出性维持率。此外，含有相同的结晶纤维素的配方w3与配方w23之间的溶出性维持率为同等级别。由上可知：通过堆积密度高的(b)结晶纤维素被混合在素片中，从而无论(c)硬脂酸盐的有无，均可谋求在高温下的溶出性维持率的改善。此外，可知：该效果远高于(c)硬脂酸盐带来的效果。
[0207]
另外，如专利文献1的记载所述，硬脂酸盐有助于40℃前后的温度下的溶出性维持率的改善。因此，在素片中组合(c)硬脂酸盐和堆积密度高的(b)结晶纤维素，是在各种储存温度环境下提高(a)乳铁蛋白的溶出性维持率的有效手段之一。